血浆检测

【作者】 王彦慧； 夏东亚； 郭涛；【机构】 沈阳军区总医院药剂科； 沈阳军区总医院药剂科 辽宁沈阳110016； 沈阳药科大学； 辽宁沈阳110016；【摘要】 目的:建立测定人血浆中盐酸曲马多的高效液相色谱-荧光检测法。方法:血浆样品经液-液萃取,以氟康唑为内标,在Diamonsil C18柱(迪马公司,200mm×4.6mm,5μm),以磷酸二氢纳缓冲液(0.04mol.L-1,pH3.5)-乙腈(77∶23)为流动相,荧光检测,激发波长为275nm,发射波长为302nm。结果:曲马多的线性范围为5~1 000μg.L-1,最低检测限为1μg.L-1。低、中、高3种浓度的日内日间RSD均小于7.7%,提取回收率分别为(85.2±4.3)%,(80.6±3.5)%和(83.6±3.6)%。结论:该法重复性好、准确、简便、快速,适用于人血浆中盐酸曲马多浓度的测定及临床药动学研究。 【谱图】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208142231_383915_1609970_3.jpg

作者：果崇慧; 刘德艳; 何国云;（河北省秦皇岛市工人医院; 河北省秦皇岛市山海关区人民医院;）摘要：目的建立一种灵敏、专属的高效液相色谱-紫外检测法,用于测定乌拉地尔在人体内的血药浓度。方法色谱柱为DiamonsilC18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.5mol/L磷酸二氢铵缓冲液(20∶80,V/V),流速1.0mL/min,检测波长268nm,内标为丁咯地尔。结果测得血浆中乌拉地尔质量浓度的线性范围为10～600ng/mL,最低定量限为10ng/mL。结论高效液相色谱-紫外检测法用于测定乌拉地尔在人体内的血药浓度,方法灵敏、专属、可靠。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271014_386285_1606903_3.jpg

[align=center][b][/b][/align][align=center][b]血浆醇沉工艺的在线质量监测[/b][/align][align=center]王佳月，臧恒昌[/align][align=center](山东大学药学院，济南，250012)[/align][b]摘要目的:[/b]在血液制品的多个生产过程中，低温乙醇沉淀法是分离纯化血液制品的重要的分离、提纯的方法之一。原料血浆沉淀作为血液制品生产环节中的上游关键环节又扮演者极其重要的角色。由于原料血浆的特殊性，很难保证批次间的重复性和一致性[sup][/sup]。基于此，本研究将血浆醇沉过程与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]进行有机结合，利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]快速无损的优点以增加对生产过程的了解，为实现生产过程的智能化制造提供了研究基础。[b]方法:[/b]本研究以血浆醇沉过程为研究体系，在实验室中模拟了5批正常生产过程及1批异常生产情况，讨论了NIRs对血浆醇沉过程的监测能力。通过对原始光谱的趋势分析、主成分分析（principalcomponent analysis，PCA）及多变量统计过程控制（multivariablestatistical process control，MSPC）分析，实现NIRs对血浆醇沉的过程监测。[b]结果:[/b]本研究说明了NIRs可以实现对血浆醇沉的过程监测，并且与离线的蛋白含量监测方法相比较更及时。从MSPC结果分析可知，采用主成分得分及HotellingT[sup]2[/sup]均可实现对异常情况的监测且监测结果较准确。[b]结论:[/b]本研究将NIRs分析技术引入使得该工艺自动化程度高，减少人为误差，实现对血浆醇沉过程检测的及时性且结果更准确。[b]关键词:[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]；血浆醇沉；在线质量监控[b] [/b][align=center][b]On-linequality monitoring of plasma alcohol precipitation [/b][/align][align=center]Liu-xiaohui, Zang-hengchang[/align][align=center]（Schoolof Pharmaceutical Sciences Shandong University, Jinan 250012）[/align][b]Abstract Objective: [/b]Inthe production process of blood products , low temperature ethanolprecipitation method is one of the important separation and purificationmethods for separating and purifying blood products . Plasma deposition of rawmaterials is a very important role of the upstream key link in the productionprocess of blood products . Due to the particularity of raw material plasma ,it is difficult to guarantee the repeatability and consistency among lots .Based on this , this study combines the process of plasma alcohol precipitationand near infrared spectrum to increase understanding of the production process, and provides the research foundation for the intelligent manufacture of theproduction process .