晶紫中性红胆盐琼脂

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  • 【求助】伊红美兰琼脂变质分层~~怎么回事?

    这段时间我们配制的伊红美兰琼脂在灭菌冷却后发生变质分层的问题~~ 表现为:配制过程无异常,不灭菌直接冷却,没有任何问题~~ 灭菌冷却后发生变质分层上层是正常的颜色下层则是一种深橙红色,再煮沸溶解后倒至平皿不能凝固~~ 那位专家碰到过这样的问题,如何去解决哈~~ 先谢谢了哈

  • CNS_20.001_琼脂

    [align=center][font='times new roman'][size=24px]2021.0[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]7[/size][/font][font='times new roman'][size=24px].[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]29[/size][/font][/align][align=center][/align][align=center][font='黑体'][size=20px]琼脂[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman']陈珺宁[/font][/align][align=center][font='times new roman'](厦门大学化学化工学院)[/font][/align][font='times new roman']摘要:[/font][font='times new roman']琼脂是一种从某些海藻萃取的亲水胶体,在人们日常生产生活的各个领域中有广泛的应用。琼脂可以改善食品的质构,提升食品的品质,并且没有任何毒性,成为一种重要的食品添加剂,在食品工业中可以作为增稠剂、凝固剂、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%82%AC%E6%B5%AE%E5%89%82][font='times new roman']悬浮剂[/font][/url][font='times new roman']、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E4%B9%B3%E5%8C%96%E5%89%82][font='times new roman']乳化剂[/font][/url][font='times new roman']、保鲜剂和稳定剂等,被广泛应用。本文将对琼脂的理化性质、提取工艺与深加工、限量、标准、检测、应用等进行逐一介绍,有助于对该食品添加剂的了解。[/font][font='times new roman']关键词:[/font][font='times new roman']食品添加剂,琼脂,性质,提取,限量,[/font][font='times new roman']标准,检测,应用[/font][font='times new roman'][size=18px]0 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]引言[/size][/font][font='times new roman']琼脂([/font][font='times new roman']agar[/font][font='times new roman']),又称琼胶、洋菜、洋粉或冻粉等,根据中华人民共和国药典记载,琼脂系自石花莱[/font][font='times new roman']Gelidium amansii Lamx[/font][font='times new roman']或其他数种红藻类植物中浸出并经脱水干燥的粘[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url];按照美国药典定义,琼脂是一种从[/font][font='times new roman']Rhodophyceae[/font][font='times new roman']类的某些海藻萃取的亲水胶体。琼脂由琼脂糖和琼脂胶组成,是一种由半乳糖和半乳糖衍生物构成的长链形多糖。其中,半乳糖残基上不含硫酸基、甲氧基、丙酮酸基等基团,可发生凝胶化的长链中性多糖是琼脂糖;半乳糖残基上含有这些基团,不发生凝胶化的长链酸性多糖是琼脂胶[/font][font='times new roman']。[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman'][size=13px][1[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]2][/size][/font][font='times new roman'][size=18px]1 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]理化性质[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]溶解性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂在水中的溶解度与温度呈一定的正相关。常温下,高纯度琼脂不溶于水、无机溶剂和有机溶剂,只微溶于乙醇胺和甲酰胺;加热条件下,琼脂可溶于水形成溶液。在[/font][font='times new roman']95~100℃[/font][font='times new roman']并间歇式搅拌条件下,或在[/font][font='times new roman']100~120℃[/font][font='times new roman']高压釜中,易制取[/font][font='times new roman']0~5% [/font][font='times new roman']琼脂溶液和用于铸模的[/font][font='times new roman']8~14% [/font][font='times new roman']琼脂溶液。琼脂也可在沸腾的低浓度乙醇([/font][font='times new roman']30~50%[/font][font='times new roman'])溶液中溶解。其他研究发现,琼脂可以溶解于多种溶剂。常温下,干琼脂可以吸水溶胀,其吸水率达[/font][font='times new roman']20[/font][font='times new roman']倍;加热至[/font][font='times new roman']95℃[/font][font='times new roman']可溶于水,极易分散形成中性溶胶,其中琼脂糖含量比例越大,凝胶强度越高。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]黏度[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂凝固能力强,黏度较低,其中石花莱琼脂具有极强凝固能力、低黏度,工业琼脂因在提取过程中受化学试剂破坏具有较低的黏度。琼脂水溶液(溶胶)的黏度受原料的种类和质量,提取和加工条件,琼脂浓度、温度、加入电解质种类等测量条件影响而不同。当[/font][font='times new roman']pH = 4.5~9[/font][font='times new roman']时[/font][font='times new roman'],黏度相对稳定;当[/font][font='times new roman']pH = 6.0~8.0[/font][font='times new roman']时,黏度受老化或离子强度影响有较小变化。开始凝胶化时,在温度一定的条件下,黏度随凝胶现象持续时间的延长而增大,最终形成凝胶。此外,琼脂溶液在高温、电解质、无机酸或酸性盐类等处理后,黏度明显下降。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]絮凝性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1][/size][/font][font='times new roman']琼脂溶液中加入[/font][font='times new roman']10[/font][font='times new roman']倍体积乙醇、[/font][font='times new roman']2-[/font][font='times new roman']丙醇或丙酮,可以定量从其水溶液中絮凝析出;也可以用饱和硫酸钙、硫酸铵或硫酸镁溶液,使琼脂溶液发生盐析。常温下,絮凝析出的琼脂能溶于水或其他溶剂,电解质浓度越大、絮凝温度越高越难溶解,但除非在体系中加入水,否则琼脂不会[/font][font='times new roman']发生凝胶化形成凝胶。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]凝胶性与滞后性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂具有凝胶性,即使琼脂溶液浓度低至[/font][font='times new roman']0.004%[/font][font='times new roman'],常温下仍能形成凝胶,不需要任何助凝剂。琼脂凝胶有许多物理化学特性:具有热可逆性;其熔化温度受琼脂凝胶浓度和平均分子量影响;凝胶强度受原料种类、化学环境(如浓度、离子强度及[/font][font='times new roman']pH[/font][font='times new roman']等)和提取方法等影响;具有优良的相容性,可与大多数多糖类树胶或蛋白质溶液互溶;放置过程中发生轻微且缓慢的老化。