小鼠睾丸间质细胞瘤细胞

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  • 小鼠骨髓细胞数检测的仪器

    大神们,帮忙推荐台主要针对小鼠骨髓细胞数检测的仪器,再一个就是能对小鼠血细胞的种类分类,计数。要求不高。。但是这种针对性的仪器还这难找。。

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  • 《细胞》:2011年度五大研究发现

    1. 利用诱导性多功能干细胞构建出小鼠精子祖细胞日本京都大学研究人员通过体外诱导胚胎干细胞(ESCs)和诱导性多功能干细胞(iPSCs),形成原始生殖细胞样细胞(primordial germ cell-like cells, PGCLCs),最后进一步分化,通过体内植入不能生育的小鼠睾丸中,产生了外观正常的精子。将这些精子注射到雌性小鼠的卵细胞中,不久雌性小鼠生出了健康的小鼠后代。2. 鉴定出阿尔茨海默病Alzheimer's disease的生物标记美国研究人员利用一种一般性和无偏差的方法---组合文库筛选(Combinatorial Library Screening)来鉴定出诊断上有用的抗体,而避免进行抗原鉴定。该方法涉及利用非自然的合成分子组合文库对病人血清样品和对照样品进行比较性筛选,这样就可鉴定出病人血清样品中要比和对照样品中保留极其多IgG抗体的分子,随后利用这些分子作为捕获试剂来捕获诊断上有用的抗体。研究人员利用多发性硬化症(multiple sclerosis)小鼠模式动物和证实这种方法的实用性,并利用该方法在阿尔茨海默病小鼠模式动物中鉴定出两种候选的IgG抗体生物标记。3. 发现干细胞多能性的选择性剪接开关加拿大多伦多大学研究人员发现了进化上保守的特异的FOXP1选择性剪接开关,可调控干细胞的多能性。研究人员发现这种剪接开关产生的FOXP1胚胎干细胞特异性异构体,与典型的FOXP1异构体相比,着不同的DNA结合性质。选择性剪接事件改变了FOXP1胚胎干细胞特异性异构体的DNA结合性质,促进维持多能性所需的转录因子基因的表达,包括OCT4、NANOG、NR5A2和GDF3,同时抑制胚胎干细胞分化所需的基因。同时,研究小组还发现FOXP1胚胎干细胞特异性异构体促进体细胞高效重编程为诱导性多功能干细胞(iPSC)。4. 追踪神经胶质瘤的起源美国研究人员利用双标记嵌合分析(Mosaic Analysis with Double Markers,MADM)---该技术的精髓在于用绿色荧光蛋白明确标示突变细胞,还有一个关键特色就是无论一个突变的绿色细胞何时产生,总是同时产生一个正常的红色细胞---来分析神经胶质瘤(glioma)的起源。他们将胶质瘤病人体内发现的两种流行突变p53与NF1导入神经干细胞(neural stem cells, NSCs)中,对源自神经干细胞的所有细胞系所作的进一步分析清楚地显示了少突胶质前体细胞(Oligodendrocyte precursor cells,OPCs)是该肿瘤的来源细胞,因为任何可见的肿瘤标志可被检出之前,变异的绿色少突胶质前体细胞的数量大大超过了其正常的红色对应物数量,足足超了130倍。为了进一步证实这点,研究人员也将p53与NF1突变直接导入小鼠少突胶质前体细胞,结果发现这些小鼠产生神经胶质瘤,从而再次证实少突胶质前体细胞是神经胶质瘤的来源。5. 发现新的组蛋白修饰方式美国芝加哥大学Ben Mary癌症研究所研究人员在细胞中筛查出了67个新组蛋白修饰标记,并从中发现了一种新型组蛋白翻译后修饰方式---赖氨酸巴豆酰化(lysine crotonylation)修饰。通过进一步的结构及基因组定位分析,研究人员证实氨酸巴豆酰化修饰是一种进化高度保守,且在生物学功能上完全不同于组蛋白赖氨酸乙酰化的蛋白质修饰方式。研究人员还发现在人类体细胞和小鼠精子细胞基因组中,组蛋白赖氨酸巴豆酰化分布于基因活性转录启动区域或增强子上。在减数分裂后的精子细胞中,赖氨酸巴豆酰化高丰度集中在性染色体上,被用来标记睾丸特异性基因。

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  • 明美1250万像素高分辨率相机助力小鼠贴壁细胞观察
    近日,为了提高医院医疗水平,进一步规划和凝练医疗方向,深州市人民医院对小鼠细胞的观察效果提出了更高的要求。明美专业工程师经过详细的沟通了解,针对博士的特殊需求,为其推荐了明美生物倒置显微镜mi52搭配研究级1250万高像素显微数码相机msx2的组合方案,并免费提供专业的样机演示服务,展现了明美在显微成像领域的专业素养。此次项目中,博士需要观察的是小鼠细胞中的贴壁细胞,这种细胞在培养过程中,必须有可以贴附的支持物表面,其依靠自身分泌或培养基中的贴附因子才能在该表面生长增殖,因此,对观察使用的显微成像产品要求极高。通过明美专业工程师的多次沟通,以及产品推荐使用,最终选定使用明美生物倒置显微镜mi52搭配研究级显微数码相机msx2来进行观察研究。msx2是明美最新研发的1250万高像素科研级数字相机,采用1英寸大靶面高性能的成像芯片,设计usb3.0数据传输接口,具有高分辨率、颜色还原准确和高灵敏度的特点,其优秀的色彩表现,是液基细胞分析、免疫组化、骨髓细胞分析等对颜色要求高的病理诊断的理想工具。此外在明暗场、相衬、偏光、dic、荧光成像等领域同样表现出色。下图为使用明美生物倒置显微镜mi52与研究级显微数码相机msx2、ms60进行观察: 下图为明美生物倒置显微镜mi52与研究级显微数码相机ms60镜头下的小鼠细胞图片: 下图为明美生物倒置显微镜mi52与研究级显微数码相机msx2镜头下的小鼠细胞图片: 使用机型:明美生物倒置显微镜mi52 研究级显微数码相机msx2。
  • 小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法!
