丽丝胺罗丹明用于细胞

【违法添加专场2】：辣椒粉中罗丹明B的测定罗丹明B(Rhodamine B)又称玫瑰红B,或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。经老鼠试验发现，罗丹明B会引致皮下组织生肉瘤，被怀疑是致癌物质。罗丹明B在溶液中有强烈的荧光, 用作实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色。但最近被查出火锅底料中的花椒是用罗丹明B炮制而成。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105281512_296640_1644952_3.jpg最近做罗丹明B遇到些问题，求助，谢谢最近参照国标 SN/T 2430-2010 进出口食品中罗丹明B的检测方法 测定辣椒粉中的罗丹明B方法中用 乙酸乙酯环己烷1:1提取 然后过GPC净化。　ＧＰＣ 参考条件：ａ）　凝胶色谱净化系统Ａｃｃｕｐｒｅｐ （Ｊ２）；ｂ）　凝胶柱规格４００ｍｍ×２５ｍｍ（内径）；ｃ）　色谱柱填料Ｂｉｏ

前言： 前段时间，据《重庆商报》报道，接国家工商总局、卫生部等4部委联合通知，重庆市工商、质监等部门抽查当地火锅底料等调味品质量后发现，王牌麻辣鱼调料等5个厂家10个批次的调味产品都含有工业染料“罗丹明B”（商品名为“玫瑰红B”），这些调味产品多为麻辣调味料。“罗丹明B”简介据了解，问题火锅底料里查出的工业染料“罗丹明B”主要来自生产底料所用的豆瓣里。加入这种物质后的豆瓣色泽红润，卖相好，很吸引消费者。“罗丹明B”（商品名为玫瑰红B）为工业染料，又称若丹明B，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。英文名Rhodamine B.分子量479.0175。罗丹明B在溶液中有强烈的荧光, 用作实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色。 正文： 辣椒面中的罗丹明B（Rhodamine B）的测定1. 适用范围适用于辣椒面中罗丹明 B的测定。2. 提取精确称取1g 辣椒面于50 mL聚丙烯离心管中，加入20 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，300 rpm振荡10 min，4000 rpm离心5 min，转移上清液于50 mL离心管中，残渣重复提取一次，合并上清液，于40℃氮吹至10 mL左右，待净化。3. 净化预处理：向Welchrom® Alumina-N（500mg/6mL）中加入5 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，流出液弃去；上样：将上述提取液加入柱中，流出液弃去，此时，含罗丹明B的样品在柱上部会出现鲜亮的粉红色的荧光条带，条带边缘清晰，粉红色随含量的增加而加深和加宽，不含罗丹明B的样品提取液不会出现粉红色条带，只会出现黄红色的界面不清晰的宽带；淋洗：加入含有20%丙酮的正己烷溶液淋洗SPE柱，可见柱体上的黄红色条带下移，直到黄色条带洗出柱体为止；洗脱：5 mL甲醇：水（90:10）洗脱（不同活度的氧化铝选择的洗脱液不一样，Welchrom® Alumina-N为Beckman Ⅰ级，采用纯甲醇洗脱时，需要大量的洗脱液才能将罗丹明B 洗脱下来，故在此加入10%的水以提高洗脱强度）；重新溶解：采用90%甲醇水溶液定容至5 mL，过0.22μm滤膜，装瓶待分析；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104111117_288161_1622024_3.jpg4. 检测色谱条件：色谱柱： TopsilTM C18 液相色谱柱（4.6 mm x 250 mm, 5 μm）流动相： 甲醇：水=75:25流速： 1 mL/min进样量： 20 μL柱温： 40°C检测波长： 554 nm运行时间：11 min 5. 结果回收率和重现性实验 将空白辣椒面上述方法处理后，分别添加一定量的标准溶液，添加浓度分别为0.2 mg/kg、0.5 mg/kg、2 mg/ kg、每批次内同一浓度做3次平行实验，共3个批次。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104111117_288160_1622024_3.jpg图谱：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104111118_288162_1622024_3.jpg本方法中使用到得耗材：1． 固相萃取小柱 Welchrom® Alumina-N 500mg/6mL (P/N:WSAN010605)2． 色谱柱：TopsilTM, 4.6*250 mm，5μm（P/N: