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台式细胞观测仪

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台式细胞观测仪相关的论坛

  • 国产光学显微镜龙头企业入局电镜赛道:台式电镜产品正推向市场

    2月8日,有投资者在互动平台向麦克奥迪(SZ300341)提问:“你好,请问贵公司有生产电子显微镜产品吗?”[color=#0070c0][b]麦克奥迪表示,公司目前有台式电镜产品正逐步推向市场。[/b][/color]据麦克奥迪MOTIC全系列显微镜的河南省总代理消息显示,[size=18px][b]“[/b][/size]麦克奥迪(Motic)发布了最新研发的台式扫描电镜(Scanning Electron Microscope,简称SEM),这一突破性的技术为科研工作者和工业界带来了更高效、更精准的微观观测解决方案。这款新型台式扫描电镜采用了先进的电子光学技术和图像处理算法,实现了高分辨率和高灵敏度的观测。相较于传统的扫描电镜,新款台式扫描电镜具有更高的稳定性和耐用性,能够满足长时间连续观测的需求。麦克奥迪的台式扫描电镜在设计上充分考虑了用户体验,其简洁直观的操作界面和智能化的功能设置使得用户能够快速上手。此外,该电镜还支持多种样品台,适用于各种不同类型的样品观测。该产品的推出对于科研和工业领域具有重要意义。在生命科学领域,研究人员可以利用台式扫描电镜观察细胞和组织的细微结构,深入了解生命过程的奥秘。在医学领域,医生可以利用该设备进行病理诊断和药物研发,提高疾病诊断的准确性和治疗的有效性。在材料科学和工程领域,研究人员可以利用台式扫描电镜观察材料的微观结构和性能,为新材料的研发和应用提供有力支持。麦克奥迪的台式扫描电镜以其卓越的性能和广泛的应用前景,将为科研和工业界带来更多的创新和突破。我们期待这款产品能够在未来的科学研究、工业生产和科技进步中发挥更大的作用。[size=18px][b]”[/b][/size][align=center][img=company_pic.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202402/uepic/d276a930-c505-4c89-99af-d1c1ec906276.jpg[/img][/align]记者从麦克奥迪官网(MOTIC)获悉,麦克奥迪实业集团有限公司始创于1983年,目前系北京亦庄投资控股有限公司混改所有制企业、深证交易所创业板上市公司麦克奥迪(厦门)电气股份有限公司100%全资控股的企业集团。主要从事光学显微镜的研发、生产和销售,主要产品以数码显微镜、显微图像集成系统和自动显微镜为代表。三大类型产品包含近百个型号,主要包括MOTIC、SWIFT、NATIONAL、CLASSICA等品牌。[来源:仪器信息网] 未经授权不得转载[align=right][/align]

  • 【分享】台式低速大容量离心机使用说明

    台式低速大容量离心机广泛应用于医药卫生、环保、农业、畜牧业等教育科研和生产部门。适用于沉析,混合物分离等。本机采用无刷电机,微机控制,具有RCF自动计算与设定。设有多种程序保护,操作简便,免维护等优点。 离心分离技术是根据颗粒在一个实用离心场合中的状态而发展起来的新技术。不同密度,大小或形状的颗粒在不同的离心场合中沉降,所以一个大体是球形非均一的混合物,可以用离心的方法加以分离,离心机是为了进一步研究生物化学,分离大量的物质。例如收集细胞,分离血浆,从这些预纯化的制剂中分离DNA和蛋白质分子,并可分离出病毒以及大规模大肠杆菌,严细胞成分,核蛋白微粒等。 台式低速大容量离心机 主要技术指示: 1:使用电源: 交流220V±10v 50HZ 2:整机功率: 500W 3:转 速: 500-5000转/分±50转/分 可调 数字显示 4:离心容量: 8×50ml 28×10ml 4×100ml 2×400ml 4×250ml 36×10ml 5:相对离心力:4390xg数字显示 6:外型尺寸: 420×460×320(mm) 7:定 时: 1—99分钟数字显示 8:重 量: 48kg 9:噪 音:≤65db最大转速时

  • 低速离心机分离法用于细胞分离

    [url=http://www.hexiyiqi.com/]离心机[/url]是一种结构复杂的高速旋转机械,它是利用离心力,不同物质在离心场中沉淀速度的差异,对混合溶液进行快速分离的专门设备,是一种将装有样品溶液的离心管、瓶或袋通过离心机转子置于离心轴上,利用转头绕轴高速旋转所产生的强大离心力,使样品中不同性质颗粒相互分离的特殊装置。可以实现样品的分析、分离。从转速看,台式离心机基本属于低速、高速离心机的范畴,因此,具有低速、高速离心机的特点。与落地式离心机相比,只不过只是尺寸和容量小一些。[align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/69.html][b][img]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/0e080cd46b2ee061b55caabaaee8cbf2.jpg[/img][/b][/url][/align][align=center][b]台式低速离心机TD5A[/b][/align]离心机的式样和型号很多,有国产的和进口的,按用途可分为分析式离心机和制备式离心机;按转速可划分为:普通离心机(低速)80000r/min;特定细胞株的功能、行为和生化特性的分析在现有技术水平上只能通过相对纯的细胞株才能弄清,然而从组织、血液和其它体液标本中获得的细胞都是不同类型细胞的混合物,并且不同细胞或同一细胞株的不同周期与其它细胞相比,其代谢过程、生物特性和理化参数大多都有差异。细胞分离技术包括离心技术、流式细胞术和细胞电泳。离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体,以及各种大分子基本手段。流式细胞术是对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术。细胞电泳是指在一定PH 值下细胞表面带有净的正或负电荷,能在外加电场的作用下发生泳动。分离不同细胞株的方法概括起来可分为两大类:一是:根据细胞的物理学特性差异分离,包括低速离心机分离法、物理吸附法、凝胶色谱法和细胞电泳法等 二是:根据细胞的生物学特性差异分离,包括花环形成法和单层细胞免疫吸收法等。在诸多分离方法中,[url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/]低速离心机[/url]分离法根据细胞大小和密度进行分离,分离介质选择广泛,原理简单,对细胞损伤小,可适用于各种不同的研究目的,已成为生物学实验室最常规的分离工具。[align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/disulengdonglixinji/2013-06-15/228.html][b][img=台式低速冷冻离心机,550,550]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2019-05-14/73cd477dd28d613eb3c077a58b94614a.jpg[/img][/b][/url][/align][align=center][b]台式低速冷冻离心机TDL5M[/b][/align]

  • 台式低速大容量离心机使用说明及注意事项

    离心分离技术是根据颗粒在一个实用离心场合中的状态而发展起来的新技术。不同密度,大小或形状的颗粒在不同的离心场合中沉降,所以一个大体是球形非均一的混合物,可以用离心的方法加以分离,离心机是为了进一步研究生物化学,分离大量的物质。例如收集细胞,分离血浆,从这些预纯化的制剂中分离DNA和蛋白质分子,并可分离出病毒以及大规模大肠杆菌,严细胞成分,核蛋白微粒等。[url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/][b]台式低速离心机[/b][/url]广泛应用于医药卫生、环保、农业、畜牧业等教育科研和生产部门。适用于沉析,混合物分离等。本机采用无刷电机,微机控制,具有RCF自动计算与设定。设有多种程序保护,操作简便,免维护等优点。[b]台式低速大容量离心机使用方法:[/b]首先将本机所配离心管加入需分离的物资,分别插入离心头孔中,每支离心管所加物质的质量必须基本相等,合上盖板,接通电源,打开电源开关(仪器后面)。 1:按选择键根据显示屏的指示,再用▲▼键选择好所需要的转子号。 2:再按选择键根据显示屏的指示,再用▲▼键选择好所需要的速度。 3:再按选择键根据显示屏的指示,再用▲▼键选择好所需要工作时间 。 4:按认可键,再按启动键,此时离心机即开始工作。当到达设定的工作时间时会自动发出报警声。[align=center][img=台式低速离心机TD5A]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/0e080cd46b2ee061b55caabaaee8cbf2.jpg[/img][/align][align=center][b]台式低速离心机TD5A[/b][/align][b]台式低速大容量离心机注意事项: [/b]1:严禁各种液体或其他杂物进入离心工作室内。否则回损坏主机。 2:仪器外壳应妥善接地,以免整机受潮影响而发生意外。 3:离心头在高速运转时请不要随意打开上盖。台式低速大容量离心机维修及配件: 在使用该离心机时如发现离心头偏心,请专业维修人员进行查修,首先取下转子再打开底盖,查看电机支柱是否偏位,进行调整即可。[b][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/disulengdonglixinji/]低速低温离心机[/url]使用说明及注意事项[/b]一、使用说明:1 此仪器无论何时使用,需经管理员同意 2 每次仪器使用都需登记 3 离心样品密度要相同,样品体积要求离试管口3mm处 4. 打开仪器电源开关,按下开盖键,打开离心机上盖.5.将配平、密度相同、管壁干燥的离心管对称放入转子里面 6.旋紧转头盖 7. 手按住指定位置将门盖压下去;8.设置离心参数:转头型号、转速、温度、时间,升降速度频率;9.参数设置确认无误,按ENTER,START;10.离心机达到设定转速5分钟后,使用者方可离开。离心中途需观察仪器运转是否正常;11.离心结束(或按STOP结束运行),转头停止运转后,打开门盖,旋松转头盖,将转头取 出放到专用架上;12.取出转子,旋松盖帽,将样品取出;13.关闭仪器电源;14.腔体内冷凝水擦净;15.腔体温度与室温相同时关闭门盖;16.冷冻离心需要预冷时,离心机在所需温度下每分钟2000转离心3-5分钟;[align=center][img=台式低速冷冻离心机TDL6M]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-26/7ac98cd01d7b0308221d2cffc3b06c8a.jpg[/img][/align][align=center][b]台式低速冷冻(低温)离心机TDL6M[/b][/align][b]二、低速低温离心机注意事项[/b]1.仪器使用前请详阅此说明书,以免误操作。2.将仪器安放在坚固平整的台面上,以免运转时产生不必要的麻烦。3.离心机盖板上面不能堆物,以免压坏或出现高低不平,影响仪器的使用效果。4.仪器在高速旋转时切不随意打开盖门。5.电源线的插头,一端插入仪器背面的插座内,另一端与外电网插座连接。注:仪器不用时,请将与外电网相连的一端卸下。6.仪器在操作时必须遵守操作程序中第5条的规定,否则会使电机烧坏,无法使用。7.使用前必须经常检查离心管是否有裂纹,老化等现象,如有应及时更换。8.使用完毕,将转头和仪器擦干净,以防试液沾污而产生腐蚀。9. 当电机碳刷长度小于6mm时必须及时更换。

  • 想用电镜直接观测细胞静息电位下的离子分布情况,能实现吗?