    小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法!海马体主要负责记忆和学习,日常生活中的短期记忆都储存在海马体中。神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元具有长突起,由细胞体和细胞突起构成。小鼠海马神经元细胞的组织来源于实验小鼠的正常脑组织,因为海马神经元细胞类似于干细胞属于高分度分化的细胞特性,具有不能传代,不能增殖等特点,所有收到细胞后尽快使用。为了更好的服务于广大科研工作者,百欧博伟生物技术人员特提供了海马神经元细胞分离培养方法,技术因人而异仅供参考:1、试验所需仪器设备及试剂(1)仪器生物安全柜CO2细胞培养箱荧光倒置显微镜高速冷冻离心机电热恒温鼓风干燥箱(2)试剂耗材T25细胞培养瓶血球计数板细胞培养孔板红细胞裂解液神经元完全培养基0.25%胰蛋白酶(含0.02%EDTA)多聚甲醛(PFA)DAPITriton X-100山羊血清NSEGoat anti-Rabbit lgG(H+L)Cross-Adsorbed Secondary antibody,Alexa Fluor 594Fluoromount-G荧光封片剂2、分离培养方法1) 取1-10 d的新生小鼠。用75%的乙醇浸泡,2) 在冰浴的PBS中分离海马,PBS洗涤3次,剪碎,3) 用0.25% Trypsin + 0.1% Ⅰ型胶原酶37℃水浴振荡消化30min,4) 用FBS终止消化,轻轻吹打,5) 过100 μm 滤网,6) 收集滤液,300 g离心5 min,7) 用完全培养基重悬沉淀,铺瓶。3、免疫荧光3.1.实验步骤(1)细胞爬片取3片玻璃片于24孔板中,每孔加入培养基1mL,加入细胞0.02million个/孔。置培养箱2h或过夜。(2)固定细胞爬片后,吸出培养基,用PBS洗1遍,加入4% PFA于4℃固定30min。用PBS洗3×5min/次。也可最后一次不吸出PBS,放4℃过夜。(3)破膜封闭将玻片除去水分,置于培养皿支撑物上,玻璃片封闭液配置:0.5% Trition X-100与PBS 1:1混合,再加10% 血清,取50uL破膜封闭液滴于防水膜上,将玻片上有细胞的一面盖上2h。(4)一抗孵育一抗配制:抗体与PBS 1:100(200)稀释破膜封闭后,取50uL一抗于防水膜上(湿盒中),将玻片(有细胞的一面)盖上置于4℃(最多可放置一周)(5)二抗孵育室温避光孵育二抗(二抗:PBS=1:500)2h后,PBS洗3×5min/次,染DAPI(DAPI:PBS=1:1000)5min,PBS洗3×5min/次。(6)包埋玻片上各滴1滴Fluoromount-G,将有细胞的一面盖上。鉴定细胞为P1代细胞3.2.检测结果(1)细胞免疫荧光鉴定照片阴性100X-DAPINSE100X-DAPI(2)检验基本情况:经免疫荧光鉴定,该细胞纯度达到90%以上。除了上述的细胞分离方法以外,百欧博伟还有很多关于其他细胞的分离方法,想要学习的小伙伴可以来百欧博伟进行现场学习,如果想要其他原代分离培养方法,可打电话或咨询相关技术人员哦。
  • Cell Research|邓宏魁/李程等课题组合作利用小鼠二细胞胚胎建立具有形成类囊胚能力的新型全能性干细胞
    2022年5月4日,北京大学生命科学学院、生命联合中心邓宏魁课题组与李程课题组、北京大学医学部基础医学院徐君课题组在Cell Research杂志上发表了题为“Derivation of totipotent-like stem cells with blastocyst-like structure forming potential”的研究论文。该研究通过化学小分子筛选组合,建立了一个新的全能性干细胞培养条件,可以支持从小鼠二细胞胚胎及扩展型多能干细胞(EPS细胞)建立全能性干细胞系。这种新型全能性干细胞可在体外长期稳定培养,在分子特征和发育潜能上与小鼠二细胞胚胎高度相似,并且可以在体外被诱导形成在转录组水平上类似于体内囊胚的类囊胚结构。从左到右分别是李程、邓宏魁和徐君(来源:北京大学官网)如何在体外制备全能性干细胞,长期以来一直是干细胞领域的重要科学问题。在小鼠中,只有受精卵及二细胞胚胎具有全能性:单个细胞能够形成一个完整生命个体。随后发育形成的囊胚细胞可以被用于建立多潜能干细胞,滋养层干细胞及原始内胚层干细胞。然而,这些干细胞的发育潜能是受限的,无法同时发育到胚内和胚外组织。近年的研究发现:在小鼠多能干细胞群中存在极少量的表达小鼠二细胞胚胎分子标记MERVL的细胞,被称为二细胞样细胞(2-cell like cells),具有二细胞胚胎的部分分子特征(1)。然而,这种细胞无法在体外进行稳定的培养。此外,最近的研究发现,二细胞样细胞与体内二细胞胚胎仍存在较大差异,作为体外研究全能性的模型仍存在较大局限性(2)。北京大学邓宏魁团队长期以来致力于采用化学小分子调控的手段来建立调控干细胞的发育潜能的新方法(3-6)。2017年邓宏魁团队报道了一个新的小分子组合(LCDM),可以在人和小鼠中建立扩展型多能干细胞(EPS细胞)(4)。EPS细胞具有胚内胚外发育潜能,并且可以被诱导形成类囊胚(Blastoid)结构(7)。然而,与小鼠二细胞胚胎相比,这种细胞的分子特征与二细胞胚胎还有较大差异,细胞的胚外分化潜能也存在局限性,诱导获得的类囊胚结构中存在较高比例的中间态和中胚层样细胞(8)。最近北京大学杜鹏团队、中山大学王继厂团队等报道了全能性干细胞的诱导条件(9-10)。当前,如何直接自小鼠全能性胚胎建立全能性干细胞,仍是全能性干细胞研究的“金标准”。在本研究中,团队通过化学小分子高通量筛选,鉴定了能够在EPS细胞中诱导提高MERVL及Zscan4阳性细胞比例的化学小分子。通过进一步的组合优化,发现了一个可以将EPS细胞诱导为全能性干细胞的小分子组合CD1530,VPA,EPZ004777,CHIR 99021 (CPEC组合),诱导获得的全能性干细胞能长期稳定地在体外培养。更为重要的是,CPEC组合可以在体外支持从小鼠二细胞胚胎直接建立全能性干细胞系。研究者将由CPEC组合支持建立的全能性干细胞命名为全能潜能干细胞(totipotent potential stem cells, TPS细胞)。研究者进一步从转录组、表观特征、嵌合能力等多个方面深入分析了TPS细胞的分子特征和发育潜能。他们发现TPS细胞在单细胞水平上表达大量的全能性特征基因,并且下调了多能性的分子标记。进一步的单细胞转录组分析发现,TPS细胞群中存在一个在转录组水平与中期二细胞胚胎高度相似的细胞亚群(约10%)。他们定量分析了TPS细胞、杜鹏团队报道的TBLC中的全能干细胞亚群、二细胞样细胞与二细胞胚胎的转录组相似度,发现TPS细胞中的全能干细胞亚群与二细胞胚胎的相似程度是最高的。ATAC-seq和全基因组甲基化分析也表明:TPS细胞具备了二细胞胚胎的表观修饰特征。在发育潜能分析方面,他们通过在不同发育阶段的单细胞嵌合实验证明了:单个TPS细胞具备了同时向胚内和胚外发育的能力。为了严格证明TPS细胞在体内的胚外发育潜能,他们对E17.5的嵌合胎盘进行了单细胞转录组分析,结果表明TPS来源的细胞可以分化形成多种胚外滋养层细胞类型。并且,他们发现tdTomato标记的TPS细胞与有GFP标记的受体胚胎形成的嵌合胎盘中,存在大量的tdTomato单阳性嵌合细胞,高表达滋养层细胞的分子标记,排除了由细胞融合导致的假阳性可能。这些结果表明了TPS细胞具备了与二细胞胚胎相似的分子特征和发育潜能。自组装形成类囊胚结构的能力是评估细胞全能性最为关键的功能性标准之一。研究者证明了通过调控早期胚胎发育的信号通路,可诱导TPS细胞高效形成类囊胚结构。单细胞转录组分析表明,TPS诱导的类囊胚结构中存在与小鼠E4.5囊胚中类似的上胚层、滋养外胚层、原始内胚层细胞,并且在转录组水平上高度相似。通过转录组数据的定量分析,研究者进一步比较了TPS-类囊胚结构中的滋养层细胞、小鼠滋养层干细胞/多能干细胞组合诱导类囊胚中的滋养层细胞,发现TPS-类囊胚结构中的滋养层细胞更类似于着床前囊胚中的小鼠滋养外胚层细胞。并且,不同于EPS细胞诱导的类囊胚结构,TPS-类囊胚结构中并不存在大量的中间态细胞及中胚层样细胞。将TPS来源的类囊胚结构植入体内后,可以诱导蜕膜化反应,但是仍无法像正常囊胚那样发育成个体,提示诱导类囊胚的方案仍需优化。最后,研究者分析了CPEC组合在TPS细胞中诱导和调控全能性的分子机制。他们发现抑制HDAC1/2和Dot1L的活性、以及特异激活RARγ通路,对TPS细胞的诱导和维持具有重要作用。