常用生化试剂

通常，在气相中，将成分衍生化是为了增加其稳定性，降低温度，那通常使用的衍生化试剂有那些？衍生化原理如何？即衍生化后，质核比得变化如何？

衍生化是一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构的物质。一般来说，一个特定功能的化合物参与衍生反应，溶解度，沸点，熔点，聚集态或化学成分会产生偏离。由此产生的新的化学性质可用于量化或分离。 样品的衍生化的作用主要是把难于分析的物质转化为与其化学结构相似但易于分析的物质，便于量化和分离。当检测物质不容易被检测时，如无紫外吸收等，可以将其进行处理，如加上生色团等，生成可被检测的物质。衍生化常用的反应有酯化、酰化、烷基化、硅烷化、硼烷化、环化和离子化等.衍生化试剂很多,简单的说:它能帮你将不能分析的样品通过衍生化试剂反应转化为可分析的化合物.衍生化试剂比如有:烷基化试剂、硅烷化试剂、酰化试剂类、荧光衍生化试剂、 紫外衍生化试剂、苯甲酰氯为衍生化试剂、羟基衍生化试剂 、 手性衍生化试剂、氨基衍生化试剂、气相色谱和液相色谱中常用的柱前衍生化方法、、固相化学衍生化法.高效液相色谱法有甲醛与2，4－二硝基苯肼（DNPH）反应生成腙，衍生化产物醛腙用有机溶剂萃取富集后，在一定温度下蒸发、浓缩，再以甲醇或乙腈溶解或稀释，最后进行色谱测定。

本人做了一个关于生化试剂分类的方案，望各位版友审查提意见，不恰之处，敬请指正！能提供更好方案的，希望能与其它版友分享！附：分类方案1. 蛋白质/多肽2. 抗原/抗体3. PCR试剂4. 实验材料（如细胞株、菌株）5. 微生物（如培养基）6. 生物分子（如氨基酸、维生素、酶）7. ELISA试剂盒8. RNAi9. 常用生化试剂

[b]几种衍生化试剂简介[/b]1. 硅烷化试剂硅烷基指三甲基硅烷Si(CH3)3或称TMS。硅烷化作用是指将硅烷基引入到分了中，一般是取代活性氢。活性氢被硅烷基取代后降低了化合物的极性，减少了氢键束缚。因此所形成的硅烷化衍生物更容易挥发。同时，由于含活性氢的反应位点数目减少，化合物的稳定性也得以加强。硅烷化化合物极性减弱，被测能力增强，热稳定性提高。 硅烷化在GC分析中用途最大。许多被认为是不挥发性的或是在200～300℃热不稳定的羟基化合物经过硅烷化后成功的进行色谱分析。 硅烷化试剂作用同时受到溶剂系统和添加的催化剂的影响。催化剂的使用(如三甲基氯硅烷，吡啶)可加快硅烷化试剂的反应。确定好硅烷化反应的时间和温度至关重要。必须知道衍生化的转化速率，以实现对未知样品的定最分析。硅烷化试剂一般都对潮气敏感，应密封保存以防止其吸潮失效。这些硅烷化试剂适用于范围较广，但如果使用过最，则可能给火焰离子化检测器造成些麻烦。 三甲基硅烷是GC分析最常用的通用硅烷化基团。引入此基团可改善色谱分离，并使得特殊检测技术的应用成为可能。 硅烷化试剂还可以用于对玻璃器具（如GC的内衬管）和色谱的担体进行去活化。 硅烷化试剂主要是（氯）甲基硅烷系列。