值得注意的是,在多糖类树胶中,只有琼脂的凝胶化温度低于其熔化温度。琼脂溶胶的凝固点在[/font][font='times new roman']32~43℃[/font][font='times new roman']之间,琼脂凝胶的熔点在[/font][font='times new roman']7[/font][font='times new roman']5~90℃[/font][font='times new roman']之间,熔点远高于凝固点被称为[/font][font='times new roman']“[/font][font='times new roman']滞后现象[/font][font='times new roman']”[/font][font='times new roman']。琼脂的许多用途基于其凝胶温度的高滞后性。[/font][font='times new roman']在相同浓度下,琼脂凝胶与其他可凝胶化的物质相比强度最大,其中低浓度凝胶可以保护分散体系、防止扩散作用和改善产品质地,高强度凝胶具有优良的弹性、强度、回复力、可逆性、相对透明性和相对渗透性等特性,均有一定的应用价值和市场前景。此外,琼脂凝胶存在较硬、易脆、粗糙、透明性较差和冷冻后脱水等缺点,但是可以通过与其他材料进行改善,比如与糊精、蔗糖等复合使用可以提高凝胶的强度,与卡拉胶复合使用可以提高弹性和柔软度,与明胶复合使[/font][font='times new roman']用可以提高凝胶的强度、透明度和黏弹性。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.5 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]非酸性降解与稳定性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂具有优良的稳定性,常温下很难降解,但大量黏度、衍射和凝胶强度实验与研究证明,在超声波、强[/font][font='times new roman']γ[/font][font='times new roman']射线辐射,及强烈搅拌和高温长时间处理后,琼脂的分子链发生断裂,导致琼脂分子量降低,部分理化性能恶化。此外,琼脂具有很强的抗酶解能力不会在人或动[/font][font='times new roman']物体内被酶解,绝大部分随排泄物排出体外。[/font][font='times new roman'][size=18px]2 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]提取与深加工[/size][/font][font='times new roman'][size=18px][4][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]琼脂提取工艺[/size][/font][font='times new roman']琼脂生产自石花莱[/font][font='times new roman']Gelidium amansii Lamx[/font][font='times new roman']或其他几种红海藻,在红海藻细胞壁中以碳水化合物(多[/font][font='times new roman']糖)的形式存在。[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']由于琼脂需求量的增加,琼脂提取工艺日益丰富和完善。目前,高温高压法、碱法、酶法辅助提取工艺应用较为广泛。[/font][font='times new roman']2.1.1 [/font][font='times new roman']高温高压法[/font][font='times new roman']高温高压法是琼脂提取的传统方法,主要流程为原料处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']浸泡[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']煮胶[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']过滤[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']冷却[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']脱水[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']干燥[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']粉碎[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']包装。该提取工艺简单,琼脂分子破坏较少,提取率较高,但凝胶强度较低。高温高压法提取琼脂一般适用于硫酸基含量较低的原料,如石花莱。[/font][font='times new roman']2.1.2 [/font][font='times new roman']碱法提取工艺[/font][font='times new roman']碱法工艺常见有低温高碱、中温高碱和高温稀碱3种[/font][font='times new roman'], [/font][font='times new roman']主要流程为原料处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']碱处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂洗[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']酸处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂洗[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂白[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂洗[/font][font='times new roman']→ [/font][font='times new roman']煮胶[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']过滤[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']冷却[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']脱水[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']干燥[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']粉碎[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']包装。中低温高碱法提取温度较低、生产工艺较易控制,但用碱量大、环境负担大、生产成本较高;高温稀碱法碱浓度较低,环境污染较小,但提取温度较高、生产工艺不易控制,且在高温条件下琼脂易被破坏,导致胶质流失、降低产率。目前,许多优化提取工艺条件的研究正在进行,以更好地利用碱法工艺提取琼脂。[/font][font='times new roman']2.1.3 [/font][font='times new roman']酶法辅助提取工艺[/font][font='times new roman']酶法辅助提取工艺是使用酶处理辅助碱法提取工艺,即利用纤维素酶在碱处理前或处理后作[/font][font='times new roman']用于藻体,加速破坏藻体的细胞壁,从而促进胶质溶出。酶法辅助提取工艺是对碱法提取琼脂的优化,可以提高琼脂的得率、凝胶强度,并且有效减少碱液和清洗水的用量,减轻环境负担。[/font][font='times new roman'][size=16px]2.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]琼脂深加工[/size][/font][font='times new roman']琼脂具有分子量大、溶解性差等缺点,对琼脂进行适当处理,可以扩大其应用范围。琼脂深加工主要集中在利用琼脂提取琼脂糖和通过降解琼脂制备琼胶寡糖。[/font][font='times new roman']2.2.1 [/font][font='times new roman']琼脂糖提取[/font][font='times new roman']琼脂糖是琼脂的重要组成成分,提取方法主要有碘化钠法、乙酰化法、聚乙二醇法、十[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']六烷基氯化吡啶法([/font][font='times new roman']CPC[/font][font='times new roman'])、二甲基亚砜法([/font][font='times new roman']DMSO[/font][font='times new roman'])、[/font][font='times new roman']EDTA – Na[/font][font='times new roman'][size=13px]2[/size][/font][font='times new roman']法、[/font][font='times new roman']DEAE - [/font][font='times new roman']纤维素法、硫酸铵法、磷酸钠法、尿素法等,目的都是将琼脂中的硫琼脂和琼脂糖分离,纯化琼脂糖。