氯喹喔啉

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  • 【科普】新冠肺炎明星药氯喹能否接棒？

    [font=&]“ 新型冠状病毒（COVID-19）正在迅速传播，科学家正在努力研究可对其进行有效治疗的药物。磷酸氯喹是一种用于治疗疟疾的老药，在中国进行的多种临床试验中显示出对COVID-19相关肺炎的明显疗效和可接受的安全性。在各国抗疫过程中，氯喹已被视为“新冠明星药”。甚至该药物被建议纳入中华人民共和国国家卫生委员会发布的下一版《由COVID-19引起的肺炎的预防、诊断和治疗指南》，以在更大范围内治疗人们对COVID-19的感染。那么，氯喹用于治疗新型冠状病毒肺炎（COVID-19）是什么机制？临床使用中又需要注意哪些问题？”[/font][align=center][font=&]01[/font][/align][align=center][font=&]—[/font][/align][align=center][font=&]氯喹简介[/font][/align][font=&]2020年2月17日，国务院召开一条新闻发布会报道磷酸氯喹这种用于治疗疟疾的旧药已经在临床中证明对COVID-19相关性肺炎具有明显的疗效和可接受的安全性。[/font][align=center][font=&] [img]https://img.chemsoc.org.cn/web/2020/04/%E5%9B%BE%E7%89%8722.png[/img][/font][/align][align=center][font=&]氯喹[/font][/align][font=&]氯喹（Chloroquine），分子式:C[sub]18[/sub]H[sub]26[/sub]ClN[sub]3[/sub]，氯喹是一种抗疟疾药物，本品主要用于治疗疟疾急性发作，控制疟疾症状。还可用于治疗肝阿米巴病、华支睾吸虫病、肺吸虫病、结缔组织病等。另可用于治疗光敏性疾患，如日晒红斑症。[/font][font=&]作用机制：[/font][font=&]本品与核蛋白有较强的结合力，通过喹啉环上带负电的7-氯基与DNA的鸟嘌呤上的2-氨基接近，使氯喹插入到DNA的双螺旋两股之间。与DNA形成复合物，从而阻止DNA的复制与RNA转录。氯喹还能抑制磷酸掺入疟原虫的DNA与RNA，由于核酸的合成减少，而干扰疟原虫的繁殖。而新型冠状病毒，主要通过与人细胞表面上的血管紧张素转化酶 2（ACE2）受体结合，然后侵入人体细胞。氯喹可一方面通过抑制冠状病毒与人体细胞 ACE2 受体的结合，抑制病毒的侵入，另一方面氯喹是一种碱性化合物，可提高内体 pH 值，能阻断冠状病毒、逆转录病毒等 pH依赖性病毒的复制。此外，氯喹具有免疫调节作用，可减少免疫病理性损伤，可抑制 TNF-α和 IL-6 的产生和释放，氯喹的抗炎作用也可减少免疫病理性损伤。[/font][align=center][font=&]02[/font][/align][align=center][font=&]—[/font][/align][align=center][font=&]相关研究进展与报道[/font][/align][font=&]3月27日，据欧联社报道，尽管法国医学界和一些专家，针对新冠肺炎患者是否可以使用“羟氯喹”药物存在争议，但法国总统马克龙依据医疗科研团队短暂的临床成果和建议，决定批准医生使用羟氯喹治疗新冠肺炎患者。据报道，法国医学家哈乌尔特领导的医疗团队宣布75%的新冠肺炎患者在服用羟氯喹6天后已痊愈。但法国医学界的一些专家表示，羟氯喹主要成分的药性和副作用一直备受质疑，绝不能草率用药。[/font][align=center][font=&][img]https://img.chemsoc.org.cn/web/2020/04/%E5%9B%BE%E7%89%8723.png[/img] [/font][/align][font=&]3月25日，钟南山院士向欧洲专家展示了一份报告：使用氯喹后，在10天到14天的潜伏期内，带有新冠病毒RNA的疑似病人转阴的比例很高。钟南山院士讲解道，在对比治疗数据中，使用氯喹的组RNA转阴的比例是91.4%、95.9%，而对照组是57.4%。[/font][font=&]2月29日，国家卫健委网站公布了《关于调整试用磷酸氯喹治疗新冠肺炎用法用量的通知》。 磷酸氯喹用于新冠肺炎治疗适用于18岁～65岁成人。