盲样检测

[align=center][size=20px]采用盲样测试对实验室人员检测能力实施内部监督[/size][/align]对实验室人员检测能力实施持续及时的监督是保证检测结果准确有效的重要保证，常见的监督方式有参加能力验证、留样再测、盲样测试、方法比对、人员比对、设备比对、观察现场试验、核查检验检测记录和报告、评审参加质量控制的结果和面谈等。参加能力验证是最有效的监督方式，但存在可参加的项目少、周期长、不能全覆盖到每个检测人员等缺点。方法比对、人员比对、设备比对实施相对简单，但结果统计繁琐，而且有时候难以保证公平公正。观察现场试验、核查检验检测记录和报告、评审参加质量控制的结果和面谈，不能直观的对检测能力进行评价。盲样测试是监督人员能力很直观有效的方法。下面说说我采用盲样测试对实验室人员检测能力实施内部监督的实施过程。一、这里的盲样包括有证标准物质和基体加标样品。有证标准物质购买回来后，撕掉标签，另外作内部编号，以密码样品的形式分发给检测人员。基体加标样品是在平行样品之一或纯基体中加标，以密码加标样品的方式给检测人员测试。[align=center][img=,690,37]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308012150379404_6138_2341876_3.jpg!w690x37.jpg[/img][/align]二、确定需要监督的人员，指定检测标准和结果提交时间，有时要对盲样的处理方法 和结果范围作说明。[align=center][img=,681,216]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308012145300472_3109_2341876_3.jpg!w681x216.jpg[/img][/align]三、检测人员按照检测标准提交结果，监督员对结果进行评价。对于有证标准物质，在证书结果范围内即为合格；对于加标样品，在检测标准要求的回收率范围内即为合格。[align=center][img=,690,164]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308012146043594_3227_2341876_3.jpg!w690x164.jpg[/img][/align]四、监督结果应用。对于检测结果合格的人员，确认其具备该项目的检测能力，后续适当减少对该项目的监督频次。对于检测结果不合格的人员，应与技术负责人一起配合查找原因，必要时重新进行盲样测试，后续应增加对该项目的监督频次。小结：盲样测试可以避免被监督人员相互“对答案”的弊端，是直观反应检测人员能力的一种监督方式。对于缺乏有证标准物质或有证标准物质昂贵的项目，密码加标是一种不错的方式，但要求监督员有一定的实验室基础操作的能力。

[align=center][b]盲样检测中的几大失误之处[/b][/align] 去年年底单位进行双认证复查评审，领导定了我作为此次盲样的检测人员，为此我提前一个月，在实验室对32种农残进行了加标回收率试验，所以我信心满满，势必顺利通过盲样考核，但想心事成并非那么容易，此次盲样是西葫芦有机磷中甲基对硫磷和有机氯中甲氰菊酯的盲样测试，用的是NY/T 761-2008方法，结果在盲样测试中出现了几大失误之处，现整理出来与大家一起分享一下，避免大家走弯路。[b] 一、 实验部分 1.1 仪器与试剂[/b] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]450[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]（美国布鲁克公司），PFPD、ECD检测器，高速分散均质机(上海标本模型厂)、氮吹仪、快速混匀器。乙腈（色谱纯）、正已烷（色谱纯）、丙酮（色谱纯）、氯化钠（分析纯）。 1.2实验方法 根据《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法》（NY/T 761-2008）进行检测。 1.3 标准溶液的配置 由农业部环境保护科研监测所提供，质量浓度均为100ug/mL，有机磷的标液用丙酮稀释至10.0ug/mL。有机氯的标液用正已烷稀释至10.0ug/mL。[align=center][img=,448,454]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807010952235190_1136_2976306_3.jpg!w448x454.jpg[/img][/align][align=center]图1：配制标液[/align] 1.4实验条件 有机磷的检测条件 色谱柱：VF-5MS（30m×0.25mm×0.25um）；温度：80℃保持1min，以20℃速度上升到130℃，再以5℃上升到200℃，再以15℃上升到250℃，保持11min。进样体积：1uL；进样品：250℃，不分流进样；检测器300℃；进样口温度：250℃；氮气流速：30mL/min；柱流速：2mL/min；空气流速：17mL/min；氢气流速14mL/min。 有机氯的检测条件 色谱柱：VF-1ms（30m×0.32mm×0.25um）；温度：80℃保持1min，以15℃速度上升到280℃,保持10.00min。