大肠埃希氏菌质控样品

p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 12月24日，中国仪器仪表行业协会官网发布关于成立《菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪》团体标准起草工作组的通知。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/e78d99c1-dbec-4bcb-8492-91f5fba8d214.jpg" title=" 企业微信截图_20201225104600.jpg" alt=" 企业微信截图_20201225104600.jpg" / /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/18138437-6b45-4d90-87a8-ec28a2cba009.jpg" title=" 通知.jpg" alt=" 通知.jpg" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 各有关单位： /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 根据《关于& lt 菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪& gt 团体标准项目建议书的批复》（中仪协[2019] 017号），《菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪》项目已经列入中国仪器仪表行业协会的团体标准制定计划。该团体标准由中国仪器仪表行业协会归口管理，青岛佳明测控科技股份有限公司牵头起草。主要参与单位有吉林市光大分析技术有限责任公司等。现征集参与标准起草单位并成立标准起草工作组，请有关单位指派熟悉相关标准内容的技术人员参加，报名表（见附件）签字盖章后于2020年12月30日前扫描电子版发送至中国仪器仪表行业协会。 !--菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪-- /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 联系人：马雅娟 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 电话：13611013933 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 地址：北京市西城区百万庄大街16号1号楼6层 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 电子邮箱：mayj@cima.org.cn /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 附件： /p p style=" line-height: 16px " img style=" vertical-align: middle margin-right: 2px " src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_doc.gif" / a style=" font-size:12px color:#0066cc " href=" https://img1.17img.cn/17img/files/202012/attachment/ce9bdb3e-7cf9-4497-a3c3-3a4140fe9054.doc" title=" 《菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪》起草工作组报名表.doc.doc" 《菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪》起草工作组报名表.doc.doc /a /p p style=" line-height: 16px " img style=" vertical-align: middle margin-right: 2px " src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a style=" font-size:12px color:#0066cc " href=" https://img1.17img.cn/17img/files/202012/attachment/d365221d-896f-4078-b98f-c6d531851c2a.pdf" title=" 关于成立团体标准起草工作组的通知.pdf.pdf" 关于成立团体标准起草工作组的通知.pdf.pdf /a /p

GB29921-2021《食品安全国家标准 预包装食品中致病菌限量》于2021年9月7日发布，2021年11月22日实施。“致泻大肠埃希氏菌”突然就成了焦点！在2013版本中，原检测项目为大肠埃希氏菌O157:H7/NM。然而随着对致泻大肠埃希氏菌检验、鉴定能力的提升，越来越多的由其引起的暴发和病例被识别出来，其导致的疾病负担以往也可能被低估。我国食源性疾病监测结果显示，近几年细菌性食源性疾病暴发事件中，致泻大肠埃希氏菌引起的事件数已经上升到第五位，高危食品主要为肉制品、蔬菜、水果等。2021版标准修订将“大肠埃希氏菌O157:H7”修改为“致泻大肠埃希氏菌”，并对肉制品中的牛肉制品、即食生肉制品、发酵肉制品类，即食果蔬制品中的去皮或预切的水果、去皮或预切的蔬菜及上述类别混合食品规定了限量要求n=5，c=0，m=0/25g。（来源：食品安全国家标准数据检索平台）致泻大肠埃希氏菌是什么？致泻大肠埃希氏菌是一类能引起人体以腹泻为主的大肠埃希氏菌，可经过污染食物引起人类发病。常见的致泻大肠埃希氏菌主要包括：肠道致病性大肠埃希氏菌EPEC肠道侵袭性大肠埃希氏菌EIEC产肠毒素大肠埃希氏菌ETEC产志贺毒素大肠埃希氏菌STEC（包括肠道出血性大肠埃希氏菌EHEC）肠道集聚性大肠埃希氏菌EAEC致泻大肠埃希氏菌如何检测？GB4789.6-2016致泻大肠埃希氏菌检验流程：目前国标PCR确认试验方法为普通PCR法。接下来带大家了解一下美正的两种PCR检测方案1. 普通PCR检测流程及产品介绍2. 荧光定量PCR检测流程及产品介绍致泻大肠埃希氏菌检测注意事项及常见问题 操作注意事项 （1）PCR鉴定前需将菌纯化于非选择性的固体培养基上；（2）所有PCR操作需严格分区，不同区域内仪器物品不可混用；（3）所有冷冻试剂使用前需融化混匀短暂离心后开盖使用；（4）试剂避免反复冻融，大体积试剂可配置后小体积分装冷冻；（5）操作需要带手套，不可使用带荧光物质或者是带粉末的手套；（6）提核酸加热后需冷却到室温后在开盖操作，避免气溶胶污染；（7）PCR管及管盖上不可使用记号笔标记；（8）不同批次试剂盒试剂不可混用；（9）严格按照试剂盒说明书设定反应参数和荧光通道。 用荧光定量PCR符合标准要求吗？ 答：这个不好说，一般按照不同的评审员的理解来要求。多数评审员应该会算是一种方法偏离吧。但是荧光定量PCR在技术上肯定是更先进的，至少明显降低了污染风险和生物安全风险，是今后食品微生物学检验技术的发展方向。GB 4789.6－2016的6.5.8条款：如用商品化PCR试剂盒或多重聚合酶链反应（MPCR）试剂盒，应按照试剂盒说明书进行操作和结果判定。这时候，我使用商品化荧光定量PCR试剂盒，是不是就可以按照试剂盒说明书进行了？大家可以探讨一下。 现在的食品实验室是否可以通过改装成分子实验室？食品检测的BSL-II室可以和PCR实验室共用吗？ 答：食品实验室本来就可以包括分子实验部分。所以，常规食品微生物检测的生物安全二级实验室可以和PCR实验室共用。但是，因为生物安全二级实验室必须是负压或者常压，而PCR实验室是相对正压，还有人流物流的多次进进出出，在防止交叉污染方面比较辛苦。最好还是不要合并使用。产品名称24T普通PCRDZ10015-348T用于PCR操作过程短暂离心

