AKATA制备型液相色谱蛋白分析仪纯化蛋白步骤很简单的，比较适合初学者。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=113913]AKATA制备型液相色谱蛋白分析仪纯化蛋白步骤[/url]
那位老师有：液相色谱做麦谷蛋白的方法。麻烦发到我油箱：liue-mailbox@163.com
FPLC简介 FPLC全称为快速蛋白液相色谱（Fast protein liquid chromatography），其原理与高效液相色谱理论类似，是由经典的液体柱层析引入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]理论，并且对相体进行了改革，配用高压输液泵，采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。FPLC是专门用来分离蛋白质、多肽及多核苷酸的系统，是HPLC近年来的一项重要革新，它不但保持了HPLC的快速、高分辨率等特性，而且还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。因此在近年来在分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面得到了广泛应用随着HPLC的发展，出现了两种新型填料：薄壳型填料和双扩散灌流型填料，它们对大分子物质的分离具有独特的优越性，从而使FPLC的应用领域得以拓展。其可应用于蛋白、有机化合物的分离纯化，能定量测定蛋白的含量和和确定蛋白的分子量，因此可应用于生物学领域和化学领域的研究。 The Pharmacia fast protein liquid chromatography (FPLC) system is used for methods developmnent and the purification of large quantities of various biomolecules (i.e., protein and DNA). The system includes two pumps capable of continuous flow to the purification columns (vary by user) , a peristaltic pump may be used for column equilibration, a UV monitor to detect biomolecules on the column, a mixer to produce elution gradients, motor valves may be used to assist with sample injection, column selection or flow reversal, and a controller with an integration function for computerized operation of various programs directing flow to the pumps and controlling the motor valves. A chart recorder is the typical mode of 'run' documentation.
借助高效液相色谱法测定乳制品中乳铁蛋白。方法：先通过额外加入的二价铁离子使乳铁蛋白的构型更利于沉淀。然后用体积分数60% 乙醇溶液沉淀蛋白除去糖分，再用醋酸盐缓冲液提取乳铁蛋白并分离掉酪蛋白，最后用高效液相色谱检测，采用LiChrosorb RP-C18 色谱柱，在质量浓度0.1g/100mL 的三氟乙酸溶液协助下，甲醇与水线性梯度洗脱。结果：乳铁蛋白的线性范围是0.4～2mg/mL(R2=0.9980)，平均回收率95.4%。结论：此方法可以用于乳制品中乳铁蛋白的测定。
我现在是一名研二学生，课题是从乳清蛋白中分离α-乳白蛋白，目前要用高效液相色谱做出α-乳白蛋白的标准曲线，实验室用的是型号POLARIS-211的液相色谱仪，目前出峰的拖尾峰明显，停留时间也不稳定，有用过这个仪器的朋友吗，希望得到大家的帮助http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif
请问用高效液相色谱法检测牛血清白蛋白标准品（BSA），用什么柱子比较好？
通过对比试验研究洗脱时间、柱温、流速、洗脱梯度等对反相高效液相色谱法的影响，确立适宜小麦胚乳醇溶蛋白（Gliadin）反相高效液相色谱法（RP-HPLC）分离的最佳实验方法为：在1.0mL/min的流速、60℃的柱温条件下对上样醇溶蛋白进行洗脱、洗脱梯度为流动相B的体积比在55min内由21%升至48%（V/V），最后通过210nm紫外光检测洗脱组分的吸收值。
分子排阻高效液相色谱法检测促胰岛素分泌肽融合蛋白纯度_王婉如
如题，我想用C8的色谱柱跑液相色谱看一下发酵液中的蛋白质变化，但是发酵液里面较复杂，如何前处理纯化蛋白质，来达到能够上机的要求？ 如果用三氯乙酸或有机相使蛋白质变性沉淀，弃去上清，还能否将沉淀溶解？我看到这类方法多用在电泳上面，那液相色谱该用上面方法呢？期待高手指点~
[color=#444444]用RP-HPLC分析小麦醇溶蛋白，连续分析了很多样品都是后面随着流动相的梯度变化基线开始漂移，求相关的解决办法[/color][color=#444444]流动相：流动相A为含有0.06%v/v三氟乙酸的乙腈，流动相B为超纯水；[/color][color=#444444]梯度变化：0min，A 21%；55min，A 47%；[/color][color=#444444]紫外波长：210nm[/color][color=#444444]柱温：60℃[/color][color=#444444]流速：1.00mL/min[/color][color=#444444]选用的三氟乙酸和乙腈都是色谱级的，使用的仪器时安捷伦1100，柱子是ZORBAX 300SB-C18液相色谱柱（4.6×250mm 粒径5μm）[/color][color=#444444][img=,690,240]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907291028348370_4260_1843534_3.png!w690x240.jpg[/img][/color][color=#444444][/color]
