当前位置: 仪器信息网 > 行业主题 > >

核酸光标记系统

仪器信息网核酸光标记系统专题为您提供2024年最新核酸光标记系统价格报价、厂家品牌的相关信息， 包括核酸光标记系统参数、型号等，不管是国产，还是进口品牌的核酸光标记系统您都可以在这里找到。 除此之外，仪器信息网还免费为您整合核酸光标记系统相关的耗材配件、试剂标物，还有核酸光标记系统相关的最新资讯、资料，以及核酸光标记系统相关的解决方案。

核酸光标记系统相关的论坛

  • PhAST Blue核酸光标记系统

    PhAST Blue核酸光标记系统

    [img=,305,240]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707031505_01_3194653_3.jpg[/img]PhAST Blue核酸光标记系统1. PhAST Blue专利技术,通过光活化DNA染料使死亡组织的DNA无效化。经过该系统处理的样本，在进行常规PCR和实时定量PCR时，将只有活细胞的DNA被扩增（EMA结合PCR技术）。2.PhAST系统是针对光敏剂而出现的一款实验设备。光敏剂的应用领域，就是PhAST系统的应用领域。PhAST将和光敏剂的发展紧密联系，不可分割。3. 小巧，便携，非常可靠，并且与PDT的激光相比更便宜。 4. 通过恒定且均匀的光照来保持热稳定。5. 简单高效，可同时进行12个样本的光活化。6.根据要求的特异性波长精度： 《±3%污泥沉降高度（相对测量范围）圆柱容器容积： - 1000mi(柱状）影像格式： - 1/3" CCD SharP高分辨率有效像素（图像）： - NTSC: 768(-)X494(V)，高解析度，480TVLines运行中读写： 线上SVI仪表软件，选用Windows2000,XP,VISTAPC规格： Windows XP，SSD影碟32GB,内存1GB；10.4"SXGA TFTVGA彩色显示屏接口规格： RS-232交换网路： RTL8100B 10/100Mbps（标准接口）安装环境： 温度0 - 45℃，相对湿度95%尺寸/重量： 600X1800X650mm(长X宽X高），80Kg电源： AC220V,50/60Hz功率 ： Max135W,AC220V,620mA

  • 荧光标记-荧光标记多肽

    荧光标记-荧光标记多肽

    5(6)-FAM，FITC，CY5，RhodamineB，PNA，EDNAS/dabcyl等荧光标记修饰的多肽：荧光标记修饰多肽技术是我们国肽生物的代表性多肽合成技术，我们的这项技术已经相当成熟。[img=,488,412]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904191652029467_5266_3531468_3.jpg!w488x412.jpg[/img]我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：17718122172；17718122684；17730030476；17718122397

  • 荧光标记抗体：原理、应用与进展

    [b][font=宋体]一、引言[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是生物学和医学领域中常用的可视化技术，其中荧光标记抗体凭借其独特的应用优势，在许多研究方向中发挥了重要作用。本文将详细介绍荧光标记抗体的原理、应用及最新进展。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、荧光标记抗体的原理[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是一种利用荧光物质对目标进行标记，通过特定波长的光激发后发出荧光，从而实现可视化检测的方法。荧光标记抗体则是将荧光物质与特异性抗体结合，形成荧光标记抗体，用于对目标抗原进行特异性结合和荧光标记。常见的荧光物质有荧光素、量子点、上转换纳米颗粒等。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]三、荧光标记抗体的应用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫分析：荧光标记抗体在免疫分析中具有广泛的应用，如酶联免疫吸附试验（[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]）、流式细胞术、免疫荧光染色等。通过荧光标记抗体与抗原的特异性结合，可以实现对目标抗原的高灵敏度、高特异性检测。例如，利用荧光标记抗体检测肿瘤标志物，有助于肿瘤的早期诊断和治疗监测。[/font][/font][font=宋体]细胞成像：荧光标记抗体在细胞成像中具有重要作用，可以用于观察细胞内特定抗原的表达情况，了解细胞的功能和行为。例如，利用荧光标记抗体对细胞膜抗原进行标记，可以观察细胞迁移、侵袭等行为。[/font][font=宋体]组织切片染色：荧光标记抗体也可用于组织切片染色，对病理组织中的特定抗原进行标记，有助于病理诊断和组织学研究。例如，利用荧光标记抗体对肿瘤组织进行染色，有助于肿瘤类型的鉴别和恶性程度的评估。[/font][font=宋体]药物筛选：荧光标记抗体在药物筛选中具有重要应用，可以用于药物作用靶点的检测和药物作用机制的研究。例如，利用荧光标记抗体对药物作用靶点进行标记，可以观察药物对靶点的影响，评估药物的疗效和安全性。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]四、展望[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]随着荧光标记技术的不断发展，荧光标记抗体在灵敏度、特异性和可视化效果等方面得到了显著提升。同时，新型荧光物质的开发和制备也为荧光标记抗体的应用提供了更多选择。未来，随着荧光标记技术的进一步优化和多色荧光标记技术的发展，荧光标记抗体将在更多领域发挥重要作用，为生物学、医学和其他相关领域的研究提供有力支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光检测服务[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 荧光标记技术