[/font][font='times new roman']2.2.2 [/font][font='times new roman']琼胶寡糖制备[/font][font='times new roman']琼胶寡糖一般是指[/font][font='times new roman']DP[/font][font='times new roman']([/font][font='times new roman']degree of polymerization[/font][font='times new roman'])为[/font][font='times new roman']2~10[/font][font='times new roman']的低聚糖[/font][font='times new roman'], [/font][font='times new roman']包括胶寡糖和新胶寡糖。琼胶寡糖具有重要的生理功能[/font][font='times new roman'], [/font][font='times new roman']在食品工业、医药工业、日用化工、生物工程等许多方面有广阔应用前景。[/font][font='times new roman'][size=13px][5] [/size][/font][font='times new roman']琼脂寡糖的制备方法主要有化学降解法和酶降解法,缪伏荣[/font][font='times new roman'][size=13px][5] [/size][/font][font='times new roman']和林坤城[/font][font='times new roman'][size=13px][4] [/size][/font][font='times new roman']等人对琼脂降解制备琼胶寡糖作出具体介绍。[/font][font='times new roman'][size=18px]3 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]限量[/size][/font][font='times new roman']根据食品标法查询网的查询结果[/font][font='times new roman'],未查明具体食品中琼脂的最大使用量,结果均为适量使用即可。[/font][font='times new roman'][size=18px]4 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]标准[/size][/font][font='times new roman'][size=18px][6][/size][/font][font='times new roman']根据中华人民共和国卫生部于[/font][font='times new roman']2010[/font][font='times new roman']年[/font][font='times new roman']12[/font][font='times new roman']月[/font][font='times new roman']21[/font][font='times new roman']日发布、于[/font][font='times new roman']2011[/font][font='times new roman']年[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']月[/font][font='times new roman']21[/font][font='times new roman']日实施的《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB 1975—2010[/font][font='times new roman']》的标准,对感官要求、理化指标、产品规格等技术要求作出详细规定。[/font][font='times new roman'][size=16px]4.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]感官要求[/size][/font][font='times new roman']根据《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB 1975—2010[/font][font='times new roman']》规定,琼脂具有类白色或淡黄色的色泽、呈均匀条状或粉状、无异味。[/font][font='times new roman'][size=16px]4.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]理化指标[/size][/font][font='times new roman']根据《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB [/font][font='times new roman']1975—2010[/font][font='times new roman']》规定,琼脂中水分([/font][font='times new roman']w%[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤22%[/font][font='times new roman'],灰分([/font][font='times new roman']w%[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤5%[/font][font='times new roman'],水不溶物([/font][font='times new roman']w%[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤1%[/font][font='times new roman'],重金属(以[/font][font='times new roman']Pb[/font][font='times new roman']计)[/font][font='times new roman']≤20%[/font][font='times new roman'],铅([/font][font='times new roman']Pb[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤5 mg/kg[/font][font='times new roman'],砷([/font][font='times new roman']As[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤3 mg/kg[/font][font='times new roman']。其中逐一理化指标的检验方法在[/font][font='times new roman']GB[/font][font='times new roman']中均有明确给出。[/font][font='times new roman'][size=16px]4.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]产品规格[/size][/font][font='times new roman']产品规格按凝胶强度不同划分,分为低强度、中强度、高强度、超高强度,即[/font][font='times new roman']20℃[/font][font='times new roman']下在[/font][font='times new roman']1.5%[/font][font='times new roman']琼脂溶液中,凝胶强度在[/font][font='times new roman']150~400 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为低强度,在[/font][font='times new roman']401~800 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为中强度,在[/font][font='times new roman']801~1200 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为高强度,[/font][font='times new roman']1200 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为超高强度。