    各位大大们好。刚刚开始从纸面上接触电镜这一块,下周就可以去亲身操作了。就想简单了解下,能否通过电镜直观察到细胞静息电位状态下细胞内和细胞外液中所含钠、钾、钙等金属离子的具体分布位置。有没有什么方法可以让电镜下只有钠钾钙离子成像而同时细胞胞器、氨基酸等有机物什么的不成像。

  • 胎盘干细胞

    胎盘亚全能干细胞定义:   亚全能干细胞自胚胎形成的第5到7天开始出现,能分化形成200 多种人体组织器官细胞,但不能形成一个完整的人体。胎盘亚全能干细胞是来源于新生儿胎盘组织的一族亚全能干细胞,其在发育阶段与胚胎干细胞接近,具备分化形成三个胚层的组织细胞的能力,但不会形成畸胎瘤。   胎盘亚全能干细胞的主要特性与功能:   胎盘亚全能干细胞是取自胎盘组织的一类亚全能干细胞,胎盘亚全能干细胞具有以下特性:   1. 具有强大的增殖能力和多向分化潜能,在适宜的体内或体外环境下具有分化为间充质干细胞,上皮干细胞、神经干细胞、肝干细胞,肌细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。可以用来修复受损或病变的组织器官,治疗心、脑血管疾病、神经系统疾病、肝脏疾病、骨组织病、角膜损伤、烧伤烫伤、肌病等多种疾病。   2.具有免疫调节作用,通过负性免疫调节功能,抑制机体亢进的免疫反应,使机体免疫功能恢复平衡,从而可以用来治疗造血干细胞移植之后的免疫排斥反应以及克隆氏病、红斑狼疮,硬皮病等自身免疫系统疾病。   3.胎盘亚全能干细胞定向培养的间充质干细胞是人体微环境的重要组成部分,移植间充质干细胞可以改变造血微环境,重建免疫系统,促进造血功能恢复,与造血干细胞共移植能显著提高白血病和难治性贫血等的治疗效果。   4.具有来源方便,细胞数量充足,易于分离、培养、扩增和纯化,传代扩增30多代后仍具有干细胞特性。   胎盘亚全能干细胞的用途:   胎盘作为理想的亚全能干细胞来源,在抗衰老及疾病治疗领域显示了其独特的功能,治疗疾病种类如下:   心脑血管系统疾病   糖尿病   肝肾损伤   脑及脊髓神经损伤   自身免疫性疾病   移植物抗宿主病   与造血干细胞共移植治疗血液病   缺血性血管病   肺及其它组织器官纤维化   抗衰老,恢复健康体态   胎盘亚全能干细胞的储存流程:   在新生儿娩出、胎盘剥离子宫排出后,由接生的医生尽快按照干细胞库胎盘标准采集规程进行胎盘的采集,然后放置在干细胞库特定的装置工具中,在限定时限内运送到干细胞库,由专业的技术人员进行亚全能干细胞的分离、提取、培养、检测等技术流程,直到根据最终检测结果来确认所获得的干细胞是否具有长期保存的价值。   保存和期限   目前国际上通用的干细胞保存技术是将获得的干细胞储存在-196℃深低温状态,医学研究与临床实践证明保存一百多年的细胞仍然具有活性。干细胞保存已有几十年的历史,胎盘干细胞库在与客户签订的合同期限内对干细胞库中所保管的胎盘亚全能干细胞活性负责。   安全性   胎盘的采集简便易行,不会引起母亲和新生儿任何不适的感觉或产生任何不良的影响。过去胎盘通常作为废物丢弃,而从胎盘中提取亚全能干细胞进行保存,是宝贵的生命资源再生。   而干细胞行业数据显示,胎盘亚全能干细胞基因稳定、不易突变,动物实验证明无致瘤性,使用安全可靠,对适应症范围疾病治疗效果好,优于传统医疗手段。   胎盘亚全能干细胞的优势   1.取材方便,原料来源充足,是生命资源的再生。   2.分化能力强可以定向诱导分化为间充质干细胞、血管干细胞、上皮干细胞、神经干细胞和肝干细胞等多种干细胞。   3.数量充足,使用方便,增殖能力强,培养后数目可达10亿,可以供多人多次使用。   4.在人群中使用不需要配型,不会产生免疫排斥反应,同时,血缘关系越亲近,生物利用度会越高,使用的效果越好。   5.治疗疾病范围广,抗衰老,恢复健康体态,心脑血管系统疾病,糖尿病,肝肾损伤,脑及脊髓神经损伤,自身免疫性疾病,移植物抗宿主病等多种疾病。

  • 【原创大赛】【流式细胞仪系列之四】光源介绍

    LASER是light amplification by stimulated emission ofradiation.的缩写。意为“受激发射的辐射光放大”。1964年按照我国著名科学家钱学森的建议将“光受激发射”改称“激光”。 本特利流式细胞仪中使用的氩离子激光器是一种固体激光器。这种激光器的特点是频率稳定性高,相干性好,寿命长。激光是这样产生的:当高压放电激发电子,电子吸收能量跃迁到高能级,然后在短时间内释放光子,回到基态。等离子管末端的光学系统来回反射光子。这些光子与其它受激电子相互作用,释放出更多与其波长、相位、方向相同的光子,随着光子数量的增加,光信号得到放大产生激光,并通过放电管尾部的布鲁斯特窗产生偏振,以最小损耗率传送。我们在等离子管周围加一磁场,对带电粒子起约束作用,以提高放电区中心的电子密度和离子密度,从而提高了输出功率。 目前台式机FCM,大多采用氩离子气体激光器。激光(laser)是—种相干光源,它能提供单波长、高强度及稳定性高的光照,是细胞微弱荧光快速分析的理想光源。由于细胞快速流动,每个细胞经过光照区的时间仅为1μs左右,每个细胞所携带荧光物质被激发出的荧光信号强弱,与被照射的时间和激发光的强度有关,因此细胞需要足够的光照强度。 激光光束在达到流动室前,先经过透镜将其聚焦,形成几何尺寸约为22μm×66μm,即短轴稍大于细胞直径的光斑。这种椭圆形光斑激光能量分布属正态分布,为保证样品中细胞受到的光照强度一致,须将样本流与激光束正交,且相交于激光能量分布峰值处。 激光光束在到达流动室前,先经过透镜,将其聚焦,形成短轴稍大于细胞直径的光斑。这种椭圆形光斑激光能量分布属正态分布,为保证样品中细胞是一个一个分别受到光照并且受照强度十分一致,须将样本流与激光束正交且相交于激光能量分布峰值处。光路调节通过仪器光学部分三个旋钮调节,对用户是相对封闭的,即安装时由工程师调试完毕后,不推荐用户作任何调节。