[b]Methods:[/b] In thisstudy, 5 batches of normal production and 1 batches of abnormal production weresimulated in laboratory using plasma alcohol precipitation process as theresearch system, and the ability of NIRs to monitor plasma alcoholprecipitation process was discussed. Through the trend analysis of the originalspectrum, principal component analysis, multivariable statistical processcontrol analysis and protein content analysis, the process monitoring of plasmaalcohol precipitation was realized. Test. [b]Results:[/b]This study shows that NIRs can monitor theprocess of plasma alcohol precipitation, and it is more timely than the offlinemethod of protein content monitoring. From the analysis of MSPC results, we cansee that the principal component score and Hotelling T2 can be used to monitorthe abnormal situation and the monitoring results are more accurate. [b]Conclusion:[/b] This study introduces NIRsanalysis technology to make the process automation degree high , reduce humanerror , realize the timeliness of the plasma alcohol precipitation processdetection and the result is more accurate .[b]Keywords:[/b] near infrared spectroscopy plasmaalcohol precipitation On-line quality monitoring血浆醇沉过程是蛋白生产过程中的首要步骤，也是分离的关键步骤，其目的是为了将不同的蛋白最大程度的区分和保留，为下一步的各个蛋白的纯化和分离做准备。作为蛋白分离的首要步骤，其沉淀结果的优劣将直接影响终产品的质量和下游的分离过程。目前工业生产中的生产模式大都采用离线的方式，即通过计算固定的公式计算投料比，在反应临近终点时抽样送检。根据送检结果判定反应进行的阶段并预估沉淀终点。这种方式的缺点是其结果往往滞后于生产过程，不能对过程进行实时的监控。因此，为了更好的实现过程的控制和在线的含量监测，本实验将[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术引入到血浆中蛋白分离的过程中来，以达到准确判断沉淀终点、合理利用宝贵的血浆资源的目的。[b]1材料与方法1.1主要仪器与原料1.1.1试剂[/b]血浆（山东泰邦生物制品有限公司）；无水乙醇（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；去离子水[b]1.1.2仪器和软件[/b][align=center] [img=,582,184]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261844190501_4612_3389662_3.png!w582x184.jpg[/img][/align][b]1.2过程操作1.2.1醇沉过程[/b][sup][/sup]原料血浆在4℃条件下添加醋酸缓冲液调节血浆pH为5.95±0.05，称取此时血浆溶[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量，根据质量计算所应添加的95%乙醇体积。模拟生产工艺：醇沉过程在低温反应仪中进行，温度设定和实际生产反应温度一致，为-4.5℃。每个批次取100mL 血浆上清置于250mL的三颈瓶中，当温度为0℃开始加乙醇，正常批次用恒流泵添加乙醇，添加速度为0.875mL/min。醇沉开始前以及醇沉过程中每2min取样0.55mL用于蛋白含量的测定。一个批次的醇沉时间为40min，共得到42个样品，一共进行8个正常批次的醇沉过程及1个批次的异常醇沉过程。醇沉终点的计算：本实验中采用的乙醇添加量是根据工厂的固定生产工艺摸索总结得到的。工厂中采用乙醇喷加的方式，加入固定体积的乙醇后即为反应终点。具体的计算公式如下：需加乙醇量的体积=悬液体积×19%÷（R-19%）×0.835注：悬液体积为开始时的血浆体积；R为原料乙醇的浓度（%）；0.835为校正系数以本实验为例，计算醇沉终点时间和乙醇添加量分别为：乙醇量=100mL×19%÷（100%-19%）×0.835=19.5864≈19.59mL醇沉终点时间=19.59÷0.875≈22.39min[b]1.2.2实验室模拟醇沉过程[/b]本研究在实验室中模拟了5批次正常醇沉过程及1批次异常醇沉过程。其中，异常批次是为了考察模型的异常监测能力，为用低温反应仪模拟了搅拌异常的情况，在10min时停止搅拌，20min时恢复。