想要做发酵过程的在线控制,需要一个可高温灭菌的probe用于在线采谱,最好是可以和thermo fisher的Antaris II 可以组装的,这个应该求助于谁呢? 谢谢大家的帮忙!
发酵过程中,细胞浓度是一个非常重要的生理参数,不但可以计算比生长速率,底物消耗速率、生物量产率和维持系数等参数,还可以及时判断是否有染菌等异常情况发生。目前测量细胞浓度的方法主要有化学法(DNA/RNA分析)和物理法(干重、光密度、呼吸商等)两大类。一般来说,与物理法相比,化学法能较准确的测量有代谢活性的生物量,缺点是花费时间长,而利用物理法测量,无法区分区分处于悬浮状态的颗粒和微生物,也无法分别活死细胞。 实现在线活细胞浓度一直是发酵领域的热门话题,仅些年来出现了不少的测量方法,依据的工作原理也是五花八门,其中最具代表性的有声学,激光散色、荧光、核磁、量热或电容。 其中法国fogale公司的测量仪器,以电容法为工作原理,直接将传感器安装与发酵罐上,可承受121℃高温灭菌,理论技术也比较成熟,是目前最为理想的适合工业级别的在线活细胞传感器。工作原理:电容传感器采用活细胞的介电特性,实时连续测量活细胞的生物体积,可应用于实验室桌面型的反应器或者是工业规模的大型反应器两对对电极位于传感器的顶部,一对用于在培养基中产生交变的电场,在电场范围内,带有完整细胞膜的细胞会在培养基中发生极化现象,发生极化的细胞可以认为是极小的电容,死细胞或者其他粒子没有完整的细胞膜,所以不能形成电容型号。另一对电极用于检测培养基中的介电信号,培养基中的介电信号和细胞的浓度是精确关联的。细胞的极化率和电场的频率纯在函数关系,当频率增加时,培养基中细胞的介电常数由低频峰(最大极化)降低到高频峰(最小极化)。这种随频率增加极化率降低的现象称为β-散射。传感器采用双频测量模式:培养基的基线在10MHz左右得到,细胞的信号在临界频率区域获得,在曲线的拐点,(动物细胞和细菌在1MHz,酵母在2MHz)我们获得了最佳的信号线性。应用:这项技术可广泛应用于各种细胞培养,生物发酵过程。已被文献证实可应用的细胞如下:动物细胞:CHO, BHK, MDCK, PERC6, NSO, HEK, Hela,Hybridoma, Vero细 菌:E.Coli, Bacillus Thuringensis, Salmonella,Streptomyces, Lactic Bacteria酵 母:Pichia Pastoris, Saccharomyces Cervisiae, PolymorphaHasenula昆虫细胞:sf9, Hi-5真 菌:Absidia
发酵罐还有别的在线检测没有?1压力传感器 2温度传感器 3溶氧电极 4氧化还原电位电极 5细胞浓度在线检测 6泡沫电极 7液位和泡沫高度检测 8尾气分析 9生物传感器 10流量传感器 还有别的没有?大家用了几种?
高温/发酵pH电极的保养与维护 本手册适用:胶体电解液pH电极、3M KCL电解液pH电极 适用于含蛋白质试样和含水分试样。 用户在使用时应遵循以下建议以避免缩短电极使用寿命或影响测量准确性。 1. 使用前准备 1.1 电解液注入口的橡胶塞上有一突起,剪去突出的部分可调整压力至内外压力对等。勿将橡胶塞整体移除,以免电解液成分由于蒸发作用发生变化。 1.2 使用清洁的水清洗电极并用柔软的纸巾吸干表面残留水份。 注意:摩擦电极可产生静电,在一定程度上造成电极反应迟缓。 1.3 检查玻璃膜的内部,如发现气泡,沿竖直方向小心晃动电极直至气泡消失。 1.4 检查电极内电解液的含量,添加电解液若液面位置在注入口下方20mm以下,而且只用博取公司的电解液产品,注意选择合适的电解液(标注于电极标签)。 注意:电解液为腐蚀性液体,应避免与仪器表面或其他敏感物质接触。 电极使用前准备工作至此完毕。
传统的酿造工业和近代发酵工业多为劳动密集型产业,自动化程度较低。近些年来随着连续发酵技术、现代生物分离技术、生物反应器技术、生物传感器技术等现代生物工程技术快速发展.基因工程生物新产品不断出现,加快了发酵工业向技术密集型转变的进程。而影响这一进程的关键因素之一就是发酵过程最优化控制技术,特别是发酵过程连续在线监测控制技术。发酵过程是一个非性线、多变量和随机性的动态过程,发酵体系是一个复杂的被控对象。温度、溶氧、pH、培养基成分、细胞形态、细胞浓度、产物组成及含量等均是发酵过程的重要控制参数。以往测定这些参数采用离线分析,不能及时反映发酵过程的状态,无法实现自动控制和连续跟踪。因此,工业发酵过程中最优化控制技术主要是在线测控系统。在线测控系统可连续、迅速、准确实现取样、检测、信号处理、反馈控制等过程,实现工业发酵过程最优化的自动控制。随着计算机及控制技术的突飞猛进,生物传感器技术的发展,发酵动力学模型研究的完善,发酵过程控制系统愈来愈多,应用范围亦越来越广。但是,工业上实现发酵过程最优化自动控制的实例却不多,仍以人工控制和半自动控制为主。1 工业发酵过程最优化控制的现状与难点总的来看,目前发酵工厂发酵过程的计算机应用和自动化控制程度不高,落后于其他领域。现代化的发酵工厂已初步实现对部分因素如温度、溶氧、pH、搅拌转速、流速等的在线检测,也可对其变化进行单因素控制,但仍与发酵最优化的自动控制目标相去甚远,即难以成功建立对培养系统进行系统的反馈性控制。其发展滞后的主要原因如下:1.1 微生物生长代谢的特殊性 这是由于发酵过程的微生物学属性,使得其不同于一般的化学反应系统,其特殊性表现在:1)微生物细胞的生长繁殖、产物的代谢既随外界条件的变化而变化,亦随遗传基因的变异而变化;2)微生物细胞是有生命的,必然要经历幼龄、壮龄、衰老和死亡等过程,发酵过程微生物之间是不同步的,微生物个体之间是有差异的;3)相当一部分发酵过程的生物化学反应途径尚不清楚,难以对反应变化进行精确的计算。因此,目前的发酵动力学模型多为经验或半经验模型,或为简化的模型;4)人类对生命科学的认知程度很低,即使对最简单的生物一微生物的认知程度也不充分,对发酵机理的认识还远远不够,对许多发酵产物形成的代谢调控机制还没有完全研究清楚,难以确立最佳的控制条件和手段;5)细胞的生长和目的代谢产物的形成最优控制条件往往是不一致的。