全国范围能做[font=&][size=16px][color=#333131]黄芪多糖的生物活性检测的检测机构有哪些？[url=https://www.woyaoce.cn/helptest/detail-0a3fb37b3e3711582507a9b535f351a1.html]点击查看具体需求详情[/url][/color][/size][/font]
在做黄芪甲苷的时候，蒸发光散射检测器参数如何设
求助：最近一直咱纳闷，在做黄芪农残有机氯检测，用的是气相ECD检测器，柱子时DB-1701，进样口温度230℃，检测器温度为300℃，不分流进样。程序升温：初始100℃，每分钟10℃升至220℃，每分钟8℃升至250℃，保持10分钟。流速是1s/min,可是做出了九个对照品混合液中只出八个峰，有两个峰即PP'-DDD和PP'-DDT重合分不开，改变流量为2s/min也没见效果，另外进样品中也没见有相应的峰出现，但却在离目标峰不远处有个很大的峰，也是唯一一个峰，请问，大家遇到过此问题是怎么个处理的？
[color=#444444]黄芪有机氯类农残色谱法测定时最后一个对照品不出峰，ECD检测器，进样口温度230℃，检测器温度300℃，不分流，程序升温，初始温度100℃，10℃／min到220℃，8℃／min到250℃，保持10分钟。为什么最后一个pp'_DDT不出峰呢？请各位高手指教！[/color]
建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定黄芪甲苷含量的方法。方法：采用一种新的检测器-蒸发光散射检测器（ELSD）以黄芪甲苷为对照品对黄芪中的黄芪甲苷进行HPLC分析，色谱柱：Phenomenex-ODS；流动相：乙腈-水（37∶63）；流速：0.85mL/min；ELSD参数；漂移管温度：100℃；载气流速：2.7L/min。结果：黄芪甲苷在0.396～3.564μg范围内呈线性，回收率为97~94%（RSD=0.68%）。结论：本法具有良好的精密度和重现性，结果准确可靠，可作为原料的质量控制方法。
[color=#444444]之前用水提醇沉法提了黄芪多糖，课题要求检测其水解后单糖组成及比例，目前做到单糖组成这一步。[/color][color=#444444]水解用的是三氟乙酸，要求完全水解，对比条件中最剧烈的条件是5M三氟乙酸，100度水解10h，但是就算是这个条件，我进[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]时依然检测不到文献中说到的理论应有单糖，甚至也检测不到多糖，请各位帮忙找找原因。[/color][color=#444444]说说之前做的，水解后我有氮气吹干，保存于-80℃冰箱，几个条件都考察完后一起冻干。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]样品处理：75%乙腈和25%乙醇溶解水解后样品，离心，吸取上清。[/color][color=#444444]所用色谱柱：HILIC柱。[/color][color=#444444]后来也打了单质谱，依旧检测不出所需要的物质。[/color][color=#444444]不知道是哪一步出错了，请大家帮忙，多谢！[/color]
[font=??????][size=16px]目的 建立超快速[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱（UF[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS）法，同时测定黄芪中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖 苷的含量。 方法 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]测定采用0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱；Shim-Pack XR-ODS 柱 （75 mm×3.0 mm，2.2 μm）；流速为0.4 mLmin-1。质谱测定采用三重四极杆串联质谱仪，电喷雾电离源（ESI 源），负离子模式检测。 结果 黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷分别在1~50 μgmL-1（r = 0.999 6）、2~100 μgmL-1 （r = 0.999 8）范围内线性关系良好。黄芪甲苷含量为0.132%~0.140%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为0.055 1%~ 0.064 3%。 结论 HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]（?高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱联用技术）在检测黄芪中的有效成分方面表现出色。该技术结合了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的高分离效能与质谱的强大结构测定功能，为黄芪的成分分析提供了高灵敏度、高选择性和结构信息。 具体来说，HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]可用于黄芪中有效成分如黄芪甲苷、?毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷以及黄芪多糖等的定性和定量分析。通过对比所建立化合物库的化学成分与实测的化学成分质荷比信息以及化合物的裂解规律，可以确定各化学成分的结构信息，为黄芪的质量控制、药理研究及新药研发提供有力支持[/size][/font]
检测黄芪药材中的黄芪甲苷，用elsd检测器，c18柱，雾化管30 漂移管70 药典方法乙腈比水32比68 对照品塔板数11000，但是样品塔板数才2800，含量合格，要求塔板数是4000这是怎么回事，重做了好多次塔板数就是上不去
想问问各位你们都是用什么测黄芪甲苷的，用什么牌子的仪器，感觉怎么样？国家对测黄芪甲苷的仪器有什么灵敏度或者是其他方面的规定吗？我们公司想买蒸发光散射检测器来测黄芪甲苷，大家觉得哪个好些？老板的心理价位就8-10万吧，谢谢各位[em58]
【作者】 徐小利； 陈晓虎； 谢静；【Author】 Xu Xiaoli,Chen Xiaohu,Xie Jing(Chongqing Institute for Drug Control,Chongqing,China 401121)【机构】 重庆市药品检验所；【摘要】 目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定补中益气丸(浓缩丸)的黄芪甲苷含量。方法色谱柱为Diamonsil(钻石)C18柱(200mm×4.6mm,5μm),柱温为30℃,流动相为乙腈-水(38:62),流速为0.8mL/min,ELSD条件为漂移管温度110℃,气体流速3.0L/min。结果黄芪甲苷进样量在2.494～39.904μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为97.26%,RSD=1.94%(n=6)。结论所用方法简便快捷,测定结果可靠,可用于补中益气丸的质量控制。 更多还原【Abstract】 Objective To establish a HPLC-ELSD method to determination of astragaloside Ⅳ in Buzhongyiqi Wan.Methods Diamonsil-C18 column(200 mm× 4.6 mm,5 μ m) was employed,and its temperature was 30 ℃.Axetonitrile-water(38:62) was as the mobile phase at the flow rate of 0.8 mL/min.ELSD inlet heater was set at 110 ℃,and N2 flow rate of 3.0 L/min.Results The calibration curve of astragaloside Ⅳ was linear in the range of 2.494-39.904 μg(r=0.999 9).The average recovery was 97.26%,RSD=1.94%(n=6).Conclusion The... 更多还原【关键词】 高效液相色谱-蒸发光散射法； 补中益气丸； 黄芪甲苷； 含量测定； 【Key words】 HPLC-ELSD； Buzhongyiqi Wan； astragaloside Ⅳ； content determination； http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271543_386438_2352694_3.jpg
现在黄芪农残做9种的还是22种？有版友知道的吗？