（考虑到停止搅拌后溶液浑浊程度较大，乙醇的局部浓度会引起蛋白含量的变性对蛋白含量测定结果和意义影响较大，所以在20min时恢复搅拌条件。采用AntarisⅡ傅里叶变换[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱仪[/color][/url]的在线光纤探头直接探入三颈瓶的其中一颈，探头需没过液面以下，用铁架台固定探头进行光谱采集。探头采用透反模式，光谱范围4000-10000cm[sup]-1[/sup]，扫描次数32次，分辨率4cm[sup]-1[/sup]，采集光谱。光谱采集设定为自动采集，反应开始前及反应结束后各采集一张光谱，反应过程中每隔一分钟得到一张光谱。每一批次反应时间为40min，共得到光谱42张。[b]2 在线质量监测分析2.1样品的原始光谱2.1.1正常批次光谱[/b][align=center][img=,542,350]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270914066841_6377_3389662_3.png!w542x350.jpg[/img][/align]本研究中模拟了5批正常批次的血浆醇沉过程，共210个样品光谱图，采集得到的原始光谱图如图2-1所示。由图中可得样品间的光谱间相似性很高，波段7000-10000cm[sup]-1[/sup]吸光度跨越范围广并且有明显变化趋势。由于溶液体系中滴加乙醇的量从无到有，伴随着光谱产生了较大变化。由于多批次光谱图中观察光谱的变化趋势不明显，所以任选其中一个批次进行分析。[align=center][img=,487,352]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270914405481_1393_3389662_3.png!w487x352.jpg[/img][/align]以05批次为正常批次的代表批次进行下一步分析，其原始光谱图如图2-2所示。随着乙醇的加入，5000-4000cm[sup]-1[/sup]、6000-5000 cm[sup]-1[/sup]光谱的吸光度值有明显的下移趋势，10000-7400cm[sup]-1[/sup]有明显的上移趋势。乙醇的分子式为C[sub]2[/sub]H[sub]6[/sub]O，结构是为CH[sub]3[/sub]CH[sub]2[/sub]OH，其分子中主要含有三类氢原子，甲基氢（-CH[sub]3[/sub]）、亚甲基氢（-CH[sub]2[/sub]-）和羟基氢（-OH）。其中-OH的一级倍频吸收主要表现在650-6000cm[sup]-1[/sup]，二级倍频主要表现在7000-6600 cm[sup]-1[/sup]，组合频主要表现在4850-4750cm[sup]-1[/sup]，CH[sub]3[/sub]的一级倍频主要体现在5900-5750cm[sup]-1[/sup]，二级倍频主要表现在7300-7000、8800-8200cm[sup]-1[/sup]，CH[sub]2[/sub]的组合频主要表现在4400-4200cm[sup]-1[/sup]，一级倍频主要表现在6100-5700 cm[sup]-1[/sup]，二级倍频主要表现在7100-6800和8500-8000cm[sup]-1[/sup]。总体来说，乙醇的量是对光谱的变化的主要影响因素，乙醇基团的特征变化区域为4850-4200cm[sup]-1[/sup]、6100-5700 cm[sup]-1[/sup]、7000-6600cm[sup]-1[/sup]、8800-8000 cm[sup]-1[/sup]。[b]2.1.2异常批次光谱[/b]从图2-9中B图可以看出，整个形状聚集为两类不同形状的光谱图。第10-20min光谱形状与正常条件下光谱相类似但是更聚集，而第21-30min光谱整体聚集在一起，趋势变化较小且与之前相比光谱形状有较大差异。在第20min恢复搅拌后，21min出现明显的光谱形状变化，可能是由于检测的滞后性引起的。反应模拟条件为20min而不是25min恢复搅拌，主要是考虑由于停止搅拌，乙醇滴加局部过浓很有可能会导致蛋白的变性或失活，可能会对体系的产生较大的影响。[align=center][/align][align=center][img=,589,317]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270915042922_2529_3389662_3.png!w589x317.jpg[/img][/align][b]2.2 PCA分析2.2.1主成分得分2.2.1.1正常批次分析[/b] 与原始光谱分析方法类似一致，为了更细致的了解原始光谱变化的规律，我们随机抽取5批正常批次中的05批次进行PCA研究分析。为了去除沉淀后悬浊的蛋白颗粒对光谱的影响，将图谱用SNV预处理后进行进一步的分析。[align=center][/align][align=center][img=,572,312]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270917119111_5432_3389662_3.png!w572x312.jpg[/img][/align]图2-12表示的是PCA模型的RMSECV和RMSEP值随着LVs的变化情况。当LVs为3时，出现第一个明显拐点，RMSECV有较小值，因此选择3作为最佳的LVs。[align=center][/align][align=center][img=,609,276]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270918550312_7228_3389662_3.png!w609x276.jpg[/img][/align]如图2-13所示，A图表示PC1-PC 2之间的关系，B图表示PC1与PC3之间的关系。从图中，可以明显的观察到几个拐点，其中A图中的21点与B图中的21点都为明显的拐点，且与蛋白的沉淀终点所对应的样品点对应，推测其可能是由于蛋白沉淀造成的。