1.2 发酵生产过程控制的复杂性 影响发酵生产过程的因素较多,远比一般化工生产过程复杂,对生产过程控制的难度较大,具体体现在以下几个方面:1)发酵过程是生化反应与化学物质跨膜(细胞膜)传输过程的叠加,属于气、液、固三相反应系统;2)由于菌体(尤其是菌丝体)的数量变化和各种代谢产物的不断积累,发酵过程发酵液粘度变化复杂,多呈非牛顿型流体性质,给传质、传热的控制带来困难;3)影响生化反应的因素除物理因素和化学因素外,还有生物因素,如细胞之间的影响、杂菌的干扰等;且这些因素又互相关联,给反应过程控制带来困难。无菌操作对生产设备和工艺都有特殊的要求;4)发酵原料多属生物材料,一般使用天然或半天然培养基,培养基成分复杂。因此,实际生产中只能对主要成分进行检控;5)生物反应器不同于一般的化学反应器,要人工提供微生物生长代谢的最佳物理、化学和生态的环境。要在生物反应器内保持菌种的最佳状态,减少各种营养物、代谢物对细胞生长和代谢的阻遏效应等均较困难;6)供在线检测用的传感器的种类和质量还远不能满足发酵最优化控制的要求。2 工业发酵过程最优化控制对策目前的最优化控制条件大多建立在经验的基础上,要取得发酵过程最优控制的突破,首先需要具体发酵产品的微生物生长代谢,发酵调控原理认识的突破,并在此基础上运用科学的方法建立发酵过程数学模型,为计算机的应用提供条件。其次,建立和完善硬件技术,即发酵过程各种参数在线检测控制的设备技术。2.1 发展完善发酵过程在线测控技术 发酵过程在线测控装置一般包括三个部分:分析检测装置(传感器)、将检测装置与发酵介质相结合的取样过滤装置、实现控制理论的反馈和控制装置,即信号传输装置和计算机。目前正在应用和研究的在线测控装置有以下几种。2.1.1传感器系统 一种直插式传感器,为直接安装在反应器内实现在线监控的传感器。已用于发酵生产中的主要是罐内物化参数的测定,如温度、溶氧、pH、转速、罐压、粘度、浊度及流量等。此类传感器的性能较稳定,应用也较为普遍,在氨基酸发酵、啤酒发酵等生产中均有应用,实现了部分参数的在线监控。其主要特点是能够承受高温高压环境,常用的有热电偶传感器、转速传感器、测力传感器、玻璃传感器、光学传感器及溶氧传感器等。另外,微生物传感器可用于测量发酵工业中的原材料(如糖蜜、乙酸等)和代谢产物(如谷氨酸、乳酸等)测量装置基本上都是由适合的微生物电极与氧电极组成原理是利用微生物的同化作用耗氧通过测量氧电极电流的变化量来测量氧气的减少量从而达到测量底物浓度的目的。在测定微生物细胞数量时,在阳极Pt表面上菌体可以直接被氧化并产生电流,这种电化学系统可以应用于细胞数目的测定。测定结果与常规的细胞计数法测定的数值相近,利用这种电化学微生物细胞数传感器可以实现菌体浓度连续、在线测定。2.1.2 流动注射检测系统(FIA) 有些传感器不能承受高温高压环境或不适合微生物发酵环境,因此不能作为直插式传感器直接在发酵罐内使用,如生物传感器。流动注射检测系统(FIA)可较好地解决这一问题,FIA 系统由取样装置、样品预处理装置、泵、注射选择阀、传感器、信号转移和数据处理计算机等组成。生物传感器安装于反应器外,样品被处理后送至反应器外与生物传感器接触反应产生信号,实现发酵过程的在线测控。常用于FIA系统的生物传感器有电流式电极、pH 电极、Bio—FEF电极、光学生物传感器、光纤生物传感器以及化学发光传感器等。2.1.3 映象在线控制系统 随着光学技术的不断发展,直接将光学显微镜安装在反应器内,在线监测发酵过程中细胞的形态和生理状态,并可以对细胞数量、大小、种类进行计算统计,荧光显微镜还可以监测细胞代谢过程。将映象在线控制系统与流动注射检测系统结合,可成为更有效的监测系统。一个典型例子是用于在线监测细胞培养状态的FI—FCM系统。该系统样品首先从生物反应器传人多位置的真空管并同时排空,数十种不同的样品和反应剂被筛选,通过连接着十条真空管的精密注射泵导人系统,连接着双向真空管的微室用于稀释样品或将样品与不同的反应剂混合。然后将处理后的样品通过自由脉冲方式注人流动细胞测定仪,流动细胞测定仪可测定培养过程中细胞大小和数量、通过观察荧光变化检测绿色荧光蛋白形成的动力学过程等,流动细胞测定仪的数据处理由主机完成,连接有系统控制板和数据控制板的计算机对系统进行控制。
8月23日全国各地的天气预报,除部分地区的最高温度达到35°C外,大部分地区的最高温度在30°C左右,最低温度在22-25°C,即将(或已经)进入秋季最佳酿酒发酵季。
本公司研发中心发酵实验室拥有9个独立发酵罐,可在线监测数据,可以满足单级、多级发酵实验,拥有专业的发酵专业团队,辅助的检验团队,菌种研发团队及仪器设备配备齐全!欢迎有需求的公司来电洽谈,电话微信同步13848063760[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/04/202204211303019403_914_4064059_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/04/202204211303026337_3354_4064059_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/04/202204211303028573_4784_4064059_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/04/202204211303027421_6444_4064059_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/04/202204211303030917_7901_4064059_3.png[/img]
有谁有发酵方面的书籍,关于酒的发酵
[size=10.5pt][font=微软雅黑][b]微生物制剂发酵[/b]的物理条件研究主要有[b]发酵温度[/b]、[b]初始[/b]、[b]溶解氧[/b]。温度是微生物生长的重要环境条件之一。微生物的生长实际是生物体的一系列生物化学反应和酶反应的有机组合,温度是影响这些反应的主要因素。由于不同来源、不同菌株和培养基成分的差异,zui适培养温度有一定的差异。[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]PH值影响微生物的发育增殖和各种能量代谢的化学活性等,在工业发酵过程中,值PH直接影响菌体的生长和目的产物的产生和积累,菌体还会产生酸碱物质导致发酵液值的变化,为保持值的稳定以至于不影响菌体的生长及产物的生成,常常需要补加酸碱来平衡值。[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]在好氧微生物发酵时溶解氧是重要的限制性因素,尤其是液体深层发酵对氧的供应要求更高。溶解氧的调节主要靠通气量、搅拌速度、罐压等进行调节。[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]此外,在液体发酵过程中往往要产生大量的泡沫,为了防止逃液和染菌,保证生产顺利进行,需在发酵液中加入消泡剂。常用的消泡剂有植物油,如花生油、豆油等,还有的用一些高分子化合物,如聚醚类消泡剂、高碳醇、有机硅消泡剂等,这类消泡剂的消泡抑泡[/font][/size]