  • 细胞培养实验室常用的基本仪器设备-离心机

    [b][font=宋体]细胞培养实验室组建的基本要求[/font]:[/b]1[font=宋体]、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。[/font]2[font=宋体]、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。[/font]3[font=宋体]、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,为[/font]10[font=宋体]万级洁净环境的洁净室。而洗刷消毒工作设在洁净室外,避免物品污染洁净室内环境。细胞洁净室需要一个空调系统并对外界保持一定的正压。[/font]4[font=宋体]、解剖实验室主要用于对器官组织的分离,需要有无菌操作台、解剖显微镜、各种手术器材等。[/font] [align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/shiyanshilixinji/2018-10-12/301.html][img=实验室离心机]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2019-05-14/4b60dacaa256bcc4fe665e2eb3536c0a.jpg[/img][/url][/align][align=center][b]智能台式高速冷冻实验室离心机 3H24RI[/b][/align][font=宋体]组织细胞培养室除一般实验室的普通常规设备外,尚有一些特殊需要的设备。基本可分为两大类:[/font][font=宋体]第一类为常用的基本设备;[/font][font=宋体]第二类为较高级的特殊设备。[/font][b]1. [font=宋体]细胞培养实验室常用的基本仪器设备[/font]1.[font=宋体]显微镜:[/font][/b][font=宋体]倒置显微镜——是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。[/font][b]2.[font=宋体]培养箱:[/font][/b][font=宋体]体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多数情况下,最适温度是[/font]37[font=宋体]℃,温差变化一般不应超过±[/font]0.5[font=宋体]℃,细胞在温度升高[/font]2[font=宋体]℃[/font] [font=宋体]时,持续数小时即不能耐受,[/font]40[font=宋体]℃以上将很快死亡。因此需要有能控制温度的培养箱,如具有较高灵敏度的恒温培养箱及[/font]CO2[font=宋体]培养箱。[/font][b]3.[font=宋体]干燥箱:[/font][/b][font=宋体]用于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。[/font][b]4.[font=宋体]水纯化装置:[/font][/b][font=宋体]细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水:即使是用于玻璃器皿的冲洗,也应使用二次以上蒸馏水。[/font][b]5.[font=宋体]冰箱:[/font][/b][font=宋体]细胞培养室必须配备。[/font]a[font=宋体]、普通冰箱或冷藏柜——储存培养液、生理盐水等培养用的物品及短期保存组织标本。[/font]b[font=宋体]、低温冰箱([/font]-20[font=宋体]℃)——用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂,如酶、血清等。[/font][b]6.[font=宋体]细胞冷冻储存器:[/font][/b][font=宋体]储存器常用的是液氮容器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小,取放使用方便及液氮挥发量(经济)三种因素。[/font][b]7.[/b][font=宋体][url=http://www.hexiyiqi.com/][b]离心机[/b][/url][b]:[/b]进行细胞培养时,常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作,通常需要使用[url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/shiyanshilixinji/]实验室离心机[/url]。一般可常规配置[/font]4000rpm[font=宋体]的国产台式离心机,例如细胞沉降,使用[url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/]低速离心机[/url]即可,离心力过大有时可能引起细胞的损伤。[/font][align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/69.html][img=低速离心机]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/0e080cd46b2ee061b55caabaaee8cbf2.jpg[/img][/url][/align][align=center][b]台式低速离心机TD5A[/b][/align][b]8.[font=宋体]天平:[/font][/b][font=宋体]常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。[/font][b]9.[font=宋体]消毒器:[/font][/b][font=宋体]一般为高压蒸汽灭菌锅,直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。[/font][b]10.[font=宋体]滤器:[/font][/b][font=宋体]目前细胞培养工作中采用的培养用液,包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质,这些物质在高温或射线照射下易发生变性或失去功能,因而上述液体多采用滤过消毒以除去细菌。目前常使用的滤器有玻璃滤器和微孔滤器,各种滤器有其使用原理和特点。[/font][b][font=宋体]常用的培养器皿:[/font][font=宋体]培养用器皿[/font][/b][font=宋体]是[/font][font=宋体]供细胞接种、生长等用的器皿,可由透明度好、无毒的中性硬质玻璃或无毒而透明光滑的特制塑料制成。[/font][font=宋体]细胞培养中需要的各种耗材[/font],[font=宋体]各类细胞培养板,细胞培养瓶,平皿移液管等。[/font][b][font=宋体]培养瓶[/font][/b][font=宋体]:由玻璃或塑料制成。主要用于培养、繁殖细胞。进行培养时培养瓶瓶口加盖螺旋瓶盖或胶塞,胶塞多用于密封培养。国产培养瓶的规格以容量([/font]ml[font=宋体])表示,如[/font]250ml[font=宋体]、[/font]100ml[font=宋体]、[/font]25ml[font=宋体]等;进口培养瓶则多以底面积([/font]cm2[font=宋体])表示。[/font][b][font=宋体]培养皿:[/font][/b][font=宋体]由玻璃或塑料制成,供盛取、分离、处理组织或做细胞毒性、集落形成、单细胞分离、同位素掺入、细胞繁殖等实验使用。常用的培养皿规格有[/font] 10cm[font=宋体]、[/font]9cm[font=宋体]、[/font]6cm[font=宋体]、[/font]3.5cm[font=宋体]等。[/font][font=宋体]多孔培养板:为塑料制品。可供细胞克隆及细胞毒性等各种检测实验使用。其优点是节约样本及试剂,可同时测试大量样本,易于进行无菌操作。培养板分为各种规格,常用的规格有:[/font]96[font=宋体]孔、[/font]24[font=宋体]孔、[/font]12[font=宋体]孔、[/font]6[font=宋体]孔、[/font]4[font=宋体]孔等。[/font][b][font=宋体]培养操作有关的器皿[/font][font=宋体]贮液瓶:[/font][/b][font=宋体]常见的为蓝盖瓶,主要用于存放或配制各种培养用液体如培养液、血清及试剂等。贮液瓶分为各种不同规格,如[/font]1000ml[font=宋体]、[/font]500ml[font=宋体]、[/font]250ml[font=宋体]、[/font] 100ml[font=宋体]、[/font]50ml[font=宋体]、[/font]5ml[font=宋体]等。[/font][b][font=宋体]吸管:[/font][/b][font=宋体]主要分为刻度吸管、无刻度吸管。刻度吸管主要用于吸取、转移液体,常用的有[/font]1ml[font=宋体]、[/font]2ml[font=宋体]、[/font]5ml[font=宋体]、[/font]10ml[font=宋体]等规格。无刻度吸管分为直头吸管及弯头吸管,除可以作吸取、转移液体外,弯头尖吸管还常用于吹打、混匀及传代细胞。[/font][b][font=宋体]加样器([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url])[/font][/b][font=宋体]:分为微量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]电动[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]。用于吸取、移动液体或滴加样本。可根据需要调节量的大小,吸量准确、方便。可保证实验样品(或试剂)含量精确,重复性良好。[/font][b][font=宋体]其他用品:[/font][/b][font=宋体]尚有收集细胞用的离心管,放置试剂或临时插置吸管用的试管,装放吸管以便消毒的玻璃或不锈钢容器,用于存放小件培养物品便于高压消毒的铝制饭盒或贮槽,套于吸管顶部的橡胶吸头,封闭各种瓶、管的胶塞、盖子、冻存细胞用的安瓿或冻存管、不同规格的注射器、烧杯和量筒以及漏斗,超净工作台使用的酒精灯,供实验人员操作前清洁消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型喷壶等。[/font][b][font=宋体]器械[/font][/b][font=宋体]主要用于解剖、取材、剪切组织及操作时持取物件。常用的有:手术刀或解剖刀、手术剪或解剖剪(弯剪及直剪),用于解剖动物、分离及切剪组织,制备原代培养的材料;眼科虹膜小剪(弯剪或直剪),用于将组织材料剪成小块;血管钳及组织镊、眼科镊(弯、直),用于持取无菌物品(如小盖玻片)夹持组织等;口腔科探针或代用品,用以放置原代培养之组织小块。[/font][b]2[font=宋体]、细胞培养实验室特殊设备[/font][/b][font=宋体]细胞培养实验室除了应配备上述的常用基本设备以外,如有条件,可添置一些特殊或先进的设备仪器,以便更有效、更精确、更深入地进行实验室工作。例如:[/font][font=宋体]([/font]1[font=宋体])酶联免疫检测仪——可用于进行免疫学测定及细胞毒性、药物敏感性检测等。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])[/font] [font=宋体]超低温冰箱([/font]-80[font=宋体]℃)——便于储存某些试剂及标本。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])旋转培养器——用于某些特殊细胞或需要收获大量细胞的培养。[/font][font=宋体]([/font]4[font=宋体])[/font] [font=宋体]荧光显微镜——进行荧光染色样本的观察。[/font][font=宋体]([/font]5[font=宋体])[/font] [font=宋体]流式细胞仪——可更精确及快速检测细胞。[/font][font=宋体]([/font]6[font=宋体])用于检测细胞培养条件的各种仪器,例如专门为快速分析细胞培养基中主要或关键营养成分、代谢产物及气体含量设计的多功能细胞培养分析仪、手提式[/font]CO2[font=宋体]浓度测定仪等。[/font][b][font=宋体]其余仪器[/font][/b][font=宋体]对于细胞实验还可能需要振荡器及磁力搅拌器用于混匀液体;还有一些沾满细胞的难清洗的不锈钢类或玻璃类器皿,则需要超声波清洗机的帮助;如果涉及免疫实验,肯定需要冰浴,碎冰的需求量大的话,则需要购买制冰机;另外破碎细胞可能会需要超声波细胞破碎仪;[/font]

  • 流式细胞术详解 1-5章节

    95%。在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学、分子生物学等学科广泛应用。国内使用的流式细胞仪主要由美国的两个厂家生产:BECKMAN- COULTER公司和Becton-Dickinson公司(简称B-D公司)。流式细胞仪主要有两型:临床型(又称小型机、台式机)和综合型(又称大型机、分析型)。BECKMAN-COULTER公司最新产品为EPICS ALTRA和EPICS XL/XL-MCL, B-D公司最新产品为FACS Vantage和FACS Calibur。EPICS XL/XL-MCL和FACS Calibur是临床型;EPICS ALTRA和 FACS Vantage是综合型,除具备检测分析功能外,还具有细胞分选功能,多用于科学研究。二.流式细胞仪主要技术指标 1.流式细胞仪的分析速度:一般流式细胞仪每秒检测1000~[

  • 图文解说流式细胞仪及其技术应用

    4.1 流式细胞仪基本原理1. 生物学颗粒分析原理① 流式细胞技术是在单细胞水平上,对于处在快速直线流动状态中的大量细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选的技术,现已成为现代医学研究最先进的分析技术之一。应用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行快速的、多参数的定量分析和分选的技术称为流式细胞术。② 生物学颗粒包括大的免疫复合物、DNA、RNA、蛋白质、病毒颗粒、脂质体、细胞器、细菌、霉菌、染色体、真核细胞、杂交细胞、聚集细胞等,所检测的生物颗粒的理化性质包括细胞大小、细胞形态、胞浆颗粒化程度、DNA含量、总蛋白质含量、细胞膜完整性和酶活性等。③ 流式细胞仪是以激光为光源,集流体力学技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。 ④ 流式细胞仪是在荧光显微镜技术、血细胞计数仪和喷墨技术的基础上发展起来的。⑤ 鞘液和样品流在喷嘴附近组成一个圆柱流束,与水平方向的激光束垂直相交,染色的细胞受激光照射后发出荧光,这些信号分别被光电倍增管荧光检测器和光电二极管散射光检测器接收,经过计算机储存、计算、分析这些数字化信息,就可得到细胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性质等物理和生化指标。2. 流式细胞仪细胞分选原理在压电晶体上加上频率为30kHz的信号,使液柱断裂成一连串均匀的液滴。当某类细胞的特性与要分选的细胞相同时,流式细胞仪就会在这类细胞形成液滴时给含有这类细胞的液滴充以特定的电荷,带有电荷的液滴向下落入偏转板间的静电场时,依所带电荷的符号分别向左偏转或向右偏转,落入指定的收集器内,从而达到细胞分类收集的目的。4.2 流式细胞仪的分类和基本结构1. 流式细胞仪的分类流式细胞仪根据功能不同可分为临床型(亦称台式机)和科研型(亦称大型机)。流式细胞仪根据其结构不同又可分为一般流式细胞仪和狭缝扫描流式细胞仪。http://www.care100.com/yqxjpkc/images/112.gif

