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食品工业上谈论的益生菌被定义为:益生菌是活的微生物,当摄入足够量时,对宿主起有益健康的作用。在谈论益生菌时必须满足三个条件:1) 活的微生物;2) 摄入足够的量;3) 对宿主健康有益。益生菌是从有益宿主健康出发给出的定义,目前研究较热的益生菌有:双歧杆菌、乳杆菌、芽孢杆菌、丁酸梭菌等,其中双歧杆菌、乳杆菌和芽孢杆菌都属于乳酸菌类,因此益生菌包括了部分乳酸菌,而乳酸菌不全是益生菌。 乳酸菌并不是一个严格的微生物分类规范,定义并不严谨,但目前已经得到大众的公认。因此食品工业上对乳酸菌的定义为:乳酸菌一般是指能发酵糖,主要生成乳酸的细菌的总称。在谈论乳酸菌时应该注意二个方面:1) 乳酸菌是一种细菌;2) 能发酵糖类生成乳酸。乳酸菌是从发酵糖产生乳酸的机理方面考虑给出的概念,对人类生活有益的乳酸菌有:双歧杆菌、乳杆菌、链球菌、明串珠菌等。并不是所有的乳酸菌都有益于人类健康,也有一些乳酸菌对人体是有害的,如有害的利斯特氏菌。目前市场上发酵奶制品中提到的乳酸菌传统意义上是指:1)保加利亚乳杆菌(Lactobacillus Bulgaricus)2)嗜热链球菌(Streptococcus Thermophilus)这两支菌是酸奶发酵过程中传统混合使用的乳酸菌。市场上发酵奶制品中提到的益生菌一般为:1)长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)2)青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)3)动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)4)干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)5)嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)6)鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)等等。它们也都是乳酸菌类,由于它们有的耐酸能经受住人体胃酸的考验,有的能在人体肠道中定植一段时间,总之能为人体肠道提供活的益生菌,因此现代微生态学研究中把它们定义为益生菌类。
1、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。一般地,大多数菌种的保藏温度以5℃为好,像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37℃进行保存,而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。传代培养保存法虽然简便,但其缺点也很明显,如:①菌种管棉塞经常容易发霉;②菌株的遗传性状容易发生变异;③反复传代时,菌株的病原性、形成生理活性物质的能力以及形成孢子的能力等均有降低;④需要定期转种,工作量大;⑤杂菌的污染机会较多。 通派(上海)生物科技有限公司是供应国内/外各类细胞(人/大鼠/小鼠细胞 等),菌种,ELISA试剂盒(人/大鼠/猪),PCR试剂盒,免疫组化试剂盒,单克隆抗体,多克隆抗体,移液器,培养皿,BD培养基,实验室耗材,实验室小型耗材等产品的国内一流服务商。公司集生物科技产品生产、销售于一体,公司实验室热门提供:传代细胞,原代细胞,耐药株,细胞染色,免疫组化,ELISA试剂盒 等。2、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。此法可防止干燥,并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。其具有方法简便的优点,同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物(如产孢能力低的丝状菌)的保存,而某些细菌如固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。
常用的有琼脂斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、沙土管保藏法、甘油冷冻管保藏法、低温冷冻保藏法等,方法很多。 我选用液体石蜡保存方法,该方法适用于不能分解液体石蜡的酵母菌、某些细菌(如芽孢杆菌属、乙酸杆菌属等)和某些丝状真菌(如:青霉属、曲霉属等),而某些细菌(如:固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌等)和一些真菌(如:卷霉菌、小克银汉霉、毛霉等)不宜采用此法进行保存。微生物检验常用以下菌种:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌药典也没有要求怎样保存,只说选用适宜的保存方法需要验证。但是肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌这些菌种用液体石蜡保存方法适合不?