Cellscreen系统第一次实现了可重复对细胞培养进行观察。无需染色、无需制样,通过光学图像分析将细胞培养的生长曲线保存;与其它现有测试方法相比,Cellscreen系统对细胞培养无损伤性,独立性。第一次实现了对同一细胞培养区域进行多次测量。Cellscreen技术证明是一种精确的、可靠的、自定义实验条件、操作方便、节省成本的方法。Cellscreen能优化和加速新产品和测试程序的开发。 Cellscreen应用领域 Cellscreen模块化设计能适用于更广范的领域,例如: 制药研究:Cellscreen系统能缩短常规科研究时间,能拍摄细胞生长因子的各种因素,如毒性测试及生物适应性的测试。 生物技术研究:Cellscreen系统适用于增殖研究、过程(培养基)最优化、质量控制。另外,用于拍摄克隆细胞实验的新性质,如应用在新的治疗蛋白和抗体的研究。 Cellscreen系统的优势: l缩短制药研发的时间周期 l对细胞培养无损伤—细胞可再用于其它研究 l可扩展的详细的结果描述,对细胞培养过程的文档和图像存档 l与现有的方法相比,更精确——可靠、重复性、自定义 l很容易融入到日常实验 l很容易操作Multiwellplate l特别低的操作成本-对所有的测量只需要一个培养皿,不需试剂、不需对细胞染色。 l节省时间—不需样品制备 l技术成熟—innovatesAG图像识别技术 l模块化设计—系统可扩展其它分析模块 Cellscreen系统模块化设计: 为满足广泛的分析需求,Cellscreen系统是按模块化设计,能运行不同的软件系统。硬件由一个双处理器电脑及控制单元组成,控制单元通过高精度电机台自动聚焦、自动调光来控制显微镜;不同的软件模块对数码相机获取的图像进行分析,分析所得的图像和数据存储在终端数据库。 软件模块包括: l悬浮细胞的增殖研究模块(PS模块) l贴壁细胞的增殖研究模块(PA) l克隆细胞实验模块(CL) 细胞增殖研究模块(PS和PA)能重复观测细胞培养的生长因子,CL模块观察克隆细胞,并能追随到起源的单克隆细胞。 克隆细胞实验模块(CL) 在整个培养过程中,CL模块自动监控单个克隆细胞到群体的生长过程;为了证明细胞群体的单克隆细胞起源,需要监控整个生长过程。 Cellscreen系统用40倍放大系数抓取容器低部的16幅图像,它能代表整个容器的状态。 所有获得的图像和数据存档到数据库,因此可以跟踪任何生物群体的成长过程,证明生物群体起源的单克隆细胞。 很好的保护—Cellscreen的培养器 Cellscreen的培养器精确的安装在显微镜上,在测量过程中,对您贵重的细胞培养,它保持一个稳定的环境。对温度和CO2的浓度能精确的控制。培养器可以长时间或频繁的监控微量滴定盘,而不需移动它。 贴壁细胞的增殖研究模块(PA) PA模块通过测量细胞覆盖区域,用户可以观察到贴壁细胞的增殖。PA以40放大倍数获得图像。系统可以自由选择培养皿的区域。这系统适用于所有通用的微量滴定盘规格(6-96眼)。结果以图像和曲线的形式表示出来。PA模块将所有的图像和结果存档,输出格式CSV(兼容Excel格式)。 PA模块精确的测量至少80%细胞的生长因子,用于科研、发展、研制新产品。 悬浮细胞的增殖研究模块(PS) PS模块通常应用在对细胞生长因子影响的研究。为了获得生长曲线,悬浮液里培育的细胞数量被重复的量化——时间、原料、操作的消耗成本。对同一培养皿里的细胞生长,PS模块能重复计数、消除对每次测量都需要更换盘子的影响。 另外,Cellscreen系统对每个细胞进行计数,相对现存的细胞计数方法,它有很高的精确性。PS模块用的是100放大倍数,它获得的图像有很好的分辨率,能提供出细胞直径和细胞形状的一些信息。 Cellscreen系统概述 很容易综合到您的日常工作中——易学易用 实验和测量的标准化 在准备阶段,用户按要求设定实验配置。对实验条件有详细选择和描述,例如:微量滴定盘上的哪个培养皿,培养皿里哪个区域需要检测;另外一些参数需要选定,如:体积、细胞类型、培养方法、细胞直径。因为无需吸液管,其它方法中隐含的误差就很容易避免。 图像清晰、分析准确 现在的测量方法里,用CCD相机拍摄图像,对每一幅图片用相同的技术指标聚焦。 Cellscreen精确的控制技术保证,在每一个测量过程中,准确的拍摄培养皿的同一区域;因此对每一选择的区域,用户可以跟踪细胞的生长过程;PS软件对选定区域的细胞进行计数;CL和PA软件用来测定克隆细胞和悬浮细胞的表面区域。 广泛和详细的结果陈述 用户可以选择结果的描述方式:如照片、生长曲线、细胞浓度曲线图或幻灯片,用来证明细胞生长发育的全过程。所有的信息,如实验设置、图像的获得、处理结果以及一些简单的实验文档都自动保存在终端数据库。
德国科学家日前成功获取了显示单细胞酵母菌内部构成的高分辨率三维图片,为研究更高级别的生物提供了新的依据。 据此间媒体30日报道,位于海德堡的欧洲分子生物实验室的科学家们使用电子束从不同角度照射酵母菌细胞,再通过电脑组合完成了这张细胞内部结构高清图片。图片除了显示细胞核 及其他组成部分外,还可以显示细胞内细微的丝状物。通过类似的方式,科学家也获取了人脑细胞内部结构的图片。 科学家认为,如同人体由骨骼支撑一样,一个细胞内部的组成部分也决定了细胞的结构和形状。单细胞的酵母菌被认为能够为研究包括人类在内的高级生物提供依据。来源:新华网
[center]人类首次拍摄寄生虫感染细胞图像 有利研发疫苗[/center]美国新出版的《公共科学图书馆• 病原体》杂志报告说,澳大利亚悉尼世纪研究所的科学家利用独创的技术,首次成功地拍摄记录下了细胞被寄生虫感染以及寄生虫随后开始向全身传播的图像。 悉尼世纪研究所免疫成像项目主任沃夫冈• 温宁格教授介绍说,他们的研究借助了能够实时观察活细胞的大功率多光子显微镜。他表示,皮肤中的树状细胞是他们研究的对象。他们发现,在正常条件下,表皮内的细胞处于静止状态,而真皮内的细胞却极其活跃,不停地移动,似乎是在搜寻病原体。在人为地将利什曼虫(Leishmania)引入细胞中后,他们观察到了寄生虫被细胞“拾起”以及开始向整个身体蔓延的过程。 利什曼病是一种经由沙蝇叮咬所传播的原虫疾病。据估计,在非洲、中东和南美某些地区,利什曼病的感染患者近1200万人,每年新增病例大概200万宗。利什曼病导致患者皮肤溃疡,并能影响病人的内脏,如脾、肝和骨髓。如果不采取治疗措施,那么病人或许会有生命危险。 直观跟踪病原体在细胞中的活动状况,为人们设计和研发防病疫苗提供了重要条件。温宁格表示,通过研究,他和同事对病原体如何被免疫系统识别以及参与的细胞有了基本了解。这意味着人们能分析那些可以识别帮助利什曼虫病原体感染患者的分子,并将这些分子作为疫苗针对的目标。此外,他们还能了解其他感染的免疫反应,以便开发出更好的疫苗。 世纪研究所执行理事马修• 瓦达斯教授认为,帮助研究人员拍摄免疫过程的多光子显微镜如同医学研究中的哈勃望远镜。哈勃让人们清晰地观察宇宙万物,而多光子显微镜则提供了独特的细胞观察方法,帮助人们全新地了解免疫系统是如何工作的。信息来源:科技日报
[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2008/06/200806161533_93273_1622715_3.jpg[/img]用三维结构照明显微镜拍下的细胞核影像[flash]http://www.youtube.com/v/Xib7yoZKspk&hl=en[/flash] 据美国《连线》杂志报道,一种新型的显微镜能够展示高清晰度、多色彩的三维画面,它比以前用的传统显微镜能揭示出更多的细节。此技术能区别细胞内彩色立体的组成结构,捕捉多色彩的三维立体细胞的画面,甚至能够给细胞不同的成份标记上不同的颜色。即使它们只相隔100纳米远,也能分别得清楚。这是一个前所未有的壮举。这一新的发展使得分子细胞生物学有了令人感兴趣的新视角。此研究成果发表在6月6日出版的《科学》杂志上。 德国慕尼黑路德维格-马克西米利安大学(Ludwig Maximilians University)完整蛋白质科学研究中心的赫恩里其劳恩哈德说:“我们为你先前没有看到和研究过的全新结构领域开启了大门。” 光学显微镜具有衍射局限性,其清晰度通常不足大约一半的可见光光波长度,约200纳米。如果二个物体靠近的距离小于这一数字,它们就无法将它们彼此识别出来。而使用更短波长的电子显微镜能看到更加细微的物体,但只限于黑白图像,且只能观察既薄又小的样本。如今,劳恩哈德小组研发的这种新型的显微镜――三维结构照明显微镜(3D-SIM)却打破了这些限制,可以给最细微的样本结构拍下亮丽的立体图像。 三维结构照明显微镜的原理是通过提取这些细微样本制造的干涉图,在电脑的帮助下重建其图像,即使在样本形状不能直接显现的情况下,此显微镜也能提取其形状有关的信息。劳恩哈德解释说,这就像你扫描一张打印照片时所出现的情况,你的眼睛不能分辨出此照片上非常细小的彩色点,但扫描仪能做到,但让你失望的是你看到了扫描图像上布满波纹和阴影。然而,这些干涉图确实包含有价值的信息,“在数学和电脑的帮助下,我们能利用这个来重建其图像。” 确实,劳恩哈德小组利用它在大约100纳米的分辨率下来观看到了哺乳动物老鼠的细胞,制造了高清晰度的图像,呈现出3种不同荧光颜色,而且DNA、细胞核膜和膜孔都分别加有标签。 此技术可以更加细致地研究染色体和其它细胞组成部件是如何在细胞空间里分布的,甚至还能区别DNA片段中哪些是活跃基因哪些是非活跃基因,这对研究衰老和疾病很有帮助。(尼特)
科技日报 2012年04月25日 星期三 本报讯 实时3D微观组织成像技术的出现不啻为癌症诊断、微创手术和眼科等医疗领域的一场革命。据物理学家组织网4月23日报道,美国伊利诺伊大学的研究人员开发出用计算自适应光学系统校正光学层析成像的畸变技术,给未来医疗的“高清”成像带来前景。相关技术成果刊登在最新一期美国《国家科学院学报》在线版上。 美国贝克曼研究所高级科学和技术博士后研究员史蒂芬说:“该技术能够超越现在的光学系统,最终获得最佳品质的图像和三维数据。这将是非常有用的实时成像技术。” 畸变如散光或扭曲困扰着高分辨率成像。其会使对象细点的地方看上去如斑点或条纹。分辨率越高,问题会变得更糟糕。这是在组织成像中特别棘手的问题,而精度对于正确诊断至关重要。 自适应光学可以校正成像的畸变,被广泛应用于天文学来校正当星光过滤器通过大气层的变形。医学科学家已经开始将这种自适应光学系统的硬件应用于显微镜,希望能改善细胞和组织成像。 但伊利诺伊大学生物工程内科医学的电子和计算机工程教授斯蒂芬指出,这同样富有挑战,将其应用于组织、细胞成像,而不是通过大气对星星成像,存在很多光学上的问题。基于硬件的自适应光学系统复杂而昂贵,调整繁琐,故不太适用于医疗扫描。 由此,该团队采用计算机软件来发现并纠正图像畸变,替代硬件的自适应光学,称为计算自适应光学技术。研究人员用此技术演示了大鼠肺组织含有微观粒子凝胶的幻影。用光学成像设备干涉显微镜的两束光扫描组织样本,计算机收集所有数据后,纠正所有的深度图像,使模糊的条纹变成尖锐的点而特征显现,用户可用鼠标点击改变参数。研究人员说:“我们能够纠正整个研究体积的畸变,在其任何地方呈现高清晰度图像。由此,现在可以看到以前不是很清楚的所有组织结构。” 该技术可以应用于许多医院和诊所的台式电脑,可对任何类型进行干涉成像,如光学相干断层扫描。(华凌)
