霍乱双糖铁琼脂

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  • 【分享】三糖铁琼脂试验原理及结果对照

    1.原理分析 本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。用于观察细菌对糖的利用和硫化氢(变黑)的产生。 该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1,只能利用葡萄糖的细菌,葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。而发酵乳糖的细菌(e.coli),则产生大量的酸,使整个培养基呈现黄色。如培养基接种后产生黑色沉淀,是因为某些细菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氢,硫化氢和培养基中的铁盐反应,生成黑色的硫化亚铁沉淀。2.试验方法 以接种针挑取待试菌可疑菌落或者纯造就物穿刺接种并涂布于斜面置36±1℃造就18-24h观察结果3.化学性质   粉红色粉末,一种鉴别培养基,由牛肉膏、酵母菌膏、卵白胨、 胨、葡萄糖、乳糖、蔗糖、硫酸亚铁、氯化钠、硫代硫酸钠、酚红、琼脂等配合制造而成。易吸湿,加水煮沸熔解后成橘红色半透明液体,pH约7.5,冷至45℃开始凝固。

  • 细菌生化反应三铁琼脂

    三糖铁琼脂培养基( l )成分 蛋白胨 20g 硫酸亚铁 0.2g 牛肉浸出粉 5g 硫代硫酸钠 0.2g 乳糖 10g 002%酚磺酞指示液 12.5ml 蔗糖 10g 琼脂 12~15g 葡萄糖 1g 水 1000ml 氯化钠 5g ( 2 )制法 除乳糖、蔗糖、葡萄糖、指示液、琼脂外,取上述成分,混合,加热使溶解,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ,加入琼脂,加热溶胀后,再加入其余成分,摇匀,分装,121 ℃ 灭菌15 分钟,制成高底层(2 ~3cm ) 短斜面。( 3 )用途 用于初步鉴别肠杆菌科细菌对糖类的发酵反应和产生硫化氢试验。 方法和结果观察:取可疑菌落或斜面培养物,做高层穿刺和斜面划线接种,置35 ℃ 培养24~ 48 小时,观察结果。培养基底层变黄色为葡萄糖发酵阳性,斜面层变黄色为乳糖、蔗糖发酵阳性;底层或整个培养基呈黑色表示产生硫化氢。

  • 因食品污染所致的三起霍乱疫情

    “截至10月9日中午12点,确诊3例霍乱患者,1例带菌患者。所有的病人和密切接触者都已经采取了相应措施,病人病情比较稳定。”10月10日,卫生部新闻发言人邓海华在回答记者有关“湖北黄石霍乱”病例提问时表示。  事件起源于10月7日,有网友在东湖社区爆料称,湖北黄石大冶汪仁镇分水岭发生霍乱疫情,大冶汪仁镇分水岭第一例已被疾病预防控制中心确诊为霍乱弧菌感染,目前有发病症状的大概十余人,一名63岁女性病危,分水岭现已被封,疑似病人都被陆续转到市传染病医院。  此爆料一出,瞬间引发全民恐慌,人人谈“霍乱”色变。  因食品污染所致  在卫生部昨日召开的例行新闻发布会上,邓海华指出,对于霍乱,10月9日,湖北省卫生厅网站上已经进行公布。具体原因是,患者在某一酒店聚餐,酒店餐饮加工人员有一个带菌者,而且是负责加工凉菜。接到疫情报告以后,当地政府已经采取了大量工作,积极处置疫情。截至10月9日中午12点,确诊3例霍乱患者,1例带菌患者。  记者昨日登录黄石市卫生局网站看到,一则关于印发《2012年黄石市霍乱疫情防控工作方案》的通知赫然在列,通知部署了整个黄石市的霍乱防治工作。  在昨日举行的卫生部新闻发布会上,邓海华通报指出,湖北省卫生厅、湖北省食品药品监管局派专家组赶赴现场进行相关疫情的指导防控,黄石市相关地区也采取了隔离治疗病人、管理密切接触者、预防服药、环境消毒、应急监测、健康教育等措施,并加强了食品安全管理。  据介绍,目前疫情的处置正紧张有序地进行中。卫生部接到报告以后,立即核实了解情况,要求湖北省做好病例救治、疫情防控、密切接触者的密切观察和消毒处理等工作,派出国家级专家组,昨日早上也已赶赴现场指导工作。  有医药专家告诉《国际金融报》记者,霍乱疫情是中国传染病防治法规定的甲类传染病,主要是由O1血清群或者是O139血清群霍乱弧菌引起的急性传染病,经水、食物以及生活的密切接触传播,人群普遍易感。