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CO2培养箱主要由箱体结构件、温度控制系统和CO2浓度控制系统三部分组成。 1、培养箱体结构件由外壳、保温材料和不锈钢水套组成。工作室的设计是关键。采用水套方式,即除正面玻璃门外,其余五面均为充满水的不锈钢夹层,通过热水的循环,使工作室处于等温水的夹层包围中,因此受热均匀、恒定,升温快,降温慢,即使停电5~6小时,也保证细胞存活。采用双层门设计,二氧化碳培养箱内面的玻璃门便 于观察细胞生长,又对环境干扰较小;外门内侧设有自动控温的衬板,使玻璃门不结露、不受环境温度变化的影响。工作室内的风扇使气体循环,使工作室的温度和CO2 浓度均匀。水套顶层采用台阶状设计(该设计获得国家专利),既保证了培养箱顶部的水层均匀,又避免了风扇电机的高温和环境变化对工作室温度均匀性的影响。制造工艺也能保证体形变减少。 2、温度控制系统采用三路检测、三级控制的电路,而且还有防止温度过部电路。(而有些进口培养箱是单路检测、二级控制电路)温度传感器是先进的电压型集成电路温度传感器,而不是常用的热敏电阴、半导体、热电偶等传感器。 3、CO2浓度控制采用超声波传感器,具有性能稳定、检测速度快、能适应潮湿的箱内环境、寿命长不易损坏、线性好等优点(此技术已获得国家专利)。而国内外同类产品多数采用热导式和红外线式。热导式传感器结构热导式传感器结构简单、成本低廉,但过于灵敏,受环境影响大,容易产生零点漂移。红外线式传感器不能在潮湿的培养箱内工作,便采用外置传感器方式,将培养箱内的气体用气泵抽出并冷凝去湿后再检测,然后将气返送回箱内。这种方式管路复杂,机械耗损大,检测结果滞后,故障率也高。
选购二氧化碳培养箱最最关心的当然就是其高可靠性、对污染的防范和控制及使用方便。二氧化碳培养箱选择都有两条最基本的要求,一是要求二氧化碳培养箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度提供最精确稳定的控制,以便于其研究工作的进展;二是要求二氧化碳培养箱能够对培养箱内的微生物污染进行有效的防范,并且能够定期消除污染,以保护研究成果,防止样品损失。 首先是二氧化碳培养箱箱体内的温度均一性是用户需要考虑的主要因素,一般在箱体内配备了风扇以及风道的培养箱的均一度要好很多,同时此装置还有助于箱内温度、CO2浓度和相对湿度的迅速恢复。当然,风扇、风道的优化也是同等重要的。二氧化碳培养箱独特设计的大直径风扇和循环风道能够保证箱体内温度和二氧化碳浓度的均一性。 第二,保持培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素,因此精确可靠的温控系统是培养箱不可或缺的重要部分。为了使培养箱更加稳定的工作,我们推荐用户选用具备相互独立三重温度控制功能的二氧化碳培养箱,即箱内温度控制、超温报警控制和环境温度监控。好的二氧化碳培养箱的环境温度监控可以根据环境温度的变化自动调节培养箱外门辅助加热系统的功率,达到精确控制箱体内温度的目的。
用户对二氧化碳培养箱都有两条最基本的要求,一是要求二氧化碳培养箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度提供最精确稳定的控制,以便于其研究工作的进展;二是要求二氧化碳培养箱能够对培养箱内的微生物污染进行有效的防范,并且能够定期消除污染,以保护研究成果,防止样品损失。所以,选购二氧化碳培养箱的老师最关心的当然就是其高可靠性、对污染的防范和控制及使用方便。一、温度控制 1. 加热方式:气套式加热和水套式加热,两种加热系统都是精确和可靠的,同时它们都有着各自的优点和缺点。水套式加热是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定的,其优点:水是一种很好的绝热物质,当遇到断电的时候,水套式系统就可以比较长时间的保持培养箱内的温度准确性和稳定性(维持温度恒定的时间是气套式系统的3-4倍),有利于实验环境不太稳定(如有用电限制,或者经常停电)并需要保持长时间稳定的培养条件的用户选用。气套式加热是通过遍布箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的,又叫六面直接加热。