进样体积：1uL；进样品：250℃，不分流进样；检测器300℃；进样口温度：250℃，氮气流速：30mL/min；柱流速：2mL/min。 1.5前处理过程[align=center][img=,411,408]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807010953085999_7556_2976306_3.jpg!w411x408.jpg[/img][/align][align=center]图2：准确称取样品25.0g，称取5-7克盐。并分别加入50mL乙腈。[/align][align=center][img=,448,448]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807010953560073_8632_2976306_3.jpg!w448x448.jpg[/img][/align][align=center]图3：匀浆及过滤[/align][align=center][img=,449,454]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807010954295696_4607_2976306_3.jpg!w449x454.jpg[/img][/align][align=center]图4：剧烈震荡具塞量筒、吸液及80度氮吹[/align][align=center][img=,448,454]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807010955238170_9409_2976306_3.jpg!w448x454.jpg[/img][/align][align=center]图5：氮吹近干时，加5mL丙酮。盖铝箔，在混匀器上混匀。用一次性针管吸液，加滤膜过滤膜后打入2ml进样瓶上机测定。[/align][align=center][img=,448,446]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807010956115458_1235_2976306_3.jpg!w448x446.jpg[/img][/align][align=center]图6：预淋洗小柱、丙酮+正已烷(10+90) 淋洗小柱、50度氮吹、加盖铝箔。正己烷定容，混匀，吸取2mL至进样瓶，上机测定。[/align][b] 二、盲样前处理过程中出现的问题[/b] 在准备盲样时我称取了5个25g样品，可供评审老师多种选择，还准备好了10ug/mL的甲基对硫磷和10ug/mL的甲氰菊酯标液，一切准备就绪，评审老师进入实验室加标，我回避，加标量不详。加标完毕我进入实验室开始前处理。原以为很顺利的实验，出现了诸多问题。[b] 2.1破碎样品用的笋瓜未提前上机测试[/b] 做盲样用的样品购买回来后经过清洗直接破碎至浆状，装样品袋备检。当评审老师询问是否提前上机测试过，购买的笋瓜是否有含有测试的甲基对硫磷和甲氰菊酯。我们说已经清洗干净了，评审老师没说什么，但最后证明，还是应该提前上机测定一下。[color=#ff6600]请看图[/color][align=center][color=#ff6600][img=,516,447]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807010957010439_709_2976306_3.jpg!w516x447.jpg[/img][/color][/align][color=#ff6600][/color][b] 2.2 前处理操作失误[/b] 此次盲样测试在前处理过程中出现了重大失误，在80℃氮吹后，误把加了正己烷的溶剂当成有机磷倒入离心管，并进行3次1mL丙酮洗烧杯并定容至5ml，混匀后加滤膜打入进样瓶2ml。再进行第二个样品操作时，猛然发现加错试剂，只好从原具塞量筒重新吸取10mL,好在原具塞量筒的液还够吸。经此一事得出经验教训，不管遇到什么事情都不能慌张，要小心谨慎，千万不可把试剂加错。[b] 2.3要实事求是，不能抱有任何侥幸心理[/b] 2.3.1平行样不平行 在这次盲样考核中，有机磷甲基对硫磷两个平行样很平行，可判断加标量为0.12mg/kg.值得一说的就是有机氯中甲氰菊酯加标量的测定，在一步一步小心谨慎的做完前处理，上机测定，等待的心情是紧张的，但看到结果的那一刻更是一下跌入谷底，两个本该平行的平行样出现不平行，由于之前在前处理出现的失误加上现在的不平行，当时的心情真是五味杂陈，但不敢多想，赶紧重新从原具塞量筒中再吸10mL，再做一遍，此时已经凌晨，上机测定，没想到拿到的结果和上次一样，仍是不平行。这可如何办？再来一次，这次具塞量筒只剩5mL了，再做一遍，上机测定，可没想到拿到的结果仍和前几次一样，仍是不平行。 2.3.2验证 这可怎么办？盲样已经没有了。重来没有机会了，为了验证我们在提前多预备的样品中自己加了个标，看结果是否平行。结果出来了，我们自己加标的样品结果却是平行的。这可怎么办？最后选择算个平均值吧，评审老师一看结果说，不可能是平行的吧，我的加标量不一样，你怎么能做出平行。此话一出当时。。。。。。啥也不说赶紧拿出原始实验记录本让老师看，评审老师看后点点头，这就对嘛有什么是什么赶紧出图报结果。虽然有惊无险，但也得到一教训，那就是实事求是，还有一点就是对自己还要多一点信心。