木糖基紫杉醇

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  • 那位能帮忙从制剂中分离出紫杉醇?

    我有一些紫杉醇制剂,是实验室中试生产时做的,但现在做课题需要原料药,所以想从制剂中分一些出来,但是了一些方法(主要是硅胶柱层析),都弄不好。制剂中成分为:聚氧乙烯蓖麻油(表面活性剂HLB13.6)、无水乙醇、紫杉醇。哪位能给个建议,不胜感激!

  • 【转帖】整合代谢工程和合成生物学大肠杆菌合成紫杉醇重要前体

    众所周知,紫杉醇是重要的抗癌药物,其作用机制是抑制癌细胞的有丝分裂。紫杉醇对包括乳腺癌在内的多种癌症有很好的治疗效果,其最高销售额曾超过10亿美元。虽然随着专利的到期,其售价有了较大幅度的降低,但是其价格仍然相当昂贵,一个疗程的价格超过1万美元。 紫杉醇是植物来源的抗癌药物,最初治疗一个病人需要4-5棵太平洋红豆杉的树皮。由于太平洋红豆杉数量非常有限,生长周期很长,并且剥去红豆杉树皮后回导致红豆杉的死亡,因此使用红豆杉树皮来提取紫杉醇治疗癌症病人面临很强的伦理困境。面对此两难境地,科学家发挥科学创新精神,开发出了红豆杉植物细胞培养技术来获取紫杉醇,随着研究是深入,科学家发现可将使用decorative yew的树叶提取紫杉醇的前体,使用化学合成的方法合成紫杉醇。由于decorative yew树叶来源很广,使用树叶也不会杀死树木本身,加之后续合成的高效性,这种提取加合成的方法称为紫杉醇的主要来源。化学全合成是获得化合物的主要手段之一,科学家经过努力也成功地合成了紫杉醇,由于紫杉醇结构复杂,化学合成需要35-50步,得率很低,因此紫杉醇的化学全合成科学意义很大,实际应用的价值不大。  微生物具有底物利用广泛,生长速度快,研究深入,大规模生产容易等优点,非常适合药物的生产,与紫杉醇同为萜类化合物的青蒿素已经通过精确的途径改造和优化,已经实现了工业化生产,这表明通过代谢工程和合成生物学手段在微生物中合成宿主本身不产生的复杂小分子是可行的,也为后续的相关研究提供可供借鉴的策略和经验。 美国麻省理工大学和Tufts大学科学家沿着这个思路,合成紫杉醇的前体taxadiene和 taxadiene-5-alpha-ol。虽然大肠杆菌并不能够产生这两种物质,但是合成他们的前体IPP是大肠杆菌生理代谢过程中的一个中间产物,IPP能够通过两部的酶促反应合成taxadiene。催化后续两部反应的酶类已经从植物中克隆出来。  美国科学家首先优化了IPP的生物合成,以大量生成IPP为后续的酶促反应提供底物。 IPP的生物合成有8个步骤,研究发现其中的四个步骤是限速步骤,通过提高限速步骤的酶量,控制整个催化的效率,大量的合成了IPP。接着讲植物的催化酶引入到工程菌株中,优化催化酶的密码子和表达水平,产生了大量的taxadiene。与只加入催化酶没有进行相关优化相比,其产量提高了1500倍,也比已有的文献报道的产量提高了1000倍。接着科学家有加入能够催化taxadiene合成 taxadiene-5-alpha-ol的酶类,将合成紫杉醇的途径有往前迈了一步。  虽然离合成能够化学转化的前体浆果赤霉素(baccatin III)还有比较远的距离,但是本研究表明在弄清楚紫杉醇的合成途径后,使用大肠杆菌合成紫杉醇很有潜力。 本研究中使用的平台技术和手段对合成其他化合物具有通用性,因此使用代谢工程结合合成生物学手段将开启动植物来源的活性小分子微生物表达的大门。  Source: “Isoprenoid Pathway Optimization for Taxol Precursor Overproduction in Escherichia coli” by Parayil Kumaran Ajikumar, Wen-Hai Xiao, Keith E. J. Tyo, Yong Wang, Fritz Simeon, Effendi Leonard, Oliver Mucha, Too Heng Phon, Blaine Pfeifer, Gregory Stephanopoulos. Science, 1 October, 2010. Funding: Singapore-MIT Alliance, National Institutes of Health and a Milheim Foundation Grant for Cancer Research

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  • 我国科学家突破“抗癌明星药”紫杉醇生物合成难题