气套式与水套式相比,具有加热快,温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点,特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养。此外,对于使用者来说气套式设计比水套式更简单化(水套式需要对水箱进行加水、清空和清洗,并要经常监控水箱运作的情况)。2. 温控系统:保持培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素,因此精确可靠的温控系统是培养箱不可或缺的重要部分。为了使培养箱更加稳定的工作,我们推荐用户选用具备相互独立三重温度控制功能的二氧化碳培养箱,即箱内温度控制、超温报警控制和环境温度监控。3. 温度均一性:二氧化碳培养箱箱体内的温度均一性也是用户需要考虑的主要因素,一般在箱体内配备了风扇以及风道的培养箱的均一度要好很多,同时此装置还有助于箱内温度、CO2浓度和相对湿度的迅速恢复。当然,风扇/风道的优化也是同等重要的,HF90二氧化碳培养箱独特设计的大直径风扇和循环风道能够保证箱体内温度和二氧化碳浓度的均一性。大直径风扇相比其他品牌培养箱的风扇,能够在低转速(低风速)时产生大的空气循环流量,在达到均一性目的的同时,降低风速、减少箱内震动。降低风速、减少震动同时也就大大提高了箱内细胞培养的成功率。二、二氧化碳浓度控制1. 两种控制系统:红外传感器(IR)或热导传感器(TCD)进行测量。两种传感器都是准确的,但都各有优缺点。热导传感器监控CO2浓度的工作原理是基于对内腔空气热导率的连续测量,输入CO2气体的低热导率会使腔内空气的热导率发生变化,这样就会产生一个与CO2浓度直接成正比的电信号。红外传感器(IR)它是通过一个光学传感器来检测CO2水平的。IR系统包括一个红外发射器和一个传感器,当箱体内的CO2吸收了发射器发射的部分红外线之后,传感器就可以检测出红外线的减少量,而被吸收红外线的量正好对应于箱体内CO2的水平,从而可以得出箱体内CO2的浓度。由于IR系统是通过红外线减少来确定箱内CO2浓度,而箱体内颗粒物能够反射或部分吸收红外线,使得IR系统对箱体内颗粒物的多少比较敏感,因此IR传感器应用在含HEPA高效空气过滤器的培养箱内比较合适,2. CO2测量系统自动校准功能:无论哪种CO2测量系统在使用一段时间后都会产生漂移,而产生漂移后直接会导致箱体内二氧化碳浓度不能稳定在我们的设定值,致使培养失败,所以我们在这里强烈建议用户在选购培养箱时必须要选择带有CO2测量系统自动校准功能的培养箱。3. CO2浓度均一性:此点与温度均一性的要求类似,在此就不做赘述。三、相对湿度箱内湿度对于培养工作来说是一项非常重要然而又经常被忽略的因素。维持足够的湿度水平并且要有足够快的湿度恢复速度(如在开关门后)才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败。目前大多数的二氧化碳培养箱是通过增湿盘的蒸发作用产生湿气的(其产生的相对湿度水平可达95%左右,但开门后湿度恢复速度很慢)。我们在此建议用户在选购二氧化碳培养箱的时候尽量选择湿度蒸发面积大的培养箱,因为我们知道湿度蒸发面积越大,越容易达到最大相对饱和湿度并且开关门后的湿度恢复的时间越短。四、防污染设计和消毒灭菌系统污染是导致细胞培养失败的一个主要因素,因而,二氧化碳培养箱的制造商们设计了多种不同的装置去减少和防止污染的发生,其主要途径都是尽量减少微生物可以生长的区域和表面,并结合自动排除污染装置来有效防止污染的产生。例如,鉴于CO2培养箱在使用过程中有时会伴有霉菌生长,为确保培养箱免受污染并且保证仪器箱体内的生物清洁性,相继问世了多种消毒灭菌方式,如带有紫外消毒功能的CO2培养箱);还有的设计生产了HEPA过滤器能过滤培养箱内空气,可过滤除去99.97%的0.3微米以上的颗粒此外,还开发设计了能使箱内达到高温湿热的环境从而杀死污染微生物,达到消毒灭菌目的的培养箱。这些装置对于细胞培养来说是必不可少,但选择何种清洁装置呢?首先,我们考虑的当然是各种方式的灭菌能力,紫外消毒能力是与紫外灯距离目标的距离的二次方成反比,距离越远,消毒能力越差,所以紫外消毒方式有其局限性,难以达到彻底灭菌的要求;HEPA过滤器由于受到过滤膜孔径的影响,无法去除病毒和一些微小细菌,也有其局限性;相比较而言,高温消毒是目前比较有效消毒灭菌的方法,高温消毒又分为两类,一是传统的高温干热消毒,另一种是先进的高温湿热灭菌。