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质谱非标定量

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质谱非标定量相关的论坛

  • 质谱定量分析

    需要定量分析CH4,CO2,CO,H2,反应是CH4+CO2=2CO+2H2,正在想法对其进行标定,得出反应的转化率。使用CH4,CO2,CO,H2纯气,按比例混合后进入质谱进行分析,如何进行试验数据处理,如何进行试验能使标定误差最小?求高人指点

  • 非标定制恒温恒湿箱报警原因有哪些?

    非标定制的恒温恒湿箱是用户找厂家专门定制的试验设备,在使用过程中也是有一定危险性的,不过生产厂家为了避让企业出现安全事故,所以会装配许多报警系统,一旦设备出现故障就会自动停机,有时候可能也会因为操作人员操作失误导致报警,不过无论是那种情况都需要先将报警解决之后才能让设备继续运行。  一、工作室内超温报警  报警因素:被测样品区传感器与通道内装有超温保护装置,在使用面板上也装有超温保护装置,当工作室内的温度超过面板上所设定的试验温度时,非标定制恒温恒湿试验箱会立刻断电停机且报警。  解决方式:需要将超温保护开关温度设置在180℃才能开始工作。  二、样品超温保护报警  报警因素:工作室温度超过控制器所设定的温度时,设备会立刻停机报警。  解决方式:要将问题解决后且复位,这样试验箱才能正常运转,其中样品超温保护分为上限、下限,客户们可以根据需求自行设定。  三、风机过热保护  报警因素:当非标定制恒温恒湿箱的风机线圈过热,就会立刻停机且报警。  解决方式:需要将故障排除以后,试验箱才会正常工作。  非标定制恒温恒湿箱能够模拟的环境比较恶劣,所以还是有一定危险性的,特别是非标定制的试验箱通常是大型的试验设备,能够整个人进入试验室内了解试验过程,不过并不是所有厂家的试验设备在门外还是门内都能打开箱门,所以在锁住试验箱箱门之前一定要仔细确认箱内没人。不过这款试验箱还是许多别的需要注意的地方,在使用之前最好先仔细阅读试验箱的操作说明。

  • 非标定制液氮罐

    非标定制液氮罐是指根据用户的个性化需求进行定制生产的液氮储存设备。这些液氮罐通常与普通液氮罐在结构和功能上有所差异,因为它们需要满足用户特定的实验室环境、样本种类以及研究目的。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405101531277773_5381_3312634_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405101531280961_7768_3312634_3.jpg!w690x920.jpg[/img][img=,500,375]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405101531283395_3601_3312634_3.jpg!w500x375.jpg[/img][img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405101531285800_7929_3312634_3.jpg!w690x920.jpg[/img][img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405101531289212_3082_3312634_3.jpg!w690x920.jpg[/img]非标定制液氮罐可以按需定制,主要用于冷装配、冷处理,贮藏牲畜精液,以及血浆、皮肤、内脏以及疫苗、微生物等的贮藏。此外,它们还应用在金属的物理特性研究、空间技术和电子工业等方面。在定制过程中,用户需要与制造商的工程师团队合作,根据实验室的具体要求设计和定制液氮罐。这包括确定液氮罐的用途、规格和型号,例如容量、口径、压力、温度等参数,同时还需要考虑液氮罐的材质和工艺等方面的要求。非标[url=http://www.yedanguan1688.com/]定制液氮罐[/url]通常使用高质量的材料制造,如304低温专用不锈钢,以确保其耐用性和安全性。它们还采用多层绝热材料和独特的抽真空技术,以减少蒸发损失率。此外,这些液氮罐还经过低温严格测试和焊缝检漏,以确保其可靠性和安全性。

