液相子交换柱

在离子交换色谱中，抑制柱有什么作用，抑制柱可以做为液相色谱的一种柱子吗，新人很不明白，求解。

今天我们聊一款常用于异构体分析的色谱柱-离子交换色谱柱，如果大家在实际使用过程中有遇到，可以参考。在高效液相色谱（HPLC）中，离子交换色谱柱（IEC）是一种基于离子交换原理的色谱技术，用于分离和纯化带电分子（离子）。这种色谱柱的固定相是离子交换剂，它可以是天然的或合成的高分子聚合物，其表面含有可以进行可逆离子交换的离子交换基团。 01.离子交换色谱柱的组成 1）色谱柱管： 色谱柱管通常是由不锈钢制成管状结构，用于容纳填料。 2）填料： a. 阳离子交换柱填料：固定相含有带负电荷的离子交换基团（如磺酸基-SO3-），能够吸引并交换溶液中的阳离子（如Na+、NH4+、K+等）。 b. 阴离子交换柱填料：固定相含有带正电荷的离子交换基团（如季铵盐-N+(CH3)3），能够吸引并交换溶液中的阴离子（如Cl-、SO42-、PO43-等）。 02.离子交换色谱柱的分离机制 1）样品加载：待分离的离子样品被加载到色谱柱上。 2）交换作用：样品中的离子根据其与固定相离子交换基团的亲和力被保留在柱上。 3）洗脱：通过改变流动相的组成（如离子强度、pH值）或使用梯度洗脱，逐渐减少离子与固定相之间的相互作用，使离子逐个或一群一群地从柱上洗脱。 4）检测与收集：洗脱的离子通过检测器进行检测，并根据需要收集。整个过程与离子色谱法的洗脱过程基本一致，可以参见高效[color=#3333ff]液相色谱|离子交换色谱法的小知识。 03.离子交换色谱柱使用的注意事项 1）使用前： a. 检查色谱柱包装和标签：确保色谱柱没有物理损伤，确认色谱柱的规格和填料类型符合实验需求。 b. 阅读说明书：仔细阅读色谱柱的使用说明书，了解色谱柱的pH稳定性范围、最大操作压力等参数。 c. 系统冲洗：需用适当的溶剂冲洗色谱柱，如甲醇或乙腈，以去除保存液和可能的杂质。 d. 色谱柱平衡：柱子需要用流动相平衡，至少20倍柱体积，直到基线稳定。 2）使用中： a. 流动相选择：确保流动相与色谱柱的兼容性，避免使用会损坏色谱柱固定相的溶剂；控制流动相的pH值，通常在2-8之间，以防止固定相水解或分解；流动相应新鲜配制，并使用0.45μm或更小孔径的滤膜过滤以去除颗粒物。 b. 样品溶解性：样品应溶解在流动相或极性相近的溶剂中；如果样品较杂，应过滤，以去除可能堵塞色谱柱的颗粒物；避免样品中存在强氧化剂或还原剂，这些物质可能会损坏色谱柱。 c. 色谱柱的平衡：在开始新的分析之前，应让色谱柱用流动相充分平衡，以确保重现性；如果更换流动相，应适当冲洗色谱柱以去除旧流动相。 d. 色谱柱的温度：避免色谱柱暴露在极端温度下，通常使用温度应低于60℃；温度的突然变化可能会导致色谱柱性能下降。 e. 色谱柱的压力：避免超过色谱柱的最大使用压力，通常不超过15MPa。3）使用后： a. 柱子清洗：分析完成后，使用使用适当的溶剂清洗色谱柱，以去除积累的污染物。对于强保留污染物，可能需要使用更强的溶剂或方法进行再生。 b. 柱子保存：长时间不使用时，应将色谱柱储存在推荐的溶剂中，通常是甲醇、乙腈或水。储存时确保色谱柱的两端密封，避免溶剂蒸发或污染物进入。 c. 记录使用情况：记录色谱柱的使用情况，包括分析的样品、使用条件和色谱柱表现，以便于追踪柱效和寿命。 04.离子色谱柱使用的局限性 1）方法限制性：离子色谱主要用于分析带电的离子，对于非离子物质的分离和检测则需要将其转化为带电的离子后才能进行分析，这增加了实验的复杂性和时间成本。 2）样品前处理要求高：对于某些低浓度的离子物质，需要进行样品前处理以提高灵敏度，如预浓缩、前处理和盐排除等步骤，这些步骤增加了实验的时间和操作难度。 3）有害废物的产生：离子色谱中使用的柱和溶液可能含有对环境有害的物质，如柱中的有机溶剂和一些离子交换剂，可能在使用过程中产生有害废物。 4）对离子交换柱的要求高：离子色谱中使用的离子交换柱需要具有较高的选择性和稳定性，才能有效地分离和检测离子。然而，柱的选择和使用也面临一定的限制，例如有些离子难以从柱中洗脱，导致柱的寿命减短。 5）成本问题：离子色谱设备相对较昂贵，而且色谱柱的成本较高。此外，一些离子色谱方法还需要使用昂贵的标准品进行定量分析，增加了实验的成本。 6）柱效限制：离子色谱柱的柱效通常低于高效液相色谱柱。 https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/10/202410091604011261_5045_3203140_3.png!w490x14.jpg 总结一下：离子交换色谱柱（IEC）是高效液相色谱（HPLC）中的一种重要工具，专门用于分析和纯化蛋白质、多肽、核酸以及其他带电分子，包括异构体的分析。这种色谱柱的固定相是带有离子交换基团的树脂，能够与样品中的离子发生交换作用。使用时，需要注意色谱柱的兼容性、pH稳定性、最大操作压力等，使用前后都需要适当地冲洗和平衡，以保持柱的性能。不过，IEC也有局限性，比如它主要用于离子分析，对非离子物质就不太适用，而且可能需要复杂的样品前处理，成本也相对较高。所以，虽然IEC在分离离子方面很有用，但使用时还得考虑到这些因素。