生物发酵涉及到医药、轻工、食品、农业、海洋、环保等众多领域,在我国国民经济发展中占有极其重要地位,是当前经济社会发展急需突破的技术领域,也是当前世界各国发展的热点领域。在生物发酵过程中,对发酵尾气中各种气体组分的检测有着相当重要的地位。发酵尾气的组分变化,反映了整个发酵过程中物质的变化情况,对尾气数据的分析,可对发酵过程起到监测的作用。 在项目完成过程中,项目组根据发酵尾气的特点以及现场应用环境的要求,对尾气预处理、采集、分析、数据处理等进行了一系列的条件优化,最终建立了一套“在线质谱仪直接分析生物发酵尾气的方法”和标准操作程序。采用SHP8400PMS在线质谱仪可对发酵尾气进行直接分析,实现实时自动在线监测,能够获得连续稳定的准确测量结果,对氧气、二氧化碳、氮气、氩气以及各种挥发性的物质进行高精度定量分析,提高了监测效率。目前该方法已成功应用于国家生化工程技术研究中心(上海)的发酵工程研究和多家生物制药企业的生产现场监测,具有推广应用的示范意义,为建立行业标准方法打下基础。专家组在给予项目肯定和高度评价的同时,也提出了相当中肯的进一步研究建议,希望能将国产质谱仪更好的应用于现场监测领域。
请问一个国产的十升的发酵罐大概要多少钱??在线急等。。。
[font=SimSun, STSong, &]对于低温长时间灭菌,如85℃、20min。此类灭菌方式属于什么,相较于95℃、30min,哪些灭菌方式不会导致奶在低温长时发酵不会有杂菌风险,且能够出现凝乳.另外据我所查,高温灭菌有单独计算公式,但是又会导致蛋白变性等,从而影响发酵乳无法凝乳等情况。那么我应该参考一个什么样标准去设计灭菌时间和温度来确保37℃、48h长时间发酵不会有染菌风险。如灭完菌初始菌数、芽孢等要求,求助各位专家[/font]
首先需了解微生物需要的营养物质。 (1)微生物需要的营养物质营养物质应满足微生物的生长、繁殖和完成各种生理活动的需要。它们的作用可概括为形成结构(参与细胞组成)、提供能量和调节作用(构成酶的活性和物质运输系统)。微生物的营养物质有六大类要素,即水、碳源、氮源、无机盐、生长因子和能源。① 水水是微生物的重要组成部分,在代谢中占有重要地位。水在细胞中有两种存在形式:结合水和游离水。结合水与溶质或其他分子结合在一起,很难加以利用。游离水(或称为非结合水)则可以被微生物利用。② 碳源碳在细胞的干物质中约占50%,所以微生物对碳的需求最大。凡是作为微生物细胞结构或代谢产物中碳架来源的营养物质,称为碳源。作为微生物营养的碳源物质种类很多,从简单的无机物(CO2、碳酸盐)到复杂的有机含碳化合物(糖、糖的衍生物、脂类、醇类、有机酸、芳香化合物及各种含碳化合物等)。但不同微生物利用碳源的能力不同,假单孢菌属可利用90种以上的碳源,甲烷氧化菌仅利用两种有机物:甲烷和甲醇,某些纤维素分解菌只能利用纤维素。大多数微生物是异养型,以有机化合物为碳源。能够利用的碳源种类很多,其中糖类是最好的碳源。异养微生物将碳源在体内经一系列复杂的化学反应,最终用于构成细胞物质,或为机体提供生理活动所需的能量。所以,碳源往往也是能源物质。自养菌以CO2、碳酸盐为唯一或主要的碳源。CO2是被彻底氧化的物质,其转化成细胞成分是一个还原过程。因此,这类微生物同时需要从光或其他无机物氧化获得能量。这类微生物的碳源和能源分别属于不同物质。③ 氮源凡是构成微生物细胞的物质或代谢产物中氮元素来源的营养物质,称为氮源。细胞干物质中氮的含量仅次于碳和氧。氮是组成核酸和蛋白质的重要元素,氮对微生物的生长发育有着重要作用。从分子态的N2到复杂的含氮化合物都能够被不同微生物所利用,而不同类型的微生物能够利用的氮源差异较大。固氮微生物能利用分子态N2合成自己需要的氨基酸和蛋白质,也能利用无机氮和有机氮化物,但在这种情况下,它们便失去了固氮能力。此外,有些光合细菌、蓝藻和真菌也有固氮作用。许多腐生细菌和动植物的病原菌不能固氮,一般利用铵盐或其他含氮盐作氮源。硝酸盐必须先还原为NH+4后,才能用于生物合成。以无机氮化物为唯一氮源的微生物都能利用铵盐,但它们并不都能利用硝酸盐。有机氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、玉米浆等,工业上能够用黄豆饼粉、花生饼粉和鱼粉等作为氮源。有机氮源中的氮往往是蛋白质或其降解产物。氮源一般只提供合成细胞质和细胞中其他结构的原料,不作为能源。只有少数细菌,如硝化细菌利用铵盐、硝酸盐作氮源和能源。④ 无机盐无机盐也是微生物生长所不可缺少的营养物质。其主要功能是:① 构成细胞的组成成分;② 作为酶的组成成分;③ 维持酶的活性;④ 调节细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位;⑤ 作为某些自氧菌的能源。磷、硫、钾、钠、钙、镁等盐参与细胞结构组成,并与能量转移、细胞透性调节功能有关。微生物对它们的需求量较大(10-4~10-3 mol/L),称为“宏量元素”。没有它们,微生物就无法生长。铁、锰、铜、钴、锌、钼等盐一般是酶的辅因子,需求量不大(10-8~10-6 mol/L),所以,称为“微量元素”。不同微生物对以上各种元素的需求量各不相同。铁元素介于宏量和微量元素之间。在配制培养基时,可通过添加有关化学试剂来补充宏量元素,其中首选是K2HPO4和MgSO4,它们可提供需要量很大的元素:K、P、S和Mg。微量元素在一些化学试剂、天然水和天然培养基组分中都以杂质等状态存在,在玻璃器皿等实验用品上也有少量存在,所以,不必另行加入。⑤ 生长因子一些异养型微生物在一般碳源、氮源和无机盐的培养基中培养不能生长或生长较差。当在培养基中加入某些组织(或细胞)提取液时,这些微生物就生长良好,说明这些组织或细胞中含有这些微生物生长所必须的营养因子,这些因子称为生长因子。