由于传统的血球计数板已不能满足高速发展的细胞研究需要,市场上各种自动细胞计数的设备越来越多。常见的主要分为两 类:基于图像的细胞计数仪(Automated vision-based counter)和基于库尔特电阻抗原理的细胞计数仪。两者主要区别在于,前者扫描仪器视野内图像,依靠设定的上下限细胞大小来进行图像识别,而后者根据细胞通过小孔引起电位变化来计算细胞个数(关于库尔特原理,详见此处),两者原理不同,因此所获得的效果也大相径庭。以下对各类细胞计数仪的计数准确性、可重复性、快捷性做结果数据比较,建议读者根据您自身需要选购适合您使用的细胞计数仪。【准确性比较】http://www.bioon.com/tech/UploadFiles_3081/201107/2011072416480295.jpg图1. 不同细胞浓度下各种细胞计数仪的计数结果与实际数值的对比上图可见:血球计数板在高细胞密度 时,计数结果与实际细胞密度有偏差,而基于图像的细胞计数仪则在多个浓度下均有较大偏差。这表明基于库尔特原理的细胞计数仪(Coulter counter和Scepter cytometer)在计数准确性上优于其他两种细胞仪。(样品为常见的COS7细胞)【可重复性比较】http://www.bioon.com/tech/UploadFiles_3081/201107/2011072416514090.jpg 图3. 不同细胞浓度下细胞计数的可重复性比较上图可见:基于库尔特原理细胞计数仪的可重复性均明显好于血球计数板和基于图像的细胞计数仪。(样品为19种细胞系)【快捷性】http://www.bioon.com/tech/UploadFiles_3081/201107/2011072416541552.jpg图5. 三种细胞计数法的计数时间对比上图可见:传统的血球计数板的计数时间远长于其他两种计数。库尔特原理计数法与基于图像的细胞计数法相比,计数速度更为稳定,而且计数时间约为后者的一半。(样品为常见的SF9,MCF7,HEK293细胞)
激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图像分析仪器,与传统的光学显微镜相比,大大地提高了分辨率,能得到真正具有三维清晰度的原色图像。并可探测某些低对比度或弱荧光样品,通过目镜直接观察各种生物样品的弱自发荧光。能动态测量Ca2+ 、pH值,Na+、Mg2+等影响细胞代谢的各种生理指标,对细胞动力学研究有着重要的意义。同时激光扫描共聚显微镜可以处理活的标本,不会对标本造成物理化学特性的破坏,更接近细胞生活状态参数测定。可见激光扫描共聚焦显微镜是普遍显微镜上的质的飞跃,是电子显微镜的一个补充,现已广泛用于荧光定量测量,共焦图像分析,三维图像重建、活细胞动力学参数分析和胞间通讯研究等方面,在整个细胞生物学研究领域有着广阔的应用前景。1. 定量荧光测量ACAS可进行重复性极佳的低光探测及活细胞荧光定量分析。利用这一功能既可对单个细胞或细胞群的溶酶体,线粒体、DNA、RNA和受体分子含量、成份及分布进行定性及定量测定,还可测定诸如膜电位和配体结合等生化反应程度。此外,还适用于高灵敏度快速的免疫荧光测定,这种定量可以准确监测抗原表达,细胞结合和杀伤及定量的形态学特性,以揭示诸如肿瘤相关抗原表达的准确定位及定量信息。2. 定量共聚焦图像分析借助于ACAS激光共焦系统,可以获得生物样品高反差、高分辨率、高灵敏度的二维图像。可得到完整活的或固定的细胞及组织的系列及光切片,从而得到各层面的信息,三维重建后可以揭示亚细胞结构的空间关系。能测定细胞光学切片的物理、生物化学特性的变化,如DNA含量、RNA含量、分子扩散、胞内离子等,亦可以对这些动态变化进行准确的定性、定量、定时及定位分析。3. 三维重组分析生物结构ACAS使用SFP进行三维图像重组,SFP将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像,并可从任意角度观察,也可以借助改变照明角度来突出其特征,产生更生动逼真的三维效果。4. 动态荧光测定Ca2+、pH 及其它细胞内离子测定,利用ACAS能迅速对样品的点,线或二维图像扫描,测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率,使用诸如Indo-1、BCECF 、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率,能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应,以及使用双荧光探针Fluo-3和CNARF进行Ca2+和pH的同时测定。5. 荧光光漂白恢复(FRAP)——活细胞的动力学参数荧光光漂白恢复技术借助高强度脉冲式激光照射细胞某一区域,从而造成该区域荧光分子的光淬灭,该区域周围的非淬灭荧光分子将以一定速率向受照区域扩散,可通过低强度激光扫描探测此扩散速率。通过ACAS可直接测量分子扩散率、恢复速度,并由此而揭示细胞结构及相关的机制。6. 胞间通讯研究动物细胞中由缝隙连接介导的胞间通讯被认为在细胞增殖和分化中起非常重要的作用。ACAS可用于测定相邻植物和动物细胞之间细胞间通讯,测量由细胞缝隙连接介导的分子转移,研究肿瘤启动因子和生长因子对缝隙连接介导的胞间通讯的抑制作用,以及胞内Ca2+、PH和cAMP水平对缝隙连接的调节作用。7. 细胞膜流动性测定ACAS设计了专用的软件用于对细胞膜流动性进行定量和定性分析。荧光膜探针受到极化光线激发后,其发射光极性依赖于荧光分子的旋转,而这种有序的运动自由度依赖于荧光分子周围的膜流动性,因此极性测量间接反映细胞膜流动性。这种膜流动性测定在膜的磷脂酸组成分析、药物效应和作用位点,温度反应测定和物种比较等方面有重要作用。8. 笼锁-解笼锁测定许多重要的生活物质都有其笼锁化合物,在处于笼锁状态时,其功能被封闭,而一旦被特异波长的瞬间光照射后,光活化解笼锁,使其恢复原有活性和功能,在细胞的增值、分化等生物代谢过程中发挥功能。利用ACAS可以人为控制这种瞬间光的照射波长和时间,从而达到人为控制多种生物活性产物和其它化合物在生物代谢中发挥功能的时间和空间作用。9. 粘附细胞分选ACAS是目前唯一能对粘附细胞进行分离筛选的分析细胞学仪器,它对培养皿底的粘附细胞有两种分选方法: ① Coolie-CutterTM法,它是Meidian公司专利技术,首先将细胞贴壁培养在特制培养皿上,然后用高能量激光的欲选细胞四周切割成八角形几何形状,而非选择细胞则因在八角形之外而被去除,该分选方式特别适用于选择数量较少诸如突变细胞、转移细胞和杂交瘤细胞,即使百万分之一机率的也非常理想。 ② 激光消除法,该方法亦基于细胞形态及荧光特性,用高能量激光自动杀灭不需要的细胞,留下完整活细胞亚群继续培养,此方法特别适于对数量较多细胞的选择。10. 细胞激光显微外科及光陷阱技术借助ACAS可将激光当作“光子刀”使用,借此来完成诸如细胞膜瞬间穿孔、切除线粒体、溶酶体等细胞器、染色体切割、神经元突起切除等一系列细胞外科手术。通过ACAS光陷阱操作来移动细胞的微小颗粒和结构,该新技术广泛用于染色体、细胞器及细胞骨架的移动。
细胞系对外泌体的细胞内摄取,在37℃、5% CO2孵育6 h。合并图像为受体细胞摄取dii标记的外泌体(红色)。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/11/202311222030103069_495_5389809_3.png[/img]
高内涵技术优势高内涵细胞成像分析系统由三个部分组成:全自动高速显微成像,全自动图像分析和数据管理。全自动高速显微成像在短时间内生成大量的图像,全自动图像分析从这些图像中提取大量的数据,数据管理软件负责建档存储、注释比较、检索分享这些图像和数据。高内涵,意味着丰富的信息。这些信息包括:单个细胞图像和各项指标,细胞群体的统计分析结果,细胞数量和形态的改变,亚细胞结构的变化,荧光信号随时间的变化,荧光信号空间分布的改变等等。人们往往因为特定的问题去设计实验,在图像中找到答案的同时,其他的信息会带来意外的新发现。
定义:单细胞研究,就是针对单个细胞的研究,这是相对于群体细胞的研究。研究意义:细胞是生命活动的基本单位,研究细胞的结构功能及行为,有利于揭示复杂生命体的生命活动规律,探究生理生化现象,获得统计平均结果。然而,现代研究表明,单个细胞内的成分存在巨大差异,平均分析结果不能反映单个细胞内成分的真实情况,会带来误导信息。癌症等疾病总是从个别细胞的变异开始,极少量异常细胞信号会被群体信号所掩盖,不能及时获得有关病变的信息。另外,细胞间的信号传导,应激反应等活动在细胞内迅速发生,传统方法无法做到实时监测。对于数量较少且较为珍贵的细胞样本,如干细胞、元祖细胞及患者样本,传统分析方法需要大量的细胞样本,并不适宜。关于物质在细胞内的空间分布,亚细胞结构如细胞器的分析,传统方法也不能满足。这些都要求我们在一定范围内从单细胞水平研究细胞的生命活动。单细胞分析方法:毛细管电泳、微流控芯片、图像分析、动力学分析及纳米技术等。目前单细胞分析存在的难点:首先无论是针对一个特异性大分子,还是在OMIC水平上进行分子分析,都存在单细胞提取物数量少,难以分析的困难,这甚至可以说是不可能完成的,因此增加灵敏度势在必行。除此之外高通量分析也是一个瓶颈,要想获得单细胞分析确切的分析结果,研究人员必须快速而准确的分析多个细胞,这并不容易。另外单细胞分析也常常需要进行多种方式分析,这不仅是由于细胞存在于一种异质性环境汇总,而且也在同一时间,也需要测量多个参数。
