苄基哌嗪

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  • 哌嗪的提取

    鸡肉中哌嗪的提取, 参考了文献用ASE萃取,回收率低怎么回事?用乙腈提取、三氯乙酸和乙腈混合提取试过了 还有什么方法? 哌嗪属于极性化合物,弱碱性

  • 35.6 反相高效液相色谱法测定左羟丙哌嗪含片中左羟丙哌嗪的含量

    35.6 反相高效液相色谱法测定左羟丙哌嗪含片中左羟丙哌嗪的含量

    作者:朱卫翔; 梁胜华;(中南大学湘雅三医院药剂科; 湖南九典制药有限公司;)摘要:目的建立反相高效液相色谱法测定左羟丙哌嗪含片中左羟丙哌嗪含量的方法。方法色谱柱为Diamonsil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(用三乙胺调pH至3.0)(25∶75),检测波长为237 nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温为室温,进样量为10μL。结果左羟丙哌嗪检测浓度的线性范围为10~80μg.mL-1,r=0.999 9,平均回收率为99.7%,RSD=0.32%。结论本法简便、快速,结果准确、可靠,可用于该制剂的质量控制。谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061103_381749_1606903_3.jpg

  • 六水哌嗪的研究

    各位大侠,我在做六水哌嗪的限度检测时,六水哌嗪的色谱峰像一把刀一样,各位有什么好的建议来改善没有!!我所用的溶剂是稀盐酸+甲醇。色谱柱是HP-5的

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  • 赛默飞发布盐酸法舒地尔药品中高哌嗪含量检测方案
    2014年12月8日,上海——科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)近日发布盐酸法舒地尔药物中高哌嗪含量检测方案。盐酸法舒地尔作为高效的血管扩张药物,可以有效缓解脑血管痉挛,是一种具有广泛药理作用的新型药物。高哌嗪是盐酸法舒地尔合成过程的中间体杂质,其测定方法鲜有文献报道,主要原因是高哌嗪含量较低,在常规的反相色谱柱上保留较弱,同时没有紫外吸收。因此本检测方法采用离子色谱的方法,电导作为检测器测定盐酸法舒地尔药品中高哌嗪的含量。盐酸法舒地尔的结构图 赛默飞发布离子色谱法检测盐酸法舒地尔中高哌嗪含量,采用ICS-2100系统,配备EG淋洗液发生装置,在前处理过程中将药物盐酸法舒地尔去除,采用与流动相浓度一致的17 mmol/LMSA作为溶解样品的最佳溶液,配备Ion Pac CS17色谱柱,选择15%含量的乙腈作为淋洗液条件,在此分析条件下,采用离子色谱技术分析盐酸法舒地尔中高哌嗪的含量,方法简单,分离柱效高,测定结果满足要求。高效离子色谱方法在药物杂质离子的测定中有比较广泛的应用前景。ICS-2100 RFIC 离子色谱系统产品详情:www.thermo.com.cn/Product6474.html应用纪要:《离子色谱法测定盐酸法舒地尔药物中高哌嗪含量》下载地址:www.thermo.com.cn/Resources/201410/30102057126.pdf --------------------------------------------------------------------------------关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技(纽约证交所代码:TMO)是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额170亿美元,在50个国家拥有员工约50,000人。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战,促进医疗诊断发展、提高实验室生产力。借助于Thermo Scientific、Life Technologies、Fisher Scientific和Unity? Lab Services四个首要品牌,我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合,为客户、股东和员工创造价值。欲了解更多信息,请浏览公司网站:www.thermofisher.com 赛默飞世尔科技中国赛默飞世尔科技进入中国发展已有30多年,在中国的总部设于上海,并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉等地设立了分公司,员工人数超过3800名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等,提供实验室综合解决方案,为各行各业的客户服务。