盐酸硫胺细胞和昆虫细胞

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  • 杆状病毒-昆虫细胞表达系统的优势与局限性

    [b][font=宋体]前言[/font][/b][font=宋体]杆状病毒载体表达系统（[/font][font=Calibri]Baculovirus [/font][font=宋体][font=Calibri]e[/font][/font][font=Calibri]xpression [/font][font=宋体][font=Calibri]vector system, BEVS[/font][font=宋体]）自[/font][font=Calibri]1983[/font][font=宋体]年问世以来，已广泛应用于疫苗生产、基因治疗等领域。目前已有多种[/font][font=Calibri]BEVS[/font][font=宋体]衍生产品获批使用，如[/font][font=Calibri]HPV[/font][font=宋体]疫苗、流感疫苗和几款兽用疫苗等。[/font][font=Calibri]BEVS[/font][font=宋体]具有安全性高、操作简单、可以无血清培养等优点，但同时也面临表达不稳定和蛋白质糖基化水平低等挑战。本文总结了[/font][font=Calibri]BEVS[/font][font=宋体]的优势和局限性。[/font][/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]杆状病毒载体表达系统的优势[/font][font=Calibri] [/font][/b][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、安全性高：杆状病毒仅感染昆虫细胞，不感染其他脊椎动物，对人类健康没有不良影响。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、高效的蛋白质表达：[/font][font=Calibri]BEVS[/font][font=宋体]能够表达复杂或难以表达的蛋白质，例如各种酶类、寄生虫蛋白、糖蛋白等，并且能进行正确的蛋白质折叠和翻译后修饰。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、易于大规模生产：昆虫细胞可以在无血清的培养基中生长，并且易于扩大生产规模。此外，[/font][font=Calibri]BEVS[/font][font=宋体]不需要处理活病毒或潜在危险的病原体，降低了生产成本。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、应用广泛：广泛用于功能、晶体学和药物发现研究。[/font][/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]杆状病毒载体表达系统的局限性：[/font][/b][font=Calibri] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、表达不稳定：由于病毒的细胞毒性作用导致宿主细胞裂解，这可能影响最终的产物产量和蛋白质的稳定性。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、糖基化水平较低：昆虫细胞所产生的异源蛋白质的[/font][font=Calibri]N-[/font][font=宋体]糖基化图谱与哺乳动物细胞产生的不同，这可能影响蛋白质的稳定性、生物活性或免疫原性。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、潜在的免疫反应：[/font][font=Calibri]BEVS[/font][font=宋体]诱导的免疫反应可能产生炎症细胞因子和趋化因子，并激活补体途径，这也可能对蛋白质表达产生负面影响。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、基因组不稳定性：杆状病毒基因组可能存在不稳定性，影响长期表达和生产稳定性。[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=宋体][font=宋体]尽管存在一些挑战，但[/font][font=Calibri]BEVS[/font][font=宋体]平台近年来已经得到了显著改进，包括病毒载体的优化、病毒基因组的修饰和宿主细胞的广泛应用，这些分子进步有助于增强[/font][font=Calibri]BEVS[/font][font=宋体]平台的多样性和应用潜力。[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]义翘神州提供[/font][url=https://www.sinobiological.com/services/baculovirus-insect-protein-expression-service][u][font=宋体][color=#0026e5][font=宋体]杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫蛋白表达的一站式服务[/font][/color][/font][/u][/url][font=宋体][font=宋体]。凭借优化的表达载体和更高滴度的病毒包装技术，义翘神州在杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞蛋白表达方面具有丰富的经验，特别是针对序列较长的蛋白、病毒类蛋白、激酶、胞内蛋白以及膜蛋白等。[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]参考文献：[/font][font=Calibri]Hong M, Li T, Xue W, et al. Genetic engineering of baculovirus-insect cell system to improve protein production. Front Bioeng Biotechnol. 2022 10:994743. Published 2022 Sep 20. doi:10.3389/fbioe.2022.994743[/font][font=Calibri] [/font]