摘要激光扫描共聚焦显微镜作为80年代发展起来的一种高精度分子细胞生物学分析仪器,具有组织细胞断层扫描、活细胞动态荧光监测、三维图像重建、共聚焦图像定量分析等先进功能,在近年的细胞凋亡这一研究热点中得到了大量创造性的应用。本文拟就对激光扫描共聚焦显微镜在凋亡的形态学、分子水平变化及重要生理过程三方面研究中的应用及其成果做一综述。细胞凋亡(apoptosis)是不同于细胞坏死的一种细胞主动死亡方式,并由特定的基因控制。凋亡细胞在形态上出现变圆皱缩、染色质浓缩边集、核碎裂、凋亡小体形成等变化,并最终由非炎症过程清除。由于细胞凋亡独特地影响着机体的细胞发育和代谢,在监测和清除肿瘤细胞与突变细胞等方面也可能发挥重要的作用,近年来受到了细胞生物学、分子生物学、免疫学等多学科的广泛关注。激光扫描共聚焦显微镜(laser scaing confocal microscopy, LSCM)是80年代发展起来的一种高精度分子细胞生物学分析仪器,辅以各类免疫荧光探针或荧光染料与被测物质特异性结合,不仅可观察固定的细胞组织切片,还可对活细胞的结构、分子和离子进行实时动态地观察和检测。在细胞凋亡的研究中,激光扫描共聚焦显微镜已被广泛地应用于形态学、分子水平监测及重要生理改变等各方面,其中不乏新颖之处,并获得了大量成果,以下将就此做一简单的介绍。激光扫描共聚焦显微镜与凋亡的形态学激光扫描共聚焦显微镜用点光源扫描标本的光学横断面,以代替普通光学显微镜所使用的场光源,并用探测针孔滤去离焦光线,所以消除了来自焦平面以外的衍射或散射光的干扰,可实现高清晰、高分辨率的组织细胞断层扫描。并且由于激光扫描共聚焦显微镜采用数字化成像,因而辅以一定的软件就能对图像进行定量分析及三维重建等操作。过去对细胞凋亡的形态学研究方法局限于活性细胞和组织切片染色、荧光镜观察,或者石蜡切片原位末端标记法。由于普通光镜的分辨率和清晰度有限,而电镜又显然不适合对凋亡这一复杂动态过程的监测,激光扫描共聚焦显微镜的应用使人们对细胞凋亡的形态学观察分析提高到了一个前所未有的新水平。细胞核核膜的破坏对于染色质聚集并形成凋亡小体起重要作用。lamin是构成核片层的蛋白质,位于核膜的内表面,由caase-6介导的lamin裂解可影响核膜的完整性。在McCall等的研究中,对果蝇卵子发生晚期的细胞凋亡现象进行了动态观察。以单抗mAb101标记其哺育细胞核内膜的laminDm0(哺乳类laminB的同源体),用激光扫描共聚焦显微镜加以观察。正常哺育细胞到11期时,染色的lamin呈弥散的雾状分布并围绕核周,而dcp-1GLC哺育细胞即使到了较晚的14期时,仍然显示界线明确的染色。可见dcp-1突变体在核lamin蛋白的酶切或解聚方面存在缺陷。细胞器Li 等在对C(6)-酰基鞘氨醇诱导胞内囊泡产生的研究中,在不产生中毒效应的情况下,加入10microM C(6)-酰基鞘氨醇以诱导鼠纤维母细胞(3T3-L1和3T3-F442A)凋亡。观察到囊泡的形成与C(6)-酰基鞘氨醇的诱导呈时间依从和剂量依从关系。大量小泡在其加入后8小时内出现,并且随时间而增大;大泡最终分布在核周,而小泡分布在细胞边缘。用抗-溶酶体膜蛋白抗体和共聚焦免疫荧光显微分析,证明增大的囊泡为晚期内吞体/溶酶体。另外,胞内的细胞器都有其适用的荧光探针,如高尔基复合体常用的探针有Dceramide、BODIPY ceramide等,内质网常用的有Dil、DiOC6等,经标记均可进行精细的观察。当然,激光扫描共聚焦显微镜在形态学中的优势更在于其对图像的三维重建功能,从而揭示过去只能在平面上显现的凋亡细胞在三维空间中的结构;而对细胞凋亡的动态过程,它可以用三维加时间的四维方式进行观察,来获取最逼真的形态学资料。凋亡过程中一些特征性的三维形态变化正期待着进一步具体的工作去发现。激光扫描共聚焦显微镜对凋亡细胞的分子水平监测随着分子生物学突飞猛进的发展,关于细胞凋亡分子机制的研究已有了很大的突破。细胞凋亡的信号传递途径及其调控涉及到大量的酶级联反应、生物大分子的空间转移等。而激光扫描共聚焦显微镜以其定性、定量、定时的优点,结合众多荧光探针的应用,成为了研究细胞凋亡分子水平变化的有力手段。DNA大分子DNA断裂以及染色质的异常凝聚,是细胞凋亡的关键,同时也是细胞核在细胞凋亡中具有标志性的变化。Columbara等报道将激光扫描共聚焦显微镜与原位TdT和Poll免疫荧光技术相结合,进而确定双链和单链DNA的断裂点。而在对细胞凋亡和细胞坏死区别的研究中,Kreel等在培养的K562细胞中加入放线菌素D以诱导凋亡,并对细胞的DNA片段进行了3’-末端标记。经激光扫描共聚焦显微镜观察发现K562细胞凋亡早期有大量DNA片段出现,且DNA片段弥散分布于除核仁外的细胞核区。伴随着凋亡的进展,细胞核内出现大量高标记密度的圆形小体。而采用NaN3或快速冻融法使细胞坏死,经激光扫描共聚焦显微镜观察证实,在坏死开始阶段并无DNA片段的出现,至少在坏死发生24小时后才有DNA片段产生。Caase家族Caases是一组高度保守的半胱氨酸蛋白酶,目前发现有11个成员。多数细胞凋亡是以Caase家族蛋白的激活并作用于其关键底物而实现的,而caases激活的关键又在于该家族蛋白间的级联反应,因此caases被认为是细胞凋亡的中心环节和执行者,成为研究的热点。Mandal等用激光扫描共聚焦显微镜对细胞凋亡中激活的caase-3的重分布进行了研究。用丁酸处理细胞后,观察到DNA-PKcs的裂解与caase-3的激活成正相关,而Bcl-2的过度表达则可抑制上述两个过程。同时还证明(1)激活后的caase-3重分布到核区,(2)裂解局部的DNA-PKcs和PARP(polyADP-ribosepolymerase,聚腺苷二磷酸核糖多聚酶),(3)裂解产物又被释放到核外的细胞液。caase-3的抑制物四肽DEVD-CHO又可抑制上述的三个连续的步骤。该研究提示:激活的caase-3在核内的重分布构成了丁酸所诱导的细胞凋亡中的一个重要凋亡信号。另外,在用激光扫描共聚焦显微镜对Q79诱导大鼠神经元凋亡的研究中,Sanchez等发现了Q79对caase-8的聚集和激活,而对caase-8的抑制则阻止了被诱导的细胞凋亡;加以Westernblot分析,还建立了caase-8的激活和某些神经退行性疾病(如舞蹈病)的联系。Grazyme丝氨酸蛋白酶grazyme为另一种重要的凋亡信号分子,对某些caase家族蛋白也有激活作用。Trapani等就证明了杀伤淋巴细胞利用穿孔素和grazymeB的协同作用来诱导靶细胞的凋亡,在其研究中通过激光扫描共聚焦显微镜观察到(1)50%细胞的胞核内快速聚集了以FITC荧光标记的grazymeB(最长7分钟,t1/2为2分钟),然后发生凋亡;(2)其它的细胞只有细胞液内有FITC-grazyme B的摄取,避免了凋亡。此间至少在13分钟后才有DNA碎片的出现,说明核内的grazyme B聚集出现在凋亡的执行阶段之前。并且通过对核内液的处理(加入70KDa FITC-dextran),间接观察到grazyme B的转移并非是因为核膜受caases的作用而破损,而是由于穿孔素的协同。其它以上的介绍显示,激光扫描共聚焦显微镜在检测活细胞酶活性动态变化方面有着突出的优势。实际上,对于细胞凋亡的分子机制这样一个极其复杂的课题,激光扫描共聚焦显微镜的应用远不只限于上述的几种离子和大分子,而是渗透到了大量的分枝课题中去。如在对重要的凋亡负调控蛋白Bcl-2的研究中,Beham等利用基因毒性损害(genotoxic damage)诱导细胞凋亡,并以Bcl-2蛋白抑制其凋亡过程。用激光扫描共聚焦显微镜和Immunoblotting观察显示,Bcl-2的作用在于阻止了诱导产生的p53蛋白向核内的转运。而Ohsawa等对独立于caase家族的另一种重要蛋白酶—组织蛋白酶进行了研究,用血清剥夺法诱导PC12细胞凋亡,并用激光扫描共聚焦显微镜监测了其精细超微结构改变过程和细胞内组织蛋白酶B和D的免疫活度的对比变化。又如,在人胰岛淀粉样多肽(hIA)的研究中,Hiddinga等用表达hIA的质粒转染COS-1细胞诱导凋亡,辅以免疫组化染色,用激光扫描共聚焦显微镜证明了hIA在细胞的内质网和高尔基复合体内呈簇状沉积,并与细胞
中国科技网讯 从一个受精卵发育成多种功能的胚胎,细胞要经过上千次分裂和复杂的排列重组。据物理学家组织网6月3日报道,霍华德·休斯医学研究院珍妮莉娅法姆研究学院开发出一种最新的成像技术,能以前所未有的速度和精确度看到这一过程,让人们能追踪胚胎成形时每个细胞在几天甚至几小时内的变化。相关论文发表在6月3日出版的《自然·方法学》上。 研究人员演示了一段约20小时的果蝇胚胎发育视频。在视频中,生物结构逐渐出现,从一小团简单的细胞簇慢慢变长,变成上万个细胞紧紧挤在一起的拉长的小胚胎,然后在新形成的肌肉收缩舒张下开始颤动,此时胚胎仅有半毫米长。此外,论文中还有一段果蝇胚胎中枢神经系统完整的发育视频,跟踪了单个细胞发育出感觉器官、脑叶及其他结构的过程,由于分辨率足够高,还能看到神经轴突尖端迅速变化。 发明该技术的珍妮莉娅法姆研究学院的菲利普·凯勒说,要理解一个单细胞怎样变成了复杂的组织,真实看到这一过程非常重要。传统光学显微镜速度太慢,无法跟踪细胞在生命初期的迅速变化,也容易破坏一个活胚胎,只能通过把多阶段、多组织的照片拼在一起,才能推测发生的变化,但“细胞分裂重组每次都不一样,这种观察方法可能会产生误导”。 新技术基于一种高速非侵入式光学显微镜,称为SiMView光层显微镜,能从4个角度同时拍摄图像,不仅能跟踪细胞运动,还能对发展过程进行数量分析。该显微镜由凯勒小组和德国的欧洲分子生物实验室合作开发,攻克了传统光学显微镜的两个难题:一是光源对样本造成的伤害,二是对海量数据进行处理分析。 大部分光源都会伤害细胞,使其中的荧光标记消失。研究小组设计的照明技术是一种激光扫描层,一次照射样本极薄的一层以减少伤害,由探测仪记录下被照亮的部分。光层来自两个相反方向,并用两个探测仪来探测荧光,照明与探测相结合,提供了4个不同的观察角度。不仅能避免由于光散射而造成的模糊,还将图像采集速度提高了50倍。 要让照亮样本和探测荧光在时间、位置上协调一致,时机吻合极为重要,光层交叉通过会造成图像模糊,发光间隔仅几毫秒。为了保持精度,SiMView还安装了实时调节的电子系统。 显微镜每秒会收集350Mb的数据,一个样本一天要产生海量数据,而不同条件或不同基因的发育对比实验,所要求的数据比这还要多好多倍。为此,研究人员开发出一种新的计算方法,能识别并跟踪显微镜视频中单个细胞并自动分析。这些都构成了拍摄活样本这一完整技术框架的必要组成部分。 凯勒表示,他们还将继续改进显微镜使计算过程更加有效。今后不仅能追踪胚胎中细胞的一代代世系,还可能控制发育以探索发育机制,并研究其他更大更复杂样本的发育过程。(常丽君) 《科技日报》(2012-06-05 二版)
骨髓细胞是我们人体不可或缺的一部分,随着不同的生理条件,骨髓像的变化范围也很广,下面我们一起来看看在广州明美光电最新产品科研级摄像头MSX2下看到的骨髓细胞成像。MSX2是最新研发的科研级数字摄像头,采用大靶面高性能的成像芯片,设计USB3.0数据传输接口,具有高分辨率、颜色还原准确和高灵敏度的特点,其优秀的色彩表现,是液基细胞分析、免疫组化、骨髓细胞分析等对颜色要求高的病理诊断的理想工具。此外在明暗场、相衬、偏光、DIC、荧光成像等领域同样表现出色。科研级数字摄像头MSX2性能特点高分辨率、图像精细。 大靶面芯片、拍摄视野更接近目镜观察视野、图像更真实。 优化颜色算法,色彩还原准确,辨识度高。高灵敏度,适合弱光条件使用。高速USB3.0传输,高效数据处理,1200万全分辨下最高15fps。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/06/201606080956_596339_1783654_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/06/201606080956_596340_1783654_3.jpg以上图片是在显微镜摄像头下所观察到的现象。
