罂粟碱残留量

火锅酱料中罂粟碱残留量检测的固相萃取方法一、实验目的本研究利用固相萃取法作为火锅酱料中罂粟碱残留量检测的前处理方法，LC-MS/MS作为检测手段。该方法可简化火锅酱料样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。二、实验目标物五种罂粟碱标准品：吗啡(CAS:57-27-2)，可待因(CAS:76-57-3)，蒂巴因(CAS:115-37-7)，罂粟碱(CAS:58-74-2)，那可丁(CAS:912-60-7)。三、应用范围本方法适用于火锅酱料、汤料、调味油和固体类调味粉等火锅食品中罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因的LC-MS/MS检测及确证。四、参考标准上海市地方标准《DB31/2010-2012火锅食品中罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因的测定液相色谱-串联质谱法》。五、实验材料Biocomma Polybase MCX固相萃取柱3mL/60mg。六、实验方法1、样品提取称取2g试样(精确至0.01ｇ)于50mL离心管中，加5mL水，振摇至均匀分散，加入15mL乙腈，涡旋振荡1min，加入6g无水硫酸镁和1.5g无水醋酸钠的混合粉末，振荡2min，4000r/min离心10min，上清液待净化。2、SPE柱净化(1)活化：向MCX复合柱小柱中依次加入5mL甲醇、5mL 0.1M盐酸活化。(2)上样和洗脱：将上述上清液过柱，依次用5mL水、5mL甲醇水(1+1)淋洗，负压抽真空10min，最后用4mL甲醇氨(4%)洗脱。(3)浓缩定容：收集洗脱液，氮吹至近干，用乙腈定容至2mL，过0.22μm滤膜，供液相色谱-质谱分析。3、LC-MS/MS条件色谱柱：XR-ODSⅢC18（2.1×150mm，2.2μm，100Å）；质谱仪：API 4000流动相：A:乙腈（0.1%甲酸）；B:0.1%甲酸水http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507151702_555659_3310_3.jpg柱温：35℃进样体积:5 μL离子源：电喷雾（ESI），正离子模式检测方式：多反应监测（MRM）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507151703_555660_3310_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507151703_555661_3310_3.jpg七、实验结果1、火锅酱料基质25μg/kg加标回收结果三个平行测试样的平均回收率大于80%，平行样间相对标准偏差均小于10%，符合标准要求。（见表4）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507151707_555663_3310_3.jpg2、空白样品添加罂粟碱等残留物质谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507151708_555664_3310_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507151708_555666_3310_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507151709_555667_3310_3.jpg 本研究是逗点生物利用固相萃取法作为火锅酱料中罂粟碱残留量检测的前处理方法，以上海市地方标准《DB31/2010-2012火锅食品中罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因的测定液相色谱-串联质谱法》制定，适用于火锅酱料、汤料、调味油和固体类调味粉等火锅食品中罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因的LC-MS/MS检测及确证。