黄芪静脉输液中黄芪甲苷和黄芪多糖的含量测定摘要:建立黄芪静脉输液中黄芪甲苷和黄芪多糖的含量测定方法。方法：用高效液相色谱法测定黄芪甲苷的含量，用碘量法测定黄芪多糖的含量。结果：黄芪甲苷和黄芪多糖的平均回收率分别为9751％、9918％，相对标准差分别为248％、191％。结论：本文建立的方法准确可靠、灵敏度高、重现性好，可作为黄芪静脉输[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量控制的有效方法。关键词:黄芪甲苷；黄芪多糖；高效液相色谱法；碘量法； 英文摘要:ToestablishthemethodfordeterminationofastragalosideIVandastragaluspolysaccharidesinRadixAstragaliinjectionMETHODS：AstragalosidewasdeterminedbyHPLCandastragaluspolysaccharidesbyiodometryRESULTS：Therecoveriesofastragalosideandastragaluspolysaccharideswere9751％RSD=248％and9918％（RSD=191％）respectivelyCONCLUSION：Thismethodisaccurate，sensitiveandrepeatable，andcanbeusedforqualitycontrolofthepreparation英文关键词:astragaloside；astragaluspolysaccharide；HPLC；iodometry；contentdetermination黄芪为补气药，性甘温，归肺、脾经，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功效。医疗实践证明，黄芪注射液对心气虚损、血脉瘀阻、病毒性心肌炎、心功能不全、脾虚困湿之肝炎有较好的疗效，也是肿瘤、免疫功能低下等较理想的辅助治疗药物。目前临床所使用的黄芪注射液为小容量针剂，需稀释后滴注，且不含黄芪多糖，所以疗效不够理想。为此，武警四川总队乐山医院和四川省乐山市三民药物研究所共同研制了含黄芪多糖、黄酮、苷类等有效成分的黄芪静脉输液。黄芪注射液的含量检测尽管WS3－β－3335－98执行标准仅要求采用薄层色谱法，但因高效液相色谱法操作更简便，精密度更高，故笔者参照文献以蒸发光散色高效液相色谱法[1]测定黄芪静脉输液中的黄芪甲苷含量；至于黄芪多糖含量的检测则选择采用碘量法。1仪器与试药11仪器美国奥泰公司高效液相色谱仪，包括蒸发光散射（ELSD）500检测器、Alltech426主机泵；电动离心机（江苏金坛公司）；TP－150超声波清洗机（北京天鹏公司）。12试药黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0781－9908）；甲醇、乙醇、正丁醇、氢氧化钠、硫酸、葡萄糖均为分析纯；乙腈为色谱纯；水为重蒸馏水。2方法和结果21黄芪甲苷含量的测定211色谱条件：色谱柱为ODS柱（250mm×40mm），柱温为40℃，流动相为乙腈－水（36∶64），流速为06ml/min，进样量为20μl。212漂移管温度选择：根据ELDS检测使用手册推荐，设置气体流速为300slpm，漂移管温度为75℃，观察流动相（不进样）进入检测器的基线噪音，不断改变漂移管温度（步长为5℃），根据基线随温度的变化情况，选择95℃为试验最优温度。213载气流速选择：设定漂移管温度为95℃，取黄芪甲苷对照液恒量，得相应峰面积，不断改变气体流速（步长为025slpm）观察峰面积和基线的变化情况，最终选择270slpm为试验最优载气流速。214最低检测限试验：精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解并稀释成浓度为1mg/ml的溶液作为贮备液，精密量取适量，逐步稀释测定，直到黄芪甲苷主峰信号为检测器噪声水平的3倍为止。得黄芪甲苷最低检测限为153ng。215线性试验：取“214”项黄芪甲苷对照品贮备液适量，精密量取10、20、30、40、50、60分别置于10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度（约相当于黄芪甲苷01、02、03、04、05、06mg）。以对照品峰面积的常用对数值为横坐标（X），以进样量的常用对数值（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程为Y=06001X—34896（r=09991），黄芪甲苷进样量在20μg～120μg范围内线性关系良好。216精密度试验：精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解并稀释至浓度为025mg/ml的溶液作为对照溶液，注入液相色谱仪，连续重复进样6次，测得黄芪甲苷的相对标准差为179％，精密度符合规定。217重现性试验：精密量取黄芪注射液适量（相当于黄芪甲苷约20mg）5份，按“2110”项下方法制备，测定黄芪甲苷含量。结果黄芪注射液中黄芪甲苷为2390mg，RSD=201％，表明方法重现性良好。218稳定性试验：取“217”项下样品溶液，分别于0、1、2、3、5、8h取样测定峰面积，结果RSD=107％，表明黄芪甲苷溶液在8h内基本稳定。219回收率试验：分别精密量取黄芪注射液适量（约相当于黄芪甲苷10、12、14mg）共3份，每份各精密加入对照溶液（0404mg/ml）25、30、35ml，按“2110”项下方法制备，测定黄芪甲苷含量，结果详见表1。由表1可见，平均回收率为9751％，RSD=248％，符合规定，说明方法具有可行性。2110样品中黄芪甲苷的含量测定：精密量取黄芪注射液100ml，置于烧杯中浓缩至10ml，加无水乙醇40ml沉淀，放置20min，离心，沉淀用80％的乙醇溶液洗涤2次，每次10ml，合并离心液与洗涤液，置水浴上蒸干。残渣加1％NaOH溶液10ml溶解，用饱和的正丁醇水溶液提取3次，每次20ml，合并正丁醇的水溶液，蒸干，残渣再加1％NaOH溶液5ml溶解，通过已处理的D101大孔吸附树脂柱（Φ15×20cm，内装树脂高约10cm）吸附，以1％NaOH溶液50ml洗脱，弃去，用蒸馏水洗至中性，再用30％乙醇溶液50ml洗脱，弃去洗脱液，继续用70％乙醇液50ml洗脱，收集洗脱液并蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml，得供试品溶液。精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解并稀释成浓度为01、03mg/ml的溶液作为对照溶液。分别精密量取上述溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，并以峰面积和进样量的对数值按二点法计算，详见图1；3批样品按上述方法制备测定，结果详见表2。22黄芪多糖含量的测定[2，3]221线性试验：精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖适量，加水溶解并稀释成浓度为10mg/ml的标准溶液，分别精密量取此标准溶液100、90、80、70、60ml，置于250ml碘量瓶中，分别加水0、10、20、30、40ml，然后精密加入01mol/L碘滴定液25ml，在不断振摇的情况下缓缓滴加01mol/LNaOH40ml，密塞，在暗处放置10min，然后加入05mol/LH2SO4液6ml，摇匀，立即用01mol/LNa2S2O3滴定液滴定，近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并同时作空白试验校正。以取样量（X）与Na2S2O3的消耗量（Y）进行线性回归，得回归方程为Y=009766X—000244，（r=09999），表明葡萄糖在60mg～100mg的范围内线性关系良好。222重现性试验：精密量取黄芪注射液100ml,按“224”项下方法制备5份，测定黄芪多糖含量，结果为10423mg，RSD=099％，表明方法重现性良好。223回收率试验：分别精密量取黄芪注射液（多糖含量为10423mg/100ml）120、150、180ml，每份各加入葡萄糖标准液（25002mg/ml）50、60、70ml制成80％、100％、120％浓度的溶液。分别浓缩至10ml，加无水乙醇40ml，放置20min，离心。沉淀用80％乙醇洗涤2次，每次10ml，弃去离心液与洗涤液，沉淀加热蒸馏水10ml溶解，并转移至25ml容量瓶中，定容，摇匀。分别精密量取3种不同浓度的溶液80、70、60ml置于250ml碘量瓶中，分别精密加水2、3、4ml，按“224”项方法测定，每个浓度测定3次，共9次，计算得到回收率为9918％，RSD=191％，详见表3。224样品中黄芪多糖的含量测定：精密量取黄芪注射液100ml，浓缩至10ml，加无水乙醇40ml，放置20min，离心。沉淀用80％乙醇洗涤2次，每次10ml，加热蒸馏水3ml使沉淀溶解并定容至10ml，摇匀。移置于250ml碘量瓶中，加入1mol/LH2SO420ml，置于水浴中水解2h，取出，放冷，加入2mol/LNaOH溶液调节pH值=7，冷却至室温。精密加入碘滴定液（01mol/L）25ml，在不断振摇的情况下缓缓滴加01mol/LNaOH40ml，密塞，置暗处放置10min。然后加入05mol/LH2SO46ml，摇匀，立即用Na2S2O3滴定液（01mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并同时作空白试验校正，计算即得（每1ml上述碘滴定液相当于9008mg的C6H12O6）。3批黄芪注射液样品，按上述方法测定多糖含量均符合规定，结果详见表4。3讨论测定黄芪甲苷含量时，如将精密量取的黄芪注射液浓缩后仅采用正丁醇的水饱合液提取制得供试品溶液，则所得的样品杂质峰多，基线略有漂移，因此不宜采用。黄芪多糖主要为葡萄糖，因此，可采用以葡萄糖或葡聚糖作对照品的苯酚－浓硫酸法[4]、蒽酮－浓硫酸法[5]或水解后用碘量法等测定其含量，但一般多采用后两种方法。采用蒽酮－浓硫酸法时，由于其线性试验回归方程为C=98481A＋08314（r=09663），浓度线性范围为35～165μg/ml，线性关系不好，故不宜采用。