有趣的是,当用CPEC组合的小分子联合处理小鼠二细胞胚胎时,他们发现这些小分子处理能在一定程度上帮助维持小鼠胚胎中的全能性分子标记的表达。这些结果表明HDAC1/2、Dot1L、RARγ通路的协同调控对于小鼠全能性调控的重要作用。综上所述,该研究利用化学调控的方法从小鼠二细胞胚胎中建立了新型的全能性干细胞,该细胞具有与二细胞胚胎相似的分子特征及双向发育潜能,能够形成与体内着床前囊胚更相似的类囊胚结构。这一工作不仅为体外研究全能性提供了更为合适和可靠的模型,而且朝着在不同哺乳动物物种中利用全能性胚胎捕捉、维持全能性干细胞的目标迈出了重要的一步。邓宏魁教授,李程研究员,徐君研究员是这一研究成果的共同通讯作者。北京大学徐亚星,赵晶薷,任奕璇,王旭阳和吕钰麟为该研究成果的第一作者。本工作获得了生命科学联合中心、国家重点研发计划项目、国家自然科学基金等支持。

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  • InvitrogenTM AttuneTM NxT,快速且不堵的流式细胞仪!突破传统流式50年技术瓶颈,创新的声波聚焦技术助力流式新发现!Invitrogen Attune NxT流式细胞仪是一款全新的台式流式细胞分析仪,采用创新的声波聚焦技术,在保证高精确度的同时可以10倍极速上样;仪器配置灵活,最高可达4激光14色,可满足各种实验方案和实验室预算要求。Attune NxT流式细胞仪具有以下优势:专利声波聚焦技术,实现极速精准上样;专业防堵塞,大细胞、粘细胞轻松上;稀有细胞超灵敏高通量分析,全血样本免洗免裂解;顶级平顶光斑激光器,无需调光路;配置可达4激光16参数,模块化设计,可现场升级;可配备自动化工作站,实现24小时无人值守上样。什么是声波聚焦?Attune NxT流式细胞仪采用超声波 (超过2 MHz) 和流体动力学双重聚焦模式,将样本细胞沿液流的中心轴汇聚成一条直线。声波聚焦基本不受进样速率的影响,这使细胞能够强聚焦于激光检测点,与样本-鞘液的比率无关,所以可以在极高的样本通量下实现高精度分析。此外,Attune NxT利用注射泵进样系统进行上样,无需绝对计数微球即可实现细胞绝对计数——可最大程度地降低成本,缩短样本制备时间。相比之下,采用单纯流体动力学聚焦的流式细胞仪最高进样速度受限,而且提高流速会增大样本核心流的宽度、细胞重合率升高,使得检测信号的CV值变大。稀释样本,但不影响数据质量裂解红细胞 (RBC) 会造成待测细胞的损失和损伤。极高的样本采集速率(高达1,000 μL/分钟)使得Attune NxT流式细胞仪能够提供免洗免裂解的实验方案,最大程度地避免细胞损失,简化样本制备过程。该特性尤其适用于那些浓度较低的样本,诸如海水、脑脊液 (CSF)、干细胞及细胞数量较少的稀释样本,这些样品分析的采集时间通常较长。采用Attune NxT流式细胞仪,即便是稀释样本,亦可快速采集,且不影响数据质量。可以对诸如小鼠血液和骨髓等难以采集的样本、细针抽吸样本或低细胞产量的样本直接进行荧光标记然后稀释上样,无需洗涤或进行红细胞裂解。在高样本采集速率下可轻松实现采集——您可在四分钟内运行至多4 mL样本。这种样本制备过程不会造成样本损失,且可对所有珍贵样本进行全面检测。快速检测稀有细胞少量细胞群体的分析需要多次采集才能获得准确且值得信赖的结果,这导致其采集时间较长。Attune NxT流式细胞仪的样本运行速率比其他流式细胞仪快10倍——高达1,000 μL/分钟,每次运行能采集2 x 107个细胞,可以快速且准确地检测稀有细胞,且不影响数据质量。在各种进样速率下保证同样的精度和灵敏度Attune NxT流式细胞仪可以在您需要时提供更高的灵敏度。即便是在1,000 μL/分钟的高进样速率下,您也可以维持精确的聚焦。声波聚焦提供的精确聚焦使研究人员能够获得更小的CV值,更好地检测弱荧光信号和背景,从而减少差异,改善信号分离效果 。最大程度地减小数据差异细胞周期分析是必须精确检测多个细胞群体之间的荧光强度差异的实例之一。采用Attune NxT流式细胞仪,不论样本进样速率如何变化,都可以最大程度地减小结果的差异。即使采用高流速上样,也可以获得相同的实验结果 。