游离前列腺特异抗原

肿瘤的液体活检主要包括循环肿瘤DNA（ctDNA）、游离肿瘤细胞（CTC）及外泌体（exosome）。众多研究表明三者与肿瘤的早诊、治疗、预后等均存在相关性。目前在临床应用最多的当属ctDNA检测。正常人的体液内亦存在来自于机体正常细胞的游离DNA，简称循环游离DNA或cfDNA；在肿瘤患者体内，循环游离DNA不仅仅来自于正常细胞，还有一部分来自于肿瘤细胞，即ctDNA，也是循环游离DNA的一部分，因此我们可以通过检测ctDNA相关变异状态作为来自肿瘤细胞的标志物。目前临床肿瘤ctDNA检测最常见的应用领域为治疗方案选择及耐药监测。 由于ctDNA具有片段化程度高、丰度低等特点，其主流检测方法包括Cobas法、Super-ARMS法、高通量二代测序（NGS）及数字PCR。液体活检的运用与优势液体活检最大的优势在于微创、快捷，易于动态监测；一定程度上全面反映肿瘤整体变异状态，不受肿瘤异质性影响；适用人群更广泛，对于难以取得活检肿瘤组织或取得肿瘤组织不够基因检测的患者，液体活检提供了一个了解肿瘤基因变异状态的有效途径。1. 早期诊断肿瘤的早期诊断最大难点是由于肿瘤负荷很低，可能影像学上没有明确的病灶，此时血液中ctDNA的含量亦极低，普通针对ctDNA突变的检测难以满足早诊的要求。但DNA甲基化改变是贯穿整个恶性转化的表观遗传学改变。即使在肿瘤发展的最早期，DNA甲基化模式也已经与正常细胞存在显著差异；其次，甲基化水平的改变是具有组织特异性的，即对甲基化进行检测及比对，能够进行器官溯源，发现到底是哪里可能会发生或已经发生了肿瘤。 因此，对ctDNA的甲基化水平进行检测，是一种有效的肿瘤早期筛查辅助手段。比如SEPT9基因甲基化检测试剂盒对结直肠癌诊断的敏感度及特异性可达74.8%及97.5%[1]，现在已经可以作为一种结肠镜前的初筛手段。2. 指导靶向治疗肿瘤的靶向治疗是目前临床最常见的ctDNA检测应用。根据《非小细胞肺癌血液EGFR基因突变检测中国专家共识》，如果有肿瘤组织，推荐使用肿瘤组织进行驱动基因检测；若无肿瘤组织样本或肿瘤组织样本不足的情况下，液体活检可作为很多患者基因检测的首选。无论何种检测方式，应注意的是若组织活检或者液体活检有任何一个是阳性，患者应当考虑使用靶向药物；当液体活检先行的时候，若液体活检为阴性，应提示患者可能存在假阴性，必要时再取活检，以避免错失可能的靶向治疗机会。 3. 耐药监测靶向治疗终归面临耐药的问题，而液体活检由于微创快捷的优势，是理想的耐药监测材料。对于EGFR一代或者二代TKI用药人群，约半数以上的患者出现EGFR 20号外显子T790M而耐药，因此对于此类患者的耐药监测可使用敏感度高且成本低的数字PCR法对T790M单点进行监测。如果患者已经出现了耐药，亟需探索其耐药机制以更换治疗方案，此时推荐使用NGS对基因变异的整体状态进行检测，以便全面寻找耐药原因。4. 预后评估在预后评估方面，微小残留病变（MRD）是目前研究的热点。MRD指的是治疗后传统影像学和实验室方法无法发现，但通过分子诊断可以发现的肿瘤来源的分子异常。多种肿瘤的相关研究表明，ctDNA突变状态可提示接受根治性治疗的患者的预后复发，并且已经在部分临床实验中得到应用。液体活检的样本采集要求血液的规范化处理是保证液体活检结果准确的基本前提。在血液样本的送检方面应注意：1.采血管的选择ctDNA检测的血液需使用EDTA抗凝管或者cfDNA专用采血管。若使用EDTA抗凝管，血液离体后应尽量保存于4℃，2小时内需尽快进行血浆分离；若使用cfDNA专用采血管，血液可在常温保存3-5天。切记严禁使用肝素抗凝管，因为肝素在后续DNA提取过程中难以去除，并且会抑制PCR反应，导致后续ctDNA检测失败。2.采血量及采血注意事项一般而言，ctDNA检测需要采集8-10ml的全血。采血后严禁剧烈震荡血液，或者使用注射器针头对血液进行转移，因为这样的操作均会导致血液中细胞破裂，从而造成基因组DNA的污染，增加ctDNA检测的假阴性。采血后应轻柔将采血管颠倒8-10次进行混匀。3. 患者采血时间的选择一般建议患者空腹进行抽血，特别是血脂较高的患者。这是由于低密度脂蛋白对荧光有屏蔽和吸收的作用，会干扰后续ctDNA的相关检测；三酰甘油会降低ctDNA的提取率；若使用微滴式数字PCR检测技术，血液中的脂质会影响后续微滴的生成。此外，对于正在进行化疗的患者，一般建议患者化疗结束后进行抽血。 国盛医学分子保鲜系列产品血液样本的保存及运输作为液体活检中一个重要的环节，如何收集保存全血样品中游离cf-DNA和cf-RNA的呢？游国盛医学研发的游离DNA采血管和游离RNA采血管可以满足液体活检中样本保存和运输的需求。 游离DNA采血管 国盛医学游离DNA采血管含有独特的抗凝剂和保鲜试剂，不含干扰游离DNA提取和抑制PCR成分，能稳定有核细胞，防止释放细胞基因组DNA而污染目标游离DNA；抑制核酸酶降解游离DNA，可在常温下稳定运输保存7天以上。 游离RNA采血管 国盛医学游离RNA保存管能稳定血细胞并防止血液凝固，防止血液有核细胞中基因组DNA和RNA的释放；能够有效抑制血浆中的核酸酶，防止游离RNA在体外降解；适合常温运输，储存样本5天及以上。