[/font][font='times new roman'][size=18px]5 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]检测[/size][/font][font='times new roman']《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB 1975—2010[/font][font='times new roman']》中规定了琼脂的鉴别试验方法和多种理化指标及凝胶强度的测定方法,本文中简述规定中提到的鉴别试验、淀粉试验、水不溶物以及凝胶强度测定的实验方法[/font][font='times new roman'][size=13px][6] [/size][/font][font='times new roman'],其余理化指标的检测方法在[/font][font='times new roman']GB[/font][font='times new roman']中均有明确给出。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]鉴别试验[/size][/font][font='times new roman']取试样[/font][font='times new roman']1g[/font][font='times new roman'],加水[/font][font='times new roman']65mL[/font][font='times new roman'],煮沸[/font][font='times new roman']10min[/font][font='times new roman'],不断搅拌,用热水补足水分,放冷至[/font][font='times new roman']32℃[/font][font='times new roman']~[/font][font='times new roman']39℃[/font][font='times new roman']即凝结成半透明有弹性的凝胶状物,再加热至[/font][font='times new roman']85℃[/font][font='times new roman']开始熔化;再取适量条状试样的碎片,浸入[/font][font='times new roman']0.01mol/L[/font][font='times new roman']碘溶液中数分钟,染成棕黑色,取出后加水浸泡后[/font][font='times new roman']渐变紫色。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]淀粉试验[/size][/font][font='times new roman']取[/font][font='times new roman']0.5g[/font][font='times new roman']试样,加水[/font][font='times new roman']100mL[/font][font='times new roman'],煮沸溶解后放冷,加[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']滴[/font][font='times new roman']0.05mol/L[/font][font='times new roman']碘溶液,不得显蓝色。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]水不溶物的测定[/size][/font][font='times new roman']称取试样约[/font][font='times new roman'] 1.5g[/font][font='times new roman'](称准至[/font][font='times new roman'] 0.001g[/font][font='times new roman'])于[/font][font='times new roman'] 500mL [/font][font='times new roman']烧杯中,加水至[/font][font='times new roman'] 200mL[/font][font='times new roman'],盖上表面皿,加热煮沸溶解(加热时注意搅动)。趁热用已干燥恒重(前后两次质量之差不大于[/font][font='times new roman'] 0.001g [/font][font='times new roman']为恒重,冷却操作时需严格保持冷却时间的统一)的砂芯坩埚减压过滤,并用热水充分洗涤烧杯和砂芯坩埚,然后将砂芯坩埚于[/font][font='times new roman']105℃±2℃[/font][font='times new roman']电热干燥箱内烘至恒重。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]凝胶强度的测定[/size][/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman'].4.1 [/font][font='times new roman']凝胶强度测定的原理[/font][font='times new roman']将试样制成一定浓度和体积的凝胶,用凝胶强度仪测定凝胶在[/font][font='times new roman']15s[/font][font='times new roman']~[/font][font='times new roman']20s[/font][font='times new roman']内的抗破砝码质量,根据温度换算系数,计算样品凝胶强度。[/font][font='times new roman']5.4.2 [/font][font='times new roman']凝胶强度的测定方法[/font][font='times new roman']制备琼脂凝胶试样,将其放在凝胶强度测定仪的试样座中心位置上,按凝胶强度测定仪说明书进行操作,移动手柄使砝码添加装置杆下端与凝胶表面接触,加大力度使凝胶的表面发生破裂(端点进入凝胶约[/font][font='times new roman']4mm[/font][font='times new roman']以上),记录此时凝胶强度值,同时,测量凝胶的温度。[/font][font='times new roman'][size=18px]6 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]应用[/size][/font][font='times new roman']琼脂因其独特的物理化学性质,在食品、医药、微生物学、实验室应用等许多方面具有广泛的应用。[/font][font='times new roman'][size=16px]6.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]食品[/size][/font][font='times new roman']琼脂具有凝固性和稳定性,在食品工业中可以作为增稠剂、凝固剂、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%82%AC%E6%B5%AE%E5%89%82][font='times new roman']悬浮剂[/font][/url][font='times new roman']、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E4%B9%B3%E5%8C%96%E5%89%82][font='times new roman']乳化剂[/font][/url][font='times new roman']、保鲜剂和稳定剂等,被广泛用于制造各种糖果、果冻、饮料、冷饮、焙烤制品、速食食品和保健食品、禽类和肉类食品、肉制品、酿造行业等等。[/font][font='times new roman']6.1.1 [/font][font='times new roman']糖果[/font][font='times new roman']在糖果生产中,琼脂作为胶凝剂,主要用于制造软糖。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']琼脂凝胶软糖是大众的产品,深受广大消费者的青睐,如无花果等水果琼脂软糖或果汁软糖,价廉物美、销量可观。[/font][font='times new roman'][size=13px][1][/size][/font][font='times new roman']琼脂主要依靠其凝胶特点制作软糖,具有含水量高、透明、柔软、有弹性、货架期长的特点。[/font][font='times new roman'][size=13px][3] [/size][/font][font='times new roman']根据琼脂的凝胶能力[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']软糖中的琼脂用量一般在[/font][font='times new roman']1[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']~2.5[/font][font='times new roman']%,碳水化合物以蔗糖为主,[/font][font='times new roman']淀粉糖浆为辅,其比例约为[/font][font='times new roman']3[/font][font='宋体']∶[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']。用琼脂制造的软糖的透明度、品质及口感均优于其它软糖。琼脂虽然作为传统的凝胶物质在糖果制作中长久应用,但实践表明其口感特性比较单一。近年来也常添加明胶、变性淀粉、果汁[/font][font='times new roman']/[/font][font='times new roman']果泥或瓜果等,有助于糖果配合物料组成的多样性,有利于风味与口感的改进。