甲氧苄喹酯

喹噁啉类药物的危害及检测目的喹噁啉类药物是一类化学合成类的抗菌促生长剂，它们的基本结构是喹噁啉-1,4-二氧化物，即喹噁啉环。主要包括喹乙醇、卡巴氧、喹喔啉、喹赛多、喹多辛、西诺喹多、德那资多（肼多司）、乙酰甲喹和喹烯酮等药物。研究表明，喹噁啉类药物对DNA致突变、致损伤，破坏细胞抗氧化作用系统，可以引起细胞自由基的产生，导致细胞DNA发生氧化性损伤，还会引起细胞周期阻滞和细胞凋亡。传统喹噁啉类药物喹乙醇和卡巴氧，由于其对人体危害最/大，世界各国和国际组织对这两种兽药制定了严格的残留限量规定。欧盟1998年发文禁止喹乙醇和卡巴氧在食品动物生产中作为促生长添加剂使用。2020年我国生效实施的GB 31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药zui/大残留限量》中规定了猪肌肉和猪肝脏组织中喹乙醇残留标志物的zui/大残留限量。同年我国农业农村部公告第250号规定卡巴氧及其盐、酯为食品动物中禁止使用的药品。但是，这些药物在生产实践中被大量地非法使用或滥用，其残留对消费者健康造成了巨大的潜在威胁。喹乙醇和卡巴氧进入动物体内后，能够在短时间内代谢成十多种产物，研究表明，3-甲基-喹噁啉-2-羧酸（MQCA）是喹乙醇在动物体内代谢后的主要产物，喹噁啉-2-羧酸（QCA）是卡巴氧在动物体内代谢后的主要产物，且该产物在动物体内滞留时间较长，因其含量与总残留关系稳定，所以将MQCA定为喹乙醇在动物体内代谢的残留标示物，将QCA定为卡巴氧在动物体内代谢的残留标示物。本文阐述了如何将卡巴氧、喹乙醇及代谢物从样品基质中分离提取出来，并经过净化后，转化成液质联用仪可以检测的形式。以提取、净化为重点，依据国标GB/T 20746-2006，为检测人员和相关领域研究人员提供一定的参考。检测项目：卡巴氧、脱氧卡巴氧、喹噁啉-2-羧酸（QCA）、3-甲基-喹噁啉-2-羧酸（MQCA）应用范围：牛、猪肝脏和肌肉液相色谱-串联质谱法方法原理：卡巴氧：用乙腈+乙酸乙酯（1+1）溶液提取肌肉和肝脏组织中的卡巴氧，提取液经正己烷脱脂后，旋转蒸发至干，残渣用甲酸（0.1 %）+甲醇（19+1）溶液溶解。样液供液质测定，内标法定量。脱氧卡巴氧、QCA、MQCA：用甲酸溶液消化试样，使组织中天然存在的酶失活，然后加入蛋白酶水解，盐酸酸化，离心过滤后，过Oasis MAX固相萃取柱或相当者净化。先用二氯甲烷洗脱脱氧卡巴氧，再用2 %甲酸乙酸乙酯溶液洗脱QCA和MQCA，氮气吹干洗脱液，残渣用甲酸+甲醇（19+1）溶液溶解，样液供液质测定，内标法定量。 前处理仪器：固相萃取装置；氮气浓缩仪；液体混匀器；分析天平（感量0.1 mg和0.01 g）；真空泵；均质器；移液器（10 μL～100 μL和100 μL～1000 μL）；聚丙烯离心管（50 mL具塞）；pH计（测量精度±0.02 pH单位）；低温离心机（可制冷到4 ℃）；玻璃离心管（15 mL）。检测仪器：HPLC-MS/MS+ESI源试样制备与保存将牛、猪肝脏和肌肉组织样品充分搅碎，均质，分出0.5 kg作为试样，置于清洁样品容器中，密封，并做上标记。将制备好的试样于-18 ℃以下保存。前处理方法1. 卡巴氧的前处理步骤称取5 g试样（精确至0.01 g），置于50 mL聚丙烯离心管中，加入5 g中性氧化铝，加入25 mL乙腈+乙酸乙酯（1+1）溶液，于液体混匀器上充分混合5 min，以5000 r/min离心5 min，将上清液移取至另一干净的50 mL离心管，加入10 mL正己烷到管中，振荡2 min，以5000 r/min离心5 min，弃去上层正己烷，将下层清液转移至150 mL鸡心瓶中。加入25 mL乙腈+乙酸乙酯（1+1）溶液，重复提取一次，正己烷除脂后合并两次提取液于同一鸡心瓶中，加入一定量的喹噁啉-2-羧酸-d4（QCA-d4）标准溶液，使其浓度为2.0 ng/g，40 ℃水浴减压旋转蒸发至干。准确加入1.0 mL 0.1 %甲酸-甲醇（19+1）溶液溶解残渣，过0.2 μm滤膜后，供液质测定。2. 脱氧卡巴氧、喹噁啉-2-羧酸、3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的前处理步骤称取5 g试样（精确至0.01 g），置于50 mL聚丙烯离心管中，加入10 mL 0.6 %甲酸溶液，混匀后，置于（47±3）℃振荡水浴中振摇1 h；先加入3 mL1.0 mol/LTris溶液混匀，再加入0.3 mL 0.01 g/mL蛋白酶水溶液，充分混匀后，置于（47±3）℃振荡水浴中酶解16 h～18 h。加入20 mL 0.3 mol/L盐酸溶液，振荡5 min，在10 ℃以5000 r/min离心15 min，上清液过滤。将滤液移入Oasis MAX固相萃取柱（3 mL甲醇和3 mL水活化）中，待样液全部流出后，用30 mL 0.05 mol/L乙酸钠-甲醇（19+1）溶液淋洗固相萃取柱，真空抽干15 min。在一支干净的玻璃管内加入一定量的喹噁啉-2-羧酸-d4（QCA-d4）标准溶液，使其浓度为2.0 ng/g，再用4×3 mL二氯甲烷将脱氧卡巴氧洗脱至管内，在45 ℃用氮气浓缩仪吹干。固相萃取柱再用3×3 mL甲醇、3 mL水、3×3 mL 0.1 mol/L盐酸溶液和2×3 mL甲醇-水（1+4）溶液分别淋洗，真空抽干15 min，然后用2 mL乙酸乙酯再淋洗固相萃取柱，弃去全部淋出液，最后用3 mL 2 %甲酸乙酸乙酯溶液洗脱喹噁啉-2-羧酸（QCA）和3-甲基-喹噁啉-2-羧酸（MQCA）到上述吹干的试管中，在45 ℃用氮气浓缩仪吹干。准确加入1.0 mL 0.1 %甲酸-甲醇（1.标准物质分别用甲醇配制成100 m-d4）同位素内标进行回收率的校正，也可以配合使用各个化合物相对应的同位素内标。