它的典型症状是水状腹泻,严重的可能导致脱水,甚至发展为循环衰竭,最终导致死亡。“近年来,我国的霍乱发病率已经非常低,并且都是轻症病例,临床以补液和抗菌治疗为主。”  三月已有3起病例  记者了解到,湖北省近三个月已经发生了三起霍乱疫情。8月25日至28日,湖北公安县发生一起由村民聚餐引起的霍乱疫情,确诊病例两例、健康带菌者四例,经救治病人病情稳定。事后认定系农民聚餐时加工了受污染的水产品所致。9月14日,湖北荆州市荆州区李埠镇一名50岁的农民确诊为霍乱病例,经救治临床痊愈。经调查,患者个人卫生习惯差、家庭居住环境不良与其发病有关。而第三起则为10月6日至9日黄石市发生的霍乱疫情,确诊霍乱病例3例,带菌者1例。  “俗话说,大灾之后必有大疫,但这不是绝对的,近期湖北集中出现三起霍乱疫情,值得重视。霍乱是典型的‘病从口入’传染病,市民一定要有良好的饮食习惯,注意卫生。”重庆中医药学会资深专家、教授周天寒告诉《国际金融报》记者,如果普通市民感染了霍乱,诸如藿香、柴胡、银花、鱼腥草、车钱草、黄苓等土生草药都有很好的治疗作用。  他介绍,藿香的全草一直被认为是对瘟疫预防与治疗功效强大的中药。如果有条件,患者也可自行服用藿香正气口服液、双苓止泻口服液等来减轻症状。  周天寒强调说,最近出现的霍乱疫情中,至今并未发现新的致病菌,所以不需要恐慌。“尽管霍乱疫情属于烈性传染病,普通人群中可能会存在隐性的感染者,好比感染甲肝病毒一样在体内产生抗体。”周天寒表示,与一般拉肚子症状有所不同,霍乱患者不会出现腹痛或发热的情况,但可能引发“喷射性水样腹泻”甚至是“米泔水样腹泻”的情况。  为此,有专家建议,一旦出现疑似症状,患者可在第一时间补充盐开水、米汤等液体,并及时到医院就诊,切莫自行服用止泻药物而延误治疗。而补液是最有效的治疗手段,对于绝大多数霍乱而言,无需使用抗生素就能康复。  【小贴士】  霍乱(cholera)是一种烈性肠道传染病,两种甲类传染病之一,由霍乱弧菌(Vibrio cholerae)污染水和食物而引起传播。临床上以起病急骤、剧烈泻吐、排泄大量米泔水样肠内容物、脱水、肌痉挛少尿和无尿为特征。严重者可因休克、尿毒症或酸中毒而死亡。在医疗水平低下和治疗措施不力的情况下,病死率甚高。  现在霍乱每年有550万人发病,12万人丧生。5岁以下儿童死亡病因中,霍乱占1/5。  霍乱弧菌对温热干燥抵抗力不强。耐碱不耐酸,在正常胃酸中仅存活4分钟,0.5%石炭酸中数分钟可致死。每立升含1mg余氯的水中15分钟致死,对常用浓度的肠道传染病消毒剂均敏感,1%漂白粉液内10分钟致死。对多西环素、链霉素、四环素、复方新诺明、诺氟沙星及氧氟沙星等药物均敏感。如果普通市民感染了霍乱,诸如藿香、柴胡、银花、鱼腥草、车钱草、黄苓等土生草药都有很好的治疗作用

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  • 新型水质分析方法 有助于震后地区检测霍乱毒素
    据世界卫生组织(WHO)的估算,全世界每年爆发300万到500万例霍乱感染,有10万到12万人因此丧命。海地发生大地震后,当地爆发的霍乱疫情已经造成3000人死亡,世界卫生组织此前警告该地的疫情仍将持续加重。   据英国工程师网站近日报道,美国中佛罗里达大学的科学家日前研制出一种新技术,可使地震救援人员能够检测出那些可能被霍乱毒素污染的水源。   在检测中,研究人员将葡萄聚糖涂在氧化铁纳米粒子上,然后将其加入水样。如果水样中有霍乱毒素,霍乱毒素将会附着在葡萄聚糖上,因为葡萄聚糖的化学结构与死于霍乱的死者肠道细胞表面上发现的霍乱毒素受体(神经节苷脂GM1)很相似。   研究人员认为,此项技术可能比现有的检测方法便宜,而且能更快地得到检测结果,有助于救援人员限制人们接触那些受污染的水源、抑制疾病的蔓延。   该项目的首席研究员、中佛罗里达大学助理教授曼纽尔佩雷兹说,“这真是太神奇了,这意味着我们掌握了一种更快速的诊断工具,而使用的则是简易并且相对便宜的葡萄聚糖与纳米粒子相结合的技术。”   研究人员表示,在那些卫生状况恶劣的国家,饮用水污染导致的疾病爆发往往是致命的。此外,生化恐怖活动或者食品污染也会带来致命的毒素。尽管还需要进行更多的研究证明该技术的可适用性,但是它已经显现出巨大的应用前景。