NY/T 4439-2023 奶及奶制品中乳铁蛋白的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法
T/BPCT 001-2023牛乳及制品中A2 β-酪蛋白含量的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]质谱法
T/CSIQ 77001-2020 乳制品中ɑ-乳白蛋白含量的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法
T/CCAA 70-2023 牛乳基婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法
T/TDSTIA 002-2021 奶及奶制品中α-乳白蛋白的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法
T/TDSTIA 028-2022 婴幼儿食品和乳品中骨桥蛋白的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法
T/TDSTIA 028-2022?【现行】婴幼儿食品和乳品中骨桥蛋白的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法
[b]【序号】：2【作者】：【题名】：[b][b][size=12px][font=&]T/CSIQ 77001—2020[/font] [/size][font=&][color=#333333]乳制品中ɑ-乳白蛋白含量的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法[/color][/font][/b][/b]【期刊】：【年、卷、期、起止页码】：【全文链接】：[/b]
普通的液相色谱柱子C18 5微米，用来分离蛋白质会怎么样？ 现有一个分子量7万左右的蛋白，我想知道普通的HPLC C18 色谱柱（5微米，非蛋白专用柱），因为没钱买蛋白专用柱。 如果将含有此蛋白的溶液进入色谱柱。结果会是怎样的：1.蛋白会很快流出色谱柱？2.还是会留在色谱柱前面？3.一般的蛋白质在5%的甲醇中会不会变性？4.堵柱子的可能性有多大？
蛋白质类高效液相色谱手性固定相[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=95569]蛋白质类高效液相色谱手性固定相[/url]
[color=#444444]想用高效液相色谱表征蛋白质分子交联前后分子量的变化。[/color][color=#444444] 蛋白质的分子量在2.5-10万之间，资料上建议用C4的柱子。[/color][color=#444444] 不知道流动相和PH值怎么选择。[/color][color=#444444] 第一次用HPLC，急求大神们的帮助！！！！！！！！！！！！！[/color]
[color=#444444]实验需要定量牛血清白蛋白（BSA）和溶菌酶（LYZ）混合溶液中各自的含量是多少，用的是安捷伦1260高效液相，色谱柱C-18，25cm，300A，流动相A 0.1%三氟乙酸水溶液。流动相B 0.1%三氟乙酸乙腈溶液，但是怎么走梯度都分不开啊，总是在间隔不到1分中出峰。求大神指点[/color]
[color=#444444]想用高效液相色谱表征蛋白质分子交联前后分子量的变化。[/color][color=#444444] 蛋白质的分子量在2.5-10万之间，资料上建议用C4的柱子。[/color][color=#444444] 不知道流动相和PH值怎么选择。[/color][color=#444444] 第一次用HPLC，急求大神们的帮助！！！！[/color]
GB/T 5009.194-2003保健食品中免疫球蛋白IgG的测定！有人做过这个方法没，用的什么液相色谱柱啊，我在网上找不到这种色谱柱，求做过的大侠指点下！
各位好，反相液相色谱柱是不是容易被蛋白质污染，应如何处理呢？
今天去给客户安装了液相色谱仪，客户主要用它来检测血浆蛋白粉中免疫球蛋白G的含量，对于液相色谱仪安装已经有一些小小经验，所以仪器送到之后很快的我们就把仪器安装好了，仪器安装好之后呢肯定是要调试和验收的，验收中的安装已经完成，接下来我们运行确认和性能确认，既然要检测血清蛋白，那我们就通过检测它来完成后面的任务吧。首先我们完成运行确认，准备我们实验需要的流动相，流动相A：称取5．6765g磷酸氢二钠和4．6478g磷酸二氢钾至1000mL容量瓶中，加水定容至l000 mL，配制成pH-6.5，浓度为0.05 mol/L的磷酸盐缓冲液。流动相B：称取甘氨酸3．7535g与1000mL容量瓶中，加入800 mL水溶解，再加入4．75 mL6 mol/L的盐酸，用水定容至1000 mL，配制成pH-2.5,浓度为0.05 mol/L的甘氨酸盐酸缓冲液。[img=,255,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060953502175_13_3763765_3.jpg!w690x920.jpg[/img] [img=,248,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060945498254_8247_3763765_3.jpg!w690x945.jpg[/img] 将两种流动相经过过滤和脱气处理后，连接到我们的输液泵上，输液泵在第一次使用时要打开排液阀，将注射器安装到废液口，用注射器进行手动吸液当衍生试剂进入注射器内，观察并确定进液管内无明显气泡后关闭排气阀，换上废液管后开始运行输液泵。此时必须要确定泵腔内有液体且无气泡才可以运行泵，否则运行泵时会损坏泵头。两个泵都要经过此操作后才可以开始运行。打开我们的泵，查看机器是否可以顺利通过自检，检测泵的流速和流动相混合比例的准确度。随后打开检测器和工作站，我们用的色谱柱是HiTrap[sup]TM [/sup] Protein G HP柱，1mL。