2013年04月02日 来源: 腾讯科学 腾讯科学讯(悠悠/编译) 据国外媒体报道,内窥镜从根本上改变了医学治疗,医生能够使用一个微型相机附在线绳粗细的连线末端,无需做大手术便能窥探患者身体内脏器官。目前,美国斯坦福大学研究人员最新研制一款新型内窥镜,是迄今世界上直径最细的内窥镜,甚至能够探测到患者体内的单个细胞。 http://www.stdaily.com/stdaily/pic/attachement/jpg/site2/20130402/00241dd2ff1512c4701135.jpg美国科学家最新研制世界最纤细内窥镜相机,可观测拍摄人体单个细胞结构 针头粗细的内窥镜将潜在拍摄到单个癌细胞和病变器官,这将避免使用较大直径内窥镜进入人体带来的伤害,例如:大脑组织。同时,这个超级纤细内窥镜将比腹腔镜形成更小的伤疤。 常规内窥镜都是采用多重光导纤维制成,它们能够照亮人体病变区域,并记录图像返回到观测者。内窥镜中纤维数量越多,图像的清晰度就更高,但是较多的纤维束将使内窥镜变得更粗。 斯坦福大学卡恩带领的一支研究小组使用一个多模光纤建造了内窥镜,多模光纤能够沿着多种不同路线携带光线,研究小组的观点是使用单个纤维照亮物体并实现传输数据,这项技术存在的挑战是信息干扰,因为光线将沿着不同路径传输。 为了实现这一点,卡恩带领研究小组建造了一种装置——空间光线调制器,该调制器能够以随机路径持续发送激光束至光纤上,由于采用随机路径,一旦光线离开光纤,将形成散斑图像,一些光线则反馈至光纤。 研究小组设计的一个计算机程序能够分析反馈至光纤的散斑图像,并使用它们形成一个图像。这项技术将提高图像的分辨率,甚至远超出之前的预期,能够观测到单个细胞大小的物体。 卡恩在新闻发布会上指出,他已发现内窥镜在成像方面的诸多应用,当他们在人体内进行手术时能够研究细胞的详细状况。
虽然经过几个世纪的研究,人类的生长于发育过程中仍遗留有很多的未解之谜。人类胚胎发育的研究始于20世纪,一般以观察胚胎的组织图像的方式来研究如器官发生的机制等,传统的方式如切片一直使用至今。现今,对于胚胎3D图像的数字化构建也已经开始,使用核磁共振、X光摄影等方法均可获得胚胎的3D图像,但分辨率仍无法达到细胞水平。本研究使用了妊娠期6-14周的胚胎和胎儿共36个,结合免疫染色、3DISCO组织透明技术和光片照明技术,获得了人类胚胎细胞级分辨率的3D图像,清晰地显示了胚胎的外周神经、肌肉、血管、心、肺和泌尿系统。通过这种方法,我们可以建立人类生长发育的图库,研究人类胚胎发育的分子机制。[b]3D图像示例:1) 周围神经系统3D成像(使用中间纤维外周蛋白(Prph)的抗体标记Prph): [/b][align=center][img=,450,317]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/2.jpg[/img] [/align][align=center](A)7周龄胚胎的表面造影图像(左);对Prph进行标记所得图像。[/align][align=center](B)8周龄胚胎的表面造影图像(灰色)和标记Prph所得图像(绿色)的叠加图像。[/align][align=center](C)8周龄胚胎的面部神经分布。表面造影图像和标记Prph所得图像的叠加(中)(右)。 [/align][align=center]感觉神经轴突和运动神经轴突在手脚的分布:分别使用胆碱乙酰转移酶(ChAT)和瞬态粘附糖蛋白-1(Tag-1)的抗体来标记。[/align][align=center](D)在外周神经,染色产生重叠现象,但在末端Tag-1(绿色)更为明显。(D-F)ChAT染色与Prph和Tag-1均无重叠。 [/align][align=center][img=,550,177]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/3.jpg[/img] [/align][align=center](D)9.5周龄的拇指,标记Prph和Tag-1。染色发生重叠,但在末端区域Tag-1更显著。[/align][align=center](E)9.5周龄的左手,ChAT与Prph表达区域不同。[/align][align=center](F)9周龄的右脚,ChAT与Tag-1表达区域不同。 [/align][align=center] [img=,550,177]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/4.jpg[/img][/align][align=center](G)7周龄的头部,标记Prph显示颅神经。(右)对颅神经分布使用Imaris软件进行3D虚拟解剖、区分并着色。 [/align][b]2) 手足的神经分布的3D成像:对Prph和Tag-1进行免疫染色以建立胚胎和胎儿手部的感觉神经及其分支的3D图像,并可观察感觉神经随时间推移的发育情况。 [/b] [align=center] [img=,450,362]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/5-1.jpg[/img][/align][align=center](A)8周龄标记Prph的右手,感觉神经分为尺骨神经、正中神经和桡神经。[/align][align=center](B)右手从7周龄到11周龄的神经分布随时间的变化。肌皮神经(指针处)很快便延长深入手部。 [/align][align=center] 之后分别对ChAT和Tag-1标记,建立了运动和感觉神经的分布的图像,以确定两种神经在何处以何种方式分离。 [/align][align=center][img=,550,286]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/5-2.jpg[/img] [/align][align=center](C)(D)9周龄的右脚和8周龄的左手的感觉神经和运动神经的3D图像。 [/align][b]3) 对肌肉生长进行3D成像分析:[/b]转录因子Pax7是有颌下门动物的肌肉干细胞标记物,是肌肉生成的关键启动因子。在肌肉的生长中,表达Pax7的细胞均匀分布于生长中的肌肉,表达肌细胞生成素(Myog)的细胞成簇分布于运动神经末端。生长中的肌肉表达了双皮质素(Dcx),可能影响神经肌肉接点的发育。 [align=center][img=,550,259]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/7-1.jpg[/img] [/align][align=center](A)9.5周龄标记Pax7的右脚和右手。[/align][align=center](B)10.5周龄标记Pax7与ChAT的右脚。[/align][align=center](C)9周龄标记Myog、ChAT和Tag-1的右脚。[/align][align=center]表达Myog的细胞成簇分布于运动神经分支末端。[/align][align=center](D)9.5周龄的左脚标记Dcx与ChAT。[/align][align=center]Dcx在肌肉(*号)和感觉神经中检测到,但在运动神经轴突中未检测到。 [/align][align=center] [img=,450,334]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/7-2.jpg[/img][/align][align=center](E)8周龄标记MHC与Tag-1的胚胎。[/align][align=center](中上)动眼肌肉的图像。[/align][align=center]点状线标示出了肌肉的分界线,此处照明被色素上皮所减弱。[/align][align=center](中下)肌肉与感觉神经。(右)左臂的肌肉与感觉神经。[/align][align=center](F)9.5周龄标记MHC与ChAT的左手,显示了肌肉与运动神经。[/align][align=center]使用不同颜色对肌肉进行了区分,同时能够观察到正在发育的骨骼。 [/align][b]4) 人类胚胎脉管系统的3D成像分析:[/b]质膜膜泡关联蛋白(Plvap)是一种由网状微血管内皮细胞表达的跨膜糖蛋白。对整个胚胎标记Plvap并成像,可以观察到致密的血管网络。对平滑肌表达的α肌动蛋白(SMA)进行免疫染色可以观察到生长中的动脉的3D结构。 [align=center][img=,450,414]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/9.jpg[/img] [/align][align=center](A)(B)8周龄标记Plvap的胚胎。[/align][align=center]Plvap在整个胚胎中形成了致密的网络。[/align][align=center](A中、右)右臂与右手。(B左)左腿的Z轴投射图像。[/align][align=center](*号)血管网络穿过了除了骨骼的所有组织。[/align][align=center](B右)面部图像。(箭头)角膜处没有血管。[/align][align=center](C)11周龄胎儿,标记胶原IV的肋骨表面。[/align][align=center](D左)11.5周龄胎儿的右腿和右膝,标记MyoSM的动脉。[/align][align=center](D右)11.5周龄胎儿的右脚,标记SMA的动脉。[/align][align=center] 对胃肠道的淋巴细胞表达的Podoplanin进行标记以研究淋巴管形成,表达Podoplanin的细胞覆盖了肠胃,[/align][align=center]而含Podoplanin的微管数量较少,说明人类淋巴系统成熟可能晚于血管系统。[img=,550,181]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/10.jpg[/img][/align][align=center](E)14周龄标记Podoplanin的消化道。表达Podoplanin的细胞位于肠胃上方。 [/align][align=center](右)表达Podoplanin的细胞尚未发育形成淋巴管。[/align][b]5) 肺的生长发育的3D分析:[/b]标记鼠的性别决定基因Sox9转录因子和Dcx,观察到Sox9在人的末端支气管芽处表达,Dcx在每个气道的近端上皮部分表达。用Plvap标记肺部的血管,发现肺间质内微血管和大血管形成了连续的网络。肺部气道的分支方式是高度保守的,包括域分支、水平分支和垂直分支,使用Sox9/Dcx标记小支气管,可以观察到3种分支方式,并发现了不对称分支现象。 [align=center][img=,550,329]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/11.jpg[/img] [/align][align=center](A)9.5周龄标记Sox9、Dcx和Plvap的胎儿的肺部。Sox9在上皮小管的末端表达,Dcx在近端表达。Plvap在整个肺的血管中表达。[/align][align=center](B)肺上皮小管Z轴光学切面。[/align][align=center](C)末端的微血管网络。[/align][align=center](D)气道分支的3D图像。肺叶(蓝绿),支气管(红)。[/align][align=center](E)支气管的3D图像。(右)三种分支方式。[/align][align=center] 标记SMA和平滑肌肌凝蛋白(MyoSM),两者均于围绕支气管和气道上皮小管的平滑肌处表达。标记Sox9显示出末端没有平滑肌。[/align][align=center]对平滑肌进行染色同时可以显示动脉和微动脉。可以使用SMA和酪氨酸羟化酶(TH)标记心脏来观察血管和神经分布。 [/align][align=center][img=,550,289]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/12.jpg[/img] [/align][align=center](F)9.5周龄的标记MyoSM的肌凝蛋白平滑肌的染色。(箭头)支气管及分支。[/align][align=center](G)11.5周龄的左肺标记SMA显示出气道平滑肌的分支方式。(箭头)动脉周围肌肉和(指针)近端气道周围肌肉。[/align][align=center](H)10周龄的肺的分支图像。末端芽部用Sox9标记。表达SMA的平滑肌分布于不表达Sox9的近端区域。[/align][align=center](I-K)心脏的光片显微图像。 [/align][b]6) 泌尿生殖系统发育的3D分析:[/b]人类生殖道分为两种结构:由中肾分化而来的中肾管(WD)和由中肾管诱导分化而来的副中肾管(MD)。性别决定伴随着生殖道的重构。Pax2转录因子可用于标记中肾和WD。8周龄的雄性胚胎中,MD尖端与WD紧密接触但并未完全生长。肾处于腹侧位置邻接生殖嵴。9.5周龄时MD继续沿WD延伸但并未连接。10周龄时两条MD连接,从两侧WD的中间延伸至泌尿生殖窦,同时开始降解,融合的剩余MD分化为前列腺囊。14周龄时,WD的中肾肾小管退化,附睾与输精管出现。Sox9是睾丸分化的必需因子,在睾丸索中表达,对Sox9使用免疫染色可以观察到睾丸索。[align=center][img=,350,415]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/13.jpg[/img][/align][align=center](A)8周龄标记Pax2的胚胎。[/align][align=center](B)(箭头)MD/WD连接。[/align][align=center](C)(D)9.5周龄的泌尿生殖系统。(箭头)MD尾端沿WD延长但仍未融合。[/align][align=center](E)10周龄的泌尿生殖系统。MD在底端融合(指针)并开始降解(箭头)。[/align][align=center](F)降解的继续。[/align][align=center](G)14周龄的泌尿生殖系统。输精管进一步发育(指针)。[/align][align=center](H)10周龄标记Pax2和Sox9的睾丸。[/align][align=center](I)10周龄标记Pax2的睾丸。[/align][align=center](J)14周龄的睾丸。[/align][align=center][img=,350,452]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/14.jpg[/img][/align][align=center](A)10.5周龄标记Pax2的泌尿生殖系统。WD连续,MD已融合。(B)11.5周龄标记Pax2的生殖系统。(箭头)WD开始降解。(C)13周龄,标记Pax2的生殖系统。(箭头)子宫大小增加,WD显著降解。(右)MD顶端发育中的输卵管纤毛。(D)8周龄标记Pax2和Plvap的睾丸。(指针)微血管覆盖了睾丸和WD。而MD却没有血管形成。(E)10周龄的雄性胎儿中,MD没有微血管形成。(F)(G)10.5和13周龄标记Pax2和Plvap的卵巢。WD和MD均有致密的血管覆盖。 [/align][align=center][/align][b]总结:[/b]将免疫标记与3D成像技术结合,能够完好地保存器官的3D结构并使分辨率达到细胞水平,简单、快速、稳定、可重复,以上这些优势适合其应用于胚胎学,可用于研究遗传疾病或畸胎。此方法的限制条件主要在材料的获得,同时使用得抗体最大数量,抗体与实验方法的兼容性和大容量数据的存储。然而其应用的广泛程度依然不可限量。以后甚至可用于建立人类生长发育的3D图库。
http://photocdn.sohu.com/20120710/Img347740451.jpg 加州大学洛杉矶分校的工程师们开发了一种全新的光学显微镜,显微镜上配备了世界上最快速的相机,可用于探测“流氓”癌细胞。 【搜狐科学消息】据国外媒体报道,美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)的工程师们近日研制出了一款世界上最快速的相机,可用于探测难以捉摸的“流氓”癌细胞。这一科研成果的研究报告发表在了最新一期的《美国国家科学院院刊》上。 从大量各类正常细胞中识别和分离出一些罕见细胞对于某些疾病的早期发现、监测和治疗来说正在变得越来越重要。这些罕见细胞中,在体内自由移动的癌细胞就是一个很好的例子。通常情况下,在10亿个健康细胞中也只有一小撮癌细胞,然而它们会抢先转移,癌细胞扩散导致癌症患者的死亡率高达约90%。这样的“流氓”细胞除了癌细胞以外,还包括用于再生医学的干细胞及其它类型的细胞。不幸的是,检测这样的细胞是很困难的。要取得良好的统计准确性需要一台自动化、高通量的仪器,可以在相当短的时间内对数以百万计的细胞进行检测。配备了数码相机的显微镜是目前分析细胞的唯一设备,但是该设备对于这项研究来说速度显得太慢了。 现在,美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)的工程师们开发了一种全新的光学显微镜,可以让这项艰巨的任务变得轻松许多。加州大学洛杉矶分校电气工程学院的工程师巴赫拉姆•贾拉利(Bahram Jalali)说:“为了抓拍到这些难以捉摸的细胞,相机必须具备在非常高的帧速率下持续捕获并对数百万张图像进行数字化处理的能力。传统的CCD和CMOS摄像头达不到这样的速度和灵敏度,因为从像素阵列读取数据需要时间,它们在速度极快的情况下对光变得不那么敏感。” 目前的流式细胞仪具有较高的通量,但是因为它依靠单点的光散射而不是拍照,在检测非常罕见的细胞类型时还不够灵敏,比如对于那些目前处于早期阶段或癌细胞转移前的癌症患者不适用。为了克服这些限制,巴赫拉姆•贾拉利和UCLA的的生物工程学副教授迪诺•迪•卡罗( Dino Di Carlo)领导的一个包括生物技术、光学、高速电子和微流体的跨学科研究团队开发出了高通量流式光学显微镜,这款显微镜非常灵敏,具备实时探测含量为百万分之一的罕见细胞的能力。 贾拉利的团队以他们在2009年创建的光子时间飞梭相机技术为基础,研制出了世界上最快的连续运行的相机。贾拉利、迪•卡罗和他们的同事在报告中描述了他们如何将这台相机与先进的微流体和实时图像处理技术进行整合,以对血液样本中的细胞进行分类。新的血液筛查技术每秒可筛查10万个细胞,比传统的基于成像的血液分析仪高出约100倍的通量。迪•卡罗说:“这项科研成果需要与一些尖端技术进行整合,通过生物工程部门、电气工程部门和加州纳米技术研究院的合作,并采用了UCLA细胞诊断学部门开发的重要的技术基础设施。”贾拉利和迪•卡罗均是加州大学洛杉矶分校的加州纳米技术研究院的成员。 他们的研究演示了如何实时辨别血液中罕见的乳腺癌癌细胞。初步结果表明,这种新技术有可能迅速地在大量血液中检测到极稀少的循环癌细胞,并将提高癌症早期检测、监测药物和放射治疗的效率。加州大学洛杉矶分校的电气工程和生物工程的项目经理本田惠介(Keisuke Goda)说:“这项技术可以大大减少错误,并将降低医疗诊断成本。” 研究人员通过将实验室生长的癌细胞与模拟现实生活中的病人的不同比例的血液进行混合得到了检测结果。加州纳米技术研究院的一名成员格达(Goda)说:“为了进一步验证该技术的临床应用效果,我们目前正在与临床医生合作进行临床试验。这项技术也将可能用于进行尿液分析、水质监测和相关的应用。”(尚力)
一、专业软件公司产品1、Metamorph软件Metamorph是先进的图像处理分析软件,此软件功能性最全,一套Metamorph软件相当于所有其他显微镜图像处理软件的集合,同时能够驱动所有显微镜及绝大数附加装置。包括三个软件模块:MetaVue、MetaMorph和MetaFluor:MetaVue是MetaMorph的入门基本版,功能与MetaMorph一样,是属于模块化的组配;MetaMorph Basic为MetaMorph中的基础版,能够为大多数实验提供强大的显微控制和显微影像的处理,达到理想的效果;MetaFluor软件,隶属 MetaMorph的软件模块,是一种使用Fura2、BCECF、INDOL、fluo3等荧光染剂测量细胞内离子浓度的比例图像专用软件。2、IPP软件强大的2D和3D图像采集、处理、增强和分析软件,同时具备广泛的测量功能,可实现用户定制化服务。软件包括2D采图测量等功能模块Image-Pro Plus、3D渲染和测量功能模块Image-Pro Plus 3D和荧光图像反卷积模块AutoDeblur。3、ImageJ(免费)ImageJ是一款基于JAVA的图像处理程序,它是一个在线图片编辑器,机器装有Windows、MacOS、Linux系统以及Java1.1运行环境就可以。它能展示、编辑、分析、处理、保存和打印8bit、16bit、32bit的图像。可以读包括TIFF、GIF、JPEG、BMP、DICOM、FITS在内的多种图像格式。 二、显微镜厂家标配软件1、CellSens软件—Olympus公司CellSens是Olympus于2010年推出的最新款生命科学图像软件软件包含3个不同的软件包,CellSens Entry、CellSens Standard和CellSens Dimension,这些软件包可以解决所有的需求。用户可根据需要自定义操作界面,成像全过程都可做个性化设置,便于用户完全控制整个实验。这样一来,只有需要的工具会显示在操作界面上,简化了成像过程,无需经验即可操作。2、Axiovision软件--Zeiss公司根据生命科学(解剖学、病理学、神经科学、细胞生物学、药理学等)的需要,Zeiss为显微镜专门设计了软件Axiovision。该软件包括基本软件(采图、分析等)和其他软件模块(多通道、时间序列、焦深拓展等)。3、leica application suite(LAS)软件--Leica公司Leica LAS是一个图像采集和展示图像管理模块,主要功能:LAS图象管理模块提供用户界面有简单对话流程;完整显微镜和数码照相机控制整合在界面中;用户可自定义模板和输入域;特别适合临床医疗用,自带三类模板:病者,疾病,实验室;可插入音讯和文档;可寻找记录通过输入域数值等。4、NIS-Elements软件—Nikon公司NIS-Elements是由尼康开发而成的一种一体化成像软件平台,它可对显微镜图像拍摄以及文档数据管理实现全面控制。NIS-Elements成像软件产品系列包括三种各不相同的软件包:NIS-Elements D使用基本测量和报告功能支持生物研究、临床和工业应用中的彩色文档管理需求;NIS-Elements BR适合进行标准研究应用。它具有通过4D图像获取和设备的控制功能;NIS-Elements AR针对高级研究应用进行优化,它具有通过所有6D图像获取和分析全自动获取和设备控制的功能。三、CCD厂家配备的软件1、ProgRes CapturePro采图与分析软件(免费)ProgRes德国耶拿(JENOPTIK Laser,Optik,Systeme GmbH)专业生产CCD。厂家同时赠送分析软件ProgRes CapturePro采图与分析软件,用于各种组织切片、细胞刮片、涂片及其他各种显微图像的形态学分析,其中包括各种染色图像、荧光图像、免疫组化反应图像、病理图像等。是针对广泛的显微实验设计开发的一种计算机图像分析系统。可配各种品牌的明场或荧光显微镜,由科学级高清晰度数字冷CCD即时获得显微图像。2、INFINITY ANALYZE软件(免费)INFINITYANALYZE具有图像采集和分析功能,是生命科学、临床医学和工业检测等领域的理想图像分析工具。与INFINITY USB 2.0系列码相机搭配使用,为用户提供完整的图像解决方案。3、QCapture软件(免费)所有的QimagingCCD都带配有QCapture软件,它能进行高品质预览和采图,使您能利用电脑轻松控制CCD预览、采图和存储,还能做binning、ROI和实时直方图,用户可以在网上下载最新版软件!四、显微系统软件包1、iQ Imaging软件—Andor公司Andor公司开发出一流的活细胞成像软件iQ Imaging Software,它有着优异的表现、突出的灵活性、超强的控制能力,确保用户可以从EMCCD中得到完美的结果。Andor iQ的核心在于采集多维图像,这意味着您可以完美的掌控多个通道、时间序列、Z-stack、多个位置数据。这样就很容易分析、处理展示和管理多细胞实验数据,以及理解图像的维度。因此它能瞬间掌控和处理复杂的数据。 2、Deltavision softWoRx软件--Applied Precision公司功能强大的softWoRx Explore Suite软件包包括3D观察和分析功能,RT全新的构造可以保证在高数据通量的情况下实现图像的快速观察和分析。加上硬件组成先进的“活细胞”成像系统,能完成完整的细胞示踪、自动聚焦、点观察、延时观察以及激光细胞动态研究,确保最佳的活细胞成像结果。五、三维展示、处理软件1、IPP的3D渲染和测量功能模块Image-Pro Plus 3D –Media Cybernetics公司该模块的主要功能:3D展示图像和测量工具;对3D图像进行手动、自动测量;物体的4D追踪;3D共定位分析2、Imaris软件—Bitplane公司软件包功能齐全、分类细致,包括Imaris基础模块、Imaris Measurementpro测量软件、ImarisTrack追踪软件、ImarisColoc共定位分析软件、FilamentTracer丝状体追踪软件、AutoDeblur:去模糊模块、AutoAligner:连续切片对准模块。3、Volocity软件—Perkinelmer公司Volocity是一组三维、四维立体观察、数据采集、定量分析、追踪和共定位分析软件。该软件包括Volocity Acquisition细胞图像观测采集平台、Volocity Visualization细胞图像三维立体操作平台、Volocity Quantitation细胞图像定量分析平台和Volocity Restoration细胞图像消雾去卷积复原平台。
通常,研究胞内分子运动,相互作用及微环境的研究者需要分析细胞内诸如扩散速率等信息。近期,有报道称科学家们使用OlympusASW2.1软件的“扩散测量软件包”(Diffusion MeasurementPackage)得到了三种有效的方法用于测量分析胞内分子扩散。考虑细胞生物学及生物物理学研究的多种需求,他们使用OlympusFluoView共聚焦显微镜系统。 第一种方法,点荧光相关光谱(Point Fluorescence Correlation Spectroscopy,PointFCS)。这一方法可逐点分析信号波动情况。通过记录荧光强度的波动,可计算出运动中的粒子数目。这一具有高时空分辨率的技术非常适用于快速运动粒子的研究。根据研究需要,可得出扩散常数或分子数目两种结果。 第二种方法,光栅扫描图像相关光谱(Raster scan Image CorrelationSpectroscopy,RICS)。这一方法用于区域研究,可测量细胞内任意区域的扩散情况。如溶液中的分子或细胞膜上的蛋白,任意胞内结构都可测量。通过划定感兴趣区域,RICS能够通过2维图像创建扩散图谱,帮助研究者掌握胞内不同时间各区域的情况。这一方法可得到扩散常数及分子数目。 第三种方法,荧光漂白恢复(Fluorescence Recovery After Photobleaching,FRAP)。通过研究扩散到漂白区域的荧光信号,这一方法被光分应用于某一区域扩散常数的分析。
原子力显微镜(AFM)是我们学校新进的大型仪器设备之一。与光学显微镜及电子显微镜不同,AFM可利用微小探针“摸索”样品表面来获得信息。其成像原理决定了它具备其他显微技术所不具有的优点:受工作环境限制较少,可以在真空、气相、液相和电化学的环境下操作;可以对导体、半导体、绝缘体等多种样品成像,样品制备简单,且对样品的破坏性较小;具有原子级高分辨率,可得到观测表面的三维立体图像,并能获得探针与样品相互作用的信息。AFM可以观察许多不同材料的原子级别的高分辨表面形貌与结构,是一种新型的表面结构分析仪器。它的出现使人类在认识和改造自然方面进入一个新的层次,已被广泛应用于高分子材料、生物学以及生命科学等领域。近年来,研究人员也开始将这种新型的表面分析技术应用于木材微观结构的研究。这为人们进一步认识和了解木材微观世界,提供了一种有效的分析手段。目前在木材科学与技术领域内的研究内容主要包括两个方面:一方面是材料表面形貌、相结构的表征,在微米、纳米的范围内获取图像。另一方面是木质材料细胞壁的力学性能,如硬度、弹性模量和屈服强度的测量。我是实验室参加工程师培训的人员之一,由于课题的需要,我尝试利用AFM技术对杨木木纤维形态尺寸特性进行了测量,具体测量与分析方法如下:1材料与方法1. 1 试样制备试材为速生杨木,切削成横截面尺寸为5 mm×1 mm×5-8mm的木片,再用Spurr树脂进行包埋,然后用超薄切片机(LKB-2188,瑞典)进行表面抛光。1.2 测试方法测量时,将用双面胶固定在钢制样品垫上,再放置在原子力显微镜(AFM XE-100型,PSIA公司)的样品台上(磁铁固定)进行扫描。AFM主要参数设定如下:接触模式,扫描速度和扫描力分别为0.5Hz和1.08nN。2 图像处理图像扫描后还需要通过原子力显微镜配套软件(XEI 1.5)进行数据处理与分析。得到原始的形貌像之后,图像处理主要步骤如下:第一步是斜度校正(Slope Correction ),为的是消除样品倾斜或弯曲(极小程度)造成的图像失真。通过软件的拉平(Flatten )功能可以方便地消除x, y方向的图像倾斜。第二步是消除噪声,保证图像的真实性。第三步根据需要还可以对图像进行滤波、放大、灰度转换、改变像素以及切面、输出3D图像等操作图。处理图像结束后得到了相对真实的表面形貌图,再直接进行分析。图1是一组木材横切表面斜度校正处理前后的表面形貌图。3 杨木细胞壁特征参数测量杨木细胞壁特征参数测量是通过原子力显微镜配套软件(XEI 1.5)来实现的。测量原理与方法见图所示。其中图2和图3分别为AFM扫描的杨木表面形貌图及细胞壁厚度、长度尺寸测试图。通过测量可知,所测杨木细胞横截面的壁厚尺寸为1.026-4.082μm;壁长为2.195-21.004μm。这与前人的研究结论相一致。这说明原子力显微镜完全可以在微/纳米尺度下对木材的细胞形态特征进行测量。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/01/200901081623_128216_1615676_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/01/200901081625_128217_1615676_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/01/200901081627_128220_1615676_3.jpg
