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细胞培养是细胞和分子生物学中最重要的一项技术。广泛应用于现代医学、农业科学、生物科学、材料科学和环境科学等领域,培养的细胞为上述领域提供研究的模型和实验材料。目前细胞间可以供从事蛋白质表达工作的昆虫细胞培养实验及如HEK293T细胞系,Hela细胞系,CHO细胞系等常用细胞系的培养、传代及其他分子实验的操作条件。
从大小来讲,细胞培养瓶约可分为约600ml,250ml,50ml和25ml的,一般都经过表面改性处理,适合细胞贴壁和生长。600ml 、300ml的多用于大规模培养时用(如单克隆细胞的培养等),50ml的多用于一般性细胞实验用(一般性的传代,保存细胞,为实验提供细胞等),25ml一般是用来复苏细胞或细胞较少时的培养,还有做原代细胞时也可以做多瓶而避免交叉污染。当然还有其他如圆形的等,都可根据个人爱好和实验需要自己选择。 根据细胞培养瓶制作材料的不同,也有玻璃和塑料之分,这里谈一点自己的浅见(欢迎不同意见的战友拍砖)。不同的细胞对胰酶的敏感度不一样,所以在实验中我们常常会遇到一些细胞消化半天也没有起色,导致细胞状态不断下滑,直至最后的死亡以至于实验进展的不顺利。当然,有时候是可以通过加一些EDTA等来增强胰酶的能力,或者提高胰酶的浓度来实现,在培养一些细胞过程中,我发现,一些细胞对玻璃和塑料制品粘附能力不同,如RAW264.7,平滑肌细胞等,在转换培养瓶之后,可以发现好消化了很多,并且在回到原制品的培养瓶时不会改变它的贴壁能力。这里希望有经验的战友可以分享你们的经验。 关于培养板的购买其实我也没有什么经验,想说的就是要尽量避免购买国产的培养板,国产的一些培养瓶还可以,但是培养板我们买过很多国产的,确实效果不是很好,细胞在里面基本上长的非常非常磕碜。所以经费富余的情况下,这些东西能买进口的就买吧。大公司的基本都可以买,BD,Corning等等。这些东西原则上是一次性的,但是我们大部分实验室根本不可能做到,其实泡酸,洗干净再用也没问题,毕竟我们没有老外那么富足的经费,所以我们就累点吧,多做点体力活锻炼一下身体吧。滴管其实也没什么好说的,国产的就足够了。要说的是图中我比较喜欢用C类的滴管,原因就是塞上棉花后吹打细胞不会怕棉花湿掉而引起污染,而且用完棉花也方便取出,便于下次再用。
新型细胞培养系统研制成功作者:张笑 来源:科学网美国威斯康辛大学麦迪逊分校的科学家们近日开发出一套新细胞培养系统,有望为细胞治疗提供更加一致和安全的细胞培养物。11月14日的《自然—方法学》刊登了这一成果。领导这项研究的Laura Kiessling教授表示这套系统并不昂贵,可承担多能细胞培养中的大量预估工作。这项技术“很简单”,“任何人都能使用”。目前,大部分人类胚胎干细胞的培养都是作为实验室研究用途的,而通常所采用的培养方法又容易造成各种污染。这套新系统采用一种化学合成制得的可与干细胞相结合的蛋白片段底物,并通过与特定培养基结合,可将细胞培养固定在未分化阶段达三个月或者更长时间。据报告显示,该系统亦可用于诱导多功能干细胞培养。“科学家现在普遍采用的培养系统都有着非特定的缺点,并且缺乏一致性,以致出现质量差异”, 领导这项研究的Laura Kiessling教授解释,“我们研发的这套系统特定性很好,而且并不贵”。(科学网 张笑/编译)相关仪器及方法:新型细胞培养系统 IX81显微镜 7500 Fast实时PCR系统 发光光度计