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定量原理

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    突然感觉思维被禁锢了,有个困惑,gcms的定量原理是什么?积分面积、响应值?那么影响定量结果的因素是什么?好吧,我不是学化学的,刚入行,请各位老师指教

  • 液质定量的操作方法及原理

    新手上路,想请教一下waters的液质联用做样品定量分析(如尿素中三聚氰胺含量的测定)的操作方法和原理,越具体越好,尤其是数据处理这块?

  • 【求助】EDS定量分析原理及误差及影响因素

    各位大侠,帮忙解决我的问题吧,EDS定量分析原理及误差及影响因素,有没有这方面的资料啊?可否分享一下,对于这方面我不是很了解,经常回答不出别人的问题,此次想系统的学习一下,麻烦高人指点!感激不尽!

  • 咖啡机实现定量出水的原理是什么

    咖啡机实现定量出水的原理是什么

    在现代咖啡机中,定量出水功能的实现依赖于高精度的流量计。其中,霍尔流量计因其精确度高、一致性强、多种高低流量控制、体积小、安装简易、符合FDA、FGB以及支持流量定制等特性,成为了咖啡机中的流量计优选。霍尔流量计的工作原理基于霍尔效应。当叶轮内置的磁铁通过磁场时,磁场会对磁铁产生力,使得叶轮旋转。叶轮的转速与流量成正比,因此可以通过测量叶轮的转速来测量流量。在霍尔流量计中,叶轮的转速被转换成GS值,然后转换成脉冲信号输出。当咖啡机需要定量出水时,控制系统首先根据预设的水量来计算所需的脉冲数。然后,通过调整电机转速或控制阀门的开度来控制水的流量。当水的流量达到预设值时,控制系统会停止供水。[align=center][img=霍尔流量计,639,367]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/01/202401111456194509_3419_4008598_3.jpg!w639x367.jpg[/img][/align]由于[url=https://www.eptsz.com]霍尔流量计[/url]具有高精度和一致性强的特点,它可以确保咖啡机每次出水量的准确性。此外,多种高低流量控制功能使得咖啡机可以根据不同的咖啡冲泡需求来调整水量。同时,由于体积小和安装简易的特性,使得它在现代咖啡机设计中占有一席之地。咖啡机实现定量出水的原理主要依赖于高精度的霍尔流量计。通过霍尔效应和脉冲信号输出的方式,实现了水量的精确控制和调整。这种原理不仅提高了咖啡机的智能化程度,还为消费者带来了更加便捷和个性化的咖啡冲泡体验。

  • 【讨论】请教各位:关于光谱定量分析原理的疑问

    光谱定量分析原理是基于(罗马金-赛伯)公式I=aCb(a乘以C的b次幂),I为光谱强度,C为元素含量。我有个疑问:每种元素,都很多条特征谱线,是每条种谱线都满足此关系?还是只有某条才满足此关系?我们计算时,应该是选择某条来计算,但如果选择不同条,计算的结果,就会不一样。(我的理解不对,但不知道错在哪?请各位指点,谢谢!)

  • 饮水机定量出水原理是什么-小型流量计

    [font=等线]如今随着智能化的不断发展,很多饮水机都可以实现定量出水的功能,这样不仅方便用户取水,还可以节省资源,那么这个功能如何实现呢?[/font][font='Segoe UI'][font=等线]饮水机实现定量出水的原理主要是通过小型流量计来实现的。这种流量计具有精确高、一致性强、体积小、安装简易等特点,并且符合[/font]FDA[font=等线]、[/font][font=Segoe UI]FLGB[/font][font=等线]标准,同时支持流量定制,使其成为饮水机定量出水的理想选择。[/font][/font][font='Segoe UI'][font=等线]在小型流量计中,常用的有霍尔式流量计和光电式流量计两种。霍尔式流量计利用霍尔效应,将带有两极磁铁的叶轮置于垂直于磁场中,当水流经过叶轮时,叶轮会转动并产生一定的[/font]GS[font=等线]值,然后将[/font][font=Segoe UI]GS[/font][font=等线]值转换成脉冲信号输出。这种原理能够精确地测量水流量,实现定量出水的功能。[/font][/font][align=center][img=饮水机流量计,531,347]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404091505501362_2694_4008598_3.jpg!w531x347.jpg[/img][/align][font='Segoe UI'][font=等线]另一种常见的流量计是[url=https://www.eptsz.com]光电式流量计[/url],它利用叶轮切割光通路产生的脉冲信号来测量水流量。通过计算转轮的转动次数,可以准确地测量出水流的多少。相比于霍尔式流量计,光电式流量计不含磁铁,纯光学感应,对水质保护更好。它适用于透光率高的液体(如水),但对于透光性差的液体可能会有一定的差异。[/font][/font][font='Segoe UI'][font=等线]饮水机定量出水的原理主要是通过小型流量计来实现的,其中包括霍尔式流量计和光电式流量计两种常见的技术。这些流量计具有精确性高、安装简便等特点,能够满足用户对定量出水的需求,为用户提供便捷、节约资源的取水体验。[/font][/font]

