微生物分析系统

、主题内容与适用范围： 本规程规定了VITEK全自动微生物分析系统的操作规程、安全要求和注意事项。本规程适用于VITEK全自动微生物分析系统。2、引用文件：《VITEK全自动微生物分析系统操作手册》3、操作规程：3.1开机：3.1.1先开电源、滤波器，然后开UPS、打印机、终端、读数器，最后开电脑。3.1.2等待屏幕出现　　biomerieux　　Login　　Password3.1.3在Login处键入SUPV按enter（回车键），在password处键入SUPV按enter（屏不显示）。3.1.4出现BioLIAISON主菜单（在主菜单的VITEK下点击），出现VITEK Status状态框，点击Reader， 出现Status和Print，点击Status。3.1.5 在读数状态窗口击process on钮。开始执行任务。3.2测试标本3.2.1标本的稀释：选取经纯培养18～24小时后，大小为3mm左右的待测菌落2～3个，置于装有1.8ml0.45%生理盐水的试管中进行稀释，用标准比浊计测菌液浓度（如浊度高加生理盐水，浊度低加菌落）。最后的菌液浓度必须达到测试卡所要求相应标准度。将试管放到样品架上。3.2.2卡片标记： 3.2.2.1从冰箱中取出测试卡，放置2～3分钟，使温度与室温相同。 3.2.2.2用vitek记号笔在“日”形图上写上编号，并在外实验结果标记处标记上外部测试实验结果（如氧化酶、触酶或凝固酶标记）。3.2.3卡片充样： 3.2.3.1将一弯曲的输样管装在测试卡上。 3.2.3.2将测试卡放在充样架上，输样管浸入装有待测菌液的标准管中。 3.2.3.3按充样器电源ON开关，约十秒钟后，READY灯亮，提示充样器为进入真空状态作好准备。 3.2.3.4将充样架插在充样板上，放入真空舱，关门。 3.2.3.5按FILL触点开关，约十秒钟后，READY灯灭，充样开始。 3.2.3.6充样完成后（约3分钟），READY灯再次亮。 3.2.3.7取出充样板，按充样电源OFF触点开关。3.2.4封卡： 3.2.4.1将封口塞的小圆头塞进孔中，旋转塞子的手柄端，使柄与头断开，小头留在孔中封住口。 3.2.4.2检查测试卡的各小室是否有气泡排除。3.2.5放卡入读数/恒温箱： 3.2.5.1检查一下阅读状态窗口，在确保读数器未进行卡片读数的情况下，打开读数/恒温箱的门，将测试卡按正确方向插入托架上的空位上，由高往下放（即最好按顺序依次排放），检查是否放正确。（必须确保测试卡位置正确，否则会损坏读数器）。 3.2.5.2关上读数/恒温箱的门。 3.2.5.3当在读数/恒温箱内放入任何新的测试卡后，都应等读数器读卡两次后，确保仪器工作正常。（如仪器进行测试工作期间，要不定时对仪器的状态进行检查。）。 3.2.5.4等待最后的测试结果。3.3关机程序：3.3.1先在读数器状态窗口击process off钮，待系统接受，退至主菜单。3.3.2击主菜单bioLIASON中system，再击system mainferace。3.3.3击Stop the system。3.3.4设置0-1’时间，通常设为“0”，点击“Execute”执行键（左下方的键），主机是否关闭可按键的“Num Luck”键，如此键无反应（看绿灯是否闪亮），无反应说明已关。3.3.5待屏幕消失5～10分钟后关机。3.3.6关机次序：先关电脑，再其他附件。3.4比浊计的用法：3.4.1用结晶紫调零，用水或盐水调100%的透光度。把装有结晶紫的试管插到样品孔中，把开关键打到ON键，旋转左键调透光度为0。把装有水或盐水的试管插到样品孔中，把开关键打到ON键，旋转右键调透光度为100%。3.4.2把悬浊液管插到样品孔中，测量它的透光度，假如透光度的读数超出所建议的范围，用加入菌液或盐水的方法，调节悬浊液，使它达到所需透光度范围。3.4.3每调十个样品必须重新调校。3.5CC2电脑故障：3.5.1故障现象：如果电脑的正常运作中断，在显示器上用户界面会发现以下故障：键盘无反应、鼠标无反应、主机故障。3.5.2解决方法：大部分故障都可用重新启动计算机的方法解决。如果确定电脑正常功能停止，执行再启动程序。如果系统不只是一个监测器，可以用快速检测来判断电脑是否处于故障状态。用其他系统的监测器检测是否有上述故障之一，假如其他监测器是有反应的，则主机是正常的，有可能是下列情况之一：　　（1）如果至少一个监测器有反应，联系厂家或经销商。　　（2）如果只有一个监测器或所有监测器都无反应，执行再起动程序。3.5.3电脑再起动程序： 3.5.3.1移动鼠标判断有无反应。 3.5.3.1.1如有反应，则见3.5.3.2。 3.5.3.1.2如无反应，则关闭电源，等至少15秒后，再开电源，再接5.3.5。 3.5.3.2进入系统维护窗口，点击Stop the System。 3.5.3.3Shut down窗口中有三步。 3.5.3.3.1Shut down INTERCTVELY？选择“NO”。 3.5.3.3.2RESTART the system after shutdown?选择“yes”。 3.5.3.3.3TIME the system goes down.选择“1”离开，选择“0”立即shut down。 3.5.3.4点击Execute键，电脑执行Shut down程序，当再启动开始时，在显示器上会出现一系列代码，这是正常的。当出现 biomerieux Login password再启动就完成了。　　第五步——第七步见开机部分。 3.5.3.8检查读数器的Directory窗口，如读数器不运行，选择要打印的初始或已完成的结果，点击print键开始打印。 3.5.3.9完成打印报告后，在reader status窗口中点击process on键。4、安全要求：4.1注意设备的表面和污染了的实验用品都是潜在的生物危险性物品。4.2如发现问题应及时通知保管人，不得随意拆动，不得带电维修保养。5、注意事项：5.1标记卡时要小心，否则会引起操作过程和结果的错误。5.2如果做过氧化酶和触酶实验，把实验结果标记在卡上，注意两者结果一致、标记方法一致。5.3所有卡在填充后须在15～20分钟内放入读数器。5.4注意一定要用比色计来测悬浊液，测十个样品后重新调核刻度。5.5使用Process On之前应等所有结果出来，否则会抹去卡上的所有结果。5.6预防稀释液的污染，不推荐使用混合盐水。5.7开机后如对话框10分钟内不出现，就按关掉计算机前部的AC POWER开关，让计算机关机15秒钟之后再重开。5.8senion上的滤网需两个人才能取出，一个人将孵育器倾斜，另一个人把它取出。电脑屏幕右上方的print和右下方的clock不能点击。5.9使用孵育器时先开主机电源（AC POWER）开关，再开电池开关，关机时刚相反。更换电池不必等到卡都做完，可在任何时候更换。