体重50kg以上者每次500mg、每日2次，疗程7天；体重50kg及以下者第1、2天每次500mg、每日2次，第3～7天每次500mg、每日1次，疗程7天。[/font][align=center][font=&] [img]https://img.chemsoc.org.cn/web/2020/04/%E5%9B%BE%E7%89%8724.png[/img][/font][/align][font=&]2月19日，国家卫健委发布了《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第六版）》（下简称“第六版方案”），此前版本中“目前没有确认有效的抗病毒治疗方法”的说法，在新版本中未再出现。连日来呼声很高的磷酸氯喹、阿比多尔被纳入其中，作为抗病毒治疗的试用药物。[/font][align=center][font=&][img]https://img.chemsoc.org.cn/web/2020/04/%E5%9B%BE%E7%89%8725.png[/img] [/font][/align][font=&]截至2月17日，将近150项针对新冠肺炎的临床药物试验在进行中，试验的药物包括瑞德西韦、磷酸氯喹以及各种中药。2月17日，科技部生物中心副主任孙燕荣表示，疗效专家组经过认真细致的研讨，最后达成一致意见，一致认为磷酸氯喹是一个上市多年的老药，用于广泛人群治疗的安全性是可控的。基于前期临床机构所开展的临床研究，结果可以明确磷酸氯喹治疗新冠肺炎具有疗效。基于当前临床救治的迫切需求，专家一致推荐，应当尽快将磷酸氯喹纳入到新一版的诊疗指南，扩大临床适用范围。[/font][font=&]截至2月15日，正在十多家医院开展临床研究，累计入组患者超过100例。临床结果初步显示，磷酸氯喹对新冠肺炎有一定的治疗效果。[/font][font=&]1月25日，中国科学院武汉病毒研究所与军事科学院军事医学研究院公布的联合研究结果显示：在 Vero E6细胞上，磷酸氯喹的EC50（半数有效浓度）=1.13μM，说明在细胞水平上磷酸氯喹能有效抑制新型冠状病毒（SARS-COV-2）。[/font][align=center][font=&]03[/font][/align][align=center][font=&]—[/font][/align][align=center][font=&]注意事项[/font][/align][align=center][color=#808080][size=14px][font=&]来源：国家卫生健康委办公厅 国家中医药管理局办公室[/font][/size][/color][/align][font=&]1.服药后可有食欲减退、恶心呕吐、腹泻等反应 还可出现皮肤瘙痒、紫癜、脱毛、毛发变白，湿疹和剥脱性皮炎、牛皮癣 头重、头痛、头昏、耳鸣、眩晕、倦怠、睡眠障碍、精神错乱、视野缩小、角膜及视网膜变性等。[/font][font=&]2.长期使用，可产生抗药性(多见于恶性疟)。[/font][font=&]3.本品对角膜和视网膜有损害，因此长期服用本品治疗以前，应先作眼部详细检查，排除原有病变，60岁以上患者宜勤检查，以防视力功能损害。[/font][font=&]4.氯喹还可损害听力，妊娠妇女大量服用可造成小儿先天性耳聋，智力迟钝等。[/font][font=&]5.氯喹偶可引起窦房结的抑制，导致心律失常、休克，严重时可发生阿斯综合征，而导致死亡。[/font][font=&]6.溶血、再障、可逆性粒细胞缺乏症、血小板减少等较为罕见。[/font][font=&][b]7.该药在成人中的致死剂量2-4g，而且是急性致死。[/b][/font][font=&]8.磷酸氯喹用于新冠肺炎治疗适用于18～65岁的患者，并根据患者体重差异化调整磷酸氯喹的用法用量。[/font][font=&]9.明确使用禁忌症和相对禁忌症,包括：处于妊娠期的女性患者；明确对4-氨基喹啉类化合物过敏的患者；患有心律失常（如传导阻滞）、慢性心脏病的患者；患有慢性肝、肾疾病并达到终末期的患者；已知患有视网膜疾病、听力减退或听力丧失的患者；已知患有精神类疾病的患者；皮肤疾病（包括皮疹、皮炎、银屑病）；葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症；因原有基础疾病必须使用洋地黄类药物、保泰松、肝素、青霉胺、胺碘酮、卞普地尔、多潘立酮、氟哌利多、氟哌啶醇、阿奇霉素、阿司咪唑、红霉素、克拉霉素、泊沙康唑、美沙酮、普鲁卡因胺、氢氯噻嗪、斯帕沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、西沙比利、吲达帕胺、氯丙嗪、链霉素、青霉胺、氯化铵、昂丹司琼、阿扑吗啡、奥曲肽单胺氧化酶抑制剂、氟羟强的松龙等药物的患者。