  • GS-Smart小型自动凝胶染色仪与台式水平脱色摇床在CBB染色法中的应用对比

    GS-Smart小型自动凝胶染色仪与台式水平脱色摇床在CBB染色法中的应用对比台式水平脱色摇床是生物学实验室常见的仪器设备,常用于普通凝胶电泳条带固定、考马斯亮蓝(CBB)染色脱色、硝酸银染色、蛋白质免疫印迹(Western Blot)、细胞培养和放射自显影等实验中。一般的台式水平脱色摇床主要是通过调节定幅载具的摆动频率,从而控制样品在溶液中的摆动快慢,这既是该仪器的基本工作原理,也是她在以上实验中主要发挥的作用。在普通考马斯亮蓝染色、脱色实验中,台式水平脱色摇床就是科研工作者们经常会用到的设备。一般是设定工作池的摇摆频率后,先后加入CBB染色液、脱色液,使摇床工作池持续摇摆,再置入蛋白凝胶使其在摇摆的液体中充分浸润洗涤,从而实现染色脱色。但一般的台式水平脱色摇床除了工作池的摆动频率可调外,没有其他参数能设置,虽然某些型号摇床还增加了定时功能,但也无法设置自动完成复杂的步骤。因此,前期进液、换液和排液都需要实验人员手动操作,另外,染色、脱色时间也只能靠实验人员自己把握。再者,台式水平脱色摇床的工作池一般裸露在外,摇摆过程中,有可能溅出溢出CBB染色液、脱色液,还有可能挥发出有毒化合物。这样不仅容易造成污染,甚至可能产生安全隐患,进而危害实验人员的健康。相比之下,鼎昊源GS-Smart小型自动凝胶染色仪无论在功能上、设计上还是外观上均领先台式水平脱色摇床,例如:1.智能编程功能:GS-Smart内置3种标准的染色程序,可编程存储47个自定义程序,可以轻松实现进液、换液、出液、定时摇动和废液回收等步骤,无人值守,让实验全程自动完成,这将为那些还在使用传统台式水平脱色摇床做CBB染色脱色实验的科研工作者们节省大量时间精力。2.可封闭可定制的染色池:GS-Smart染色池可封闭,既能防止液体溅出溢出、阻隔挥发物质,还可选择并定制各种尺寸。有些科研工作者为实现“快速”CBB染色脱色,习惯将CBB染色液或脱色液加热至沸腾然后进行染色脱色处理,而高温状态的液体会加速挥发甲醇乙酸等化合物,如果此时使用台式水平脱色摇床,无疑具有一定的安全隐患。3.机身与储液瓶一体化设计:该设计属于国际首创,与市场同类产品相比,减少了分散在外的瓶瓶罐罐,从而整机占地面积与普通台式水平脱色摇床相当。不仅节省了实验室空间,同时也美化了整体外观。综上,在CBB染色脱色实验应用方面,鼎昊源GS-Smart小型自动凝胶染色仪无论在功能上、设计上还是外观上均全面领先于台式水平脱色摇床。事实上,GS-Smart从2013年春季发布之初,就定位成了一款为考马斯亮蓝染色脱色实验而生的仪器,她的最终使命是全面取代CBB染色脱色实验中的台式水平脱色摇床,从而让所有CBB染色脱色自动进行!本文关键词:摇床,脱色摇床,水平脱色摇床

  • 【分享】台式离心机保养

    台式离心机的维护: 1、台式离心机运转前要先切断电源,并先松开离心机刹车,手试转动转鼓,看有无咬煞情况。 2、检查离心机其他部位有无松动或不正常情况。 3、接通电源依顺时针方向开车启动(通常从静止状态到正常运转约需40-60秒左右)。 4、通常每台设备到厂后均须空车运转3小时左右,无异常情况即可工作。 5、物料尽可能要放置均匀。 6、必须专人操作,容量不得超过额定量。 7、严禁机器超速运转,以免影响机器的使用寿命。 8、机器开动后,若有异常情况必须停车检查,必要时需予以拆洗修理。 9、台式离心机工作时是高速运转,因此切不可用身体触及其转鼓,以防意外。 台式离心机保养: 为确保离心机正常运转,转动部件请每隔6个月后加油保养一次。同时查看轴承处运转润滑情况,有无磨损现象;制动装置中的部件是否有磨损情况,严重的予以更换;轴承盖有无漏油情况。 机器使用完毕,应作好清洁工作,保持机器整洁。 不要将非防腐型离心机与于高腐蚀性物料的分离;另外严格按照设备要求、规定操作,非防爆型离心机切不可用于易燃、易爆场合。 滤布的目数应根据所分离物料的固相颗粒的大小而定,否则影响分离效果。另外滤布安装时应将滤布密封圈嵌入转鼓密封槽内,以防物料跑入。

  • 【求购】【已应助】超声波细胞破碎仪一台

    最近实验室准备购买一台超声波细胞破碎仪,希望帮忙推荐几款价廉物美的,经销商和我联系也可以,最好要把优惠的价格告诉我,谢谢 EMIAL:yangliang870221@126.com 电话:15173250907 杨

  • 台式浊度仪的特点

    浊度是一种质量特性,也是衡量水质的重要指标。浊度可以理解为衡量水体相对清澈度的指标。目前实验室常用的是[url=http://www.hach.com.cn/product/tl23]台式浊度仪[/url],精密度高,测量更加稳定和准确。台式浊度仪主要特点为有多种测量模式单次、连续、快速沉降模式,信号平均模式,比率模式等,识别稳定性后方才显示读数, 保证测量结果的稳定和准确,大大地避免人工判断读数变化产生的误判和误差。大部分台式浊度仪外观采用彩色触摸屏,简洁直观的操作界面和操作步骤,占用空间小且美观。

  • 【转帖】法国发现线虫繁殖时细胞“返老还童”机制

    法国国家科研中心日前发表公报说,该机构的科研人员通过观测一种线虫的受精过程,发现这种动物繁殖时部分细胞“返老还童”的机制,这一研究成果有助于了解衰老的原理和与之相关的疾病。公报指出,蛋白质是构成生物细胞的主要成分,然而随着时间流逝,蛋白质会逐渐氧化,从而导致衰老。此前,研究人员通常将衰老个体与年轻个体进行比较,探寻延缓衰老的方法。不过雨果·拉吉拉纽领导的实验室采取一套新思路,选取一种线虫作为研究对象。这种动物个体很小,身体透明且雌雄同体,能够迅速自我繁殖,且便于研究者清楚地看到繁殖过程。在如此开展观察后,研究者发现,在线虫的成熟卵细胞受精前,一组蛋白酶被激活,将老化的蛋白质转换成全新蛋白质,构成未来的胚胎,如此生成的线虫新个体可以不遗传上一辈与衰老相关的部分疾病。拉吉拉纽认为,上述发现有助于专家了解生物繁殖时减少下一代患某些遗传病的机制,为预防和治疗相关疾病提供了新思路。

  • 台式NMR谱仪60M-80M

    目前,市场上出现了台式NMR谱仪 60M-80M,(1)Oxford公司的Pulsar台式高分辨NMR谱仪 60M(2)热电公司的picoSpin 80 台式高分辨NMR谱仪 80M(3)Bruker台式FT-NMR系统FOURIER 60 60M(4)加拿大的NMReady 60P核磁共振波谱仪 60M有用过的或者熟悉的同志,给讲讲!

  • 【求助】采购台式PH仪

    我们想买一台台式的PH仪,主要测[b][color=#fd1289]工业废水[/color][/b]的,有一些有机物和颜色等,[b]国产[/b]的就行,唯一的要求就是[b][color=#ec0078]皮实[/color][/b]!我们已经买了好多便携式的,梅特勒和MYRONL的都坏了,也返修过,没用,因为长期在污水的环境中,用的也比较多,随处放很容易坏掉,所以想买台式的。一定要皮实,不要动不动就不能校正啊,或者电极坏掉啊,返修啊之类的。希望大家推荐一下~~~~如果带电导和温度测量功能就更好了。我看说明配置里总是出现一个:输入阻抗:不小于[color=black]1×10[sup]12[/sup]Ω 是什么意思啊?[/color]