  • 【讨论】请教各位:关于直读光谱分析光谱定量分析原理的疑问

    光谱定量分析原理是基于(罗马金-赛伯)公式I=aCb(a乘以C的b次幂),I为光谱强度,C为元素含量。我有个疑问:每种元素,都很多条特征谱线,是每条种谱线都满足此关系?还是只有某条才满足此关系?我们计算时,应该是选择某条来计算,但如果选择不同条,计算的结果,就会不一样。(我的理解不对,但不知道错在哪?请各位指点,谢谢!)

  • 荧光定量PCR:简介、原理、应用

    荧光定量PCR简介荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08年以来,仪器和试剂是遍地开花,这也使科研人员均跃跃欲试,都想借此技术使自己的研究能突飞猛进,发展势头通过查找每年所发表的文章数可一目了然。据有关统计,在 Medline 数据库中,用“Taqman” 或 ”real time PCR” 作为关键词检索,1996 年是19 篇,1999 年157 篇,到2003 年就高达2984 篇,2009年会是多少呢?我们不得而知。但其迅猛的发展势头却是不可更改的,本公司真诚希望能和众多研究人员共同努力,抓住这一大好时机,为科研事业的发展贡献自身的力量。基于这一目标,本公司长期以来对荧光定量PCR,无论是技术还是多年来的产品,均进行了深入地研究,并及时推出更加优异的荧光定量 PCR技术服务。荧光定量PCR原理荧光定量PCR最早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值(如下图所示)。荧光域值(threshold)是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值,它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上,但一般荧光域值的缺省设置是PCR反应前3-15个循环荧光信号标准偏差的10倍,即:threshold。http://www.biomart.cn/upload/asset/2011/01/25/1295364674.jpgCt 值:是指每个反应管内的荧光信号到达设定域值时所经历的循环数。Ct值与起始模板的关系:研究表明,每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代表Ct值如下图所示。因此,只要获得未知样品的Ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。http://www.biomart.cn/upload/asset/2011/01/25/1295364675.jpg荧光定量检测荧光定量检测根据所使用的标记物不同可分为荧光探针和荧光染料。荧光探针又包括Beacon技术(分子信标技术,以美国人Tagyi为代表)、 TaqMan探针(以美国ABI公司为代表)和FRET技术(以罗氏公司为代表)等;荧光染料包括饱和荧光染料和非饱和荧光染料,非饱和荧光染料的典型代表就是现在最常用的SYBR GreenⅠ;饱和荧光染料有EvaGreen、LC Green等。嵌合荧光染料法(SYBR GreenⅠ)SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料,与双链DNA非特异性结合。在游离状态下,SYBR Green I发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合,其荧光增加1000倍。所以,一个反应发出的全部荧光信号与出线的双链DNA量呈比列,且会随扩增产物的增加而增加。http://www.biomart.cn/upload/asset/2011/01/25/1295364672.gifSYBR Green I荧光染料与DNA双链的结合双链DNA结合染料的优点:实验设计简单,仅需要2个引物,不需要设计探针,无需设计多个探针即可以快速检验多个基因,且能够进行熔点曲线分析,检验扩增反应的特异性,低的初始成本,通用性好,因此国内外在科研中使用比较普遍。荧光探针法(Taqman 技术):PCR扩增时,加入一对引物的同时再加入一个特异性的荧光探针。该探针为一直线型的寡核苷酸,两端分别标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,PCR 仪检测不到荧光信号; PCR扩增时(在延伸阶段),Taq 酶的 5' - 3' 切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条 DNA 链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与 PCR 产物形成完全同步,这也是定量的基础所在。其过程如下图所示http://www.biomart.cn/upload/asset/2011/01/25/1295364673.gif荧光定量PCR的应用分子生物学研究1、核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等。2 、基因表达差异分析。 比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 ( 如药物处理、物理处理、化学处理等 ) ,特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证3 、SNP 检测。检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体对特定药物的不同反应有着重要的意义,因分子信标结构的巧妙性,一旦SNP 的序列信息是已知的,采用这种技术进行高通量的 SNP 检测将会变得简单而准确。4、 甲基化检测。甲基化同人类的许多疾病有关,特别是癌症, Laird 报道了一种称作 Methylight的技术,在扩增之前先处理 DNA ,使得未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不受影响,用特异性的引物和 Taqman探针来区分甲基化和非甲基化的 DNA ,这种方法不仅方便而且灵敏度更高。医学研究1、 产前诊断:人们对遗传性物质改变引起的遗传性疾病还无法治疗,到目前为止,还只能只能通过产前监测,减少病婴出生,以防止各类遗传性疾病的发生,如为减少X连锁遗传病患儿的出生,从孕妇的外周血中分离胎儿DNA,用实时荧光定量PCR检测其Y性别决定区基因是一种无创伤性的方法,易为孕妇所接受。2、 病原体检测:采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。3、 药物疗效考核:对乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒 (HCV) 定量分析显示:病毒量与某些药物的疗效关系。HCV高水平表达,干扰素治疗作用不敏感,而HCV低滴度,干扰素作用敏感;在拉米夫定治疗过程中,HBV- DNA的血清含量曾有下降,随后若再度上升或超出以前水平,则提示病毒发生变异。4、 肿瘤基因检测:尽管肿瘤发病的机理尚未清楚,但相关基因发生突变是致癌性转变的根本原因已被广泛接受。癌基因的表达增加和突变,在许多肿瘤早期就可以出现。实时荧光定量 PCR不但能有效地检测到基因的突变,而且可以准确检测癌基因的表达量。目前用此方法进行过端粒酶hTERT基因、慢性粒细胞性白血病WT1基因、肿瘤 ER基因、前列腺癌PSM基因、肿瘤相关的病毒基因等多种基因的表达检测。