有没有哪位大神用紫外或者示差测过黄芪甲苷啊，我们这边没有蒸发光散射，只能用紫外和示差，但是跟着文献上搜出来的资料完全没有走出来的迹象啊。仪器条件如下：1：紫外：流动相30%乙腈水，色谱柱150mm的C18柱子走，检测波长203。2：示差 流动相：67%甲醇水，色谱柱：150mm C18。以上，标都是用甲醇配的，最大浓度是500ppm。
使用蒸发光检测器做黄芪甲苷含量不出峰怎么办？使用的液相是伍丰手动的
【作者】 龙旭阳； 刘长发； 段富津；【机构】 黑龙江中医药大学； 黑龙江中医药大学 黑龙江哈尔滨150040； 黑龙江哈尔滨150040；【摘要】 目的:建立HPLC-ELSD法测定冠心康胶囊中黄芪甲苷的含量方法。方法:Diamonsil(钻石)C18色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水(36:64),柱温30℃;ELSD漂移管温度105℃;氮气流速2.7l/min。结果:黄芪甲苷在3.06~15.30μg范围内线性关系良好,r=0.9997,平均回收率98.58%,RSD为1.22%。结论:该法准确可靠,可作为冠心康胶囊的质量控制标准。 更多还原【关键词】 HPLC-ELSD； 质量标准； 冠心康胶囊； 黄芪甲苷； 【基金】 黑龙江省科技攻关课题(编号:5030177)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061730_381982_2352694_3.jpg
HPLC-ELSD测定芪桂消癓颗粒中的黄芪甲苷 张梦云，冯俭* ，张煜华，李煌，朱晗 (成都中医药大学附属医院，四川成都610072)摘要: 目的建立测定芪桂消癥颗粒中黄芪甲苷含量的方法。方法采用HPLC － ELSD 法，色谱柱为Diamonsil C18柱(150mm × 4. 6 mm，5. 0 μm)，流动相为乙腈－ 水(32∶68)，流速为1. 0 mL·min － 1 ，柱温为35℃;检测器漂移管温度为80℃，氮气压力为45 psi。结果黄芪甲苷7. 72 ～ 23. 16 μg 与峰面积的线性关系良好( r = 0. 9993)，平均回收率为97. 49%，RSD = 2. 08%(n = 6)。结论所建方法简便、准确、重复性好，可有效地控制芪桂消癥颗粒的质量。关键词: 高效液相色谱－ 蒸发光散射检测器法;芪桂消癥颗粒;黄芪甲苷http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207242113_379515_2432394_3.jpg
[align=center][color=#333333]黄芪含量测定[/color][/align]1 材料与试剂 乙腈（色谱级）、正丁醇、氨水、甲醇（分析纯）、黄芪甲苷（购自中检院）、血竭样品（送检样品）。2 色谱条件 LC-20AT液相色谱仪（日本岛津），色谱柱：Zorbax SB C18(250mm*4.6μm*5μm)（安捷伦），流动相：以乙腈-水（30：70）；蒸发光检测器（奥泰）；柱温35℃。3 样品制备（参照2015年版药典） 3.1 标准品溶液的制备 取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，即得。[align=center][img=,555,177]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121553061421_926_1858223_3.jpg!w555x177.jpg[/img][/align]3.2 样品溶液的制备 取本品中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5cm，柱高为12cm），以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。[align=center][img=,583,180]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121553295651_9515_1858223_3.jpg!w583x180.jpg[/img][/align]3.3 计算方法 分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。小结：每次接到黄芪样品大家都会来一句怎么又有黄芪，大概黄芪是比较受嫌弃的中药材之一了，药典上的方法过程比较繁琐，一般需要2-3天才能把前处理处理完。检测简述流程：浸泡过夜——索氏提取4h——旋干——萃取 （4次+2次）——蒸干（这个正丁醇不太好旋干比较耗时）——过大孔树脂柱（上样之前要洗至无醇味，然后上样后用3种溶剂洗脱）——旋干——定容待测。为了减少误差及节省时间，我们考察了正丁醇的萃取次数对含量的影响，我们用2次80ml和4次40ml进行对比发现结果相当，实验操作过程中萃取次数越多反而容易引起操作误差，值得大家注意的是大孔树脂上样前要洗至无醇味，这个对结果影响还是有的，保证数据的平行性，用同体积的水进行洗至无醇味。
HPLC法测定防己黄芪方中粉防己碱的含量摘 要目的 建立HPLC法测定防己黄芪方中粉防己碱的含量的方法。方法 采用Hypersil BDS C18色谱柱（4.6mm×200mm，5µm）。流动相为甲醇:水（含0.03%二乙胺）=80:20，柱温30℃，流速1.0mL/min，检测波长282nm。结果 粉防己碱在6.25µg·mL-1～200µg·mL-1呈良好的线性关系（r = 0.9993），平均回收率为94.4%，RSD = 1.6%，三种方法测定防己黄芪方中粉防己碱的含量分别为0.506mg·mL-1 ，0.424mg·mL-1 和0.541 mg·mL-1 。结论 本法简便，准确，重现性好，可作为防己黄芪方中粉防己碱的含量测定方法。关键词：防己黄芪汤；粉防己碱；HPLC ；含量测定Determination of Tetrandrine in Stephania andAstragalus Combination by HPLCABSTRACTObjective: To establish a HPLC method for the determination oftetrandrine in Stephania and Astragalus Combination Method : A Hypersil BDS C18 chromatographic column （4.6mm×200mm，5µm）served as the solid phase；methanol-water（80:20）(0.03% diethylamine) was used as the mobile phase；the column temperature was at 30℃；the flow rate，1.0ml/min；UV detection wavelength[fo
作者：曹敏; 武斌; 刘树民;（黑龙江中医药大学中医药研究院;）摘要：目的建立苍耳子配伍黄芪的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,研究配伍对各单味药主要特征峰的影响。方法采用HPLC分析苍耳子、黄芪单煎及苍耳子配伍黄芪合煎样品,选用Diamonsil C18色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),以甲醇-0.2%甲酸水为流动相进行线性梯度洗脱,流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm。结果建立了苍耳子配伍黄芪的HPLC指纹图谱,基本为两单味药特征峰的加和,无明显新特征峰的增加,但配伍合煎对某些成分的溶出有明显的相互抑制作用。结论本方法简便、快捷,为临床类方的配伍应用以及制定复方质量标准提供了参考。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061420_381877_1606903_3.jpg
10，抽取5个版友）；中奖名单：莫名其妙(注册ID：moyueqiu)捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）夏天的雪（注册ID：bingwang228）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702171503_01_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702171503_02_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================HPLC-ELSD法测定祝艾康胶囊中黄芪甲苷的含量方法：HPLC基质：动物提取物应用编号：102891化合物：黄芪甲苷固定相：Diamonsil C18(2)色谱柱/前处理小柱：Diamonsil 5μm C18(2), 250 x 4.6mm色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18 250 mm× 4.6 mm, 5μm(Cat#:99603) 流动相: 乙腈-水(33∶67) 流速: 1.0 mL/min 柱温: 35℃ 进样量: 20 μL 检测器: ELSDS文章出处：中国实验方剂学杂志 2010, 16(4):60-62关键字：祝艾康胶囊; 黄芪甲苷; 高效液相-蒸发光散射检测法, Diamonsil C18, 钻石二代,含量测定谱图：摘要：目的:建立中药复方祝艾康胶囊中黄芪甲苷的含量测定方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),乙腈-水(33∶67)为流动相,流速1.0 mL.min-1,柱温35℃,漂移管温度105℃,空气流速2.7 L.min-1。结果:黄芪甲苷在1.515～7.575μg具良好的线性关系(r=0.999 96),平均回收率98.83,RSD 1.8%。结论:该法准确、可靠、重复性好,可用于控制祝艾康胶囊的质量。http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/106-7.JPG