  • Nature:科学家从人卵细胞培养出胚胎干细胞

    10月6日出版的新一期英国《自然》杂志刊登报告说,美国研究人员用人类卵细胞培养出了胚胎干细胞,虽然这项成果还存在一些缺陷,但已是“黄禹锡造假事件”后最接近培养出正常人类胚胎干细胞的成果。这一成果可能引起有关克隆问题的新一轮大争论。http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201110/2011100911202350.jpg(图片来自原文)将体细胞中的遗传物质植入卵细胞中,将其培育成为胚胎干细胞甚至最终培养出新的个体,就是常说的克隆技术,著名的克隆羊“多利”就是用这种技术得到的。2004年,韩国研究人员黄禹锡曾宣称用这种方法培育出了人类胚胎干细胞,引起一时轰动,但后来证明这是一起造假事件。此后,许多科研人员都进行了这方面的尝试,但一直没有成功。相关研究面临的障碍是,如果先将人类卵细胞中的遗传物质去掉,再植入另一个体细胞的遗传物质,这样得到的卵细胞分裂几次后就会停止发育。而美国纽约干细胞基金实验室等机构的研究人员报告说,如果留下一部分原有卵细胞中的遗传物质,再另外加上体细胞的部分遗传物质,这样得到的卵细胞可以发育到具有70至100个细胞的囊胚阶段,达到可以提取胚胎干细胞的阶段。胚胎干细胞具备发育成各种组织和器官的潜力,如果能够培育出人类胚胎干细胞,就意味着能够培育出属于某个人自己的组织和器官,可用于个性化的医疗。当然这也会引起有关克隆人的争议。本次研究虽然能够培育出人类胚胎干细胞,但也存在一些缺陷。最重要的是这些细胞中存在3组染色体,即卵细胞原有的1组染色体和来自体细胞的2组染色体,而正常的人类细胞只有2组染色体。因此,这种人类胚胎干细胞还不具备实用性。但是《自然》杂志同时发表的社论指出,这是自“黄禹锡造假事件”后最接近培养出可用人类胚胎干细胞的成果,在大方向上证明这仍然是一条可行的道路。社论认为,这将引起新一轮的有关克隆人的大争论,甚至提出联合国有必要开始考虑制订监管克隆的规章制度。

  • 浅谈台式鼓风干燥箱的七个安装调试步骤

    台式鼓风干燥箱是航空、汽车、家电、实验室、科研等领域必备的测试设备,用于测试和确定电工、电子及其他产品及材料进行高温试验的温度环境变化后的参数及性能。适用于工矿企业、大专院校、生物制药、食品加工、科研、医疗单位和各类实验室作非易燃易爆及非挥发性物品的干燥、烘焙、融腊和消毒、灭菌之用。  台式鼓风干燥箱的安装调试方法,如下:  1、台式鼓风干燥箱运输中注意不要在玻璃上用力,也不要碰撞箱体。  2、电源为AC220V50HZ,必须使用16A以上三芯插座,并有可靠接地线,不得擅自使用二芯插座。  3、台式鼓风干燥箱落地后,应放置平稳如地面不平应予以修正。  4、请不要在阳光直射或高温潮湿的地方使用仪器。  5、台式鼓风干燥箱应远离电磁干扰源,并应将设备的接地线有效接地。  6、台式鼓风干燥箱在正常运行时,箱内载物摆放应不影响空气流通以保证箱内温度均匀。  7、电源线不要紧靠后面,也不要让仪器或其他物品压在电源线上,以免损伤电源线。

  • 挑战人类生殖: 用干细胞制造胚胎

    自去年10月开始,分子生物学家Katsuhiko Hayashi就陆陆续续收到了许多夫妻的邮件,这些夫妻大多人到中年,仍然在为了一件事情焦急:要一个孩子。其中有一位英国的更年期妇女,希望到他位于日本京都大学的实验室,在他的帮助下怀上孩子,她写道:“这是我唯一的愿望。”这些请求开始于Hayashi一篇文章的发表——他原以为只有发育生物学家才会对他的实验结果感兴趣。在体外条件下,利用小鼠的皮肤细胞创造可以发育成精子和卵子的原始生殖细胞(PGCs)。为了证明这些实验室培养的原始生殖细胞与自然发育而成的原始生殖细胞类似,他利用它们生成了卵子,进而创造小鼠生命。他表示,这个创造出来的小鼠生命仅仅是他研究的一个“副产品”,他的研究将意味着更多——利用不孕妇女的皮肤细胞为她们提供可受精的卵细胞。与此同时他还提出,男性的皮肤细胞也可以用来创造卵子,同样,女性的皮肤细胞也可以生成精子。(事实上,研究结果发表后,许多同性恋发邮件给Hayashi ,索要更多的信息。)尽管这是一项创新研究,但是公众的广泛关注还是令Hayashi和他的教授Mitinori Saitou感到非常惊讶。他们花了十多年不断挖掘哺乳动物配子产生的微妙细节,然后在体外条件下重新创建该过程——一切都是为了科研,而非医疗。现在他们的方法使研究人员能够创建无限的原始生殖细胞,这种在以前很难获得的珍贵细胞的正常供应有助于推动哺乳动物生殖研究。但是,当他们将这个科学挑战自小鼠到猴子,再到人类推进时,这一过程被公众定义为治疗不孕不育的过程,于是相关的道德争议随之出现。“毫无疑问,他们在小鼠身上给这一领域带来了重大的改变,” 洛杉矶加州大学的生育专家Amander Clark说,“但是,在这项技术展示它的实用性之前,我们必须讨论一下使用这种方式创造配子的伦理问题。”回到最初在小鼠体内,胚胎发育一周后,便出现约40个左右的原始生殖细胞。这个小小的细胞团进而在雌性小鼠体内形成成千上万的卵细胞,在雄性小鼠体内每天都能生成几百万个精细胞,并能够遗传小鼠的全套遗传信息。Saitou想要了解在这些细胞发育过程中受到了那些信号的控制。在过去的十年中,Saitou已经通过辛苦研究确定了几个基因——包括Stella, Blimp1 和Prdm14 ——这些基因的某种组合在某些时候对于PGCs的发育起到了至关重要的作用。利用这些基因作为标记,可以从其他细胞中筛选原始生殖细胞以观察这些细胞的变化。2009年,在日本神户的RIKEN发育生物学中心,他发现,当培养条件适当时,在精确的时间加入骨形态发生蛋白4(BMP4),可以胚胎干细胞转化为原始生殖细胞的。为了验证这一发现,他向胚胎干细胞提供高浓度的BMP4,结果显示,几乎所有的胚胎干细胞都变成了PGCs。他和科学家们都预计这一过程非常复杂。http://www.ibioo.com/data/attachment/portal/201308/25/095620gaqefeejnqejxuu3.jpg人造小鼠生殖细胞产生小鼠胚胎的过程(点击图片查看大图)Saitou的方法严格遵循了自然过程,这与其他从事类似研究的人形成了鲜明的对比,以色列魏茨曼科学研究所的干细胞专家Jacob Hanna说。许多科学家尝试通过信号分子轰击干细胞在体外创造特定类型的细胞,然后筛选细胞混合物得到他们想要的细胞。但是他们忽略了这些细胞的自然形成过程和这些人造细胞与自然形成细胞的相似程度。Saitou找出了形成生殖细胞所需的条件,去除多余的信号干扰并将每个过程的时间精确控制,给他的同事们留下了深刻的印象。英国谢菲尔德大学的干细胞生物学家Harry Moore将这种生殖细胞发育的精确重现视为一场“胜利”。到了2009年, Saitou在小鼠生殖细胞出现之前从外胚层取了一些细胞,这成了研究的起点。但是想要真正掌握这个过程中,Saitou希望从细胞培养开始。当时正值Hayashi从英国剑桥大学回到日本,和Saitou一样,Hayashi在该领域先驱Azim Surani英国的实验室里完成了4年的研究。Surani盛赞这两位科学家说,他们的“气质、风格和解决问题的方法能够相互补充”。 Saitou “处理事情时很有系统性、完成目标一心一意”,而Hayashi“工作时更有直觉、视角更广阔、处理问题方法相对更加宽松”,他说。“他们确实形成了一个非常强大的团队。”Hayashi加入了Saitou京都大学的团队,他很快就发现,那里不同于剑桥。在京都大学,Hayashi用在理论讨论上的时间比曾经少得多,而更多的时间都花在实验上。他说“在日本,我们只管‘做’,这有时是非常低效的,但有时又酝酿着巨大的成功”。Hayashi同样以外胚层细胞作为起点,但与Saitou不同的是,他试图培养一个能够产生原始生殖细胞的稳定细胞系。可惜这种方法没有奏效。Hayashi借鉴其他研究结果——一个关键调控分子(activin A)和生长因子(bFGF)可以将培养的早期胚胎干细胞转化成类似于外胚层细胞的细胞类型。这引发了Hayashi将这两个因素结合起来的想法,诱导胚胎干细胞分化为外胚层,然后采用Saitou之前的方法把这些细胞成为的PGCs。通过这种新的方法,他最终获得了成功。为了证明这些人造的原始生殖细胞是真实的拷贝,他们必须证明这些细胞可以进一步发育成精子和卵子。这一进程是非常复杂和难以理解的。所以研究小组将这一工作留给了自然——Hayashi将PGCs植入无法产生精子的小鼠的睾丸,观察这些细胞是否会发育。Saitou认为,这是可行的,但还是感到有些担忧。当实验进行到第3或4只小鼠时,他们发现小鼠的输精管里充满了精子。“这一切都发生得恰如其分,我知道他们会产生幼仔,”Hayashi说。研究小组将这些精子注入卵细胞中并植入雌性小鼠的胚胎,结果产生了大量的雌性和雄性后代。他们利用诱导多能干细胞(iPS)进行反复的实验,成熟的细胞被重新编程为胚胎状态。此外,精子被用于生产幼仔,证明它们具有基本功能——这是干细胞分化领域的罕见成就。Clark说:“这是整个多能性干细胞研究领域里在培养皿中生成全功能细胞类型少有的成功案例之一。”他们预计形成卵细胞更复杂,但是在去年,Hayashi在体外条件下制作有正常着色的原始生殖细胞并转入白化小鼠的卵巢,将产生的卵细胞体外受精后植入代孕。当透过幼崽半透明的眼睑看到黑色的眼睛时,他知道这一切又成功了。生殖细胞的回馈目前,许多研究人员已经能够复制验室培养原始生殖细胞的过程。人造原始生殖细胞特定用于表观遗传学研究:通过修饰DNA确定哪些基因表达。最常见的修饰就是为DNA碱基加上甲基,这些修饰在有些情况下,能够反映生物所经历的历史过程。与其它类型的细胞类似,表观遗传标记改变了原始生殖细胞在胚胎发育过程中的命运,但原始生殖细胞有个与众不同的特点,就是当它们发育成精子和卵子后,表观遗传标记被擦除。这就允许细胞创建能够形成任何类型细胞的受精卵。表观遗传微妙变化中出现错误将会导致不孕不育并出现器官故障,如如睾丸癌。Surani和Hanna的团队已经利用人造原始生殖细胞研究不同酶在表观遗传调控中的作用,也许有一天,能够解答表观遗传网络如何参与疾病调控。事实上,体外产生的原始生殖细胞可以为研究提供数百万个细胞,而不是供科学家研究了40个左右,这些细胞可以通过解剖早期胚胎获得。Hanna说:“这是一个大问题,因为我们这里有这些稀有的原始生殖细胞正在经历我们尚不了解的全基因组表观遗传变化。”“体外模型为科学家们提供了前所未有的方便,” Clark表示认同。临床意义但是Hayashi和Saitou没有办法向乞求帮助的不孕夫妻提供帮助。在这种方法被运用在临床之前,还有许多问题需要梳理。Saitou和Hayashi发现,虽然运用他们的技术所产生的后代通常似乎是健康和大量的,但这些后代产生的原始生殖细胞并生不完全“正常”。 第二代原始生殖细胞产生的卵细胞往往是脆弱、畸形的,并且从支持它们生长的组织上脱离。当受精时,卵细胞内部会分为三组染色体,而不是正常的两组,体外受精的成功率也只有正常原始生殖细胞的三分之一。哈佛医学院从事表观遗传学研究的Yi Zhang,使用Saitou的方法在研究中发现,体外受精过程中,人造的原始生殖细胞不能像自然状态下产生的原始生殖细胞一样,抹去它们的表观遗传标记。“我们必须要知道,这些都是PGCs的类似细胞,而不是真正的原始生殖细胞,”他说。此外,这项技术还存在两个大的挑战。首先是在不将PGCs放回睾丸或卵巢的前提下买入和使它们变成成熟的精子和卵子,Hayashi目前正在试图破解PGCs生成卵子或精子的生物信号,使人工培育条件下完成这一阶段成为可能。但最可怕的挑战是在人体重复上述所有的工作。该小组已经在利用Saitou找到的关键调控基因来调整人类的iPS细胞,但是Saitou 和Hayashi都知道,人类的信息调控网络不同于小鼠。此外,Saitou有无数的小鼠胚胎进行解剖,但无法在人类胚胎进行