问题: 阴离子交换柱子咋保存有知道的不回复: 我看到有人用纯甲醇保存安捷伦的强阴离子柱，都一个月用四五回一根柱子用了两年多还好大家都怎么保存的～

钙型强酸性阳离子交换树脂为填充剂的色谱柱如何清洗和维护?液相色谱流动相是超纯水

[b]高效液相色谱柱的管理[/b]摘 要:介绍了影响色谱柱使用寿命的几个因素,探讨了色谱柱规范化管理和保养的经验。关键词:高效液相色谱 柱 管理 保养 高效液相色谱法是20世纪70年代急剧发展起来的一项高效、快速的分离、分析技术。液相色谱法是指流动相为液相的色谱技术,在经典的液相色谱法基础上,引入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法理论,在技术上采用高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器,实现了分析速度快、分析效率高和操作自动化,它具有高压、高速、高效、高灵敏度等特点。它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂,缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后依次进入检测器,色谱信号由记录仪、积分仪或色谱工作站记录。高效色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。因此,有必要加强和规范色谱柱的管理,从而延长色谱柱的使用寿命。本文从影响色谱柱使用寿命的几个因素出发,从管理的角度,探讨色谱柱的维护与保养。1 色谱柱的类型常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶、离子交换树脂、凝胶或玻璃微球等填充剂。在化学键合硅胶中以十六烷基硅烷键合硅胶最常用,辛基硅烷键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用。近年来,由于蛋白质等生物大分子物质分离提纯技术的飞速发展,离子交换色谱柱、凝胶色谱柱的应用也越来越广。2 影响色谱柱使用寿命的因素2.1 流动相在以水溶液为流动相时,水溶液中的微生物例如细菌容易生长,当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些霉菌可能在色谱柱中滋生,堵塞固定相颗粒间的空隙。由于湿法填充技术的问世,目前普遍使用的色谱柱填料直径一般都小于10um,流动相中的颗粒杂质很容易先沉积在柱头然后慢慢堵塞柱子。流动相的pH值对色谱柱也有影响,特别是对化学键合硅胶填料,水溶液的pH最适范围在2~7.5之间,当pH8时,硅胶会释出生成絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。当在缓冲液中加入有机溶剂例如甲醇或乙腈时,盐类的溶解度下降,会析出盐沉淀,堵塞柱子。同时流动相中的有机溶剂和盐会腐蚀色谱柱头的筛板,产生柱头凹陷。流动相的极性对柱子也有一定影响,对于硅胶柱,甲醇、水、冰乙酸等极性较大物质会破坏填料,反之,对于化学键合硅胶,极性小的物质如正丁醇、二氯甲烷等也起同样的作用。碱性溶液会破坏阳离子交换树脂色谱柱,而酸性溶液容易损坏阴离子交换树脂柱。

离子交换色谱法（Ion Exchange Chromatography，简称IEC）是一种基于离子交换原理的分离技术，广泛应用于生物大分子如蛋白质、核酸以及小分子如氨基酸和离子的分离纯化过程。其核心原理是利用固定相离子交换剂上的电荷基团与流动相中的离子进行可逆的离子交换，实现样品中不同组分的分离 。在离子交换色谱中，固定相通常是带有电荷的树脂或纤维素，这些基质通过化学反应引入了电荷基团，形成阳离子或阴离子交换剂。阳离子交换剂带有负电荷，用于吸附带正电的离子；而阴离子交换剂带有正电荷，用于吸附带负电的离子 。离子交换剂可以分为强离子交换剂和弱离子交换剂，它们的电荷基团具有不同的解离常数，影响着离子的交换能力 。流动相是IEC中的另一个关键要素，它通常为含盐的缓冲水溶液，可以通过改变其离子强度、pH值或组成来调节样品组分的保留行为。例如，增加流动相的离子强度可以增强与样品离子争夺离子交换官能团的能力，减弱样品组分与离子交换树脂的亲和性，从而实现洗脱 。 01.离子交换色谱分离的原理是什么？ 答：离子交换色谱的分离原理是利用带有相反电荷的离子交换剂作为固定相，与样品中的离子通过电荷相互作用发生可逆的离子交换，通过改变流动相的离子强度或pH值调节样品组分与离子交换剂之间的结合力，实现不同电荷特性的样品组分在色谱柱中的选择性分离。 02.离子交换色谱分离的过程是什么？ 答：1）平衡（Equilibration）： 在色谱分析开始之前，色谱柱需要在特定的缓冲溶液中达到平衡状态，以确保色谱柱上的离子交换剂具有一致的电荷状态。 平衡通常使用与流动相相同或相似的缓冲液进行，直到色谱图基线稳定，表明色谱柱已达到所需状态。 如： 阳离子交换剂带有负电荷（如磺酸基团 -SO3^-），吸附带正电的离子。 阴离子交换剂带有正电荷（如季胺基团 -NH3^+），吸附带负电的离子。 2）样品加载与冲洗（Sample Loading and Washing）： 样品在平衡后的色谱柱上进行加载，这一步骤需要小心操作，以避免对色谱柱造成物理损伤或过度加载样品。 加载样品后，可能需要使用流动相进行冲洗，以去除未与离子交换剂结合的样品组分，减少对色谱柱的污染。流动相是携带样品通过色谱柱的溶液，通常为含盐的缓冲水溶液。 流动相中的离子可以与固定相上的离子交换剂发生可逆的离子交换反应。 [color=#595959]3）洗脱（Elution）： 当样品溶液进入色谱柱时，样品中的离子根据其电荷性质与固定相上的离子交换剂发生相互作用。 样品中的不同组分根据其与离子交换剂的相互作用强度被逐步洗脱。洗脱可以通过等度洗脱（使用单一浓度的缓冲液）或梯度洗脱（逐渐改变缓冲液的浓度或组成）来实现。 洗脱过程中，通过调整流动相的pH值、离子强度或组成，可以控制样品中各组分的洗脱顺序和分离效率。 4）再生（Regeneration）： 分离完成后，需要对色谱柱进行再生，以去除可能残留在柱上的样品组分，恢复色谱柱的性能。 再生通常使用高浓度的盐溶液或强酸/强碱溶液进行，以去除色谱柱上的所有残留离子，然后使用平衡缓冲液重新平衡色谱柱。 原理动画：https://www.bilibili.com/video/BV1Qw411Z7Re/?vd_source=55086ed2640f93c14350844eeb8bd5f5 03.常见的离子交换色谱柱有哪些？ 答：强阳离子色谱柱、弱阳离子色谱柱、强阴离子色谱柱和弱阴离子色谱柱 1）强阳离子色谱柱（Strong Cation Exchange, S-CAX）： 使用强酸性离子交换剂，如磺酸基团。 在较宽的pH范围内（通常pH 2-12）保持带负电荷状态。 适用于分离带正电荷的样品，如碱性蛋白质。 2）弱阳离子色谱柱（Weak Cation Exchange, W-CAX）：使用弱酸性离子交换剂，如羧酸基团。电荷状态受pH影响较大，通常在pH 4-7之间带负电荷。适用于分离在特定pH下带正电荷的样品，如蛋白质的电荷异构体。 3）强阴离子色谱柱（Strong Anion Exchange, S-AEX）：使用强碱性离子交换剂，如季胺基团。在较宽的pH范围内（通常pH 1-14）保持带正电荷状态。适用于分离带负电荷的样品，如酸性多糖或某些蛋白质。 4）弱阴离子色谱柱（Weak Anion Exchange, W-AEX）：使用弱碱性离子交换剂，如胺基或酚基官能团。电荷状态受pH影响较大，通常在pH 6-9之间带正电荷。 适用于分离在特定pH下带负电荷的样品，如某些核苷酸和有机酸。 04.那常见的离子交换色谱柱洗脱顺序有什么规律？ 答：1）强阳离子色谱柱（Strong Cation Exchange, S-CAX）： 使用强阳离子交换剂，如磺酸基团，能够在较宽的pH范围内保持带负电状态。在这种色谱柱中，通常首先洗脱的是带正电荷较多的碱性物质，随后是带正电荷较少的中性或酸性物质。具体顺序取决于样品的等电点（pI）和流动相的pH值。 2）弱阳离子色谱柱（Weak Cation Exchange, W-CAX）： 使用弱阳离子交换剂，如羧基官能团，其电荷状态受pH影响较大。在pH值高于其pKa时，交换剂带负电荷，能够保留带正电荷的样品。洗脱顺序通常是由电荷数量和pH值决定的，可能与强阳离子色谱柱有所不同，因为弱阳离子交换剂在pH值低于其pKa时会逐渐失去电荷。 3）强阴离子色谱柱（Strong Anion Exchange, S-AEX）： 使用强阴离子交换剂，如季胺官能团，通常在广泛的pH范围内保持带正电状态。在这种色谱柱中，带负电荷较多的酸性物质会先被洗脱，随后是带负电荷较少的中性或碱性物质。 4）弱阴离子色谱柱（Weak Anion Exchange, W-AEX）：使用弱阴离子交换剂，例如叔胺基官能团，其电荷状态受pH影响较大。在pH值低于其pKa时，交换剂带正电荷，能够保留带负电荷的样品。洗脱顺序通常是由电荷数量和pH值决定的，与强阴离子色谱柱相比，洗脱行为可能因pH的变化而有显著不同。

摘　要:综述了高效液相色谱配体交换色谱手性固定相的发展、制备及其在手性拆分中的应用,讨论了洗速、进样量、中心金属离子及其浓度、流动相pH 值、柱温、有机改性剂等对对映体分离的影响,阐述了对手性识别机理的认识.[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=23983]高效液相色谱手性拆分中的配体交换色谱手性固定相[/url]

我想问下，羧酸型阴离子交换柱到底有没有？我问过很多人，自己也看过书，大概都是说羧酸型交换柱的都是阳离子交换柱，而为什么很多文献上都有使用羧酸型阴离子交换柱，如：鸡蛋样品用0.1mol/LNa2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液溶解,离心后,上层清液用Oasis HLB固相萃取柱和[color=#DC143C]羧酸型阴离子交换柱[/color]净化,用流动相洗脱定容后,用高效液相色谱紫外检测器在355nm测定.所以我现在对这个糊涂了，不知道这两个说的是不是一种柱子？因为急用，所以特来请教大家，谢谢给以帮助，谢谢！

想找几根报废的液相色谱柱，有谁有能送我几根吗？主要是想接在仪器上当阻力柱用冲洗柱子的，有哪位朋友有的能不能送我几根。我可以拿一盒进样瓶和你交换，最主要是为了交个朋友