生长因子可定义为:某些微生物本身不能从普通的碳源、氮源合成,需要额外少量加入才能满足需要的有机物质,包括氨基酸、维生素、嘌呤、嘧啶及其衍生物,有时也包括一些脂肪酸及其他膜成分。各种微生物所需的生长因子不同,有的需要多种,有的仅需要一种,有的则不需要。一种微生物所需的生长因子也会随培养条件的变化而变化,如在培养基中是否有前体物质、通气条件、pH和温度等条件,都会影响微生物对生长因子的需求。从自然界直接分离的任何微生物,在其发生营养缺陷突变前的菌株,均称为该微生物的野生型。绝大多数野生型菌株只需简单的碳源和氮源等就能生长,不需要添加生长因子;经人工诱变后,常会丧失合成某种营养物质的能力,在这些菌株生长的培养基中,必须添加某种氨基酸、嘌呤、嘧啶或维生素等生长因子。⑥ 能源能源是指为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能。化能异养型微生物的能源即碳源;化能自养型微生物的能源都是还原态的无机物,如NH4+、NO2-、S、H2S、H2、Fe2+等,它们分别属于硝化细菌、亚硝酸细菌、硫化细菌、硫细菌、氢细菌和铁细菌等。一种营养物常有一种以上营养要素的功能,即除单功能营养物外,还有双功能,甚至三功能营养物。辐射能是单功能;还原态无机养分常是双功能的(NH4+既是硝化细菌的能源,又是它的氮源)甚至是三功能的(能源、氮源和碳源);有机物常有双功能或三功能作用。(2)配制培养基必须遵循的原则微生物的培养基通常指人工配制的适合微生物生长繁殖,或积累代谢产物的营养基质。广义上说,凡是支持微生物生长繁殖的介质或材料,均可作为微生物的培养基。一个适当的培养基配方,对发酵产品的产量和质量有着极大的影响。针对不同微生物,不同的营养要求,可以有不同的培养基。但它们的配制必须遵循一定原则。① 营养物质应满足微生物的需要。不同营养类型的微生物对营养的需求差异很大,应根据菌种对各营养要素的不同要求进行配制。② 营养物的浓度及配比应恰当。营养物浓度太低,不能满足微生物生长的需要;浓度太高,又会抑制微生物生长。糖和盐浓度高有抑菌作用。碳氮比(C∶N,以还原糖含量与粗蛋白含量的比值表示):一般培养基为C∶N=100∶0.5~2。在设计培养基配比时,还应考虑避免培养基中各成分之间的相互作用,如蛋白胨、酵母膏中含有磷酸盐时,会与培养基中钙或镁离子在加热时发生沉淀作用;在高温下,还原糖也会与蛋白质或氨基酸相互作用而产生褐色物质。③ 物理、化学条件适宜。pH:各种微生物均有其生长繁殖的最适pH,细菌为7.0~8.0,放线菌为7.5~8.5,酵母为3.8~6.0,霉菌为4.0~5.8。对于具体的微生物菌种,都有各自的特定的最适pH范围,有时会大大突破上述界限。在微生物生长繁殖过程中,会产生能够引起培养基的pH改变的代谢产物,尤其是不少微生物有很强的产酸能力,如不适当地加以调节,就会抑制甚至于杀死其自身。在设计培养基时,要考虑培养基的pH调节能力。一般应加入缓冲液或CaCO3,使培养基的pH稳定。其他:培养基的其他理化指标,如水活度、渗透压也会影响微生物的培养。在配制培养基时,通常不必测定这些指标,因为培养基中各种成分及其浓度等指标的优化,已间接地确定了培养基的水活度和渗透压。此外,各种微生物培养基的氧化还原电位等也有不同的要求。④ 培养目的:培养基的成分直接影响培养目标。在设计培养基时,必须考虑是要培养菌体,还是要积累菌体代谢产物;是实验室培养,还是大规模发酵等问题。用于培养菌体的种子培养基营养成分应丰富,氮源含量宜高,即碳氮比值应低;相反,用于大量积累代谢产物的发酵培养基,氮源应比种子培养基稍低;当然,若目的产物是含氮化合物时,有时还应该提高培养基的氮源含量。在设计培养基时,还应该特别考虑到代谢产物是初级代谢产物,还是次级代谢产物。如果是次级代谢产物,还要考虑是否需加入特殊元素(如维生素B12中Co)或特殊的前体物质(如生产青霉素G时,应加入苯乙酸)。在设计培养基,尤其是大规模发酵生产用的培养基时,还应该重视培养基组分的来源和价格,应该优先选择来源广、价格低廉的培养基。(3)几种培养基的配制原则① 种子培养基:适用于微生物菌体生长的培养基,目的是为下一步发酵提供数量较多,强壮而整齐的种子细胞。一般要求氮源、维生素丰富,原料要精。② 发酵培养基:用于生产预定发酵产物的培养基,一般的发酵产物以碳源为主要元素。发酵培养基中的碳源含量往往高于种子培养基。如果产物的含氮量高,应增加氮源。在
微生物制氢发酵液中主要产物为醇和酸,如果用葡萄糖作为碳源的话,则主要为乙醇,丁醇,乙酸,丙酸,丁酸,当然还有葡萄糖这种难于出来的物质,这这些不容易出来的物质容易损坏色谱柱。我想请问,是用一个高温后处理好呢,还是定时利用溶剂清洗色谱柱效果比较好?如果高温处理,葡萄糖不能气化,会不会碳化而损坏柱子呢? 谢谢各位兄弟姐妹![em61] [em23]
发酵中的消泡剂……
在线质谱仪的构造及其在发酵过程中的应用1 质谱分析原理质谱仪需要在高真空下工作:离子源(10-3~10-5 Pa) 质量分析器(10-6 Pa)(1) 大量氧会烧坏离子源的灯丝;(2) 用作加速离子的几千伏高压会引起放电;(3) 引起额外的离子-分子反应,改变裂解模型,谱图复杂化。图1 质谱仪的结构图2 质谱分析法和工业质谱仪的组成质谱分析法是通过对被测样品离子质荷比的测定来分析其组成的一种方法。被分析的样品首先要离子化,然后利用不同离子在电场或磁场中运动行为的不同,把离子按质荷比(m/z)分开而得到质谱,通过样品的质谱和相关信息,可以得到样品的定性定量结果。实验室质谱仪种类很多,从应用的角度可以分为有机、无机、同位素、气体分析质谱仪几类。其中,数量最多,用途最广的是有机质谱仪,包括各种色谱-质谱联用仪。从所用质量分析器的不同,可分为扇形磁场、四极杆、飞行时间、离子阱、傅里叶变换质谱仪等。工业质谱仪是工业生产流程中使用的在线质谱仪,它是一种小型的气体分析质谱仪,目前使用的质量分析器有扇形磁场、四极杆、飞行时间三种。工业质谱仪一般由检测系统、真空系统、电学系统和数据处理系统几个部分组成。(1)检测系统由进样系统、离子源、质量分析器和离子检测器组成。样品由进样系统导入离子源,在离子源中被电离成正离子或负离子,离子束按质荷比大小由质量分析器分开,被检测系统接收并记录而获得质谱图。 图2 质谱仪检测系统的基本组成(2)真空系统提供和维持质谱仪正常工作所需要的高真空,通常在10-3~10-9 Pa。(3)电学系统为质谱仪的各个部件提供电源和控制电路。(4)数据处理系统快速、高效地计算和处理质谱仪获得的大量数据,并承担仪器控制的任务。2.1电子轰击型离子源 离子源是质谱仪的主要组成部件之一,其作用是使被分析的物质电离成为离子,并将离子会聚成有一定能量和一定几何形状的离子束。 在质谱分析中,常用的电离方法有电子轰击、离子轰击、原子轰击、真空放电、表面电离、场致电离、化学电离和光致电离等。各种电离方法是通过对应的各种离子源来实现的。利用具有一定能量的电子束使气态样品分子或原子