    荧光标记技术

    荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染，操作简便等优点，使得荧光标记物在许多研究领域的应用日趋广泛。荧光标记物质在蛋白的功能研究、药物筛选等领域也有着广泛的应用。人们利用利用荧光标记的多肽来检测目标蛋白的活性，并将其发展的高通量活性筛选方法应用于疾病治疗靶点蛋白的药物筛选和药物开发（例如，各种激酶、磷酸酶、肽酶等）。因此，多肽的荧光修饰，同样是多肽合成领域的重要内容。下面是一些常用的多肽修饰荧光物质：[align=center][img=,488,412]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812201531359566_2467_3531468_3.jpg!w488x412.jpg[/img][/align]下面是一些荧光物质的激发光波长和发射光波长[align=center][img=,572,527]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812201531560487_1473_3531468_3.jpg!w572x527.jpg[/img][img=,572,296]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812201531563837_2721_3531468_3.jpg!w572x296.jpg[/img][/align]1.FITC修饰异硫氰酸荧光素（FITC）具有比较高的活性，通常来说，在固相合成过程中引入该种荧光基团相对于其他荧光素要更容易，并且反应过程中不需要加入活化试剂。我们公司合成的FITC修饰的多肽通常主要有两种形式：（1）在整条肽链末端接入FITC，并且在FITC之前接入一分子的Acp（6-氨基己酸），也称烷基间隔器。反应中FITC与肽链上裸露的-NH2反应，Acp的接入提供了六个碳的直链空间，大大降低了反应的空间位阻，提高了反应效率，降低了反应难度。其次，FITC还与多肽结构中的-SH，侧链-NH2反应，Acp的加入也降低了这种副反应发生的可能。此外，多肽在酸性环境条件下切割时，在N端接入FITC的多肽需要经历环化作用来形成荧光素，这种过程通常都会伴随最后一个氨基酸的切除，而烷基间隔器Acp的接入就避免了这一情况的发生。（2）在整条肽中的某个Lys侧链接入FITC，Lys侧链为末端为-NH2的四碳直链烷基，直接起到了降低空间位阻的作用。这种修饰方式能够灵活的在整条肽中任何位置进行FITC修饰，而不仅仅局限于末端。我们所采用的FITC修饰多肽的两种形式，都具有操作简便，成功率高，容易分离纯化等优点。[align=center][img=,670,486]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812201532383561_827_3531468_3.jpg!w670x486.jpg[/img][/align]2.AMC修饰7-氨基-4-甲基香豆素（AMC）是一种应用广泛的荧光标记试剂，例如，酶的痕量测定，酶的鉴定，激光染料的制备等多种用途，此外，C端用香豆素修饰的泛素分子也是研究蛋白质泛素化过程的重要探针。与其他荧光染料不同的是，AMC修饰多肽分子是从C端进行：（1）AMC与肽链C端第一个氨基酸反应 （2）固相合成整条肽链（从第二个氨基酸开始），并且保留整条肽链的侧链保护基和最后一个氨基保护基；（3）液相缩合AA-AMC与全保护的肽链；（4）切除保护基，完成肽链的修饰。[align=center][img=,514,326]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812201533275550_1867_3531468_3.jpg!w514x326.jpg[/img][/align]国肽生物提供5(6)-FAM，FITC，CY5，RhodamineB，PNA，EDNAS/dabcyl，Biotin等各种修饰的高质量多肽。国肽生物具有成熟的荧光标记多肽技术，优良的纯化生产工艺，定制荧光修饰的多肽，国肽生物是值得信任的品牌。成功案例：序列Cy5-betaA-YNDEDPEKEKRIKELELLLMSTENELKGQQAL，CY5进行修饰。HPLC分析：[align=center][img=,562,256]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812201534177890_6619_3531468_3.jpg!w562x256.jpg[/img][/align]MS分析：[align=center][img=,562,236]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812201534424203_4797_3531468_3.jpg!w562x236.jpg[/img][/align]合肥国肽生物官网[img=,220,52]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812201535194030_1002_3531468_3.jpg!w220x52.jpg[/img]

  • 【资料】荧光标记染料

    [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=154966]荧光标记染料[/url]

  • 【实战宝典】荧光定量PCR几种不同荧光标记有哪些，有什么区别？

    问题描述：荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]几种不同荧光标记有哪些，有什么区别？解答：[align=left][font=宋体][color=black]荧光定量[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/color][/font][font=宋体][color=black]的荧光标记主要有特异性和非特异性两类。非特异性荧光标记主要包括：[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]SYBR Green I[/color][/font][font=宋体][color=black]，[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]SuperGreen[/color][/font][font=宋体][color=black]；特异性荧光标记主要包括：水解探针（[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]TaqMan[/color][/font][font=宋体][color=black]探针）、杂交探针（[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]hybridization probe[/color][/font][font=宋体][color=black]）、分子信标。[/color][/font][/align][align=left][font='Times New Roman','serif'][color=black]SYBR Green [/color][/font][font=宋体][color=black]，对[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]DNA[/color][/font][font=宋体][color=black]模板没有选择性，适用于任何[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]DNA[/color][/font][font=宋体][color=black]使用方便、灵敏、便宜，不必设计复杂探针，但容易与非特异性双链[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]DNA[/color][/font][font=宋体][color=black]结合，产生假阳性，对引物特异性要求较高。[/color][/font][/align][align=left][font='Times New Roman','serif'][color=black]TaqMan[/color][/font][font=宋体][color=black]探针法，对目标序列的高特异性设计不同标记的探针，可进行多重检测，结果的重复性较好，但只适合一个特定的目标，价格相对较高，探针的设计较为繁琐。[/color][/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

  • 【求助】LIF检测核酸时，用什么染料较好，且毒性较小、不累积

    核酸用LIF检测，激发波长在488nm。我检测的核酸，自身没有荧光标记，需要衍生。但是一般，荧光染料毒性都很大，譬如EB。那针对这样的情况，是否有相对比较安全的标记物，来对核酸进行标记。面对“身体是革命的本钱”，实在是不敢贸然选用毒性超大的标记物。期待帮助！