国家标准计划《饲料中盐酸氨丙啉、乙氧酰胺苯甲酯和磺胺喹噁啉的测定》由 TC76（全国饲料工业标准化技术委员会）归口 ，主管部门为国家标准化管理委员会。主要起草单位 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心（北京）] 。征求意见稿.pdf编制说明.pdf

故事背景话说客户已经采购了某牌子山寨版的elsd，但检测的时候在关键位置出现基线波动大的问题，正好影响到用户关键物质的检测。怎么办？怎么办？这时候啊，客户最关注的就是物质的定量不准的问题，所以他们就想试试我们瑞士步琦的elsd3300。 接到这个情况后，我们迅速把buchi elsd33300样机发给用户，而我们的杨工也亲自飞到北京进行现场测试，并在现场连续测试了两天，同时也给客户做了elsd3300的操作和维护培训，客户对我们的产品非常感兴趣，说没有想到小小elsd3300还有这么多学问。两天测试和检测方法优化后，步琦elsd基线平稳，噪音小，漂移小，重现性高，当时又正好是酷暑季节，用户对我们的产品质量以及工作态度都非常肯定。目前最新的消息是用户已经将某山寨仪器退货，而瑞士步琦的elsd3300已经进入采购流程。不得不说，李鬼李逵,实验结果辩真假啊！另外还想说瑞士步琦不仅可以有专家现场实验指导，还可以到我们专业的实验室试样，这也是区别李鬼李逵的好方法！现在的我们为了更加的贴近客户，帮助大家排忧解难，在客户选购仪器之前，我们提供免费一天的试机机会，免费，免费哦，重要事情说三遍。详见上篇微信《免费！！真的吗？过完七夕还得约！》 专业应用磷脂酰胆碱（1,2-diacyl-sn-glycero-3-phosphocholine）是一种两性分子，由亲水的头部和疏水的尾部组成。亦称卵磷脂。磷脂酰胆碱是磷脂的主要成分之一，从植物中提取，磷脂酰胆碱将大脑的指令迅速传递，信息传递速度越快，记忆力越强，是健脑食物。它能增强婴儿智力，提高学习效率。尤其是胎儿，在生长发育中对磷脂酰胆碱的需求极大。卵磷脂在蛋黄和大豆中特别丰富，食品行业中广泛用作乳化剂，本文详细报告了用buchi公司elsd3300蒸发光散射检测器检测磷脂酰胆碱的检测结果。图 1： elsd3300蒸发光散射检测器设备：elsd3300蒸发光散射检测器shimadzu lc-20 hplc（配pc55n）试剂及耗材：流动相a：甲醇：水：冰醋酸：三乙胺（85:15:0.45:0.05）流动相b：正己烷：异丙醇：流动相a （20:48:32）色谱柱：silica，4.6*250mml, 5um样品：磷脂酰胆碱及溶血磷脂酰胆碱样品预处理:样品经流动相溶解后过0.22um滤膜过滤后待上样进样体积:20ul按照表1的梯度比例进行检测，运行时间为26min。时间/min流动相a流动相b0109020307035955361090411090表 1：buchi elsd3300蒸发光散射检测器检测磷脂酰胆碱及溶血磷脂酰胆碱样品检测：样品配置好后置于自动进样器中，使用编辑好的方法进行自动进样分析 结果：buchi elsd3300蒸发光散射检测器检测磷脂酰胆碱及溶血磷脂酰胆碱检测结果见表2 。表 2：磷脂酰胆碱及溶血磷脂酰胆碱本次实验的难点是样品没有紫外吸收，流动相比较复杂，样品具有双亲特性，且elsd3300运行参数如气体流速和检测温度以及增益值必须优化。 结论本实验严格按照2010版药典方法使用elsd3300检测了磷脂酰胆碱及溶血磷脂酰胆碱。实现了低至0.8ug溶血磷脂酰胆碱的检测，从上述图谱来看elsd3300具有噪音小且基线漂移小和重现性高等特点。参考文献[1] 2010版药典步琦申明：针对市场上一些混淆市场，虚假宣传的行为，我们再次发出严正申明：瑞士步琦公司buchi是全球（包括港澳台等地）提供美国grace公司的flash chromatography (reveleris® prep和reveleris® x2)， alltech® elsd蒸发光散射检测器（alltech® elsd 3300）， 以及色谱柱等相关产品线的唯一合法供应商。步琦实验室设备贸易(上海)有限公司（作为瑞士步琦在中国的唯一分公司）有权针对任何混肴市场、虚假宣传等侵权行为，要求其停止侵权行为并将委托上海市海华永泰律师事务所追究其法律责任！