[/font][font=&]10.使用磷酸氯喹治疗新冠肺炎的患者，用药前必须心电图检查正常，禁止同时使用喹诺酮类、大环内酯类抗生素及其他可能导致QT间期延长的药物。同时，保证患者体内电解质水平（钾、钠、氯）和血糖、肝肾功能正常；应当注意与其他药物的相互作用，不建议同时应用包括磷酸氯喹在内的3种及以上抗病毒药物；密切关注用药后的不良反应，出现不可耐受的毒副作用时应当停止使用；严格按照《药品不良反应报告和监测管理办法》要求，做好不良反应监测和报告工作，切实保证用药安全。[/font][align=center][font=&]04[/font][/align][align=center][font=&]—[/font][/align][align=center][font=&]结论[/font][/align][font=&]COVID-19 是国际关注的突发公共卫生事件。根据最近的报道，氯喹在限制SARS-CoV-2（COVID-19病毒引起）的体外复制方面有效。但是也有报道说目前开展的实验证据与研究项目绝大多数属于小样本量、观察性与非随机性实验，很难得出正确的结论，甚至可能危害大于收益。因此，药物的长期安全性、有效性还需要更多的临床证据去检验，相信实践是检验真理的唯一标准。[/font][font=&]参考文献[/font][font=&]1. A systematic review on the efficacy and safety of chloroquine for the treatment of COVID-19,2020.[/font][font=&]2. Breakthrough: Chloroquine phosphate has shown apparent efficacy in treatment of COVID-19 associated pneumonia in clinical studies,2020.[/font][font=&]3. Drug treatment options for the 2019-new coronavirus (2019-nCoV). Biosci Trends. 2020.[/font][font=&]4. Effects of chloroquine on viral infections: an old drug against today’s diseases? Lancet Infect Dis 2003.[/font][font=&]5. Chloroquine for the 2019 novel coronavirus SARSCoV-2. Int J Antimicrob Agents 2020:105923.[/font][font=&]6. Remdesivir and chloroquine effectively inhibit the recently emerged novel coronavirus (2019-nCoV) in vitro. Cell Res 2020. [/font][align=right][color=#808080]（[/color]来源：化学通讯微信公众号 甄文瑶/撰稿[color=#808080]）[/color][/align]

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  • 【抗疫药】羟氯喹连续合成和连续分离