  • 如何使昆虫细胞适应新的培养液

    市场上供应的大多数培养液的配方非常接近，这使得细胞很容易适应新的培养液。这里我将详细介绍一个方法，这个方法是保守的，在大多数情况下可以进行删减一些步骤。最简单最节省时间的情况是把细胞直接分装到新的培养液中，观察几代以保证细胞的生长参数是可以接受的。这个方法适于悬浮细胞，不过也很容易扩展到贴壁细胞。细胞的生长参数1. 翻倍时间（ Doubling Time ）细胞的翻倍时间在评价昆虫细胞健康程度的参数中是最容易测量的。翻倍时间应该在细胞处于对数期复制时测量，对于 Sf9 和 Sf21 细胞来说通常是介于 16-24 小时之间，不过大多数在 20-22 小时。dt=t × ln2/ln(Ct/Co) ，其中 dt 为翻倍时间， Co 为起始细胞数目， Ct 为经过时间 t 后的细胞数目， t 为 Co 和Ct 两次计数之间的间隔时间，所有的时间都以小时为单位。2. 细胞大小（ Cell Size ）细胞的大小是监测细胞健康程度的一个非常有用的参数。如果细胞是健康的，细胞的大小均一，都处于该细胞株体积正常变化范围的下限。细胞的大小在不同的细胞株变化是很大的。对于我用过的 Sf9 和 Sf21 ，典型的直径是 16-18 m m ，不过我知道有些细胞株小至 14 m m 或者大至 19 m m 仍然很健康。3. 滞后期（ Duration of Lag ）当细胞的密度较低时，会有一个滞后期，其长短取决于分装或者传代后细胞的密度。一般说来，该密度越低，滞后期越长。对于一个特定的细胞株来说，当这个密度高出一个阈值时，滞后期的长短与密度无关；而低于一个阈值时，滞后期无限长，细胞不再增殖。4. 低密度分装极限（ Low Density Split Tolerance ）能够在一个较短的滞后期（小于 12 小时）复苏的细胞形状较好。不过这是细胞株的特性，需要进行实验来确定你的细胞株的密度极限。我的细胞株有些在分装成密度为 5 × 104 细胞 /ml 时仍然可以很好复苏，有些细胞株分装成 5 × 105 细胞 /ml 就不能复苏了。5. 高密度极限（ High Density Maximum ）这是你的细胞能生长的最大密度，高于这个密度你的细胞将进入平台期。这个指标既和细胞株有关，又和使用的培养液有关。我建议先把你的细胞株培养至平台期，然后把一些分装到新鲜的培养液中以后，使剩下的继续生长至平台期，同时密切监测细胞状况。一般来说，细胞的培养要避免密度超过高密度极限的 80% 。对于我培养的细胞，这个极限值从 2 × 106 至 12 × 106 细胞 /ml 不等。实验步骤第一阶段：1. 准备合适体积的由 25% 体积新培养液和 75% 旧培养液（即细胞原先适应的培养液）组成的混合培养液 I。2. 将细胞以通常分装时使用的最低分装密度的两倍分装到混合培养液 I 中。3. 使细胞生长到通常培养时的较高密度，监测细胞生长参数。4. 继续以步骤 2 中的密度分装细胞到新鲜的混合培养液 I 中，直到生长参数达到可以接受的水平。有时候分装一次就可达到要求。5. 一旦细胞稳定下来，以通常使用的最低分装密度分装细胞至新鲜的混合培养液 I 中，同样监测细胞参数。6. 细胞达到较高密度后，继续以步骤 5 中的分装密度把细胞分装到新鲜的混合培养液 I 中，直到细胞的生长参数达到可以接受的水平。7. 如果细胞恢复到正常状态，进行第二阶段的实验。8. 如果细胞不能达到正常状态，新培养液可能不适于培养这种细胞。9. 如果细胞在新培养液中的生长参数达到平衡状态，虽然与正常状态不同，但是可以为实验接受，也可进行第二阶段的实验。第二阶段：1. 准备适量的由 50% 新培养液和 50% 旧培养液组成的混合培养液 II 。2. 将细胞以两倍最低分装密度分装至混合培养液 II 中。3. 如第一阶段一样，监测细胞生长指数，使细胞达到稳定状态。然后将分装密度降到最低分装密度，再使细胞达到稳定状态。第三阶段：步骤同第一阶段和第二阶段，使细胞适应混合培养液 III （ 75% 新培养液和 25% 旧培养液）。第四阶段：1. 步骤同第一阶段、第二阶段和第三阶段，使细胞适应新培养液。2 . 当细胞在新培养液中达到稳定后，监测细胞的生长指数，看是否波动过大。

  • 杆状病毒昆虫细胞表达系统：原理探微与常见问题解决指南

    [font=宋体][font=宋体]在生物技术的广阔天地中，杆状病毒昆虫细胞表达系统以其独特的魅力和广泛的应用前景，正逐渐受到研究者们的青睐。这一系统巧妙地利用经过改造的杆状病毒基因组，在大肠杆菌中高效复制，并通过精密的转座过程将目的基因精准地插入到[/font][font=Calibri]bacmid[/font][font=宋体]的特定位点。这一过程不仅展示了生物技术的精巧与奇妙，更为科研工作者提供了强大的工具，用以探索和研究蛋白质的功能与结构。然而，任何技术在实际应用中总会遇到一些问题和挑战。为了帮助大家更好地掌握和运用这一系统，本文将深入探讨其原理，并分享在实际操作中可能遇到的常见问题及其解决方案，以期为大家的科研工作提供有益的参考和指导。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]杆状病毒昆虫细胞表达系统原理：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]经过精心改造的病毒基因组（即杆状病毒穿梭载体[/font][font=Calibri]Bacmid[/font][font=宋体]）在此系统中展现了非凡的复制能力。它们能在大肠杆菌如[/font][font=Calibri]DH10Bac[/font][font=宋体]菌株中自如地繁衍。这一复制过程得益于供体质粒中目的基因两侧所锚定的[/font][font=Calibri]Tn7[/font][font=宋体]转座原件。这些原件与[/font][font=Calibri]DH10Bac[/font][font=宋体]菌株中的[/font][font=Calibri]helper[/font][font=宋体]质粒所编码的转座酶活性相互作用，将目的基因精准地转座到[/font][font=Calibri]bacmid[/font][font=宋体]的特定位点上。