8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。 28、溴酚蓝：pH指示剂，pH=3.0时呈黄色，pH=4.6时呈蓝紫色。酸碱指示剂；非水滴定用指示剂，蛋白电泳染色；病毒化验等。29、台盼兰：台盼蓝（Trypan Blue）或称台盼兰，是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性。30、二甲苯青FF：用于琼脂糖聚丙烯酰胺凝胶电泳的示踪染料， 易溶于水和醇，可与溴芬蓝按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙：是一种荧光色素，与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光，与DNA结合量少发绿色荧光，与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染，因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞.它还可以用作移码突变的诱变剂，能镶嵌于两个相邻的碱基对之间，这样在DNA复制过程中，会使DNA链增加或缺失一个碱基，造成移码突变。吖啶橙染液有毒，操作时要戴手套，需避光。32、EDTA和EGTA：EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合剂的代表性物质。能和碱金属、稀土元素和过渡金属等形成稳定的水溶性络合物。此外EDTA也可用来使有害放射性金属从人体中迅速排泄起到解毒作用。也是水的处理剂。EGTA--乙二醇双（2-氨基乙基）四乙酸在Mg2+存在下测定Ca2+时，可用EGTA直接滴定,滴定误差小于0.3% ，比用EDTA滴定提高了选择性。此外它与金属离子形成的配合物的稳定性普遍比相应的EDTA配合物差。33、TRICINE：N-甘氨酸， 常见的电泳系统是Tris－甘氨酸系统；Tris－Tricine电泳则用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的电泳，能够获得较好的分离效果。可以用前者代替。34、PVP40：PVP40 中的CO - N = 有很强的结合酚类化合物的能力，与其形成稳定的复合物，常用于提取RNA时除去酚类。35、脱氧胆酸钠：离子型去垢剂，作用有：1、裂解细胞；2、溶解蛋白，尤其是可以溶解一些难溶于水的蛋白，如膜蛋白等；3、很适合做WB，但在Co-IP中使用，需要谨慎。36、6-BA：细胞培养中用到，细胞分裂素。37、碘代乙酰胺：也叫作碘乙酰胺，2-碘乙酰胺。用于有机合成，在蛋白组学中组氨酸和半胱氨酸的烷基化试剂，用于多肽测序以及酶抑制剂等，蛋白组学级试剂。38、萘乙酸：NAA，为广谱性植物生长调节剂。可促进细胞分裂，诱导形成不定根，改变雌雄花比例，增加坐果率等39。番红O与藏红T：氧化还原指示剂、生物染色、酸碱指示剂，滴定分析亚硝酸盐。40。TTC：2，3，5-三苯基氯化四氮唑（红四氮唑），多用于药物分析和琼脂糖添加剂，在计数琼脂中加入适量的TTC（0.5% TTC 1ML加到100ML琼脂中），细菌菌落长成红颜色，对去除食品本底颗粒物干扰非常有意义。

生化试剂的概念　　生化试剂（Biochemical reagent）是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物，以及临床诊断、医学研究用的试剂。生化试剂的介绍　　由于生命科学面广、发展快，因此该类试剂品种繁多、性质复杂。生化试剂的种类　　主要有电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、透变剂和致癌物质、杀虫剂、培养基、缓冲剂、电镜试剂、蛋白质和核酸沉淀剂、缩合剂、超滤膜、临床诊断试剂、染色剂、抗氧化剂、防霉剂、去垢剂和表面活性剂、生化标准品试剂、生化质控品试剂、分离材料等等。生化试剂的种类与等级说明　　（1）免疫试剂包括抗体及抗血清、正常血清及补体、抗原、免疫组织化学研究用试剂、细胞培养用试剂、细胞分离试剂、凝胶内扩散法及电泳试剂等。（2）基因工程用试剂包括基因表达与基因重组、人工合成蛋白、激素、核酸合成试剂、核酸制剂、内切酶等。（3）诱变剂和致癌物质主要供测定工作场所与生活环境中的毒物质的致癌性与化学毒物的致突变性。（4）临床诊断试剂主要供医疗系统中的临床病理诊断、生化诊断、液晶诊断、同位素诊断与一般化学诊断等诊断检查中所用的一大类化学试剂。（5）工业用化学品包括试制开发的工业用化学品，有四千种以上，还在不断增加。　　从生物体中提取的或由化学合成的生物体的基本成分，用于生物成分的分析鉴定及生物制品的制造。随着生命科学的发展，生化试剂已发展成为化学试剂的一大类,有商品10000多种。中国销售的生化试剂品种有2500种。生化试剂受热、受潮、受光后易丧失活力，保存期短，因此贮运条件比较苛刻。例如，绝大多数酶试剂怕热，需在0～5℃下保存，有些作为遗传工程用的酶试剂则需在－20℃下保存。生化试剂按生物体组织中所含有的或是在代谢过程中所产生的物质可分为氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸、酶、辅酶、糖类、酯类、激素等；按生物学研究的需要可分为电泳试剂、色谱试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂等。 生化试剂根据用途不同对其纯度及技术均有一定的要求。例如酶试剂，有粗制酶、结晶酶、多次结晶酶以及不含某些杂酶的酶制剂等多种。生化试剂有三种生产方法：①从生物体中分离、提纯；②化学合成；③发酵。对生化试剂产品的技术要求有：含量、熔点、冰点、旋光度、含水量、光谱特征、折光、密度和生物活性等。