发酵是细胞大规模培养技术中最早被人们认识和利用的。发酵技术在医药、轻工、食品、农业、环保等领域的广泛应用,使这一技术在国民经济发展中发挥着越来越重要的作用。 为了提高发酵生产水平,人们首先考虑的是菌种的选育或基因工程的构建。而实际上,发酵工艺的优化,包括生物反应器中的工程问题,也同样非常重要。 发酵环境条件的优化发酵环境条件的优化是发酵过程中最基本的要求,也是最重要、最难掌握的技术指标。温度、pH值、溶氧、搅拌转速、氨离子、金属离子、营养物浓度等的优化控制,依据不同的发酵而有所不同。同时,微生物在生长的不同阶段、生产目的代谢产物的不同时期,对环境条件可能会有不同的要求。因此,应该在生物反应器内,使温度、pH值、溶氧、搅拌转速等不断变换,始终为其提供最佳的环境条件,以提高目的产物的得率。 在发酵放大实验中,一般都很注重寻找最佳的培养基配方和最佳的温度、pH值、溶氧等参数,但往往忽视了细胞代谢流的变化。例如:在溶解氧浓度的测量与控制时,关心的是最佳氧浓度或其临界值,而不注意细胞代谢时的摄氧率;用氨水调节pH值时,关心的是最佳pH值,却不注意添加氨水时的动态变化及其与其他发酵过程的参数的关系,而这些变化对细胞的生长代谢却非常重要。 基于此,华东理工大学的张嗣良提出了“以细胞代谢流分析与控制为核心的发酵工程学”的观点。他认为,必须高度重视细胞代谢流分布变化的有关现象,研究细胞代谢物质流与生物反应器物料流变化的相关性,高度重视细胞的生长变化,尽可能多地从生长变化中做出有实际价值的分析,进一步建立细胞生长变量与生物反应器的操作变量及环境变量三者之间的关系,以便有效控制细胞的代谢流,实现发酵过程的优化。 补料分批发酵技术该技术可以有效地减少发酵过程中培养基黏度升高引起的传质效率降低、降解物的阻遏和底物的反馈抑制的现象,很好地控制代谢方向,延长产物合成期和增加代谢物的积累。 所需营养物限量的补加,常用来控制营养缺陷型突变菌种,使代谢产物积累到最大。氨基酸发酵中采用这种补料分批技术最普遍,实现了准确的代谢调控。 超声波的应用超声波有很强的生物学效应。可应用于发酵过程的上、中、下游三个阶段。其在发酵工艺上的应用,可增加细胞膜的通透性和选择性,促进酶的变性或分泌,增强细胞代谢过程,从而缩短发酵时间,改善生物反应条件,提高生物产品的质量和产量。 超声波的作用机制分为热作用、空化作用和机械传质作用。热作用是超声波在介质内传播过程中,能量不断被介质吸收而使介质的温度升高的一种现象,可用于杀菌或使酶失活。空化作用是超声波在介质中传播时,液体中分子的平均距离随着分子的振动而变化。当其超过保持液体作用的临界分子间距,就形成空化(空泡)。空泡内可产生瞬间高温高压并伴有强大的冲击波或射线流等,这足以改变细胞的壁膜结构,使细胞内外发生物质交换。机械传质作用是超声波在介质中传播时,可使介质质点进入振动状态,加速发酵液的质量传递,提高发酵过程的反应速度。 超声波可广泛应用于生物发酵工程。不同频率和强度的超声波对发酵过程的作用是不同的,使用时应视具体的发酵工艺和使用条件进行选择。 增加前体物的合成增加目的产物的前体物的合成或是直接添加前体物,均有利于目的产物的大量积累。如:在氨基酸的发酵中,通常在微生物的培养中加入前体,生产氨基酸;在花生四烯酸的发酵中,通过增加前体物或是加强糖代谢的途径,增加其前体物的合成,均有助于提高花生四烯酸的产量。 去除代谢终产物改变细胞膜的通透性,把属于反馈控制因子的终产物迅速不断地排出细胞外,不使终产物积累到可引起反馈调节的浓度,即可以预防反馈控制。 发酵工艺优化的方法有很多,它们之间不是孤立的,而是相互联系的。在一种发酵中,往往是多种优化方法的结合,其目的就是要控制发酵,按照自己的设计,生产出更多、更好的产品。
一、准备1、检查蒸汽管道、阀门、电机、电源、饮用水管是否有泄漏点或接通;如果有的管有泄漏点,及时更换乳胶管!2、检查发酵罐轴封、夹层、搅拌、视镜阀是否正常;出现异常则及时添加甘油(密封用)。3、用自来水清洗洁净本机内壁;一般上午开机后清洗3-5次,直至流出的水清亮为止。4、用蒸汽空消发酵罐设施及相关管道系统;5、拧开投料口盖镙栓,启动饮用水泵电源按钮,按工艺要求加入饮用水和投入生产用原、辅物料,拧紧投料口盖镙栓;6、关循环水进水阀,开排水阀,将夹层储水排干净;7、检查机器各部份紧固件是否松动和齐全。乳胶塞子要及时更换新的,避免染菌造成不必要的麻烦!!补充:空消在投料前,气路、料路、种子罐、发酵罐、碱罐、消泡罐必须用蒸汽进行灭菌,消除所有死角的杂菌,保证系统处于无菌状态。1. 空气管路的空消(1) 空气管路上有三级预过滤器,冷干机和除菌过滤器。预过滤器和冷干机不能用蒸汽灭菌,因此在空气管路通蒸汽前,必须将通向预过滤器的阀门关闭,使蒸汽通过减压阀、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。(2) 除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压,因此,蒸汽减压阀必须调整在0.13Mpa,不得超过0.15MPa。(3) 空消过程中,除菌过滤器下端的排气阀应微微开启,排除冷凝水。(4) 空消时间应持续40分钟左右,当设备初次使用或长期不用后启动时,最好采用间歇空消,即第一次空消后,隔3~5小时再空消一次,以便消除芽孢。(5) 经空消后的过滤器,应通气吹干,约20~30分钟,然后将气路阀门关闭。2. 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐空消(1) 种子罐、发酵罐、碱罐及消泡罐是将蒸汽直
