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生物样品均质器

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生物样品均质器相关的论坛

  • 拍打式均质器在微生物处理上的分析

    [url=http://www.xo-yiqi.com]拍打式均质器[/url]又称无菌均质器,可以从固体样品中直接提取细菌。那么产品如何使用呢? 只需将原始样品和稀释液加入到无菌的样品袋中,然后将样品袋放入拍打式均质器中,经过叶片的拍打锤击产生压力、引起振荡、加速混合、从而达到溶液中微生物成分处于均匀分布状态,即可完成样品的处理。使用一次性无菌均质滤袋隔离操作,保证卫生和安全,不与仪器接触,无样品泄露而不需进行系统清洗,具有方便快速、结果准确、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理,不需洗刷器皿的特点,重复性好的要求。有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品,确保无菌袋中混合全部的样品。均质后的样品可作为代表原本,进行后续分析,没有样品的变化和交叉污染的危险。 应用领域: - 食品微生物分析 - 动物组织、生物样品、化妆品的均质处理 - 肉、鱼、蔬菜、水果均质处理 - 药品、临床、分子学、毒素及细菌检测等领域 最常用的应用领域为食品微生物检测 微生物检验定义:应用微生物学的理论与方法,研究外界环境和食品中微生物的种类、数量、性质、活动规律及其对人和动物健康的影响。意义:是衡量食品卫生质量的重要指标之一,也是判定被检食品能否食用的科学依据之一。判断食品加工环境及食品卫生情况,能够对食品被细菌污染的程度作出正确的评价,为各项卫生管理工作提供科学依据,提供传染病和人类、动物的食物中毒的防治措施 检验的主要内容:生产环境、原辅料、加工运输、储藏、销售过程、成品。

  • 脉冲式均质器在食品微生物快速检测中应用研究

    脉冲式均质器在食品微生物快速检测中应用研究

    脉冲式均质器在食品微生物快速检测中应用研究 随着经济的发展,人民对食品安全性的要求也日益提高,如何更快更好的检测出食品能否放心食用就显得尤为重要。微生物指标是食品检测中一个重要的指标,而传统的检测方法操作准备繁琐且样品前处理带有一定的缺陷和局限性。为了提高检测效率,微生物检测可使用快速检测方法。现行国际上常用的快速检测方法为使用快速测试片。由于测试片上含有冷水可溶性凝胶,因此无需传统方法中倾倒琼脂的步骤,从而避免了对细菌可能造成的热损伤。相对于传统平板检测方法操作简便、结果稳定,具有良好的实用性能,可大大简化操作程序,提高检测速度。为了快速检测方法能更好的开展,选择适宜的样品前处理的均质方式可使检测数据更真实可靠。本文通过研究新式的脉冲式均质器与传统的拍打式、旋转搅拌式在使用效果上的差异,以得出使用脉冲式均质器在食品微生物快速检测中更优的结论。 一.材料(1) 试验材料 美国3M公司细菌总数测试片,美国3M公司酵母菌/霉菌测试片,检测样品来源于市场随机购买。(2) 主要培养基平板计数琼脂培养基、孟加拉红培养基、伊红美蓝琼脂、Baird-Parker 琼脂基础、亚硫酸铋(BS)琼脂。以上培养基均由广东环凯微生物科技有限公司提供。(3) 主要仪器设备ShockMixer-1 脉冲式样品前处理器(环凯制造)、拍打式均质器、搅拌式均质器、振荡器、高压蒸气灭菌锅、超净工作台、电子天平、移液枪、生化培养箱。(4) 菌株大 肠 埃 希 菌 、金黄色葡萄球菌、福氏志贺氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌。以上菌种均由广东环凯微生物科技有限公司提供。(5) 脉冲式均质器的工作原理通过高频率震动内装食品样品的专用胶袋,产生强烈冲击波与高速搅动联合作用,将食品中的微生物驱赶到样品悬液中,形成菌浓度均匀的样品稀释液。减轻了对样品的破坏,从而极大地减少了样品碎片的产生。食品样液澄清度高,能与快速检测方法更配套。 二.试验方法1.平板法

  • 【分享】拍击式均质器法国interscience为你提供准确微生物数据

    BagSystem 系列食品和固体样品均质仪及其附件 Model BagSystem Series Mixers and Accessories BagMixer 实验室样品混合均质的最佳工具 BagMixer 系统使从固体样品中提取细菌的过程变得非常简单,只需将样品和稀释液加入到无菌的 BagFilter 样品袋中 ,然后将样品袋放入 BagMixer 中,关上门即开始和完成样品的处理。 BagMixer 系统有效地 分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品,确保无菌袋中混合全部的样品 具有充分的代表性。 BagMixer 系统减少了样品的处理和准备时间,通常 30-60 秒 的处理时间是充分的。处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析,没有样品的变化和交叉污染的危险。 BagMixer 系统提 供多种标准模式,几乎包含分析和研究的所有领域。 优 点:—安静和容易操作 —全部不锈钢系统 —可拆卸和调整的搅拌器 —可调整的均质时间 —固定的或可变的均质速度 —渐进式均质,卓越的细胞保护 —无菌一次性滤袋,保证卫生和安全 —全开启式门,易于清洗 —水密双层安全门 —玻璃透明窗口易于观察 (W 型 ) —样品与均质仪无接触,不需要进行系统清洗 —废液槽以防止样品袋泄漏 —温度控制模式 ( 选择件 ) 型 号: BagMixer 400 型,包括 W 型 ( 玻璃门 ) 和 P 型 ( 钢门 ) 和 VW 型 ( 玻璃门 + 可变速 ) 应用领域: 食品微生物分析:原材料和成品,肉、鱼、蔬菜、水果、饼干 ... 等;药品和化妆品的微生物分析、烟草 ... 稀释和混合 ... 等等 有效容积: 50-400ml 时间范围: 30-210 秒或连续运转 可变速度: 400P 和 W 型: 8 次挤压 / 秒; 400VW 型: 6-9 次挤压 / 秒 外观尺寸: 40x20x24cm 主机重量: 16.5Kg 电源要求: 220V/50Hz 中国总代理,物美价廉,有您适合的一款!!!-------------------------------------------------------------------上海智理科学仪器有限公司 http://www.wisdomsci.net 021-51695868

  • 食品微生物用的均质器

    食品微生物检验用的拍击式均质器,我查到的都是进口的,价格不菲啊!日本的、法国的,怎么没有国产的啊大家有用的吗,希望提供一些信息[em45]

  • 关于均质器

    各位老师好。请问什么样的均质器好用,什么牌子,请给点建议。我们是做食品微生物检验用的,样品一般都是固体的。我从网上查有拍击式的均质器不知好用不。挺着急的。还有他的大概价位是多少。十分感谢。

  • 均质器的摆放

    请教各位,做微生物的均质器应该摆在无菌室里面还是无菌室外面?之前摆在里面,有一次审核时被一个老师说不能摆在里面,说样品的制备要在无菌室外面做,是这样的吗?