    素有“植物大熊猫”之称的红豆杉是我国一级珍稀濒危保护植物,其生长速度极慢,一般成树需要几十年甚至上百年,人工种植也非常不易。但这一树种却是全球知名抗癌药物紫杉醇的提取来源。中国农业科学院深圳农业基因组研究所闫建斌团队近日牵头发现紫杉醇生物合成途径中关键的未知酶,设计并重构了紫杉醇生物合成新路线,为开发我国自主的紫杉醇提取生产技术提供重要抓手,从而为中国的紫杉醇绿色制造产业化铺平道路。相关研究成果于北京时间1月26日在国际期刊《科学》上发表。中国科学院院士赵国屏对此评价:该研究成功解析了紫杉醇合成途径中尚未被发现的若干关键催化酶,并利用植物底盘实现了合成路线的人工重构,结束了阐明紫杉醇生物合成途径的漫长研究历史,也生动代表着我国一批中青年科学家,在合成生物学领域探索奋斗近二十年所达到的里程碑式新高度。闫建斌研究员介绍,紫杉醇是一种结构异常复杂且独特的四环二萜类天然产物,由红豆杉中提取,在世界上被广泛应用于多种癌症的临床治疗。在我国,紫杉醇原料药主要依靠从人工种植的红豆杉中提取紫杉醇前体分子——巴卡亭Ⅲ,再通过简单的化学合成修饰,实现大规模生产。但这高度依赖于珍稀而有限的红豆杉资源,使得紫杉醇药物生产成本高昂,还可能引发生态破坏和耕地占用等问题。因此,如何提高紫杉醇的生物合成效率、开发绿色可持续的新型生产策略,以替代天然提取,成为亟待解决的焦点、难点问题。长期以来,世界各国都在积极推动紫杉醇相关研究与产业发展。特别是美国,自20世纪60年代开始至今,一直主导着紫杉醇的科技前沿。当前,最先进的紫杉醇前体巴卡亭Ⅲ等的提取技术、核心的红豆杉细胞生产技术和基因工程技术等,依然掌控在欧美制药公司手中。中国农业科学院深圳农业基因组研究所(岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心)组织国内外多家单位,开展了多年攻关。研究人员从58个关键候选基因中,发现了一个关键的蛋白酶。这种酶的发现与反应机制的阐明,重塑了科学界对于紫杉醇内部独特结构的分子反应机制的理解。随后,研究团队证明了巴卡亭Ⅲ分子可由9个核心基因合成,绘制出了巴卡亭Ⅲ的完整生物合成过程。以上发现突破了合成生物学技术实现紫杉醇绿色可持续生物制造的关键瓶颈,将为紫杉醇合成生物学制造提供关键基因。
  • 沃特世最新PFP(全氟苯基)色谱柱适用于USP方法紫杉醇及其注射液含量测定
    紫杉醇(Paclitaxel)最初是从红豆杉科红豆杉属(Taxus)植物的树皮中提取得到的二萜类化合物,具有独特抗癌活性,曾被美国国立癌症研究所认为是近15~20年来肿瘤化疗的最重要的进展。紫杉醇注射液功效主治卵巢癌和乳腺癌及NSCLC的一线和二线治疗。头颈癌、食管癌,精原细胞瘤,复发非何金氏淋巴瘤等。 USP对紫杉醇[1]以及紫杉醇注射液[2]的含量测定系统方法(系统方法参见色谱通则*): 流动相:水-乙腈 11:9(即 55:45),如需要时可适当调整比例。 洗脱:等度,1.5mL/min[1] 色谱柱:5um, 4.6[1] 或 4.0[2] mmID x 250mmL,L43(即:PFP,全氟苯基) 检测:UV227nm 要求:拖尾因子0.7-1.3范围内[1];紫杉醇峰的保留时间在6.0-10.0min范围内[2] *USP Chromatography 允许调整范围如下而仍具有法规依从性: - 色谱柱粒径可减小(但减小程度最多为50%) - 柱长度可调整± 70% - 流速可调整± 50% 使用沃特世最新产品XSelect&trade HSS PFP色谱柱(3.5um, 4.6x150mm, PN186005862),流速1mL/min,可对混标得到如下分离效果,满足对紫杉醇定量分析的要求。沃特世公司也提供更多规格XSelect HSS PFP色谱柱以满足不同应用与需要。 适当调整流动相,如降低乙腈浓度至42%v/v,即可获得更完全可靠的紫杉醇分离度如下: 关于沃特世XSelect&trade HSS PFP柱产品: 是目前市场上稳定性最好的、最具重现性的PFP(全氟苯基)柱 基于沃特世HSS(高强度硅胶)颗粒,有完全对等的ACQUITY UPLC亚二微米柱,可供未来无忧升级至UPLC技术平台 独特的PFP(全氟苯基)键合相对碱性化合物和平面状芳香族化合物具有独特选择性 (产品手册请见:http://www.waters.com/waters/library.htm?cid=511436&lid=134643659,欢迎垂询索取中文资料) [1] USP34, 3798, Assay of Paclitaxel Monograph. [2] USP34, 3799, Assay of Paclitaxel Injection Monograph.
