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液相色谱子柱

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液相色谱子柱相关的论坛

  • 谈一谈对液相色谱及其柱子的看法

    [align=center][b]谈一谈对液相色谱及其柱子的看法[/b][/align]2010年,我来到单位上班,彼时的单位有一台液相和一台[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url],上班一个月以后,我被领导安排到省局技术中心去学习。学习液相色谱的感觉是什么呢?就是看两遍就八九不离十了,我曾经听别人说过,学习液相色谱对于一个外行来说,如果做的样品很单一,一天就差不多了。其实,液相色谱是一项好学难用的仪器。液相色谱的维护是需要相当的细致的。液相色谱涉及的领域很多,标准品、溶剂、色谱柱等诸多环节,每一个环节处理不好都有可能出问题。由于仪器复杂,所以保养不易,高压系统出故障的可能性也很大。液相色谱柱是液相色谱的核心,作为分离通道,非常重要!液相色谱柱的保养才是大学问,有的人使用色谱柱的时候不会保养或者不懂得保养,往往是使用几次以后就峰拖尾很厉害了。早些年我参加液相色谱的能力验证,那个时候能力验证允许的误差还是比较大的,所以色谱柱稍微有点问题,出现轻微的前伸或者拖尾的现象,能力验证还是可以通过的。随着形势的发展,能力验证的D值越来越小,要求越来越高。对色谱柱的要求也越来越高!所以我想借助本论坛,[b]向kromasil的专家提议,能否搞一个色谱柱保养的线上讲座,或者准备一些色谱柱保养的方法文件,以飨读者!色谱柱如果保养的好,是非常得心应手的!如果有系统性生物色谱柱保养手册是非常好的!各位做分析测试的老师也殊为不易,尤其是检测机构混岗很厉害,大家都是全能型选手,全能型选手的另一方面就是整体基础薄弱,很多只涉猎皮毛,这个就需要大家多学多问,我认为仪器信息网论坛的出现也是大家的福音,我们也希望kromasil论坛能够成为大家交流的通道。[/b]

  • 液相色谱柱

    请教各位前辈!在下有采购液相色谱柱的打算,对于现在具体的行情又不太了解。想请教一下,那一种品牌的色谱柱好一点?正在使用的是岛津的液相色谱仪,会不会使用岛津的色谱柱更好一点,岛津原装进口的柱子大概多少钱呀?岛津哪一个型号的柱子好用一点。(主要是中药材含量测定,会使用到有梯度的方法。)另外就是有没有可能从柱子本身特有的标志去判断其是不是原装进口的呀? 十分感谢!!!

  • 液相色谱柱子冲洗方法

    各位大侠; 因为我刚接触到液相色谱,很多方面都不懂,现请教一下:做样前后柱子的冲洗程序在哪儿设定?我们买的是岛津LC-20A,谢谢了哈!

  • 液相色谱柱使用、保养与反相HPLC柱子的清洁和再生

    液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。一、液相色谱柱的安装: 1、液相色谱柱的结构: a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。 在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。 b、柱填料: 液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。 正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3—10 μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。 反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。 常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10 μm之间。 2,色谱柱的安装: a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。 c、 按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止,再用扳手继续顺时针拧1/4-1/2圈,切记不要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象,请用扳手继续顺时针拧1/4圈,直至不漏液为止。二、液相色谱柱的使用: 色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理: a、最好使用流动相溶解样品。 b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。 2、流动相的配制:

  • 液相色谱峰拖尾,排除柱子原因

    我们有一台岛津10A的液相色谱,平时使用的都很正常,最近总是出现峰型拖尾的现象,排除柱子与样品的问题,检测器的流通池也洗过了,还有检测器的能量有800,基线正常,不知道是什么原因

  • 请教液相色谱平衡柱子的相关问题

    新手做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url],在毕业师兄临走前现学的色谱仪操作。流动相是纯乙腈-30mM磷酸盐缓冲液PH2.3,梯度洗脱程序。自己做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]前,先把流速调到1ml/m,两个流动相各脱气几分钟(因为使用比较频繁,一个星期用三四次),再分别用100%的A/B相冲柱子,冲到基线平了之后再上样,一般每个流动相都会冲十来分钟。参考文献里的梯度洗脱程序有28分钟,每个样结束后有14分钟平衡柱子,而我平衡柱子的方法是每个样跑结束后,就有梯度洗脱程序继续跑,等基线平了之后加下一个样,不知道我的操作是不是对的。还有就是所有样品测完之后,等用梯度洗脱程序把基线冲平之后,一般冲十多分钟,再用100%的甲醇冲20多分钟,最后关闭仪器。不知道我的平衡方法是不是有问题,希望各位大佬们帮我看看。

  • 液相色谱柱安装与使用

    液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。 一、液相色谱柱的安装: 1、液相色谱柱的结构: a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。 在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。 b、柱填料: 液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。 正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3—10 µm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。 反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。 常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10 µm之间。 2[/font

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