为了满足中国市场的需求,现有8家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在全国共设立了6个应用开发中心,将世界级的前沿技术和产品带给国内客户,并提供应用开发与培训等多项服务;位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术,研发适合中国的技术和产品;我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队,在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息,请登录网站www.thermofisher.cn
  • 欧盟对阿斯巴甜的重新评估延至2013年5月
    应欧洲食品安全局(EFSA)的要求,欧洲委员会已经同意将阿斯巴甜(aspartame)的全面重新评估延至2013年5月。这也将允许EFSA的科学专家们有充分的时间来考虑新的数据并完成综合风险评估,以及在最终采纳前就草案意见进行公开评议。   2011年5月,欧洲委员会要求EFSA在2012年前提前对阿斯巴甜(E 951)进行全面重新评估。之前计划于2020年前完成,对该甜味剂的审查是对2009年1月20日之前的,经欧盟授权的对所有食品添加剂系统地重新评估的一部分,该次重新评估是EU 257 / 2010条例下的提前行动。   EFSA接受了这一任务并着手公开征求科学数据和全面开展文献审查,使政府食品添加剂及食品营养源添加(ANS)小组能够在2012年初开始风险评估。   在科学审议的过程中,该小组发现5-苄基-3,6-二氧-2-哌嗪乙酸(5-benzyl-3,6-dioxo-2-piperazine acetic acid,DKP)及其他储存于特定条件下的食品及饮料中的阿斯巴甜的潜在降解物的数据太少。因此EFSA再次发动号召征求关于DKP及其他阿斯巴甜降解物的数据资料。
  • 珂睿:在线固相萃取-质谱系统助力污水验毒
    2020年6月23日习近平总书记在全国禁毒工作先进集体和先进个人表彰会议上就禁毒工作做出了重要指示,要求坚持厉行禁毒方针,打好禁毒人民战争,完善毒品治理体系,深化禁毒国际合作,推动禁毒工作不断取得新成效,为维护社会和谐稳定、保障人民安居乐业作出新的更大贡献。在国家“十四五”规划中污水检毒也已经成为了禁毒工作的重要手段,污水验毒可以客观、全面的反应城市毒情,为公安机关锁定“毒源”提供有利的技术支持。目前,污水验毒已成为各省监控毒情的重要技术手段,很多省市在2018年就已经开始开展对全省的污水样本进行检测,并取得了一定的成效,目前该技术已经开始得到大范围的推广。污水中主要检测的毒品包括:吗啡、可待因、、O6-单乙酰吗啡、苯丙胺、甲基苯丙胺、MDMA、苯甲酰爱康宁、氯胺酮、去甲氯胺酮、MDA、可卡因、美沙酮等,同时需要检测常量的可替宁,作为人群基数标志物。目前,较常见的污水毒品检测方法有离线固相萃取法和在线固相萃取法两种方案,两种方案前处理流程如下:离线固相萃取法:在线固相萃取法:两种前处理方法对比:离线固相萃取法在线固相萃取法污水取样量50ml10ml是否需要对水样进行酸化需要不需要单个样本耗时175分钟18分钟前处理耗材(按照每个样品做两次平行计算)一次性过滤器3-5个一次性酸性SPE小柱 2个一次性碱性SPE小柱 2个分析色谱柱 1套一次性过滤器1个在线富集柱 1套分析色谱柱 1套需要配置的前处理设备全自动固相萃取仪离心浓缩仪移液枪移液枪每天可处理和分析的样品数量20个100个自动化程度中等高综上所述,在线固相萃取法相较于离线固相萃取法,具有明显的方法学优势,样本检测耗时只有离线法的十分之一,检测成本只有离线法的十分之一,每日检测速度是离线法的十倍。目前,成都珂睿开发的双鱼-I在线固相萃取系统,在与质谱联用后,可以非常方便而有效的将污水验毒工作开展起来,可同时监测多达近30种毒品,且可随着工作的深入,形势的变化,对监测的毒品种类进行扩展,有效达到毒情监测的目的。目前珂睿可以检测的毒品包括但不限于:a. 常见毒品及代谢物15种:吗啡、可待因、O6-单乙酰吗啡、苯丙胺、甲基苯丙胺、MDMA、MDA、可卡因、苯甲酰爱康宁、氯胺酮、去甲氯胺酮、美沙酮、甲卡西酮、卡西酮、四氢大麻酸。b. 芬太尼类毒品6种:芬太尼、去苯乙基芬太尼,呋喃芬太尼,舒芬太尼、卡芬太尼、瑞芬太尼。c. 