  • 食品微生物志贺氏菌方法验证

    食品微生物志贺氏菌方法验证

    [align=center][b]食品微生物志贺氏菌方法验证[/b][/align][align=left]近期在做食品中志贺氏菌的方法验证,与大家分享一下试验过程及结果。[/align][b]1[/b]、[b]目的:[/b]本实验是通过从人员能力、仪器设备、标准菌株及试剂、方法、环境五个方面对食品微生物志贺氏菌检验进行验证。[b]2、人员能力验证情况[/b]目前实验室人员经培训、考核,具备测定食品微生物学检验志贺氏菌测定的能力,人员能力验证合格。[b]3、仪器设备验证情况[/b]3.1方法对测试设备的要求恒温培养箱 :36℃±1℃、41.5℃±1℃3.2目前配备的设备情况:生化培养箱 上海龙跃LBI-150:36℃±1℃,生化培养箱 上海龙跃LBI-150:41.5℃±1℃;设备经过校准并确认合格。[b]4、标准菌株及试剂验证情况[/b]4.1方法对标准菌株、试剂的要求标准菌株:福氏志贺氏菌 ATCC12022培养基:志贺氏菌增菌肉汤、XLD培养基、麦康凯琼脂(MAC)、志贺氏菌显色培养基、三糖铁(TSI)琼脂、志贺氏菌干制生化鉴定试剂盒、志贺氏菌属四种多价诊断血清、福氏志贺氏菌TR-204、鲍氏诊断血清TR-205试剂:0.85%灭菌生理盐水4.2配备情况福氏志贺氏菌 ATCC12022:美国菌种保藏中心,有效期至2020.8.31志贺氏菌增菌肉汤:青岛高科技工业园海博生物技术有限公司,批号20180919麦康凯琼脂(MAC):青岛高科技工业园海博生物技术有限公司,批号20181227XLD培养基:青岛高科技工业园海博生物技术有限公司,批号20190305三糖铁(TSI)琼脂:青岛高科技工业园海博生物技术有限公司,批号20180828志贺氏菌显色培养基:北京陆桥生物技术有限公司,批号180518志贺氏菌干制生化鉴定试剂盒:北京陆桥生物技术有限公司,批号190122志贺氏菌属四种多价诊断血清:宁波天润生物药业有限公司,批号190101福氏志贺氏菌TR-204:宁波天润生物药业有限公司,批号20190101鲍氏诊断血清TR-205:宁波天润生物药业有限公司,批号20180101无菌生理盐水(氯化钠):AR 国药集团化学试剂有限公司,批号201811204.3验收情况:已验收合格[b]5、检测方法[/b]食品安全国家标准 食品微生物学检验 志贺氏菌GB 4789.5-2012,适用于食品中志贺氏菌的检验;方法现行有效,已受控。[b]6、环境条件验证情况[/b]6.1方法对测试环境的要求在环境温度为18℃~26℃,环境湿度为30%~70%,试验区域为百级洁净度进行。6.2目前对环境的设施和监控情况环境控制设备:空调 环境监控设备:温湿度表,已检定合格,在有效期内6.3环境验证情况定期进行沉降菌监测,验证洁净度,合格。[b]7、方法验证情况[/b]7.1验证方式:向样品中加入标准菌株。7.1.1合格标准:供试品+目标菌组生长良好。7.1.2样品:香肠[img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271322285776_2548_3949637_3.jpg!w690x920.jpg[/img]7.2验证内容7.2.1菌液制备:取福氏志贺氏菌 ATCC12022的工作菌斜面,用5mL生理盐水洗脱;将上述洗脱液用0.85%生理盐水稀释至菌浓度约为10~100CFU/mL的菌悬液备用。7.2.2培养基制备:按 GB 4789.5-2012 要求配制。7.2.3样品前处理:按 GB 4789.5-2016、GB /T4789.17-20037.2.4供试品+目标菌组7.2.4.1增菌:以无菌操作称取25g样品,放入盛有225mL的生理盐水无菌均质袋内;向此均质袋中加入每毫升含菌量约为10~100CFU/mL的福氏志贺氏菌 ATCC12022菌悬液1mL,混匀后作为试验组。于41.5℃±1 ℃,厌氧培养16h~20h。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271323545716_9092_3949637_3.jpg!w690x517.jpg[/img]7.2.4.2分离:取增菌后的志贺氏菌增菌液分别划线于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上,于36℃±1℃培养20h~24h,观察各个平板上生长的菌落形态。志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征见下表。[table][tr][td][align=center]选择性琼脂平板[/align][/td][td][align=center]志贺氏菌的菌落特征[/align][/td][/tr][tr][td]MAC琼脂[/td][td]无色至浅粉红色,半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐[/td][/tr][tr][td]XLD琼脂[/td][td]粉红色至无色,半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐[/td][/tr][tr][td]志贺氏菌显色培养基[/td][td]表面白色,周围紫红色菌落(在陆桥志贺氏菌显色培养基)[/td][/tr][/table][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271324513903_7521_3949637_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271324505666_7879_3949637_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271324525123_1111_3949637_3.jpg!w690x517.jpg[/img]7.2.4.4生化试验:将6.2.4.2中选择性平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落,分别接种三糖铁和营养琼脂斜面、半固体各一管,置36℃±1℃培养20h~24h,分别观察结果。凡是三糖铁琼脂中斜面产碱、底层产酸、不产气、不产硫化氢的菌株,进行生化试验和血清学试验。将可疑菌落制成0.5麦氏浊度的菌悬液分别接种生化试剂盒内,每孔接种0.2mL,置于36℃±1℃培养18h~24h。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271325394036_2347_3949637_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271325396586_4193_3949637_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271325414073_5644_3949637_3.jpg!w690x517.jpg[/img]7.2.4.5血清鉴定:多价O菌体抗原,挑取菌胎于载玻片上两个区域,其中一个区域加生理盐水,一个区域滴多价O血清,将菌胎研磨成乳状。将玻片摇动混合1min,如果抗血清中出现凝结成块的颗粒,而且生理盐水中没有发生自凝现象,凝集反应为阳性。判定检出志贺氏菌/25g样品中。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271326275466_3029_3949637_3.jpg!w690x517.jpg[/img]7.2.4.4同时做样品空白,样品均无菌生长。[img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271329172668_5569_3949637_3.jpg!w690x920.jpg[/img][img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907271329162206_1964_3949637_3.jpg!w690x920.jpg[/img]7.2.5以上试验验证结果如下:[table][tr][td][align=center][b]样品信息[/b][/align][/td][td][align=center][b]检测结果/25g[/b][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]香肠+福氏志贺氏菌[/align][/td][td][align=center]检出[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]香肠[/align][/td][td][align=center]未检出[/align][/td][/tr][/table]7.3验证结果:供试品+目标菌组生长良好。8、试验结论:本实验室在人员能力、仪器设备、标准物质、试剂、检验方法、环境条件等方面均具备了测定食品微生物志贺氏菌的能力;方法验证方面,综上所述本实验室通过样品加标与样品空白检验均达到食品微生物学检验 志贺氏菌GB 4789.5-2012 的要求,综合考虑,本实验室可以开展此项目。