  • 沃特世经典Symmetry色谱柱适用于中国药典方法紫杉醇及其注射液含量测定
    紫杉醇(Paclitaxel)最初是从红豆杉科红豆杉属(Taxus)植物的树皮中提取得到的二萜类化合物,具有独特抗癌活性,曾被美国国立癌症研究所认为是近15~20年来肿瘤化疗的最重要的进展。紫杉醇注射液功效主治:卵巢癌和乳腺癌及NSCLC的一线和二线治疗;头颈癌、食管癌,精原细胞瘤,复发非何金氏淋巴瘤等。 中国药典对紫杉醇[1]以及紫杉醇注射液[2]规定了有关物质检测及含量测定方法。 有关物质检测方法要求使用C18柱,以水-乙腈进行梯度洗脱,检查三杉尖宁碱(杂质I)与7-表-10-去乙酰基紫杉醇(杂质II)等杂质。使用沃特世经典高纯硅胶色谱柱Symmetry C18(5um, 4.6x250mm, PN WAT054275)按药典方法可得如下谱图,充分满足紫杉醇峰与杂质II峰之间的分离度大于1.2的药典方法系统适应性要求: 对于实际样品检测杂质的效果图: 药典方法要求,维持初始流动相乙腈-水(40:60)不变,待紫杉醇主峰洗脱完毕后再进行梯度洗脱,时间较长,使用沃特世UPLC技术可以帮助提高通量效率并节约样品耗量及溶剂消耗量。 含量测定要求使用C18柱,以甲醇-水-乙腈(23:41:36)为流动相等度洗脱。使用同上Symmetry C18柱进行分离,得到谱图如下,充分满足紫杉醇峰与杂质I峰及杂质II峰的分离度均大于1.0的药典方法系统适应性要求。 药代研究参考:中国新药研究者也已经使用UPLC技术开展了对红豆杉属植物根须的代谢轮廓分析[3]以及对紫杉醇衍生物(NPD-103)和紫杉醇脂质体的药物动力学分析[4-5]。 关于沃特世Symmetry系列色谱柱产品: 1994年以来的制药行业内标杆产品,高纯度、高品控,全程依从cGMP生产规范! 质优价中,优惠后仅为三千,帮助您平衡对数据品质和对成本的双重要求! 具有最广泛的文献引用,多达百余个USP方法使用(可垂询),多达170多个应用的应用手册,即索即得 [1][2]中国药典2010版,二部,1007-1008页。 [3] 红豆杉属植物根须的UPLC-ESI-MS代谢轮廓分析。沃特世液相色谱质谱通讯,第47期,23-28页。 葛广波等。 [4] Determination of a novel paclitaxel derivative (NPD-103) in human plasma by ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Biomed Chromatograr. 2009 May 23(5): 510-5. Zhang SQ, et al. [5] Clinical pharmacokinetics of paclitaxel liposome with a new route of administration in human based on the analysis with ultra performance liquid chromatography. J Pharm Sci. 2010 Nov 99(11): 4746-52. Wang X, et al.