  • 只需一滴血 即可测癌症和霍乱
    据最新一期《美国化学学会期刊》报道,包括加拿大研究人员在内的国际团队研发出一种新型石墨烯传感器。该生物传感器不仅对检测霍乱毒素具有非常高的灵敏度,还能为癌症和其他传染病提供早期诊断。   表面等离子体共振(SPR)传感器是一种用于医学诊断的光学技术,具有很高的灵敏度和特异性。研究人员发现,添加石墨烯可导致SPR传感器信号倍增,从而使一个单分子超薄层即可锚定特定疾病信号。该传感器可在数分钟之内检测出霍乱毒素,相比之下,当前的检测技术则需要几小时甚至几天。该技术也可扩展到包括癌症在内的几乎任何疾病标志物的检测。   研究人员表示,除了更加快速,由于灵敏度的极大提高,该传感器亦可更容易地检测出较小量的生物标志物,从而为癌症和其他疾病的早期诊断和预后创造条件。这意味着,只需使用来自患者的一滴针刺血液样本,就可检测出疾病的生物标记。   SPR生物传感器明显要比标准的酶联免疫吸附试验(ELISA)具有更高的灵敏度,实验室生长的石墨烯证明要比之前使用的其他形式石墨烯更适合于开发新型传感器。被称为化学气相沉积的石墨烯生长技术可创建出几乎不含缺陷的大面积单层石墨烯,而石墨烯表面的均匀性则有助于传感器信号的放大。

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  • E-Gel® Imager凝胶成像仪NEWE-Gel® 凝胶成像系统可助您实现个人化琼脂糖凝胶记录和分析。您可以同时得到:一,台式仪器的小尺寸和可承受的价格优势;二,体积更大更复杂的凝胶成像系统的功能和特性。8 经济&mdash &mdash 最便宜的配备有科学级照相机的成像系统8 节省空间&mdash &mdash 适用于大多数实验台,轻便易移动8 使用简单&mdash &mdash 简单的设置和直观的软件,可对E-Gel® 凝胶或其它琼脂糖凝胶进行分析8 高质量图像&mdash &mdash 即便在运行过程中亦可捕获清晰丰富的图像,并可以采用功能强大的Gel Quant Express软件进行分析8 方便快捷&mdash &mdash 与其它体积较大的共享式系统相比,利用这台个人化的成像仪,您可以缩短等待时间并减少重编程设置了解更多,请登录
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  • 产品用途:适用于分离、制备DNA、RNA。产品特点:聚碳酸酯注塑成型,透明度高;可以制作四种不同规格的琼脂糖凝胶,制胶方便;凝胶托盘带有加样背景黑带和荧光标尺,便于加样和观察;透明上盖开孔式设计,便于散热;开盖断电,确保安全;下槽桥式设计,节省缓冲液;上盖具有限位功能,保证操作准确; 技术参数:电极铂金丝直径为0.3mm,纯度为99.95%,电场稳定;缓冲液量:约650 ml凝胶板规格(L×W):60×60mm;120×60mm(长胶);60×120mm(宽胶);120×120mm;外形尺寸:31x15x12cm样品梳:11+25齿(1.0mm厚);6+13齿; 8+18齿(1.5mm厚);2+3齿(2.0mm厚) ;双层水平电泳槽EPC SDY6产品用途:适用于分离、制备DNA、RNA。产品特点:一次可跑双层琼脂糖凝胶,使电泳效率提高一倍;槽体为高透明度PC材料,上盖开孔,便于散热和观察;凝胶托盘带有荧光标尺,便于观察分析;桥式设计结构,节省缓冲液;电极架可拆卸,方便清洗与更换;技术参数:凝胶数量:1—2块;凝胶托盘:1—2层,2层托盘之间为嵌入式结构,组合灵活方便;凝胶面积(L × W):100 × 70mm;加样梳规格:8齿、15齿,1.0、1.5mm(厚度);缓冲液容量:400ml左右;产品重量:0.5kg;外形尺寸:197 × 96 ×100mm;小型水平电泳槽EPC SDY2产品用途:适用于分离、制备DNA、RNA。产品特点:槽体为高透明度PC材料,上盖开孔,便于散热和观察;凝胶托盘带有荧光标尺,便于观察分析;桥式设计结构,节省缓冲液;电极架可拆卸,方便清洗与更换;技术参数:缓冲液容量:260ml;凝胶面积(L × W):100×70mm;加样梳规格:8齿、15齿,1.0、1.5mm(厚度);外型尺寸:27× 12 ×11cm ;
