内容摘要:根据光吸收定律,在理论上,吸光度对溶液浓度作图所得的直线的截距为零,斜率为£6。实际上吸光度与浓度关系有时是非线性的,或者不通过零点,这种现象称为偏离光吸收.如果溶液的实际吸光度比理论值大,则为正偏离吸收定律;吸光度比理论值小,为负偏离吸收定律。1.物质的吸收光谱曲线物质的吸收光谱曲线是通过实验获得的,具体方法是:将不同波长的光依次通过某一固定浓度和厚度的有色溶液,分别测出它们对各种波长光的吸收程度(用吸光度A表示),以波长为横坐标,以吸光度为纵坐标作图,画出曲线,此曲线即称为该物质的光吸收曲线(或吸收光谱曲线),它描述了物质对不同波长光的吸收程度。图2—21所示为三种不同浓度的 KMnOt溶液的三条光吸收曲线。由图中可以看出:①高锰酸钾溶液对不同波长的光的吸收程度是不同的,对波长为525nm的绿色光吸收最多,在吸收曲线上有一高峰(称为吸收峰)。光吸收程度最大处的波长称为最大吸收波长(常以Amax表示)。在进行光度测定时,通常都是选取在A。。。的波长处来测量,因为这时可得到最大的灵敏度。②不同浓度的高锰酸钾溶液,其吸收曲线的形状相似,最大吸收波长也一样。所不同的是吸收峰峰高随浓度的增加而增高。③不同物质的吸收曲线,其形状和最大吸收波长各不相同。因此,可利用吸收曲线来作为物质定性分析的依据。2.光吸收定律(1)朗伯一比尔定律朗伯定律:当一束平行的单色光垂直照射到一定浓度的均匀透明溶液时,入射光被溶液吸收的程度与溶液厚度的关系为式中,志为另一比例常数,它与入射光波长、液层厚度、溶液性质和温度有关;c为溶液浓度。这就是比尔(Beel’)定律。比尔定律表明;当溶液液层厚度和入射光通量一定时,光吸收的程度与溶液浓度成正比。必须指出的是:比尔定律只能在一定浓度范围内才适用。因为浓度过低或过高时,溶质会发生电离或聚合而产生误差。光吸收定律(朗伯一比尔定律):当溶液厚度和浓度都可改变时,这时就要考虑两者同时对透射光通量的影响,与入射光的波长、物质的性质和溶液的温度等因素有关。这就是朗伯一比尔定律,即光吸收定律。它是紫外一可见分光光度法进行定量分析的理论基础。光吸收定律表明:当一束平行单色光垂直入射通过均匀、透明的吸光物质的稀溶液时,溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。光吸收定律应用的条件:一是必须使用单色光;二是吸收发生在均匀的介质中;三是吸收过程中,吸收物质互相不发生作用。(2)吸光系数K称为吸光系数,其物理意义是:单位浓度的溶液液层厚度为1cm时,在一定波长下测得的吸光度。K值的大小取决于吸光物质的性质、入射光波长、溶液温度和溶剂性质等,与溶液浓度大小和液层厚度无关。但K值大小因溶液浓度所采用的单位不同而异。①摩尔吸光系数e。当溶液的浓度以物质的量浓度(mol/L)表示,液层厚度以厘米(cm)表示时,相应的比例常数K称为摩尔吸光系数。以e表示,其单位为L/(m01.cm)。这样,可以改写成A—abe’.摩尔吸光系数的物理意义是:浓度为ltool/L的溶液,于厚度为1cm的吸收池中,在一定波长下测得的吸光度。摩尔吸光系数是吸光物质的重要参数之一,它表示物质对某一特定波长光的吸收能力。e愈大,表示该物质对某波长光的吸收能力愈强,测定的灵敏度也就愈高。因此,测定时,为了提高分析的灵敏度,通常选择摩尔吸光系数大的有色化合物进行测定,选择具有最大e值的波长作入射光。