一、发酵过程检测的主要参数按性质分1. 物理参数:温度、搅拌转速、空气压力、空气流量、 物理参数:温度、搅拌转速、空气压力、空气流量、 溶解氧、表观粘度、排气氧(二氧化碳) 溶解氧、表观粘度、排气氧(二氧化碳)浓度等 2. 化学参数:基质浓度(包括糖、氮、磷)、pH、 化学参数:基质浓度(包括糖、 产物浓度、核酸量等 产物浓度、 3. 生物参数:菌丝形态、菌浓度、菌体比生长速率、 生物参数:菌丝形态、菌浓度、菌体比生长速率、 呼吸强度、基质消耗速率、 呼吸强度、基质消耗速率、关键酶活力等从检测手段分1. 直接参数:通过仪器或其它分析手段可以测得的 直接参数:参数,如温度、 、 参数,如温度、pH、残糖等在线检测参数: ①在线检测参数:不经取样直接从发酵罐上安装的仪表 得到的参数,如温度、 、搅拌转速; 上 得到的参数,如温度、pH、搅拌转速; 离线检测参数:取出样后测定得到的参数,如残糖、 ②离线检测参数:取出样后测定得到的参数,如残糖、 NH2-N、菌体浓度。 、菌体浓度。2. 间接参数:将直接参数经过计算得到的参数,如 间接参数:将直接参数经过计算得到的参数,摄氧率、 摄氧率、KLa等 等二、发酵过程参数常用检测方法及仪器主要参数检测原理及仪器• 取样系统十分重要。 生物反应过程大多为纯培养,无菌操作十分重要 生物反应过程大多为纯培养,无菌操作十分重要。 问题 1. 三角瓶内的培养液如何取样? 三角瓶内的培养液如何取样? 2. 发酵罐常用取样方式可否知道? 发酵罐常用取样方式可否知道?• 溶氧的检测1、常用检测方法:溶氧电极法 、常用检测方法:思考:溶氧电极如何标定? 思考:溶氧电极如何标定?2、电极的标定 、一般测定中应进行以下二点标定 一般测定中应进行以下二点标定 (1)零点标定 ) 用饱和Na 作无氧状态的溶液, 用饱和 2SO3作无氧状态的溶液,将氧电极放入 该溶液中,显示仪表上可见溶氧浓度下降, 该溶液中,显示仪表上可见溶氧浓度下降,待下降 稳定后,调节零点旋钮显示零值。 稳定后,调节零点旋钮显示零值。 (2)饱和校正(满刻度) )饱和校正(满刻度) 进行简便测定时,可以采取空气饱和方式。将电 进行简便测定时,可以采取空气饱和方式。 极放入培养液中,通气搅拌一段时间, 极放入培养液中,通气搅拌一段时间,显示仪上 可见溶氧上升,待上升稳定, 可见溶氧上升,待上升稳定,调节满刻度旋钮至 100%即为饱和值。 即为饱和值。 即为饱和值主要参数检测原理及仪器
核心提示:华中正大 关锋义一、在发酵过程中溶解氧进行控制的意义 在反应器中氧参与菌体的生长、产物的形成和维持细胞的代谢。氧是难溶华中正大 关锋义一、在发酵过程中溶解氧进行控制的意义· 在反应器中氧参与菌体的生长、产物的形成和维持细胞的代谢。氧是难溶于水的气体,在室温及常压条件下,纯氧的溶解度仅为36mg/L,空气中氧的溶解度仅为8mg/L。当水中溶有糖或其它盐类时,氧的溶解度则更低。· 以谷氨酸发酵一、在发酵过程中溶解氧进行控制的意义为例,同化100g葡萄糖需耗氧41.4g,而培养基中溶解氧只够菌体生长14s的消耗。因此足够的通风供氧对好氧氨基酸发酵非常关键。· 在工业发酵中产率是否受氧的限制,单凭通气量的大小是难以确定的。因溶解氧的高低不仅取决于供氧、通气搅拌等,还取决于需氧状况。故了解溶解氧是否够的最简便又有效的办法是就地监测发酵液中的溶解氧浓度。从溶解氧变化的情况可以了解氧的供需规律及其对生长和产物合成的影响。· 在发酵过程中溶解氧低于某一临界值,就会影响菌体的生长与产物的合成,但并不是维持溶解氧越高越好。即使是专性好气菌,过高的溶解氧对生长可能不利,而且有可能改变其代谢途径,不利于目的产物的合成。· 了解发酵过程中溶解氧和其他参数间的关系,可以通过观察发酵溶解氧的异常变化,及时发现生产可能出现的问题,如某些操作故障或事故、中间补料是否得当、污染杂菌等,以便尽早采取措施补救。· 在发酵过程中进行溶解氧的控制,可以“按需供风”,调节不同发酵罐批不同发酵时段间的供氧水平,以达到节能降耗,降低生产成本之目的。二、在金霉素发酵过程中溶解氧的变化规律· 金霉素生长、代谢过程可从培养液中溶氧浓度的变化反映出菌体的生长生理状况。· 在金霉素发酵过程的不同阶段,随着发酵培养体积的不断增加和菌体的生长代谢的不断变化,发酵罐内溶氧值不同,按一定规律变化。一般情况下,发酵接种后1-5小时为适应期,溶氧值最高;5-15小时,经过适应期后,需氧量上升,溶氧值较高;15-40小时,随着菌体的生长代谢旺盛,需氧量大增,溶氧值最低;40-80小时,需氧量中等,溶氧值回升;80-124小时,需氧量较少,溶氧值较高。 三、金霉素发酵罐DO控制系统· 1. 空气流量检测与控制系统· 1.1 空气流量检测系统使用由重庆耐德仪器仪表有限公司生产的涡街流量计,型号为YYW-A-125-DIII R/DBLU-20125A2B1PAT1P1/S/YYW-A1-200-DXQIIIR-B ,量程为0-2218.2m3/0-4800m3· 1.2 空气流量控制系统使用ZJHP-16B-125/ZJHP-16B-200气动单座调节阀,适用温度-17℃-220℃、流量特性为线性。· 2. 溶解氧检测系统使用由Mettler生产的InPro6800/120溶氧电极,可适应发酵高温消毒条件;DO变送器4100e ,具有自动手动自检、编程、校准等功能。· 3. 溶解氧控制系统采用美国Honeywell公司S9000控制系统/北京康拓生化公司的KT3000控制系统的2个PID回路组成1个串级PID调节单元。达到可分时段改变设定值,各时段空气流量在不低于设定值前提下溶氧值按设定值调节的控制目标。均由北京康拓生化公司集成、指导安装与调试运行。· 发酵罐DO未控制罐批曲线· 发酵罐DO控制罐批曲线· 溶氧控制发酵中的一些现象· 溶氧控制发酵前期和后期因空气流量较小,罐压较低有时出现泡沫大的现象,可关小排气阀门进行改善。· 溶氧控制改善了发酵10-30h的过速生长现象。· 发酵前期偏低的通气量会使生长迟滞,偏高的通气量会使生长过速,失去控制溶氧的意义,前期通气量需控制在合适的水平。· 发酵过程DO自控实施效果· 金霉素发酵DO自控试验总结论· 采用单因素方差分析方法,分析结论为:对发酵过程进行DO自控,与发酵最为紧密的发酵指标:发酵周期、发酵效价、补糖量、通氨量、提炼收率均无显著性差异,产品质量指标无显著性差异。· 通过对三个发酵车间对照组与试验组数据对比,发现试验组通氨量会有所降低(2-7%),TC会有所升高(2-3%)。· 三个发酵车间同时实施DO自控,总节气率为26.9%,每年可节电1200万KW·h。
初发酵培养24h为阴性,是否可以结束实验,最后查mpn表也以初发酵的结果来查?还是说要继续培养至48h,或者依旧要做复发酵实验?