  • 质谱技术在蛋白质组研究中的分析方法

    2003年人类基因组精细图绘制完成,是人类科学史上一个里程碑式的事件。后基因组时代的研究重点自然落在了蛋白质头上。为啥?因为中心法则告诉我们,基因的产物——蛋白质,是生命活动的最终执行者。与基因组类比,研究生物体内全套蛋白质的科学,就是蛋白质组学。基因组计划完成的同年,人类蛋白质组计划启动,令人激动的是,2014年人类蛋白质组的草图也完成了。而蛋白质组学能够飞速发展的最大功臣非质谱莫属。质谱的应用范围非常广泛,但这里只讨论蛋白质组学中的质谱。简单地说,质谱法(mass spectrometry)就是对肽段离子的重量(质荷比,m/z)进行测量的分析方法。样品经质谱仪(mass spectrometer)检测得到质谱图(mass spectrum),通过对质谱图的分析就可以对样品中的蛋白进行鉴定、定量。亲,图1的这种典型的蛋白质组学流程都很熟悉吧。蛋白首先都要被特异性的酶(通常为Trypsin)切割为肽段,再进行后续分析,这在蛋白质组学中被称为“自下而上”的研究策略(Bottom-up proteomics)。我们平时见到的质谱分析基本都是这种类型。提到蛋白质组,即会联想到一系列高大上的名词,iTRAQ、SWATH、SILAC、Shotgun、Label-free等等。很多概念容易弄混淆,下面我们就来理理清楚。图1. 典型的蛋白质组学流程大体上,质谱研究蛋白主要是鉴定和定量。通过二级质谱图(MS2或者MS/MS)进行数据库搜索匹配鉴定蛋白。通过各种标记或非标记的手段对不同样品中的蛋白进行比较就是定量。蛋白定量比较是质谱最重要的用途,图2是对定量方法的一个简单总结。非标定量(Label-free)不需要标记,不同样品分别处理、分别进质谱检测;优点是处理简单、无需标记、价格便宜、可以比较很多组样品,缺点是对操作步骤、LC、质谱稳定性要求严格。SILAC是在细胞培养基中加入稳定同位素标记的氨基酸,在代谢水平标记蛋白,一级质谱图进行定量,可以做到三组样品混合后进行比较,定量准确,但是不能标记组织样本,养细胞成本也较贵。双甲基化标记是通过化学反应的办法在肽段水平进行标记,一级质谱定量,也可以三组对比,标记试剂都比较便宜,而且可以标记任何来源的样品。iTRAQ和TMT是商品化的试剂盒,肽段水平标记,二级质谱定量;分别可以做到最多8组和10组样品间蛋白质组的比较。图2. 质谱定量方法以上这几个是一家的,还有几个名词是属于另外一家,比如Shotgun (DDA)、SWATH/DIA、SRM (MRM)、MRMHR/PRM。质谱进行数据采集的方式大致分为三种:鸟枪法(Shotgun)、选择反应监控(SRM)和全景式的SWATH/DIA。下面对照图3再来简单介绍一下。图3. 质谱扫描方式DDA、IDA、Shotgun和鸟枪法说的是相同的东西,意思是质谱在每个循环的中从一级里挑选丰度高的TopN个肽段去打碎做二级扫描,得到的结果通过与已知数据库中的理论蛋白进行匹配。DDA简单有效,分析流程比较成熟,也是目前质谱分析的主流方式。DDA也有其固有的缺陷,即具有一定的随机性,偏向于检测丰度较高的肽段,而抑制了低丰度肽段的检测。靶向策略被称为质谱领域的Western blot。质谱只去采集目标肽段大小的离子信息,因而提高了灵敏度和特异性。这种方法用来研究感兴趣的特定蛋白,定量准确,但是通量很有限。SWATH/DIA这种全景式的数据采集方式在最近几年突然火了起来,被认为在不远的未来可能会取代DDA的主流位置。该方法采取的策略是将扫描范围内的所有肽段按照质荷比分为若干个窗口,再对每个窗口里所有的肽段一起打碎,采二级,数据分析时通过抽提蛋白的子离子信息进行定量。SWATH/DIA解决了DDA中随机性选择肽段的缺陷,所以重复性更好,定量的准确性基本达到了SRM的水平,而且可以实现大规模定量。借用听来的一个比喻来说明:DDA就像机关枪扫射,数量多、体积大的目标命中的概率要大一些。靶向扫描(SRM或PRM)就像精准狙击,排除干扰,目标明确,每一枪直指目标,但是难以大规模消灭敌人。SWATH/DIA就是地毯式轰炸,只要暴露在我方攻击范围内的敌人,不管三七二十一,全部炸完。图4. 定量方法与采集方式结合如果将上述的定量方法(图2)和质谱数据采集方式(图3)结合起来,就得到了现在基于质谱的蛋白质组学研究的各种策略(图4)。再打个比方,保证吃货们一听就懂:鸡、鱼、肉、蛋、蔬菜要通过炒锅、烤箱、高压锅、微波炉等烹调之后才能变为美食,填饱肚子。同样的,各种定量方法(非标的和标记的)处理的样品,要通过质谱各种采集方式变为电脑中的数据,才能分析并从中得到蛋白的信息。本次的介绍就先到这里了,如果其中有什么问题,欢迎您批评和建议,我们会努力变得更好;如果需要跟我们进行技术交流和讨论,欢迎大家联系武汉金开瑞。后续我们还会继续推出对质谱技术各方面进行解析的文章,敬请期待。ReferencesA draft map of the human proteome. Nature 509: 575–581 (2014)Mass-spectrometry-based draft of the human proteome. Nature 509: 582–587 (2014)A review: Annu. Rev. Biochem. 80: 273–99 (2011)SILAC: Molecular & Cellular Proteomics 1: 376-386 (2002)iTRAQ: Molecular & Cellular Proteomics 343: 91–99 (2010)SRM: Nature Methods 9: 555–566 (2012)SWATH: Molecular & Cellular Proteomics 11: 1–17 (2012)

  • 谈谈试验设备 仪器非标定制

    中国现在的研发投入和科研产出均居于世界第二位。中国2014年的研发投入约1.33万亿,2015年我国研发经费投入总量迈上1.4万亿。国内高端仪器的市场是被国外产品占领,且科技力量重理论和应用而疏于对仪器的研究和发展。我国起步又晚,造成许多应用者偏爱国外仪器,这也是目前很多理论和应用的论文都是基于国外仪器上的原因之一。国外仪器采购成本高;服务成本高;同样好的项目,没有国外实验室先用上好仪器,显得被动。 试验设备非标定制,就是根据科研人员特殊使用意图和研究目的,进行定向设计、研发、制造的设备,是需求创新和技术创新的结合体,从一定程度上讲,开辟科研人员的思路,这已经成为科技发展一个不可或缺的推动因素。

  • 急,谁能帮我, 老帖子里的新问题"在线质谱怎样对混合气体进行定量"

    翻了09年的帖子,读了各位前辈的解答。但还有问题不太清楚,因为最近刚接收hiden的四极杆质谱,不带色谱。也是要求混合气体组分定量。to 小智问题1 我用hiden的软件,那里面已经有RS的输入值,我还要用混合气体的标气去求一下吗?或者说去验证一下,如果仪器状态出现了漂移,那怎么对已经发生的测量结果进行修正? 就是用实际测量出的RS求出实际的组分分压吗?问题2 用外标法进行标定,为什么某种组分气体的峰强和浓度的关系应该是一条曲线?to hoggy简单的组分就直接用工作曲线。能再解释详细点吗?有知道的前辈也请解答下,多谢。

  • 【求助】含有定量环的色谱仪标定--外标法

    求助各位大虾!含有定量环的色谱仪还需要标定吗?我见标准报告里,除了出峰时间和峰面积外,还有一项‘result’,这个结果是不是已经可以表征浓度了?另外,用外标法制定标准曲线时,所有的组分,浓度和峰面积都是一次线性关系吗?

  • 新人关于质谱定量离子的问题

    是这样的,质谱例如乙苯的定量离子是91/106,那么我看质谱图的时候发现它的碎片是91.1/106.1,再进一针发现它的碎片是91/106,在做线的时候选择的定量离子是91.1/106.1,这样是对于91/106是可以正常定量的吗,会对结果有什么影响吗,例如定不了量之类的,感谢老师??

  • 气相色谱内标定量问题求助

    [color=#444444]事件:[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]内标法定量环化物,以二十烷为内标(二十烷的响应值是环化物的一倍)[/color][color=#444444]方法:样品瓶中称取环化物标样0.04g记作标样1,称取0.06g记作标样2,二十烷称取0.7g溶于100ml甲苯中,移取5ml至样品瓶,进样分析![/color][color=#444444]结果:标样含量97%,以标样1标定标样2,标样2含量为94%,怎么回事,不应该都是97%才对吗?标样1中环化物峰面积与内标峰面积想接近,标样2中环化物面积比内标峰面积大,这种情况下我要测定含量大概在40%左右的环化物样品,该以哪个标样为准?[/color][color=#444444]我开始怀疑这种方法的线性不好,因为方法不是我开发的,是应用了很长时间的方法,但以前称取标样都是取中间称取0.05g,没有发现问题,但有时候测定40%左右样品发现平行性不太好,于是我就称取不同浓度的5标样,加入相同浓度的内标溶液,测定线性,以质量比对面积比作曲线,线性很好,R=0.9999,但以其中一个浓度的标样为标样标定其他浓度的标样却发现含量变化很大,按道理讲应该标定出来的都是同一个含量97%呀,我就懵了!不懂了!请求高手指点,不胜感激呀![/color]