  • 荧光标记DNA探针在细胞核混悬液杂交中的应用

    （1）细胞核的分离： 将培养的细胞制成细胞混悬液，或以胰蛋白酶消化法于培养盖上收集培养细胞。应用MgSO4染色分离方法分离细胞核（Van den Engh et al 1986, 在Traok和Van Den Engh 34章　）。细胞混悬液浓度为5×106/ml。利用RNA酶消化后，使核从细胞分离，细胞核混悬液浓度为4～5×106细胞核/ml。（2）细胞固定和酸的处理：在5 ml试管内加冷的100%酒精不断旋转以达到满意的固定。在冰上停留10 min。在4 ℃离心（×150 g）10 min。重复加三次冷的100%酒精入试管内，离心，倾去。置于冰上10 min，再离心。然后加入相当核悬液1/2量的0.1 n HCl , 0.5% Triton X-100。室温停留10 min。加入IBM-0.25%Triton X-100（IBM配方：50 mmol/l KCl, 10 mmol/L MgSO4, 5 mmol/L HEPES pH8.0）。再离心，重复IBM漂洗（这时细胞核可在不染色情况下，以荧光显微镜观察）后，以2×SSC-0.1%Tween漂洗1×3min，继之加入等量2%的多聚甲醛在1×PBS-5 mmol/l MgSO4。在室温静置站立10min。倾去上清液，加IBm -Triton X-100漂洗，离心，使细胞核混悬液最终浓度为108/ml，（可用IBM-Triton X-100稀释约50倍，在血球计数器计数），混悬液镜检应含单个，完整的细胞核。（3）细胞核混悬液杂交①配制杂交混合液：甲酰胺5份，20×SSC1份，50%硫酸葡聚糖2份，pH调至7.0。此原液（stock solution）可贮存在4 ℃冰箱内。应用时加1份10 mg/ml鲱鱼精子DNA（herring sperm DNA）。②混合1 μl的细胞核混悬液（108/ml）与18μl的杂交混合液，充分混匀。将此19 μl混合液移入1.5 ml容积的Eppendorf 管中（核含量约为105）。③加入100 ng/每管的AAF标记DNA探针（如为生物素标记DNA探针浓度为20～40 ng/每管）。④置70 ℃10min使DNA探针和核DNA变性。⑤和组织切片与DNA探针杂交方法相较，不同的是在加热变性后切勿置冰上迅速冷却以终止反应，而应迅速转入37 ℃孵育过夜。（4）杂交后漂洗在每管中加入1.25 ml 50%甲酰胺-2×SSC（pH7.0），在42 ℃静置10～15min。偶尔旋转以助混匀。冷却至室温。加100 μl经dimethylsuberimidate(DEMS)处理的血细胞（107/ml）混匀，离心，室温，10min，轻弹试管使沉淀的小块散开，加入1.25 ml 2×SSC(pH7.0)，42 ℃，继之，静置于室温10～15min，如前离心，再加1.25 ml IBM-Triton X-100,室温静置5min，离心。注：DEMS处理红细胞方法：经漂洗并离心去除白细胞和血清的红细胞在盐液如PBS中，细胞含量为108/ml，以K2CO3和DEMS溶液处理3次，第1次：K2CO3为20 mmol/L,DEMS为3 mmol/L，以后2次：K2CO3依然为20 mmol/L，而DEMS为10 mmol/L。在应用前将K2CO3和DEMS液混合加入红细胞混悬液中。在最后2次漂洗液中，应用100 mmol/l K2CO3将pH调至9～10。在25 ℃，15min后，加入50 μl，100 mmol/l 的柠檬酸（citric acid）/每ml细胞混悬液的浓度以达固定红细胞的目的。固定的红细胞离心倾去上清液后，用2×SSC稀释到108/ml，加0.1%叠氮钠可在4 ℃保存至少1年。（5）AFF标记的荧光显示：加200 μl的PBS含0.05%Tween和2%正常血清（NGS），轻轻振荡混匀，室温静置10min，加20 μl 1：100的单克隆抗AFF抗体，37 ℃孵育45min，加1.25 ml的PBS-Tween，室温静置10min，加20间歇性振荡，离心，倾去上清液，加200 μlPBS含0.05%Tween –2%NGS,振荡，室温静置10min，加20 μl的羊抗小鼠–FITC荧光标记抗血清，稀释度1：100～1：300。孵育于37 ℃ 45min，加1.25 ml PBS –Tween,室温静置10min，离心，倾去上清液。（6）生物素标记探针的荧光显示：加200 μl 4×SSC含0.1%Trion X-100 和5%BSA。室温静置10 min后，加20 μl抗生物素标记FITC抗血清15 μg/ml，孵育在37 ℃ 30min，以1.5 ml 4×SSc –0.1% Trion X-100洗1次，加入1.25 ml IBm –Triton X-100,室温静置10～15min，间歇振荡、离心。（7）荧光显微镜观察：将细胞核混悬液稀释于250 μl的IBM-Trion X-100中，轻加振荡混匀。为抗荧光褪色可加等量的抗褪色溶液至载片上的细胞核涂片上，选择适当的激发波长观察。（8）流式细胞计：将750 μl的细胞核混悬液通过流式细胞仪（Flow cytometry, FCM），DEMS处理过的红细胞作为对照（Df 530/30nm, Omega ·Optical Inc, Brattleboro, VT）。

  • qPCR定量分析原理及荧光标记方法有哪些？

    [font=宋体][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]常常被用来对[/font][font=Calibri]RNA-seq[/font][font=宋体]或芯片测序得到的有意义的基因表达情况进行准确的定量分析，本文主要从[/font][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]的原理、定量方法等方面进行讲解。[/font][/font][font=宋体] [/font][table][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]区别[/font][/b][/align][/td][td][align=center][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]荧光定量[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][/font][/b][/align][/td][td][align=center][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]常规[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][/font][/b][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]检测时间[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑][font=微软雅黑]实时[/font][font=微软雅黑]+终点[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]终点[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]检测信号[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]荧光染料或者探针[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]核酸染料[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]准确度[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]定量[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]半定量[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]是否能检测终点产物[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]能[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]能[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]是否能计算起始浓度[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]能[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]否[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]仪器要求[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑][font=微软雅黑]荧光定量[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑][font=微软雅黑]常规[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪[/font][/font][/align][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]一、[/font][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]定量原理[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]，即实时荧光定量[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]，就是通过对[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增反应每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板的定量分析。因为在[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增的指数时期，模板的[/font][font=Calibri]Ct [/font][font=宋体]值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以可以定量。（[/font][font=Calibri]Ct [/font][font=宋体]值：每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数 [/font][font=Calibri](cycle)[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]Ct [/font][font=宋体]值越小，反应扩增到达平台期所需循环数越少，目的基因起始含量越高）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]的荧光标记方法分为以[/font][font=Calibri]SYBR Green I[/font][font=宋体]染料法为主的荧光染料嵌合法，以[/font][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针法为主的荧光探针法（[/font][font=Calibri]Cycling Probe[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]Molecular Bracon[/font][font=宋体]等），淬灭染料引物法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]SYBR Green I[/font][font=宋体]染料法[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]是高灵敏度的非特异性双链[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]荧光染料，具有绿色激发波长。它以非特异性方式结合在[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]双螺旋小沟区域。游离的[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]只发出微弱的荧光信号，[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]过程中，当扩增生成[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]时，[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]逐渐与[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]结合，荧光信号被千倍放大，荧光信号的强度与扩增得到的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度成正比。荧光信号被仪器检测并采集得到“扩增曲线”，通过荧光信号的强度反映出体系中[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]但[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]与特异性扩增产物结合时还可以同引物二聚体、非特异性扩增的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]结合，影响结果判断。所以扩增反应结束后，还必须对生成的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]进行分析：即通过升温，[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]双链解开，[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]染料脱落，荧光值逐渐下降，形成温度和荧光强度的曲线即“熔解曲线（[/font][font=Calibri]Melting curve[/font][font=宋体]）”，由此判断体系中是否存在引物二聚体、非特异性扩增。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]染料法操作简单、灵敏度高、成本较低，被广泛地应用于[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]定量、 基因表达量的研究、转基因重组动植物的研究等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针法[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针是由[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’端标记有荧光报告基团和[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]’端标记有淬灭基团以及与目标基因特异性结合的寡核苷酸序列组成。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，此时仪器不会检测到荧光信号。在[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增时，模板[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]变性解链，[/font][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针特异性结合到目标基因处，而[/font][font=Calibri]Taq[/font][font=宋体]酶具有[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’[/font][font=Calibri]-3[/font][font=宋体]’核酸外切酶活性，延伸至探针结合处，可将探针水解，使荧光报告基团和淬灭基团分离，从而检测到荧光信号，荧光信号的强度与扩增得到的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度成正比。荧光信号被仪器检测并采集得到“扩增曲线”，通过荧光信号的强度反映出体系中[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针法因其特异性高，被广泛地应用于等位基因鉴别、[/font][font=Calibri]SNP[/font][font=宋体]分型、病原体和病毒检测、疾病耐药基因研究、多重定量等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注[font=宋体]义翘神州[/font]qPCR定量分析服务：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/real-time-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-service[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 抗体标记技术及其应用