[size=4] 传统的微生物分离、鉴定方法操作繁杂，周期长，准确性差，灵敏度低，对实验室技术人员的专业技术、操作技能、工作经验要求极高，快速和准确获得细菌的鉴定及药敏结果是非常必要的。近年来随着计算机的发展及广泛应用，微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。先后出现了许多全自动细菌鉴定与药敏系统，比如VITEK 系统、MicroScan WaikAway系统、MicroScan AS-4 微生物分析仪、PHOENIXTM系统等。这些技术的应用，为医学微生物检验工作提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序，大大提高了细菌鉴定的准确性,在很大程度上提高了工作效率，但同时也应注意一些问题，本文对几种常用的鉴定系统在临床微生物检验中的应用情况做一综述。[back=rgb(243, 40, 255)]1 全自动微生物鉴定系统的基本原理 [/back] 全自动微生物鉴定系统是基于生物信息编码（数码）鉴定细菌的新方法。数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码，建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字（编码），查阅检索本或数据库，得到细菌名称。其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。 鉴定系统的工作原理因不同的仪器和系统而异。不同的细菌对底物的反应不同是生化反应鉴定细菌的基础，而试验结果的准确度取决于鉴定系统配套培养基的制备方法、培养物浓度、孵育条件和结果判定等。大多鉴定系统采用细菌分解底物后反应液中pH的变化，色原性或荧光原性底物的酶解，测定挥发或不挥发酸，或识别是否生长等方法来分析鉴定细菌。 药敏试验分析系统的基本原理是将抗生素微量稀释在条孔或条板中，加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育，通过测定细菌生长的浊度，或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解，观察细菌的生长情况。在含有抗生素的培养基中，浊度的增加提示细菌生长，根据判断标准解释敏感或耐药。[/size]

一家开心果生产企业是2004年建成投产的，投产初期，每次抽检的开心果微生物常规检测大肠菌群超标达800倍以上。开心果微生物检测不合格导致产品无法出口。针对微生物检测超标现象，检验检疫局与生产企业对造成微生物超标原因进行分析，并采取相应措施加以防范，收效明显。微生物超标原因分析从检测结果可以知道，未开口开心果原料和开口开心果原料由于外界环境和人工操作污染，导致微生物超标现象。调味水由于水温（35℃左右）偏低，导致微生物超标现象。开心果半成品由于经过烘焙，我们在烘焙箱直接抽取样品，烘焙温度保持在80℃，达到较理想的灭菌效果，因此微生物检测结果没有超标现象。虽然半成品微生物没有超标，但经过包装环节后，开心果成品检测结果却出现了微生物超标现象，显然污染主要来源是包装工序。我们经过现场调查，对各种因素进行分析，导致开心果成品超标原因如下：