一直以来关于牛奶酸奶的各种传言风波不断,复原乳酸奶的风波已经被传的沸沸扬扬,一时间人们开始对酸奶的配制清单格外留心,生怕一不小心买了复原乳制得的酸奶。其实是发酵乳还是复原乳很多消费者是傻傻分不清楚的,百度百科上解释复原乳又称“还原乳”或“还原奶”,是指把牛奶浓缩、干燥成为浓缩乳或乳粉,再添加适量水,制成与原乳中水、固体物比例相当的乳液。而发酵乳(酸乳)则是乳和乳制品在特征菌的作用下发酵而成的酸性凝乳状制品,该类产品在保质期内的特征菌必须大量存在,能继续存活且具有活性。单不考虑复原乳营养价值如何,复原乳和鲜牛奶制得的酸奶在味道上是否有很大的差异,差异表现在哪里,作为消费者我们也并不知道,为此又要用到我们味觉检测神器“电子舌”了。 将两种酸奶与纯净水按照1:1的比例混合搅拌均匀后离心,取上清液用于电子舌测试。将测试的实验结果以柱形图的方式展示见下图所示。图中蓝色代表发酵乳,红色代表复原乳制得的酸奶,可见在苦味、涩味、涩的回味和甜味方面,复原乳制得的酸奶均要高于发酵乳,尤其是苦味值相差较多。而对于鲜味和咸味复原乳制得的酸奶则要弱于发酵乳了,可见复原乳经过多次高温处理多少会发生一些变化。 由此可见原材料的不同制得的酸奶在味道上还是会存在一定的差异的,营养价值另当别论,在味道上两者是会存在一定差异的。孰好孰坏并不能单从口味上来看,喜爱不同,对味道的要求也不一样。[align=center][img=,690,474]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807101831506693_3188_2973932_3.jpg!w690x474.jpg[/img][/align]
这不是实验室普通化学分析使用的PH电极,是安装在生物工程发酵大罐上在线测量PH的电极,价格可不低,梅家报价好几千元一只。面对生物发酵罐的高温消毒、有一定罐压、多种有机和无机物质混合液体介质、发酵周期长等复杂条件,这种在线PH电极要比实验室PH计的普通电极在设计、选材、制造方面有更高的要求。下面解剖一只从发酵大罐上换下来的一只PH电极,让我们仔细看看其内部结构。[b]一、生物发酵罐PH电极基本情况[/b]发酵罐使用的在线PH计示意图如下(其它传感器温度、溶氧、压力等未画出),一般在罐体中下部位,用带压力表的专用金属护套进行安装。[img=,617,466]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241849446717_8569_1807987_3.jpg!w617x466.jpg[/img]新的梅特勒PH电极是下图这样的,型号465-50-SC-P-S7/9848。它是一种可添加液态电解质的工业PH电极,使用在生物发酵罐上,能够经受住高温消毒、适当罐压、发酵液成分复杂、长时间持续地进行精确测量:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241849450349_526_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]这是添加电解质口,存放时用橡胶塞封住,避免漏液:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241849454640_7796_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]前端,用缓冲液罩住电极头,保护指示电极(玻璃电极)的敏感膜。梅特勒的这种电极采用曾获得专利的银离子阱技术,可防止在硫化物介质内的隔膜表面形成大量的硫化银,从而延长了电极的使用寿命。玻璃电极与参比电极分别在粗细两只玻璃管中,外面是管壁较厚的大玻璃保护管。可以看见参比电极中的银离子阱及各段没变色。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241849458590_3596_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]在发酵罐内耐高温消毒,适应成分比较复杂的发酵液体介质,是这只PH电极的特性。取下缓冲液罩,看看电极头上两侧的隔膜(络液部),它的材质是微孔陶瓷。如果在使用中被硫离子污染,会变黑色;被蛋白质污染,会发黄:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241849461797_5244_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]绘出电极结构图如下,对各部分关系看得更清楚:[img=,600,792]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241849467431_8686_1807987_3.jpg!w600x792.jpg[/img]电极头局部的放大图形:[img=,690,516]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910242113336309_7074_1807987_3.jpg!w690x516.jpg[/img][b]二、PH电极拆解[/b]下面,是这次要拆解的车间已报废PH电极,安装在有压力表的金属护套中。生产车间环境不好,外观比较脏:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241849474777_3519_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]打开护套,看见里面安装的电极:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241849478202_6586_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]护套上的压力表,最大量程10bar。工作时,护套内压力应保持高于罐内压力1.5bar以上的正压力([color=red]注意:最高不能超过6bar![/color]):[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241849442747_8284_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]从护套中取出电极:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856152980_5536_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856156450_3694_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]电极外玻壳上印有型号465-50-SC-P-S7/9848,PH测量范围0~12,工作温度0~130℃,电极杆长度(细杆部分)150mm,加液最大限位线等:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856160090_7444_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]电极头部分:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856163878_6915_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]这个角度看,大玻璃管内有一粗一细两根玻璃管。粗玻璃管是指示电极导线支撑管,导线的两个折弯之间是内缓冲液液位,这只电极的内缓冲液液位已经在下限位置(这种标示方式,有些像汽车的机油尺)。细玻璃管是参比电极导线支撑管:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856168581_6577_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]为了看得更仔细,敲碎玻璃管外壳。不小心,粗玻璃管内的玻璃电极导线连接处折断了:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856171839_4663_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]进一步剥离后,玻璃电极与参比电极信号引出的连接处:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856175369_6276_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]玻璃电极信号引出的连接处采用镀金接插件,确保接触良好:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856179609_7110_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]电信号采用S7型电缆插接头,也是镀金的:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856184130_3427_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]电极头部位。粗玻璃管(玻璃电极引线支撑管)直通敏感膜球泡,内部有内缓冲溶液;细玻璃管是参比电极支撑管,在旁边:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241856147129_962_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]将玻璃电极的粗玻璃管敲脱掉,看见管内的电极引线直通达敏感膜球泡内:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241903286191_613_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]玻璃电极引线直径0.6mm,材质采用银/氯化银。它是在银丝上镀了一层AgCl沉淀制作而成。