新精活物质8种:氟硝西泮、MDPV、对甲氧基甲基苯丙胺、甲氧麻黄酮、1-(3-三氟甲基苯基)哌嗪、1-(3-氯苯基)哌嗪、苄基哌嗪、氟胺酮。d. 制毒原料5种:麻黄碱、伪麻黄碱(冰毒原料)、邻酮(氯胺酮原料)、NPP和4-ANPP(芬太尼原料)本方案完全满足公安部JD/Y JY02.10-2021“水样中21种毒品及代谢物与可替宁的测定”技术规范要求。我们按照方法要求,对污水中12种毒品进行了方法学相关的一系列测试,包括准确性、方法检出限、定量限、污水中基质效应、标准曲线线性相关系数、每种毒品保留时间偏差、样品重复性和双样平行相对相差等,得出了一系列数据,充分证明了双鱼-I在线固相萃取系统的方法可靠性。本次测试所用仪器设备为:双鱼-I在线固相萃取系统+API4000型三重四级杆串联质谱仪。样本情况:A、B、C三个污水样本(每瓶200ml),其中含有的12种毒品已知浓度。操作步骤:1.取样本10ml,过0.22um水相膜,至进样瓶中2.进样瓶中加入氘代内标(12种氘代含量均为25ng/mL),振匀3.取进样瓶中2mL样本进样目标物检出限ng/L(S/N≥3)定量限ng/L(S/N≥10)内标在盲测污水样本中基质效应%(回收率)线性关系方程线性相关系数吗啡0.3183.2Y=0.02679X-0.048700.9997706-单乙酰吗啡0.51109Y=0.01876X+0.006400.99864可待因0.51101Y=0.02034X+0.003560.9986美沙酮0.21123Y=0.01639X+0.105360.99903甲基苯丙胺0.2194Y=0.01933X+0.117440.99929苯丙胺0.2187.3Y=0.0187X+0.109710.99924氯胺酮0.2190.1Y=0.01889X+0.094030.99967去甲氯胺酮0.5179.5Y=0.02229X+0.069610.99981MDMA0.2197.5Y=0.02199+0.016020.99762MDA0.5199.5Y=0.01991X+0.050.99985可卡因0.21106Y=0.02293X+0.016480.99718苯甲酰爱康宁0.5168.8Y=0.02117X+0.026960.99847方法检出限、定量限、污水中基质效应、线性关系考察(定量限均可达1ng/L, 回收率均在68%-125%之间,线性相关系数均优于0.998)目标物保留时间偏差(%)样品重现性(RSD, %, n=6)平行双样相对相差(%)ABCABCABC吗啡0.1290.1210.1932.5171.9893.5920.680.982.0406-单乙酰吗啡0.1280.0370.0372.0521.6260.9682.983.380.47美沙酮0.1560.2150.1952.2641.1311.531 4.551.030.74甲基苯丙胺0.1560.0670.0373.391.7643.0054.711.035.79苯丙胺0.1970.1970.1970.8210.6161.484.923.282.78氯胺酮0.1240.1240.1471.4120.6512.3282.431.982.75去甲氯胺酮0.110.110.111.2230.9611.3752.363.661.11MDMA0.0640.0350.0351.1831.3440.5643.481.493.13MDA0.1810.060.060.5290.9550.7172.222.164.82可卡因0.1040.1040.1040.5030.7342.270 0.111.613.09苯甲酰爱康宁0.1790.1790.1092.9764.1252.574.121.685.22保留时间与标准品的偏差均小于0.2%,样品的重现性RSD均小于3%,双样平行相对相差小于6%珂睿双鱼-I在线固相萃取与Sciex三重四级杆串联质谱系统联用(客户现场)考虑到污水毒品检测中,可替宁为常量组分,不适合采用大体积进样,双鱼-I专门设计了双进样器的高配方案,可以在一次序列分析中实现大体积进样分析痕量毒品和常量可替宁,无需对硬件进行任何手动更换或切换,无人值守,全自动获得检测结果。同时考虑到相关用户除污水毒品检测外,可能会开展其它如毛发毒品检测、理化检测等常量分析,双进样器高配方案用户仅通过系统升级和软件控制,即可方便地实现大体积进样与常规小体积进样分析的快速无缝切换,满足多种应用需要。 成都珂睿科技双鱼-I型在线固相萃取系统目前已经多家客户处开展污水中毒品分析的应用,包括公安局和第三方司法鉴定机构,用户反馈良好。2020年珂睿推出了双鱼-I型在线固相萃取系统以及国产第一套污水中毒品分析的在线固相萃取液质联用方案,希望让国产色谱分析仪器能够更好地助力到关系国计民生的检测项目中,真正做到“中国制造服务于中国崛起”!