由于第一、第二主成分的和为96.30%，即可以解释整体光谱的96.30%的变异，所以我们对前两个主成分进行分析以确定其各个主成分所代表的意义。[align=center][/align][align=center][img=,583,321]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270919143192_3078_3389662_3.png!w583x321.jpg[/img][/align]如图2-14所示，A图表示样品点与PC1之间的关系，B图表示添加的乙醇量与PC1之间的关系，C图表示总蛋白含量与PC1之间的关系。从图中可以看出，PC1得分与乙醇的加入量成一定的相关性，尤其是在生成沉淀之前，呈现相似的同一线性趋势，推测PC1得分有可能主要反应了醇沉体系中乙醇含量变化。在蛋白沉淀前，乙醇的加入量对PC1的影响较大，这可能是由于光谱采集到了大量的乙醇分子的光谱。此外，由于PC1的拐点与蛋白含量的拐点重合，20min之前PC1得分值升高，而蛋白含量基本不变；相反的，在20min拐点之后，蛋白含量不断下降而PC1值基本趋于稳定。说明PC1与体系中的蛋白含量也存在一定的相关性。[align=center][/align][align=center][img=,519,300]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270919336172_1352_3389662_3.png!w519x300.jpg[/img][/align]图2-15所示中，A图为样品与PC2 之间的关系图，B图为乙醇添加量与PC2之间的关系，C图为总蛋白含量与PC2之间的关系。结果显示随着醇沉时间的进行，PC2呈现“v”字形变化趋势，与乙醇添加量及总蛋白含量的总体趋势一致。1-5个点基本平稳，刚开始加入乙醇时为醇沉开始期；6-30个样品为沉淀期。其中蛋白含量与PC2呈现一致趋势，说明PC2可能主要反应总蛋白的含量；31-42个样品为沉淀结束后期，样品光谱及PC2得分趋于平稳。[b]2.2.1.2异常批次分析[/b]图2-19表示的样品PC1与PC2之间的关系图，可以明显的看出10-20min PC 1点聚集在一起，恢复搅拌后21min与22min有明显的断层，这一点在图2-19、2-20、2-21中都有所显示。说明光谱发生了显著差异，体系也发生了变化。停止搅拌后，由于乙醇滴加的位置没有变化，所以乙醇滴加处乙醇含量可能局部过高。恢复搅拌的瞬间，光谱采集到的仍有可能是局部乙醇含量较高的光谱。之后随着搅拌的恢复，体系逐渐恢复稳定。[align=center][img=,537,301]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270919516652_8993_3389662_3.png!w537x301.jpg[/img][/align][align=center][img=,531,301]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270920149681_3256_3389662_3.png!w531x301.jpg[/img][/align][align=center][img=,522,299]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270920308772_4410_3389662_3.png!w522x299.jpg[/img] [/align][b]2.3 MSPC分析：[/b]MSPC中常见的统计量包括主成分得分、HotellingT[sup]2[/sup]分析和SPE统计量等。在本研究中选用了主成分中的PC1和HotellingT[sup]2[/sup]进行进一步的分析。[b]2.3.1主成分得分控制图[/b]主成分得分是通过多变量投影方法计算得到，但是当主成分数目过多时，会造成监控的困难。在本研究体系中，PC1解释了光谱85%的变异，代表了大部分的光谱信息，得分代表了醇沉过程中体系的变化趋势，因此建立了基于PC1得分的主成分得分控制图。首先计算了5批正常醇沉过程的PC1得分的平均值和标准差，然后计算平均值±3倍的标准差作为控制图的上下临界线。如图2-25所示，图中表示PC1对正常批次的监控图，其中红色的控制线表示±3倍标准差得到的上下控制线。由图中可以看出，随着样品取样点和取样时间的推进，PC1得分呈阶梯状，1-5min变化趋势平缓，5-22min呈线性变化趋势，23-42min沉淀后期趋势平缓。5批样品的醇沉过程的PC1得分值的变化趋势基本一致，说明批次之间的差异较小。[align=center][img=,506,272]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270920461612_8757_3389662_3.png!w506x272.jpg[/img][/align]图2-26为异常批次的PC1得分控制图，其中红色线为上下的控制线，超出控制线视为异常情况。黄色线显示的是第10批次异常情况为第10min停止加乙醇，25min恢复的情况，从图中可以看出10批次在第11min时就超出了控制线，且PC1的得分值趋于稳定，在25min恢复后PC1值有明显的上升趋势，整体来说从10min停止乙醇后，体系的变化趋势就不在控制线内，即使恢复条件后仍超出了控制线。紫色线显示的是10min停止搅拌20min恢复的异常生产情况。从图中可以看出，异常批次在13min时超出了控制线，且PC1的得分值趋于稳定，在第20min恢复后，PC1得分值有明显的拐点，但仍超出了控制线。绿色线显示的是10min时增大流速25min时恢复的异常情况。从图中可以看出，第12批次在14min时超出了控制线，在25min恢复时，逐渐回到控制线内。由PC得分图可知，建立的控制模型图可以有效的对醇沉过程进行监测，可以实现对过程中的异常情况监测，及时发现仪器异常故障、人为操作失误等以保证过程的正常进行。