  • 质谱图中的定量离子与定性离子

    关于质谱图中的定量离子与定性离子的确定方法:定量离子是不是以质谱图中最高的相对离子强度为定量离子,定性离子的选择则以特征离子的丰度比为选择依据啊,我是初学者,多谢指教

  • 质谱定量内标选择

    我之前定量没有用同位素内标,保留时间也能分开。最近看到关于质谱定量内标选择的内容,认为同位素内标好,能校正基质效应,色谱行为和响应特征接近,即便没有合适的同位素内标,也要选择结构类似的,色谱行为接近的。但是如果液相分不开一起进质谱的话,会不会产生离子抑制?

  • 【谱图】质谱定量问题

    我用的是热电的GC-MS,对于软件的操作不是很熟悉。由于我是刚接触对于质谱的定量问题一直不是很清楚,看了一些书,介绍的方法和单纯气谱的差不多。所以,想请各位高手指点一下,如何利用质谱图进行定量分析呀!谢谢各位的帮忙!

  • 质谱定量用什么模式

    各位老师,大家好,新学质谱定量分析,请问质谱定量要用哪一种模式呢?我们做的一级质谱的信噪比很低啊,还不及紫外,定量为什么要用到二级质谱呢?烦请各位老师赐教。

  • 关于质谱定量

    请教各位专家:我用的是四级质谱,想根据特征峰用它进行定量。但是我发现在同一条件下,纯物质的各个碎片峰比例不是定值,比如说噻吩,它的两个比较大的峰是m/z84和58,可是测定的过程中,两个峰的强度比值在不同的时间不相同,请问这是什么原因啊?如果比值不定我就无法用特征峰进行定量。多谢

  • 【求助】在线质谱分析混合气体的问题

    大家好,我最近想开展这么一个实验,是甲醇的直接分解,产物主要有co 和 H2,副产物有水,CO2等。我想用质谱来进行定量,也看了一些文章,初步想这么操作,请大家指教:用氦气通入甲醇瓶中,带入到固定床(与在线质谱相连)中,考察不同催化剂的影响。首先需要标定各个已知浓度物质在质谱上强度,气体的标定我打算用标准气瓶来标定,但是甲醇的标定怎么做比较精确。文献中有用质谱法来测甲醇和氦气的分压,这个原理是什么?

  • 气质联用-质谱定量问题

    [color=#444444]质谱是四极杆检测器。请问其定量方法是怎样的?[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]时[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]定的是峰面积,那么质谱定量定的是什么?怎么定的。求详解[/color]

  • 质谱定量误码题

    我用质谱做样时,最后定量出来匹配度很低,我把时间范围度小点匹配度就高了,是怎么回事?

  • 质谱仪--三重四级杆质谱是如何定量的?

    三重四级杆质谱是如何定量的?三重四级杆通过离子打碎获得特异性子离子,子离子在通过Q3后时在接收器上转化为电信号,反映到分析软件就是离子强度图。在一定线性范围下,分析物浓度越高,打到接收器上的离子就越多,信号越强,这是定量的基础。此外在定量时可以选择用峰高或峰面积定量,一般选用峰面积定量准确。因为是定量,所以必需标准曲线,原理与高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]类似。一般多用内标法定量,以排除质谱重现性和样品处理造成的影响。那么,随着设置离子对越多,如何能保证定量准确呢?四极杆对于离子的选择性通过是交替进行的,在所有离子通道之间快速切换。随着设置离子对数量的增加,每个离子所占用的检测时间缩短,这会影响到其检测灵敏度,但是只要实际样品和标准溶液所采用的分析方法一致,定量的准确性理论上是不受影响的。

  • 质谱定性和定量离子的知识人

    各位高手:我刚开始做质谱,请多指教。 我的质谱是5973,我知cas号或进标样,怎么查看这性和定量离子呀。最好是举例说明,在此先谢了。

  • 质谱如何做到定量分析?

    质谱如何做到定量分析?