    一、背景介绍新冠疫情蔓延全球，急需寻找有效药物。除了瑞德西韦，氯喹与羟氯喹同时被WHO和美国总统点名加入海外抗疫候选药物单用或组合应用的多国多中心临床试验（Solidarity Clinical Trial）。美国选用氯喹/羟氯喹作为新冠治疗候选药物的原因在于这是一种上市多年的老药，因此安全性有保障。如果选用一种全新的（未上市）的药物，其安全性是未知的，也需要花费更多的时间去验证。抛开羟氯喹是否能成为治疗新冠病毒的特效药，世界卫生组织已将羟氯喹（HCQ）确定为基本医疗保健系统的必需抗疟药，但API的高制造成本阻碍了HCQ的全球普及。因此，开发具有成本效益的合成工艺来增加该药物的普及显得至关重要。如今，采用先进技术，开发低成本广谱药物和小批量孤独药是FDA一直致力推动的目标。微反应连续流技术的兴起不光给低成本药物的合成带来可能，还可以快速应对市场的需求。2018年，弗吉尼亚联邦大学化学系和化学与生命科学工程系研究小组，在Beilstein J. Org. Chem. 期刊上发表了抗疟药羟氯喹的高效连续合成报告。小编就带大家来解读，连续流技术如何来助力这场没有硝烟的病毒战！ 二、羟氯喹的逆合成分析从羟氯喹的逆合成分析中可以发现化合物(6)是关键中间体。在传统工艺中化合物(6)通常有以下两种合成路径（图2）。反应路径1a中，使用氯酮（3）进行保护-去保护反应是优化工艺的一个关键点。虽然改进路径1b去掉了此步骤，但它使用了一个复杂的过渡金属-催化剂系统 。考虑到这些问题，研究小组通过逆合成分析，发现可以通过α-乙酰基丁内酯（8）的脱羧开环一步生成（10），然后化合物（10）可以不经分离制备化合物（6）。 三、连续流合成研究研究小组首先开发并优化了一条快速连续合成化合物10的方法（表1）。该路线的收率显著高于之前报道的合成路线 。使用55％的氢碘酸，反应温度80°C，转化率可达98%，分离收率为89％。?四、Zaiput在线连续分离由于使用了过量的氢碘酸，在进行下一步反应之前，必须将过量的氢碘酸从反应流中除去。将含有粗品（10）的产物与甲基叔丁基醚（MTBE）和饱和NaHCO3在线混合，然后使用Zaiput连续流分离器进行在线分离。在有机相中，可以得到纯化后的化合物（10）。连续分离简化了后处理步骤，大大节省了人力和时间。Zaiput高效液液分离技术是由美国MIT孵化的一项新技术。以专利技术液液分离膜为基础，提供不互溶流体连续在线分离。分离器利用多孔膜与水相和有机相间润湿性的差异来分离油水两相，该设备设计有压力系统可以自动调节两相间的压力恒定，确保分离的稳定性，流线型的设计也提供了即插即用的快捷功能。 五、中间体(6)(11)的合成化合物（10）与化合物(7)反应可生成化合物（6），化合物（6）无需分离与羟胺反应，通过K2CO3的填充床生成肟（11）。从生成（11）的两步反应中可以看出，反应物的浓度对肟的形成有显著影响。使用1 M浓度的反应物，结果显示温度100°C，停留时间 20 min，转化率为85%，分离收率为78％。六、连续搅拌釜反应器（CSTR）工艺作者选择了连续搅拌釜反应器（CSTR）工艺进行化合物（11）的加氢还原合成化合物（12）。用HPLC泵输送至CSTR中，并通入氢气使其反应。作者优化了化合物（12）的各个步骤后，将各个步骤合为一个连续的反应过程。该过程将化合物（10）转化为化合物（6），再继续转化为化合物（12）（图4）。最终产物化合物（12）的收率达到68％。七、羟氯喹的连续釜式合成为了整个工艺流程的连续化，作者选择使用CSTR 研究最后一步羟氯喹的合成。作者考察了溶剂和碱对HCQ（1）收率的影响。实验总结：• 连续合成工艺大大缩短了反应时间• 减少了步骤并提高了单个反应的收率• 使用了更具成本效益的起始原料和试剂• 连续合成与连续分离技术的完美结合，促使了整个过程的连续化• 具有成本效益的合成工艺来增加该药物在未来的普及新工艺与目前传统的商业工艺相比，总收率提高了52％。连续方法采用连续流反应器、在线连续分离及连续搅拌釜反应器的组合，过程更加安全可靠。参考文献：Beilstein J. Org. Chem. 2018, 14, 583–592. doi:10.3762/bjoc.14.45康宁在中国独家代理：Zaiput 高效液液分离器以专利技术液液分离膜为基础，提供不互溶流体连续在线分离。分离器有一个混合流体入口和两个出口，分别为有机相出口和水相出口，分离器使用过程中不需要任何准备或校准。分离器利用多孔膜与水相和有机相间润湿性的差异来分离油水两相，该设备设计有压力系统可以自动调节两相间的压力恒定，确保分离的稳定性，流线型的设计也提供了即插即用的快捷功能。产品特性:• 分离液体不依赖密度差，可分离乳液• 在连续流动过程中，分离器可实现连续在线分离• 非常低的死体积，优异的化学耐受性，可在压力下运行• 可实现实验室规模放大至工业化生产规模• 高效分离降低萃取溶剂消耗• 非常适合活性或不稳定中间体的分离
    时间： 2020-05-19
    作者： 康宁反应器
  • 美国总统直播带货的羟氯喹到底是个啥