符合您的规格标准的软件Attune NxT软件采用直观且易于使用的界面,能提供强大的数据采集和分析功能。您可以方便地建立、自定义并保存实验供将来研究之用。自动进行补偿,并可根据补偿指南进行设置。分析软件为数据分析效率最大化设计,其对较大的数据组的刷新速度快 (高达2,000万次/样本),当您作出调整时,能够立即显示于数据曲线上。软件采用独特的工具简化了实验设置,包括利用滤光片配置管理器进行试剂选择。您可以从预置或定制试剂下拉菜单中选择试剂,根据仪器上的优化通道匹配适当的试剂,然后应用于曲线标志。服务与支持Attune NxT流式细胞仪可享受全球技术支持和服务项目。我们致力于提供个性化的服务,自从您向我们的销售代表购买Attune NxT仪器之日起,仪器可终生享受服务。Attune NxT流式细胞仪可享受一年的全面服务计划,包括:? 综合培训 (每台仪器2位用户)? 应用和分析支持? 全球技术服务? 预防性维护应用领域 ? 癌症 ? 免疫学? 侧群细胞分析 ? 人类间充质干细胞 ? 细胞周期分析 ? 细胞增殖 ? 免疫分型 ? 海洋样品分析 ? 微生物学? 植物研究 ? 磷酸化蛋白检测
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  • 多功能细胞电穿孔仪 400-860-5168转1674
    美国著名BTX是专业的细胞融合、多功能细胞电穿孔仪 的生产厂家。自从1983年起,苛求的科研工作者就已经把BTX多功能细胞电穿孔仪作为电融合、电穿孔等应用领域的首选仪器。ECM多功能细胞电穿孔仪在转基因的应用领域中得以广泛的应用,其无以伦比的高性能得到了全球同行的厚爱。BTX的多功能细胞电穿孔仪系列产品适用于动植物、细菌、酵母、哺乳动物、人类细胞(包括活体细胞)的转基因等操作,BTX还在网站建立了技术数据库,提供超过5000份的参考目录和600多份的protocols供科研工作者免费查阅。多功能细胞电穿孔仪应用举例&bull 动物细胞转染(系统:ECM630/830)对真核细胞的转染可以通过多种方法获得,例如磷酸钙沉淀、脂质体转染、病毒方法以及电穿孔。电穿孔已经被正式对传统的转染方法不灵的细胞有很好的效果,因此被选为最佳的分子传递系统。电穿孔的好处有可重复性、更高的效率、大量样本处理、无毒性以及容易使用(不需要孵育时间)。Lofin等人(1999)对NIH/3T3细胞进行电穿孔使mRNA进入,以研究细胞周期及细胞分化过程中mRNA对基因表达调节、控制。Bodwell等人(1999)在对COS-7细胞进行电穿孔是使用较长的脉冲时间后获得了较高水平的表达。Warner等人(1997)使用电穿孔方法成功转化了淋巴细胞。Incyte Genomics公司成功使用BTX电穿孔仪转染了ES细胞进行转基因小鼠的生产。BTX ECM399\630\830型仪器、电穿孔杯以及多种特用的电极都用于动物细胞转染用途。&bull 蛋白质电整合/电插入 (系统:ECM630/830)将蛋白质导入细胞以及将蛋白质插入至细胞膜中也可以通过电穿孔来实现。不光肽段,而且包括抗体的多种蛋白,也可以进行导入。Ushio-Fukai等人(1998)对电穿孔插入哺乳动物细胞中的外源蛋白进行了定量。对于这些用途可以使用多种BTX电极。&bull 植物细胞转化(系统:ECM630/830)对植物原生质(玉米、烟草等)及完整植物的电穿孔可以用于产生对农业/园艺有用的转基因作物。植物细胞转化的一个主要目的是对植物细胞进行稳定转化以产生具有优良品质及产量增加的作物。Lin等人(1997)优化了多种植物上用于GUS表达的电穿孔条件,结果显示完整植物细胞以及原生质都可以进行有效转化。Diaz等人(1994)针对小麦及燕麦的叶和根的原生质进行了相似的优化试验,证明了电穿孔对于植物工作的有效性。这些作者也比较了电穿孔与PEG的差别,结果发现电穿孔更有效、更有重复性、更经济。BTX是世界上体内转染用特殊电极的领先者。对于这些用途可以使用多种BTX电极,例如2针阵列、游标尺电极、以及Tweezertrodes。&bull 贴壁细胞的转染----ACT (系统:ECM630/830)除了对盛在普通样品杯的悬浮细胞进行电穿孔外,还可以对多种培养板上的贴壁细胞进行原位电穿孔。