当目的基因成功插入后，会导致[/font][font=Calibri]bacmid[/font][font=宋体]上的[/font][font=Calibri]LacZ[/font][font=宋体]基因发生移码，进而通过蓝白斑筛选法轻松鉴定出阳性重组[/font][font=Calibri]bacmid[/font][font=宋体]。经过提取后，这些[/font][font=Calibri]bacmid[/font][font=宋体]便能转染昆虫细胞，开启其在昆虫细胞中的高效表达之旅。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]昆虫[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]杆状病毒表达平台的常见问题解答[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、[/font][/font][font=宋体]义翘神州是否接受已构建的表达载体进行[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-expression][b]蛋白表达[/b][/url]？[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于众多常规蛋白表达项目，义翘神州确实欢迎并接受客户直接提供的表达载体，如[/font][font=Calibri]pFastBac[/font][font=宋体]等，进行专业的蛋白表达。我们深知每个蛋白的特性独一无二，因此，我们始终致力于与客户保持紧密的沟通，共同探讨并确定最佳的纯化方案，确保最终交付的产品符合客户的期望和需求。我们承诺，通过我们的专业知识和丰富经验，将客户的表达载体转化为高质量的蛋白产品。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][/font][font=宋体]义翘神州是否接受包被好的杆状病毒直接进行蛋白表达？[/font][font=宋体]对于一些常规蛋白表达项目我们同样也可以直接使用客户制备好的杆状病毒进行蛋白表达，我们也会根据蛋白的实际特性与客户沟通交流纯化方案和最终交付形式。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、[/font][/font][font=宋体][font=宋体]哪些类型的蛋白适合杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞表达系统进行制备？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞表达系统适用于多种类型的蛋白表达，鉴于昆虫细胞可实现高密度培养的特性以及相对原核系统较为完备的后修饰和蛋白折叠机制，杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞表达系统通常被较多的用于胞内定位蛋白的表达，并且其在表达一些稳定性相对较差的蛋白，比如转录因子等方面也有一定的优势。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、[/font][/font][font=宋体]杆状病毒表达系统有哪些优势？[/font][font=宋体][font=宋体]杆状病毒表达系统是属于真核表达系统，在蛋白质表达方面具有许多优势，比如可容纳大量[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]插入片段、相对较高的表达水平以及类似于哺乳动物细胞的真核蛋白质修饰等。 杆状病毒表达系统是结构分析中最常用的表达系统。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、[/font][/font][font=宋体]在表达后的修饰中，昆虫系统出现多条带，不同的修饰在活性上有区别吗？[/font][font=宋体]重组表达的后修饰会出现不均一的情况，但不是所有的后修饰都会对蛋白活性有影响，所以需要结合该蛋白的修饰位点在功能上的作用进行分析，不同的修饰不一定在活性上有差异。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体]、[/font][/font][font=宋体]目的蛋白表达后会和病毒一起释放到胞外吗？[/font][font=宋体]需要确定目的蛋白是分泌表达还是胞内表达。分泌表达的蛋白会释放到胞外，因此纯化的时候选用培养上清。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州为客户提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/baculovirus-insect-protein-expression][b]杆状病毒[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/baculovirus-insect-protein-expression][b]-[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/baculovirus-insect-protein-expression][b]昆虫表达平台[/b][/url]，在[url=https://cn.sinobiological.com/services/baculovirus-insect-protein-expression-service][b]杆状病毒[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/baculovirus-insect-protein-expression-service][b]-[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/baculovirus-insect-protein-expression-service][b]昆虫细胞蛋白表达服务[/b][/url]方面具有丰富的经验，特别是针对序列较长的蛋白、病毒类蛋白、激酶、胞内蛋白以及膜蛋白等。