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  • 产品介绍:PureCube Rho1D4 Agarose是针对Rho1D4标签膜蛋白的亲和层析产品,Rho1D4是一种含有9个氨基酸的长链亲和标记物(TETSQVAPA),可用于高特异性亲和蛋白纯化。库柏生物的PureCube Rho1D4琼脂糖纯化树脂是为FPLC蛋白的纯化测定而制造的。具有Rho1D4标签的膜蛋白可以通过PureCube Rho1D4 Agarose,利用Rho-tag高特异性来纯化,它在蛋白质产量和纯度方面甚至胜过更常用的Flag-Tag标记。本产品由通过Rho1D4抗体进行功能化40 μm琼脂糖微球组成。德国Cube Biotech研发团队拥有逾40年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究经验,为您提供专用于膜蛋白纯化的Rho1D4系列高质量PureCube Rho1D4琼脂糖填料、磁珠和预装柱,以及具有较高流速XL琼脂糖同系列产品。产品优势:1)德国制造,欧美优质膜蛋白纯化产品供应商;2)膜蛋白纯化的理想解决方案,可以获得纯净且活性的膜蛋白;3)结合能力可高达3-4mg/mL;4)高度特异性纯化带有标签的重组膜蛋白;5)可重复再生使用;6)良好的流量分布和最小空隙体积;7)兼容常用的色谱仪器;8)配合Nanodisc使用,是目前非常有效的膜蛋白提取解决方案,数家科研院校正在使用;9)高性价比的膜蛋白纯化产品! 产品详解:对膜蛋白提取有高特异性和高产量每个批次的PureCube凝胶均是按照严格的质量标准体系生产并严格检验,以确保每一批分装的产品都有高的蛋白结合能力。通过与特异性抗原表位相互作用,辅以优化过的纯化操作步骤,能使目标蛋白在洗脱组分中有高产出量。图1是对CXC趋化因子受体4(CXCR4)的纯化溶于Fos-Choline-14的带标签蛋白通过大肠杆菌表达,再经由含PureCube Rho1D4琼脂糖的层析柱纯化。用Rho1D4多肽作为洗脱液,4次洗脱组分每毫升共收集到0.8mg、1.0mg、0.85mg和0.6mg目标蛋白。蛋白印迹结果说明CXCR4大约是65 kDa和35 kDa。这些条带是39.7 kDa膜蛋白的二聚体和单体。单体、二聚体的分离以及去除洗脱肽段,可以通过排阻层析的方法实现。 图1:用PureCube Rho1D4琼脂糖纯化CXCR4。大肠杆菌裂解液(TL)溶解在Fos-Choline-14中,溶解的组分(SF)与装有Rho1D4抗体的免疫亲和层析柱相结合。平衡组分中没有测得损失目标蛋白,经分光光度计测定,CXCR4在洗脱组分(E1-E4)中得浓度范围在0.6-1.0mg/mL。 蛋白表达系统纯度产率(所有回收蛋白)采取的纯化步骤hVN1R1G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%1mg/1g细胞Rho1D4 IAC+SECFPR3G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%2mg/6g细胞Rho1D4 IAC+SECTAAR5G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%1mg/9g细胞Rho1D4 IAC+SECOR131-2G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%2.9mg/10g细胞Rho1D4 IAC+centrifugationhOR17-4G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%7.5mg/2.5L培养物Rho1D4 IAC+SEChOR17-4G蛋白偶联受体无细胞小麦胚芽提取物70%*0.3mg/mL反应溶液*Rho1D4 IAC+SECCD81四次跨膜蛋白可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)>95%26μg/3×10^7个细胞Rho1D4 IACAE1溶质载体S.啤酒系BJ545793%2.5mg/18L培养物Rho1D4 IAC 表1:有文献报道的使用Rho1D4系统纯化膜蛋白的纯度和产率。尽管很多用Rho1D4系统纯化的膜蛋白均为G蛋白偶联受体家族,该系统也可以有助于辨别其他如转运体之类的膜蛋白。 