  • 无菌均质器的应用范围和使用说明

    [color=#333333][url=http://www.chinanoted.com/][color=#e53333]无菌均质器[/color][/url],又称拍打式匀浆机,拍打式匀浆器,无菌均质器的应用范围如下:[/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、无菌均质器广泛用于动物组织、生物样品等均质处理,在食品、药品、化妆品、临床、分子学、毒素及细菌检测等领域均可应用,特别适合于微生物检测样本的制备。[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、无菌均质器[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]拍打式匀浆器[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]是在国外系列产品技术基础上改进并放大的先进产品,具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理,不需洗刷器皿的特点。[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、无菌均质器也适合肿瘤组织[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]如肝癌、肠癌、胃癌、乳腺癌[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]的匀浆,既可得到大量的单细胞,必要时,可通过延长均质时间,对组织细胞[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]如肝脏等[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]实现柔软的破碎。[/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、无菌均质器可有效地分离固体样品表面和被包含在内的微生物均一样品,样品装在一次性无菌均质袋中,不与仪器接触,运行快速、结果准确、重复性好的要求。[/color][color=#333333]该装置设有全开启式玻璃透明窗口门,易于清洗,玻璃透明窗口易于观察。采用大屏幕液晶显示,工作时间和均质速度智能可调,拍击器也可任意调整前后距离。可有效的分离实验样品表面和被包含在内的微生物均一样品,样品使用一次性无菌均质滤袋隔离操作,保证卫生和安全,不与仪器接触,无样品泄露而不需进行系统清洗,具有方便快速、结果准确、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理,不需洗刷器皿的特点,重复性好的要求。本产品也适合肿瘤组织(如肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌)的匀浆,既可得到大量的单细胞。必要时,可通过延长均质时间,对组织细胞实现柔软的破碎。 [/color][color=#333333]biosafer[/color][color=#333333][url=http://www.chinanoted.com/][color=#e53333]无菌均质器[/color][/url]是使从固体样品中提取细菌的过程变得非常简单,只需将样品和稀释液加入到无菌的样品袋中,然后将样品袋放入拍击式均质器中即可完成样品的处理。有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品,确保无菌袋中混合全部的样品。处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析,没有样品的变化和交叉污染的危险。应用领域:食品微生物分析;动物组织、生物样品、化妆品的均质处理;鱼、肉、蔬菜、水果、饼干;药品的微生物分析等[/color][color=#333333]。[/color][color=#333333]在使用[/color][color=#333333]biosafer[/color][color=#333333]无菌均质器时正确对待这些问题,可以使均质器更好的为您服务。 [/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]) 电源插头必须插紧到位,出现松动可能影响电脑控制器造成死机,如出现死机现象,请关闭后侧电源开关,关机[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]分钟后重新启动。[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]) 在锤击板工作时请不要随意打开均质器门,以免样品液溢出。应按“开[/color][color=#333333]/[/color][color=#333333]停”建,设备自动停止运行。当把门关上后,再按“开[/color][color=#333333]/[/color][color=#333333]停”建,设备自动完成余下工作。切勿颠倒操作。 [/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]) 仪器长期不使用应切断电源,拨去插头。防止无菌均质器内部电子元器件老化。 [/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]) 均质器门底部为防止均质袋意外破裂,便于清洗溢出物,底部设计为空的,可放置接水盘,所以仪器运转时请勿用手从底部伸入,以免纹伤手指。均质器工作时最好不要打开均质器门,造成不必要的损失。 [/color][color=#333333]5[/color][color=#333333]) 机器在运转前,请仔细查看均质箱内有无异物,以免工作时发生故障和损伤均质袋。[/color][color=#333333]6[/color][color=#333333]) 硬块,骨状,冰状物等坚硬锐利的物质不宜使用,以免破坏均质袋。 [/color][color=#333333]7[/color][color=#333333]) 仪器和均质袋的存放都应避免阳光的直接照射,特别是均质袋应存放在无阳光或避免紫外线照射的地方,以免老化。 [/color][color=#333333]8[/color][color=#333333]) 量少时,需加快速度时,均质物纤维比较坚韧时,则可用后面旋钮调节拍击板与可视窗的间距,来达到更好的均质效果。注意调整的距离,避免发生空击等损伤无菌均质器的情况发生。 [/color][color=#333333][url=http://www.chinanoted.com/][color=#e53333]无菌均质器[/color][/url]正确使用步骤为: [/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、把需处理的试品放入无菌均质袋中。 [/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、打开均质器门(可全开启),将无菌袋开口在关闭均质器门时夹住。 [/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、设定使用程序(如拍击速度、拍击时间等),进行拍击均质工作。 [/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、实验完毕后,打开均质器门,取出样品。 [/color][color=#333333]无菌均质器的使用如果做到以上几点,可以极大延长其使用寿命和使用效果。 [/color]

  • 【实战宝典】实验室里剩余的生物样品该如何处置?

    问题描述:实验室里剩余的生物样品该如何处置?解答:[font=宋体]含有病原微生物的样品必须遵守感染性废弃物的处理原则,所有潜在感染危险物品的处理,必须先去污染,未经消毒不能拿出实验室,液体废弃物经离心后上清液,感染细胞培养的营养液和洗涤液等必须收集在防漏、未破损的容器内,经高浓度的化学消毒剂作用。对于剩余样品,接种过的培养基、菌种等,在丢弃之前均需采用适当方法消毒;特别是来源于分枝杆菌、真菌和病毒实验者,应在实验室内经高压蒸气灭菌后方可拿出实验室,对于任何有污染的锐器处理前不要用手接触。这些物品应置于盛有消毒液的硬壁容器内,最好经高压蒸气灭菌后丢弃或再处理保存。[/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》

  • 【原创】实验室均质器的分类及应用

    均质过程即是将原始样本与某种液体或溶剂混匀,得到成分分布均匀的溶液。实验室用均质器大体可分为:探头旋刃式均质器、超声波破碎均质器和敲打式均质器(拍击式、研磨珠式)三类。探头旋刃式均质器是通过研磨杵在均质管内转动,达到分离、混匀、破碎、均质的目的,适合处理韧性强的样品。用于分散动物/植物组织,配合裂解液做核酸、蛋白等的抽提,也可用于工业上树脂、色素制造悬浮/乳浊液等。具有低速、扭力大、无噪音等特点。使用方便,通过更换不同的探头,可以处理不同量的样品(0.2微升-数百升),操作简便,更适合单样品操作。缺点:不能同时处理多个样品,不同样品需要更换或清洗探头,增加样品间交叉污染的机会;不适合细菌、酵母及其他真菌等厚壁样品的处理。超声波破碎均质器用于各种组织/细胞裂解、细胞器、核酸、蛋白的提取,以及其他工业样品的乳化、均质。使用方便,通过更换不同的探头,可以处理不同量的样品;乳化、均质效果好,适合单样品操作。缺点:不能同时处理多个样品,不同样品需要更换或清洗探头,增加样品间交叉污染的机会;升温快,对生物样品不友好。敲打式均质器拍击式均质器通过捶击板不停地在袋上捶击。产生的压力可将袋中的物质击碎混匀。研磨珠均质器是将样品和相应的珠子放到试管里通过三维高速旋转、振动,靠研磨珠的高速敲打方式对样品进行研磨、均质将样品打碎,适用范围广。用于动物和植物组织、藻类、细菌、酵母、真菌或霉菌以及各类孢子体的破碎,DNA/RNA、蛋白的提取。能够高效地处理包括骨头、孢子、土壤等在内的顽固样品,通量高,不会交叉污染,操作简便、高效。处理脆性样品较好,缺点:不能处理大体积样品,单个样品单次处理量一般小于1.5ml,耗材和设备投入较高。

  • 微生物致病菌检测仪应用场景

    微生物致病菌检测仪是一款采用生物化学反应方法检测ATP(三磷酸腺苷)含量的科学仪器。由于活细胞中都含有ATP,通过测量ATP的含量,可以判断被测样品中微生物及其他生物参与的多少,进而用于判断卫生情况。  微生物致病菌检测仪具有操作相对简单、高灵敏性的特点,但非专业人员在使用时仍需注意一些问题,以免影响仪器检测的准确性。  微生物致病菌检测仪的应用场景包括但不限于以下领域:  制药行业:用于检查原料药、注射用水、口服液、片剂、胶囊、生物制品及制剂的微生物限度,确保药品质量和安全性。  疾控中心:用于检测江、河、湖、海、水样,以及空调冷凝水、生活饮用水等水质的细菌总数和致病菌,进行水质监测和评估。  食品行业:适用于饮料、矿泉水、纯净水等产品的菌落总数检查,确保食品质量和安全。  化妆品行业:用于检测各种用水及产品中的微生物含量,保证产品质量和安全性。  医院和医疗保健机构:用于空气微生物的采样研究,如洁净室和手术室的无菌检测,以及室内环境的微生物监测。  科研机构:用于进行微生物限度研究和实验,如药物研发、生物工程等领域。  此外,还有其他需要进行微生物限度检测的领域,如发酵、化工等,以及需要保证产品质量和安全性的其他行业。  请注意,虽然微生物致病菌检测仪具有广泛的应用,但在使用过程中仍需遵循相关操作规范,以确保检测结果的准确性和可靠性。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405091043269783_6130_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 【分享】工业微生物产生菌的分离筛选