  • CA 对 细胞状态的影响

    CA 对  细胞状态的影响

    [b][font='Times New Roman',serif]CA[/font]对[font='Times New Roman',serif]A549[/font]细胞状态的影响[/b][font=宋体]首先探究了 [/font]CA [font=宋体]对细胞生长状态的影响。以 [/font]A549 [font=宋体]细胞为例,设置了终浓度为[/font]0[font=宋体]、[/font]300 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]浓度梯度,并观察其在不同时间([/font]3[font=宋体]、[/font]9[font=宋体]、[/font]18 h[font=宋体])的细胞状态。如图 [/font]3-1 [font=宋体]所示,加入 [/font]CA [font=宋体]后细胞的状态发生了显著的变化,在 [/font]3 h [font=宋体]时就已经出现细胞形态的改变;当 [/font]18 h [font=宋体]时,细胞已经有死亡的迹象。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][align=center] [/align][font='Times New Roman',serif][/font][img=,523,261]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211171003382232_7794_3237657_3.png!w690x311.jpg[/img][font=宋体]图 [/font] CA [font=宋体]刺激 [/font]A549 [font=宋体]细胞,终浓度为 [/font]0 μM[font=宋体]、[/font]300 μM[font=宋体],不同时间细胞状态图[/font][b][font='Times New Roman',serif]CA[/font]对 [font='Times New Roman',serif]A549[/font]细胞活力的影响[/b][font=宋体]本文设置了终浓度为 [/font]0[font=宋体]、[/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300[font=宋体]、[/font]500[font=宋体]、[/font]1000[font=宋体]、[/font]1500[font=宋体]、[/font]2000[font=宋体]、[/font]3000 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]浓度梯度,细胞在 [/font]5% CO[sub]2[/sub][font=宋体]、[/font]37 ℃[font=宋体]的培养箱中无血清培养[/font]6 h[font=宋体],最终得出了浓度依赖型[/font][font=宋体]的曲线。如图 [/font]3-2 [font=宋体]所示,加入 [/font]600 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]对细胞的抑制率可达到 [/font]50%[font=宋体]左右;当 [/font]CA [font=宋体]加入浓度为 [/font]2.5 mM [font=宋体]时,细胞的存活率只有 [/font]20%[font=宋体];当 [/font]CA [font=宋体]的加入浓度为 [/font]3 mM [font=宋体]时,细胞[/font][font=宋体]已经死亡。[/font] [table][tr][td][img=文本框:,475,307]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211171003523300_7297_3237657_3.png!w690x370.jpg[/img][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][align=center]32[/align][font='Times New Roman',serif][/font][font=宋体]图 [/font] [font=宋体]不同浓度梯度([/font]0[font=宋体]、[/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300[font=宋体]、[/font]500[font=宋体]、[/font]1000[font=宋体]、[/font]1500[font=宋体]、[/font]2000[font=宋体]、[/font]3000 μM[font=宋体])[/font]CA [font=宋体]刺激 [/font]A549[align=center][font=宋体]细胞测的细胞活力曲线图[/font][/align])[b]蛋白免疫印迹分析[/b] [table][tr][td] [table=100%][tr][td][img=,553,349]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211171004059904_8264_3237657_3.png!w690x378.jpg[/img] [/td][/tr][/table] [/td][/tr][/table][font=宋体]以 [/font]A549 [font=宋体]为例,本文选用不同浓度([/font]0[font=宋体]、[/font]20[font=宋体]、[/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300[font=宋体]、[/font]500 μM[font=宋体])的 [/font]CA [font=宋体]处理[/font]1 h [font=宋体]后的细胞裂解液与生物素孵育,进一步进行免疫印迹分析。如图 [/font] [font=宋体]所示, [/font]Westerningblotting [font=宋体]分析表明,随着 [/font]CA [font=宋体]浓度增加,曝光后的条带逐渐加深,这进一步证明了 [/font]CA [font=宋体]已成功结合到蛋白上,从而在蛋白上引入可被酰肼生物素标记的醛基,同时也可进一步证明酰肼化学法能够实现[/font]CA [font=宋体]靶蛋白的标记。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]图 [/font] [font=宋体]一定浓度梯度([/font]0[font=宋体]、[/font]20[font=宋体]、[/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300[font=宋体]、[/font]500 μM[font=宋体])[/font]CA [font=宋体]刺激 [/font]A549 [font=宋体]细胞的免疫印迹结果和[/font][align=center][font=宋体]考马斯染色结果[/font][/align][font='Times New Roman',serif][/font][b][font='Times New Roman',serif]CA[/font]修饰肽段分析[/b][font=宋体]选用 [/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300μM[font=宋体]的 [/font]CA[font=宋体]处理 [/font]A549[font=宋体]、[/font]K562[font=宋体]细胞,每个样品各做三次生物学重复并进行分析。如图 [/font]3-4[font=宋体]所示,在浓度 [/font]50μM[font=宋体]的 [/font]CA[font=宋体]刺激下,可从 [/font]A549[font=宋体]细胞鉴定到 [/font]16[font=宋体]个高可信度的 [/font]CA[font=宋体]修饰位点,从 [/font]K562[font=宋体]细胞鉴定到了[/font]32 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点;在 [/font]100 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]刺激下,可从 [/font]A549 [font=宋体]细胞中鉴定到 [/font]43 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点,从 [/font]K562 [font=宋体]细胞中鉴定到了 [/font]100 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点;在 [/font]300 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]刺激下,可从 [/font]A549 [font=宋体]细胞中鉴定到 [/font]264 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点,从 [/font]K562 [font=宋体]细胞中鉴定到了 [/font]355 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点。[/font][font=宋体] [/font] [table][tr][td][img=,551,179]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211171004226161_3885_3237657_3.png!w690x461.jpg[/img][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体]图 [/font]CA [font=宋体]刺激 [/font]A549 [font=宋体]和 [/font]K562 [font=宋体]细胞,终浓度为 [/font]50 μM[font=宋体]、[/font]100 μM [font=宋体]和 [/font]300 μM [font=宋体]三次生物学重复鉴定[/font][font=宋体]到的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点的韦恩图[/font]