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  • 新型 6545 Q-TOF 将软件与硬件的创新进行了有机结合,使仪器质量、仪器稳定性及其整体性能均得到了显著提高。无论从事药物研究、食品安全分析、法医/毒理学研究、环境分析,还是代谢组学或脂质组学研究,全新 6545 Q-TOF 的独特设计都可以让您的 MS 分析更快速、更简单及更高效。主要特点:- 使用快速启动方法快速启动和运行,该方法包括用于完整蛋白质和多肽分析工作流程的 Agilent AdvanceBio LC 色谱柱。- 通过采用 MassHunter BioConfirm 软件的自动化数据工作流程表征主要和次要完整蛋白变异。- 利用 SWARM 自动调谐功能,根据需要调整仪器,确保在无需手动调整的情况下获得高性能。全新大分子设置可为完整糖基化单克隆抗体提供低至亚纳克级的检测限。- 针对糖基化完整蛋白,确保您的结果质量数准确度不超出 10 ppm 范围。- 使用强大的新型迭代 MS / MS 功能深入分析您的消化样品。- 采用经过测试的系统,即使执行数千次蛋白质进样也不会引起性能降低,大大延长正常运行时间。- 无需放空即可清洁入口光学组件,大大缩短维护延迟时间。食品安全及环境:全离子 MS/MS 技术对于检测食品、血浆、尿液等复杂基质中的数百种分析物,靶向 MS/MS 或自动MS/MS 对这些基质的分析存在局限性,直观得分系统可以轻松地在 MassHunter 定性分析软件中查看每个化合物的碎片离子谱库匹配和母离子与子离子的色谱共流出情况。MassHunter 定量分析软件中简化 MassHunter定性/定量分析方法用于批量分析,用户只需输入校准浓度,即可在一个批次中分析数百种农药。此外,实验结果证明,系统能够对复杂基质中浓度低于或等于法规规定最大残留限量 (MRL) 的多数农药和农药代谢物进行检测。脂质组学:1500 多种脂质得以鉴定,包括鞘脂类、磷脂类、甘油酯类、固醇和固醇酯类、多聚异戊二烯醇和多聚异戊二烯醇酯类,以及脂肪酸类。还揭示了一些烟草特异性脂质的性质。代谢流分析:采用 Agilent MassHunter VistaFlux 工作流程,在肿瘤细胞中以 U-13C-Gln作为代谢示踪物进行定性代谢流分析,展示示踪物进入经典三羧酸循环通路中的结果。与手动数据挖掘相比,为稳定同位素示踪数据处理提供了全面、自动化且快捷的框架,其中包括同位素体提取和定性代谢流文件数据的通路可视化。常规肽谱分析:NIST mAb 中多肽的提取化合物色谱图(ECC)。在较短的梯度时间 (15 min) 下获得了出色的色谱分离度。NIST mAb轻链和重链上每个已识别的多肽用其相应的序列编号进行标记。例如下图中,天然多肽(母离子位于m/z = 631.6385 处,+3)和 Met 氧化多肽(母离子位于 m/z = 636.9698 处,+3)的 MS/MS 谱图对比结果。b4–b7 碎片离子(绿框)的主要差异 (+15.99 Da)明确区分了天然形式和修饰形式,并指出了轻链中 Met-4 是氧化的位。单克隆抗体分析:完整 NIST mAb 分析(进样量 0.5 _g)完整 NIST mAb 的质谱解卷积结果(进样量 0.5 _g)完整单抗分析(创新药与生物仿制药)(进样量 0.5 _g)
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  • 在线实验到生产型脂质体挤出器可用于制备批量在10mL-5000mL 脂质体,脂质体粒径50-200nm之间. 可以配合手工泵,电动泵, 高压均质机,气泵后使用,使用压力从1500-5000psi。 可以制备阿霉素,紫杉醇,两性霉素B,多柔比星,柔红霉素,阿糖胞苷,长春新碱,顺铂,硝酸益康唑 脂质体生产。清洗方便容易灭菌,符合GMP和FDA制药厂规范。在线脂质体挤出器产品特点:  1 卫生级别:物料接触材料是经FDA&GMP认可的316L不锈钢。  2 处理样品量:脂质体样品处理量10ml-10000ml,生产型脂质体制备处理量 10L, 20L, 50L, 100L。样品处理量可低至10ml。  3 工作压力: 1,500-5,000PSI(100-345Bar)。  4 温度控制:带夹套可外接冷却液控制样品温度在合适范围。  5 兼容性:在线式可配接均质机或高压泵使用。  6 可选滤膜:孔径为50nm, 80nm, 100nm, 200nm, 400nm, 800nm。  7 适制样品:可以制备阿霉素,紫杉醇,两性霉素B,多柔比星,柔红霉素,阿糖胞苷,长春新碱,顺铂,硝酸益康唑 脂质体生产。优点:  采用微米打孔挤出膜支撑板(肉眼可见规则的孔),无金属颗粒,适合药物生产  使用时仅需要安装1片聚碳酸酯膜,无需另外安装Drain Disc 或者 Filter Support,操作更简便,长期使用可节约一大笔买辅助膜的资金  气瓶动力源,无需手动来回推挤,相比手动挤出器具有更高广的样品处理体积范围型号参数:型号在线挤出器5mL/min在线挤出器.05L/min在线挤出器0.4L/min在线挤出器1L/min在线挤出器4L/min压力0-5,000psi0-5,000psi0-5,000psi0-5,000psi0-5,000psi容量2-50mL10-200mL0.2L-2L1L-10L2L-40L尺寸10cm × 10cm × 8cm (1kg) - 45cm × 40cm × 30cm (90kg)特点压力流量自由调节, 卫生级不锈钢, 控温夹层控制, 接压缩气体, 安全阀, 多种接口选配接高压泵, 接均质机, 2-8个脂质体挤出器并联