食疗方--【黄芪补气茶】【食材】黄芪10克、西洋参10克、枸杞子10克。【做法】煎水服用。【效果】益气滋阴、清热降火、消除疲劳、增强大脑记忆力。
[color=#00008b]前言：本篇是以黄芪含量测定的方法为例来介绍两点对数方程的应用，有关安捷伦1100的操作方法和蒸发光检测器的知识大家可以在本网和回帖中找到，如有疑问我们共同探讨。并在此感谢大家对文章的建议，也使我学到了很多知识，谢谢大家！[/color][size=4][b] 解析外标两点对数方程计算黄芪药材含量[/b][/size][b]方 法[/b]： 照高效液相色谱法，ODS柱，以乙腈-水（32：68）为流动相，流速1ml/min，经蒸发光检测器检测，用外标两点对数方程计算黄芪药材中黄芪甲苷的含量。[b]仪 器[/b]： 安捷伦1100型液相色谱仪、蒸发光检测器（ELSD）、ODS柱（4.6um*5mm*200mm）[b]供试品[/b]： 黄芪药材（检测成分：黄芪甲苷）[b]关键词[/b]： 高效液相法、蒸发光检测器、黄芪甲苷、粉碎、提取物、外标两点对数方程[b]正 文[/b]：[color=#dc143c]前处理：[/color]取约20g的黄芪药材放置于小型粉碎机内，粉碎后，盛装在密闭的容器中待用。[color=#dc143c]供试品制备：[/color]取黄芪药材粉末两份，Ⅰ.4.0037g；Ⅱ.4.0022g。分别置索氏提取器中，加甲醇40ml，浸泡过夜（大于8小时）。第二天，加甲醇适量，加热回流4小时，提取液浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇（制法：把水加入正丁醇中至饱和）振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液；用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷；通过D101型大孔吸附树脂柱(备注：自己装填)，并以水50ml洗脱，弃去水液；再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液；继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干；用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。简单讲，即把黄芪药材最后提取物（黄芪甲苷）溶解到5ml甲醇中。[color=#dc143c]对照品制备：[/color]称取黄芪甲苷对照品（中检所购入）0.0512g至100ml容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，摇匀，即得。[color=#dc143c]测定：[/color]系统平衡后，精密吸取对照品溶液10ul进样，得色谱峰面积Ⅰ.259457 ；进样20ul，得色谱峰面积Ⅱ.523039。供试品溶液进样20ul，两针，色谱峰面积为：Ⅰ.909836，Ⅱ. 902925 。根据对照品峰面积和进样量，以外标两点对数方程计算供试品含量。[color=#dc143c]两点对数方程定义：[/color]是利用两点的对数值呈线性关系求解二元一次方程y=ax+b。本题是利用对照品溶液两针进样量的对数值和所得峰面积的对数值呈线性的关系，把两组数据带入方程y=ax+b中，求得a和b，即求解了该方程式。然后带入供试品峰面积的对数值，求得供试品进样量的对数值，对其求反对数得供试品进样量（黄芪甲苷的量）。方程中x、y值均为进样量和峰面积取对数（lg）后的数值。简单讲，就是通过对照品溶液两针的进样量和峰面积（均取对数lg）求解方程式后，把供试品峰面积（取对数lg）带入方程式求得供试品的进样量。[color=#dc143c]数据处理：[/color]根据外标两点对数方程，应先计算得到方程式中的x、y值，才能求解此方程式。即取对照品进样量的对数值为x，取对照品峰面积对数值为y，计算结果如下：---------对照品-----------Ⅰ--------------------------Ⅱ---------进样量：---0.0512g×10ul（5.12ug）-----0.0512g×20ul（10.24ug）进样量取lg，得x：--------0.7093 --------------------1.0103 -----色谱峰面积：--------259457---------------------523039峰面积取lg，得y：--------5.4141---------------------5.7185 [color=#dc143c]方程式求解：[/color]根据“数据处理”中求得的x、y值，通过Excel图表中的XY散点图，以（0.7093，5.4141）、(1.0103, 5.7185)两点，求得方程如下：[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/09/200909021104_169264_1622024_3.jpg[/img][color=#dc143c]供试品进样量求解：[/color]取供试品色谱峰面积的对数值，得y，带入已求得的方程式y=1.0112x+4.6969，求得x，如下：---------供试品------------Ⅰ----------------------Ⅱ ---------称样量：--------4.0037g -----------------4.0022g -----色谱峰面积：--------909836-------------------902925峰面积取lg，得y：--------5.9590-------------------5.9557 通过方程，求得x：--------1.2481-------------------1.2448根据lg(进样量)=x，求x（1.2481、1.2448）的反对数，得供试品进样量:Ⅰ.17.7052ug 、Ⅱ.17.5711ug（黄芪甲苷）[color=#dc143c]含量计算：[/color]根据供试品称样量、样品的稀释倍数5ml及20ul进样量中黄芪甲苷的量，求得：供试品Ⅰ含量：（17.7052ug×5ml/4.0037g/20ul）×100%=0.1106%供试品Ⅱ含量：（17.5711ug×5ml/4.0022g/20ul）×100%=0.1098%平均值为：（0.1106%+0.1098%）/ 2 = 0.11%[color=#dc143c]结 果：[/color]该批黄芪药材中含黄芪甲苷的量为0.11%。[color=#dc143c]数据处理Excel表：[/color]见附件：[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=169305]黄芪含量测定数据处理全过程[/url][b]参考文献[/b]：1.《中国药典》2005版一部2.《高效液相色谱法及其在药物分析中的应用》（中华康网）3.《你了解蒸发光检测器吗？》（仪器信息网）（全文完，请大家指导！）===============================================================================================蒸发光检测器知识：一.[b]ELSD检测步骤[/b]：1）雾化：在雾化器中，洗脱液通过1个针孔与氮气（也可以用空气）混合，形成均匀的雾状液滴。2）流动相蒸发：液滴通过加热的漂移管时，流动相被蒸发，样品组分形成气溶胶，进人检测室。3）检测：在检测室内，用激光来照射气溶胶，产生散射，测定散射光强，记录散射光强度随时间的变化关系，就得到了色谱图。二.[b]ELSD检测原理[/b]：气溶胶受固定光强的激光照射后，待测组分的质量(m）和散射光强度(I)有以下的关系：I=Kmb lgI=blgm+lgK式中K和b为与蒸发室温度和流动相性质有关的常数。上式说明散射光的对数响应值与组分的质量的对数成线性关系。
液相质谱方法优化了很长时间，样品处理办法由开始的沉淀蛋白换成了液液萃取，还是在血浆中没有检测到。该化合物分子量为785.6，我的MRM是+,即807.6-627.5我看到文献有做成功的，可含量也很低Cmax=16ng，请问是黄芪甲苷在大鼠胃内被酸化了吗？还是有别的原因？灌胃液中含黄芪甲苷大于1mg/mL。[img=,555,239]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903211951256531_6859_3255306_3.jpg!w555x239.jpg[/img]
咳嗽喝黄芪陈皮饮。取黄芪15克、陈皮5克、红枣（去核）2—4枚，将所有原料放入锅中，加适量清水煎煮30分钟即可。该茶饮有助补肺、固表、健脾，适用于疲倦乏力、咳嗽不止者。??皮饮。取黄芪15克、陈皮5克、红枣（去核）2—4枚，将所有原料放入锅中，加适量清水煎煮30分钟即可。该茶饮有助补肺、固表、健脾，适用于疲倦乏力、咳嗽不止者。??