这样可以避免用胰酶消化细胞,有助于保持细胞的活性及细胞数目。Lewis等人(1999)使用培养皿电极将基因转染入人类及静脉内皮细胞。Paptis等人(1998)通过对长在导电载玻片的NIH/3T3细胞进行原位电穿孔研究信号转导。Teruel等人(1999)也对位于载玻片上的海马神经细胞转入DNA、RNA以及多种大分子。BTX为贴壁细胞的转染(ACT)提供了PP35-2、366、747、840及Epizap电极系统。请关注不久后为这些用途开发的新产品&bull 高通量筛检----HTS (系统:ECM630/830)高通量筛检及cDNA文库的建立,需要一次处理多个样本的能力。使用传统样品杯花费很大而且有时间限制。然而,96孔板里使用的电极对于这些类型的应用肯定有用。Hoffma-Tsay等人(1994)使用96孔共轴电极在植物融合实验中检测8种化学物质。Peterfy等人(1995)比较了多种类型的多孔电极,将DNA传递入COS-7细胞。Marrero等人(1997)使用多孔电极将抗体电导入血管平滑肌细胞,以诱导细胞增值。BTX目前提供747和840用于这样的用途,并且不断开发新的产品。体内基因导入(IVGD)(系统:ECM830)在体内基因转移的非病毒技术中,直接将质粒DNA注射进入肌肉内是简单、廉价及安全的。Aihara及Miyazaki(1998)第一次指出通过在肌肉内将DNA注射与电穿孔相结合,可以将表达增强100倍。Mir等人(1999)使用多种类型的电极将基因传递进入多种种属的骨骼肌(大鼠、小鼠、兔、猴)。他们的结果显示通过使用电穿孔以及DNA注射:(1)基因转移的效率大大增加了,只是表达增强2-4倍;(2)不同实验之间的差别缩小了,而这正是单独DNA注射的主要缺点;(3)表达持续时间很长(数月),这对于长期临床应用非常重要;(4)不同种属的不同的肌肉都有阳性的反应,说明广泛的可用性;(5)基因表达非常特异仅在局部,而周围组织则没有影响到。这种技术成功用于其他组织,例如肝、睾丸、以及皮肤。最近Vicat等人(1999)通过体内电穿孔仪将基因传递如小鼠脑组织。与被称为有力的脑组织基因转移的非病毒载体的pCMV-luc与PolyEthylenlmine联合的方法相比,电穿孔的效率要高50倍。Nishi等人证明使用电穿孔可以获得有效的神经胶质瘤基因转移。Nishi还显示对实体瘤进行电基因治疗后肿瘤生长阻滞了50-90%。Dean等人将基因电导入完整的肠系膜动脉获得了成功。电穿孔已经被证实确实是进行体基因/药物转移方面一项有前途的技术,有许多新奇的用途。BTX公司特制的2针阵列电极、Genetrodes、卡钳电极、Tweezertrodes提供将基因侵入性以及侵入性转移入组织的方法。卵内基因转移(IOGD) (系统:ECM830)Muramatsu等人(1997)比较了3种转染方法用于将外源基因转入早期鸡胚进行表达。他发现与脂质体转染及基因枪相比,电穿孔是最有效的方法。Takeuchi等人(1999)使用电穿孔技术将早期鸡胚转染了tbx5及tbx4基因,以确定肢芽的翅/腿标志。对于这种用途已经开发出特用的电极。Genetrodes、L形状针电极,被用于测定鸡胚及靶向组织的特定区域。许多研究人员已经转染了眼、心或者肢体组织,方便了发育生物学方法的进一步研究。刚上市的足控开关具有遥控功能,是ECM830可以在不需要手操作的情况下进行激活,这对于卵内、体内以及体外胚胎用途非常重要。体外胚胎基因转移(IVEGD)(系统:ECM830)Tasaki等人(1999)讨论了使用电穿孔在体外小鼠胚胎方面的运用。小鼠胚胎有柱状的结构而且有比家禽更多胚胎培养基操作需求。有可能对胚胎进行电穿孔用于异位表达研究。在小鼠中后脑部的基因表达已经被观察。这个技术也用在交配后9.5天小鼠胚胎,以研究Hu基因在神经分化中的功能。BTX为这些目的提供一种全新的电极:Genepaddles。&bull 胚胎操作/核移植/动物克隆 (系统:ECM2001/830)核移植是将细胞核从供体转入受体的过程。细胞核指导胚胎的发育,导致新生体安全出生。在这个过程中,电融合用于将供体细胞与受体卵细胞融合,并进一步激活细胞分裂,形成胚胎。Meng等人(1997)将核移植技术扩展至灵长类动物模型,克隆出恒河猴。