碱性绿标准品

跑碱性橙2、21、22时标准品峰都重合在一起，一开始怀疑是有两个标准品过期失效了，然后用三瓶标液各配成一瓶单标上机测定，结果都有出峰且出峰时间非常接近分别是11.564、11.558、11.553。仪器是Waters e2695 柱子安捷伦C18柱流动相A:0.02mol/L乙酸铵 PH4.5 B甲醇有大佬做过的请指教 多谢[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110141521201837_4215_3490514_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110141521485873_9300_3490514_3.png[/img]

1 主题内容与适用范围本方法规定了酱制品和腐竹中碱性橙2，碱性橙21，碱性橙22，碱性嫩黄的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LCMS[/color][/url]MS测定方法。本方法适用于酱制品与腐竹中碱性橙2，碱性橙21，碱性橙22，碱性嫩黄的定性、定量分析。2 原理碱性橙是一种碱性染料，包括碱性橙2，碱性橙21，碱性橙22等。碱性橙染料主要用于纺织品、皮革制品及木制品的染色。根据美国卫生研究所化学品健康与安全数据库资料表明：摄取吸入以及皮肤接触该物质均会造成急性和慢性的中毒伤害。有确凿的动物实验数据表明，该物质为致癌物，在接触该物质时需使用无孔手套和呼吸面罩，以免对人体造成伤害。我国国家标准GB2760《中华人民共和国食品添加剂使用卫生标准》中，未将碱性橙纳入食品添加剂范围。但是，由于碱性橙比其他水溶性染料如柠檬黄、日落黄等更易于在豆制品、黄鱼、辣椒制品上染色且不易褪色，而且成本低，因此一些不法商贩用碱性橙对豆制品、黄鱼、辣椒制品等产品进行染色，以次充好，以假冒真，欺骗损害消费者，危害消费者的身体健康。样品经乙腈提取3 试剂和材料3.1 碱性橙2标准品3.2 乙腈：色谱纯3.3 甲醇：色谱纯3.4 Agela Technologies Cleanert C183.5 Agela Technologies Cleanert PSA4 仪器设备4.1 岛津[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]MS 80504.2 湘仪L550离心机4.3 EYEL 4 1100旋转蒸发仪4.4 EYEL 4 分液漏斗振荡器4.6 离心管：50mL4.7 滤膜：0.22μm 尼龙5 分析步骤5.1提取称取样品（辣酱制品及腐竹制品）（1.00±0.02）g于50mL离心管中；加入10mL提取液，涡旋混合，震荡5min超声提取5min，4000r/min离心5min；取上清液备用。备注：提取溶剂（乙腈）5.2净化2ml离心管中加入PSA0.1g以及C18 0.1g，取提取液1ml加入到2ml离心管中，涡旋混匀高速离心3min，取上层提取液过0.22μm尼龙滤膜于进样瓶中。6 仪器条件([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]MS8050)6.1 质谱参数质谱参数：离子源ESI源 Nebulizing Gas Flow: 3 L/min Heating Gas Flow: 10 L/min Interface Temperature300 ℃；DL Temperature 250 ℃；Heating Block Temperature 400℃ Drying Gas Flow: 10 L/min[align=center] [table=432][tr][td=1,2]化合物[/td][td=1,2]母离子[/td][td=1,2]子离子[/td][td]Q1[/td][td=1,2]碰撞能量（CE）[/td][td=1,2]Q3 pre Bias（v）[/td][/tr][tr][td]锥孔电压[/td][/tr][tr][td=1,3]碱性橙2[/td][td=1,3]213[/td][td]121.3[/td][td=1,3]-30[/td][td]-21[/td][td]-20[/td][/tr][tr][td]77.25[/td][td]-20[/td][td]-12[/td][/tr][tr][td]120.3[/td][td]-30[/td][td]-19[/td][/tr][tr][td=1,2]碱性橙21[/td][td=1,2]315.2[/td][td]300[/td][td]-12[/td][td]-25[/td][td]-17[/td][/tr][tr][td]144[/td][td]-26[/td][td]-44[/td][td]-21[/td][/tr][tr][td=1,2]碱性橙21[/td][td=1,2]391.2[/td][td]376[/td][td=1,2]-30[/td][td]-29[/td][td]-23[/td][/tr][tr][td]220[/td][td]-40[/td][td]-19[/td][/tr][tr][td=1,2]碱性嫩黄[/td][td=1,2]268.2[/td][td]147[/td][td=1,2]-30[/td][td]-28[/td][td]-22[/td][/tr][tr][td]122[/td][td]-24[/td][td]-30[/td][/tr][/table][/align]6.2 液相参数：色谱柱：shim-packXR-ODSⅢ（1.6μm）流动相：A为5mmol乙酸铵溶液 B为乙腈进样量：2μL流动相曲线如下：[img=,490,163]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708140956_01_3081717_3.png[/img]7.1 标准品线性碱性橙及碱性嫩黄标准品储备液10mg/kg，稀释至10μg/kg、5μg/kg、1μg/kg、0.5μg/kg、0.1μg/kg上机分析，线性关系及谱图如下图。备注：稀释溶剂为（水:甲醇=8:2）[img=,490,188]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708140958_01_3081717_3.png[/img] 碱性橙2 [img=,490,195]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708140958_02_3081717_3.png[/img] 碱性橙21[img=,490,195]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708140959_01_3081717_3.png[/img] 碱性橙22[img=,490,195]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141000_01_3081717_3.png[/img] 碱性嫩黄7.2回收率样品处理需做阴性基质标曲，回收率一般在70%左右。 [table=458][tr][td]基质[/td][td]添加水平 （ug/kg）[/td][td]碱性橙2 回收率%[/td][td]碱性橙21 回收率%[/td][td] 碱性橙22 回收率%[/td][td]碱性嫩黄 回收率%[/td][/tr][tr][td]腐竹[/td][td]5[/td][td]70.1[/td][td]72.3[/td][td]69.5[/td][td]70.2[/td][/tr][tr][td]酱制品[/td][td]5[/td][td]74.5[/td][td]71.8[/td][td]70.5[/td][td]68.9[/td][/tr][/table]8.结语做碱性橙是时一些初步验证试验，望广大仪友指正交流。[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09510.gif[/img][align=center][/align]