设置好实验所需参数：流动相梯度洗脱程序[table][tr][td][align=center]时间(min)[/align][/td][td][align=center]流速(mL/min) )[/align][/td][td][align=center]流动相A(%)[/align][/td][td][align=center]流动相B(%)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]4.5[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5.5[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]15.0[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]15.5[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]22.0[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100 0[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][/table]检测波 长280nm。让流动相冲洗整个系统，查看基线，等待基线平稳。[img=,306,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060949079532_4842_3763765_3.jpg!w690x765.jpg[/img] [img=,316,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060949585645_8170_3763765_3.jpg!w690x742.jpg[/img] [img=,268,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060957536288_7365_3763765_3.jpg!w690x874.jpg[/img][img=,321,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060944094564_753_3763765_3.jpg!w690x730.jpg[/img] [img=,285,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060944599785_6578_3763765_3.jpg!w690x822.jpg[/img] 在这该阶段我们可以把标准品配制出来，首先我们来了解一下免疫球蛋白G，它是血清主要的抗体成分，占血清免疫球蛋白的百分比较多，大约占75%，但它只有40%-50%在血清中，其余在组织当中。它的主要功能是在机体免疫中起到保护作用，它也是唯一可以通过胎盘的免疫球蛋白。通过胎盘获取的母体免疫球蛋白G在出生后数月对防御白喉、[url=https://baike.baidu.com/item/%E9%BA%BB%E7%96%B9][color=#000000]麻疹[/color][/url]、脊髓灰质炎等感染起着重要作用。它的结构想一个“Y”字型，如图：[img=,357,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060948093745_2090_3763765_3.jpg!w440x418.jpg[/img] [img=,255,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060953036898_4160_3763765_3.jpg!w690x920.jpg[/img] [img=,190,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908061003393034_7645_3763765_3.jpg!w690x1230.jpg[/img] 称取免疫球蛋白G标准品0.0102g（纯度=97%）置于10mL容量瓶，并用流动相A定容到10mL，摇匀，脱气。浓度为1mg/mL。取配置好的标准溶液母液，用流动相A稀释成浓度为0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL的标准工作液。检测进样阀的精密度：将标准溶液母液取20μL在检测波 长280nm条件下进样，连续进样6次，计算其相对标准偏差RSD=0.94%。依次进样标注品工作液20μL，由时间进行定性，峰面积进行定量。得出其平均相关系数r=0.9999。免疫球蛋白G检出质量浓度以3倍信噪比(s/N=3)计算，最低检出质量浓度为0．1 mg/mL。原本还有一步已知浓度样品的检测，前处理方法如下：称取0.1g精确至0.0001曲血浆蛋白粉于15mL的塑料离心管中，准确加入10mL流动相A，涡旋振荡10min，4 000 r/min离心5 min，取上清液经微孔膜(0．22μm)过滤，滤液待测。但是由于今天已知浓度的样品没有到，所以我们无法进行样品进样，但是建议大家在安装仪器时最好用已知浓度的样品进样验证仪器的准确性。好了，今天就到这里啦！
大家都知道哪些较好的分离蛋白与多肽的液相色谱柱呢，可以罗列一下
T/CITS 0012-2023 牛乳基婴幼儿配方乳粉及牛乳中A1和A2 β-酪蛋白的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法
液相色谱仪检测 我今天进样进了乙醚、鱼胶原蛋白两个物质之后，出现柱压上升，色谱分离效果变差的现象 。乙醚对色谱柱有没有损害 ？鱼胶原蛋白对色谱柱有没有损害？
是针对纳升级、毛细管、窄径分离而设计的，目的在于获得最高效色谱分辨率、灵敏度及重现性。 直接纳升流速在常规纳升流纳升级液相色谱速分离技术的基础上又有了重大改进。用户将看到改进后的峰容量和峰形，每次分离后检测得到的组分数量增加。 纳升级液相色谱可高效分离各种多肽和蛋白质，与质谱联用后是蛋白组学研究的最佳工具，纳升液相色谱采用微流控制系统，可在20 nL/min 的流量水平下实现精确控制和梯度洗脱；微流控技术也极大地提高了质谱检测的灵敏度，可对更多的低丰度多肽进行分离和鉴定。 此外，纳升级液相色谱还可拓展应用至代谢靶分子、致病蛋白分子的鉴定，在纳升级稳定流量下质谱检测器可获得很好的灵敏度、分辨率和重现性。[color=#f10b00][size=6]说说你的认识、见解、或者使用经验吧？[/size][/color]
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