技术的进步使研究人员能够从分裂球进展至更高分化的胚胎细胞以及静止的胚儿细胞,作为核的供应来源。胚胎产生的细胞在体外培养6-13代,然后在转入前使用血清饥饿的方法使细胞静止。如前文所述,Roble、Cibelli以及Stice是第一次在1998年报告使用非老化胚成纤维细胞作为核的供体进行核移植而产生绵羊克隆转基因牛的人。Ian Wilmut在1996年震惊了整个世界,他从成年乳腺的细胞产生出第一个动物克隆&mdash &mdash 多利。使用分化的成年细胞进行克隆的能力打开了核移植广泛运用的大门即基因治疗的令人激动的模式。最近的成功事例PPL Therapeutics公司从成年体细胞克隆出猪。对于这些用途可以使用多种细胞融合样品池及微型载玻片。
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  • 单细胞悬液制备系统 400-860-5168转2623
    主要用途及功能:无酶、无污染条件下,全自动、快速柔和、省时、标准化、便捷、的从新鲜或者冰冻的组织(淋巴、脾脏,肝脏,肺,肾,肿瘤,结肠、睾丸、卵巢、脑神经组织、骨头、FFPE等)中获得单细胞悬液,也可将组织块制备成匀浆(如蛋白提取,核酸提取)。该产品的优势:1、处理温和:一次性分离管,独特的转子、定子及鳍状磨齿结构设计,间距100μm,减少了对样本损伤,提高了细胞活性,获得了更高的细胞产量。2、多功能性:可获得高活性单细胞悬液和具有亚细胞物质的组织匀浆。用于细胞分选,分析或者培养。也可以用于分离亚细胞物质(如蛋白,核酸等)。3、过程无菌化:能保证在无菌条件下,在封闭系统中安全地处理样品。4、全自动化标准化:自动标准化编写存储程序,支持自定义设置时间,速度等参数,标准化流程操作,减少人为操作误差,使结果有高度可重复性。5、处理样本量大:一次可以运行4个不同组织和样本。6、处理样本种类范围广:能够处理除骨和软骨之外大部分的组织和样本,如FFPE等特殊样本亦可处理。7、快速:2-3分钟即可完成单细胞悬液制备。????8、样本容量灵活:标本大小10-300mg。9、单细胞质量高:细胞得率65%-90%,细胞活性90%以上。
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  • 瑞沃德大容量细胞分选柱
    一、产品简介瑞沃德细胞分选柱,搭配细胞分选试剂盒分选后可直接进行细胞培养、流式检测、单细胞测序等各种下游实验。高活率,高纯度;低刺激,低残留二、订购信息货号名称规格容量HCSC-25细胞分选柱 LarSep Columns(25个/盒)25pcs/box/LSC-S1细胞分选磁极(单通道)1pcs/SS01分选支架1pcs/CSAK-01细胞分选组件套装(单通道)1set包含分选柱1盒(25pcs),分选支架1pcs,分选磁极(单通道)1pcsK1301-10小鼠CD3+细胞分选试剂盒1ml*2for 1*10^9 total cellsK1302-10小鼠CD4+细胞分选试剂盒1ml*2for 1*10^9 total cellsK1303-10小鼠CD8+细胞分选试剂盒1ml*2for 1*10^9 total cellsK1201-10人CD3+细胞分选试剂盒 1ml*2for 1*10^9 total cellsK1202-10人CD4+细胞分选试剂盒1ml*2for 1*10^9 total cellsK1203-10人CD8+细胞分选试剂盒1ml*2for 1*10^9 total cells
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  • Kugelmeiers 3D 细胞培养板-细胞球体类器官培养