[color=#444444]请教一个问题，我想做醛酮类化合物的衍生化（甲醛、乙醛、丙酮、丙醛、丙烯醛），目前的方法是用2,4-二硝基苯肼做衍生。现在我查到了一个用2,4,6-三氯苯肼的衍生化试剂，本人对化合物结构解析不太了解，想请教利用这两种衍生化试剂做衍生试剂，那个更容易一些，衍生产物更稳定一些？衍生条件（温度、时间，PH）等一些参数。希望给出合理化的建议。[/color]

各位对生化试剂有了解的大虾们，如果把成千上万种生化试剂概括为5-8类，大概怎么分比较全面，符合大家的使用习惯呢？仪器信息网目前网站分类参见http://www.instrument.com.cn/reagent/，生化试剂版块，希望征集更好的改版方案。 有奖征集生化试剂分类，一旦被网站采用，悬赏50积分。

今天看文献，不知道衍生化试剂有什么作用，衍生化反应、衍生化处理的作用，希望哪位能给解答一下，不胜感激！

最近做的样品中含有一些羧酸还有醛类，看了一些文献，对于醛类，有的用DNPH(2,4-二硝基苯肼)，有的用PFBHA。对于羧酸，有的用BSTFA。请问1、应当如何对样品进行衍生化呢？2、衍生化试剂一般从哪里买的？看了一些国外的试剂公司，衍生化试剂非常贵，动辄就上千元，不敢乱来。谢谢各位！

哪位大神那有衍生化试剂手册？

小白求助大佬，本人所测的物质需要BSTFA衍生化处理，之前用的是Regis公司的，但是现在疫情直接断货啦，sigma的也进不来，我想试试国产麦克林或者阿拉丁的BSTFA试剂，有没有前辈购买过这两个国产品牌的衍生化试剂，效果怎么样？如果实在不行就只能等上海彻底解封换sigma的BSTFA试剂啦[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif[/img]

液相色谱柱后衍生测农残，衍生化试剂通氮气作用是什么？氮气插入溶液内还是溶液上方

请教高手，在资料上看到使用的衍生化试剂是MTBSTFA，我现在只有BSTFA试剂，请问二者在应用上有何区别呢？能不能用BSTFA代替MTBSTFA呢？

求助，做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]衍生化试剂必须都是色谱级别的吗，衍生化之后，正己烷萃取的

大家好！不知道大家做GC/MS联用时有没有做过衍生化试剂的空白？我现在用10ul甲氧胺盐酸盐吡啶与90ul（BSTFA+1%TMCS)混合经衍生化步骤后上机，发现会出来甘油、硬脂酸等乱七八糟大概20~30个峰，溶剂延迟有5min。这样的话根本不能做样本，以前也用这款衍生化试剂，只不过是小瓶装的。试剂也是新买的，应该不是失效的问题。且同样条件用MSTFA时不会有这个问题，这是说明Sigma的试剂不纯吗？还是其他原因？大家做的溶剂峰大概是什么样的情况？快毕业了，情况很急，希望能得到大家的解答，感恩不尽！