苄基哌嗪相关的仪器

  • FI-RXMI100 手持式傅里叶变换红外物质分析仪,是一款快速、准确鉴别未知化合物的现场分析设备,国产自研、迷你轻巧、坚固耐用。FI-RXMI100 可以应用于各类户外场景,诸如突发性事 故现场、爆炸火灾、危化品泄露、医疗卫生污染、防化部队救灾、港口应急、刑侦缉毒、海关抽检、实验室未知物质检测等重大化学污染事故,应用领域极广。FI-RXMI100 手持式分析仪将傅里叶红外的快速、准确、高效、智能等优势完美集成,具有光谱分辨率高、功耗低、重量轻、体积小等绿色环保的特点,可轻松应对现场*一响应的采样需求。FI-RXMI100 手持式分析仪,整机设计简约大方,包含智能化的触控大屏、全自动 ATR 压力装置及舒适的手持端等。晶体采用纯金刚石材质,镶嵌在钝化的不锈钢盘中,可以耐受强酸碱、硬岩石等各类不同的固体、粉末、纤维、液体、糊状等样品。液体及糊状样品可直接测试, 无需压力装置,其他样品仅需放置少量在 ATR 晶体中间,压头会自动下压并确保分析过程中压力的一致性和便捷性。FI-RXMI100 配置全自动“一键直达”软件,开机后自动显示采集界面,自动进行 ATR 测量, 自动搜索数据库,自动显示*佳结果。软件集成混合物分析功能,结合数学算法,可根据实 际情况自定义混合物的数量,并对谱图进行连续多次的搜索,并给出各个组分的谱图的相对 占比比例。同时, 用户可以随时保存搜索结果或存档打印,无需人为干预。FI-RXMI100 标配有超过 10,000 余种各类危化品、有机化合物、毒*品及爆炸物的红外光谱数据库,数据库全部显示中文名称,包括常见毒/品、易制毒化学品、精神药品、麻醉药品、新精神 活性物质等管控药品、毒/品掺杂物及稀释剂、爆炸物等。此外,软件提供用户快速自建库功能,允许用户开发新的中文数据库,以便不断更新自我检测 能力。产品特点● “一键直达”式全自动测 -评 -存功能;● 配备全自动压力装置,纯金刚石 ATR 晶体,可测试各类毒*品及腐蚀性样品,如硫酸、盐酸、硝酸等;● 快速谱图分析及混合物分析功能,优化的分析算法,更有效识别混合物;● 数据库涵盖常见毒*品、易制毒化学品、芬太尼类、合成大麻素类、合成卡西酮类等新精神活性物质等列管物质,以及毒/品掺杂物及稀释剂、爆炸物及危化品等物质,筛查更全面;● 具有自动保存谱图、自动添加检测时间、自动扣除金刚石、CO2 的吸收峰,可自动生成打印报告并导出保存或打印;● 具有 WIFI、蓝牙等多种通讯方式,支持数据传输及管理;● 主机面板实时显示电池电量,可显示电池的充放电状态等信息。红外检测项目部分列表(可检测数量超过 2500 种)常见毒/品甲基苯丙胺、海洛因、 K 粉(氯胺酮)、可卡因盐酸盐、可卡因碱、摇头丸、止咳水、大麻酚等易制毒化学品NPP、4-ANPP、 P-2-P(1-苯基-2-丙酮)、胡椒醛、麻黄碱、 MEK(甲基乙基酮)等芬太尼类芬太尼、舒芬太尼、瑞芬太尼、卡芬太尼、奥芬太尼、乙酰芬太尼、异丁酰芬太尼、戊酰芬太尼、硫代芬太尼、呋喃芬太尼等 60 余种合成大麻素类UR-144、AB-CHMINACA、 PB-22、JWH-200、JWH-081、AM-694 等120 余种合成卡西酮类卡西酮、甲卡西酮、乙卡西酮、 4-氯甲卡西酮、 4-溴乙卡西酮等、 4-CDMC 等 125 种苯乙胺类2-氟苯丙胺、 3-甲氧基甲基苯丙胺、 4-氯苯丙胺、 2C-B、25I-NB4OMe、5-APB 等 80 余种色胺类甲基色胺、 5-MeO-AMT、 5-MeO-DMT 等 23 种其他类氟胺酮、 3-MeO-PCP、3-FPM、二氯西泮、氟阿普唑仑、依替唑仑、哌异丙酯、苄基哌嗪、 2-氨基茚满等爆炸物类黑火药、硝铵炸药、 TNT、黑索金、太安等 产品参数项目FI-RXMI100 技术参数光谱范围5000-500cm-1光谱分辨率优于 2cm-1波数精度优于 0.01cm-1干涉仪国产高稳定立体角镜干涉仪,恒久准直,使用寿命大于 10 年分束器中红外专用硒化锌(ZnSe)防潮分束器,能适应长期野外现场工作。