    Kugelmeiers 3D 细胞培养板一、Kugelmeiers公司介绍Kugelmeiers Ltd. 成立于 2015 年,是瑞士苏黎世大学的衍生公司。公司起源于苏黎世大学医院用于治疗糖尿病的人胰岛细胞移植临床项目。其业务是将对细胞生物学现实的新见解转化为适合 3D 细胞培养和细胞移植的产品。该公司在细胞移植、3D细胞培养和干细胞生物学方面的专业知识满足了日益增长的市场需求。Sphericalplate 5D细胞培养板可以在每个板上形成多达9000个细胞球状体,从而以可重复且对细胞友好的方式,实现了球状体的高通量开发二、 产品介绍- Sphericalplate 5D 细胞培养板Sphericalplate 5D 细胞培养板可以大规模生成均匀、尺寸可控和标准化的球状体。安全"是细胞培养平台 Sphericalplate 5D 的原则。它具有独特的功能以支持细胞球状体的均一性、活性和可放大性。我们的独特几何形状和表面使细胞聚集成球状体, 让您对细胞培养拥有控制能力。Sphericalplate 5D 型号分为:24孔3D细胞培养板,6孔3D细胞培养板1. Sphericalplate 5D 6孔3D细胞培养板Sphericalplates 5D® 用于3D 细胞培养的培养板,6孔培养板是无菌,一次性使用,为形成大小一致的球形细胞聚集体提供培养环境,每个孔有3364个微孔,6孔培养板共有20184 微孔。孔板的材质是COC, 每个孔的工作体积是2-4ml, 总体积是14mL。2. Sphericalplate 5D 24孔3D细胞培养板Sphericalplate 5D 24孔3D细胞培养板含有9000 微孔。Sphericalplate 5D细胞培养板的产品特点:&bull 是易于使用的细胞球状体形成平台&bull 可以实现标准化和大小一致的球形体&bull 易于升级,不会降低球状体的质量&bull 1个6孔Sphericalplate 5D 细胞培养板=20184个球状体Sphericalplate 5D细胞培养板的优势:&bull 形成大小一致均匀,标准化的球状体&bull 预涂层,无表面附着物&bull 可放大生产大量球形体,用于实现高通量成像/筛选/分析(例如,蛋白质组学/基因组学/代谢组学)&bull 适合对病人细胞进行个性化诊断或个性化研究细胞&bull 方便用于在同一板孔内的多个球形体上测试不同的化合物 &bull 与现有的标准成像和自动化技术/设备/系统兼容-尤其是球状体处于微孔内中心位置&bull 可进行长时间或短时间培养以生成足够的球状体&bull 可从癌症球体内收集分泌物组三、Sphericalplate 5D 细胞培养板的应用Sphericalplate 5D (SP5D) 是一种 3D 细胞培养板,用于形成高质量和高产量的均匀、大小可控的球状体。它还可以方便扩大规模并进一步扩展到转化研究或诊断。在开发SP5D时,目标是通过培养标准化球体来创造一个模拟生理条件的环境,该球体可以在没有外部干扰信号的情况下进行细胞间通信。同时,它提高了后续测试的可重复性,因为由于培养的细胞球体的尺寸差异较小,因此您始终以相同的初始条件开始实验。自动化性和可放大性是Sphericalplate 5D 的关键特征,这在未来的治疗应用中也至关重要。SP5D 采用获得专利的金字塔几何形状和微孔设计,具有明确的角度、圆润的底部和锐利的边框。这允许在孔底部形成具有预测尺寸且高度规则的球状体。这些设计特征的结合有利于生物保真度和细胞间通讯。此外,特定的几何形状使球体居中,并支持球体在孔内位置的可预测性。使用即用型 SP5D 特别人性化,您将很快熟悉新平台的操作:接种细胞后,培养不需要任何预处理或离心步骤。通过简单的移液,更换培养基也特别方便,微孔的高度被设计为可以保留细胞球状体。SP5D中成功培养的细胞包括:人类胚胎干细胞人乳腺癌细胞系(BT20、MCF-7)小鼠胚胎干细胞系(HM-1)人前列腺癌细胞系(LNCaP)人间充质基质细胞人肺癌细胞系 (A549)原代胰岛细胞(人、猪、啮齿动物)人骨肉瘤细胞系(Saos-2)β细胞系(EndoC-βH1、MIN-6)人肾上腺癌细胞系肝内胆管细胞类器官 (ICO)人卵巢癌细胞系(OVCAR-3、OAW-42、SK-OV-3)人羊膜上皮细胞 (hAEC)人肝癌细胞系(HepG2)原发性平滑肌细胞人肝细胞 (HepaRG)人脐静脉内皮细胞系(huVEC)人白种人胎肺细胞系(WI-38)小鼠3T3成纤维细胞系人胶质母细胞瘤细胞系Sphericalplate 5D应用领域包括:3D 细胞培养,癌症球状体研究,药物筛选,组织工程,再生医学,3D 生物打印,诊断,个性化医疗,3D 干细胞培养等

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