  • 2方法 制备感受态细胞

    感受态细胞的制备(一)制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞  下述操作方案是由Hanahan(1983)提供的,所制备的大肠杆菌DHl、DH5和MM249感受态细胞培养物能使每微克超螺旋DNA以≥5x108转化菌落的频率进行转化,其他大多数大肠杆菌菌株的最高转化率大约只有前述菌株的1/10-1/5。尽管如此,实际上对所有克隆方面的用途来说,这已绰绰有余。一些大肠杆菌菌株(如MC1061)不适于此法。下列有3个因素对于获得持续高的转化频率来说是至关重要的:(1)转化缓冲液中试剂的纯度 务必使用所能得到的最高质量的试剂,这些试剂应分装成小份,避光保存于冷处。(2)细胞的生长状态 由于一些不清楚的原因,直接用贮存于-70┴冰冻培养基中的贮存原种搠种而进持培养的细菌,所得到的转化效率最高,不应使用在实验中的贮存原咱接种崦进持培养的细菌,所得到的转效率最高,不应使用在实验室中连续传代,贮存于4℃或贮存于室温的培养物。(3)玻璃和塑料器皿的清洁度 痕量的去污剂或其他化学物质的存在可能大大地降低细菌的论效率,所以最好拨出一批玻璃器皿专用于制备感受态细菌,而不作它用。这些玻璃器皿应用手洗刷,再灌满纯水(Milli-Q级或与其相当的级别),然后高压灭菌,临用前方把水倒掉。细心操作的话,几乎总是可以获得转化效率高的感受态细胞,每微克超螺旋DNA可能得到5x107-1x108个转化菌落。然而甚至经验最为丰富的工作者也不可能保证持有必要用标准的螺旋质粒DNA制品来检测每一批新的感受态细胞的转化效率。制备感受态细胞前,先制备一大批黧的螺旋质粒DNA,分装成许多小份贮存于-70℃。这些标准制品可用来检验每一批新的感受态细胞的转化效率,并检查每一个实验的转化效率。设立这样一个阳性对照后,如果某一次实验得不到转化菌落,就可以根据对照的情况查明宣究竟是感受态细菌方面有庇漏,还是DNA制品间有差异。分装的感受态细菌可在-70℃保存几个月而转效率无明显下降。1)用无菌铂丝直接蘸取冻存有大肠杆菌DHl株(或DH5株、MM249株原种)(贮存于-70℃的冻培养基上,见附录A),在SOB琼脂平板表面划线, 于37℃培养16小时。将冰冻的细菌融化,铂丝在冻存细菌原种的表面划过时,已带上足量的细菌,因此一管冻存细菌原种可使用多次。2)将4-5个分隔良好的菌落转移到1ml含20mmol/L MgSo4的SOB中,菌落直径为1-2mm。中速振荡使细菌分散,然后在1L锥瓶中用30-100ml含20mmol/LMgSO4的SOB稀释培养物。3)于37℃将细菌培养0.5-3.0小时,为达到高效转化,活细胞数务必少于108细胞/ml,可每隔20-30分钟测定OD600值来检测培养物的生长情况。在菌株与菌株之间,OD600值和每毫升中活细胞数间的关系变化很大,因此有必要通过测量特定大肠杆菌菌株的生长培养物在生长周期的不同时相的OD600值,并将各稀释度的培养物铺于无抗生素的LB琼脂平皿以计算每时相的活细胞数,从而使分光光度读数得到标化。4)在无菌条件下将细菌转移到一个无菌、一次性使用的、用冰预冷的50ml聚丙烯管(Falcon 2070)中,在冰上放置10分钟,使培养物冷却至0℃。切记:下述所有步骤均需无菌操作。5)于4℃用Sorvall GS3转头(或与其相当的转头)以4000转/分离心10分钟, 回收细胞。6)倒出培养液,将管倒置1分钟以使最后残留的痕量培养液流尽。7)用约20ml(每个50ml管)用冰预冷的转化缓冲液(对于TFB''见表1.3;对于FSB,可参见表1,4)轻轻振荡,重悬沉淀(若制备需立即使用的感受态细胞可用TFB:若制备需要贮存于-70℃的感受态细胞则用FSB),将重悬细胞冰浴10分钟。8)于4℃用Sorvall GS3转头或与其相当的转头)以4000转.分离心10分钟,回收细胞。9)倒出培养液,将管倒置1分钟以使最后残留的痕量培养液流尽。10)用4ml(每个50ml管)用冰预冷的TFB或FSB轻轻振荡重悬沉淀。按步骤11)a给出的操作程序制备立即使用的感受态细胞,而步骤11)b制德贮存于-70℃留待以后使用的感受态细胞。11)a.新鲜感受态细胞的制备a)将140μl DnD溶液加到每一悬液的中心,立即轻轻旋转以混匀悬液,然后在冰上放置15分钟。DnD溶液二硫苏糖醇(DTT) 1.53gDMSO 9.0ML1mol/L乙酸钾(pH78.5) 100μl水至 10MLDnD溶液作可耐受人机溶剂的Millex SR膜(Millipore)过滤除菌,将DnD溶液分装成160μl小份放入0.5ml的无菌微量离心管中,密封管口,贮存于-20℃。DMSO的氧化产物,据推测可能是二甲硫醚,是转化的掏物。为避免这个问题,应购买质量最好的DMSO。应将所购试剂分装成10ml小份,放入无菌试管,密封管口,贮存于-70℃。每小份只用1次,用后弃去。1mol/L乙酸钾(pH7.5)的配法。b)每管再加140μlDnD溶液,轻轻旋转混匀之,将悬液置于冰上,再放15分钟。c)将小份悬液分装到冷却的无菌聚丙烯管(Falcon 2059''17x100mm)中,将管置于冰上。就大多数克隆方面的用途来说,50μl感受细胞悬液已绰绰有余。然而,如需要更大量的转化菌落(如构建cDNA文库),每小份感受态细胞的量可能需要加大些.加入DNA后,于42℃短暂加热感受态细胞,这是一个关键步骤,务必以正确的升温速度使细胞加温到正确的温度。下面给出的所有时间和温度是用Falcon 2059型管获得的数据,其他类型的管未必可产生相同的结果。b.冻存的感受态细胞的制备a)每4ml重悬细胞加140 μl DMSO,轻轻旋转混匀之,将悬液置冰上15分钟。b)每份悬液再加140μl DMSO,轻轻旋转混匀之,重新放入冰浴中。c)迅速将悬液分装到冷却的无菌的微时离心管中,封紧管口,没入液氮中快速冰冻感受态细胞。贮存于-70℃备用。就大多数克隆方面的用途来说,50μl感受态细胞悬液已绰绰有余。然而,如需要更大量的转化菌落(如构建cDNA文库),每小份感受态细胞的量可能需要加大些。d)需要时,从-70℃冰箱中取出一管感受态细胞,把管握于手民主,融化细胞。细胞一经融化,立即把管转移至冰浴中,在冰上放置10分钟。e)用一冷却的无菌吸头把感受态细胞转移到冷却的无菌聚丙烯管中(Falcon2059''17x100mm)中,放置在冰浴上。加入DNA后,于42℃短暂加热感受态细胞,这是一个关链步骤,务必以正确的升温速度使细胞如温到正确的温度。下面给出的所有时间和温度是用Falcon 2059试管获者的数据,其他类型的管未必可产生相同的结果。12)将DNA加入到感受态细胞中,轻轻旋转几认混匀内容物。在冰上放置30分钟。为得到最佳结果,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%。转化体的数量相对于所加入的DNA量近妣例地增加,直至系统达到饱和,尽管感受态细胞在不同批次之间有一些差异,50μl感受态细胞通常可被约lng超粒DNA所饱和。虽然再加DNA也不影响转化体的总产量,但使用过多的DNA将降低系统的效率(以每微克DNA所获转化体的数量来衡量)。当所转化的DNA很难得时(如用从相对难得的样品中提取mRNA而合成的cDNA),这就显得格外重要。为最大限度地提高转化菌落的数目,可把现有DNA分置于几小份感受态细胞中,以期系统不致饱和。试验中一定包括下面的对照:a.加入已知量的标准超螺旋质粒DNA制品的感受态细胞。b.完全不加质粒DNA的感受态细菌。13)将管放入预加温到42℃的循环水浴中放好的试管加架上,恰恰放置90秒,不要摇动试管。14)快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却1-2分钟。15)每管加800μl SOC培养基(见附录A)。用水浴将培养基加温至37℃,然后将管转移到37℃摇床上,温育43分钏使细菌复苏并表达质粒编码的抗生素抗性标记基因。为最大限度地提高转化效率,复苏期中应温放地摇动细胞(转速225转/分)。16)将适当体积(每个90m平板达200μl)已转化的感受态细胞转移到含20mmol/L MgSO4和相应抗生素的SOB琼脂培养基上。如培养物体积太小(〈10μl),可再加肉汤培养基,用一无菌的弯头玻棒轻轻地将转化的细胞涂到琼脂平表面。如在一个90mm平板上铺200μl以上的感受态细胞,应离心浓缩细胞(于室温用Sorvall SS34转头(或与其相当的转头)以4000转/分离心10分钟),然后用适量SOC轻轻重悬细胞。如用四环素抗性作为选择标记,全部的转化混合物可以铺在一个单独的平皿上(或铺在软琼脂中)。然而如选用氨苄青霉素抗性,则只能将一部分培养物(根据实验决定)铺在单独的平皿上,氨苄青霉素抗性菌落数的曾加与平皿上所加细菌数的增加并无线性比例关系,这可能是因为被抗生素杀死的细胞可释放生长抑制物质的缘故。\par 17)将平板置于室温直至液体被吸收。18)倒置平皿,于37℃培养,12-16小时后可出现菌落。如检查氨苄青霉素抗性,用转化细胞铺平板时密度应较低(每个90mm平板不超过104菌落),于37℃培养平板时不应超过20小时。氨苄青霉素抗性的转化体可将β-内酰胺酶分泌到培养基中,迅速灭活菌落周围区域中的抗生素。这样,铺平板时懊度太高或培养时间太长都会导致出现对氨苄青霉敏感的卫星菌落。在造