液相柱子在超高速液相使用有啥影响？

液相色谱柱柱效变差，如何解决，平时柱子使用的时候水的比例比较大，柱子拖尾比较严重，峰不成尖锐型。

[color=#3e3e3e]摘 要:介绍了影响色谱柱使用寿命的几个因素,探讨了色谱柱规范化管理和保养的经验。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　关键词:高效液相色谱 柱 管理 保养[/color][color=#3e3e3e]　　高效液相色谱法是20世纪70年代急剧发展起来的一项高效、快速的分离、分析技术。液相色谱法是指流动相为液相的色谱技术,在经典的液相色谱法基础上,引入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法理论,在技术上采用高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器,实现了分析速度快、分析效率高和操作自动化,它具有高压、高速、高效、高灵敏度等特点。它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂,缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后依次进入检测器,色谱信号由记录仪、积分仪或色谱工作站记录。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　高效色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。因此,有必要加强和规范色谱柱的管理,从而延长[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　色谱柱的使用寿命。本文从影响色谱柱使用寿命的几个因素出发,从管理的角度,探讨色谱柱的维护与保养。[/color][b][color=#3e3e3e]1 色谱柱的类型[/color][/b][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶、离子交换树脂、凝胶或玻璃微球等填充剂。在化学键合硅胶中以十六烷基硅烷键合硅胶最常用,辛基硅烷键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用。近年来,由于蛋白质等生物大分子物质分离提纯技术的飞速发展,离子交换色谱柱、凝胶色谱柱的应用也越来越广。[/color][b][color=#3e3e3e]2 影响色谱柱使用寿命的因素[/color][/b][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2.1 流动相[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　在以水溶液为流动相时,水溶液中的微生物例如细菌容易生长,当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些霉菌可能在色谱柱中滋生,堵塞固定相颗粒间的空隙。由于湿法填充技术的问世,目前普遍使用的色谱柱填料直径一般都小于10um,流动相中的颗粒杂质很容易先沉积在柱头然后慢慢堵塞柱子。流动相的pH值对色谱柱也有影响,特别是对化学键合硅胶填料,水溶液的pH最适范围在2~7.5之间,当pH8时,硅胶会释出生成絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。当在缓冲液中加入有机溶剂例如甲醇或乙腈时,盐类的溶解度下降,会析出盐沉淀,堵塞柱子。同时流动相中的有机溶剂和盐会腐蚀色谱柱头的筛板,产生柱头凹陷。流动相的极性对柱子也有一定影响,对于硅胶柱,甲醇、水、冰乙酸等极性较大物质会破坏填料,反之,对于化学键合硅胶,极性小的物质如正丁醇、二氯甲烷等也起同样的作用。碱性溶液会破坏阳离子交换树脂色谱柱,而酸性溶液容易损坏阴离子交换树脂柱。[/color][color=#3e3e3e]2.2 样品和固定相[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　如果有少量或微量的样品不能够溶解在流动相中,在通过固定相会堵塞柱子。样品中的颗粒杂质也会堵塞柱子。样品组分例如糖、蛋白质等通过柱子时会产生不可逆吸附,这样固定相的活性点被覆盖。样品组分还会与固定相产生反应,尤其是对于氨基柱的影响较为严重,因为氨基易与酐、酮形成希夫(Schiff)缩合而减少活性点,使保留时间缩短。色谱柱键合相基团脱落、固定相分解和活性基团变性以及会影响柱效和保留时间的显著改变。大多数键合相都是通过硅氧硅键(Si-O-Si)连接在硅基质上,形成带有有机基团的固定相Si-O-Si-R(R为CnH2n+1),硅氧硅键可能在水溶液中水解而断裂,使键合基团脱落。[/color][b][color=#3e3e3e]3 高效液相色谱柱的管理[/color][/b][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]3.1 色谱柱的管理[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　制定色谱柱管理的标准操作规程并严格执行。每一根新购进的色谱柱必须造册登记,内容包括:生产公司、品名、型号、规格、购进时间、启用时间、单价、柱内保护溶液等。色谱柱分类存放,硅胶柱、化学键合硅胶柱、氰基或氨基柱、离子交换树脂柱、凝胶柱各用一个色谱柱盒,盒上贴上标签,注明类别。随柱说明书装入密实袋附在登记本上。每启用一根色谱柱,在色谱柱上贴上标签,注明启用日期。每根柱子每两个月保养一次,特别是对于一些使用频率少的柱子,因为放置时间长,容易干柱,每一次做好保养记录。对于确已失效的柱子,做好停用记录,不能随意丢弃,专门存放,如果现用的柱子的填料需要填补,可以用存放的柱子的填料。在从事生产的单位的质检部门,对于使用时间较长柱效降低的柱子,可把它用于检测产品的中间体。[/color][color=#3e3e3e]3.2 色谱柱的保养[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　色谱柱使用一段时间后,常遇到柱子被污染,柱效会有一定程度的下降,采用适当的方法对色谱柱进行保护,可以延长色谱柱的使用寿命。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　样品和流动相的处理:溶解的样品进样前用滤膜过滤,以除去不溶物。如果必要,需进行样品的预处理。流动相中如有不纯物质将影响柱效,所以溶剂尽量使用色谱级别的,至少是分析纯级别,流动相使用前用微孔薄膜过滤。在流动相的输液管前安装过滤器。过滤器定期用甲醇超声清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。对于堵塞严重的过滤器,可在火焰上灼烧后再清洗。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　保护柱(预柱)的使用:对于较昂贵的色谱柱,可以在柱前加一保护柱,防止样品中杂质污染分析柱,对于制备柱,因其进样量大,使用保护柱尤为重要。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　常规处理:硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱每一次用完后用低流速长时间的二氯甲烷或正己烷等溶剂冲洗 键合相硅胶色谱柱、离子交换色谱柱和凝胶色谱柱先用蒸馏水冲洗,再用甲醇冲洗,然后用甲醇与蒸馏水以一定比例混合的溶液冲洗后过夜。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　对于已使用一段时间后柱效下降的色谱柱可按以下方法进行再生。再生处理包括活化(右→左)和净化(左→右)两种。硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱按下列顺序冲洗:三甲基戊烷或己烷←→三氯乙烷←→乙酸乙脂←→丙酮←→乙醇←→水。键合相硅胶柱:蒸馏水←→甲醇(冲洗过程中可加入少量二甲基甲酰胺)。离子交换树脂柱:高浓度的NaCl溶液(1-2molL的NaCl溶液)可使大部分树脂再生,油脂等少数与树脂紧密结合的物质可用低浓度碱溶液(如0.1molL的NaOH溶液)冲洗,酸性有机物吸附在固定相的用低pH缓冲液冲洗,碱性有机物用高pH缓冲液冲洗,然后再用蒸馏水←→甲醇←→二氯甲烷←→甲醇←→蒸馏水冲洗。凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶处理可分解凝胶中剩余的痕量胃蛋白酶,然后再用蒸馏水←→甲醇←→蒸馏水冲洗。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　已污染的色谱柱的处理:因保留强的物质污染,流动相或样品中不溶物沉积于柱头,可用下列方法洗涤:去除脂类可用四氢呋喃、乙腈或甲醇洗涤 去除蛋白质可用乙腈、丙醇和1%三氯乙酸进行梯度洗脱 一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脱,同时反复注入100-200ml的四氢呋喃。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　柱头处理:对于柱头堵塞污染严重的情况而且用溶剂冲洗无效的色谱柱,只有打开柱子去除柱顶的填料重装:先拆下不锈钢烧结过滤器,检查柱床,常见凹陷或受污染的带色填料,剔去不规则床层和带色填料,使柱床显白色并完全水平,再用甲醇作糊状填料匀浆液,将糊状填料匀浆液滴在柱上靠重力从匀浆液中排出甲醇液,重复直到填料水平。[/color][color=#3e3e3e]　　柱子的贮存:首先柱子必须清洗干净后才能贮存,柱子不能贮存在水或水性溶剂中,否则会引起微生物的滋生。极性色谱柱可用适当溶剂如二氯甲烷冲洗 键合相色谱柱用甲醇冲洗 阴离子交换色谱柱用0.002%洗必泰(双氯苯双胍己烷)的缓冲液冲洗,阳离子交换色谱柱用0.005%硫柳汞缓冲液冲洗 凝胶色谱柱用缓冲液中加0.02%叠氮化钠或用20%乙醇冲洗。再将柱子两头密封,以防止溶剂蒸发使柱子干燥而引起柱子结构的几何学改变。[/color]