    原生动物(103),其中放线菌和霉菌指其孢子数。但各种微生物由于生理特性不同,在土壤中的分布也随着地理条件、养分、水分、土质、季节而有很大的变化。因此,在分离菌株前要根据分离筛选的目的,到相应的环境和地区去采集样品。(一)根据土壤特点1. 土壤有机质含量和通气状况一般耕作土、菜园土和近郊土壤中有机质含量丰富,营养充足,且土壤成团粒结构,通气饱水性能好,因而,微生物生长旺盛,数量多,尤其适合于细菌、放线菌生长。山坡上的森林土,植被厚,枯枝落叶多,有机质丰富,且阴暗潮湿,适合霉菌、酵母菌生长繁殖,微生物数量相应也比较少。从土层的纵剖面看,1~5cm的表层土由于阳光照射,蒸发量大,水分少,且有紫外线的杀菌作用,因而微生物数量比5~25cm土层少;25cm以下土层则因土质紧密,空气量不足,养分与水分缺乏,含菌量也逐步减少。因此,采土样最好的土层是5~25cm。一般每克土中含菌数约几十万到几十亿个,并且各种类型的细菌和放线菌几乎都能分离到。如好气芽孢杆菌、假单胞菌、短杆菌、大肠杆菌、某些嫌气菌等。但总的说来酵母菌分布土层最浅,约5~10cm,霉菌和好氧芽孢杆菌也分布在浅土层。2. 土壤酸碱度和植被状况土壤酸碱度会影响微生物种类的分布。偏碱的土壤(pH7.0~7.5)环境,适合于细菌、放线菌生长。反之在偏酸的土壤(pH7.0以下)环境下,霉菌、酵母菌生长旺盛。由于植物根部的分泌物有所不同,因此,植被对微生物分布也有一定的影响。如番茄地或腐烂番茄堆积处有较多维生素C生产菌。葡萄或其他果树在果实成熟时,其根部附近土壤中酵母菌数量增多。豆科植物的植被下,根瘤菌数量比其他植被下占优势。3. 地理条件南方土壤比北方土壤中的微生物数量和种类都要多,特别是热带和亚热带地区的土壤。许多工业微生物菌种,如抗生素产生菌,尤其是霉菌、酵母菌,大多从南方土壤中筛选出来。原因是南方温度高,温暖季节长,雨水多,相对湿度高,植物种类多,植被覆盖面大,土壤有机质丰富,造成得天独厚的微生物生长环境。4. 季节条件不同季节微生物数量有明显的变化,冬季温度低,气候干燥,微生物生长缓慢,数量最少。到了春天随着气温的升高,微生物生长旺盛,数量逐渐增加。但就南方来说,春季往往雨水多,土壤含水量高,通气不良,即使有微生物所需的温度、湿度,也不利于其生长繁殖。随后经过夏季到秋季,约有7~10个月处在较高的温度和丰富的植被下,土壤中微生物数量比任何时候都多,因此,秋季采土样最为理想。(二)采样方法用取样铲,将表层5cm左右的浮土除去,取5~25处的土样10~25,装入事先准备好的塑料袋内扎好。北方土壤干燥,可在10~30处取样。给塑料袋编号并记录地点、土壤质地、植被名称、时间及其他环境条件。一般样品取回后应马上分离,以免微生物死亡。但有时样品较多,或到外地取样,路途遥远,难以做到及时分离,则可事先用选择性培养基做好试管斜面,随身带走。到一处将取好的土样混匀,取3~4撒到试管斜面上,这样可避免菌株因不能及时分离而死亡。

  • 【讨论】工业微生物产生菌的分离筛选(一)

    原生动物(103),其中放线菌和霉菌指其孢子数。但各种微生物由于生理特性不同,在土壤中的分布也随着地理条件、养分、水分、土质、季节而有很大的变化。因此,在分离菌株前要根据分离筛选的目的,到相应的环境和地区去采集样品。(一)根据土壤特点1. 土壤有机质含量和通气状况一般耕作土、菜园土和近郊土壤中有机质含量丰富,营养充足,且土壤成团粒结构,通气饱水性能好,因而,微生物生长旺盛,数量多,尤其适合于细菌、放线菌生长。山坡上的森林土,植被厚,枯枝落叶多,有机质丰富,且阴暗潮湿,适合霉菌、酵母菌生长繁殖,微生物数量相应也比较少。从土层的纵剖面看,1~5cm的表层土由于阳光照射,蒸发量大,水分少,且有紫外线的杀菌作用,因而微生物数量比5~25cm土层少;25cm以下土层则因土质紧密,空气量不足,养分与水分缺乏,含菌量也逐步减少。因此,采土样最好的土层是5~25cm。一般每克土中含菌数约几十万到几十亿个,并且各种类型的细菌和放线菌几乎都能分离到。如好气芽孢杆菌、假单胞菌、短杆菌、大肠杆菌、某些嫌气菌等。但总的说来酵母菌分布土层最浅,约5~10cm,霉菌和好氧芽孢杆菌也分布在浅土层。2. 土壤酸碱度和植被状况土壤酸碱度会影响微生物种类的分布。偏碱的土壤(pH7.0~7.5)环境,适合于细菌、放线菌生长。反之在偏酸的土壤(pH7.0以下)环境下,霉菌、酵母菌生长旺盛。由于植物根部的分泌物有所不同,因此,植被对微生物分布也有一定的影响。如番茄地或腐烂番茄堆积处有较多维生素C生产菌。葡萄或其他果树在果实成熟时,其根部附近土壤中酵母菌数量增多。豆科植物的植被下,根瘤菌数量比其他植被下占优势。3. 地理条件南方土壤比北方土壤中的微生物数量和种类都要多,特别是热带和亚热带地区的土壤。许多工业微生物菌种,如抗生素产生菌,尤其是霉菌、酵母菌,大多从南方土壤中筛选出来。原因是南方温度高,温暖季节长,雨水多,相对湿度高,植物种类多,植被覆盖面大,土壤有机质丰富,造成得天独厚的微生物生长环境。4. 季节条件不同季节微生物数量有明显的变化,冬季温度低,气候干燥,微生物生长缓慢,数量最少。到了春天随着气温的升高,微生物生长旺盛,数量逐渐增加。但就南方来说,春季往往雨水多,土壤含水量高,通气不良,即使有微生物所需的温度、湿度,也不利于其生长繁殖。随后经过夏季到秋季,约有7~10个月处在较高的温度和丰富的植被下,土壤中微生物数量比任何时候都多,因此,秋季采土样最为理想。(二)采样方法用取样铲,将表层5cm左右的浮土除去,取5~25处的土样10~25,装入事先准备好的塑料袋内扎好。北方土壤干燥,可在10~30处取样。给塑料袋编号并记录地点、土壤质地、植被名称、时间及其他环境条件。一般样品取回后应马上分离,以免微生物死亡。但有时样品较多,或到外地取样,路途遥远,难以做到及时分离,则可事先用选择性培养基做好试管斜面,随身带走。到一处将取好的土样混匀,取3~4撒到试管斜面上,这样可避免菌株因不能及时分离而死亡。