[align=center][b]HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法测定黄芪醇提物中的黄芪甲苷的含量[/b][/align][b]黄芪甲苷是黄芪皂苷提取物中的特征性成分，也是具有代表性的主要成分，黄芪甲苷可以促进患者心肌细胞的供氧能力，使冠状动脉供血区供血充足，避免因缺血导致的大范围心肌坏死，继而缓解患者心绞痛症状，平稳心跳速率[sup][/sup]。药典中有关于黄芪药材中黄芪甲苷含量的测定方法，但此方法并不完全适用于黄芪醇提物中的黄芪甲苷的含量测定，而且黄芪水提物与黄芪醇提物中化学成分有差异，预实验中发现测定黄芪水提物中黄芪甲苷含量建立的方法也不适应于黄芪醇提物中中黄芪甲苷含量的测定。本章实验利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url]建立黄芪醇提物中黄芪甲苷含量测定方法，并利用该方法测定其含量，计算出黄芪甲苷的转移率，用于黄芪醇提最佳提取工艺的优选。同时，本章实验系统地验证所建立的方法的可行性，为选择黄芪甲苷的含量测定方法提供参考。[b]1 材料和仪器1.1 样品 [/b] 收集9组黄芪醇提物样品，所有黄芪药材均由济宁华能制药厂提供。[b]1.2 试剂 [/b]黄芪甲苷对照品（成都瑞芬思生物科技有限公司批号H-013-170117）；乙腈为色谱纯（赛默飞世尔科技有限公司）；D101大孔吸附树脂（廊坊淼阳化工有限公司生产20160310）；盐酸溶液（国药集团化学试剂有限公司生产）；氢氧化钠溶液（国药集团化学试剂有限公司生产20160824）；超纯水。[b]1.3 仪器 [/b]液相色谱仪系统（美国Agligent Technology 公司1260型液相色谱仪，包括G1312B二元泵，G1322A在线脱气机，G1316A柱温箱）；NASCA F5100型自动进样器（日本SHISEIDO公司）；资生堂CAPCELL PAC CN 色谱柱（2.0*150 mm，5 mm，日本SHISEIDO公司）；API 4000型三重四级杆串联离子肼质谱仪（美国Applicated Biosystem Scuex公司）。[b]2 方法学考察2.1 色谱条件[/b]色谱柱为 Synergi C18 80A（250 mm×4.6 mm，4 μm），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水（35 : 65）进行等度洗脱；进样量10 μL；检测波长为203 nm；柱温30 ℃，流速为1 mL/min。黄芪甲苷保留时间约为10 min。黄芪醇提物和黄芪甲苷标准品HPLC色谱图见表5-1，表5-2。[/b][align=center][img=,690,365]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131711071808_2711_3237657_3.png!w690x365.jpg[/img][/align][align=center]图5-1 黄芪醇提物HPLC色谱图[/align][align=center][img=,690,373]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131711240945_4181_3237657_3.png!w690x373.jpg[/img][/align][align=center]图5-2 黄芪甲苷标准品HPLC色谱图[/align][b]2.2 质谱条件 [/b]电喷雾电离，正离子模式（喷雾电压：4.5 kV）；鞘气压力：30 arb；辅助气压力：10 arb；离子传输管温度：550 ℃；扫描模式：全扫描；扫描范围：m/z 100-1000。按“2.1.3”项下色谱条件进样，进样量10 μL。为进一步验证10 min出峰的物质是黄芪甲苷，利用LC/MS技术对黄芪皂苷提取物的化学成分进行研究，采用正离子源ESI检测。黄芪甲苷分子量784.97 Da，由于仪器差异，黄芪甲苷出峰时间后移至12.5 min，此峰的鉴定结果质谱图显示含大量黄芪甲苷。图5-3为黄芪皂苷提取物的正离子模式HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]总离子流图、分离子流图和质谱图。[align=center][img=,690,426]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131711415732_2681_3237657_3.png!w690x426.jpg[/img][/align][align=center]图5-3 黄芪甲苷正离子模式HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url] 总离子流图、分离子流图和质谱图[/align][b]2.3 供试品溶液的制备[/b]对D101大孔吸附树脂预处理：第一步用乙醇或甲醇清洗吸附柱内壁，向柱内加入称量好的树脂体积0.4-0.5倍的乙醇或甲醇，然后将新的D101大孔吸附树脂投入吸附柱中，使乙醇液面高于D101大孔吸附树脂层0.5 m，浸泡过夜。用2 个柱体积的乙醇或甲醇通过D101大孔吸附树脂层，用乙醇缓慢浸泡D101大孔吸附4-5 h，观察洗脱液加水后不呈白色浑浊为止。再用蒸馏水以2 BV洗柱，洗至洗脱液呈中性。用2 BV的5 %盐酸溶液以4-6 BV/h过柱，浸泡2-4 h。用蒸馏水以2 BV/h洗至洗脱液呈中性。用2 BV的2 %氢氧化钠溶液以4-6 BV/h过柱，浸泡2-4 h。最后用蒸馏水洗D101大孔吸附树脂，洗至洗脱液显中性即可。上样：取黄芪醇提物加水溶解至15 mL得黄芪提取液，以1 mL/min过树脂，先以4 BV蒸馏水洗脱，弃去水液，再用4 BV的70 %乙醇溶液洗脱，用烧杯收集吸附柱内的洗脱液，转入蒸发皿，水浴蒸干后，用甲醇溶解并转移至10 mL容量瓶定容。[b]2.4 对照品溶液的制备[/b]用万分之一天平精密称取10.1 mg黄芪甲苷对照品至10 mL容量瓶，加甲醇定容，得1.01mg/mL的对照品溶液，用0.22μm的微孔滤膜过滤，备用。[b]3 结果3.1 线性关系考察[/b]精密量取黄芪甲苷标准品10.1 mg黄芪甲苷，用甲醇10 mL制备成1.01 mg/mL黄芪甲苷储备液，然后吸取相应体积稀释成浓度梯度为150 μg/mL、250 μg/mL、300 μg/mL、400 μg/mL 、500 μg/mL的对照品溶液，上述对照品溶液按“2.3”项下色谱条件分别进样10 μL，利用自动积分功能测定峰面积积分值，以黄芪皂苷提取物中黄芪甲苷的峰面积积分值对标准品浓度进行线性回归，所得回归方程为y = 2821.6x + 12.438（回归系数[i]R[sup]2[/sup][/i]= 0.9989），证明蒙古黄芪中黄芪甲苷在150~500 μg/mL范围内线性关系良好，黄芪甲苷对照品标准曲线如图5-4所示。[align=center][img=,542,346]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131711574358_4557_3237657_3.png!w542x346.jpg[/img][/align][align=center]图5-4 黄芪甲苷标准曲线[/align][b]3.2 精密度试验[/b]在拟定分析条件下，精密吸取供试品溶液10 μL，连续进样 6 次，记录提取离子流图峰面积，测定黄芪甲苷量，计算得相对标准偏差RSD为1.9% ，提示该方法具有较好的精密度。[b]3.3 重复性实验[/b]取同一黄芪样品 6份，按2. 2 项下方法制备供试品溶液，在拟定分析条件下，准确吸取10 μl 进样分析，测定黄芪甲苷量，计算得 RSD为2.0%，提示该方法重复性良好。[b]3.4 稳定性试验[/b]取黄芪药材供试品溶液，分别在0 h、3 h、6 h、9 h、24 h、48 h后，在拟定分析条件下，准确吸取10 μl 进样分析，测定黄芪甲苷量，计算得RSD为 4.4% ，提示黄芪供试品溶液稳定性较差。[b]3.5 加样回收率试验[/b]精密称取 6 份黄芪甲苷量已知的黄芪水提物样品，每份折合黄芪药材 0. 5 g，分别准确加入浓度为 0. 0 342 mg /ml 黄芪甲苷溶液1 ml，1 ml，2ml，2ml，3ml，3ml，按 2. 2 项下方法制备供试品溶液，准确吸取 1. 0 μl 进样分析，测定黄芪甲苷量，计算回收率，结果见表3-1。由表3-1可见，方法平均回收率为 97.92%，表明该方法具有较好的回收率。