液相色谱柱的保存1.反相色谱柱每天实验后的保养使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟.注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷.2.长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下.对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上,储存的温度最好是室温.

大家好！我现在使用的是安捷伦1200快速液相，安捷伦zobax c18（4.6X50mm，1.8um)平时10%甲醇-90%水压力240bar都不会漏液，现在只要压力上升到180柱子和预柱之间就漏液断开，请问是什么原因呢

想请教下，普通的液相新柱子，按正常时间活化跟快速活化，对柱子的性能有影响吗？

[color=#444444]在做液相色谱的时候，阴离子交换柱用含有80%的正己烷流动相走了半针，后来用水和甲醇分别冲洗了4个小时。现在柱子还是有问题，柱子应该怎么冲洗，还是柱子已经坏了？[/color]

液相柱子有保护柱，那气相可以有吗？

高效液相柱子进气泡了，冲了一天一夜了，怎么判断还有没有气泡？感觉完蛋了！如果还有，柱子就废掉了吗？连上检测器的时候用100的甲醇基线和柱压都是平的，但改变甲醇比例就会有峰出现，忧伤，请教各位有什么好的办法没有？

在换液相色谱柱子的之前跟之后应注意哪些问题，请高手指点一下，谢谢！

前辈们：液相柱子的一头接口端给拧断了，卡里面了，螺母也拧不下来了，谁知道该怎么办吗？

液相色谱柱的柱效与柱子的内径有关？

1.高效液相色谱柱的维护：我们在使用新的色谱柱应该在我们自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。而且在使用的过程中常常有堵塞的现象，造成这种现象的主要原因是①溶剂中的不溶物②样品中的不溶物③泵进样器等中的不溶物④柱内不溶物的形成等。如果当色谱柱堵塞以后我们可以对色谱柱进行修复，首先，使用含盐缓冲液后(如离子对试剂)应用溶解性强的溶剂(如水)进行冲洗。其次，先断开检测器，然后用对来自样品中的物质有强溶解性的溶剂进行冲洗，对于反相色谱柱，可使用甲醇、乙睛、四氢呋喃、氯仿、庚烷等，在此条件下，应避免溶剂的pH低于2或高于8。最后如果经过上述还是没有修复，色谱柱压力还是没有下降，则要断开检测器，将色谱柱反方向放置，然后检查柱压，若压力稳定下降，则保持色谱柱反方向连接，用低于0.5ml/min流速冲洗一小时。如果压力不下降，则要看内置过滤器是否被堵塞，如果被堵塞应冲洗或更换，若进口端的填料发生堵塞，柱子将不可能被彻底恢复，只能通过去掉进口端的部分填料，重新填充进行有限的柱效恢复。而且修复的厚度是2-5mm　　2.高效液相色谱柱的保养：色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。我们在对色谱柱使用前进行测试以后，我们要根据不同的情况对色谱柱进行保养：①反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。②长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温.　　3高效液相色谱柱的维护与保养在液相色谱仪中的应用：高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术，是现代分离测定的重要手段。问世以来，因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。高效液相色谱柱是消耗品，会随使用时间或进样的次数增加，出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰，柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生，不同的色谱柱清洗方法各不相同比如：　　3.1反相柱分别用甲醇:水=90:10，纯甲醇(HPLC级)，异丙醇(HPLC级)，二氯甲烷(HPLC级)等溶剂作为流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积.然后再以相反的次序冲洗。　　3.2正相柱分别用正己烷(HPLC级)，异丙醇(HPLC级)，二氯甲烷(HPLC级)，甲醇(HPLC级)等溶剂做流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大，可降低流速，避免压力过高).注意使用溶剂的次序不要颠倒，用甲醇冲洗完后，再以相反的次序冲洗至正己烷，所有的流动相必须严格脱水。　　3.3离子交换柱长时间在缓冲溶液中使用和进样，将导致色谱柱离子交换能力下降，用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。