在显微镜下观察,头部的氯化银镀层已经严重腐蚀:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241903289891_350_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]电极引线上其它部位表面的腐蚀情况(视觉关系,看似花斑,实际是腐蚀坑):[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241903293641_8767_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,515]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241903297201_7108_1807987_3.jpg!w690x515.jpg[/img]电极引线在弯折部位表面的腐蚀轻微:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241903300751_676_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]敏感膜球泡部位,是一种特殊玻璃膜,大约厚0.3mm,表面不太光滑,有一些蚀坑:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241903303811_6890_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]从内部看,两侧的微孔陶瓷隔膜已经发黑,说明发酵介质内含有有硫离子在隔膜中形成了硫化银(正常使用时,应用专用隔膜清洁剂清洗):[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241903307962_2765_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]下面是参比电极,由于甘汞电极在70℃以上时电位值不稳定,而发酵罐消毒时,湿热温度达到120℃,因此采用银/氯化银电极。此报废电极的AgCl混合物段及银离子阱已变成黑色:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241903311621_5776_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]参比电极的前端,用多间隙的棉花纤维塞住,便于浸入参比电解质溶液:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241909390221_1822_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]敲碎参比电极玻璃管,看看内部的芯结构。银离子阱和AgCl混合物段已成黑泥状:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241903278841_4883_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]管内的棉花纤维:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241912319917_6180_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]参比电极信号引线分为两个部分,前端(参比电极头)为Ag/AgCl引线,后段(接电缆头)为Ag引线:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241912324717_64_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]参比电极引线前端(Ag/AgCl)的显微图片,表面的AgCl镀层呈灰黑色,没见到蚀斑:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241912328177_5979_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]参比电极后段的银引线,直径0.4mm,由于密封在细玻璃管内,没有任何腐蚀,自然光下呈银白色,在显微镜下呈现为黑色:[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241912331041_5709_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img]拆解后的零件见下图,很简单。关键技术还在梅家电极制作的设计、材料、工艺等内在方面体现出来,使得电极适应生物工程发酵的条件,准确度高、寿命较长。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910241912315751_1942_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][b]三、使用注意事项[/b]通过对梅特勒发酵工程PH电极拆解,看来还是比较娇气的。其寿命取决于使用条件和精心维护。注意以下几个方面: 经常巡视护套压力表,保持正常工作压力(罐压+1.5bar≤护套内压力≤6bar); 及时添加补足电解质溶液; 做好对电极的常规清洁。对一般性污染,用水、0.1mol/l NaOH或0.1mol/l HCl清洗电极数分钟。油脂或有机物污染,用丙酮或乙醇清洗电极数秒钟;当隔膜发黄,及时使用专用清洁剂(9891)清洁蛋白质污染;当隔膜发黑,及时使用专用清洁剂(9892)清洁硫化物污染; 电极较长时间不用时,应按说明书要求保存在合适的液体中; 电极不能长期干放,不能在表面附有干燥介质时贮存电极; 发酵罐检修或闲置时,应取下电极妥善保管,避免受到意外损坏; 电极敏感膜钝化后,可以使用梅特勒的电极再生液(9895)进行有限再生。再生处理后,应进行校准。
110种发酵培养基!!
引用氮氮的欢乐 的 谈工业发酵各阶段培养基的要求工业发酵中利用生产菌发酵得出最终产物是一个逐级放大的过程,各个不同的阶段对于营养成分的要求也各有特点,根据发酵不同阶段的要求,培养基可分为孢子培养基、种子培养基和发酵培养基三种。 孢子培养基孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基,对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长,产生较多优质的孢子,并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是:第一,营养不要太丰富(特别是有机氮源),否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖-硝酸盐-其它盐类的培养基上都能很好地生长和产孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只长菌丝而不长孢子。第二,所用无机盐的浓度要适量,不然也会影响孢子量和孢子颜色。第三,要注意孢子培养基的pH和湿度。生产上常用的孢子培养基有:麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作霉菌孢子培养基,因为它们含氮量少,疏松、表面积大,所以是较好孢子培养基。大米培养基的水分需控制在21%-50%,而曲房空气湿度需控制在90%-100%。 种子培养基种子培养基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体,并使菌体长得粗壮,成为活力强的“种子”。所以种子培养基的营养成分要求比较丰富和完全,氮源和维生素的含量也要高些,但总浓度以略稀薄为好,这样可达到较高的溶解氧,供大量菌体生长繁殖。种子培养基的成分要考虑在微生物代谢过程中能维持稳定的pH,其组成还要根据不同菌种的生理特征而定。一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源,因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用,有利于菌体迅速生长,所以在种子培养基中常包括有机及无机氮源。最后一级的种子培养基的成分最好能较接近发酵培养基,这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应,快速生长。 发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时,则可考虑培养基用分批补料来加以满足。 根据发酵生产各阶段菌体对营养的需求可以大概看出,孢子阶段培养基要求营养简单少量;种子阶段培养基要求丰富完全,特别是氮与维生素含量要高;发酵阶段培养基要求在足够维持适当生长之余与产物相关联,能提供部分前体、特定成分。安琪酵母公司生产的安琪酵母浸出物采用纯化培养的高蛋白面包酵母,经过自溶酶解、分离、真空浓缩、喷雾干燥等工序精制而成。有安全性好,适用面广;稳定性高,重复性好;营养全面,量化控制;澄清度高,利于提取;颜色浅,营养损失少等诸多优点。富含蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、维生素、微量元素等营养成分,比例协调,同时采用生物酶解技术,使营养物质高效定向降解,可为菌体生长培养提供全面均衡的营养。除了作为优质的种子阶段培养基氮源外,在发酵阶段同样能为维持菌体茁壮稳定提供充足的营养,尤其是以初体产谢产物为终产物的发酵,安琪酵母浸出物所含的种类齐全的氨基酸,核苷酸,各种维生素与矿质元素更是作为前体、促进剂发挥着重要的作用;而且其澄清度高,发酵残留少的特点,又大大减少了产品的提取纯化的难度与消耗,协助企业向清洁化,高效化,环保化生产发展。 安琪酵母浸出物以其优异的品质,在发酵工业飞速发展的今天,定会得到更广泛的应用,为生物产业的腾飞作出更大的贡献[/
分离发酵液中不同分子量物质我是做豌豆酸浆的发酵的,老板让我先把发酵液分离成不同分子量的两种溶液,一种是大分子量,一种小分子量。我应该用什么来做呢?是超滤还是层析?本人刚做实验属新手。。。。忘大家不吝赐教!!!我的分离后的各组分都需要用。用透析袋透析可以吗?但是我买的透析袋是常常的一条带子,只有2,3十厘米宽。和“袋子”差距很大啊。谁知道怎么用吗?
发酵工艺学,各种酒类的发酵工艺^_^
一、青霉素的发酵工艺过程一、工艺流程中国植提论坛|植提网(1)丝状菌三级发酵工艺流程冷冻管(25°C,孢子培养,7天)——斜面母瓶(25°C,孢子培养,7天)——大米孢子(26°C,种子培养56h,1:1.5vvm)——一级种子培养液(27°C,种子培养,24h,1:1.5vvm)——二级种子培养液(27~26°C,发酵,7天,1:0.95vvm)——发酵液。(2)球状菌二级发酵工艺流程&N-x$y5g2L8k冷冻管(25°C,孢子培养,6~8天)——亲米(25°C,孢子培养,8~10天)——生产米(28°C,孢子培养,56~60h,1:1.5vvm)[size
[color=#00008B][size=2][size=4][font=楷体_GB2312]请问赛多利斯实验室5L发酵罐酸度计更换一个要多少钱?必须配套使用赛多利斯品牌的吗?我实验室的破损了。。。[/font][/size][/size][/color][em09509]
求问医院水样粪大肠多管发酵法检测,初发酵时刚加样品就培养基由紫色变为黄色是什么原因水样pH测定5-6左右,稀释十倍后测定培养基颜色为紫色,是医院废水里含消毒液次氯酸含量高使培养基褪色了吗?