义翘神州拥有多种常用昆虫细胞系（[/font][font=Calibri]Sf9, Sf21, High-Five[/font][font=宋体]），一般来说，[/font][font=Calibri]Sf9[/font][font=宋体]更利于病毒扩增，[/font][font=Calibri]Hi5[/font][font=宋体]更利于蛋白表达。义翘采用的是[/font][font=Calibri]Sf9[/font][font=宋体]扩增病毒，[/font][font=Calibri]Hi5[/font][font=宋体]重组表达，并且凭借优化的表达载体和更高滴度的病毒包装技术，有效提高蛋白表达量，交付高活性蛋白。[/font][/font][font=宋体]详情可查看：[/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/baculovirus-insect-protein-expression[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font]

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  • 动物细胞培养基如何选择？这里有答案
    1、细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。1.1 平衡盐溶液（balanced salt solution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank' s与Hank' s的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank' s常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5% CO2的培养条件。表1-1 几种常用的BSS配方（g/L）名称PBS（无Ca2+、Mg2+）PBS（含Ca2+、Mg2+）Earle’sHank’sD-Hank’sKrebs-RingerNaCl8.008.006.808.008.007.00KCl0.200.200.400.400.400.34CaCl2--0.200.14-MgCl2• 6H2O-0.10---MgSO4• 7H2O--0.20.2-Na2HPO41.151.15-0.0480.0480.10Na2HPO4• 2H2O--0.14--0.207KH2PO40.200.20-0.060.06NaHCO3--2.200.350.35-葡萄糖--1.001.00-1.80酚红--0.010.010.01-目前用于细胞培养的血清主要是牛血清，培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的，但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。此外，血清含一些对细胞产生毒性的物质，如多胺氧化酶，能与来自高度繁殖细胞的多胺反应（如精胺、亚精胺）形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长，甚至造成细胞死亡。目前，血清多作为一种添加成分与合成培养基混合使用，使用浓度一般为5~20 %，最常用是10 %。1.2 合成细胞培养基合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。最早开发的基础培养基（minimal essential medium, MEM），其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上，DMEM、IMDM、HAM F12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍，其特性及应用的范围见下表：哺乳动物细胞培养基：培养基名称特性及应用范围199细胞培养基添加适量的血清后，可广泛用于多种细胞培养，并用于病毒学、疫苗生产等MEM细胞培养基MEM（Minimal Essential Medium）培养基有含Earle' s平衡盐的类型，也有含Hanks' 平衡盐的类型；有高压灭菌型的，也有过滤除菌型的；还有含非必需氨基酸的类型。是最基本、适用范围最广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM（Dulbecco’s modified Minimal Essential Medium）是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好，常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM（Iscove’s modified DMEM ）是由Iscove在DMEM基础上改良，增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交瘤细胞培养，以及无血清培养的基础细胞培养基。GMEM细胞培养基Glasgow’s MEM培养基是MEM的改进型，用于支持BHK-21细胞的生长。原配方以BME为基础， 加入10%磷酸胰蛋白(月示)肉汤，氨基酸和维生素浓度加倍。RPMI-1640细胞培养基专门针对淋巴细胞培养设计，含有BSS、21种氨基酸、维生素等，广泛适于多种正常细胞和肿瘤细胞的培养，也用做悬浮细胞培养。HamF12细胞培养基含微量元素，可在血清含量低时用，适用于克隆化培养。F12适用于CHO细胞，也是无血清细胞培养基中常用的基础细胞培养基。DMEM/F12细胞培养基将DMEM和F12按照1:1比例混合，混合后营养成份丰富，血清使用量也减少，常作为开发无血清细胞培养基时的基础细胞培养基。McCoy' s5AMcCoy' s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)原代细胞的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。William' s Medium E适用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。神经元基础培养基可为神经元生长提供基础营养物质。