分离酚酸、醇用的HSS T3柱子是超高效液相柱子，可以用于高效液相色谱的仪器吗？

1.高效液相色谱柱的维护：我们在使用新的色谱柱应该在我们自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。而且在使用的过程中常常有堵塞的现象，造成这种现象的主要原因是①溶剂中的不溶物②样品中的不溶物③泵进样器等中的不溶物④柱内不溶物的形成等。如果当色谱柱堵塞以后我们可以对色谱柱进行修复，首先，使用含盐缓冲液后(如离子对试剂)应用溶解性强的溶剂(如水)进行冲洗。其次，先断开检测器，然后用对来自样品中的物质有强溶解性的溶剂进行冲洗，对于反相色谱柱，可使用甲醇、乙睛、四氢呋喃、氯仿、庚烷等，在此条件下，应避免溶剂的pH低于2或高于8。最后如果经过上述还是没有修复，色谱柱压力还是没有下降，则要断开检测器，将色谱柱反方向放置，然后检查柱压，若压力稳定下降，则保持色谱柱反方向连接，用低于0.5ml/min流速冲洗一小时。如果压力不下降，则要看内置过滤器是否被堵塞，如果被堵塞应冲洗或更换，若进口端的填料发生堵塞，柱子将不可能被彻底恢复，只能通过去掉进口端的部分填料，重新填充进行有限的柱效恢复。而且修复的厚度是2-5mm　　2.高效液相色谱柱的保养：色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。我们在对色谱柱使用前进行测试以后，我们要根据不同的情况对色谱柱进行保养：①反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。②长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温.　　3高效液相色谱柱的维护与保养在液相色谱仪中的应用：高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术，是现代分离测定的重要手段。问世以来，因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。高效液相色谱柱是消耗品，会随使用时间或进样的次数增加，出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰，柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生，不同的色谱柱清洗方法各不相同比如：　　3.1反相柱分别用甲醇:水=90:10，纯甲醇(HPLC级)，异丙醇(HPLC级)，二氯甲烷(HPLC级)等溶剂作为流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积.然后再以相反的次序冲洗。　　3.2正相柱分别用正己烷(HPLC级)，异丙醇(HPLC级)，二氯甲烷(HPLC级)，甲醇(HPLC级)等溶剂做流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大，可降低流速，避免压力过高).注意使用溶剂的次序不要颠倒，用甲醇冲洗完后，再以相反的次序冲洗至正己烷，所有的流动相必须严格脱水。　　3.3离子交换柱长时间在缓冲溶液中使用和进样，将导致色谱柱离子交换能力下降，用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。

Kromasil柱Kromasil是瑞典AKZO NOBEL公司生产的高性能硅胶基质液相色谱柱填料品牌。Kromasil是一种高纯度球形硅胶填料，金属杂质含量极低，减少了有些金属螯合物在硅胶基质上的络合作用。Kromasil硅胶的表面由独特的硅羟基基团组成，硅烷的覆盖率高，在较高的或较低的PH条件下不易水解和分解，可在PH=1.5～9.5条件下稳定使用。Kromasil 的含碳量高，表面极性小，分离效能高。通常在分析碱性样品时，与酸性硅羟基反应会产生不利的拖尾现象，而Kromasil化学纯度极高，它的表面由分布独特、相对中生的硅羟基基团组成，并使不需要的酸性硅羟基基团减少到最低，从而使之具有良好的峰对称性种较高的柱效。Hypersil BDSHypersil BDS 类色谱填料是极好的反相柱填料，有很好的耐久性及重现性，应用范围极其广泛。Hypersil BDS 硅胶担体键合前经过专门的碱钝化处理，将残余硅羟基降至极限，这种改善的表面，使得键合后的硅胶具有很高的配位度，大大降低了硅羟基与分析物之间的相互作用，改善了色谱峰形，降低了色谱峰的拖尾程度，提高了峰的对称性。Hypersil BDS填料的特征：l 对碱性化合物有更好的峰型。l 更长的寿命。l 更好的稳定性。l 同碱性化合物一样，酸性和中性化合物也有非常优异的峰值--真正的通用柱填料。紧管常规填料色谱柱具有优异的选择性和较长的色谱柱寿命。且对于简单的两元流动相(如甲醇/水)，当样品为酸性、中性和弱碱性化合物时均可获得较佳的峰不对称度。但当分析药物等样品中的强极性含氮的化合物时，样品峰型就极查，拖尾严重，并导致定量分析精度下降，时常会出现一些小峰埋没于前一拖尾峰的尾巴中，造成该现象的原因是固定相上尚有残余的硅羟基。尽管很多厂家对硅胶表面作了第二次反应，即所谓的“封尾”，以减小残余硅羟基的作用，但往往都不能完全消除残余的硅羟基的影响。Hypersil公司开发的将残余的硅羟基降至极限的Hypersil BDS(Base Deactived Silica,碱纯化硅胶)系列产品，并用现代衍生反应技术生产出特别适用于碱性化合物的真正均一反相填料。Hypersil 300A 填料是基于5um和10um,孔径为300A 的硅胶为基质的HPLC填料适合越来越多的生物大分子分离与分析的需要,现可提供C18 C8 C4 的填料*Hypersil 300A C18　适合亲水性强的分子量大于5000的小肽酶的水解片断及各种天然和合成小肽的分析*Hypersil 300A C4　　适合疏水性的小肽及大分子的多肽分析*Hypersil 300A C8　　选择性介于C18和C4之间适用于亲水性及弱疏水性的小肽和蛋白质酶的水解片断及各种天然和合成小肽的分析。Hypersil ODS填料Hypersil 填料是基于粒度为3um 、5um和10um, 孔径为120A的硅胶为基质的HPLC填料其生产过程的质量控制标准非常严格全世界数千个实验室使用Hypersil色谱柱已长达20多年很多应用实例可以从多种文献及著名杂志上查到。大量的试验测试已经证实Hypersil ODS2填料是替代Waters Spherisorb ODS2的最佳填料无论是在酸性还是碱性样品的分析上选择性与峰型几乎与其保持一致。LiChrosorb填料常规色谱分析柱产品介绍： LiChrosorb是德国MERCH公司出品的一种多孔无定型硅胶基质填料品牌，在过去的25年中非常成功地应用于液相色谱分离。产品特点：LiChrosorb RP-8和RP-18适合于碱性样品的色谱分析。技术参数：LiChrosorb填料参数Spherisorb 填料Waters公司出品的Spherisorb填料有3um、5um和10um, 孔径为80A 硅胶为基质的HPLC填料其高的分离性能已得到广大色谱用户的认可Spherisorb填料有C18 C8 CN C6H5和NH2等固定相C18有经封尾处理的ODS-2和未经封尾处理的ODS-1 两种ODS-2 的碳含量为11.5%ODS-1的碳含量为5.75%Spherisorb SAX强阴离子交换柱和SpherisorbSCX强阳离子交换柱分别适合于对小分子的酸性和碱性化合物的分析比通常的正相和反相色谱柱有更佳的分离性能BETASIL 填料ThermoHypersil-Keystone公司非常有特点的新型通用填料装填的色谱柱-BETASIL 为了达到原装柱的水平公司采用全新结构柱管装填以满足您更高分析要求的需要*高纯硅胶彻底减去活处理提供完美的峰型*高比表面积高覆盖键合相*真正的高效柱理论塔板数较高*较强的保留,反相色谱应用中适宜强极性化合物的分离