[b][i]Deepcell周一表示,已与英伟达合作开发用于单细胞研究应用的生成人工智能技术。[/i][/b][align=center][b][i][img=image.png,113,83]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/174b29e0-2f00-4d45-af22-8d08603d1fda.jpg[/img][/i][/b][/align][align=center][b][i][img=e763286044be6f856573c041d533273b_logo_with_R.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/ee51f257-73e0-4f4c-beab-da55f87c445f.jpg[/img][/i][/b][/align]通过合作,公司将利用英伟达的计算专业知识和Clara一套专注于医疗保健的计算平台和软件,为基于细胞形态的分析应用程序构建新的算法,这些算法可以与Deepcell最近推出的REM-I高维细胞分析和分选平台等工具结合使用。Deepcell联合创始人、总裁兼首席技术官Mahyar Salek在一份声明中表示:“我们看到了将多模式和生成性人工智能融入我们的平台的多种可能性,并利用我们拥有的数十亿细胞图像的专有数据库来训练更多的人工智能模型。我们与英伟达的关系将帮助我们加快此类增强,并将这些进步带给我们的客户。”总部位于加利福尼亚州门洛帕克的Deepcell成立于2017年,是斯坦福大学的子公司,于2022年初筹集了7300万美元的B轮资金。Deepcell 是人工智能(AI)驱动的单细胞分析领域的先驱,旨在推动深度生物学发现,早在2023年2 月 6 日宣布,它已经发布了三个数据集,使研究人员能够探索新的高维形态数据。这些数据集是在 Deepcell 的高通量平台上生成的,该平台由成像和分选仪器、AI 模型和软件套件组成。Deepcell的首席技术官 Mahyar Salek曾经表示:“Deepcell的数据表明,深度学习可以实现较高的分类准确率,揭示了精确描述细胞特征和表型的新方法,并能够对感兴趣的细胞进行无标记分离,以进行进一步的深度分析。这项技术为生物医学界的科学家、转化研究机构和制药行业提供了一种新的工具,以从细胞形态学数据中获得对细胞的深度认识。”[b]关于 Deepcell[/b]Deepcell 是一家生命科学公司,它将 AI 引入细胞生物学,开启了称为形态组学的高维生物发现新领域。通过 Deepcell 的人工智能成像和微流体解决方案 REM-I 平台,该公司正在利用细胞形态学进行无限发现,从而实现新规模的细胞生物学研究和单细胞分析。Deepcell 的平台利用其 AI 模型,即人类基础模型,根据形态差异来识别和分类细胞,有助于推动基础和转化研究,并提供诊断测试和治疗靶向方面的未来应用。该公司于 2017 年从斯坦福大学分拆出来,已筹集近 1 亿美元的风险投资。[来源:仪器信息网译] 未经授权不得转载[align=right][/align]
产品简介:保存液快速对脱落上皮细胞、腺细胞、白细胞等进行很好的保存和固定,保持标本采集时的原始细胞形态,防止细胞在保存过程中发生变形、自溶等。并通过制片使细胞均匀涂布在载玻片上制成薄层细胞涂片。染色后细胞结构在显徵镜下清晰易辨,同时把血液、粘液和炎症细胞减少到最底程度,从而易发现和确认异常细胞。更有利于从细胞的形态变化判定细胞的病变程度,使判定结果更加准确可靠,提高异常细胞的检出率,大大提高宫颈癌筛查方法的特异性和诊断的准确率。·产品性能特点::红细胞处理能力强:无需另加裂解液,既可将全部红细胞彻底清除,同时完美保存有诊断价值的各种有核细胞形态,从而对于临床上重度宫颈糜烂病人(或大量血细胞标本)能轻松一次性处理干净·消化分解黏液能力强:充分消化粘黏液,去除标本中普遍存在的黏液等干扰成份,释放具有诊断价值的细胞,保留有价值的诊断背景,有效提高检出率,检测结果准确。·细胞形态:核结构完整,其中核膜、核仁、核染色质颗粒及分布清晰可见,胞浆的嗜染性正常,有利于鉴别细胞的类别及来源。 细胞萃取:采用梯度离心分离萃取及红细胞处理专利技术和黏液消化技术多合一去除液基细胞学标本中的血液、黏液等干扰成份,富集提取细胞及诊断成份。 ·兼容性强:保存的细胞同时可做免疫细胞化学、HPV-DNA和衣原体等病原微生物的分子生物学检测,无需多次采样的烦恼。·应用广泛:细胞保存液临床运用非常广泛,除了运用宫颈细胞学检查外,还有胸腹积液、尿液、滑膜液、支气管冲洗液、脑脊液、针吸穿刺细胞及痰液标本细胞检测。·保存时间长:细胞在保存液中保存30天形态不变,真正保持细胞原始形态,更接近本身的组织学结构,更有利于恶性病变与良性反应性改变的鉴别诊断。·保存液细胞包裹技术,可以使细胞均匀悬浮,保证操作者在涂片标本时的随机性,任意取样涂片都具有代表性。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106231241_301155_2324710_3.jpg
[url=http://www.f-lab.cn/microscopes-system/magnetic-tweezers.html][b]细胞单分子操纵磁镊系统[/b][/url],magnetic tweezers是继激光光镊技术仪器后又一种细胞操纵和细胞力学测量仪器.它采用倒置显微镜和电动平移旋转定位台和PicoTwist磁力细胞操纵捕获技术,组成强大的单分子操纵磁镊仪器。细胞单分子操纵磁镊系统是通过梯度分布的磁场对处于其中的可磁化微粒施力,通过显微镜观察并分析微粒运动过程,这套磁镊可同时对40个细胞分子视频采集和跟踪测量。[b]细胞单分子操纵磁镊系统特点[/b]操作稳定—图像漂移很低分辨率高,测力能力强—适合超薄样品可以同时对40个细胞单分子成像和跟踪测量磁铁来控制 DNA拉伸和超螺旋结构[b]细胞单分子操纵磁镊系统应用[/b]细胞单分子,生物单分子,细胞力学,生物力学等,在单分子水平上对生物分子行为(包括构象变化、相互作用、相互识别等)的实时﹑动态检测以及在此基础上的操纵﹑调控等;对单个生物大分子施以力或力矩,并测量它们的物理性质(如DNA弹性、蛋白质的力学变性等);对单个生物大分子施以力或力矩,测量它们的力学生化反应(如分子马达);研究机械力的作用如何影响细胞的生长、分裂、运动、粘附以及信号的传输,基因的表达;在生物大分子上施加力以使之发生构像上的变化,研究生物单分子形成新的结构,以及力学以及动力学之间的相互联系等。研究各种药物可能导致的DNA、蛋白质凝聚、变性过程;给出分子实时行为与性质的分布,有效避免对集群测量苛刻的同步(synchronization)要求,如DNA的解链(unzipping)、蛋白质的折叠(folding)等。[b][img=细胞单分子操纵磁镊系统]http://www.f-lab.cn/Upload/magnetic-tweezers.jpg[/img][/b]细胞单分子操纵磁镊系统:[url]http://www.f-lab.cn/microscopes-system/magnetic-tweezers.html[/url]
现如今市场上的ELISA试剂盒种类繁多,但是要如何找到适合你的那款呢?一款合适的细胞分离试剂盒可以说是实验成功的保障,因为只有获得正确的细胞,下游的分析结果才可能准确。目前,市面上有多种多样的分离试剂盒可供选择,它们的主要区别在于分离方法和筛选标志。正向选择VS负向选择细胞分离试剂盒的工作原理主要有两种,正向选择和负向选择。正向选择的试剂盒,使用与目标细胞直接结合的抗体来进行捕获。这种抗体通常与磁珠相连,可以利用磁铁将悬液中的抗体-磁珠-细胞复合物提取出来,再通过二抗将磁珠与目标细胞分开。负向选择的试剂盒也采用类似的抗体包被磁珠,不过这种试剂盒是通过去除样品中的非目的细胞,来间接捕获目的细胞。这两种细胞分离试剂盒如何取舍,主要取决于目标细胞的表面是否具有特异性强的筛选标志。这样的筛选标志能够实现特异性的捕获,避免所获得的细胞被非目标细胞污染。如果你的目标细胞刚好具有这样的筛选标志,那么正向选择的细胞分离试剂盒就是最佳选择。但如果目标细胞并不具有特异性强的筛选标志,那我们最好还是选用负向选择的细胞分离试剂盒。
关于流式细胞计使用等相关内容
科技日报讯 据物理学家组织网近日报道,美国斯克里普斯研究所开发出一种“液体活组织检查”技术,通过检查血液中有没有一种叫做循环内皮细胞(CECs)的特殊标记,能确认病人是否处于心脏病发作的高风险中。相关论文发表在最新一期的英国物理学会(IOP)刊物《生物医学》上。 血管内皮细胞排列在动脉壁上,当它们在血液中循环时,就和心脏病发作的进程密切相关。研究人员认为,这些循环内皮细胞所到之处会出现病变斑块、组织断裂和溃疡,造成动脉发炎。这些损害会形成血管阻塞,妨碍血液在动脉中流通,最终导致心脏病发作。 预测检查技术的原理是用健康的对照组来识别循环内皮细胞(CECs),并找出那些最近曾因心脏病发作而接受过治疗的病人。为此,研究人员开发出一种叫做“高清循环内皮细胞”(HD-CEC)化验的程序,探测并描绘出79名病人血液样本中的CEC特征。这些病人已经历过一次心脏病发作。他们用了两个控制对照组作为对比,包括25个健康人士和7个身患血管病并经过治疗的病人。该检测能从外形上以及循环内皮细胞与特殊抗体的反应中识别出它们,经过心脏病发作的人循环内皮细胞水平明显升高。 “在经历一次心脏病发作后,病人体内能可靠地探测到循环内皮细胞,而健康对照组中却没有。研究论文的目标是建立证据,我们已成功做到了这一点。”负责该研究的斯克里普斯研究所副教授彼得·库恩说,“相比于健康对照组,我们的结果非常明显。下一步就是要评估这项检测在心脏病发作早期识别中的有用性了。” 研究人员认为,这种技术现已能对那些显出征兆但尚未心脏病发作的人进行检测。此前尚无针对心脏病的预测检查,至少预测准确性无法令人满意。 他们还把检测结果与一种已经商业化的CellSearch检查进行了对比,CellSearch已获美国食品和药物管理局批准,用于检查癌症病人肿瘤细胞的数量。HD-CEC测试对循环内皮细胞显示出了更高的特异性,因为它用的是直接分析法,避免了浓缩阶段的偏差。“我们的检测能有效分析数百万个细胞,效率更高,但要保证你分析的是病人所有的可疑细胞。”(常丽君)来源:中国科技网-科技日报 2014年01月21日
http://www.people.com.cn/mediafile/pic/20110923/12/4263327015060539720.jpg这是人耳内静纤毛细胞的微距显微摄影图像。它们的作用是探测由于声波引发的空气机械震动,从而让我们听到声音。
目前国内对细胞破碎机的研究局限于实验研究,仅对某种结构均质阀的均质效果进行验证与分析,或是选择结构参数。实验研究的局限性使这种分析不够全面。高压细胞破碎机是目前生物工程领域广泛使用的一种细胞破碎机。作者结合近期国外对高压细胞破碎机的理论研究工作,应用半经验半理论的方法,分析探讨了高压细胞破碎机的均质理论。高压细胞破碎机的结构及工作原理: 高压细胞破碎机由高压泵和破碎阀两部分组成,高压泵通常采用柱塞往复泵,其结构与一般柱塞泵相同。破碎阀安装在柱塞泵的排出管路上,一般由阀芯和阀座构成,阀芯和阀座的结构形式对破碎效果、能耗以及阀的磨损影响极大。国外对破碎阀的结构进行了大量研究,设计出许多不同结构的破碎阀,研究主要围绕下列问题进行:1,在较低操作压力下提高破碎效果2,提高阀的使用寿命。意大利Niro Soavi公司为此,开发出R型细胞破碎阀,经过多年的实际使用,获得用户的认可。高压细胞破碎机工作原理: 高压细胞破碎机有一个或数个往复运动的柱塞,物料在柱塞作用下进入可调节压力大小的阀组中,经过特定宽度的限流缝隙(工作区)后,瞬间失压的物料以极高的流速(1000米/秒,最高可达1500米/秒)喷出,碰撞在阀组件之一的碰撞环上,产生三种效应: 空穴效应:被柱塞压缩的物料内积聚了极高的能量,通过限流缝隙时瞬间失压,造成高能释放引起空穴爆炸,致使物料强烈粉碎细化。(主要应用于均质) 撞击效应:物料通过可调节限流缝隙的以上述极高的线速度,喷射到用特殊材料制成的碰撞环上,造成物料粉碎。(主要应用于细胞破碎) 剪切效应:高速物料通过泵腔内通道和阀口狭缝时会产生剪切效应。(主要应用于乳化)经过这三种效应处理过的物料可均匀细化到0.1μm-2μm粒径。