昆虫细胞培养基：培养基名称特性及应用范围Grace' s昆虫培养基Grace昆虫培养基（Grace' s Insect Medium）最初设计为支持澳大利亚白星橙天蚕蛾 (Antherea eucalypti) 细胞 的生长，是对Wyatt培养基的改良，以更接近 Antherea 血淋巴。Grace用这种培养基建立了第一个连续细胞系。适当补充添加剂后，该基本培养基已用于培养各种昆虫细胞，包括多种鳞翅类以及一些双翅类昆虫。Grace昆虫细胞培养基主要作为 培养基基础，用于培养Sf9 和Sf21细胞系，也用于其它鳞翅类昆虫细胞系的生长和维持。Grace' s培养基(Grace’s Insect Cell Culture Medium) 是无血清培养基，使用时需要补充血清，从而为细胞提供必要的营养因子。添加5 -20%胎牛血清后，Grace昆虫细胞培养基可以用于培养多种昆虫细胞。IPL-41 昆虫培养基 IPL-41昆虫培养基（IPL-41 Insect Medium）旨在用于大规模扩增草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）细胞系，也常用于通过杆状病毒表达系统（BEVS）进行蛋白表达。 IPL-41培养基是对原始IPL配方的改良，由美国农业部昆虫病理实验室Weiss等人开发，用于大规模扩增草地贪夜蛾衍生细胞系。Weiss向基础培养基中加入了胎牛血清和TPB培养基（Tryptose Phosphate Broth），成功地实现了IPL-21 AE (III)细胞系的大规模连续培养。该培养基主要用于培养和维护鳞翅类衍生细胞系和扩增这些细胞系的病毒。IPL-41培养基基础也以用于无血清夜蛾细胞的杆状病毒重组蛋白表达。Shield' s & Sang Insect向Sheilds-Sang M3昆虫培养基中添加10%胎牛血清后广泛用于培养各种果蝇细胞系。Sheilds-Sang M3昆虫培养基（Sheilds and Sang M3 Insect medium） 基于D22培养基。该培养基支持黑腹果蝇衍生细胞的生长。Sheilds和Sang将原配方中的氯化物除去，用谷氨酸盐提供钠和钾离子，并用游离氨基酸替代乳白蛋白水解物。Bis-Tris作为缓冲剂放置pH变动。Schneider' s 果蝇培养基 很多昆虫组织培养基的配方是模拟特定昆虫体液的主要物理化学性质。针对相同物种的不同培养基成分的相似度可能比针对不同物种的培养基之间更低。有多种培养基用于果蝇细胞和组织的体外培养。应用最多的是Schneider 培养基、D-22 培养基。果蝇细胞用于研究各种生物化学过程，包括遗传学、内分泌学、生理学和细胞生物学等方面，以及重组蛋白的表达。加入5-20% 胎牛血清后Schneider培养基能够支持黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）原代细胞和建立的细胞系的快速生长。该培养基用于培养和维护果蝇胚胎衍生的细胞系以及其它双翅目昆虫细胞培养物细胞培养基常用几种重要的添加成分及使用过程中应注意的问题酚红在细胞培养基中用作pH值的指示剂。一般情况下，可以通过酚红的指示作用判断培养基的pH值，但低血清或是无血清细胞培养基中酚红的含量与普通细胞培养基中的酚红含量不同，不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值，建议使用pH计进行测定。酚红通常对含血清的细胞培养基生产的生物制品质量并不会产生明显影响，也可通过纯化技术去除，但酚红在无血清细胞培养基中可能带来胞内钠/钾失衡，影响细胞生长。碳酸氢钠在细胞培养基中主要是作为缓冲系统，此外还具有调节渗透压的作用。通常产品使用说明中的碳酸氢钠推荐量是一个标准、安全量，是在科学的基础上根据实践经验所得。但是由于不同的细胞系（株）不同，同一株细胞适应环境也可能不同（细胞耐受性不同等），且存在的地域性水质差异等，在实际生产过程中也可稍作改动，但使用者需做相应的检测（理化及细胞生产试验等）。HEPES是一种非离子缓冲液，在pH 7.2 ～7.4范围内具有较好的缓冲能力，在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（0.34 g /L）共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。其安全浓度范围是10～25 mmol/L。丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是在没有葡萄糖的条件下，细胞也可以代谢丙酮酸钠。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，4 ℃下放置1周可分解50 %，使用中最好单独配制，置-20 ℃冰箱中保存，使用前加入细胞培养液中。赖氨酸（L-lysine）：分子量大于70,000的多聚赖氨酸可以用于促进细胞贴壁生长，也可以用于组织学(Histology)分析时的粘片剂。Poly-L-lysine和Poly-D-lysine都可以用于促进细胞的贴壁生长。Poly-L-lysine可以被某些细胞所消化并吸收，摄入过多的Poly-L-lysine会产生一定的细胞毒性。如果遇到Poly-L-lysine有细胞毒性的情况，可以考虑选用Poly-D-lysine，因为右旋的聚赖氨酸是不会被生物吸收利用的，所以毒性更低。远慕生物致力于生物技术和生命科学等行业领域，专注于植物生物学技术研究，以满足全球不断增长的食品，能源、医药日益增长的需求和发展。目前远慕生物制造和提供的产品主要有动物细胞培养产品（包括细胞培养基、FBS、缓冲溶液、抗菌剂和其他试剂）和植物生物学产品（包括植物组织培养基、凝胶系列产品、植物生长调节剂、抗生素&抗菌剂、生化试剂以及植物组培容器和耗材）。
    时间： 2020-06-11
    作者： 上海远慕生物科技有限公司
  • 昆虫可取代老鼠接受药测