    质谱信号。与EI谱图分析以相对强度为主不同,在色谱-质谱联用时,信号的绝对强度就成了我们天天都要关心的内容,因为质谱信号强度随时间的变化就是实验的色谱图,通常以总离子强度或者某一特定质荷比离子的强度作图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511271813_575350_2544766_3.jpg2、定量的两种方法外标法 用已知量的标准样品A和未知量的待测样品A分别进行实验;我们会得到以下三个信息:标准样品的量(已知);标准样品的信号强度;待测样品的信号强度。(假设样品的响应=常数*浓度,从这三个信息即可算出待测样品的量。) 为了更加精确地测定未知量的样品,我们希望标准样品的信号强度与待测样品的信号强度尽量接近(以减少非线性响应的影响)。因此常用的外标法会测量一系列已知量的标准样品,绘制一条工作曲线,再用拟合的方法确定未知样的量。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511271814_575351_2544766_3.jpg内标法 外标法主要有以下两方面的局限:1标样和待测样是独立进行实验的,实验间的偶然误差无法消除;2标样和待测样的基质(即除待分析物外的其它成分)不同,基质有可能会带来不同的影响,也会产生误差。 那么,如果我们把已知量的标准样品B直接加入待测样品A,就可以把标准样品和未知样品的测定在同一次实验和同样基质中完成,也就消除了两次实验和基质不同造成的误差,这就是内标法。(如果加入的标准样品和待测样品是同种物质A,那么由于它们不可区分,只通过一次实验是不能定量待测样的,这时我们在加入标样前后分别进行两次测量,即测量待测样及待测样+标样的信号,即可计算出待测样的量。)3、质谱相关的特殊定量细节同位素稀释 前面内标法的介绍中我们可以发现,最理想的内标物既要和待测样相同(具有相同的响应系数)又要不同(仪器可以区分二者的信号),这对矛盾的集合体就是同位素内标。 由于不同同位素的化合物具有近似相同的物理化学性质,离子化时的响应通常也是相同的,而它们具有不同的质荷比m/z,即可在质谱中被区分出来。因此同位素标准品是最理想的内标物。 另外,由于某些元素的天然同位素分布有一定的比例,当我们加入一定量的同位素内标时,可以把对信号绝对强度的测量转化为对信号相对比例的测量,从而提高实验的准确性。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511271814_575353_2544766_3.jpg选择反应监测 在不太复杂的体系中,我们只要按照分子量就可以定性某种化合物了。但对于复杂混合物(如石油产品/生物样品)而言,很多化合物具有相同或相近的质量(同分异构体质量完全相同,有些化合物分子量非常接近,如CO和N2,要考虑仪器的质量分辨率是否能区分二者),此时仅靠测量质量就不能确定这个化合物是否就是我们关心的“the one”了。 在串联质谱 (Tandem MS) 仪器中,我们不仅可以把质谱仪理解为一个称量离子的“天平”,它还具有了离子“镊子”(选择某个特定的离子把它分离出来)和“剪刀”(把某个/某些离子激活并打成碎片)的功能。通过母离子和子离子的两步选择,我们可以在复杂体系中精确定位到我们关心的化合物,同时,两次离子选择还可减少复杂基质的干扰,降低背景噪声(获得更低的检出限)并提高方法的动态范围。因此选择反应监测是目前色谱(气相色谱/液相色谱)-质谱联用中最常用的定量方法。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511271815_575354_2544766_3.jpg选择反应监测在不太复杂的体系中,我们只要按照分子量就可以定性某种化合物了。但对于复杂混合物(如石油产品/生物样品)而言,很多化合物具有相同或相近的质量(同分异构体质量完全相同,有些化合物分子量非常接近,如CO和N2,要考虑仪器的质量分辨率是否能区分二者),此时仅靠测量质量就不能确定这个化合物是否就是我们关心的“the one”了。在串联质谱 (Tandem MS) 仪器中,我们不仅可以把质谱仪理解为一个称量离子的“天平”,它还具有了离子“镊子”(选择某个特定的离子把它分离出来)和“剪刀”(把某个/某些离子激活并打成碎片)的功能。通过母离子和子离子的两步选择,我们可以在复杂体系中精确定位到我们关心的化合物,同时,两次离子选择还可减少复杂基质的干扰,降低背景噪声(获得更低的检出限)并提高方法的动态范围。因此选择反应监测是目前色谱(气相色谱/液相色谱)-质谱联用中最常用的定量方法。

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