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  • Genizer系列在线脂质体挤出器可用于制备批量在10mL-5000mL 脂质体,脂质体粒径50-200nm之间. 可以配合手工泵,电动泵, 高压均质机,气泵后使用,使用压力从1500-5000psi。 可以制备阿霉素,紫杉醇,两性霉素B,多柔比星,柔红霉素,阿糖胞苷,长春新碱,顺铂,益康唑 脂质体生产。清洗方便容易灭菌,符合GMP和FDA制药厂规范。Genizer系列在线脂质体挤出器 产品特点:1 卫生级别:物料接触材料是经FDA&GMP认可的316L不锈钢。2 处理样品量:脂质体样品处理量10ml-10000ml,生产型脂质体制备处理量 10L, 20L, 50L, 100L。样品处理量可低至10ml。3 工作压力: 1,500-5,000PSI(100-345Bar)。4 温度控制:带夹套可外接冷却液控制样品温度在合适范围。5 兼容性:在线式可配接均质机或高压泵使用。6 可选滤膜:孔径为50nm, 80nm, 100nm, 200nm, 400nm, 800nm。7 适制样品:可以制备阿霉素,紫杉醇,两性霉素B,多柔比星,柔红霉素,阿糖胞苷,长春新碱,顺铂,益康唑 脂质体生产。Genizer系列在线脂质体挤出器 优点:采用微米打孔挤出膜支撑板(肉眼可见规则的孔),无金属颗粒,适合药物生产使用时仅需要安装1片聚碳酸酯膜,无需另外安装Drain Disc 或者 Filter Support,操作更简便,长期使用可节约一大笔买辅助膜的资金气瓶动力源,无需手动来回推挤,相比手动挤出器具有更高广的样品处理体积范围Genizer系列在线脂质体挤出器型号参数:型号GOE-5mL/minGOE-50mL/min0.4L/minGOE-1L/minGOE-4L/min压力0-5,000psi0-5,000psi0-5,000psi0-5,000psi0-5,000psi容量2-50mL10-200mL0.2L-2L1L-10L2L-40L尺寸10cm × 10cm × 8cm (1kg) - 45cm × 40cm × 30cm (90kg)特点压力流量自由调节, 卫生级不锈钢, 控温夹层控制, 接压缩气体, 安全阀, 多种接口选配接高压泵, 接均质机, 2-8个脂质体挤出器并联
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木糖基紫杉醇相关的耗材

  • 紫杉醇Silicycle正相硅胶
    北京绿百草科技专业提供分离紫杉醇Silicycle正相硅胶。紫杉醇(Paclitaxel)是从紫衫的树皮中提出的一种化合物,Silicycle正相硅胶适合分离紫杉醇,货号为R12030B,粒径40-63&mu m,孔径60Å 。绿百草科技现货供应Silicycle正相硅胶填料。
  • 液相色谱柱 SUPELCOSIL LC-F( 紫杉醇的专用分析柱)
    液相色谱柱 SUPELCOSIL LC-F( 紫杉醇的专用分析柱)货号59158 产品描述 SUPELCOSIL LC-F 色谱柱键合有五氟苯基官能团/封尾。对卤代化合物、酯类、酮类、碱和紫杉烷类包括紫杉醇的分离,该色谱柱具有与传统反相色谱柱不同的特殊选择性。 应用特点 紫杉醇的专用分析柱 型号规格 250*4.6mm,5&mu m
  • 五氟苯基柱,紫杉醇分析专用色谱柱
    用氟原子取代反相固定相碳链上的氢原子,含氟固定相除了对含氟和含卤素化合物有较高的选择性外,也可作为普通的反相固定相使用,用于分离不含氟或卤素的化合物,提供与C-H烷基固定相不同的选择性。在生物制药、天然产物和环境分析中近年来应用广泛。 氟代固定相比烷基固定相有更强的离子交换和极性作用的分离特性,对一些极性的代谢产物有很好选择性。另外含氟固定相有很强的几何尺寸和立体形状选择性,能分离一些结构相似、用烷基固定相很难分离的物质。 用于含氟化合物以及紫杉醇类的天然产物的分离,由于苯环的存在,和其它氟烷基固定相不同,PFP对芳香族化合物也有很高的选择性。

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