大肠埃希菌（Escherichia coli，E.coli）和志贺菌（Shigella Castellani）都是具有高度传染性、危害严重的革兰阴性肠道致病菌, 病人感染后的临床表现相似，如发热、水样腹泻、剧烈腹痛等，严重可致死亡。临床上大肠埃希菌和志贺菌的正确鉴定对临床治疗非常关键，因为不同的菌株间有毒力和耐药性的差异，感染不同的致病菌，需要采用不同的治疗方案。从全基因组角度上，大肠埃希菌（Escherichia coli，E.coli）和志贺菌（Shigella Castellani）的平均核苷酸一致率＞95% ，保守DNA＞69%，符合同一个种的定义，它们在菌落形态及生物学特性方面都非常相似，因此在临床实验室的常规工作中很容易被混淆，影响疾病的准确治疗。即使是通过16S rRNA 测序也只能鉴定到志贺菌-大肠埃希菌，并不能将其准确区分，进一步的鉴定需要依赖生化反应及血清学试验，但是这两种鉴定手段的实验步骤复杂、耗时很长，根本无法满足临床上对时效性的要求。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱( matrixassistedlaser desorption / ionization time of flight massspectrometry，MALDI-TOF MS) 是近年发展起来的一种新型软电离质谱技术，具有快速、准确、操作简便、高通量、低成本等优势，已经被广泛应用于微生物的分型鉴定。由于大肠埃希菌（Escherichia coli，E.coli）和志贺菌（Shigella Castellani）基因水平上同属于一个种，特征性质谱图高度相似，如果仅仅使用目前常用的微生物分型算法进行数据库检索，仍然会有错误鉴定的情况存在。我公司基于自主知识产权的Ebio ReaderTM 3700M飞行时间质谱系统平台，开发出了一套功能强大的人工智能算法，准确区分基因型相近的难辨菌的解决方案，如大肠埃希菌（Escherichia coli，E.coli）和志贺菌（Shigella Castellani），准确度达到95%以上。我们利用Ebio ReaderTM 3700M 分别对福氏志贺菌(Sh.flexneri)、大肠埃希菌（E.coli）以及两种菌株的混合菌进行质谱鉴定以及蛋白质谱图比较分析。激光频率20 Hz，每个样本进行200次激光采集，采集相对分子质量 2000Da～15000Da的蛋白质图谱，通过数据分析软件对采集到的3个样品图谱进行比对分析。3种样品均在 2691、3737、4869、5381、6255、7274、9067、9743、10300 m /z 处出现相似的特征峰，其蛋白质谱图极为相似（图1），如果单纯通过数据库检索的话，极大可能会造成错误鉴定。 图1：大肠埃希菌、福氏志贺菌以及混合菌的质谱图之后，我们分别选取福氏志贺菌51例，大肠埃希菌56例，利用Ebio ReaderTM 3700M飞行时间质谱系统进行质谱分析，通过神经网络软件比对观察两组细菌蛋白峰的差异，并运用强大的人工智能算法将采集到的谱图数据建立分类模型，然后利用此模型进行了盲样鉴定。结果可以将大肠埃希菌和福氏志贺菌完美地区分开，分离度分别达到99.5%和95.4%，混合菌的分类结果显示大肠埃希菌和福氏志贺菌分别为76.2%和23.8%，也说明了此样品为混合样本，且有一定的定量效果（如下表）。 通过软件的聚类分析功能，更加直观地显示我们建立的这套方案可以将大肠埃希菌和福氏志贺菌以及二者的混合菌有效的分离（图2）。 图2：大肠埃希菌、福氏志贺菌以及混合菌的聚类分析在此MALDI-TOF微生物自动鉴定检测系统中，公司使用了自主研发、具有深度学习分析功能的神经网络人工智能软件。通过上述案例证明此套人工智能算法可实现对大肠埃希菌和志贺菌的准确区分鉴定，弥补了质谱技术在鉴定亲缘关系相近菌种能力的不足，达到了精准医疗的目的，对临床诊断及治疗方面具有重要意义。