  • 扫描电镜的生物材料样品制备方法

    扫描电子显微镜样品制备比透射电镜样品制备简单,不需要包埋和切片。扫描电子显微镜样品的制备,必须满足以下要求:①保持完好的组织和细胞形态;③充分暴露要观察的部位;③良好的导电性和较高的二次电子产额;④保持充分干燥的状态。  某些含水量低且不易变形的生物材料,可以不经固定和干燥而在较低加速电压下直接观察,如动物毛发、昆虫、植物种子、花粉等,但图象质量差,而且观察和拍摄照片时须尽可能迅速。对大多数的生物材料,则应首先采用化学或物理方法固定、脱水和干燥,然后喷镀碳与金属以提高材料的导电性和二次电子产额。  化学方法制备样品  化学方法制备样品的程序通常是:清洗→化学固定→干燥→喷镀金属。  1、清洗:某些生物材料表面常附血液、细胞碎片、消化道内的食物残渣、细菌、淋巴液及粘液等异物,掩盖着要观察的部位,因而,需要在固定之前用生理盐水或等渗缓冲液等把附着物清洗干净。亦可用5%碳酸钠冲洗或酶消化法去除这些异物。  2、固定:通常采用醛类(主要是戊二醛和多聚甲醛)与四氧化锇双固定,也可用四氧化锇单固定。四氧化锇固定不仅可良好地保存组织细胞结构,而且能增加材料的导电性和二次电子产额,提高扫描电子显微图象的质量。这对高分辨扫描电子显微术是极端重要的。为增强这种效果,可用四氧化锇-单宁酸或是四氧化锇-珠叉二胼等反复处理材料,使其结合更多的重金属锇,这就是导电染色。  3、干燥:固定后通常采用临界点干燥法。其原理是:适当选择温度和压力,使液体达到临界状态(液态和气相间界面消失),从而避免在干燥过程中由水的表面张力所造成的样品变形。对含水生物材料直接进行临界点干燥时,水的临界温度和压力不能过高(37.4℃,218帕)。通常用乙醇或丙酮等使材料脱水,再用一种中间介质,如醋酸戊酯,置换脱水剂,然后在临界点干燥器中用液体或固体二氧化碳、氟利昂13以及一氧化二氮等置换剂置换中间介质,进行临界干燥。  4、喷镀金属:将干燥的样品用导电性好的粘合剂或其他粘合剂粘在金属样品台上,然后放在真空蒸发器中喷镀一层50~300埃厚的金属膜,以提高样品的导电性和二次电子产额,改善图象质量,并且防止样品受热和辐射损伤。如果采用离子溅射镀膜机喷镀金属,可获得均匀的细颗粒薄金属镀层,提高扫描电子图象的质量。  冷冻方法制备样品  低温扫描电子显微术是20世纪80年代迅速发展和广泛应用的方法。它包括生物样品的冷冻固定、冷冻干燥、冷冻割断和冷冻含水样品的扫描电子显微术等。  1、冷冻固定:将生物材料投入低温的致冷剂中,如液氦、液氮、液体氟利昂及丙烷等。快速冷冻可使生物组织细胞的结构和化学组成接近于生活状态。被冷冻固定的生物样品,可以在低温条件下转移到具有低温样品台的扫描电子显微镜中直接观察无需进一步处理或仅在冷冻样品表面喷镀一薄层金属。这种方法不仅快速简便,而且可以排除由于干燥法造成收缩的假象,特别适合于研究含水量很高的生物材料。  2、冷冻干燥:生物样品经冷冻固定后,其中的水分冻结成冰,表面张力消失;再将冷冻样品放于真空中,使冰渐渐升华为水蒸气。这样获得的干燥样品在一定程度上避免了表面张力造成的形态改变。

  • 【讨论】生物制品无菌检查

    药典附录中规定的无菌检查方法中化学制剂和生物制品的检查方法不同,其中生物制品无菌要求样品分三份,过滤后一份加改良马丁,另两份加硫乙醇酸盐,一份30-35度培养,一份硫和一份改25-28度培养。而二部无菌只需要各做一份,分两种温度培养。为什么呢?生物制品多做个硫,有什么意义吗?

  • 【原创大赛】生物内样品预处理

    【原创大赛】生物内样品预处理

    生物内样品预处理生物样品成分复杂,往往含有大量有机物、无机物及各种矿物质元素,在对目标成分进行分析检测时,首先要排除内源性杂质及代谢物的干扰,又要对目标成分进行富集纯化以满足仪器检测灵敏度的要求。在处理的过程中,还要密切关注目标成分的理化性质,如失活,空气氧化,蛋白水解等,生物样品的提取制备繁琐复杂,下面我们对一些常规的预处理方法进行归类总结。1.样品均匀化样品均匀化可采用物理方法和化学方法。简单总结如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307241405_453376_1444635_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307241406_453378_1444635_3.jpg http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307241406_453380_1444635_3.jpg2.去蛋白处理蛋白质的存在常常干扰生物样品中一些小分子化合物的检测。在色谱分析中,蛋白质的存在有可能会堵塞色谱柱,导致柱压升高,影响柱效,对仪器产生较大损伤。去除蛋白质的方法主要有:2.1 加入与水混溶的有机溶剂对于生物样品中极性成分,可加入极性有机溶剂甲醇、乙腈、乙醇、丙酮等,它们能与水互溶,使样品中的蛋白质脱水沉淀。按体积比1:2加入过量极性有机溶剂,离心,可沉淀98%的蛋白质。优点:蛋白脱水生成沉淀,通过离心即可除去,操作简便;若样品用于反相高效液相色谱法进行分析,上清液与流动相相匹配。局限性:但凡能溶于水-醇系统的物质,均在上清液中被提取出来,对于目标成分并没有很好的分离,上清液由于加液量多,难于挥干浓缩,残留的微量蛋白有可能会引起色谱柱堵塞。2.2加入酸性沉淀剂酸性沉淀剂能同蛋白质的阳离子形成不溶性盐。加酸性沉淀剂10%三氯醋酸、6%高氯酸钼、钼酸、磷钨酸、苦味酸等,调节溶液的pH值低于蛋白的等电点,使蛋白形成白色沉淀,加热使淀完全,离心,得上清液。优点: 沉淀作用强,0.2体积即达99.7%的沉淀率。局限性:上清液须用乙醚等萃取,萃取剂可能对目标成分产生干扰。2.3加入无机盐类无机盐类可以使蛋白质胶体脱水并中和其电荷而沉淀。常用无机盐类:饱和硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。局限性:沉淀率较低。2.4加入重金属盐类重金属盐类如汞盐、铜盐、锌盐等可与蛋白质形成不溶性盐而沉淀2.5其它非化学方法可用平衡透析法、超滤法去除大分子蛋白。液液萃取或液固萃取在萃取药物的同时,直接去蛋白。3.冷冻干燥冷冻干燥是生物预处理的有效方法,主要适用于水溶性较强的生物样品。将生物样品置于液氮、冰-丙酮浴或-40℃冰箱等低温条件下冷冻,冷冻好的样品放入冻干机中减压干燥,干燥的过程冰直接升华为水蒸气,其它杂质也一并挥发掉。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307241407_453382_1444635_3.jpg4.结合物水解药物在代谢后形成的葡萄苷酸、硫酸酯等结合物,使药物无法以游离状态存在,若要检测药物离子浓度,则需要通过酸水解、酶水解、溶剂解等方式。5.贮存预处理好的生物样品如在短期(如日内)即行分析的样品,置于4℃冰箱冷藏;需放置数日或较短时日的:-20℃冷冻;长期贮存:-40℃~ -80℃。

  • 样品零度保鲜的微生物繁殖情况

    化验室留样一般均在零度左右的冰箱中存放。但是不知道该温度下样品能保留多少天?保存过程中微生物繁殖情况是怎么样的?有朋友做过测试么?