[align=center][/align][align=center][img=,518,271]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270921347631_3537_3389662_3.png!w518x271.jpg[/img][/align][b]2.3.2 Hotelling T2分析[/b]HotellingT[sup]2[/sup]图反映了每个采样点在变化趋势和幅值上偏离模型的程度。如图2-27所示，正常批次的数据的Hotelling T[sup]2[/sup]统计量都在控制限以内，红色的控制线为3批样品的HotellingT[sup]2[/sup]的均值±3倍的标准差，说明这5个批次建立的模型所解释的过程变量运行正常。[align=center][/align][align=center][img=,527,260]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270921485631_5031_3389662_3.png!w527x260.jpg[/img][/align][align=center]图2-27 Hotelling T2对正常批次的监控图[/align] 如2-28所示，为HotellingT[sup]2[/sup]对异常批次的监控图，其中红色线为控制线。异常批次10批、11批和12批分别在13min、14min、13min超出控制线。异常样品与其余正常生产批次样品存在明显区别，判别结果与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]原始光谱判别结果（3.1.2）一致，说明采用HotellingT[sup]2[/sup]法对不同生产批次进行过程监控分析具有可行性。其中异常批次的生产过程在30min回到控制线以内，说明醇沉中终点可能受搅拌的影响较小，与乙醇添加量有较大的关系。[align=center][/align][align=center][/align][align=center][img=,510,290]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807270922483092_653_3389662_3.png!w510x290.jpg[/img][/align][b]3结果与讨论[/b]本实验主要在实验室中模拟了5批正常批次及3批异常批次的生产情况，讨论了NIRs法对血浆醇沉过程的监测能力。通过对原始光谱分析、PCA分析以及MSPC分析，结果发现用NIRs可以实现对血浆醇沉的过程监测且更及时准确。[b] [/b]从原始近红外的光谱分析中可以观察到体系中随着乙醇的添加导致的光谱变化规律，进一步归属光谱波段的化学基团，可以推测醇沉过程中发生的主要变化，为进一步探究醇沉过程及监测在线异常情况提供了理论依据。从MSPC结果分析可知，采用主成分得分及HotellingT[sup]2[/sup]均可实现对异常情况的监测。虽然部分情况下监测的结果有滞后，但是与传统的含量监测方法相比仍有明显的优势。[align=center][b]参考文献[/b][/align] Belië n J, Forcé H. Supply chainmanagement of blood products: A literature review. EUR J OPER RES, 2012,217(1):1-16. Cid J, Velásquez C A, Lozano M.Optimizing the blood component production process. Isbt Science, 2016,11(S1):19-25. Jurado M, Algora M, GarciasanchezF, et al. Automated processing of whole blood units: operational value and invitro quality of final blood components.. Blood transfusion Trasfusione del sangue, 2012, 10(1):63-71. E. J. Cohn, W. L. Hughes Jr.,and J. H. Weare. Preparation and Properties of Serum and Plasma Proteins. XIII.Crystallization of Serum Albumins from Ethanol-Water Mixtures1,J. Am. Chem.Soc., 1947, 69 (7), 1753-1761. Oss C J V. On the mechanism ofthe cold ethanol precipitation method of plasma protein fractionation.Journal of Protein Chemistry, 1989, 8(5):661-668. Cohn E J, Strong L E, Hughes WL, et al. Preparation and Properties of Serum and Plasma Proteins. IV. A Systemfor the Separation into Fractions of the Protein and Lipoprotein Components ofBiological Tissues and Fluids1a,b,c,d. J AM CHEM SOC, 1946, 68(3):459-475. Farrugia A, Scaramuccia D. Thedynamics of contract plasma fractionation. Biologicals Journal of theInternational Association of Biological Standardization, 2017, 46:159.