    [font=宋体]抗体标记技术是一种广泛应用于生物学、医学及免疫学等领域的重要技术。它通过将特定的标记物与抗体结合，实现对抗体及其所识别的抗原的检测、定位和定量等操作。本文将介绍抗体标记技术的原理、方法及实际应用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]一、抗体标记技术的原理[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体标记技术是将特定的标记物与抗体结合，使抗体带上示踪基团，从而实现对抗体及其所识别的抗原的检测、定位和定量等操作。根据标记物的性质，抗体标记技术可分为放射性标记、荧光标记、化学发光标记和生物发光标记等。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、抗体标记技术的方法[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]放射性标记[/font][font=宋体][font=宋体]放射性标记是将放射性核素与抗体结合，通过放射性衰变产生的射线实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的放射性核素包括[/font][font=Calibri]3H[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]14C[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]35S[/font][font=宋体]等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点，但存在放射性污染的问题。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记[/font][font=宋体][font=宋体]荧光标记是将荧光染料与抗体结合，利用荧光信号实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的荧光染料包括异硫氰酸荧光素（[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]）、藻红蛋白（[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]）和罗丹明等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点，但存在光漂白和光干扰等问题。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]化学发光标记[/font][font=宋体]化学发光标记是将化学发光剂与抗体结合，利用化学反应产生的光信号实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的化学发光剂包括吖啶酯类、过氧化物酶和碱性磷酸酶等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点，但存在化学反应的不稳定性等问题。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]生物发光标记[/font][font=宋体]生物发光标记是将生物发光物质与抗体结合，利用生物发光产生的光信号实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的生物发光物质包括萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点，但存在生物发光的不稳定性等问题。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三、抗体标记技术的应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫组化染色[/font][font=宋体]免疫组化染色是一种用于检测组织中特定抗原的定位和定量技术。通过抗体标记技术将特异性抗体与组织中的抗原结合，再利用组织化学方法显示抗原的位置和分布。该技术可用于诊断疾病、研究组织结构和功能等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]流式细胞术[/font][font=宋体]流式细胞术是一种用于检测细胞表面抗原的表达水平的技术。通过抗体标记技术将特异性抗体与细胞表面抗原结合，再利用流式细胞仪对细胞进行计数和分选。该技术可用于研究细胞分化、免疫应答和肿瘤发生等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫沉淀[/font][font=宋体][font=宋体]免疫沉淀是一种用于分离和纯化特异性抗原的技术。通过抗体标记技术将特异性抗体与抗原结合，再利用蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]或蛋白[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]等亲和层析方法将抗原与抗体分离。该技术可用于研究抗原的性质、结构和功能等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总之，抗体标记技术是一种广泛应用于生物学、医学及免疫学等领域的重要技术。它通过将特定的标记物与抗体结合，实现对抗体及其所识别的抗原的检测、定位和定量等操作。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]同时义翘神州还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url]，可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]

  • 纺织品缩率测试自动标记系统

    在做纺织品缩率试验时，对样品做标记挺麻烦的,听说有一种自动标记系统，能通过灯管和摄像头的影响对产品洗涤前后自动做标记，不知道哪里有这种设备？

  • 什么是抗体标记？高质量的标记抗体有哪些？

    [font=宋体]抗体标记是一种生物技术，通过将标记物（如酶、荧光素、生物素等）共价连接到抗体上，使其与待检测物（如特定抗原）特异性反应，形成多元复合物。随后，借助相关仪器，可以直接观察试验结果或进行自动化测定，从而对抗原、抗体反应进行定性和定位研究，或进行定性和定量测定。下面为大家介绍几种高质量的标记抗体：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]①荧光色素标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]这种标记方法是将荧光素与相应的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]结合，将荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]与标本中相应的抗原形成荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原复合物，用荧光显微镜观察。在显微镜若存在荧光则意味着存在抗原抗体复合物，因此可根据已知的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]推断出另一种未知抗原[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗体[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②[/b][url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记抗体[/b][/url][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高！这种方法可使抗体或其它蛋白质的[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基与酰化的生物素共价结合，生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]③放射性碘标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质的碘标记方法有很多种，比如我们常用的化学法或酶促法通过氧化对蛋白质分子进行碘化等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]④[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体是指将[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料与特定抗体结合而成的复合物，这种技术常用于生物医学研究中的荧光标记。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料是从红藻属藻类中提取得到的一种特殊色素，具有较高的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体主要应用在流式细胞术和免疫组化等实验中。在流式细胞术中，[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞表面标记物的表达情况，如[/font][font=Calibri]CD4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CD8[/font][font=宋体]等，可以实现对免疫细胞亚群的研究。在免疫组化和免疫组织化学等实验中，[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞内标记物的表达，如细胞因子、转录因子等，可以深入研究细胞内信号传导通路及相关的生物学功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑤[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体是一种荧光标记的二抗，通常是在单抗上进行标记，具有很强的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体可以与细胞或细胞组分中的特定抗原结合，用于细胞表面标记、蛋白质定量分析、细胞周期和细胞凋亡研究等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑥[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体是将[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]（异硫氰酸荧光素）与特异性抗体经适当方法连接而成的复合物。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]是一种荧光染料，能够与各种抗体蛋白结合，并产生强烈的荧光信号。这种标记技术常用于生物医学研究中的荧光标记，特别是在免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州除了为客户提供抗体开发，还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url]，可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。更多关于抗体标记及抗体标记方法详情可以参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]