检测器防潮型高灵敏度 DLaTGS 检测器,内置 ADC红外光源长寿命中红外陶瓷光源激光器固体激光器,使用寿命大于 10 年显示7 英寸触控屏,具有标准数据接口及充电接口,可进行无线和蓝牙传输。主机内置摄像头,配置Windows10操作系统,用户无需现场组装,开机即用。触屏操作模式配置7寸触摸屏,具有标准TYPE-C数据接口及充电口电池内置可充电锂离子电池,连续 4 小时续航,可通过外部36伏车载电瓶供电。充电100 - 240 VAC, 50 - 60 Hz,既可以给红外主机供电,又可以给平板电脑供电,系统设计有外置充电口、主机开关按钮密闭干燥系统具有良好的密封防潮性能,软件实时显示仪器内部温度和湿度数值,并有湿度自动报警功能,底板上有可再生的旋拧干燥管。 全自动功能开机后自动显示采集界面,自动进行 ATR 测量,自动搜索数据库,自动显示*佳结果。点击后自动保存搜索结果或 word 文档,无需人为干预ATR软件全自动控制压头,配备国产纯金刚石晶体,耐磨损、抗腐蚀、易清洗, 可以满足固、液样品的快速测量需求 软件智能一键直达式测评存功能的全中文版处理软件。功能还包括:红外光谱测 量功能、光谱数据预处理功能、谱图快速比较功能、用户自建标准谱库功 能、定量分析功能、自动扣除金刚石/CO2 吸收峰功能、智能谱图识别功能、报告自动生成及打印功能等。一体化设计界面,包含“采集-图像-混合物分析-报告-设置”等集成化功能, 遭图采集结束后,可在报告界面直接显示样品照片、谱图的结果。检测结果可以保存为图片格式或者生成 PDF 报告。智能混合物搜索功能结合数学算法,可连续进行谱图剥离搜索,快速获得混合物的主要成分;可设置差减的次数;可自动进行合成谱图,和测量谱图进行对比,进一步核验搜索结果;可给出各个组分的谱图的相对占比比例,并且供半定量的参考含量。 数据库配置专业的红外谱图数据库,超过 10,000 张,包括易制毒化学品、大麻素类物质、芬太尼类物质、新精活毒*品、危险化学品等物质的谱图,其中毒/品类谱图超过 2500 张尺寸26cm×16.3cm×12.8cm(含自动压头)重量4.5kg工作温度-10OC 至+40OC储存温度-20OC 至+55OC 软件应用界面一键直达式:自动测评存软件界面应用领域● 公安、海关、边防、交通运输等领域,现场对管控品、走私样品等可疑品的● 毒/品、新精神活性物质等管控品、爆炸物、危化品的快速检测● 对各类块状或固体粉末、液体、薄膜、腐蚀性样品、透明或半透明样品进行直接检测
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  • Neon NxT 电转染系统:可靠的转染性能使用高效、快速、简单、灵活的紧凑型电转染系统,节省宝贵的研究时间,并保护珍贵的样本。Invitrogen Neon NxT 电转染系统采用专有移液器吸头技术,再结合经过简化的工作流程和灵活操作,有助于减少样本损失,降低污染风险,减少操作步骤,让您全方位管控各种实验。Neon NxT 电转染系统的优势极高的转染效率和细胞活率—可转染具有挑战性的细胞株,转染效率高、细胞活率高 提高基因编辑效率—专有的Neon NxT基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能根据需要灵活变通—针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案,精确优化电转染参数节省宝贵的研究时间—利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面,通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞节省珍贵样本—尽量减少样本输送造成损失和污染的风险使用该转染系统对多种细胞株进行转染时,均可实现极高的转染效率和细胞存活率Neon NxT 电转染系统是一款电转仪,在极难转染的细胞(包括免疫细胞、原代细胞和干细胞)中实现高达 90% 的转染和基因编辑效率。150 多个细胞株已在经过优化的即用条件下进行了转染效率和细胞存活率测试。 