[/font][font='times new roman'][size=13px][2[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]7][/size][/font][font='times new roman']6.1.2 [/font][font='times new roman']果冻[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']在果冻制造过程中添加琼脂,可为稳定剂和胶凝剂,使颗粒悬浮均匀、不沉淀、不分层。根据琼脂的胶凝能力,一般用量为[/font][font='times new roman'] 0.15[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']~0.3[/font][font='times new roman']%。[/font][font='times new roman'][size=13px][2][/size][/font][font='times new roman']6.1.3 [/font][font='times new roman']饮料[/font][font='times new roman']琼脂用在饮料类产品中可作为助悬剂,使饮料中固型物悬浮均匀、不下沉。其悬浮时间及保质期长,是其它助悬剂无法代替的,产品透明度、流动性会更好、口感爽滑无异味。在果粒饮料中表现出优异的悬浮效果,使用浓度为[/font][font='times new roman']0.001[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']~0.005[/font][font='times new roman']%即可使果粒悬浮均匀。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']6.1.4 [/font][font='times new roman']冷饮[/font][font='times new roman']琼脂用于冷饮食品,如冰棒、冰淇淋等各种冷冻制品,可减少冰晶,提高抗热融性,使产品更加爽口。在冰淇淋生产中,琼脂可改善冰淇淋的组织状态,提高冰淇淋的黏度和膨胀率,防止冰晶析出,使制品组织细腻轻滑,使用量为[/font][font='times new roman']0.3[/font][font='times new roman']%左右。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']琼脂与刺槐豆胶、[/font][font='times new roman']明胶相配合,在冷饮食品的质地和香味稳定性方面起到极优异的作用,并能防止脱水收缩和表面结皮。作为稳定剂的最佳浓度是:琼脂[/font][font='times new roman']0.12[/font][font='times new roman']%、刺槐豆胶[/font][font='times new roman']0.07[/font][font='times new roman']%、明胶[/font][font='times new roman']0.20[/font][font='times new roman']%。[/font][font='times new roman'][size=13px] [1][/size][/font][font='times new roman']6.1.5 [/font][font='times new roman']焙烤制品[/font][font='times new roman']琼脂可以作为一种略起粘结作用的添加剂,被广泛地用于多种焙烤食品中[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']如焙烤食品生产厂将琼脂用于曲奇饼、奶油夹心派的外壳、含果仁的果冻、馅饼或派的馅、糕饼甜心表层的酥皮、蛋白酥皮筒等。琼脂也可以作为保湿剂,也成功用于面包和糕饼甜心中防干燥。[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂还可以作为填充剂和膨松剂,可代替淀粉制造麦片糊、无淀粉面包和餐后点[/font][font='times new roman']心,制作为低热能食品,同时对面包和饼干也起到了保湿、保险的作用。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']在上述这些类型的产品中,琼脂使用的量约在[/font][font='times new roman']0.1[/font][font='times new roman']%~[/font][font='times new roman']1[/font][font='times new roman']%的范围内。[/font][font='times new roman'][size=13px][1][/size][/font][font='times new roman']6.1.6 [/font][font='times new roman']速食食品和保健食品[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂素食食品和保健食品中也有重要应用,例如它可以添加用于谷类食品(如麦片)、肉食代用品(如人造肉、素肉等)和素食者食用的甜食与点心中。[/font][font='times new roman']6.1.7 [/font][font='times new roman']禽类和肉类罐头[/font][font='times new roman']在禽类和肉类罐头中,琼脂作为胶冻剂和赋形剂,其用量可以是罐头中清汤的[/font][font='times new roman']0.5[/font][font='times new roman']%~[/font][font='times new roman']2.0[/font][font='times new roman']%,以消除罐头中食品组织发生脆碎。[/font][font='times new roman']6.1.8 [/font][font='times new roman']肉制品[/font][font='times new roman']琼脂作为肉制品的辅料,具[/font][font='times new roman']有提高肉制品的品质、保护其风味等特性。[/font][font='times new roman'][size=13px][3] [/size][/font][font='times new roman']琼脂用于灌制香肠、熏制或腓制肉制品,可明显保护其胶体以防止其风味散失。烹调的火腿可浇盖含有琼脂和抗坏血酸的溶液,包装以后,琼脂处理过的肉制品比未处理的和只用抗坏血酸单独处理的肉制品更能保持原有的风味。[/font][font='times new roman'][size=13px][2][/size][/font][font='times new roman']6.1.9 [/font][font='times new roman']酿造行业[/font][font='times new roman']琼脂在酿造行业,作为啤酒、酱油和食用醋的澄清剂以加速和改善产品澄清。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]6.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]医药[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂可以广泛地用作轻泻剂,在人体肠中不会被消化,在充分水化的情况下,如同纤维素一样,起到增大排泄物体积和促进肠道蠕动的作用,并且无刺激性和可以达到润肠的效果。在放射科中,琼脂常作为钡餐中硫酸钡的悬浮剂。琼脂常常在缓释胶囊药物栓塞药、外科润滑剂,以及许多乳剂类型的药物中用作为起多种功能的添加剂。在药片中,琼脂用作为赋形剂和崩解剂。[/font][font='times new roman'][size=16px]6.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]微生物学[/size][/font][font='times new roman']琼脂在微生物学中获得了最有价值的应用。在低浓度下,琼脂即可阻止氧进入液体介质中,可以用于在暴露于空气中的营养肉汤进行厌氧菌的培养。在液体介质中使用的琼脂浓度通常在[/font][font='times new roman']0.007[/font][font='times new roman']%~[/font][font='times new roman']0.08[/font][font='times new roman']%。[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']在制作微生物的培养基的过程中,可以通过添加琼脂作为凝固剂来将[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%B6%B2%E4%BD%93%E5%9F%B9%E5%85%BB%E5%9F%BA/8509492][font='times new roman']液体培养基[/font][/url][font='times new roman']转化为固体培养基或[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E5%8D%8A%E5%9B%BA%E4%BD%93%E5%9F%B9%E5%85%BB%E5%9F%BA/3410252][font='times new roman']半固体培养基[/font][/url][font='times new roman']。