【作者】 方增军； 张斌； 孙德清； 【机构】 山东大学药学院； 山东大学第二医院药剂科 济南250033； 山东大学第二医院药剂科； 【摘要】 目的建立测定人血浆中氟罗沙星浓度的高效液相色谱方法,并用于其药代动力学研究。方法氟罗沙星血浆样品经甲醇沉淀蛋白后直接进样。色谱柱为Diamonsil C18柱,流动相为1%三乙胺(磷酸调pH至4.8)/乙腈(80/20,V/V),流速1.0mL·min–1。采用荧光检测器,激发波长290nm,发射波长458nm。氟罗沙星药代动力学研究采用双周期交叉试验设计。结果氟罗沙星血浆浓度在0.025~8.00μg·L–1范围内线性关系良好,低、中、高浓度质控样品的日内、日间精密度不超过5.16%,方法精密度99.1%~100.9%,提取回收率86.7%~92.0%。健康志愿者口服400mg氟罗沙星试验及参比制剂后主要药代动力学参数分别为:Cmax5.08±0.78和5.38±1.40μg·mL–1,tmax1.72±0.79和1.82±0.78h,t1/211.68±1.27和11.38±1.51h–1,AUC0-∞78.44±11.44和76.53±13.24μg·mL–1·h。结论该方法灵敏度高、定量准确,适用于氟罗沙星人体药代动力学研究。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207301426_380558_2379123_3.jpg

【作者】 何敏； 姚彤炜；【Author】 HE Min and YAO Tong-wei*(Department of Pharmaceutical Analysis and Drug Metabolism, College of Pharmac eutical Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310031, China)【机构】 浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室； 浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室 浙江杭州310031； 浙江杭州310031；【摘要】 目的　建立兔血浆中DL111 IT的高效液相色谱荧光检测法。方法　血浆样品和内标格列本脲经氯仿提取后 ,选用DiamonsilODS C18柱 (15 0mm× 4 . 6mm ,5 μm) ,乙腈 - 0 . 0 2 5mol·L-1磷酸氢二铵缓冲溶液 (磷酸调pH 5 .0 ) (6 0 .4 0 ,V/V)为流动相 ,流速 1 0mL·min-1,荧光检测 (λex=2 5 0nm ,λem=332nm)。结果　DL111 IT在浓度 1 .0 0～ 2 0. 0 0ng·mL-1范围内呈良好线性 ,r=0. 9996 ,n =5。高 (2 0 . 0 0ng·mL-1)、中 (10 . 0 0ng·mL-1)、低 (1 .0 0ng·mL-1) 3个质控样本平均提取回收率分别为85 . 3%± 1 .3% ,84 .9%± 2 . 7% ,85 . 8%± 1 .8% ,方法回收率分别为 99 .5 %± 0 . 4 % ,10 2 . 1%± 1. 8% ,10 .1 3%± 2 .4 % ;日内(n =5 )和日间 (n =5 )RSD分别低于 3 .0 %和 7. 0 %... http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207301441_380565_2379123_3.jpg

[align=center][font='times new roman'][size=16px]血浆外泌体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]在肺癌诊断中的应用[/size][/font][/align][font='times new roman'][size=16px]引言[/size][/font][font='宋体']外泌体作为重要的信息载体，参与肿瘤的发生、进展、转移和化疗耐药等过程，外泌体携带大量的遗传物质，已成为液体活检最理想的分析目标。外泌体也是目前最有前途的非侵入性诊断和预后的生物标志物之一。目前，超速离心法是外泌体分离的金标准。为了实现外泌体的临床价值，本研究以超速离心法富集了人血浆中的外泌体，并对健康人及肺腺癌患者的血浆样品做了区分，用于下游的肺癌诊断[/font][font='宋体']。[/font][align=left][font='times new roman'][size=16px]血浆外泌体用于肺癌诊断的策略[/size][/font][/align]肺癌仍然是世界范围内癌症相关死亡的主要诱因，因为大多数患者被诊断时均为晚期。因此，我们初步评估了超速离心法富集外泌体用于肺癌诊断的潜在适用性。我们收集了6名健康捐赠者和6名肺癌患者的血浆样本。利用超速离心法富集1 mL血浆样本中的外泌体，对比健康捐赠者和肺癌患者的血浆外泌体，结合数据分析，评估血浆外泌体在监测肺癌诊断方面潜在的适用性。