一般认为s6×10。L/(。mol·cm)属高灵敏度。摩尔吸光系数由实验测得。在实际测量中,不能直接取1mol/L这样高浓度的溶液去测量摩尔吸光系数,只能在稀溶液中测量后,换算成摩尔吸光系数。已知含Fe。+浓度为500tzg/L溶液用KCNS显色,在波长480nm处用2cm吸收池测得A—O.197,计算摩尔吸光系数。②质量吸光系数。质量吸光系数适用于摩尔质量未知的化合物。若溶液浓度以质量浓度p(g/L)表示,液层厚度以厘米(cm)表示,相应的吸光度则为质量吸光度,以n表示,其单位为L/(g·cm)。这样可表示为A—n(3)吸光度的加和性在多组分体系中,在某一波长下,如果各种对光有吸收的物质之间没有相互作用,则体系在该波长处的总吸光度等于各组分吸光度的和,即吸光度具有加和性,称为吸光度加和性原理。各吸光度的下标表示组分1,2,…,n。吸光度的加和性对多组分同时定量测定、校正干扰等都极为有用。(4)影响吸收定律的主要因素根据光吸收定律,在理论上,吸光度对溶液浓度作图所得的直线的截距为零,斜率为£6。实际上吸光度与浓度关系有时是非线性的,或者不通过零点,这种现象称为偏离光吸收.如果溶液的实际吸光度比理论值大,则为正偏离吸收定律;吸光度比理论值小,为负偏离吸收定律。引起偏离光吸收定律的原因主要有下面几方面。①入射光非单色性引起偏离。吸收定律成立的前提是:入射光是单色光。但实际上,一般单色器所提供的入射光并非是纯单色光,而是由波长范围较窄的光带组成的复合光。而物质对不同波长光的吸收程度不同(即吸光系数不同),因而导致了对吸光定律的偏离.入射光中不同波长的摩尔吸光系数差别愈大,偏离光吸收定律就愈严重。实验证明,只要所选的入射光,其所含的波长范围在被测溶液的吸收曲线较平坦的部分,偏离程度就要小。②溶液的化学因素引起偏离。溶液中的吸光物质因离解、缔合,形成新的化合物而改变了吸光物质的浓度,导致偏离吸收定律。因此,测量前的化学预处理工作是十分重要的,如控制好显色反应条件,控制溶液的化学平衡等,以防止产生偏离。③比尔定律的局限性引起偏离。严格说,比尔定律是一个有限定律,它只适用浓度小于O.01 mol/I。的稀溶液。因为浓度高时,吸光粒子问平均距离减小,以致每个粒子都会影响其邻近粒子的电荷分布。这种相互作用使它们的摩尔吸光系数e发生改变,因而导致偏离比。尔定律。为此,在实际工作中,待测溶液的浓度应控制在0.01 mol/L以下。
HG/T 3569-2001_成色剂光吸收的测定[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=83742]HG/T 3569-2001_成色剂光吸收的测定[/url]
求助氨苄西林红外光吸收图谱鉴别 标准规定:红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。1、样品和对照怎么做前处理?
尿常规干化学试纸条与尿液发生颜色反应后,每项物质(胆红素,白细胞。。。。。)它们可见光吸收曲线怎么找呢???
我想知道一下水(冰)对于红外波长的光吸收系数,选择的波长要使其在冰中的吸收系数和水中的吸收系数不同,忘好心人提供点资料,不胜感激!谢谢!
我主要想知道一下在什么波长的范围内,水(冰)对于红外的光吸收系数有显著区别,望好心人提供点这方面的资料,特别是冰对于红外的吸收情况,不胜感激,谢谢!