  • 【分享】荧光探针标记样品的过程及注意事项

    [b]对细胞进行荧光标记后，有时会出现影响定量实验的三种情况。[/b]一是所有细胞都能标记上荧光，但样品荧光强度过高，甚至饱和。克服方法是降低标记细胞时胞外荧光探针的浓度；或改变标记样品的条件，例如减少标记探针与样品的反应时间。二是出现“环岛效应”或“边缘效应”，表现为即连成片的细胞最外环的边缘的细胞荧光强度明显高于被包围在中间的细胞的荧光强度。克服办法是①在不影响实验的情况下，尽量减低细胞种植密度；②由于染料浓度过高时，更容易产生边缘效应；③适当延长标记时间，以使染料在细胞间达到充分的平衡时间；④染色后，上机前要进行充分洗涤附着探针(不需要洗涤的探针除外

  • 同位素肽_同位素标记_同位素技术

    同位素肽_同位素标记_同位素技术

    目前我们国肽生物合成的同位素标记多肽主要为C13，N15两种同位素标记的多肽，通过直接在肽链中引入同位素标记的氨基酸达到有效标记整条肽链的目的，常用的同位素标记的氨基酸有Tyr，Thr,Lys,Arg,Glu等。同位素标记的多肽与普通肽的区别在于其结构中某一个或几个氨基酸中的C被C13取代或者N被N15取代。[img=,422,228]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/05/201905091355121241_560_3531468_3.jpg!w422x228.jpg[/img]专业的团队，一流的合成纯化技术，严谨的工作态度，严格的质量要求，是我们能够满足客户对同位素标记多肽的不同纯度要求的重要保障。与此同时，同位素标记多肽的原料（同位素标记的氨基酸）价格昂贵，使得我们合成成本高，这就直接导致了这种多肽价格的高昂，秉着客户至上，竭力满足客户需求的经营理念，我们国肽生物提供微克，毫克到千克级别的质量服务。我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：17718122172；17718122684；17730030476；17718122397

  • 【方法经验】简明BrdU荧光标记（IHC和ICC）

    最近在此经常看到有战友了解和咨询BrdU标记染色方法，我这里根据个人经验稍微整理一下protocol如下：*在进行之前，请确保所有试剂的准确。！！！浓度及PH值！！！免疫细胞化学细胞培养数小时后，加入BrdU 数小时后进行BrdU染色。染色方法如下：1）4% 多聚甲醛室温固定20-30分钟；2）PBS洗涤10分钟/次，3次；3）2N HCl，室温， 15分钟；4）PBS洗涤10分钟/次，3次 5）等量于2N HCl （体积相等）0.1M NaB4O3 室温15分钟；6）PBS洗干净 （适当延长时间和加大体积，完全洗净）；7）0.1%Triton X 1-2min；8）10%血清中封闭45-60min 9）一抗稀释于10%血清中4度过夜；10）PBS洗涤10min/次，3次；11）二抗稀释于PBS 室温一小时 12）PBS洗涤3次13）Hochest染核。免疫组织化学（适用于200-300微米的活脑片）1）4% 多聚甲醛室温固定20-30min；3）PBS洗涤20-30min/次，3次；4）2N HCl 室温1小时；5）PBS洗涤20-30min/次，3次；6）0.1MNaB4O3 （等量于2N HCl，体积）室温1小时；7）PBS洗干净；8）4度block液过夜；（block液：PBS+10%BSA+0.3%Triton-X100（+0.2‰NaN3，防腐，有毒，可不加））9）一抗稀释于block液中4度过夜 （适用于脑片，普通10-20微米切片按正常IHC步骤即可）；10）PBS洗涤30min/次，3次；11）二抗稀释于Block液中过夜；12）PBS洗涤30min/次，3次；13）Hochest染核并用共聚焦显微镜拍摄统计。-------------------------------------------------------

  • 【转帖】残留知识普及一百篇之十四【生物芯片的技术核心】

    所有的生物芯片技术都包含四个基本要点：芯片的制作、杂交或反应、测定或扫描、数据处理。生物芯片的技术核心是芯片的制备及反应信号的检测。 1、芯片制备技术 目前制备芯片的方法基本上可分为两大类：一类是原位合成(in situ Synthesis)；一类是合成后交联(post-synthesis attachment)。原位合成是目前制造高密度寡核苷酸芯片最为成功的方法。在制备基因芯片时要考虑阵列的密度、再生性、操作的简便性、成本的高低等几方面的因素。 具体而言，比较典型的DNA芯片制备方法有4种：第一种方法是Affymetrix公司开发的光引导原位合成法，该方法是微加工技术中光刻工艺与光化学合成法相结合的产物。第二种方法是Incyte Pharmaceutical公司采用的化学喷射法，该方法是将合成好的核昔酸探针定点喷射到芯片上并加以固定化来制作DNA芯片。第三种方法是斯坦福大学研制的接触式点涂法。在DNA芯片制备中通过高速精密机械手的精确移动让移液头与玻璃芯片接触，而将DNA探针涂敷在芯片上。第四种方法是通过使用4支分别装有A，T，G，C核昔的压电喷头在芯片上并行地合成出DNA探针。 光引导合成法与喷墨打印法、合成点样法相比，最大的优点是，它可以合成密度极高的阵列；但它的最大缺点是耗时、操作复杂，而且为保证在不同位点加上不同的单体，从而在不同的位点合成不同的探针，需要不断更换不同的蔽光膜，对一个含25个碱基的探针的微阵列，一般需更换100个蔽光膜，需一天多的时间才能完成。合成点样法虽然芯片上探针的密度相对较低，每个样品都要预合成、纯化，在芯片制备前还需妥善保存合成的探针，但是它的最大优点是操作简便。目前很多公司采用这种方法来制备芯片。 2、样品制备技术 生物样品往往是各种组分的混合体，成分非常复杂，由于目前的检测体系还不能检测出未扩增的标记样品，所以待测样品DNA在杂交前一般都要进行聚合酶链反应(PCR)，在扩增的过程中，对靶DNA进行标记。目前DNA样品的扩增一般是通过液相反应来完成，但由于低浓度核酸很难检测到，在溶液中通过PCR反应获得线性扩增也很困难；另外，不同靶DNA对引物的竞争，意味着某一序列的扩增优于其他序列。为了解决上述问题，一些公司正在研究新的方法。如固相PCR系统，该系统是将2种引物排列在丙烯酰胺膜上，与DNA样品、PCR试剂混合，如样品含有靶序列，则开始扩增反应；通过这种固相PCR体系，可避免对引物的竞争，同时也降低了遗留污染。不过也有不少人试图绕过样品扩增这一问题，如 Mosaic Technologies 公司引入的固相 PCR 方法，引物特异性强，无交叉污染并且省去了液相处理的烦琐； Lynx Therapeutics 公司引入的大规模并行固相克隆法 (Massively parallel solid-phase cloning) ，可在一个样品中同时对数以万计的 DNA 片段进行克隆，且无需单独处理和分离每个克隆。 在芯片飞速发展的今天，样品制备已经成为芯片发展的瓶颈所在。对于较大规模制作芯片的用户，由于点样样品数目太多，即使采用高通量试剂盒还是不够方便。世界上声誉卓著的核酸纯化供应商德国QIAGEN公司推出了全自动核酸和蛋白纯化工作站，该工作站有4个不同的自动纯化系统型号：BioRobot 8000，BioRobot 3000，BioRobot 9604，BioRobot 9600，加上QIAGEN优质的多种配套纯化试剂盒--从质粒、粘粒、RNA、血液基因组DNA、病毒DNA到蛋白，品种丰富，在欧美的生物医学市场上掀起了一场革命，各大分子生物学中心、芯片中心、医学中心争相抢购。 样品获得后要进行标记，目前样品的标记主要是荧光标记。荧光标记基本分为2种，一种是使用荧光标记的引物，一种是使用荧光标记的三磷酸脱氧核糖核苷酸。目前常使用的荧光物质有：荧光素、罗丹明、HEX、TMR、FAM、Cy3、Cy5等。根据扩增产物分离的方法不同，标记的方法也不同：进行单引物标记的，其扩增产物通常由聚丙烯酰胺凝胶电泳分离；对一个引物用生物素标记，另一个引物用荧光素标记的，一般用亲合素偶联的磁珠捕捉其扩增产物，通过变性处理使荧光标记的产物解链。此外，也有用生物素残基标记引物，将生物素标记的扩增产物与芯片杂交，洗涤后加入亲合素连接的荧光物，通过生物素与亲合素的结合及靶序列与探针的结合产生荧光信号，然后利用荧光检测系统对荧光信号进行检测。