    英国的生物家认为，可以用蛾、毛虫和果蝇等昆虫替代老鼠，进行药物试验。 　　科学家已经发现，哺乳动物与昆虫的一些主要细胞在感染病原体之后，产生类似的抗病化学反应。最新发现意味着，以前用老鼠来进行的药物试验，有80%可以用昆虫替代，可望替药厂省下大量的时间和金钱。 　　爱尔兰国立大学的生物学家卡瓦纳，在爱丁堡举行的微生物医学年会上发表了研究成果。他说：“现在通常的做法是，在新药研究过程中，初步试验用幼虫，最后的验证试验用老鼠。” 　　他还说：“这种方法比较快，因为用昆虫做试验48小时就能出结果，但是用老鼠常常需要4至6个星期，而且昆虫要便宜得多。” 　　卡瓦纳和同事发现，构成人体免疫系统的嗜中性粒细胞以及血细胞，在昆虫体内也起到类似的作用，受到细菌感染后也会出现同样的反应。 　　昆虫和哺乳动物的细胞都会产生结构类似的化学物质，这种化学物会移动到细胞表面杀死入侵者。他们发现，免疫细胞会把细菌包围住，然后释放出酶分解它们。
    时间： 2009-09-10
    作者： WEI
  • 阿拉丁细胞培养总动员，一起快乐实验吧
    阿拉丁细胞培养总动员，一起快乐实验吧 Aladdin&i-Quip的优势细胞培养细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术。细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的 技术。 细胞培养泛指所有体外培养，其含义是指从动物活体体内取出组织，于模拟体内生理环境特定的体内条件下，进行孵育培养，使之生存并生长。细胞培养工作现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域，成为最重要的基础科学之一。 阿拉丁为您提供全面的细胞培养技术，现货充足的各种培养所需试剂。芯硅谷作为阿拉丁的耗材品牌，为细胞培养实验准备了各系耗材，包括：细胞培养板，深孔板，各容积培养皿、培养管等。阿拉丁-芯硅谷是您细胞培养实验的首选。 产品列表&mdash &mdash 细胞培养专用试剂货号品名规格CAS号包装A103539抗坏血酸 用于细胞培养50-81-7500gA103540抗坏血酸 用于植物细胞培养50-81-7100g,500gP110425L-苯丙氨酸 非动物源，EP, JP, USP ；用于细胞培养，98.5 to 10163-91-225g,100g,500gT108222L-苏氨酸JP, USP ；用于细胞培养，99.0-101.0%72-19-525g,100gI115775L-异亮氨酸EP, JP, USP73-32-525g,100g,500gE103809乙醇胺 99%，细胞培养专用141-43-5100ml,500mlT100896噻唑蓝(MTT) 98%298-93-11g,5g,25g,250mgC114435矮壮素 植物细胞培养级,&ge 99%(HPLC)999-81-55g,25gG115554D-半乳糖胺盐酸盐 for cell culture,99%1772-03-81g,5g,250mgC111538氯化钠 用于细胞和昆虫细胞培养，&ge 99.5% (T)7647-14-52.5kg,1kg,500gP100088亚碲酸钾 99.5%7790-58-125g,100gC139524干酪素 suitable for insect cell culture9000-71-9500gC110500干酪素 technical grade9000-71-92.5kg,500g,500mlH104201肝素钠 185 USP units/mg9041-08-11g,5gH123383肝素钠 &ge 180 USP units/mg9041-08-1100KU,250KU,500KU,1000KUB111605硼酸 用于细胞培养和植物细胞培养, &ge 99.5%10043-35-3500gM112543氯化锰,四水 昆虫细胞培养级，&ge 99%13446-34-9100gS104205水合胆酸钠 98%206986-87-05g,25g,100gS104206水合胆酸钠 for cell culture，&ge 99.0%206986-87-025g,100g产品列表&mdash &mdash 细胞培养专用耗材货号包装品名详细参数B1559-03100EA三角形细胞涂布棒三角推边宽度:30mm 全长:208mm 颜色:蓝色 材料:PP 是否消毒:是 包装类型:热封袋B1559-05100EA三角形细胞涂布棒三角推边宽度:60mm 全长:235mm 颜色:蓝色 材料:PP 是否消毒:是 包装类型:热封袋C1623-0250EA6孔细胞培养板孔数:6 孔径:35mm 生长面积:9.61cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-0450EA24孔细胞培养板孔数:24 孔径:16mm 生长面积:1.91cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-0650EA96孔细胞培养板孔数:96 孔径:7mm 生长面积:0.35cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-1250EA6孔细胞培养板,TC处理孔数:6 孔径:35mm 生长面积:9.61cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C1623-1650EA12孔细胞培养板,TC处理孔数:12 孔径:22mm 生长面积:3.87cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C1623-1750EA12孔细胞培养板孔数:12 孔径:22mm 生长面积:3.87cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-1850EA24孔细胞培养板,TC处理孔数:24 孔径:16mm 生长面积:1.91cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C1623-1950EA96孔细胞培养板,TC处理孔数:96 孔径:7mm 生长面积:0.35cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C4219-0120EA细胞刮刀手柄长度:250mm 刀片长度:30mm 是否灭菌:是C4219-0220EA细胞刮刀手柄长度:250mm 刀片长度:30mm 是否灭菌:是C4219-0320EA细胞刮刀手柄长度:400mm 刀片长度:18mm 是否灭菌:是C4219-0420EA细胞刮刀手柄长度:400mm 刀片长度:30mm 是否灭菌:是C6057-0150EA细胞筛材质:尼龙网 