[/font][font='times new roman'][size=16px]6.4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]实验室应用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂可以提高颗粒度测量的精确度,可以对包含有固体颗粒的悬浮液的浓度进行测定,亚甲基蓝、甲苯胺蓝、硫堇和频那氰醇等染料可以通过琼脂的作用而发生可逆的聚合。蛋白质可以通过琼脂凝胶作电泳迁移,用于铁蛋白、卵清蛋白、血红蛋白和胃蛋白酶的解析。琼脂钠和琼脂铵、琼脂糖和琼脂糖钠在球蛋白电泳、免疫扩散诊断技术、凝胶过滤和分子大小排阻色谱等技术中是很有应用价值的。琼脂还能稳定胆固醇溶液。[/font][font='times new roman'][size=18px]7 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]总结与展望[/size][/font][font='times new roman']琼脂由琼脂糖和琼脂胶组成,是一种由半乳糖和半乳糖衍生物构成的长链形多糖,具有特殊的理化性质,并因此在食品、医药、微生物、实验室等均有广泛的应用。据不完全统计,目前没有明确规定琼脂的最大使用量,适量使用即可。食品安全国家标准对琼脂的感官要求、理化指标和产品规格等均作出详细规定,并给出了与琼脂相关的检测方法。琼脂产业的发展[/font][font='times new roman']具有重要的经济效益、社会效益和生态效益,同时还直接或间接地成为构建海洋渔业生态链和海洋渔业产业经济链不可或少的纽带。随着琼脂在食品工业的广泛应用,必将具有广阔的市场前景。[/font][font='times new roman'][size=13px][2][/size][/font][font='times new roman']参考文献:[/font][font='times new roman'][[/font][font='times new roman']1] [/font][font='times new roman']琼脂[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']明胶科学与技术[/font][font='times new roman'],2005(03):123-130.[/font][font='times new roman'][2] [/font][font='times new roman']李琴梅[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']戚勃[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼脂的物化特性及其在食品工业中的应用[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']中国食品添加剂[/font][font='times new roman'],2009(06):170-174.[/font][font='times new roman'][3] [/font][font='times new roman']宋雪健[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']王洪江[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']张东杰[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼脂在食品中的应用研究进展[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']现代农业科技[/font][font='times new roman'],2017(12):267-268+272.[/font][font='times new roman'][4] [/font][font='times new roman']林坤城[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼脂提取及深加工研究进展[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']福建农业科技[/font][font='times new roman'],2018(09):56-60.[/font][font='times new roman'][5] [/font][font='times new roman']缪伏荣[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']李忠荣[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼胶的降解及其产物的开发应用[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']现代农业科技[/font][font='times new roman'],2007(02):125+128.[/font][font='times new roman'][6] GB 1975-2010, [/font][font='times new roman']食品安全国家标准 食品添加剂 琼脂[/font][font='times new roman']([/font][font='times new roman']琼胶[/font][font='times new roman'])[s].[/s][/font][font='times new roman'][7] [/font][font='times new roman']朱肇阳[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']凝胶型糖果[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']第五部分[/font][font='times new roman']——[/font][font='times new roman']琼胶及琼胶软糖[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']食品工业[/font][font='times new roman'],1992(05):2-7.[/font]

晶紫中性红胆盐琼脂相关的方案

  • 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂检测方法
    甘露醇卵黄多粘菌素琼脂(简称MYP琼脂),也称蜡状芽孢杆菌选择性琼脂(简称BCS琼脂),是一种高度选择性培养基,用于检测和增菌食品样本中的蜡状芽孢杆菌。成分  蛋白胨            10g  牛肉膏            1g  甘露醇            10g  氯化钠            10g  琼脂             15g  蒸馏水            1000mL  0.2%酚红溶液         13mL  50%卵黄液          50mL  多粘菌素B          100 国际单位/mL  pH7.4制法  将前面五种成分加入于蒸馏水中,加热溶解,校正pH,加入酚红溶液。分装烧瓶,每瓶100mL,121℃高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂,冷至50℃,每瓶加入50%卵黄液5mL及多粘菌素B10000国际单位,混匀后倾注平板。
  • 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA实验
    水平式琼脂糖凝胶电泳是基因工程操作中最常规的实验方法,它简单易行,只需少量的DNA就能检测,其分辨效果比分光光度计法与溴化乙啶-标准浓度DNA比较法更高,更直接,检测DNA范围更广,其原理是溴化乙啶在紫外光照射下能发射荧光,当DNA样品在琼脂糖凝胶中电泳时,琼脂糖凝胶中的EB就插入DNA分子中形成荧光络合物;使得DAN发射的荧光,增强几十倍。而荧光的强度正比于DNA的含量,如将已知浓度的标准样品做琼脂糖凝胶电泳的对照,就可比较出待测样品的浓度。若用薄层分析扫描仪检测,则可精确地测得样品的浓度。电泳后的琼脂糖凝胶块直接在紫外光下照射拍照,只需5~10ng DNA ,就可以从照片上比较鉴别。如肉眼观察,可检测到0.01~0.1ng的DNA。
  • 琼脂糖凝胶电泳常见问题解决
    琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。