请教各位：我想做氯氰菊酯的质谱分析，应该用什么做为衍生化试剂？[em04]

呵呵,我是新手,想请教一下关于叶酸的衍生化试剂都有哪些,现在我查到的资料都是关于柱后衍生化的,我想用柱前衍生化,恳请高手指点一下[em0815]

??液相色谱使用最多的是紫外检测器，为了使一些没有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外检测器检测，往往通过衍生化反应在这些化合物的分子中引入有强紫外吸收的基团：2,4-二硝基苯、苯甲基、对硝基苯甲基、3,5-二硝基苯甲基、苯甲酸酯、对甲苯酰、对氯苯甲酸制、对硝基苯甲酸酯、对甲氧基苯甲酸酯、苯甲酰甲基、对溴苯甲酰甲基，这些衍生物可被紫外检测器检测。??大多数紫外衍生反应来自经典的光度分析和有机定量分析，新的衍生化反应和衍生化试剂是随液相发展而发展的，这些反应的原理都来自有机合成，所以就要求操作者对有机合成有所了解。但是，由于柱前衍生化是为色谱分析准备样品，处理样品的量小（mg级），所用的小型和微型反应器皿又不同于常量的有机合成，而是类似于近年来发展的微量有机合成。紫外衍生化反应要选择反应产率高、重复性好的反应。过量试剂和试剂中的杂质如果干扰下一步的色谱分离和检测，则在色谱进样前要进行纯化分离。还要注意反应介质对紫外吸收的影响。??（1）苯甲酰化反应：苯甲酰氯及其衍生物--对硝基苯甲酰氯、3,5-二甲基苯甲酰氯和对甲氧基苯甲酰氯都可以同胺、醇和酚类化合物反应，生成紫外吸收的苯甲酸酯类衍生物；??（2）2,4-二硝基氟代苯（DNFB）的反应：DNFB与醇的反应产率很低，但可与大多数伯胺、仲胺和氨基酸反应，生成强紫外吸收的苯胺类衍生物；??（3）苯基异硫氰酸酯（PITC）的反应：PITC可与氨基酸反应，生成苯基己丙酰硫脲衍生物--PTH氨基酸；??（4）苯基磺酰氯的反应：苯基磺酰氯可与伯胺和仲胺反应。??甲苯磺酰氯可与多氨基化合物反应，不仅能提高它们的检测灵敏度，还可改变HPLC的分离度。??（5）有机酸的酯化反应：有机酸很容易与酰溴基反应生成酯，常用的酰溴基试剂有苯甲酰溴、甲氧基苯甲酰溴、对溴基苯甲酰溴和对硝基苯甲酰溴等；??酯化反应在极性溶剂（如乙腈、丙酮或四氢呋喃）中进行，有时需要加催化剂，如冠醚加钾离子、二乙胺或N-二异丙基胺等。??（6）羰羟基化合物的反应：醛类和酮类中的羰基可与2,4-二硝基苯肼（DNPA）反应，反应在弱酸性条件下进行，生成苯腙衍生物。??羰基化合物还可以与对甲基苄基羟胺（PNBA）在碱催化下反应，生成有强紫外吸收的肟。

请教各位大虾啦~~本人新手，没做过衍生化~~因为实验室只有化学纯的三甲基氯硅烷这种硅烷化试剂，可不可以就用这个做衍生化呢？还是一定要专门用于分析的才行？就用这一种就可以吗，是否还需要别的，如[size=2][font=''Times New Roman'']HMDS，BSTFA等？？还有衍生化一定要用吡啶吗？三乙胺可以代替吗？衍生化反应的容器有没有什么要求，普通的烧杯之类的可以吗？问题有点多哦，，谢谢各位帮忙解答一下，不胜感激，急啊~~[/font][/size]