  • 基因芯片实验操作流程图

    基因芯片实验操作流程包括样本DNA或RNA制备、标记、杂交及洗涤等步骤http://img1.jiansuo.net/trademd/upload/asset/meeting/2010/12/02/1291289644.JPG 基因芯片实验操作流程图 1、样本DNA或RNA制备 芯片实验中核酸的抽提没有特殊之处，参照常规的分子生物学实验手册就可以。但对于RNA样本，由于RNA的稳定性很差，在活体内的半衰期也很短，因此取材一定要新鲜，取材后迅速保存在液氮中，在整个处理过程中要非常小心，以免降解，影响实验成功率或结果的可靠性。 2、核酸标记方式 分子生物学常用的标记方法有同位素标记和非同位素标记方法，常用的同位素有33 P、32 P、125 I及3 H等化学发光标记和荧光标记，非同位素标记方法又分为化学发光法和荧光法。常用的化学发光物质有碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶，它们能催化相应的底物产生有颜色的沉淀物；生物素和地高辛是最常用的非同位素标记物。很多荧光染料、碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶可直接同抗地高辛抗体及亲和素偶联。而目前常用的荧光染料种类有德克萨斯红(Texasred)、荧光系、罗丹明、Cy3、Cy5等。生物芯片中的标记方法普遍采用荧光方法，很少采用化学发光法和同位素标记方法。 核酸样本通常采用酶反应法进行标记，蛋白质样本采用化学方法或抗体―抗原间接标记的方式。核酸中常用的酶反应方法有：反转录法、随机引物法、切口平移(nicktranslation)、PCR、体外转录等。在酶反应过程中掺人带荧光的dNTP，从而标记新合成的核酸分子。如果酶反应中需要引物，如PCR、随机引物法和反转录法，也可以将荧光基团通过化学反应加到引物的末端。 3、样品标记方法 样本标记方法很多，这里仅举几种常用的方法。 (1) RNA标记方法：对于表达谱基因芯片和RNA不同剪切体的研究，是针对RNA样本进行标记。最常见的标记方式是用Cy3或Cy5荧光，通过反转录标记法，选择不同激发波长的荧光标记不同的样本。如Cy3或Cy5标记的dNTP，通过酶反应掺人到待测样品中，便可以在一张片子上同时检测两份标本的信息，做到平行性比较，数据更可靠。另外，由于反转录法所需RNA样本量大，一般需要20fig的总RNA。对于微量的组织样本很难制备足够的RNA，这时可以采用RNA线性扩增方法，最普遍采用的RNA扩增方法是RNA体外线性扩增方法。 (2) DNA样本的标记方法：当对样本进行CGH分析、SNP、分子分型或甲基化研究时，主要选用DNA作为样本。对于CGH，可以进行全基因组标记，通常采用随机引物标记方法。这种方法需要的DNA量大，一般在2pg以上的基因组DNA。虽然有人发明了全基因组DNA的线性扩增技术以减少对样本量的需求，但效果上都不很理想，很难真正做到全基因组及完全的线性扩增。对于SNP研究，可以采用类似CGH的标记方式进行全基因组标记。由于SNP检测的是DNA的“质”，而不像表达谱或CGH质检测核酸的“量”，因此不必要考虑标记时DNA的线性关系，可以采用其他的全基因组的扩增方法。但由于杂交条件的限制，一般难以做到真正意义上的高通量。因此，一般只是选择少数目的基因的少数SNP位点进行研究，可以采用多重PCR标记方法标记目的片段代替全基因组标记。甲基化研究有两种方案，一种采用SNP的检测原理，另一种类似CGH的方法。