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    无锡一单位新建食品QC实验室,现已装修好,需采购以下仪器设备及实验室常用物品,主要做固体饮料及糕点预拌粉,要求最好同一家供应商提供,在无锡能有售后,请满足要求的厂商联系。序号仪器名称1电热恒温干燥箱2恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃3干燥器:内附有效干燥剂4快速水分测定仪5恒温水浴箱:46 ℃±1 ℃6天平:感量为0.1mg7天平:感量为0.1g8冰箱:2 ℃~5 ℃9均质器10振荡器11菌落计数器12定氮蒸馏装置13自动凯氏定氮仪14灭菌锅15无菌室(超净工作台)16pH 计或pH 比色管或精密pH试纸17生物显微镜18计重秤19可调电炉20移液枪配枪头21量筒 500ml22烧杯23培养皿 直径90mm24刻度吸管(1ml、10ml)25锥形瓶(含塞)250mL、500mL26吸耳球27酒精灯28脱脂棉29手术剪刀30酒精缸31镊子32玻璃棒33记号笔34试管架35移液架36试管(配硅胶塞)37结晶紫中性红胆盐琼脂38接种环(针)39平板计数琼脂40试管刷41小导管42小药勺43变色硅胶44白大褂45称量瓶联系信息:实验室负责人 花经理 微信 L19805658275(添加时,请备注:在仪器信息网上看到的)
  • 谭蔚泓:基于核酸适体质谱条形码的精准分子分型
    近日,湖南大学谭蔚泓院士团队与浙江大学医学院附属第一医院黄河教授团队开发了一种基于核酸适体的质谱流式技术,用于单细胞的细胞表面蛋白分析,旨在为疾病的精准分子分型提供一个新的平台技术。该方法不仅能够实现培养细胞的分子分型和分类,还能结合机器学习,实现临床样本亚型的分类。该方法极大地扩展了核酸适体的应用领域,并为疾病的分类和诊断提供了新方法。  背景介绍:  高度异质性是恶性肿瘤的重要特征,同一疾病的不同亚型可能对临床治疗有着完全不同的反应。因此,疾病的精准分子分型对其诊疗研究具有重要意义。虽然基因组测序和转录组测序已经成为最常用的分类策略,但它们无法提供蛋白质的表型和功能数据。单细胞水平的膜蛋白分析将为疾病分型提供重要信息。流式细胞术提供了高通量的单细胞测量技术。然而,由于荧光光谱重叠问题,限制了荧光流式细胞术的多元分析能力。质谱流式作为一种先进的替代方法,具有信号重叠小和细胞背景噪声低等优点,已展现出在一次实验中同步测量超过40个细胞参数的能力。尽管质谱流式技术在多路复用单细胞分析中的巨大潜力,但其在肿瘤分类中的潜力受到识别探针种类不足的限制。  核酸适体作为一种新型的识别配体,具有特异性高、合成简单、免疫原性低、修饰方便等优势。此外,以完整的活细胞为筛选对象,可以通过Cell-SELEX(指数富集配体进化技术)获得大量能够特异性识别细胞膜蛋白标志物的核酸适体。  本文亮点:  基于以上研究背景,湖南大学谭蔚泓院士团队联合浙江大学医学院附属第一医院黄河教授团队设计、合成了一种由二乙烯三胺五乙酸(DTPA)基元组成的聚合物,用于螯合多个金属离子。然后,选择了一系列识别不同细胞表面生物标志物的核酸适体,每个适体分别与螯合了不同金属离子的聚合物偶联(Apt-MICP)。最后,评估了基于Apt-MICP的细胞表面蛋白分析在培养细胞和临床样本中用于血液恶性肿瘤(HM)精确分类的潜力(图1)。图1. 基于核酸适体的质谱流式分析技术用于血液恶性肿瘤的分子分型作者首先对聚合物进行了设计与合成,并通过点击化学将其与核酸适体相连(图2a)。利用琼脂糖凝胶电泳和高效液相色谱对产物进行表征,证明了sgc8c-MICP的成功合成(图2b,c)。同时,在核酸适体上修饰上荧光基团,利用荧光流式验证了sgc8c-MICP仍然能够靶向CEM细胞,而不会结合Ramos细胞(图2d,e)。图2. sgc8c-MICP的合成与表征  在证明了该策略的有效性之后,作者挑选了15条相关的核酸适体,将其连接上螯合了不同金属离子的聚合物,得到15条Apt-MICP。将15条核酸适体联用,依次对8种血液恶性肿瘤细胞系进行结合,通过质谱流式进行分析。将得到的结果进行归一化,并用热图进行展示(图3a)。利用viSNE降维分析方法对分型结果进行分析,实现8种细胞的区分(图3b)。结合无监督的主成分分析方法,实现血液恶性肿瘤细胞系更精确的区分(图3c)。图3. 血液恶性肿瘤细胞系的细胞表面特征分析及分类  利用上述合成的15条Apt-MICP,结合五种相关的抗体,实现了31例血液恶性肿瘤临床样本(包括AML、ALL、B淋巴瘤以及CML四种亚型)的分子分型(图4a)。由于临床样本的异质性高,作者利用机器学习的方法进行PLS-DA建模,并成功将四种亚型的样本区分开来(图4b),总体准确率达到了100%(图4c)。图4. 临床样本训练集的分子分型和分类  为了进一步验证该模型的有效性,作者又收集了15例临床样本,得到了分子图谱(图5a)。将分型结果输入到模型当中,实现对每个样本亚型的判定,总体准确率达到了80%(图5b)。图5. 临床样本测试集的分子分型和分类  总结与展望:  综上所述,该研究开发了一个基于核酸适体的质谱流式检测平台,用于精确的癌症分类。作者合成了一系列核酸适体-金属标签探针,并证明了它们在细胞类型特异性结合以及质谱流式检测方面的良好性能。通过用15个核酸适体探针分析细胞表面特征,可以很好地区分8个HM细胞系。此外,通过结合机器学习(PLS-DA),对HM临床样本的四个亚型构建了一个高质量的分类模型,在训练集中分类总准确率为100%,在测试集中分类总准确率为80%。基于这些结果,基于核酸适体的质谱流式平台有望在其他疾病的分类和诊断中得到广泛应用。该工作以Research Article的形式发表在CCS Chemistry。

晶紫中性红胆盐琼脂相关的仪器

  • 产品介绍:PureCube Rho1D4 Agarose是针对Rho1D4标签膜蛋白的亲和层析产品,Rho1D4是一种含有9个氨基酸的长链亲和标记物(TETSQVAPA),可用于高特异性亲和蛋白纯化。库柏生物的PureCube Rho1D4琼脂糖纯化树脂是为FPLC蛋白的纯化测定而制造的。具有Rho1D4标签的膜蛋白可以通过PureCube Rho1D4 Agarose,利用Rho-tag高特异性来纯化,它在蛋白质产量和纯度方面甚至胜过更常用的Flag-Tag标记。本产品由通过Rho1D4抗体进行功能化40 μm琼脂糖微球组成。德国Cube Biotech研发团队拥有逾40年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究经验,为您提供专用于膜蛋白纯化的Rho1D4系列高质量PureCube Rho1D4琼脂糖填料、磁珠和预装柱,以及具有较高流速XL琼脂糖同系列产品。产品优势:1)德国制造,欧美优质膜蛋白纯化产品供应商;2)膜蛋白纯化的理想解决方案,可以获得纯净且活性的膜蛋白;3)结合能力可高达3-4mg/mL;4)高度特异性纯化带有标签的重组膜蛋白;5)可重复再生使用;6)良好的流量分布和最小空隙体积;7)兼容常用的色谱仪器;8)配合Nanodisc使用,是目前非常有效的膜蛋白提取解决方案,数家科研院校正在使用;9)高性价比的膜蛋白纯化产品! 产品详解:对膜蛋白提取有高特异性和高产量每个批次的PureCube凝胶均是按照严格的质量标准体系生产并严格检验,以确保每一批分装的产品都有高的蛋白结合能力。通过与特异性抗原表位相互作用,辅以优化过的纯化操作步骤,能使目标蛋白在洗脱组分中有高产出量。图1是对CXC趋化因子受体4(CXCR4)的纯化溶于Fos-Choline-14的带标签蛋白通过大肠杆菌表达,再经由含PureCube Rho1D4琼脂糖的层析柱纯化。用Rho1D4多肽作为洗脱液,4次洗脱组分每毫升共收集到0.8mg、1.0mg、0.85mg和0.6mg目标蛋白。蛋白印迹结果说明CXCR4大约是65 kDa和35 kDa。这些条带是39.7 kDa膜蛋白的二聚体和单体。单体、二聚体的分离以及去除洗脱肽段,可以通过排阻层析的方法实现。 图1:用PureCube Rho1D4琼脂糖纯化CXCR4。大肠杆菌裂解液(TL)溶解在Fos-Choline-14中,溶解的组分(SF)与装有Rho1D4抗体的免疫亲和层析柱相结合。平衡组分中没有测得损失目标蛋白,经分光光度计测定,CXCR4在洗脱组分(E1-E4)中得浓度范围在0.6-1.0mg/mL。 蛋白表达系统纯度产率(所有回收蛋白)采取的纯化步骤hVN1R1G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%1mg/1g细胞Rho1D4 IAC+SECFPR3G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%2mg/6g细胞Rho1D4 IAC+SECTAAR5G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%1mg/9g细胞Rho1D4 IAC+SECOR131-2G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%2.9mg/10g细胞Rho1D4 IAC+centrifugationhOR17-4G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)90%7.5mg/2.5L培养物Rho1D4 IAC+SEChOR17-4G蛋白偶联受体无细胞小麦胚芽提取物70%*0.3mg/mL反应溶液*Rho1D4 IAC+SECCD81四次跨膜蛋白可诱导的HEK293S细胞系(哺乳动物)>95%26μg/3×10^7个细胞Rho1D4 IACAE1溶质载体S.啤酒系BJ545793%2.5mg/18L培养物Rho1D4 IAC 表1:有文献报道的使用Rho1D4系统纯化膜蛋白的纯度和产率。尽管很多用Rho1D4系统纯化的膜蛋白均为G蛋白偶联受体家族,该系统也可以有助于辨别其他如转运体之类的膜蛋白。 IAC:免疫亲和层析;SEC:排阻层析。在20世纪80年代发现Rho1D4表位和配对抗体,当时通过将抗体偶联到Sepharose上来纯化在猴肾细胞中表达的牛视紫红质。自此,Rho1D4系统(标签,偶联抗体的亲和基质,洗脱肽)开始用于少量膜蛋白的纯化,包括G蛋白偶联受体(GPCR),ATP结合转运体,溶质反向转运体和一个四次跨膜蛋白。 图2:假设有3个跨膜域的膜蛋白。Rho1D4标签加到膜蛋白C端,它的序列是T-E-T-S-Q-V-A-P-A通过转基因修饰在目标膜蛋白的C端(或N端)加上Rho1D4标签(如图1)。