  • 微生物检验样品采集应注意的问题

    样品的采集是微生物检验的重要组成部分,用于检验的样品数量和状况具有重要意义。这对取样人员和制样人员提出了很高的专业要求,既要保证样品的代表性和一致性,又要保证整个微生物检验过程在无菌操作的条件下进行。微生物检验样品的采集大致分为取样、包装密封、标志、样品的运输、接收、保存几个环节。1 取样取样是指在一定质量或数量的产品中,取一个或多个代表性样品,用于感官、微生物和理化检验的全过程。首先在取样之前应确认货、证是否相符。其次取样工具要达到无菌的要求,对取样具和一些试剂材料应提前准备、灭菌。如果使用不合适的采集工具,可能会破坏样品的完整性,甚至使样品采集毫无意义。应根据不同的样品特征和取样环境,对取样物品和试剂进行事先准备和灭菌等T作。另外要保证样品能够代表整批产品,其检测结果应具有统计学有效性,样品到达实验室时的状况应能反映出取样时产品的真实情况。取样时应根据不同的产品类型、产品状态等选择不同的取样方法和标准。① 包装食品对于直接食用的小包装食品,尽可能取原包装,直到检验前不要开封,以防污染。对于桶装或大容器包装的液体食品,取样前应摇动或用灭菌棒搅拌液体,尽量使其达到均质;取样时应先将取样用具浸入液体内略加漂洗,然后再取所需量的样品,装入灭菌容器的量不应超过其容量的3/4,以便于检验前将样品摇匀;取完样品后,应用消毒的温度计插入液体内测量食品的温度,并作记录。尽可能不用水银温度计测量,以防温度计破碎后水银污染食品;如为非冷藏易腐食品,应迅速将所取样品冷却至0~4℃。对于大块的桶装或大容器包装的冷冻食品,应从几个不同部位用灭菌工具取样,使样品具有充分的代表性;在将样品送达实验室前,要始终保持样品处于冷冻状态样品一旦融化,不可使其再冻,保持冷却即可。② 生产过程中的取样 划分检验批次,应注意同批产品质量的均一性;如用固定在贮液桶或流水作业线上的取样龙头取样时,应事先将龙头消毒;当用自动取样器取不需要冷却的粉状或同定食品时,必须履行相应的管理办法,保证产品的代表性不被人为地破坏。

  • 【转帖】工业微生物产生菌的分离筛选(二)

    富集(enrichment)培养是在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种,以利分离到所需要的菌株。富集培养主要根据微生物的碳、氮源、pH、温度、需氧等生理因素加以控制。一般可从以下几个方面来进行富集。一、控制培养基的营养成分微生物的代谢类型十分丰富,其分布状态随环境条件的不同而异。如果环境中含有较多某种物质,则其中能分解利用该物质的微生物也较多。因此,在分离该类菌株之前,可在增殖培养基中人为加入相应的底物作惟一碳源或氮源。那些能分解利用的菌株因得到充足的营养而迅速繁殖,其他微生物则由于不能分解这些物质,生长受到抑制。当然,能在该种培养基上生长的微生物并非单一菌株,而是营养类型相同的微生物群。富集培养基的选择性只是相对的,它只是微生物分离中的一个步骤。现举两例,如要分离水解酶产生菌,可在富集培养基中以相应底物为惟一碳源,加入含菌样品,给目的微生物以最佳的培养条件(pH、温度、营养、通气等)进行培养。能分解利用该底物的菌类得以繁殖,而其他微生物则因得不到碳源无法生长,菌数逐渐减少。此时分离将得到所需的微生物。又如要分离耐高渗酵母菌,由于该类菌在一般样品中含量很少,富集培养基和培养条件必须严密设计。首先要到含糖分高的花蜜、糖质中去取样。富集培养基为5%~6%的麦牙汁,30%~40%葡萄糖,pH3~4,在20~25℃温度下进行培养,可以达到富集的目的。在富集培养时,还需根据微生物的不同种类选用相应的富集培养基,如淀粉琼脂培养基通常用于丝状真菌的增殖,配方为(%):可溶性淀粉4,酵母浸膏0.5,琼脂2,pH6.5~7.0。在配制时要特别注意酵母浸膏加量,过多会刺激菌丝生长,而不利于孢子的产生。根据微生物对环境因子的耐受范围具有可塑性的特点,可通过连续富集培养的方法分离降解高浓度污染物的环保菌。如以苯胺作惟一碳源对样品进行富集培养,待底物完全降解后,再以一定接种量转接到新鲜的含苯胺的富集培养液中,如此连续移接培养数次。同时将苯胺浓度逐步提高,便可得到降解苯胺占优势的菌株培养液,采用稀释涂布法或平板划线法进一步分离,即可得到能降解高浓度苯胺的微生物。移种的时间既可根据底物的降解情况,也可通过微生物的生长情况确定。如在分离环己烷降解菌时,样品经环己烷为惟一碳源的培养基富集后,培养液由原来的无色变为浑浊的乳白色。同时锥行瓶壁上也可观察到微生物的生长情况。此时可以2%的接种量移入新鲜的富集培养基中继续培养。连续富集培养的方法虽耗时较长,有时甚至需要6~7个月,但效果较好。通过该方法分离DDT、甲基对硫磷(MP)及其他一些污染物的分解菌,也都取得了满意的结果。二、控制培养条件在筛选某些微生物时,除通过培养基营养成分的选择外,还可通过它们对pH、温度及通气量等其他一些条件的特殊要求加以控制培养,达到有效的分离目的。如细菌、放线菌的生长繁殖一般要求偏碱(7.0~7.5),霉菌和酵母菌要求偏酸(4.5~6)。因此,富集培养基的pH值调节到被分离微生物的要求范围不仅有利于自身生长,也可排除一部分不需要的菌类。分离放线菌时,可将样品液在40℃恒温预处理20分钟,有利于孢子的萌发,可以较大的增加放线菌数目,达到富集的目的。筛选极端微生物时,需针对其特殊的生理特性,设计适宜的培养条件,达到富集的目的。一般所筛选的微生物通常是好氧菌,但有时也需分离厌氧菌。因严格厌氧菌不仅可省略通气、搅拌装置,还可节省能耗。这时除了配置特殊的培养基外,还需准备特殊的培养装置,创造一个有利于厌氧菌的生长环境,使其数量增加,易于分离。三、抑制不需要的菌类在分离筛选的过程中,除了通过控制营养和培养条件,增加富集微生物的数量以有利于分离外,还可通过高温、高压、加入抗生素等方法减少非目的微生物的数量,使目的微生物的比例增加,同样能够达到富集的目的。从土壤中分离芽孢杆菌时,由于芽孢具有耐高温特性,100℃很难杀死,要在121℃才能彻底死亡。可先将土样加热到80℃或在50%乙醇溶液中浸泡1h,杀死不产芽孢的菌种后再进行分离。在富集培养基中加入适量的胆盐和十二烷基磺酸钠可抑制革兰阳性菌的生长,对革兰阴性无抑制作。分离厌氧菌时,可加入少量硫乙醇酸钠作为还原剂,它能使培养基氧化还原电势下降,造成缺氧环境,有利于厌氧菌的生长繁殖。筛选霉菌时,可在培养基中加入四环素等抗生素抑制细菌,使霉菌在样品的比例提高,从中便于分离到所需的菌株;分离放线菌时,在样品悬浮液中加入10滴10%的酚或加青霉素(抑制G+菌)、链霉素(抑制G-菌)各30~50U/ml,以及丙酸钠10μg/ml(抑制霉菌类)抑制霉菌和细菌的生长。另外据报道,重铬酸钾对土壤真菌、细菌有明显的抑制作用,也可用于选择分离放线菌。在分离除链霉菌以外的放线菌时,先将土样在空气中干燥,再加热到100℃保温1h,可减少细菌和链霉菌的数量。分离耐高浓度酒精和高渗酵母菌时,可分别将样品在高浓度酒精和高浓度蔗糖溶液中处理一段时间,杀死非目的微生物后再进行分离。对于含菌数量较少的样品或分离一些稀有微生物时,采用富集培养以提高分离工作效率是十分必要的。但是如果按通常分离方法,在培养基平板上能出现足够数量的目的微生物,则不必进行富集培养,直接分离、纯化即可。

  • 【讨论】均质器应用

    食品微生物检测需要均质器,诸位实验室购买了此装备?运用效果如何?经常使用?推荐一下那家均质器好用。

  • 【分享】微生物的分离、培养和菌种保藏

    在自然条件下,微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。为了研究某种微生物的特性,或者大量培养和利用某一种微生物,必须事先从有关的生态环境中分离出所需的菌株,获得纯培养。获得纯培养的方法,称为微生物的纯种分离法,这一过程称为微生物的分离和纯化。欲从含有多种微生物的样品中直接辨认出,并且取得某种所需微生物的个体,进行纯培养,那是困难的。由于微生物可以形成菌落,而每个单一菌落常常很可能是由一种个体繁殖而成。不同微生物的菌落是可以识别和加以鉴定的。因些将样品中不同微生物个体在特定的培养基上培养出不同的单一菌落,再从选定的某一所需菌落中取样,移植到新的培养基中去,就可以达到分离纯种的目的。这也就是常用纯种分离法的原理。在微生物的分离和纯培养过程中,必须使用无菌操作技术。所谓无菌操作,就是在分离、接种、移植等各个操作环节中,必须保证在操作过程中杜绝外界环境中的杂菌进入培养的容器或系统内,从而污染培养物。具体操作方法见本实验有关部分和教师作示范。获得微生物纯培养的常用方法有稀释平板分离法和平板划线分离法等。有条件的单位也可用显微操纵器单细胞分离法。针对不同的分离材料和条件,可以采用不同的分离方法。一、目的要求1. 初步掌握微生物的分离、培养和菌种保藏的基本方法。2. 练习微生物接种、移植和培养的基本技术,掌握无菌操作技术。二、实验材料样品:新鲜土壤。培养基:灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、淀粉琼脂培养基、马铃薯蔗糖培养基(10mL装)。无菌水:带有玻璃珠装有45mL无菌水三角瓶、装有9 mL无菌水的试管。其它:无菌培养皿、无菌吸管、无菌三角玻棒、台天平、记号笔、接种环、酒精灯、火柴、标签纸、胶水、水泡锅。试剂:5000U/mL链霉素液0.5%重铅酸钾液。

  • 微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数

    一、实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使其成单个细胞存在,否则一个菌落就不只是代表一个细胞,再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。此记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些产品检定,如根瘤菌剂等产品检定,生物制品检验,土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。自然条件下,微生物常以群落状态存在,这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物,必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养,这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。在自然界中,土壤是微生物生活的良好环境,其中生活的微生物数量和种类都是极其丰富的,因此土壤是人类开发利用微生物资源的重要基地。土壤中的微生物数量、种类与土壤肥力有关,肥沃的土壤中多,贫瘠土壤中少。其生理类群则与土壤的其它理化性质,如通气、pH有关,例如在通气良好的菜园土中,好气性微生物占有绝对优势。本实验以菜园土为材料分离土壤中的好气性细菌,并进行数量测定。分离微生物时,一般是根据该微生物对营养、pH、氧气等要求的不同,供给它们适宜的生活条件,或加入某种抑制剂造成只利于该菌种生长,不利于其它菌种生长的环境,从而淘汰不需要的菌种。分离微生物常用的方法有稀释平板分离法和划线分离法,根据不同的材料,可以采用不同方法,其最终目的是要在培养基上出现欲分离微生物的单个菌落,必要时再对单个菌落进一步分离纯化。在用稀释平板分离微生物时,还可以同时测定待分离的微生物的数量。放线菌与细菌同属原核微生物,是重要的抗生素产生菌,在土壤中的数量仅次于细菌,尤其是在有机质丰富、透气性好的中性到微碱性土壤中的数量较多。本实验采用高氏一号琼脂培养基分离和计数菜园土中的放线菌。真菌在土壤中的数量次于细菌和放线菌,主要在有机质丰富、透气性好的偏酸性土壤中较多。分离土壤中的真菌并不难,但由于其菌落大,容易扩展,计数准确性较低。本实验采用加有氯霉素或庆大霉素和孟加拉红的马丁氏培养基分离及计数菜园土中的真菌。按一般资料介绍为链霉素,但此种抗生素要先配成一定浓度的溶液,且应于倒平板前才加入培养基中。在此培养基上,放线菌和细菌被氯霉素或庆大霉素和孟加拉红所抑制,但大多数真菌能够生存,且其菌落受孟加拉红的抑制而较小,从而避免了某些真菌的扩散蔓延而带来的数量上的误差。

  • 无菌均质器使用八大注意事项

    无菌均质器,又称拍打式匀浆机,拍打式匀浆器。主要用于生物技术领域的组织分散、医药领域的样品准备、食品工业的酶处理以及在制药工业、化妆品工业、油漆工业和石油化工等方面。   该装置设有全开启式玻璃透明窗口门,易于清洗,玻璃透明窗口易于观察。采用大屏幕液晶显示,工作时间和均质速度智能可调,拍击器也可任意调整前后距离。可有效的分离实验样品表面和被包含在内的微生物均一样品,样品使用一次性无菌均质滤袋隔离操作,保证卫生和安全,不与仪器接触,无样品泄露而不需进行系统清洗,具有方便快速、结果准确、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理,不需洗刷器皿的特点,重复性好的要求。本产品也适合肿瘤组织(如肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌)的匀浆,既可得到大量的单细胞。必要时,可通过延长均质时间,对组织细胞实现柔软的破碎。   BILON品牌无菌均质器是使从固体样品中提取细菌的过程变得非常简单,只需将样品和稀释液加入到无菌的样品袋中,然后将样品袋放入拍击式均质器中即可完成样品的处理。有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品,确保无菌袋中混合全部的样品。处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析,没有样品的变化和交叉污染的危险。应用领域:食品微生物分析;动物组织、生物样品、化妆品的均质处理;鱼、肉、蔬菜、水果、饼干;药品的微生物分析等。   在使用我公司的无菌均质器时,有八个需要注意的地方,正确对待这些问题,可以使均质器更好的为您服务。   1) 电源插头必须插紧到位,出现松动可能影响电脑控制器造成死机,如出现死机现象,请关闭后侧电源开关,关机3分钟后重新启动。   2) 在锤击板工作时请不要随意打开均质器门,以免样品液溢出。应按“开/停”建,设备自动停止运行。当把门关上后,再按“开/停”建,设备自动完成余下工作。切勿颠倒操作。   3) 仪器长期不使用应切断电源,拨去插头。防止无菌均质器内部电子元器件老化。   4) 均质器门底部为防止均质袋意外破裂,便于清洗溢出物,底部设计为空的,可放置接水盘,所以仪器运转时请勿用手从底部伸入,以免纹伤手指。均质器工作时最好不要打开均质器门,造成不必要的损失。   5) 机器在运转前,请仔细查看均质箱内有无异物,以免工作时发生故障和损伤均质袋。   6) 硬块,骨状,冰状物等坚硬锐利的物质不宜使用,以免破坏均质袋。   7) 仪器和均质袋的存放都应避免阳光的直接照射,特别是均质袋应存放在无阳光或避免紫外线照射的地方,以免老化。   8) 量少时,需加快速度时,均质物纤维比较坚韧时,则可用后面旋钮调节拍击板与可视窗的间距,来达到更好的均质效果。注意调整的距离,避免发生空击等损伤无菌均质器的情况发生。   无菌均质器正确使用步骤为:   1、把需处理的试品放入无菌均质袋中。   2、打开均质器门(可全开启),将无菌袋开口在关闭均质器门时夹住。   3、设定使用程序(如拍击速度、拍击时间等),进行拍击均质工作。   4、实验完毕后,打开均质器门,取出样品。   无菌均质器的使用如果做到以上几点,可以极大延长其使用寿命和使用效果。让我们正确使用无菌均质器从现在开始!