承接上回，我们说了一下离子交换色谱柱的原理、构造、分离机制、使用过程中的注意事项及它的局限性，今天主要说说它的维护保养和相关的注意事项，色谱柱固有一死，但好的操作还是能延缓它的生命周期的。 01.离子交换色谱柱的维护 1）柱体积估算：可以使用公式V=0.68πr2L 来估算色谱柱的柱体积，其中 V 为柱体积（mL），r 为色谱柱内径（cm），L 为色谱柱长度（cm）。 2）色谱柱的柱效测试：在条件允许的情况下，对新色谱柱进行测试。 3）色谱柱平衡：新柱使用前，应先用甲醇或乙腈冲洗，然后用初始流动相冲洗，以达到平衡。 4）色谱柱保护：对于复杂样品，建议使用在线滤器或保护柱，或者使用SPE小柱进行前处理。 5）色谱柱清洗：常规清洗包括使用100%水冲洗除盐，然后用甲醇或乙腈冲洗。对于强保留污染物，可以使用高浓度缓冲盐溶液（一般不超过1M的盐浓度）清洗，再用甲醇或乙腈清洗。 6）色谱柱保存：色谱柱应在适宜的温度下保存，并且根据制造商的建议使用合适的保存液。如果长时间不用，应该用保存液进行冲洗，确保里面填料不会干涸。 7）使用保护柱：对于容易污染的样品，建议使用保护柱来延长分析柱的寿命。 8）记录维护：记录色谱柱的使用和维护历史，包括使用日期、样品类型、清洗和再生周期等。 9）更换柱子：当色谱柱性能下降，如出现峰形异常、柱效降低或分离度下降时，考虑更换新柱。 02.离子交换色谱柱的注意事项 1）pH范围：确保流动相的pH值在色谱柱指定的范围内，通常为2-8，以防止固定相水解或分解。 [size=16px]2）温度控制：避免长时间在极端温度下使用色谱柱，一般推荐使用温度不超过60℃。 3）样品清洁度：样品应尽可能干净，避免含有悬浮颗粒、聚合物或其他可能堵塞或污染色谱柱的物质。 4）样品溶解性：样品最好溶解在流动相或与之兼容的溶剂中，以减少柱床的污染。 5）流动相组成：流动相的组成应当新鲜配制，避免使用长时间存放的溶液，以防微生物生长或沉淀形成。 6）缓冲盐浓度：使用合适的缓冲盐浓度，避免过高的浓度可能导致的柱床污染或性能下降。 7）避免高压：在冲洗或使用过程中，避免对色谱柱施加过高的压力，这可能导致填料压缩或床层损坏。 8）避免极端条件：避免在超出色谱柱制造商规定的pH、温度或有机溶剂比例的条件下使用色谱柱。 9）定期平衡：新柱或长时间未使用的色谱柱在使用前应进行适当的平衡。 https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/10/202410091607055228_9656_3203140_3.png!w490x14.jpg 总结一下： 为了确保离子交换色谱柱的长期稳定性和高效性能，我们需要遵循一系列维护和保养的步骤。首先，我们需要了解色谱柱的基本特性，比如它的体积，这可以通过特定的公式来计算。新柱子在投入使用前应该进行柱效测试，以确保其性能符合标准。 使用前，色谱柱需要用适当的溶剂进行预冲洗，然后用流动相进行平衡，以保证分析的重现性。对于含有复杂组分的样品，建议使用保护柱或在线过滤器，以减少对分析柱的污染。 在操作过程中，我们需要注意以下几点：保持流动相的pH值在色谱柱允许的范围内，控制色谱柱的使用温度，确保样品的清洁度，以及使用新鲜配制的流动相。同时，也要避免使用过高的压力，防止超出色谱柱制造商规定的使用条件。 定期清洗色谱柱也是必不可少的，这包括使用水溶液去除盐分，接着用有机溶剂进行深度清洗。如果遇到顽固的污染物，可能需要使用高浓度的缓冲盐溶液进行处理。色谱柱在不使用时应该用推荐的溶剂保存，以防止填料干涸和性能下降。 此外，记录色谱柱的使用和维护历史对于追踪其性能变化非常重要。当色谱柱的性能下降时（如出现异常的峰形或降低的柱效），就应该考虑更换新的色谱柱了。