[align=left][font='times new roman'][size=16px][color=#000000] [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]血浆中外泌体表征[/size][/font][/align]测试了超速离心法对复杂血浆样品的适用性。首先，利用纳米颗粒示踪分析对超速离心法得到的血浆外泌体进行了表征。如图（a）所示， 纳米颗粒示踪分析显示分离的外泌体粒径分布同样较窄，平均粒径为128.8 nm。与细胞上清样品类似，Western blot方法验证了分离外泌体的有效性。如图（b）所示，经富集后，典型的低丰度外泌体标记物同样得到了有效检测。以上结果证明，超速离心法能[img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img]够成功的用于血浆中外泌体的富集。[align=center][font='黑体'][size=14px]图[/size][/font][font='黑体'][size=14px] （a）重悬液中血浆外泌体的[/size][/font][font='黑体'][size=14px]纳米颗粒示踪分析技术[/size][/font][font='黑体'][size=14px]表征，（b）[/size][/font][font='黑体'][size=14px]Western blot方法[/size][/font][font='黑体'][size=14px]表征血浆[/size][/font][font='黑体'][size=14px]外泌体标记物HSC70、TSG101、CD63和CD9[/size][/font][font='黑体'][size=14px]蛋白条带[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=16px]血浆外泌体用于肺癌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]诊断[/size][/font][/align][font='宋体']我[/font]们收集了6名健康捐赠者和6名肺癌患者的血浆样本。利用超速离心法富集血浆样本中的外泌体。采用纳米颗粒示踪分析技术对血浆外泌体标进行表征。如图所示，与健康对照组相比，肺癌患者的血浆外泌体显著上调。对比健康捐赠者和肺癌患者的血浆外泌体，结合数据分析，证明血浆外泌体在监测肺癌诊断方面具有潜在的适用性。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310171534194891_9083_6197575_3.png[/img][font='黑体'][size=14px]图[/size][/font][font='黑体'][size=14px] [/size][/font][font='黑体'][size=14px]健康人与肺癌患者血浆中外泌体的[/size][/font][font='黑体'][size=14px]纳米颗粒示踪分析[/size][/font][font='黑体'][size=14px]技术[/size][/font][font='黑体'][size=14px]表征[/size][/font][/align][align=left][font='黑体'][size=18px]小结[/size][/font][/align]超速离心法可以高效、特异性地从人血浆中富集、纯化外泌体，在此我们评估了超速离心法在复杂血浆样品中的适用性。肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因，因为在原发癌症扩散之前进行早期诊断具有挑战性。以6例肺癌患者(6例健康供者为对照)的人血浆为样本，进一步研究超速离心法富集外泌体在肺癌筛查和诊断中的应用。这些结果证实了血浆外泌体在肺癌筛查和监测中的应用潜力。

【作者】 李秋红； 张丹丹； 李纯； 韩华；【Author】 Li Qiuhong Zhang Dandan Li Chun Han Hua (Pharmaceutical School Clinical Department,Heilongjiang University of Chinese Medicine,Harbin 150040)【机构】 黑龙江中医药大学药学院临床药学教研室；【摘要】 目的:建立测定大鼠体内血浆和唾液中槐果碱含量的HPLC分析方法。方法:采用色谱柱:Diamonsil(R)C18柱150mm×4.6mm,流动相:甲醇-0.1‰三乙胺水溶液(60:40,v:v),检测波长:220nm,柱温:30℃,流速:0.8ml/min。结果:槐果碱血浆和唾液的相对回收率分别为92.7%～96.6%和94.8%～113.0%,日内、日间精密度RSD10%,血浆和唾液中槐果碱浓度在8～160μg/mL和2～40μg/mL范围内相关系数分别为0.9994和0.9995,线性关系良好。结论:首次建立槐果碱唾液样品检测方法以及用HPLC法同时测定大鼠体内血浆和唾液中的含量方法,为槐果碱的临床药动学研究提供了新的方法学基础。 