[align=center][img=,553,450]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807010957587925_9467_2976306_3.jpg!w553x450.jpg[/img][/align][align=center]原始记录[/align][b] 三、结论[/b] 从这次盲样考核来说，还是有许多需要注意的事项：[b] 1[/b]、做盲样用的样品，破碎后一定要提前上机做基质测定，检测样品本身是否含有考核项或是否与目标物太近，不好判断。[b] 2[/b]、一定不要把试剂搞混，不能把丙酮当正己烷，也不能把1:9当正己烷使用。前处理的谨慎与否直接影响数据的准确度。盲样只有那么多，推倒重来的机会几乎没有。[b] 3[/b]、还要注意一定要实事求是，结果是什么报什么。要相信自己。 总结的有不到的地方，还请各位老师指导。

[align=center][font='宋体'][color=#000000][back=#ffffff][b]记一次盲样检测的常识性错误[/b][/back][/color][/font][/align][font='宋体'][size=18px][color=#000000] 定期参加室间比对是保证实验室检测能力持续符合要求的一项重要工作，也是对实验室人员整体能力水平的一次大考验。在我们实验室，每年至少经历2次上级主管部门组织的室间比对，比对项目涵盖常见的、经常开展的项目，比对结果好坏直接影响到整个资质有效期内主管部门对实验室的检查频次、严格程度，能否承接政府特定招标项目，而且在资质延续的评审中也会参考往年的能力验证结果进行评定。因此，每年开展能力验证时公司全体上下都非常重视。3月份，我们收到了报名通知，确定了参加比对的项目。为了迎接“大考”，在等待收样期间，我安排实验室人员对相关检测项目所需试剂、耗材、标物、质控样品等进行了一次盘点，该购买的尽快采购，并进行了一次培训，讲解了操作难点、要点，并对留样进行了复测，结果满意。本以为经过这么严谨的准备工作，应该不会出现什么大问题了，但实际检测的时候还是打了我一个措手不及，差点败在一个常识性的错误中。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=18px][color=#000000] 出问题的是一个二氧化硫的比对项目，做这个项目的实验人员做完质控样品后跑过来跟我说，质控样的结果不在范围内，而且相差好远，比对样品暂时不敢开封。我一听，质控样你都做不对，比对样品肯定不能做了。不敢耽误，马上看数据并详细询问了操作过程。检测人员说完全按照标准方法来操作。我仔细比较了这次和之前几次标准曲线的吸光度数据，几乎完全一样，看来问题不在标准曲线和试剂。我又问他质控样品你是怎么处理的，他说按照质控样品使用说明书的要求稀释20倍以后，当未知样品进行检测了。我看了标准上样品的前处理方法，对照他的检测结果，再看看质控样的范围，大概心算了一下，发现问题的原因了——这纯粹就是一个常识性的错误：最终结果没有考虑样品处理中的稀释问题。[/color][/size][/font][align=center][img=,690,475]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011617545463_7356_2341876_3.jpg!w690x475.jpg[/img][/align][align=center][font='宋体'][size=18px][color=#000000]图1 标准中的样品处理和测定步骤[img=,669,156]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011618351479_3932_2341876_3.jpg!w669x156.jpg[/img][/color][/size][/font][/align][align=center][font='宋体'][size=18px][color=#000000]图2 质控样品使用说明[/color][/size][/font][/align][font='宋体'][size=18px][color=#000000] 很明显，在样品处理的过程中，相当于将质控样品又稀释了2.5倍，最终结果是要乘以2.5才对的。[/color][/size][/font][font='宋体'][size=18px][color=#000000] 总结及原因分析：这个标准是完全配套空气中二氧化硫浓度的检测，标准中给出的计算公式直接是计算到空气中浓度，并没有涉及溶液中浓度的计算，而且我们平时做样品时的质量控制，考虑到成本，一般采用加标回收率的方法，这位检测人员平时做样品较多，操作还是熟练的，加标回收率一直很好，也是第一次做有证的质控样，因此没有过多的考虑，以为像平时一样检测结果就是最终结果。通过此次出现的问题，总结两点：1. 做盲样之前一定要先做质控样品，质控样品合格了，才能做盲样；2. 检测人员在操作过程中一定要有思考，不能日复一日的像个机器人一样重复操作，而对整个过程没有任何思考，否则稍微的一点条件的改变都可能造成整个头脑的“卡壳”。[/color][/size][/font]

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