Guava® SARS-CoV-2 多抗原抗体检测试剂盒（Guava® SARS-CoV-2 Multi-Antigen Antibody Kit）是一种新型的、基于微球的免疫分析试剂盒，应用于常规流式细胞仪，可同时检测血清和血浆样本中针对三种SARS-CoV-2抗原（核衣壳蛋白（N）、刺突蛋白受体结合域（RBD）以及刺突蛋白S1亚基（S1））的IgG、IgM和IgA抗体表达。通过对荧光强度和数据结果简单直观地解读，可轻松分析体内相关抗体的水平，为免疫反应提供更全面的评估。Guava® SARS-CoV-2抗体检测试剂盒针对Guava® Muse® 细胞分析仪和Guava® easyCyte™ 系统上进行了系统性的优化，同时亦可兼容任何配置有488nm或532nm激光器的流式细胞仪。Guava® SARS-CoV-2多抗原抗体检测试剂盒可为您提供• 更完整的抗体图谱： 通过基于微球的多重检测方法对三种SARS-CoV-2抗原同时进行分析，您可以获得更加完整的抗体图谱。• 全面的免疫反应评估： 同时获取三种SARS-CoV-2亚型的表达信息，在COVID-19相关研究中为您提供更加全面的免疫反应评估。• 快速获取结果： 仅需15分钟实验操作，即可获得完整的血清学数据资料，整个过程不超过75分钟。• 灵活的检测通量： 从单管到多孔板，从低通量到高通量，灵活的兼容性可满足您各种通量需求。• 广泛的适应性： Guava® SARS-CoV-2多抗原抗体检测试剂盒针对Guava系统进行了优化，同时兼容市场上多种型号的常规流式细胞仪，可支持您现有的实验室设备，满足您多样化的研究需求。工作流程Guava® SARS-CoV-2抗体检测试剂盒同时分析抗三种SARS-CoV-2抗原的抗体应答。利用该方法可以检测抗SARS CoV-2、IgG、IgM和IgA抗体，并获得血清和血浆样本中不同抗体同型的表达状态的宝贵信息。用户可以在Guava® Muse® 细胞分析仪，Guava® easyCyte™ 流式细胞仪或其他任何配置有488 nm或532 nm激光器的流式细胞仪上读取样品。Guava® Muse® 细胞分析仪中预设有特定分析软件（ A），针对每种微球的提供散点图、计数和中位荧光强度数据。Guava® easyCyte™ 系统利用仪器自带的InCyte软件（B）可轻松实现圈门设定并导出统计数据。示例：SARS-CoV-2抗体同型特异性检测订购信息产品名：Guava® SARS-CoV-2 多抗原抗体检测试剂盒货号：FCPA100101更多产品信息：https://www.luminexcorp.com/zh/guava-sars-cov-2-multi-antigen-antibody-kit/

在液态活检以及生命科学研究的诸多领域中，如何正确有效地在样品的保存和运输中，防止其受到污染和降解，对检测结果和实验结果的准确性和可靠性有很大的影响。因此，在样本的保存和运输中，相关人员都喜欢使用游离DNA保存管这个产品去解决这一问题。那么这个产品的主要功能到底有哪些呢？一、保护游离DNA样品免受污染和降解游离DNA保存管的最基本功能是保护游离DNA样品免受污染和降解。游离DNA在提取、储存和运输过程中极易受到外界环境因素的影响，导致样品质量下降。而游离DNA保存管在能够有效地隔绝外界污染物的同时，减缓游离DNA的降解过程，确保样品质量。二、延长游离DNA样品的保存时间游离DNA保存管内含有独特的保鲜剂和稳定剂，可以稳定试管内的游离DNA并防止其降解，从而实现样品的长期保存，有利于研究者对样品进行长时间的保存和运输。比如国盛医学所研发的游离DNA保存管，采用独特抗凝剂和保鲜剂，不仅具有常温下保鲜血浆中游离DNA（cfDNA,ctDNA），稳定有核细胞防止释放细胞基因组DNA而稀释目标游离DNA，还能抑制核酸酶降解游离DNA，从而仍样本的保存时效从普通采血管的6小时延长至7天，满足样本长距离运输、长时间保存的需求，对于一些需要长时间追踪的研究项目具有很大的优势。三、广泛应用于多个领域游离DNA保存管广泛应用在基因遗传研究、生物医学遗等多个领域，为相关研究提供了有力支持。目前，相关应用比较成熟的领域主要为NIPT(无创DNA产前检测技术)、肿瘤检测、用药指导、术后/药效监测。正如上所述，游离DNA保存管的相关功能在疾病诊断、生物标志物研究、个体化治疗等领域的所发挥的作用越来越大。此外，随着科技的不断进步，以及分子生物学技术和液体活检的发展，相信该产品在未来还将在更多领域发挥重要作用。