    导 语截至目前，全球已累计约500万人次感染新型冠状病毒。在当前新型冠状病毒肆虐的大背景下，新疫苗、新治疗药物由于需经过较长周期的临床试验以确保其安全性，无法迅速应用于临床；因此，老药新用不免为一种积极尝试，硫酸羟氯喹（Hydroxychlorquine sulfate，CAS#：747-36-4）即是其中一种。硫酸羟氯喹于1955年在美国上市，目前已在加拿大、法国、德国、澳大利亚、中国、日本等70多个国家获得批准。最初硫酸羟氯喹被用于治疗疟疾，后来临床发现此药物具有轻度免疫抑制和免疫调节的作用。自新冠肺炎疫情在全球扩散以来，有部分临床研究报道硫酸羟氯喹对于新型冠状病毒感染患者有效；此外,美国总统特朗普在多个官方场合亲自“带货”，更是引发了美国、印度、巴西、新加坡等国对于硫酸羟氯喹的热潮。 （图片来源于网络） 为了规范用药、减少用药安全问题，美国FDA于3月28号发布了硫酸羟氯喹用于治疗COVID-19住院患者的紧急使用授权，并在4月14日发布了硫酸羟氯喹的BE指南。尽管目前仍无确凿研究表明硫酸羟氯喹可以对抗新冠病毒，但世界各国对硫酸羟氯喹及其原料药（API）的关注度已逐渐升温。印度是硫酸羟氯喹最大的生产国之一，约占全球供应量的一半。此前印度已经批准该药用于预防新冠病毒感染，目前已经向全世界上百个国家出口了8000多万片硫酸羟氯喹。随着印度近期将该药列入禁止出口原料药名单的事件发酵，硫酸羟氯喹及相关原料供货价格已疯涨。硫酸羟氯喹生产国的产能及出口规模在短期内呈现出爆发增长；有消息报道，自3月20日以来，国内某制药厂商生产的硫酸羟氯喹，5天内已出口原料药4.9吨。 为了应对预期增长的药品质量控制及临床药物浓度监测需求，本文遵照EP10.0（欧洲药典）、USP43（美国药典），开发了硫酸羟氯喹有关物质、硫酸羟氯喹片含量测定的HPLC（以及UHPLC）方法；此外参考FDA关于生物样品分析指导原则及硫酸羟氯喹BE指南，开发了LCMS-8050监测人血浆中硫酸羟氯喹含量的测定方法。 1.EP方法测试硫酸羟氯喹有关物质（使用超高效液相色谱系统LC-30A或同等型号）EP10.0中要求杂质C与硫酸羟氯喹、杂质B与杂质C分离度均需≥3.0。图1. 硫酸羟氯喹有关物质色谱图 结果显示，杂质C与硫酸羟氯喹、杂质B与杂质C分离度完全满足要求。 2.USP方法测试硫酸羟氯喹片含量（使用高效液相色谱系统LC-2040C 3D或同等型号）图2. 硫酸羟氯喹与磷酸氯喹标准样品色谱图 结果表明硫酸羟氯喹与磷酸氯喹分离度为3.728，完全满足要求。 3. LCMS-8050测定人血浆中硫酸羟氯喹含量人血浆样品经乙腈沉淀蛋白后离心取上清进样分析，硫酸羟氯喹在0.5~500 ng/mL范围内线性良好，相关系数大于0.998；方法定量限为0.5 ng/mL；硫酸羟氯喹低、中、高浓度样品日内精密度在1.57~8.33 %之间；准确度在97.91~106.02 %之间；硫酸羟氯喹低、中、高浓度样品及内标的基质效应在98.31~108.17 %之间；使用LCMS-8050三重四极杆液质联用系统可在10 min内对血浆中硫酸羟氯喹含量进行测定。图3. 空白血浆及含硫酸羟氯喹血浆样品（200 ng/mL） 图4. 空白血浆及含磷酸氯喹血浆样品（100 ng/mL） LC-2030/2040 series LC-40 LCMS-8050 采用岛津液相色谱系统，依照EP10.0方法及USP43方法，可以很好的对硫酸羟氯喹原料药及其制剂质量控制的要求；在全球硫酸羟氯喹需求激增的背景下，保证药品质量。在此基础上开发的LCMS-8050监测人血浆中的硫酸羟氯喹含量，则是为了进一步结合临床指标，准确评价硫酸羟氯喹在人体内的药效及相互作用，指导更加合理、安全用药。无论结果如何，候选药物在质量控制及临床试验等高质量研究中的表现都值得被了解和不断完善。我们将继续关注更多科学证据的揭晓；同时更期冀在创新科技力量的推动下，新冠病毒能早日被有效遏制。
    时间： 2020-05-27
    作者： 岛津
  • 通过高分辨成像质谱分析大鼠视网膜中氯喹的分布