颜色:蓝色 尺寸:40&mu m 是否灭菌:是C6057-0250EA细胞筛材质:尼龙网 颜色:白色 尺寸:70&mu m 是否灭菌:是C6057-0350EA细胞筛材质:尼龙网 颜色:黄色 尺寸:100&mu m 是否灭菌:是D3815-0110EA384孔深孔板,方形孔类型:普通型 材质:聚丙烯 容积:120&mu l 颜色:透明 底部形状:V型 是否灭菌:否D3815-0310EA384孔深孔板,方形孔类型:低吸附型 材质:聚丙烯 容积:120&mu l 颜色:透明 底部形状:V型 是否灭菌:否D3815-0510EA384孔深孔板,方形孔类型:普通型 材质:聚丙烯 容积:190&mu l 颜色:透明 底部形状:V型 是否灭菌:否L1557-01100EAL型涂布棒长度:156× 38mm 颜色:蓝色 材质:ABS 是否消毒:是 包装类型:纸塑袋M4939-011EA覆四氟涂层微量取样匙类型:海曼型 长度:150mmP4184-0160EA60mm细胞培养皿尺寸:60× 15mm 生长面积:26.17cm2 TC处理:否 灭菌:伽马 描述:普通型适合悬浮培养P4184-0260EA60mm细胞培养皿,TC处理尺寸:60× 15mm 生长面积:26.17cm2 TC处理:是 灭菌:伽马 描述:标准型适合贴壁培养P4184-0360EA100mm细胞培养皿尺寸:100× 20mm 生长面积:55.65cm2 TC处理:否 灭菌:伽马 描述:普通型适合悬浮培养P4184-0460EA100mm细胞培养皿,TC处理尺寸:100× 20mm 生长面积:55.65cm2 TC处理:是 灭菌:伽马 描述:标准型适合贴壁培养P4940-011EA外覆PTFE涂层取样匙,双平头类别:双平头,圆形平头和锥形平头 长度:200mm 刀片尺寸(最宽的部位):约44× 6mmP4941-011EA外覆PTFE涂层取样匙,平头和勺头类别:平头和勺头 长度:225mm 直径:4.7mmR1596-04500EAPP培养管,无边外径× 高:12× 75mm 容量:5ml 材质:PP 类型:无刻度 是否消毒:否 包装类型:热封袋R1596-05500EAPS培养管,无边外径× 高:13× 75mm 容量:5ml 材质:PS 类型:无刻度 是否消毒:否 包装类型:热封袋R1596-11250EAPS培养管,无边外径× 高:16× 100mm 容量:8ml 材质:PS 类型:无刻度 是否消毒:否 包装:热封袋T1558-01500EAT型细胞涂布棒,已灭菌长度:140mm 颜色:蓝色 材料:ABS 是否消毒:是 包装类型:纸塑袋D1554-011000EA普通型接种环类型:1&mu L环形 材料:软性PP 全长:200mm 环直径:30mm 颜色:蓝色 是否消毒:是 包装类型:纸塑袋更多产品请访问阿拉丁官网www.aladdin-e.com
    时间： 2016-01-15
    作者： 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
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盐酸硫胺细胞和昆虫细胞相关的仪器

  • EX-CELL® CD昆虫细胞培养基 400-622-8982
    EX-CELL CD昆虫细胞培养基是专门为各种昆虫细胞株（如Sf21, Sf9, Tni, C636, S2和Sf-RVNTM细胞）而开发的化学成分限定的培养基。该配方非动物来源且化学成分限定，不含任何水解物或未知组成成分。该培养基已含L-谷氨酰胺。EX-CELL CD昆虫细胞培养基可作为扩增培养基和生产培养基，应用于重组蛋白、疫苗和病毒载体的流加培养。该产品旨在用于研究或进一步生产，而不可用于人体或治疗用途。更多信息，e.g., 产品性能，制备说明，效期，订购信息等，可联系默克当地销售，也可参见本页面核心参数 - 样本下载中的资料手册。
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    厂商： 默克工艺解决方案
    品牌： 默克/Merck
    型号： 其他细胞平台 - EX-CELL&reg CD昆虫细胞培养基
    价格： 面议
  • Sf-RVN® 昆虫细胞株 400-622-8982
    Sf-RVN昆虫细胞株是一种弹状病毒阴性的Sf9细胞株，可以贴壁培养和悬浮培养中扩增。Sf-RVN昆虫细胞株已适应在化学成分限定的培养基中扩增，用于表达重组蛋白、腺相关病毒（AAV）和病毒样颗粒（VLP）。细胞株经过cGMP条件下的外源因子检测并储存。随附完整的可追溯性文档和使用技术指南，其中包含用于实现最佳性能的详细方案。推荐使用已经过优化的EX-CELL CD昆虫细胞培养基，可以让Sf-RVN昆虫细胞株获得出色的扩增和产率。结合起来，这两种产品组成了Sf-RVN平台。Sf-RVN昆虫细胞株仅用于研究目的。在临床或商业生产中使用该细胞株或任何衍生自该细胞株的产品之前，必须获得商业许可。请联系默克当地的销售以获取更多详细信息。Sf-RVN细胞以10×106 cell/mL的密度以1 mL体积装在冻存管中提供给客户。细胞储存在EX-CELL CD昆虫细胞培养基和10% DMSO中。特点和优势：- 杆状病毒阴性：缓解风险并增强生物安全性- 经过cGMP条件下的外源因子测试并储存于EX-CELL CD昆虫细胞培养基- 可用于监管备案的完整可追溯性文档- EX-CELL CD昆虫细胞培养基是一种经过优化的化学成分限定的培养基，可实现细胞株的出色扩增和生产率- 包含详细方案的使用者技术指南，以实现最佳性能也可联系MerckMillipore.com以进行其他cGMP测试和细胞存储服务。
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    厂商： 默克工艺解决方案
    品牌： 默克/Merck
    型号： 其他细胞平台 - Sf-RVN&reg 昆虫细胞株
    价格： 面议
  • Sf-RVN® 昆虫细胞株 400-622-8982