[align=center]表5-1 黄芪甲苷加样回收率测定结果[/align] [table][tr][td] [align=center]样号[/align] [/td][td] [align=center]样品中的量/mg[/align] [/td][td] [align=center]加入量/mg[/align] [/td][td] [align=center]测得量/mg[/align] [/td][td] [align=center]回收率/%[/align] [/td][td] [align=center]平均值/%[/align] [/td][td] [align=center]RSD/%[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]0.96 [/align] [/td][td] [align=center]2.88 [/align] [/td][td] [align=center]97.92 [/align] [/td][td=1,6] [align=center]97.92 [/align] [/td][td=1,6] [align=center]0.7 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]0.96 [/align] [/td][td] [align=center]2.89 [/align] [/td][td] [align=center]98.96 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]1.92 [/align] [/td][td] [align=center]3.83 [/align] [/td][td] [align=center]98.44 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]1.92 [/align] [/td][td] [align=center]3.81 [/align] [/td][td] [align=center]97.40 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]2.88 [/align] [/td][td] [align=center]4.76 [/align] [/td][td] [align=center]97.92 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]1.94 [/align] [/td][td] [align=center]2.88 [/align] [/td][td] [align=center]4.73 [/align] [/td][td] [align=center]96.88 [/align] [/td][/tr][/table][b]3.6 黄芪甲苷的含量测定结果[/b]取9组黄芪水提物按照“2.3”项下操作，制备供试品溶液，准确吸取 1 0 μL 进样分析，在拟定的分析条件下，测定黄芪甲苷峰面积积分值，计算相应的黄芪甲苷含量。9组蒙古黄芪中黄芪甲苷含量测定结果如表5-2所示。[align=center]表5-2 9组蒙古黄芪中黄芪甲苷含量测定结果[/align] [table][tr][td] [align=center]试验号[/align] [/td][td] [align=center]峰面积[/align] [/td][td] [align=center]含量（mg/g）[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]560.07 [/align] [/td][td] [align=center]0.13 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]501.70 [/align] [/td][td] [align=center]0.12 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]564.61 [/align] [/td][td] [align=center]0.13 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]507.19 [/align] [/td][td] [align=center]0.12 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]524.05 [/align] [/td][td] [align=center]0.12 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]477.02 [/align] [/td][td] [align=center]0.11 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]7[/align] [/td][td] [align=center]921.07 [/align] [/td][td] [align=center]0.21 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]783.88 [/align] [/td][td] [align=center]0.18 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]9[/align] [/td][td] [align=center]924.71 [/align] [/td][td] [align=center]0.22 [/align] [/td][/tr][/table][b]3.7 黄芪甲苷转移率正交试验设计及结果[/b]醇提的黄芪甲苷转移率考察正交试验与醇提的出膏率考察正交试验设计相同，首先以乙醇作为提取溶剂，把影响药材提取效果的提取溶剂乙醇用量（A）、提取次数（B）、提取时间（C）确定为考察因素，以上三个考查因素各分3个水平考察，见表5-3。[align=center]表5-3 实验因素水平表[/align] [table][tr][td=1,2] [align=center]水平[/align] [/td][td=3,1] [align=center]因素[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]A（乙醇用量/倍）[/align] [/td][td] [align=center]B（提取次数/次）[/align] [/td][td] [align=center]C（提取时间/h）[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]10[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][/tr][/table]黄芪甲苷转移率=各实验组黄芪提取物中黄芪甲苷含量/原黄芪药材中黄芪甲苷含量×100%。原药材中毛蕊异黄酮苷的含量按照药典的方法测得的结果为0.4042mg/g。跟据实验数据，得到水提实验中设定的不同工艺条件下的毛蕊异黄酮苷的转移率，其中因素D为误差项，作直观分析表和方差分析表，见表5-4，5-5。[align=center]表5-4 黄芪甲苷转移率考察 L[sub]9[/sub](3[sup]4[/sup])正交试验表[/align] [table][tr][td] [align=center]试验号[/align] [/td][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]C[/align] [/td][td] [align=center]D[/align] [/td][td] [align=center]黄芪甲苷 转移率/%[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]32.01 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]28.60 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]32.28 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]28.92 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]29.91 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]27.16 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]试验号[/align] [/td][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]C[/align] [/td][td] [align=center]D[/align] [/td][td] [align=center]黄芪甲苷 转移率/%[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]7[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]53.11 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]45.09 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]9[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]53.33 [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]K1[/align] [/td][td] [align=center]92.89[/align] [/td][td] [align=center]114.04[/align] [/td][td] [align=center]104.26[/align] [/td][td] [align=center]115.25[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]K2[/align] [/td][td] [align=center]85.99[/align] [/td][td] [align=center]103.60[/align] [/td][td] [align=center]110.85[/align] [/td][td] [align=center]108.87[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]K3[/align] [/td][td] [align=center]151.53[/align] [/td][td] [align=center]112.77[/align] [/td][td] [align=center]115.30[/align] [/td][td] [align=center]106.29[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]优水平[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]R[/align] [/td][td] [align=center]65.54[/align] [/td][td] [align=center]9.17[/align] [/td][td] [align=center]11.04[/align] [/td][td] [align=center]8.96[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][/table][align=center]表5-5 黄芪甲苷转移率考察方差分析结果[/align] [table][tr][td] [align=center]方差来源[/align] [/td][td] [align=center]离差平方和[/align] [/td][td] [align=center]自由度[/align] [/td][td] [align=center]F[/align] [/td][td] [align=center]显著性[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]864.64[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]46.01[/align] [/td][td] [align=center]*[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]21.63[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]0.07[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]C[/align] [/td][td] [align=center]20.57[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]0.07[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]D [/align] [/td][td] [align=center]14.18[/align] [/td][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][td] [align=center]-[/align] [/td][/tr][/table]注：F[sub]0.1[/sub]（2,2）=9，F[sub]0.05[/sub]（2,2）=19，*为有显著性，-为无显著性。从正交试验结果可知：醇提实验中，各因素对黄芪甲苷转移率的影响大小顺序为：A（乙醇用量）B(提取次数)C(提取时间)；每个因素3水平之间的趋势为A[sub]3[/sub]A[sub]1[/sub]A[sub]2[/sub]，B[sub]1[/sub]B[sub]3[/sub]B[sub]2[/sub]，C[sub]3[/sub]C[sub]2[/sub]C[sub]1[/sub]，直观分析得最佳提取工艺为A[sub]3[/sub]B[sub]1[/sub]C[sub]3[/sub]，即加醇10倍量，提取1次，每次3h。表5-5的方差分析结果表明： A因素的影响具有统计学差异(PB(提取次数)C(提取时间)；每个因素3水平之间的趋势为A[sub]3[/sub]A[sub]1[/sub]A[sub]2[/sub]，B[sub]1[/sub]B[sub]3[/sub]B[sub]2[/sub]，C[sub]3[/sub]C[sub]2[/sub]C[sub]1[/sub]，直观分析得最佳提取工艺为A[sub]3[/sub]B[sub]1[/sub]C[sub]3[/sub]，即加醇10倍量，提取1次，每次3h。表5-7的方差分析结果表明： A因素的影响具有统计学差异(P0.05)，即乙醇用量对黄芪甲苷转移率具有显著影响。[b]4 讨论[/b]本章实验利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]技术，测定了黄芪醇提物中黄芪甲苷的含量，并系统地验证所建立的方法的可行性，经过试验条件的摸索，黄芪甲苷的色谱条件为35 %乙腈洗脱，所建立的方法能够较好的将黄芪甲苷与其他成分分开，可用于黄芪皂苷中黄芪甲苷含量测定，黄芪甲苷稳定性试验结果RSD值高于2 %，可能是由于黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ在酸性水解的条件下易转化成黄芪皂苷Ⅳ，即黄芪甲苷，使黄芪水提物中黄芪甲苷在48h内的稳定性不好。根据三个因素水平趋势可知，随着乙醇的用量增加，黄芪甲苷的提取效率越来越高，实验设置中每次10倍量是最大乙醇用量，这是从大工业生产和节能降耗等方面考虑的结果。根据煎煮次数水平趋势，提取1次的黄芪甲苷转移率最大，这有可能是因为黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ在酸性水解的条件下易转化成黄芪皂苷Ⅳ，即黄芪甲苷，而黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ在第一次就较完全的被提取出来，随着时间增加，转换成黄芪皂苷Ⅳ，即黄芪甲苷，第二次时黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ的结构可能被破坏，影响其转化成黄芪甲苷。第三次时可能黄芪甲苷被提取的更彻底，转移率又开始小幅增大。在3h内，当提取时间增加，黄芪甲苷会逐渐增大，原因可能是黄芪甲苷的提取更加彻底，黄芪皂苷Ⅰ或黄芪皂苷Ⅱ转化成黄芪甲苷最多。实验设置中每次3h是最大提取时间，这也是从综合成本与效率的角度考虑的结果。因此，综合考虑，将加醇10倍量，提取1次，共3h作为最佳醇提实验工艺。由黄芪甲苷转移率结合出膏率的到的综合评分的结果可以看出，不同提取工艺对黄芪醇提物中黄芪甲苷的含量和出膏率的影响不同，其中7、8、9组评分较高，三个组的黄芪甲苷转移率相较于其他组也是最高，但第8组出膏率却相对较低，另外出膏率高低的顺序也不与黄芪醇提物中黄芪甲苷的转移率高低的顺序项一致，这说明出膏率与黄芪醇提物中黄芪甲苷的转移率并无明显的对应关系。[align=center]参考文献[/align] 朱燕辉, 严奉祥. 黄芪甲苷及其生物学活性.现代生物医学进展,2008, 8 ( 4 ) : 781-783.
维权声明：本文为yhc2004原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。有机氯农药是一类高效广谱杀虫剂，曾在世界各国广泛使用。我国虽已在1983年停止使用这类农药，但由于它具有化学性质稳定、不易分解，并通过生物链富集在动植物体内，造成了对自然环境的严重污染及对人体健康的极大危害。中药材种植期一般较长，尤其是多年生根类药材，更易受到有机氯农药的污染。我国中药材中的农药残留的污染，是造成中药材质量下降的重要原因，已成为制约我国中药材走向国际市场的主要障碍。因此，中药材中农药残留问题已经引起了国内外的普遍关注，建立和完善中药材中有机氯农药残留量的检测方法十分必要。 黄芪药材为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。呈圆柱形，表面淡棕黄色或淡棕褐色，有不整齐的纵皱纹或纵沟。质硬而韧，不易折断，断面纤维性强，并显粉性，皮部黄白色，木部淡黄色，具放射状纹理及裂隙，呈“菊花心状”。气微，味微甜。嚼之有豆腥味。性温，味甘。具有补气固表，利尿，托毒，排脓，敛创生肌之功效。主产于山西、黑龙江、内蒙古等省区。以栽培的蒙古黄芪质量为佳。至今为止，对其中有机氯农药六六六、滴滴涕残留测定的研究未见报道。本文建立了黄芪药材中9种有机氯农药超声提取，毛细管气相色谱检测的方法，为提高传统中药的质量、建立和完善中药产品中有机氯类农药残留量的测定的方法提供依据。 1 仪器与试剂1.1 仪器 THGC－2001气相色谱仪，电子捕获检测器，弹性石英毛细管柱 30m×0.32mm×0.25μm。800型离心机。1.2 试剂 丙酮（分析纯），石油醚（沸程６０～９０℃，分析纯），二氯甲烷（分析纯）无水硫酸钠（分析纯）硫酸（分析纯）有机氯农药六六六（BHC）（α-BHC,β-BHC,γ-BHC,δ-BHC）、滴滴涕（DDT）（PP΄-DDE, PP΄-DDD ,ＯP΄ -DDT,PP΄-DDT）及五氯硝基苯（PCNB）标准品（农业部农药检定所）2 方法与结果2.1 对照品的制备2.1.1 对照品储备液的制备精密称取六六六（BHC）（α-BHC,β-BHC,γ-BHC,δ-BHC）、滴滴涕（DDT）（PP΄-DDE, PP΄-DDD ,ＯP΄ -DDT,PP΄-DDT）及五氯硝基苯（PCNB）农药对照品适量，用石油醚（60～90℃）分别制成每1ml约含4～5µg的溶液，即得2.1.2 混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚（60～90℃）稀释至刻度，摇匀，即得。2.1.3 混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚（60～90℃）制成每1L分别含0µg、1µg、5µg、10µg、50µg、100µg、250µg的溶液，即得。 2.2 色谱条件 弹性石英毛细管柱 30m×0.32mm×0.25μm；进样口温度230℃，检测器温度300℃，不分流进样；流速为28ml/min；程序