一旦配有该序列,即可用装载有Rho1D4抗体的亲和基质捕获目标蛋白,并随后通过添加过量Rho1D4多肽,产生竞争性结合基质表面抗体来洗脱目标蛋白,用此方法洗脱比改变pH值等方式更加温和。Rho1D4系统的一大优势是抗体与表位相互作用特异性非常高。而其另一大优势是洗脱目的蛋白收率相当高。利用Rho1D4纯化的目标蛋白可用于功能性研究,如:配体结合的特性,蛋白与蛋白间的相互作用。*纯度是从低浓度经一步Rho1D4 IAC在反应溶液中得出的;产率是在洗脱成分浓缩并过SEC柱后计算。 技术参数:用途Rho1D4 (TETSQVAPA)标记蛋白的高特异性亲和纯化特异性与Rho1D4标记蛋白的亲和性特殊功能强烈推荐用于膜蛋白的纯化 结合力3-4 mg / ml 琼脂糖磁珠配体Rho1D4 抗体粒径大小40 μm螯合剂稳定性在含有10 mM DTT 和 1 mM EDTA的缓冲液中稳定 罐装量以 50?%悬浮液进行运送所需设备 裂解液 洗涤缓冲液 洗脱缓冲液 冰水浴 可用50?mL离心管的可预冷离心机 (最小转速 10,000 x g) 50?mL 离心管 微量移液枪和微量移液枪尖 一次性重力柱,带盖底出口,2ml pH计 回转摇床 SDS-PAGE缓冲液,试剂和设备 可选择:Western Blot试剂和设备 推荐流速和保存温度0.25-1.0mL/min,4℃相关产品:1. 所有PureCube系列琼脂糖产品均提供用于自动液相色谱系统(如:FPLC)的预装柱(提供1mL);2. 用于稀释样品或用于pull-down实验,我们推荐使用PureCube Rho1D4 Magbeads磁珠;3. Rho1D4抗体:这种抗体作为分离物质来生产PureCube的Rho1D4琼脂糖。也可以在Western Blot实验或者ELISA实验中检测rho-tagged蛋白;4. Rho1D4多肽:在洗脱缓冲液中,Rho1D4多肽竞争结合到亲和层析凝胶上然后释放标签蛋白,相对于改变洗脱液的pH值来说提供了更温和的洗脱环境。Cube Biotech 提供了一系列的Rho1D4肽段,这些肽段已经被PureCube Rho1D4琼脂糖验证;5. 配合Nanodisc产品使用,是有效的膜蛋白提取解决方案。6. Rho1D4多肽可以单独购买,也可以购买PureCube Rho1D4试剂盒套装。详情请参见订货信息以及公司官网。What our customers say:订购信息:33101PureCube Rho1D4 Agarose (1 ml)33102PureCube Rho1D4 Agarose (5 ml)33103PureCube Rho1D4 Agarose (10 ml)33301PureCube Rho1D4 Cartridge (1x1 ml)33305PureCube Rho1D4 Cartridge (1x5 ml)33199Rho Starter Set 1: PureCube Rho1D4 Agarose (1 ml) + Rho1D4 peptide (5 mg)33299Rho Starter Set 2: PureCube Rho1D4 MagBeads (1 ml) + Rho1D4 peptide (5 mg)33399Rho Starter Set 3: PureCube Rho1D4 Cartridge (1x1 ml) + Rho1D4 peptide (5 mg)16201Rho1D4 peptide (5 mg)16203Rho1D4 peptide (25 mg)40020Rho1D4 Antibody (200 μg)
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  • PureCube His Affinity Agarose (NTA)是针对组氨酸标签的亲和层析产品,组氨酸标签是应用广泛的亲和层析标签,这种标签具有小尺寸、低免疫原性的特点和在多种天然或变性条件下的广泛适用性,NTA相对于IDA具有更高的洗脱液纯度。 产品优势:1)德国制造,品质与信誉的坚实保证;2)结合载量可高达80mg/mL,目前市面上高结合能力;3)更优越的DTT和EDTA稳定性和耐受性;4)凝胶的多孔性和均匀粒径,使蛋白与凝胶之间有很好地相互作用;5)适合低压环境下的纯化过程(大规模纯化制备或预装柱均可使用);6)高性价比,为研发、生产降低成本;7)适用于大肠杆菌和真核细胞的裂解液和上清液;8)同时可装载Co, Cu, Zn和其它金属离子。 优势详解: 1. 收率高,纯度高Fig. 1: Over 20% more yield obtained with PureCube Ni-NTA Agarose. SDS-PAGE of GFP expressed in E. coli and purified in gravity columns with PureCube Ni-NTA Agarose and Ni-NTA resin from Competitor Q. 80 mg/mL protein yield was obtained with PureCube Ni-NTA Agarose (E1–E4, Cube) compared to 65 and 48 mg/mL, respectively, with the widely used alternative resins G and Q (E1–E4, Competitor G / Competitor Q). Cube Biotech蛋白结合能力 80mg/mL 2. 优越的DTT和EDTA稳定性Fig. 2: NTA is robust in the presence of reducing and chelating agents. GFP-His was purified on gravity columns containing PureCube Ni-NTA Agarose after exposing the resin for 1 h to 3 concentrations of DTT or EDTA. NTA exhibits a shallow decay rate in binding capacity. PureCube Ni-NTA琼脂糖在DTT和EDTA存在下非常坚实,在稳定性测试中,将PureCube Ni-NTA琼脂糖置于DTT与EDTA浓度逐渐升高的环境中处理1小时。再用处理过的凝胶在重力层析柱中纯化大肠杆菌表达的GFP-His,凝胶的蛋白结合能力因存在DTT与EDTA而下降,但是衰减率平缓,即使在1.5 mM EDTA,凝胶依然具有其大结合能力的54%。 Cube BiotechDTT稳定性10mMEDTA稳定性1.5mM 产品特性:应用Specific binding and purification of 6x his-tagged proteins特异性Affinity to His-tagged proteins结合能力80?mg/mLBead LigandNi-NTA粒径大小40 μm螯合剂稳定性Stable in buffer containing 10 mM DTT and 1 mM EDTA保存Delivered as a 50?% suspension所需试剂耗材Lysis BufferWash BufferElution BufferIce bathRefrigerated centrifuge for 50?mL tube (min 10,000 x g)50?mL centrifuge tubeMicropipettor and Micropipetting tipsDisposable gravity flow columns with capped bottom outlet, 2 ml?pH meterEnd-over-end shakerSDS-PAGE buffers, reagents and equipment Optional: Western Blot reagents and equipment 订货信息:31101PureCube Ni-NTA Agarose (1 ml)31103PureCube Ni-NTA Agarose (10 ml)31105PureCube Ni-NTA Agarose (50 ml)31110PureCube Ni-NTA Agarose (250 ml)31112PureCube Ni-NTA Agarose (500 ml)31115PureCube Ni-NTA Agarose (1000 ml)31120PureCube Ni-NTA Agarose (5000 ml)
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  • 智能琼脂培养基分装系统 实现琼脂培养基的无菌分装和堆叠自动化,内含直径90mm平皿分装模块;可选配直径55mm,150mm等规格的平皿分装模块、保温模块、摇晃混匀模块、复层倾注模块。可大幅度提高分装效率、减少人工工作量、降低不同皿之间的分装量误差、消除交叉污染风险。 产品特点适用于55mm、90mm、150mm 等各种规格培养皿类型培养基保温技术:室温至50℃可调内置紫外灯,分装区域独立消毒,预防交叉污染分装效率:300皿/h培养皿贴标 应用领域琼脂培养基分装技术参数名称/型号智能琼脂培养基分装系统 / HONOR500ZFZ电源单相三线电压:220V;50Hz使用环境温度10-30℃,湿度35-80 %,万级(C级)洁净区域及以上通量400皿/批分液体积约 10mL-100mL,可设定分液精度≤±2%(水样溶剂)分液速度10-1000mL/min分装效率300皿/h紫外消毒功能支持,分装区域独立消毒,预防交叉污染保温模块选配:室温至60℃可调摇晃混匀模块选配,具有正反摇晃混匀功能复层倾注模块选配
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