图1 .Neon NxT 电转染系统的转染效率。 使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。报告的转染效率为 GFP 阳性细胞的百分比 (n = 3) 注意: 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应中进行电转染。图 2.Neon NxT 系统进行电转染后的细胞存活率。 在使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。转染细胞使用 Invitrogen SYTO Red 死细胞染色剂染色,并通过 Invitrogen ATTUNE NxT 流式细胞仪评估细胞存活率。报告的细胞存活率 (%) 为 3 次测量的平均值。 注意: 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应液中进行电转染。图 3. Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液在基于 CRISPR-Cas9 的基因编辑实验中的性能。. 在 10 μL 或 100 μL 反应中电转细胞。(A) 以 GFP 阳性细胞百分比表示的 GFP 供体 DNA 基因敲入效率。(B) GFP 供体 DNA 敲入后细胞的存活率。(C) 以电转后不表达 GFP 的初始 GFP 阳性细胞百分比表示的基因敲除效率。(D) 电转后基因敲除细胞的存活率。提高基因编辑效率基因编辑在进一步了解人类健康和疾病方面大有可为。在基因编辑工作流程中,一个关键而又具有挑战性的步骤是将 CRISPR 核糖核蛋白 (RNP)、DNA 和 RNA 分子有效地递送到所选择的细胞系中,也就是所谓的转染。如上所述,电转是最广泛使用的递送方法,因为它能够实现高转染效率,即使是难以转染的细胞也不例外。与 Neon NxT 电转染系统配合使用时,我们的基因编辑试剂和 Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能,使用 CRISPR Cas9 等特定物质进行哺乳动物细胞(包括原代细胞、干细胞和难以转染的细胞)的基因敲除或基因敲入实验 (图 3)。为什么 Neon NxT 电转染系统可以很好地替代电转比色皿?与标准比色皿电转染腔室不同,Neon NxT 电转染系统使用专有的生物兼容移液器吸头腔,可产生更均匀的电场。这一设计可以更好地维持生理状态,与常规电转染相比,细胞存活率更高。形成更加均匀的电场在整个电转染腔室内维持稳定的 pH 值产生极少热量生成较少离子减少细胞遇到的剪切力图 3.Neon NxT 移液器吸头相对于标准电转比色皿的优势。 专有的生物兼容型 (A) Neon NxT 吸头展示了成熟可靠的毛细管电转染技术,与(B) 电转比色皿相比具有重要优势。针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案,精确优化电转染参数电转染参数可定制使用 Neon NxT 电转染系统,您可以精确控制对实验至关重要的参数,而不会将宝贵的时间浪费在调整不准确的参数上。您可以利用该转染系统修改以下参数:脉冲电压脉冲宽度脉冲次数细胞类型缓冲液类型递送物质类型对各种递送物质、细胞类型和细胞密度均可通用将 DNA、RNA 或蛋白质递送到多种哺乳动物细胞中,每次反应可灵活转染 2 x 10⁴ 至 6 x 10⁶ 个细胞。使用 TransfectionLab 云端 APP 轻松制定计划Invitrogen TransfectionLab 是一款云端 APP,可以通过Thermo Fisher Connect平台进行访问,能够根据每个电穿孔实验,从设计阶段开始量身定制分步指南。您可以远程设置多达 384 个样本的多个孔板布局,通过已经连接网络的 Neon NxT 系统,您可以直接访问 APP 中保存的任何方案或孔板布局。