大茴香酸-硫酸荧光体系测定黄芪甲苷刘养清 杜鸣 徐秉玖关键词: 黄芪甲苷； 大茴香酸； 黄芪； 中药复方补阳还五汤； 荧光分光光度法中图分类号: R927.2 R284.1 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870(2000)07-0544-03黄芪甲苷(astragaloside)是中药膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.和蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao的主要活性成分，有抗炎、降压、镇痛、镇静、升高血浆中cAMP水平、促进小鼠再生肝DNA的含量［1,2］以及促进免疫功能等生理活性。黄芪甲苷的测定方法主要有：紫外分光光度法［3，4］、薄层扫描法［5，6］和HPLC法［7，8］。光度法常用香草醛在浓硫酸作用下与甲苷显色反应，空白值较高，干扰严重；薄层扫描法操作繁琐，准确度相对较差。黄芪甲苷仅在200 nm处有末端吸收，对HPLC法不利。黄芪甲苷的荧光分析尚未见报道。本文首次根据在浓硫酸条件下黄芪甲苷与大茴香酸反应产物具有荧光的特性建立了荧光分光光度法测定黄芪甲苷，方法灵敏度高、选择性好、线性范围宽、检出限低、操作简便。可直接用于黄芪生药、中药复方、黄芪制剂以及含药血清等多种样品的测定，无干扰。材料与方法 仪器 日本岛津RF-540型荧光分光光度计。 试剂 黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所提供)配成1.0 mg.mL-1的甲醇溶液。2％大茴香酸的无水乙醇溶液，72％硫酸溶液，85%磷酸溶液。所用试剂均为分析纯。 样品及处理 黄芪口服液(上海福达制药有限公司生产，批号980502)。取口服液1.00 mL，加入无水乙醇2.00 mL，离心分离沉淀，上清液蒸干，用甲醇1 mL溶解，备用。补阳还五汤复方汤剂煎煮3次，合并水煎液，分别用石油醚、氯仿、正丁醇萃取4次，每次萃取剂用量为水煎液体积的一半。合并正丁醇相，总体积为800 mL。取正丁醇萃取液2 mL，蒸干，用甲醇2 mL溶解，备用。含药猪血清样品(北京医科大学药学院生药研究室提供)：用补阳还五汤复方浸膏连续3 d喂猪，3 d后取血，分离猪血清，取猪血清50 mL，用正丁醇萃取4次，每次萃取剂用量为原血清体积的一半。得含药血清样品100 mL，取正丁醇萃取液4 mL，蒸干，用甲醇2 mL溶解，备用。黄芪生药样品：按文献［3］方法提取分离，甲醇溶样，备用。结果与讨论1 黄芪甲苷反应产物的激发光谱和发射光谱 取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.1 mL，于5 mL量瓶中，加入2％大茴香酸溶液0.6 mL、72% H2SO4溶液0.8 mL，于60℃水浴中反应20 min,迅速冷却后，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，在荧光分光光度计测荧光光谱黄芪甲苷反应产物最大激发波长Ex=320 nm,最大发射波长Em=387 nm。2 大茴香酸用量的影响 取大茴香酸0.1，0.3，0.5，0.6，0.7，0.9 mL按照分析方法操作，选择大茴香酸最佳用量。结果表明大茴香酸用量0.6 mL较合适(图1)。3 稀释液的选择 准确移取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷0.1 mL，按照分析方法操作，体积定容时选无水乙醇、甲醇、冰醋酸和水作稀释液，测得其荧光强度(If)分别为77.6,48.4,35.0,1.3。可见无水乙醇对荧光强度影响最小。本文采用无水乙醇作为稀释液。 Fig 1 Effect of amount of anisic acid4 酸的种类和用量的影响 选72％ H2SO4, 85% H3PO4及浓HClO4进行实验，结果发现选用72％ H2SO4时反应产物的荧光强度最大。对72%硫酸的用量进行选择，结果表明72％ H2SO4取0.8 mL为最佳(图2)。 Fig 2 Effect of amount of sulphuric acid5 反应温度的影响 准确移取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.1 mL，按分析方法内容操作，分别在40，50，60，70，80，90℃和沸水浴中反应20 min，同时做空白。考察荧光强度随温度的变化，结果表明：60℃时反应空白小，荧光强度较高。故实验选择60℃为反应温度较适宜。6 加热时间的影响 将温度控制在60℃，改变加热时间，考察加热时间对反应的影响。结果表明加热时间选20 min为宜。7 反应产物的稳定性 准确移取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.1 mL，按照分析方法操作，测定荧光强度值，每间隔5 min测定1次，对产物稳定性进行考察。结果表明反应产物在90 min内均稳定。8 工作曲线及检出限 分别准确移取1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.010，0.025，0.050，0.100，0.150和0.200 mL，在最佳实验条件下，测定工作曲线，得回归方程为：Y＝-0.4201+1.575X，γ＝0.9993。黄芪甲苷浓度在2.0～40 μg.mL-1与荧光强度呈良好的线性关系。检出限为0.02 μg.mL-1。9 干扰考察 为解决基体太浓或基体不一致所造成的影响，在适当稀释溶液后，采用标准加入法测定样品。为考察此反应选择性，利用薄层分离黄芪甲苷［6］后测定样品中其他物质的荧光强度，证明杂质荧光强度与样品总荧光强度的比1.2%。10 样品的测定与回收率实验 取被测样品6份各0.1 mL，依次加入1.0 mg.mL-1黄芪甲苷对照品0.0，0.01，0.02，0.03，0.04和0.05 mL，按照分析方法操作，分别测定了黄芪、复方补阳还五汤、黄芪口服液及猪血清样品中黄芪甲苷的含量，测定结果及回收率实验见表1。SampleContent/%Recovery/%RSD/%HQOL0.210±0.00298.5～101.91.8BYHWT0.280±0.02098.8～102.12.1AMB0.420±0.00498.6～102.02.0PS0.063±0.00198.8～102.41.9黄芪是补阳还五汤的君药，黄芪甲苷定量分析是黄芪中药制剂质量控制的重要指标，本方法灵敏度高，选择性好，操作简便且无干扰，可作为黄芪甲苷的质控方法。基金项目： 九五攀登计划项目杜鸣(北京医科大学药学院分析化学与药物分析研究室，北京 100083 )徐秉玖(北京医科大学药学院分析化学与药物分析研究室，北京 100083 )刘养清(山西师范大学化学系，山西 临汾 041004)收稿日期: 1999-08-03
黄芪饮片按照中国药典2015年版方法测定黄芪甲苷液相图谱为2个峰，用含黄芪的超微粉制成的颗粒，测定其黄芪甲苷，液相图谱为1个峰，为什么？颗粒不只含有黄芪，含有其他成分，求解答，谢谢
黄芪有促雌激素样作用，可使小鼠动情期（通常为一日）延续达10日之久。黄芪对小鼠的发育亦有良好影响。另有报告谓黄芪浸膏、黄芪内酯和黄芪固醇对大鼠和小鼠体重、提肛肌或肾脏等重量均无明显影响，表明无同化激素或雄激素样作用。红芪（多序岩黄芪）为黄芪的同科不同属植物，其多糖可明显升高老年大鼠血清睾酮含量。注:摘自《医学中央杂志》、《新医药学杂志》、《北京生理科学会1964年学术年会论文摘要》、《甘肃中医学院学报》
作者：张杰;张凌艳;李贺一; (哈药集团三精制药股份有限公司;三精艾富西药业有限公司;三精英美药业有限公司;)摘要：目的:建立高效液相色谱法测定生血康口服液的含量。方法:采用迪马(钻石)C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(35-65),流速1.0ml/min,蒸发光散射检测器。结果:黄芪甲苷与其它杂质能达到有效分离,在0.03021mg/ml~0.19206mg/ml范围内,浓度同峰面积呈良好的线形关系,r=0.999698,仪器精密度RSD为2.81%,方法的重复性RSD为3.78%。结论:该方法简便、准确、可行。可用于生血康口服液的质量控制。谱图：无
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