硅烷化衍生化试剂加入量应该是多少？

有那位大虾做氯霉素、瘦肉精和莱克多巴胺。它们的衍生化试剂是不是相同的。使用的都写着BSTFA，但是好像买来的东西不大相同。瘦肉精的使BSTFA kit,莱克多巴胺写的是BSTFA+TMCS 99:1（ksylon bft)kit，这个跟氯霉素的那个是相同的，但是氯霉素的后面没有kit。这几个是不是相同的，能不能通用呢 。

做气相色谱时，需要对待测物质进行衍生。衍生化试剂选用什么规格的？分析纯？优级纯？还是色谱纯

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=11405]生化试剂目录[/url]现提供国产分子生物学生化试剂厂商及产品资料，希望对各科研用户或者想代理生化试剂的公司有帮助。目录大家保存可能对以后试验等有帮助。

请问做衍生化的时候，有没有用两种衍生试剂的朋友？我用了两种，但是不知道为什么要用两种，请教！谢谢一般是不是只用一种啊？

在液相分析中使用衍生化试剂邻苯二醛和三巯基丙酸，图见附件中图1。现有如下问题请教：1.分析物质加入上述衍生化试剂和仅有衍生化试剂跑出的图和附件中图1的图形大体相同，只是后面大峰的峰高不同，前面小峰的峰高基本一致，分析物质的出峰位置应在大峰位置，这样能够说明分析物质的图谱可用吗？2.跑分析物质的时候，主峰峰高不稳定，会一直降低，但前面杂质峰基本不变，是什么原因呢？3.跑一段时间后，也就两三小时吧，峰形就会变差，出现不对称现象，图见附件中图2，怎样避免呢？估计是由于衍生化试剂残留在柱子和紫外检测器中，冲洗可改善峰形，有什么好方法避免呢？谢谢各位不吝赐教[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=63137]图[/url][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/09/200709121738_63841_1638240_3.gif[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/09/200709121738_63842_1638240_3.gif[/img]

在化学实验中我们难免会碰到一些试剂上写的英文名称，这时我们需要的就是了解这些英文名称代表了哪些试剂，这样才能让我们更方便、快捷、正确的进行实验。下面就告诉您一些常用的化学试剂英汉对照，看看您答对了么？AR (Analytical reagent 分析纯)；BC(Biochemical 生化试剂)；(British Pharmacopoeia 英国药典)；BR (Biological reagent 生物试剂)；(Biological Stain 生物染色剂)；CP (Chemical pure 化学纯)；EP (Extra Pure 特纯)；FCM (For Complexometry 络合滴定用)；FCP (For chromatography purpose 层析用)；FMP (For microscopic purpose 显微镜用)；FS (For synthesis 合成用)；GC (Gas chromatography 气相色谱)；GR (Guaranteed reagent 优级纯)；HPLC (High Preuuer Liquid chromatography 高压液相色谱)；Ind (Indicator 指示剂)；LR (Laboratory reagent 实验试剂)；OSA (Organic analyfical standard 有机分析标准)；PA (Pro analysis 分析用)；Pract (Practical use 实习用)；PT (Primary eragent 基准试剂)；Pur (Pure purum 纯)；Puri (Purimum 特纯)；(ectrum pure 光谱纯)；Tech (Techincal grade 工业用)；TLC (Thin Layer chromatography 薄层色谱)；UV (Ultra violet pure 分光纯、光学纯、紫析分光光度纯）这些化学试剂中英文名称您都知道么？

[font=&][color=#666666]分析、总结了生化检验试剂在订购、储存和使用等全流程管理中的常见问题，通过采取对生化检验试剂用量进行评估后再制订采购计划、建立独立常温试剂架将已出/未出电子库的常温试剂分区域储存、对试剂开瓶效期进行评估等措施，对生化检验试剂进行了科学、规范化的管理，提高了生化检验试剂管理的工作效率，为临床检验质量提供了可靠保障。[/color][/font]