看文献中将PET溶解后旋涂在石英载玻片上得到PET薄膜,然后在紫外可见分光光度计上测量薄膜的紫外可见光吸收光谱。后面这一步从载玻片上的膜得到吸收光谱就木有详细解释了,不知道这种几十微米的薄膜如何用普通的分光光度计测量吸收光谱?我也看到很多公司的仪器介绍说有什么支架的,但是还是不是很清楚。这里牛人比较多。请问谁做过薄膜的紫外可见光吸收光谱呢?还请点拨一二。初来论坛,多多指教~
非道路柴油移动机械排气烟度限值及测量方法》(GB 36886-2018)不透光烟度计测定法,仪器显示光吸收系数就是最终检测结果吗?是不是要计算呢?排气限值执行几类标准呢?
新手第一次发帖求助,谢谢各位帮忙[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/06/200606091005_19871_1659951_3.jpg[/img]上图是聚氨酯薄膜本体紫外-可见光吸收,可不知为什么没有吸收峰,只是在313nm处就直接降到了0, 不知道是什么原因啊?膜太厚?仪器出问题?[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/06/200606090955_19869_1659951_3.jpg[/img]上图是聚氨酯的四氢呋喃溶液做的紫外-可见光吸收谱,参比是四氢呋喃,但不知为什么280nm以下吸收峰很乱?上面两图是同一仪器做的,是不是仪器有问题了啊,作出来的谱线太差了。自己是新手,第一次做紫外,还请大家帮忙,谢谢了~
薄膜样品如何测紫外可见光吸收光谱?直接测量就可以吗?好像看文献都是把薄膜样品刮下来,溶解在溶液里然后再测,是不是这样?另外看到紫外吸收光谱图,横坐标为wavelength/nm是波长,纵坐标是Reflectance /a.u.作何解呢?单位是什么?本人对分析化学实在不是很懂,忘大侠们指教,多谢!
(刚才发过该帖了,奇怪的是竟然进不去帖了)我想寻找一种溶液可见光吸收峰在450nm的化合物,用来校正酶标仪吸光度测试的准确性,该化合物应是性质稳定、无毒害、摩尔吸光系数较大。请大侠指教!谢谢!
[size=3][font=宋体] 《计量与测试技术》今年第七期,发表了《浅议全自动洗板机的校准方法》一文。全自动洗板机的性能指标有[/font][font=Times New Roman]6[/font][font=宋体]项:[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体]、重复性:清洗后酶标板质量相对标准偏差[/font][font=宋体]δ[/font][sub][font=Times New Roman]c[/font][/sub][font=宋体]<[/font][font=Times New Roman]1%[/font][font=宋体];[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体]、最大残余量:清洗后酶标板平均每孔最大残余量应[/font][font=宋体]<2μL;3、最大浸泡时间:最大浸泡时间≥1000s;4、孔间加液量CV:在每孔分配量为350μL下,变异系数<2%;5、耐压:洗板机冲洗瓶、清洗瓶应能耐受20kPa正压力,废液瓶应能耐受20kPa负压力,持续时间1min,应无变形或破裂;6、密闭性:洗板机管路密性应良好,在清洗和吸液管路中通入20kPa气压,持续1min应无泄漏现象。[/font][/size][size=3][font=宋体] 据JJF1001-1998《通用计量术语及定义》可知:校准是在规定条件下,为确定测量仪器或测量系统所指示的量值,或实物量具或参考物质所代表的量值,与对应的由标准所复现的量值之间关系的一组操作。显然[/font][font=宋体]全自动洗板机既不是[/font][font=宋体]测量仪器,也不是测量系统,更不是实物量具或参考物质,自然无校准可言,可见该文欠妥。实际上文中所述应该说是针对产品的测试、检测或检验。版友们说对吗?[/font][/size]
如何判断物质是否有荧光吸收,在HPLC检测下出峰或者不出峰?