  • 微生物实验室,检测项目暂不涉及致病菌,是否还需要任命生物安全责任人与生物安全监督员?

    [font=&][size=15px]上述要求来自于CNAS-CL01-A001中的规定。[/size][/font][font=&][size=15px]实验室不做致病菌[b]也要有[/b]生物安全责任人。[/size][/font][font=&][size=15px]实验室检测中不涉及致病菌,[b]并不代表[/b]微生物实验室没有致病菌。[/size][/font][font=&][size=15px]例如,实验室收到发霉的测试样品,检测项目只涉及菌落总数,不要求做致病菌实验。[/size][/font][font=&][size=15px]但是样品本身含有致病菌,所以需要有生物安全员的对生物安全进行控制和管理。[/size][/font]

  • 【仪器心得】拍击式均质器使用心得

    【仪器心得】拍击式均质器使用心得

    [align=center][b][font=宋体]【仪器心得】拍击式均质器使用心得[/font][/b][/align][align=center][b][font=宋体] [/font][/b][/align][align=center][b][font=宋体] [/font][/b][/align][font=宋体][color=#333333][font=宋体]拍击式均质器常用于实验室混合样品、固体粉碎混合、抽样均匀度测试混合等。今天和大家分享的是天津奥特赛恩斯[/font][font=Helvetica]ATBM-400B[/font][font=宋体]。我们实验室常用普通试验样品的混合及无菌样品混合用。[img=,640,480]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309270903052375_4863_2227357_3.png!w640x480.jpg[/img][/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333][font=Helvetica]1.[/font][font=宋体]仪器的使用经验:[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333][font=宋体]这台拍击式均质器,实验室服役时间约[/font][font=Helvetica]12[/font][font=宋体]年。[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]这个型号的设备现在实验室有两台,一台用于微生物无菌样品、另外一台常规使用。其实真心觉得常规用的优点浪费了。首先需要将其放置在平稳的台面上,连接好电源线和样品管。然后将样品管放入样品台中,然后根据实验要求选择相应的拍打头和拍打时间。但是一定要注意,样品的量不要超过标记线。按下启动按钮,设备就会开始工作。在拍打的过程中,需要注意观察样品的状态,必要的时候调整拍打时间或拍打头的角度。设备预定时间后会自动停止工作。此时可以将样品管取出,并将样品倒入另一个容器中进行下一步实验。[/color][/font][font=宋体][color=#333333]另外大家注意尤其是室内有粉状样品或容易产尘时候,一定做好准备。这台设备外侧有散热口,容易吧粉状样品吹飞了。[/color][/font][font=宋体][color=#333333] [/color][/font][font=宋体][color=#333333][font=Helvetica]2.[/font][font=宋体]仪器的优点和不足[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]拍击混合后在取出样品管时需要注意,因为样品管内的样品可能会很热,小心烫伤。日常维护保养需要定期检查拍打头的磨损情况,并更换损坏的部件。我们遇到过设备磨损,粉状样品溢出的问题。导致一个检验员擦拭了一下午。里面的空间狭小,清理起来耗时费力。但是这个设备这么多年没有坏过。这也是一个亮点了。[/color][/font][font=宋体][color=#333333] [/color][/font][font=宋体][color=#333333] [/color][/font][font=宋体]3.[/font][font=宋体]总结[/font][font=宋体][color=#333333]曾经有飞行检查国家抽检样品,对于微生物实验室他们要求必须要无菌的混合设备,所以当时配备了。单单理化的样品吗,个人觉得没必要。在保证取样具有代表性的同时,多个样品放入自封袋子中手动混合就够用了,法规也没特殊要求。只要受控就可以了。这台国产的设备整体挑不出缺点。实验室买设备能国产的,没必要买进口的,首选性价比高的。[/color][/font]

  • 【金秋计划】均质器的使用注意事项

    [size=16px][font=黑体]均质器使样品处理过程中不可缺少的设备。常用的均质器主要是旋转均质器和拍击式均质器。旋转式均质器是靠旋转的刀片将均质杯中的样品打碎。缺点是每次均质都要更换刀片和均质杯,样品易受到污染,均质过程中容易产生热量使样品中的微生物受损。拍击式均质器使用无菌均质袋,拍击的机械装置作用在均质袋上,不和样品直接接触,因此不会受污染。拍击式均质器由于使用方便,不易受污染,使用越来越广泛。但其缺点是均质的力量不足,对于坚硬的样品不但无法均质均匀,还会引起均质袋的破损。[/font][font=黑体][/font][/size] [size=16px][font=黑体][b]使用注意事项:[/b][/font][font=黑体][/font][/size] [size=16px][font=黑体](1)使用前先将电源插头固定牢靠后,再打开机器开关。插头不能使其出现松动,因为机器工作时会产生振动导致插头脱落。这种突然短点对机器会造成损伤。[/font][font=黑体][/font][/size] [size=16px][font=黑体](2)均质器工作时不准随便打开均质器门,防止样液飞溅(有的均质器打开门以后自动停止拍击均质),一定要先关机器再开门,然后同样关闭门之后再开机。[/font][font=黑体][/font][/size] [size=16px][font=黑体](3)使用均质器之前,一定要检查均质器内是否有异物,防止损伤机械装置或均质袋。[/font][font=黑体][/font][/size] [size=16px][font=黑体](4)坚硬样品,尽量不要用拍打式均质器,防止均质袋破裂,冷冻样品需缓化解冻以后才能使用拍击式均质器。当一定要拍打坚硬样品时,最好加套均质袋。[/font][font=黑体][/font][/size] [size=16px][font=黑体](5)均质器的底部是空的,如遇均质袋意外破裂时,方便清理溢出物。[/font][font=黑体][/font][/size] [size=16px][font=黑体](6)均质器和均质袋放置在阴凉干燥处,特别是均质袋应避酸碱、避阳光,防止其过早的变脆老化。[/font][font=黑体][/font][/size] [size=16px][font=黑体](7)均质器用完之后,先关机断电,然后将其内外清理干净。[/font][font=黑体][/font][/size] [font=黑体][size=16px](8)对于一些拍打均质后,容易堵塞移液管或[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url]枪头的样品,建议使用带过滤网的无菌均质袋。[/size][/font]

  • 【求助】各位作生物样品的战友,样品上液质前是如何处理的?

    单位的up[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]刚装好,准备作生物样品,血,尿,唾液之类的。各位作生物样品的战友,样品上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]前是如何处理的?离心后还过膜吗?样品体积本来就少,一般就100ul,过了膜还能剩多少啊?用什么牌的滤膜,大概多少钱啊?我们的1.7um的柱子前有0.2um的在线滤器。不过膜行不行啊? 大家讨论以下啊,具体点。以前相似的帖子,总觉得可操作性不强。

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