  • 【原创1+1系列活动】全自动核酸分析系统免费体验开始

    【原创1+1系列活动】全自动核酸分析系统免费体验开始

    您还在为做胶时小心翼翼对待如EB类的核酸染料而苦恼吗?还在为胶分辨率低，没办法获得差异结果而头疼吗?还在为同样的PCR产物用不同大小的Marker估算，但结果不同而纠结吗?还在为传统电泳繁杂的步骤耽误时间而痛苦吗?现在你可以对这一切说NO了，免费体验全自动核酸分析系统Qsep100（点击查看详情）开始了!这款分析系统，是利用微毛细管电泳技术检测双链DNA的新仪器，PCR后您不用再制胶，不用再接触EB，不用再浪费时间跑胶和花心思分析胶上的结果。全自动毛细管核酸分析系统（点击查看详情）Qsep100，承担您所有的实验步骤，节省您宝贵的时间，提高您实验结果的精确性。　　全自动核酸分析系统Qsep100，采用毛细管电泳原理，对DNA 片段进行分离和检测。该系统包含检测模块、分析模块、样品进样器和可替换的Pen-shape 卡夹。最快3分钟完成一个样本检测，检测样本灵敏度低至0.1ng/ul，可分辨出1-4bp差异的DNA片段，可对结果进行定性和定量分析。电泳峰图、凝胶电泳图、DNA片段差异的分析都可以通过软件来完成。只需简单几个操作，您就可以获得直观、精准的检测结果，让您的实验标准、精准、自动、高效。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_648236_1604352_3.gif　　凡报名的网友在活动期间，昊诺斯科技将携带仪器上门免费为您做体验。　　免费体验期，参加体验互动活动，将有精美礼品奉上哟\(^o^)/~　　参加方式一：仪器信息网上注册，发帖并加入昊诺斯-鼎昊源真心英雄队(发帖时“选择主题”请选择“第五届原创”;“参加原创团队”点“是”，记得选择“昊诺斯-鼎昊源真心英雄队”哟)，累积积分，还有机会获得仪器信息网的礼品呢O(∩_∩)O~http://bbs.instrument.com.cn/images/HomeFocus/2012081614290062.jpg点击加入我们，让我们成为朋友吧！　　参加方式二：关注并发微博@昊诺斯生物(新浪微博)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209141410_390911_2507958_3.gif　　发帖内容可涉及以下3方面：（分享试用感受可同时参加原创大赛获得双重奖励！）　　1、 使用全自动毛细管核酸分析系统Qsep100的体验照片和体验感觉，奖励礼品：计时器或手机座。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210251416_399232_2961690_3.jpg　　2、 具体实验的数据和分析结果，奖励礼品：U盘。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210251419_399233_2961690_3.jpg　　3、 使用全自动毛细管核酸分析系统Qsep100得到实验数据，并以此发表的文章，将有现金奖励。(SCI文章500元，核心期刊300元)　　欢迎垂询北京昊诺斯科技有限公司市场部产品负责人曹迪 18601371910 caodi@herosbio.com，(因为区域划分，活动仅限北方区域，具体问题欢迎来电垂询)。　　温馨提醒：您发帖后，请您发邮件到heros@herosbio.com或致电市场专员董丽芳座机010-64842431-315及时和我们联系，我们核实完后将尽快将送出礼品。

  • 【求助】请问pe标记的抗体在荧光显微镜下是用蓝光观察吗？

    [color=#00FFFF][size=4][em09512] 请教大家一下哦，，我用pe荧光标记的抗体 在荧光显微镜是用蓝光去看吗？ 那台是nikon的落射荧光显微镜来的，有绿光，蓝光，黄光可选的（那个是激发光的光源吗？）， 我用蓝光去看什么都没有，用绿光去看就有一两颗红色一点的东西，那些是什么啊？ 我是新手啊，请教大家罗，。。 谢谢。。[/size][/color]

  • 【资料】激光共聚焦扫描显微镜一些介绍

    激光共聚焦扫描显微镜简介一、 激光共聚焦显微镜的基本组成激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope LSCM)是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品，是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。激光共聚焦显微镜利用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦的原理和装置，以及通过针孔的选择和PMT的收集，并带有一套对其所观察到的对象进行数字图像分析处理的系统软件。与传统光学显微镜相比，它具有更高的分辨率，实现多重荧光的同时观察并可形成清晰的三维图象等优点。所以它问世以来在生物学的研究领域中得到了广泛应用。激光共聚焦显微镜主要有四部分组成：1、显微镜光学系统。2、扫描装置。3、激光光源。4、检测系统。整套仪器由计算机控制，各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地进行。1.1 显微镜光学系统　　显微镜是LSCM的主要组件，它关系到系统的成象质量。显微镜光路以无限远光学系统可方便地在其中插人光学选件而不影响成象质量和测量精度。物镜应选取大数值孔径平场复消色 差物镜，有利于荧光的采集和成象的清晰。物镜组的转换，滤色片组的选取，载物台的移动调节，焦平面的记忆锁定都应由计算机自动控制。1.2 扫描装置　　LSCM使用的扫描装置在生物领域一般为镜扫描。由于转镜只需偏转很小角度就能涉及很大的扫描范围，图象采集速度大大提高，512×512画面每秒可达4帧以上，有利于那些寿命短的离子作荧光测定。扫描系统的工作程序由计算机自动控制。1.3 激光光源　　LSCM使用的激光光源有单激光和多激光系统。多激光器系统在可见光范围使用多谱线氩离子激光器，发射波长为457nm、488nm和514nm的蓝绿光，氦氖绿激光器提供发射波长为543nm的绿光，氦氖红激光器发射波长为633nm的红光，新的405nm半导体激光器的出现可以提供近紫外谱线，但是小巧便宜而且维护简单。1.4 检测系统　　LSCM为多通道荧光采集系统，一般有三个荧光通道和一个透射光通道，能升级到四个荧光通道，可对物体进行多谱线激光激发，样品发射荧光的探测器为感光灵敏度高的光电倍增管PMT，配有高速12位A/D转换器，可以做光子计数。PMT前设置针孔，由计算机软件调节针孔大小，光路中设有能自动切换的滤色片组，满足不同测量的需要,也有通过光栅或棱镜分光后进行光谱扫描功能的设置。二、激光共聚焦显微镜的特点以及在生物领域的应用传统光学显微镜相比，激光共聚焦显微镜具有更高的分辨率，实现多重荧光的同时观察并可形成清晰的三维图象等优点，在对生物样品的观察中，激光共聚焦显微镜有如下优越性：1、对活细胞和组织或细胞切片进行连续扫描，可获得精细的细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统的三维图像。2、 可以得到比普通荧光显微镜更高对比度、高解析度图象、同时具有高灵敏度、杰出样品保护。3、***图象的获得，如7 维图象(XYZaλIt): xyt 、xzt 和xt 扫描,时间序列扫描旋转扫描、区域扫描、光谱扫描、同时方便进行图像处理。 4、细胞内离子荧光标记，单标记或多标记，检测细胞内如PH和钠、钙、镁等离子浓度的比率测定及动态变化。5、荧光标记探头标记的活细胞或切片标本的活细胞生物物质，膜标记、免疫物质、免疫反应、受体或配体，核酸等观察；可以在同一张样品上进行同时多重物质标记，同时观察； 6、对细胞检测无损伤、精确、准确、可靠和优良重复性；数据图像可及时输出或长期储存。 由于共聚焦显微镜的以上优点，激光共聚焦显微镜在以下研究领域中应用较为广泛：1、细胞生物学：如：细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡机制；各种细胞器、结构性蛋白、DNA、RNA、酶和受体分子等细胞特异性结构的含量、组分及分布进行定量分析；DNA、RNA含量、利用特定的抗体对紫外线引起的DNA损伤进行观察和定量；分析正常细胞和癌细胞细胞骨架与核改变之间的关系；细胞黏附行为等 2、生物化学：如：酶、核酸、受体分析、荧光原位杂交、杂色体基因定位等，利用共聚焦技术可以取代传统的核酸印迹染交等技术，进行基因的表达检测，使基因的转录、翻译等检测变的更加简单、准确。3、药理学：如：药物对细胞的作用及其动力学；药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量 4、生理学、发育生物学：如：膜受体、离子通道、离子含量、分布、动态；动物发育以及胚胎的形成，骨髓干细胞的分化行为；细胞膜电位的测量.荧光漂白恢复（FRAP）、荧光漂白丢失（FLIP）的测量等。 5、遗传学和组胚学：如：细胞生长、分化、成熟变化、细胞的三维结构、染色体分析、基因表达、基因诊断； 6、神经生物学：如：神经细胞结构、神经递质的成分、运输和传递； 7、微生物学和寄生虫学：如：细菌、寄生虫形态结构； 8、病理学及病理学临床应用：如：活检标本的快速诊断、肿瘤诊断、自身免疫性疾病的诊断； 9、免疫学、环境医学和营养学。如：免疫荧光标记（单标、双标或三标）的定位，细胞膜受体或抗原的分布,微丝、微管的分布、两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位；对活细胞中的蛋白质进行准确定位及动态观察可实时原位跟踪特定蛋白在细胞生长、分裂、分化过程中的时空表达，荧光能量共转移（FRET）。