IAC:免疫亲和层析;SEC:排阻层析。在20世纪80年代发现Rho1D4表位和配对抗体,当时通过将抗体偶联到Sepharose上来纯化在猴肾细胞中表达的牛视紫红质。自此,Rho1D4系统(标签,偶联抗体的亲和基质,洗脱肽)开始用于少量膜蛋白的纯化,包括G蛋白偶联受体(GPCR),ATP结合转运体,溶质反向转运体和一个四次跨膜蛋白。 图2:假设有3个跨膜域的膜蛋白。Rho1D4标签加到膜蛋白C端,它的序列是T-E-T-S-Q-V-A-P-A通过转基因修饰在目标膜蛋白的C端(或N端)加上Rho1D4标签(如图1)。一旦配有该序列,即可用装载有Rho1D4抗体的亲和基质捕获目标蛋白,并随后通过添加过量Rho1D4多肽,产生竞争性结合基质表面抗体来洗脱目标蛋白,用此方法洗脱比改变pH值等方式更加温和。Rho1D4系统的一大优势是抗体与表位相互作用特异性非常高。而其另一大优势是洗脱目的蛋白收率相当高。利用Rho1D4纯化的目标蛋白可用于功能性研究,如:配体结合的特性,蛋白与蛋白间的相互作用。*纯度是从低浓度经一步Rho1D4 IAC在反应溶液中得出的;产率是在洗脱成分浓缩并过SEC柱后计算。 技术参数:用途Rho1D4 (TETSQVAPA)标记蛋白的高特异性亲和纯化特异性与Rho1D4标记蛋白的亲和性特殊功能强烈推荐用于膜蛋白的纯化 结合力3-4 mg / ml 琼脂糖磁珠配体Rho1D4 抗体粒径大小40 μm螯合剂稳定性在含有10 mM DTT 和 1 mM EDTA的缓冲液中稳定 罐装量以 50?%悬浮液进行运送所需设备 裂解液 洗涤缓冲液 洗脱缓冲液 冰水浴 可用50?mL离心管的可预冷离心机 (最小转速 10,000 x g) 50?mL 离心管 微量移液枪和微量移液枪尖 一次性重力柱,带盖底出口,2ml pH计 回转摇床 SDS-PAGE缓冲液,试剂和设备 可选择:Western Blot试剂和设备 推荐流速和保存温度0.25-1.0mL/min,4℃相关产品:1. 所有PureCube系列琼脂糖产品均提供用于自动液相色谱系统(如:FPLC)的预装柱(提供1mL);2. 用于稀释样品或用于pull-down实验,我们推荐使用PureCube Rho1D4 Magbeads磁珠;3. Rho1D4抗体:这种抗体作为分离物质来生产PureCube的Rho1D4琼脂糖。也可以在Western Blot实验或者ELISA实验中检测rho-tagged蛋白;4. Rho1D4多肽:在洗脱缓冲液中,Rho1D4多肽竞争结合到亲和层析凝胶上然后释放标签蛋白,相对于改变洗脱液的pH值来说提供了更温和的洗脱环境。Cube Biotech 提供了一系列的Rho1D4肽段,这些肽段已经被PureCube Rho1D4琼脂糖验证;5. 配合Nanodisc产品使用,是有效的膜蛋白提取解决方案。6. Rho1D4多肽可以单独购买,也可以购买PureCube Rho1D4试剂盒套装。详情请参见订货信息以及公司官网。What our customers say:订购信息:33101PureCube Rho1D4 Agarose (1 ml)33102PureCube Rho1D4 Agarose (5 ml)33103PureCube Rho1D4 Agarose (10 ml)33301PureCube Rho1D4 Cartridge (1x1 ml)33305PureCube Rho1D4 Cartridge (1x5 ml)33199Rho Starter Set 1: PureCube Rho1D4 Agarose (1 ml) + Rho1D4 peptide (5 mg)33299Rho Starter Set 2: PureCube Rho1D4 MagBeads (1 ml) + Rho1D4 peptide (5 mg)33399Rho Starter Set 3: PureCube Rho1D4 Cartridge (1x1 ml) + Rho1D4 peptide (5 mg)16201Rho1D4 peptide (5 mg)16203Rho1D4 peptide (25 mg)40020Rho1D4 Antibody (200 μg)
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