    p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 在药物研发过程中，候选化合物的体内药代动力学分析是非常关键的步骤。该分析不仅可以掌握其药效药理，还可以得到和毒性评价有关的信息。通常，使用放射性自显影技术(Autoradiography: ARG)和荧光色素标记细胞的方法进行分析。但是，使用ARG的方法成本高，而且一方面这些方法无法区别原药和代谢物，另一方面标记物质的行为可能与未标记物存在差异。因此，最近成像质谱分析法，不进行标记即可对候选化合物进行检测的方法备受瞩目。质谱成像法除了能够在无标记的情况下对各种物质的分布进行分析，还能够使用同一切片同时分析原药及其代谢物，有望在今后的药物研发领域得到应用，取得新的突破。本文介绍使用成像质谱显微镜iMScope i TRIO /i 对氯喹给药后大鼠视网膜进行检测的示例。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/c4265e4a-c078-4017-93d2-68a9d4eafbd5.jpg" title=" 1.png" alt=" 1.png" / /p p style=" text-align: center " 图1 氯喹的结构式 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " strong 大鼠视网膜中氯喹的高空间分辨率成像 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 在本次分析中，对给予抗疟剂药物氯喹的大鼠视网膜进行分析。图1为氯喹的结构式。使用氯喹标准品进行分析，对基质及测定模式进行优化，表1为组织切片的分析条件。使用成像质谱显微镜iMScope i TRIO /i 进行高空间分辨率成像，发现在约10 μm厚的视网膜色素上皮周围有氯喹的分布(图2和图3)。在测定氯喹时，如果使用成像质谱分析法常用的MS模式，因受到生物体衍生杂质带来的离子抑制、干扰的影响，无法得到清晰的MS图像(此处数据省略)。在本次分析中，通过iMScope i TRIO /i 的MS/MS模式进行测定，提高灵敏度，能够获得10 μm的高空间分辨率下的MS/MS图像。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/b1a9ec68-3837-45b5-a422-9f98ed4422b0.jpg" title=" 4.png" alt=" 4.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/8fad9a5c-304b-4f86-b070-8ec12bb1a38d.jpg" title=" 2.png" alt=" 2.png" / /p p style=" text-align: center " 图2 组织切片上的MS/MS质谱图 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/4ba84009-2ef8-4ef5-92af-f47ac86ebdb9.jpg" title=" 3.png" alt=" 3.png" / /p p style=" text-align: center " 图3 光学图像和MS/MS质谱图像 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " strong 大鼠眼球中氯喹的高速成像 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 在药代动力学研究过程中，为了阐明药物分子在细胞及器官水平的特征分布区域，分别需要在高空间分辨率及中等空间分辨率获得药物分子的分布信息。本实验使用MS/MS span style=" text-indent: 2em " 模式测定在中等分辨率(50 μm)下测定大鼠眼球整体的氯喹分布情况，分析条件如表2 所示。虽然使用了更大的激光直径，有可能带来存在噪音高、离子抑制等问题，iMScope /span i style=" text-indent: 2em " TRIO /i span style=" text-indent: 2em " 依然能够检测得到具有较高信噪比的氯喹特征碎片，并获得清晰的质谱图像。成像质谱实验的采集 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 速度取决于目标检测区域中所包含的点数。iMScope i TRIO /i 能够独立更改激光直径及采集间隔等参数，从而能够轻松控制采集速度及图像尺寸，并且不会影响数据质量。