更多还原【Abstract】 This is a study to determine sophocarpine in rats’ plasma and saliva using HPLC approach.We made the study under the following parameters:Diamonsil(R)C 18 Column at 150mm×4.6mm,methanol-water containing 0.1‰triethy- lamine (60:40,v:v) for mobile phase,a detection wave length at 220 nm,a temperature at 30℃,and a flow-rate of 0.8 mL/min.The study has produced the following results:a relative recovery of sophocarpine in plasma and saliva at 92.7%～96.6%,and 94.8%～113.0% respectively;the RSD of intra... 更多还原【关键词】 HPLC； 槐果碱； 血浆； 唾液； 【Key words】 HPLC； Sophocarpine； Plasma； Saliva； http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061030_381710_2352694_3.jpg

10，抽取5个版友）；中奖名单：玲儿响叮当（注册ID：jshbhh）捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）大川之子,纵横四海(注册ID：chuangu120)翠湖园（注册ID：hhx050）sixingxing（注册ID：v2889187）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231507_611891_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231507_611892_1610895_3.png【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================血浆中利多卡因的测定方法：SPE基质：血浆应用编号：101288化合物：利多卡因固定相：ProElut PLS色谱柱/前处理小柱：ProElut PLS 30mg / 1ml 100/pkg样品前处理：1、样品准备 制备2 - 3 mL 血浆，取1 mL 血浆与1 mL 水混匀，待净化。2、净化 a 活化： 依次将1 mL 甲醇、1 mL 水加入ProElut PLS 30 mg/1 mL (Cat.#68002)，流出液弃去； b 上样： 将样品加入小柱，流出液弃去； c 淋洗： 1 mL 5% 甲醇水溶液淋洗，淋洗液弃去，将小柱抽干； d 洗脱： 1 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液； e 重新溶解：40 oC 下氮气吹干洗脱液，1 mL 流动相定容色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18(2) 200 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99602) HPLC应用101350文章出处：P040关键字：血浆，利多卡因，SPE，ProElut PLS摘要：适用于人与动物血浆中利多卡因的检测。谱图：http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/p91%20copy.png图例：1. 立多卡因

高效液相色谱法测定大鼠血浆和全血中核黄素的含量韦京豫， 郭长江， 杨继军， 蒋与刚， 李云峰， 徐琪寿（军事医学科学院卫生学环境医学研究所，天津）摘要：为了直接反映核黄素营养状况对血中核黄素水平的影响，建立了高效液相色谱测定大鼠血浆及全血中核黄素含量的方法。采用Diamonsil C18色谱柱250mmx4.6mm i.d.5um）分离，以甲醇5mol/l乙酸铵（体积比为1.2ml/min）为流动相，流速1.2ml/min，荧光检测器检测（激发波长450nm，发射波长：520nm）。样品经乙腈、三氯甲烷处理后进样分析。核黄素测定的线性范围5-200nmol/l，最低检测限为2.5nmol/l(s/n=2),日内测定的峰面积的相对标准偏差（RSD）为1.2%,日间测定的RSD=4.3%。核黄素在血浆样品中的加标回收率为97.0%-104%，在全血样品中的加标回收率为97.4%-104.4%.关键词：高效液相色谱法；核黄素；血浆；全血；大鼠http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207241234_379356_2355529_3.jpg