Kromasil柱Kromasil是瑞典AKZO NOBEL公司生产的高性能硅胶基质液相色谱柱填料品牌。 Kromasil是一种高纯度球形硅胶填料，金属杂质含量极低，减少了有些金属螯合物在硅胶基质上的络合作用。 Kromasil硅胶的表面由独特的硅羟基基团组成，硅烷的覆盖率高，在较高的或较低的PH条件下不易水解和分解，可在PH=1.5～9.5条件下稳定使用。 Kromasil的含碳量高，表面极性小，分离效能高。通常在分析碱性样品时，与酸性硅羟基反应会产生不利的拖尾现象，而Kromasil化学纯度极高，它的表面由分布独特、相对中生的硅羟基基团组成，并使不需要的酸性硅羟基基团减少到最低，从而使之具有良好的峰对称性种较高的柱效。Hypersil BDSHypersil BDS 类色谱填料是极好的反相柱填料，有很好的耐久性及重现性，应用范围极其广泛。Hypersil BDS 硅胶担体键合前经过专门的碱钝化处理，将残余硅羟基降至极限，这种改善的表面，使得键合后的硅胶具有很高的配位度，大大降低了硅羟基与分析物之间的相互作用，改善了色谱峰形，降低了色谱峰的拖尾程度，提高了峰的对称性。Hypersil BDS填料的特征：l 对碱性化合物有更好的峰型。l 更长的寿命。l 更好的稳定性。l 同碱性化合物一样，酸性和中性化合物也有非常优异的峰值--真正的通用柱填料。紧管常规填料色谱柱具有优异的选择性和较长的色谱柱寿命。且对于简单的两元流动相(如甲醇/水)，当样品为酸性、中性和弱碱性化合物时均可获得较佳的峰不对称度。但当分析药物等样品中的强极性含氮的化合物时，样品峰型就极查，拖尾严重，并导致定量分析精度下降，时常会出现一些小峰埋没于前一拖尾峰的尾巴中，造成该现象的原因是固定相上尚有残余的硅羟基。尽管很多厂家对硅胶表面作了第二次反应，即所谓的“封尾”，以减小残余硅羟基的作用，但往往都不能完全消除残余的硅羟基的影响。Hypersil公司开发的将残余的硅羟基降至极限的Hypersil BDS(Base Deactived Silica,碱纯化硅胶)系列产品，并用现代衍生反应技术生产出特别适用于碱性化合物的真正均一反相填料。Hypersil 300A 填料是基于5um和10um,孔径为300A 的硅胶为基质的HPLC填料适合越来越多的生物大分子分离与分析的需要,现可提供C18 C8 C4 的填料*Hypersil 300A C18　适合亲水性强的分子量大于5000的小肽酶的水解片断及各种天然和合成小肽的分析*Hypersil 300A C4　　适合疏水性的小肽及大分子的多肽分析*Hypersil 300A C8　　选择性介于C18和C4之间适用于亲水性及弱疏水性的小肽和蛋白质酶的水解片断及各种天然和合成小肽的分析。 Hypersil ODS填料Hypersil 填料是基于粒度为3um 、5um和10um, 孔径为120A的硅胶为基质的HPLC填料其生产过程的质量控制标准非常严格全世界数千个实验室使用Hypersil色谱柱已长达20多年很多应用实例可以从多种文献及著名杂志上查到。大量的试验测试已经证实Hypersil ODS2填料是替代Waters Spherisorb ODS2的最佳填料无论是在酸性还是碱性样品的分析上选择性与峰型几乎与其保持一致。LiChrosorb填料常规色谱分析柱产品介绍： LiChrosorb是德国MERCH公司出品的一种多孔无定型硅胶基质填料品牌，在过去的25年中非常成功地应用于液相色谱分离。产品特点：LiChrosorb RP-8和RP-18适合于碱性样品的色谱分析。技术参数：LiChrosorb填料参数Spherisorb 填料Waters公司出品的Spherisorb填料有3um、5um和10um, 孔径为80A 硅胶为基质的HPLC填料其高的分离性能已得到广大色谱用户的认可Spherisorb填料有C18 C8 CN C6H5和NH2等固定相C18有经封尾处理的ODS-2和未经封尾处理的ODS-1 两种ODS-2 的碳含量为11.5%ODS-1的碳含量为5.75%Spherisorb SAX强阴离子交换柱和SpherisorbSCX强阳离子交换柱分别适合于对小分子的酸性和碱性化合物的分析比通常的正相和反相色谱柱有更佳的分离性能BETASIL 填料ThermoHypersil-Keystone公司非常有特点的新型通用填料装填的色谱柱-BETASIL 为了达到原装柱的水平公司采用全新结构柱管装填以满足您更高分析要求的需要*高纯硅胶彻底减去活处理提供完美的峰型*高比表面积高覆盖键合相*真正的高效柱理论塔板数较高*较强的保留,反相色谱应用中适宜强极性化合物的分离

各位大侠， 我做利用C18柱子液相时突然想到，液相柱子对某个样品中不同组分的分离效果很好，那利用这根柱子的理化特性，有没有相似的填料如树脂、硅胶、氧化铝等，来实现组分分离，在生产上加以应用？谢谢！

请问检测用饲料甜味料中用高效液相C18的什么填料的柱子好呢？

液相不接柱子压力有1.2MPA,正常是0到0.3MPA的。。用什么方法清洗效果比较好。老师们给个建议。。谢谢