古安泰[b][url=http://www.coantec.com/news/Details/226]高清内窥镜[/url][/b]功能特点包括以下五点: 1、技术先进:工业内窥镜采用最新电晶体CCD摄像和高亮度LED光源技术,视频图像明亮,显示图像清晰、色泽逼真、分辨率高。 2、强抗液性:从远端探头到手持柄,同三维系列工业内窥镜具有强耐水性,并且耐矿物、合成润滑油、航空燃油、煤油、汽油和柴油性极佳。3、经济实用:工业内窥镜性价比高,物超所值,该款无论是价格还是性能,在市场上均具有很大的竞争性,是您进行管道视频检测、精密仪器检测等的首要选择。4、操作简单:配有外置可充电池,便携式高清晰彩色液晶显示器,极大的方便了户外长时间的使用,并可配专用视频采集卡进行实时抓拍,一键便能实现。可与监视器或显示器连接,实时高清晰显示检测图像。5、坚固耐用:工业内窥镜线缆和镜杆基本都采用金属制成的。摄像头采用采用防刮防油污的玻璃壳,精密模具注塑成型,部分零件采用不锈钢铸压成型,保证产品经久耐用,防水,耐磨,耐腐蚀,提高了在恶劣环境下的耐用性。本产品适用于:1.气管/水管道清洗:有助于检查管道之前之后的清洁,防锈,防腐,防尘,放裂痕2.汽车行业:检查引擎,提高发动机,变速箱,消声,散热器,燃料管等部件的质量3.工业机械:用于检查发动机的伤痕或磨损,变速箱,液压系统,大大缩短了停机的时间4.航空工业:用于涡轮,叶片,燃烧室的定期检查或机体的检查,以及火箭发动机的研开发制造5.船舶工业:用于检查锅炉,汽轮机,柴油发动机,管道6.电子工业:用于确认产品的布线状况,检查机器的工作状况等
第七届国际分子与细胞生物学大会将于2017年4月25-27日在西安举行。大会活动主要包括主题报告、科技论坛、专题讨论会、展览展示、海报展示高端人才招募洽谈会等。会议议题包含干细胞、分子与细胞生物学的最新技术、分子细胞生物学、生物医药等。此外本届会议将邀请到国内外著名院士、以及来自世界50多个国家和地区的相关领域学者、企业高管、科研院所的科研专家等领衔主讲高端论坛近40个。为广大的国内外分子与细胞生物学领域嘉宾提供了相互交流的平台。同期将召开第二届遗传学大会和生物技术产业大会。三会联动,一次注册均可参加!大会网站:http://www.bitcongress.com/cmcb2017/cn/default.asp大会主席:尹玉新博士,北京大学基础医学院院长、北京大学系统生物医学研究所所长大会主题论坛演讲人:Martin Banwell 博士,澳大利亚国立大学教授 Christian Patermann 博士,德国欧洲委员会前主任 Robert S. Plumb 博士,英国帝国理工学院教授Dongping Zhong博士,美国俄亥俄州立大学教授Xiang Zhang博士,英国剑桥大学首席顾问,皇家学会会员 著名演讲人(国内)卢灿忠,中国科学院福建物质结构研究所教授罗顺,中国健顺生物科技有限公司总裁许胜勇,北京大学教授范兴明,云南省农业科学院研究员孙凌云,南京大学医学院教授、主任谭砚文,复旦大学教授陈建海,南方医科大学教授谢志红, 安徽医科大学教授华益民,苏州大学教授沈赞明,南京农业大学教授胡颖,哈尔滨工业大学教授刘磊, 北京大学教授郑彩霞,北京林业大学教授邓文生,武汉科技大学教授邓文礼, 华南理工大学教授王雯,首都医科大学教授陈兵, 第三军医大学教授张小莺,西北农林科技大大学杨铁林,西安交通大学教授秦 鸿雁,第四军医大学教授刘毅, 遵义医学院附属医院教授许乃寒,清华大学深圳研究生院教授茅卫锋,大连医科大学副教授张志远,中国国家生物科学研究所研究员蒋晓江,第三军医大学教授,主任医师刘书逊,第二军医大学副教授吴玉梅,第四军医大学副教授著名演讲人(国外):Ying-Jan Wang,台湾国立成功大学教授Julie Kazimiroff,美国艾伯特爱因斯坦医学院主任Samir Ounzain,瑞士洛桑大学博士后科学家Yitzhak Rabin,以色列巴伊兰大学教授Franz E. Weber, 瑞士苏黎世大学教授Christina L. Chang,台湾国立成功大学教授Ivan Robert Nabi,加拿大英属哥伦比亚大学教授Brajendra K. Tripathi,美国国立卫生研究院科学家Stefano Zanasi,意大利佛罗伦萨大学教授Vadim Davydov,俄罗斯国立医科大学教授So Yoon Kim,韩国延世大学教授Kari Keinanen,芬兰赫尔辛基大学教授Yi Wang,加拿大阿尔伯塔大学Yeu-Ching Shi,台湾Indigena Botanica公司Ruben G. Contreras,墨西哥高级研究中心首席研究员Yong Jia,美国诺华研究基金会基因组学研究所高级研究员Dongxia Xing,美国MD安德森癌症中心高级研究科学家Mark A. Birch-Machin,英国纽卡斯尔大学教授 Zvi Naor,以色列特拉维夫大学教授Jia-Ching Shieh,台湾中山医科大学副教授Emmanuel M. Drakakis,英国帝国理工大学教授Kiwon Song,韩国延世大学教授Gregory Lee,加拿大不列颠哥伦比亚大学教授Michael Uhlin,瑞典卡罗林斯卡学院研究员Makoto Fukuda,日本东京医科齿科大学Kwan-Kyu Park,韩国大邱大学教授Yonggui Gao,新加坡南洋理工大学副教授Edith Aberdam, 巴黎第七大学研究工程师Alex Kharazi ,美国Stemedica副总裁Jukka Tuomi,芬兰阿尔托大学研究室主任Charles H. Sherwood,美国阿尼卡疗法有限公司总裁、首席执行官David Trudil,美国NHDetect公司执行总裁Alain Verreault,加拿大蒙特利尔大学教授、首席研究员Susanne Staehlke, 德国罗斯托克大学医学中心研究员 会议议题专题一:细胞生物学的研究前沿论坛1:细胞核结构和功能 论坛2:染色质和表观遗传 论坛3:基因组不稳定性和DNA损伤 论坛4:细胞骨架、粘附和迁移 论坛5:中心粒、中心体和纤毛 论坛6:蛋白质结构和功能 论坛7:膜结构、动态、运输和调控 论坛8:线粒体功能和细胞能量代谢 论坛9:信号转导和信号网络 论坛10:细胞分裂和细胞周期 论坛11:蛋白质稳态、细胞应激 论坛12:细胞坏死与存活 论坛13:叶绿体和光合作用 论坛14:细胞壁生物学 论坛15:发育和形态发生 论坛16:免疫细胞生物学 论坛17:微生物和寄生虫生物学 论坛18:基因表达和转录调控专题二: 干细胞论坛1:胚胎干细胞和成体干细胞 论坛2:间充质干细胞 论坛3:造血干细胞 论坛4:神经干细胞 论坛5:细胞可塑性和重编程 论坛6:干细胞治疗专题三: 分子与细胞生物学的最新技术论坛1:基因组编辑技术 论坛2:高通量/高含量技术 论坛3:分子和细胞成像技术 论坛4:单分子和单细胞分析技术 论坛5:实验室芯片、微流体和微阵列 论坛6:流式细胞术 论坛7:新型细胞分离,分离和培养技术 论坛8:光遗传学专题四: 分子细胞生物学与生物医药论坛1:分子与细胞生物学和转化医学 论坛2:分子药物靶标研究 论坛3:癌细胞生物学 论坛4:细胞神经生物学 论坛5:神经退行性疾病 论坛6:生殖细胞和生殖疾病 论坛7:肌肉细胞和肌肉疾病 论坛8:RNA与疾病和治疗 论坛9:端粒、端粒酶与衰老 论坛10:模式生物和疾病模型 论坛11:组织修复与再生 论坛12:心血管生物学 论坛13:红细胞疾病 论坛14:时间生物学★ 企业展位展览范围 一、科学仪器区 分析测试仪器:光谱仪器、色谱仪器、质谱仪器、频谱仪器、波谱仪器、光学分析仪器、热分析仪器、表面分析仪器、元素分析仪器、成份分析仪器、过程分析仪器、图像分析仪器、射线分析仪器、气相色谱、液相色谱、显微镜、光学影像处理和其他通用分析仪器等。 通用实验室仪器:热量装置、反应装置、剂量称重系统、自动化装置、独立技术、实验室家具、实验室用品、实验室医疗设备、实验室数据系统、实验室图像分析及处理、实验室工艺及设备、输送设备与连接装置、清洁、烘干设备、超洁净环境工程设备等。 生化仪器、生命科学及微生物检测仪器、实验动物设施:多肽合成仪、氨基酸测试仪、DNA合成仪、诊断仪器、生物生化技术设备、生物培养箱、发酵罐、酶标仪、生物传感器、生物工程过程控制与生产工艺装备。行业专用分析仪器与设备:电子光学仪器、生化仪器、生命科学及微生物检测仪器、生物反应器、实验动物设施。二、试剂/消耗品区 通用试剂、仪器专用化学试剂、标准物质、实验室用化学品、电子试剂 、光化学试剂、生化和分子生物学试剂、医学/诊断/检验试剂、细胞/血清/培养基抗体、实验室消耗品。 三、生物医药区
细胞自噬是机体一种重要的防御和保护机制。但是这种自噬“信号”如何传递给细胞从而使其“执行”自噬过程,则一直是科学界的难题。近期,我校生命科学学院林圣彩教授课题组成功找到高等动物细胞在生长因子缺失条件下,启动自噬的部分“密码”,从而在细胞自噬机制研究方面取得重大突破。 4月27日,最新一期的美国《科学》杂志以研究文章的形式刊发了这项研究成果,并配发专门评述。这也是近三年来,我校生命科学学院第二篇发表在这一世界顶级学术刊物上的论文。2009年6月,该院韩家淮教授的一篇有关细胞选择死亡方式机制的研究文章曾“登上”该杂志。 所谓自噬,是指细胞消化自身蛋白质或细胞内的结构(细胞器)的一种自食现象。通过这种现象,细胞可以降解、消除和消化受损、变性、衰老和失去功能的细胞器和变性蛋白质等生物大分子,为细胞的生存和修复提供必须的能量。 科学家们认为,自噬与细胞凋亡、细胞衰老一样,是一种十分重要的生物学现象。有关实验表明,包括肥胖症、糖尿病、神经退行性疾病、免疫失调及癌症在内的人类许多重大疾病的发生都与该过程的异常有关。为此,自噬也是当前生命科学中最热门的研究领域之一。 据林圣彩介绍,对自噬进行分子机制的研究始于上世纪90年代的以单细胞生物酿酒酵母为模型的研究,目前,一系列构成单细胞生物自噬核心机器的基因已被发现并命名。 然而,对自噬在多细胞生物特别是哺乳动物中的调控机制的研究,科学界至今仍在不断探索中。摆在科学家面前的一个根源性的问题是:在多细胞生物中,诱导自噬的各种信号是如何被传递到细胞内自噬“核心机器”从而启动自噬过程的? 研究表明,与单细胞生物不同,在多细胞生物内,外界营养元素要依赖于生长因子的调控才能被转运到细胞内。一旦细胞外的生长因子匮乏,细胞便能启动自噬以维持能量平衡。那么,生长因子缺失这一信号又是如何“传达”的呢? 这也成为长期致力于细胞信号转导研究的林圣彩教授课题组近年来的研究目标之一。经过多年研究,课题组终于成功“**”这一自噬启动“密码”——即通过一种名为GSK3的激酶活性增高后磷酸化并随之激活乙酰转移酶TIP60,进而导致自噬核心机器中的蛋白激酶ULK1的乙酰化水平增强而启动细胞自噬。简言之,这一发现揭示了多细胞生物在生长因子缺失条件下的细胞自噬过程的新的介导分子及其通路。 林圣彩认为,弄清楚了细胞内到底有哪些蛋白分子“参与”了自噬和它们如何串联在一起,将有益于科学界从“源头”上认识相关疾病,并为这些疾病的诊断和治疗提供新的靶点。