  • 多肽合成 胰岛素 同位素标记 磷酸化 二硫键 多肽公司

    合肥国肽生物科技有限公司（简称：国肽生物TM）成立于2014年，是一家专业从事多肽产品的研发、生产和销售以及多肽技术转让的高新技术企业。BP公司成立之初，便成功收购了国内几家多肽、抗体公司，是目前国内的专业多肽合成、抗体制备、蛋白表达的规模型生产企业。国肽生物专长于荧光标记肽、同位素标记肽、人工胰岛素、药物肽、化妆品肽、长肽困难肽等产品的合成与研发，致力于学术水平的科研提升，搭建学术交流平台，促进前沿、专业的学术知识推广，推动多肽在生物医学材料等领域的研究与应用。公司产品广泛应用于药物研发，抗体的制备（包括单抗与双抗），荧光分子探针的构建以及细胞透膜研究、活体成像、新型材料研发和质谱分析等研究领域国肽生物按照客户定制要求供应高品质普通多肽。我们拥有成熟的多肽合成纯化方法，利用SPPS方法和液相合成方法为客户提供高品质多肽。我们的服务特点是:1. 纯度：我们提供粗品肽和纯度纯度为70%，75%，80%,85%,90%,95%,98%,99%的纯品多肽。2.脱盐和转盐：根据客户要求，我们可以对多肽进行脱TFA盐处理，也可以转为醋酸盐。3.交货期限：30个氨基酸之内，一般2-3周，最快1-2周。4.质量控制：每条多肽都免费提供合格的HPLC，MS和COA文件。5.售后服务：1-2周内可以提出异议，我们免费复测，不合格免费退货，1-3个月内使用不合格可以免费提供复测，样品免费保存3个月。国肽生物根据客户要求，供应各种修饰型多肽。1.磷酸化的Ser、Tyr和Thr修饰的多肽：我们提供单磷酸化和多磷酸化多肽服务，目前我们已经能够提供四个磷酸化位点修饰的多肽。2.5(6)-FAM，FITC，CY5，RhodamineB，PNA，EDNAS/dabcyl等荧光标记修饰的多肽：荧光标记修饰多肽技术是我们国肽生物的代表性多肽合成技术，我们的这项技术已经相当成熟。3.生物素Biotin，Lys(Biotin)修饰的多肽：生物素是维生素B2的组成部分，Biotin，Lys(Biotin)修饰的多肽也是客户经常定制的多肽。我们提供生物素修饰的多肽已经有将近100%的成功率。4.含有一对或多对二硫键修饰的多肽：二硫键在蛋白质的结构稳定中起到重要作用，目前我们已经能够为客户提供四对二硫键修饰的多肽。5.含有同位素C13，N15修饰的多肽：同位素标记的多肽主要应用于医学和生物学领域，通常价格较高，为了满足客户需要，我们接受微克级的同位素多肽定制。6.含有特殊氨基酸修饰的多肽：例如，D型氨基酸，氨基酸衍生物，脂肪族羧酸等等，都在我们接受的定制范围内。国肽生物提供150个氨基酸以内的长肽合成服务。多肽合成过程中，肽链过长时，经常会出现缺残基，氨基酸缩合困难等情况，基于这些现象，我们开发了三种有效提高反应成功率的方案：1. 微波合成法：对于合成过程中出现的一些难以缩合的氨基酸，我们采用微波法进行合成，该方法效果显著，并且大大缩短了反应时间。2. 片段合成法：当某些多肽用常规合成方法合成困难，我们也会采用将多肽中某一段的某几个氨基酸缩合之后作为一个整体缩合到肽链上去，这种方法也能够解决许多合成中存在的问题。3.酰肼合成法：酰肼法合成多肽的方法是将固相合成的 N末端Cys 多肽和 C末端多肽酰肼之间的化学选择性反应形成酰胺键而实现多肽的连接，该方法根据肽链中Cys的位置，将整条肽链分成多条序列分别合成，最终经过液相缩合反应得到目标肽，显著地提高了最终产物纯度，广泛适用于含有Cys的长链多肽的合成。国肽生物拥有成熟的长肽合成工艺，能够根据客户定制的多肽序列，快速有效地设计合成方案并迅速开始合成，更快更好的为客户提供所需的服务是我们不变的坚持。详情请咨询合肥国肽生物www.bankpeptide.com

Instrument.com.cn Copyright©1999- 2023 ，All Rights Reserved版权所有，未经书面授权，页面内容不得以任何形式进行复制