    Sf-RVN昆虫细胞株是一种弹状病毒阴性的Sf9细胞株，可以贴壁培养和悬浮培养中扩增。Sf-RVN昆虫细胞株已适应在化学成分限定的培养基中扩增，用于表达重组蛋白、腺相关病毒（AAV）和病毒样颗粒（VLP）。细胞株经过cGMP条件下的外源因子检测并储存。随附完整的可追溯性文档和使用技术指南，其中包含用于实现最佳性能的详细方案。推荐使用已经过优化的EX-CELL CD昆虫细胞培养基，可以让Sf-RVN昆虫细胞株获得出色的扩增和产率。结合起来，这两种产品组成了Sf-RVN平台。Sf-RVN昆虫细胞株仅用于研究目的。在临床或商业生产中使用该细胞株或任何衍生自该细胞株的产品之前，必须获得商业许可。请联系默克当地的销售以获取更多详细信息。Sf-RVN细胞以10×106 cell/mL的密度以1 mL体积装在冻存管中提供给客户。细胞储存在EX-CELL CD昆虫细胞培养基和10% DMSO中。特点和优势：- 杆状病毒阴性：缓解风险并增强生物安全性- 经过cGMP条件下的外源因子测试并储存于EX-CELL CD昆虫细胞培养基- 可用于监管备案的完整可追溯性文档- EX-CELL CD昆虫细胞培养基是一种经过优化的化学成分限定的培养基，可实现细胞株的出色扩增和生产率- 包含详细方案的使用者技术指南，以实现最佳性能也可联系MerckMillipore.com以进行其他cGMP测试和细胞存储服务。
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    厂商： 默克工艺解决方案
    品牌： 默克/Merck
    型号： 其他细胞平台 - Sf-RVN&reg 昆虫细胞株
    价格： 面议
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盐酸硫胺细胞和昆虫细胞相关的耗材

  • 昆虫细胞专用胎牛血清
    Hyclone是美国GE公司的细胞培养产品的品牌。Hyclone胎牛血清（Foetal bovine serun，FBS）原料是来源于澳大利亚，美国，加拿大和南美洲的高质量血源，即Hyclone胎牛血清南美，Hyclone胎牛血清澳洲，Hyclone胎牛血清北美。Hyclone公司拥有深厚的生产高标准血清的工业经验。为了获得高等级参数指标的胎牛血清，Hyclone采用了非常严格的质量控制体系。HycloneSH30070.03，昆虫细胞专用胎牛血清；美国源，Hyclone公司zui好的一款血清，新开学之际，素尔优惠多多，素尔拥有自己的进口渠道，严格控制渠道，提供原装品SH30070.03血清，美同达公司可批发供应，全国各地均可发货！产品名称：昆虫细胞专用胎牛血清货号：SH30070.03品牌：Hyclone公司级别：特级规格：500ML内毒素含量: ≤10 EU/ml血红蛋白含量: ≤10 mg/dl有效期：五年储存温度：-20°C运输温度：充足干冰运送库存状态：素尔现货素尔生物作为国内几大血清供应商之一，以每年5000-10000瓶的量为各大实验室提供性价比高、品质卓越的动物血清制品，主要客户群：高校生物实验室、中科院系统、制药企业、干细胞治疗等等，作用：细胞珠的保藏、胚胎细胞、细胞融合组织器官培养及单抗制备。HycloneSH30070.03，昆虫细胞专用胎牛血清，是比较高端产品之一，相对价格较高，等级也高，用来培养娇贵细胞、昆虫细胞、内皮细胞、干细胞等。
    供应商： 北京美同达科技有限公司
    品牌： Hyclone
    价格： 面议
  • 人 CYP2C8，含有氧化还原酶和细胞色素b5
    SupersomesCYP2C8+OR+b5 Hu该产品昆虫细胞重组表达酶。 CYP2C8参与一些药物底物的代谢。
    供应商： 康宁生命科学（吴江）有限公司
    品牌： 康宁
    价格： 面议
  • 欧罗拉自动化组织细胞DNA纯化系统试剂盒
    MagPure纯化技术介绍MagPure（磁珠法）纯化技术是专门为自动化核核酸提取设计的。该技术采用超顺磁性粒子为基质， 在其表面包被硅醇基或羧基基团，使得微粒与核酸发生特异性的吸附作用，从而达到纯化核酸的目的。 MagPure技术配合自动化核酸提取工作站，可将核酸分离纯化，从手工变成机械自动化操作，可大大 提高实验的准确度和通量，并减少操作人员接触危险样品的机会。血液等液体样品核酸提取系列MagPure Tissue DNA Kit (自动化组织细胞DNA纯化系统)采用磁珠法从培养细胞/固体组织样品中提取总DNAMagPure Tissue DNA Kit 采用磁珠法纯化技术，适用于从组织或细胞样品中提取高纯度的总DNA，得到的DNA可直接用于PCR、荧 光定量PCR、Southern杂交等实验。该产品可成功在VERSA 10，VERSA 1100，VERSA HT等设备上运用。MagPure Tissue DNA Kit 可从常规的动物组织中提取高达100μg的总DNA。MagPure Tissue DNA Kit II是专门为富含多糖类或色素的样品中提高纯度的DNA而 设计。MagPure Forensic DNA Kit专门用于微量且富含抑制因子的法医类样品中提取高纯度DNA。小鼠各种组织样品（10mg）经MagPure Tissue DNA Kit 提取后，取纯化的DNA测量，结果表明MagPure Tissue DNA Kit纯化的DNA纯度好，产量高12个长期放置的干燥昆虫样品(1-5mg)经MagPure Tissue DNA Kit II提取后，取10%纯化DNA上样于0.8%琼脂糖凝胶电泳分析的结果(左图)。 取纯化的DNA测量，结果表明（图右），MagPure Tissue DNA Kit II纯化的DNA无颜色，OD260/280为1.7-1.9, OD260/230为1.0-2.4可兼容液体处理系统VERSA 10 PCR/NAP 自动化核酸提取-PCR建立工作站VERSA HT 高通量自动化液体处理工作站VERSA 1100 NGLP 下一代测序工作组VERSA 1100 4ch Independent 独立四通道液体处理工作站VERSA 1100 PCR/NAP 自动化核酸提取-PCR建立工作站Aurora在核酸分离纯化领域拥有完整和先进的技术，MagPure试 剂盒为不同样品提供不同粒径或不同官能基团的磁性粒子，以达到 最佳的纯化效果。在满足产品精确性及可重现性的要求，实现高通 量自动化核酸纯化的同时 保证产品绝对的兼容性。
    供应商： 加拿大欧罗拉生物科技有限公司
    品牌： 欧罗拉
    价格： 面议
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