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/12e37b19-cce0-4e12-a91f-8af4b67f0802.jpg" title=" 5.png" alt=" 5.png" / /p p style=" text-indent: 2em " strong span style=" text-align: justify text-indent: 2em " 基质涂敷方式的比较 /span /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 在氯喹成像质谱分析中，比较了2 种不同的MALDI 基质涂敷方式。 图5 显示了由升华法获得的成像结果(基质升华方式的示意图如图6 所示)。基质升华由iMLayer 升华仪自动完成，而喷雾方式由手动完成。喷雾方式获得成像结果如图7 所示。对比两种方式的检测结果，升华法获得了更加清晰尖锐的氯喹分布图像，而喷雾的结果则看起来会有一些扩散，如图7 所示。前处理方式的优化依然取决于组织切片的特性以及所使用的基质类型。如示例中的结果，前处理步骤对最终成像结果的图像质量有显著的影响，不仅仅是切片制备的条件，基质涂敷的过程也很重要。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/3e80c956-c24a-4b4f-b277-ff7fa0b9a5ad.jpg" title=" 6.png" alt=" 6.png" / /p p style=" text-align: center " 图6 基质升华方式示意图 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " strong 在相同切片上进行MS 和MS/MS 成像分析 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 成像质谱分析中，在同样位置只能采集一次数据。但是，使用iMScope i TRIO /i 可以调整激光直径及采集间隔，因此可以在采集点之间留下未采集区域，从而实现更多次的成像分析。图8显示了使用激光直径为5μm，采集间隔为10μm时，在同一采集区域内进行4次成像分析的方式。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/7029ec9e-44bf-483d-a071-a1651cfc8ffb.jpg" title=" 7.png" alt=" 7.png" / /p p style=" text-align: center " 图4 组织切片上氯喹的MS/MS产物离子质谱图，激光直径50μm /p p style=" text-align: center" img style=" " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/b8099d01-93e1-49aa-9926-907aeab7a6d9.jpg" title=" 8.png" / /p p style=" text-align: center " 图5 升华法获得的氯喹分布质谱图像 /p p style=" text-align: center" img style=" " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/c8b163cf-961b-4c26-8d20-902c68beed0f.jpg" title=" 9.png" / /p p style=" text-align: center " 图7 喷雾法获得的氯喹分布质谱图像 /p p style=" text-align: center" img style=" " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/d51c038b-8e0c-4efa-8ecf-87c964a43b83.jpg" title=" 10.png" / /p p style=" text-align: center " 图8 在同一测定区域进行1次MS分析及3次MS/MS分析的数据采集设置方式示例 /p p br/ /p
    时间： 2020-06-23
    作者： ONE
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