洗板机选购应注意以下几个方面: 1. 关键指标:残留量≤2uL/孔。这是洗板机的一个关键指标,残留量大的洗板机其洗板效果相对较差。目前大多数洗板机的残留量为≤5uL,设计良好的洗板机可达≤2uL。
这款[url=http://www.f-lab.cn/microplate-readers/ut-3900.html][b]自动96针洗板机[/b][/url]UT-3900采用雷杜Rayto洗板机技术设计制造的96针[b]自动洗板机和96针酶标洗板机,[/b]具有高达96路歧管多通道酶标板清洗功能和较低的[b]96针洗板机价格。自动96针洗板机UT-3900特点[/b]高达96路歧管,自动和手段定位多个通道,3个通道用于清洗,1个用于冲洗,1个用于废液具有摇板功能,时间和速度可调超大LCD屏显示,操作界面用户友好可清洗各种类型的酶标板,包括U型底,V型底和平底板和长条超大内存,可编程100个清洗程序命令液体水位探测和报警功能方便维护[img=自动96针洗板机]http://www.f-lab.cn/Upload/UT-3900.jpg[/img]自动96针洗板机:[url]http://www.f-lab.cn/microplate-readers/ut-3900.html[/url][b][b]自动96针洗板机[/b]UT-3900参数[/b]酶标板:96孔或长条残留量:1μL清洗量:50~3000μL/well, 10/50连续可调清洗循环:最大99次循环长条清洗: 1-8个长条编程清洗浸泡时间:0-24小时摇晃时间:0-24小时显示:大LCD屏清洗通道: 5通道瓶,1个或3个(可选)用于清洗,1个用于清水,1个用于废水清洗瓶容积:2L/屏内存:100个清洗程序接口:RS232接口电源:AC110/220V, 50-60Hz重量:23.8Kg尺寸:L610x W460xH240mm
色相,液相和普通的原子和荧光吸收光谱仪有什么区别呀?是什么关系呀 》不懂呀 ![em53] 请懂者回复 谢谢[em62]
求购酶标仪、洗板机及爱滋病初筛实验室相关设备。
制备了一种镀金属的碳纤维布,对方要求给出该材料的日光吸收率,请教各位如何测定它的日光吸收率?用什么仪器测?
【题名】:一种基于紫外—可见光吸收光谱的COD在线监测方法【期刊】:【年、卷、期、起止页码】:【全文链接】:https://t.cnki.net/kcms/detail?v=kxaUMs6x7-4I2jr5WTdXti3zQ9F92xu0jPYZ-6FemR80TpIUx9Y4vpRh2vkVskFh1PV5ClLEPJEf0KYBVfy9JBKrm74m79Y-&uniplatform=NZKPT
如题!跪求:亚铁离子、铁离子、碳酸根离子、碳酸氢根离子、钙镁离子的可见光吸收波长数据!可以其他资料交换zhiweihao@yahoo.cn或83585676有了解相关信息的万望回帖!不胜感谢!
洗板机有一根吸管不出液是什么原因
专家,你好!伯乐1575洗板机不储存修改的洗板程序怎么办?(新建的也不储存)。
昨天在一疾控中心检定酶标仪时,用户还要求我们检配套的洗板机。我想洗板机应该不是计量器具,不存在检定的问题,也没有洗板机的规程吧?如果要检也只能是由产品质检机构,依据其国家的产品标准进行检验吧?
请问,哪个厂家生产5000元左右的洗板机.谢谢!
处理量不大,手洗太累,进口的又太贵,请大家帮忙推荐一款国产洗板机
请问各位专家,如何调节洗板机的洗板头的高低,太低我怕碰到酶标板的底部,还有就是:asp.vert.pos和bot.vert.pos是什么意思?谢谢大家!!!
最近站里新买一台MK3酶标仪,同时还买了洗板机,我觉得没必要两者要配套使用,觉得洗板机虽然有一定好处,但也易造成污染,请教一下,两者是必须配置吗
[color=#444444]请问哪位大虾有伯乐1757洗板机的中文说明书可以分享阿,或者告诉我怎么保存程序也可以阿,我每次设的程序都无法调出,很头痛啊。多谢多谢![/color]
洗板机的作用,可以把液体分配到微孔板中。移液和分液系统同样有此功能。二者的差别是什么呢?谢谢
哪位高手有洗板机的自校准方法,给我发一份。谢谢!