  • 【资料】美国科学家解开胚胎干细胞信号通道之谜

    美国南加州大学科学家表示,他们新发现的名为IQ-1的小分子在防止胞胎干细胞分化成一种或多种特殊细胞方面具有决定性作用,该研究成果有望帮助人们开发出无污染大规模培养胚胎干细胞的方法。有关研究刊登在美国《国家科学院院报》网站上。  干细胞疗法是许多科学家研究的热门项目,大规模培养胚胎干细胞是干细胞疗法成功发展的前提。目前,实验鼠纤维原细胞饲养层是唯一被证明为能够培养胚胎干细胞的方法。在此方法中,必要的化学信号能促使胚胎干细胞不断分裂而不分化。然而,南加州大学凯克医学院医学和药学教授迈克尔卡恩博士表示,人体胚胎干细胞用饲养层培养会遭受实验鼠糖蛋白标识的污染,如果将培养的干细胞用于人体,或许出现可怕的免疫反应。  作为发现IQ-1小分子的研究小组主要研究人员,卡恩表示,他们发现的小分子帮助人们向实现无实验鼠纤维原细胞饲养层培养胚胎干细胞的方法往前迈进了一步。对于IQ-1的工作原理,卡恩解释说,Wnt通道(也就是细胞信号通道)对干细胞具有分叉效应(dichotomouseffects),IQ-1能够在阻断Wnt通道一个分叉的同时,增强来自Wnt通道另分叉的信号。这样,人们可以从根本上维持干细胞的生长和所需的力量。  卡恩认为,如果人们能够创造出一个化学物质环境的系统来培养人体胚胎干细胞,那么就可以避免干细胞受污染的危险,它将让科学家的工作更加容易,这是研究小组的奋斗目标。凯克医学院干细胞和再生医学中心主任马丁佩拉博士表示,卡恩他们的研究让人们能够观察胚胎干细胞内部分子控制机制,其新发现有望帮助人们开发出大规模繁殖纯胚胎干细胞的技术。

  • 新型台式、便携式光谱仪类型及体积比较

    新型台式、便携式光谱仪类型及体积比较厂家及仪器型号光谱系统及仪器性能仪器大小及运行环境HILGER ASSURE Desktop Spectrometer(台式全谱光谱仪)全息光栅-CCD;焦距200mm波长范围:170—410nm火花光源-全谱直读,多基体分析体积:660×380×560(mm)重量:30kg运行环境:0~50℃SPECTRO SPECTROLAB JRCCD(全新台式金属分析仪)全息光栅—CCD波长范围:175—550nm火花光源-全谱直读,合金分析体积:380×600×440(mm)重量:~70kg运行环境:一般室温下SPECTROPORTCCDPortable Metals Analyser(便携式金属分析仪)全息光栅—CCD:焦距:150mm波长范围:278—560nm;火花光源;现场金属鉴别和成分分析体积:375×450×180(mm)重量:15kg运行环境:现场ARUNMetalscan 2500/2000#(台式金属分析仪)特制光栅—CCD;焦距:170mm波长范围:174—406nm(2500#)火花光源-全谱直读,多基体分析体积:544×160×465(mm)重量:20kg(仪器全封闭防尘保护)运行环境:0~35℃,钢铁炉前分析ARUN Metalscan 1650Portable Metals Analyser(便携式金属分析仪)特制光栅—CCD;焦距:170mm波长范围:185—410nm;电弧光源;微型光学系统装在探头内,不用光纤联接,无谱线通道限制。体积:460×210×480(mm

  • 新显微镜可追踪胚胎发育单细胞分裂过程 有助于理解一个单细胞怎样变成了复杂的组织

    中国科技网讯 从一个受精卵发育成多种功能的胚胎,细胞要经过上千次分裂和复杂的排列重组。据物理学家组织网6月3日报道,霍华德·休斯医学研究院珍妮莉娅法姆研究学院开发出一种最新的成像技术,能以前所未有的速度和精确度看到这一过程,让人们能追踪胚胎成形时每个细胞在几天甚至几小时内的变化。相关论文发表在6月3日出版的《自然·方法学》上。 研究人员演示了一段约20小时的果蝇胚胎发育视频。在视频中,生物结构逐渐出现,从一小团简单的细胞簇慢慢变长,变成上万个细胞紧紧挤在一起的拉长的小胚胎,然后在新形成的肌肉收缩舒张下开始颤动,此时胚胎仅有半毫米长。此外,论文中还有一段果蝇胚胎中枢神经系统完整的发育视频,跟踪了单个细胞发育出感觉器官、脑叶及其他结构的过程,由于分辨率足够高,还能看到神经轴突尖端迅速变化。 发明该技术的珍妮莉娅法姆研究学院的菲利普·凯勒说,要理解一个单细胞怎样变成了复杂的组织,真实看到这一过程非常重要。传统光学显微镜速度太慢,无法跟踪细胞在生命初期的迅速变化,也容易破坏一个活胚胎,只能通过把多阶段、多组织的照片拼在一起,才能推测发生的变化,但“细胞分裂重组每次都不一样,这种观察方法可能会产生误导”。 新技术基于一种高速非侵入式光学显微镜,称为SiMView光层显微镜,能从4个角度同时拍摄图像,不仅能跟踪细胞运动,还能对发展过程进行数量分析。该显微镜由凯勒小组和德国的欧洲分子生物实验室合作开发,攻克了传统光学显微镜的两个难题:一是光源对样本造成的伤害,二是对海量数据进行处理分析。 大部分光源都会伤害细胞,使其中的荧光标记消失。研究小组设计的照明技术是一种激光扫描层,一次照射样本极薄的一层以减少伤害,由探测仪记录下被照亮的部分。光层来自两个相反方向,并用两个探测仪来探测荧光,照明与探测相结合,提供了4个不同的观察角度。不仅能避免由于光散射而造成的模糊,还将图像采集速度提高了50倍。 要让照亮样本和探测荧光在时间、位置上协调一致,时机吻合极为重要,光层交叉通过会造成图像模糊,发光间隔仅几毫秒。为了保持精度,SiMView还安装了实时调节的电子系统。 显微镜每秒会收集350Mb的数据,一个样本一天要产生海量数据,而不同条件或不同基因的发育对比实验,所要求的数据比这还要多好多倍。为此,研究人员开发出一种新的计算方法,能识别并跟踪显微镜视频中单个细胞并自动分析。这些都构成了拍摄活样本这一完整技术框架的必要组成部分。 凯勒表示,他们还将继续改进显微镜使计算过程更加有效。今后不仅能追踪胚胎中细胞的一代代世系,还可能控制发育以探索发育机制,并研究其他更大更复杂样本的发育过程。(常丽君) 《科技日报》(2012-06-05 二版)

  • 引起台式恒温恒湿试验箱出现干烧报警的原因

    引起台式恒温恒湿试验箱出现干烧报警的原因

    [b][url=http://www.linpin.com/]台式恒温恒湿试验箱[/url][/b]在工作的温湿度自然环境时,出现了干烧报警的情况,这是设备的空气加湿器内的太热过载保护器检测到发热管温度大于我们设置的标准温度,从而传送过热数据信号到控制板上,造成控制板把干烧的报警传送出去,引起了关机情况。接下来我们一起来看看什么引起该设备干烧报警的?  1、设备的加湿系统供水出现问题  这个情况是指设备内的供水系统没有按正常给空气加湿器供应水,这样一来空气加湿器内发热管开展加温,很快导致干烧警报的出现,加湿供水问题又分成:[align=center][img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306151546359842_4361_5295056_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/align]  1)空气加湿器供水电源开关毁坏或是遭受影响   空气加湿器是不是加温,是由空气加湿器水道的浮球液位计来操纵的,当空气加湿器内水位线做到一定部位,浮球液位计抵达限制,传出液位仪抵达数据信号给控制板,控制板得出加温数据信号,发热管刚开始加温。当浮球液位计毁坏或是因脏污粘附在表层时,没法一切正常工作中,会出現误警报,这时必须拆换新的浮球液位计或是拆下来浮球液位计开展清理。  2)台式恒温恒湿试验箱内的离心水泵突然不在运行了   供水离心水泵不在转行,有可能是离心水泵被毁坏,必须立即拆换新的离心水泵;也有可能是离心水泵控制回路出現问题,导致离心水泵沒有了供电系统,因此离心水泵不工作,必须查看离心水泵电源电路,开展检修   2、设备出现过热保护系统出現错误警报  过热保护装置是用于检测发热管溫度的,当过热保护系统毁坏时,没办法按正常检测溫度会导致出现错误警报,则必须拆换新的过热保护装置。  以上是小编分享的引起台式恒温恒湿试验箱出现干烧报警的原因,希望你在使用设备一定要时刻注意观察是否有异常,如有异常有必要的情况下,立刻停机做检查,以免造成设备损坏,产生不必要的成本。今天就到这,感谢你的阅读!

  • 胚胎干细胞培养标准化操作规程(SOP)

    关键词(必填项目):胚胎干细胞培养目的(必填项目):正确规范胚胎干细胞培养背景知识(选填项目):无。原理(选填项目):无主体内容:目录一、细胞二、一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代三、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法四、移植细胞的准备细胞多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡1.表达绿色荧光蛋白(EGFP)的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。2.D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。3.J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7-9代。4.J1rtTA-rtTA表达J1细胞,由Dr. Jaenish的实验室友情提供。5.表达黄色荧光蛋白的YC5-ES细胞,由Dr. Nagy的实验室提供。一般培养--维持ES细胞处于未分化状态ES细胞培养用含有ESGRO(白血病抑制因子)的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1%明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2-3天从达到80%-90%融合的平板按1:8的比率传代细胞一次,细胞传代以后,在将细胞接种在0.1%明胶包被的培养皿之前,通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时,使分化细胞粘附,从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃,5%CO2,100%湿度条件下培养。培养基ES:配制一20×不含DMEM,HS,ESGRO的溶液(该溶液也能用于EB培养基--见下文)。分装在50ml FALCON管中,(稀释为2×,每管42ml),贮存在-20℃。通过将21ml该溶液,HS和ESGRO加入450mlDMEM中制备培养基,0.2μm滤膜过滤。贮存于4℃。 注:一瓶DMEM是500ml。贮存液 DMEM(高糖) [/s

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