利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面,通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞经简化的电转染工作流程Neon NxT 电转染系统的工作流程经过简化,易于操作和执行,用户几乎不需要进行培训,提高了结果的一致性和可再现性。使用该转染系统可轻松完成电转染过程:首先,将细胞和质粒混合物加入 Neon NxT 移液管吸头中。其次,插入移液器架,按下“电穿孔”。最后,将转染细胞转移至培养皿中。由于转染在移液器吸头内进行,所以 3 个简单的步骤即可完成转染操作:吸液、电转染、分液。该电转染系统能够缩短处理时间除了简化工作流程外,与常规电转染系统相比,我们专有的电转染技术可将总处理时间缩短至 10-15 分钟,因为转染在 Neon NxT 移液器吸头内进行。一个缓冲液试剂盒即可用于多种哺乳动物细胞类型解决了根据细胞株寻找缓冲液试剂盒的问题。我们使用一个缓冲液试剂盒简化了这一过程,该试剂盒可适配 150 多个哺乳动物细胞株。我们建议使用电压低于 1,900 V 的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 R 和电压较高的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 T。节省时间的孔板设置使用 Neon NxT 电转染系统的直观用户界面,提前设置整个孔板,而不用“快速启动 (Quick Start)”功能调整不同样本之间的电转参数。在每个样本进行电转染时,可监测屏幕上的进展情况,在 20 分钟内最多可完成 24 个样本的电转染。
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  • CRISPR-Cas9技术原理:  CRISPR(clustered,regularlyinterspaced,shortpalindromicrepeats)是一种来自细菌降解 入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫机制。在细菌及古细菌中,CRISPR系统共分成3类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共同发挥作用,而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可,这为其能够广泛应用提供了便利条件。  目前,来自Streptococcuspyogenes的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9蛋白(含有两个核酸酶结构域),可以分别切割DNA两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物,然后通过PAM序列结合并侵入DNA,形成RNA-DNA复合结构,进而对目的DNA双链进行切割,使DNA双链断裂。  由于PAM序列结构简单(5' -NGG-3’),几乎可以在所有的基因中找到大量靶点,因此得到广泛的应用。CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞,是目前高效的基因组编辑系统。CRISPR-Cas9技术优势:  1.效率高:可精确编辑基因组,敲除效率高  2.周期短:CRISPR-Cas9系统的构建和使用极为方便,极大降低了实验难度,缩短实验周期  3.高嵌合率,生殖遗传稳定;  4.多重编辑能力:可实现多个靶位点同时进行基因打靶;  5.可实现大片段DNA敲除、敲入、条件性敲除。武汉贝赛模式生物科技有限公司提供基因编辑(转基因、基因全敲、条件性敲除、基因敲入、点突变等)大小鼠模型,提供定制的基因编辑细胞系构建服务(基因敲除,点突变,基因敲入),进行动物相关实验(大小鼠净化、精子及胚胎保种等),提供模式动物繁殖供应和药物药效评价以及新药研发服务等。
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