  • 【原创大赛】归一化法定量的原理和注意事项

    【原创大赛】归一化法定量的原理和注意事项

    [align=center][size=24px]归一化法定量的原理和注意事项[/size][/align][align=center]概述[/align]归一化法是较为常用的色谱定量方法,因其操作方法简便、获得数据报告速度较快的优点,在石油化工、普通化工、医药生产等行业的过程产物监测和产品分析等场合下得到广泛的应用。但是采用归一化法定量(包括面积归一化法和校正面积归一化法)时,需要对谱图的分离情况和相应强度进行整体综合考量,否则不容易获得准确度和精密度良好的分析结果。[align=center]第一节 归一化法定量的基本原理[/align]色谱法定量的基本原理——在一定范围内,待测物质的质量与该物质色谱峰的峰面积(或者峰高)成正比,如式1-1所示(以待测物质质量为例):[align=center] (1-1)[/align]式中 m —— 样品质量; f —— 校正因子; A —— 峰面积。例如某待测样品中总共含有四种物质(物质a、b、c、d),在某色谱分析条件下获得色谱数据,如图1所示:[align=center] [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110072204194960_9557_1604036_3.jpg[/img][/align][align=center]图1 某样品色谱图[/align]那么某种物质在该样品中的质量百分比含量即为: (1-2)式(1.2)即为校正面积归一化法的定量公式。当采用校正面积归一化法定量时,需要事先获得样品中所有组分的校正因子fi——一般需要通过实验测定或者通过文献检索获得。基于色谱定量的基本原理式(1-1),可以得知校正因子(以质量校正因子为例)为样品质量与峰面积的比值,如式(1-3)。色谱工作者需要使用标准样品进样测定之后,根据标准样品的质量与峰面积的比值计算目标物质的绝对校正因子f。 (1-3)显然在处理复杂样品分析时,实验员的工作量会比较大。另外部分情况下无法获得全部出峰组分的标准样品——某些组分甚至可能是未知物质。某些化学结构类似的物质具有数值接近的校正因子,当色谱工作者采用归一化法进行此类样品定量时,可以假定所有组分的校正因子均相同(例如令所有组分的校正因子fi = 1),那么某组分在样品中的质量分数可以表示为式1-4. (1-4)此即为面积归一化法,是校正归一化法的特例。实际的分析工作中,较难满足所有组分校正因子均相同这一条件。所以面积归一化法的分析准确度不太高,但操作简易、定量结果对进样体积重复性要求较低、对实验室的仪器硬件和操作人员水平要求不高。面积归一化法在化工分析中较为常见,例如石化行业采用fid检测器定量烃类的面积归一计算结果,比较接近质量百分比浓度。[align=center] 第二节 归一化法定量对样品的要求[/align]可以采用归一化法的待测样品中的全部组分应当在检测器上均可出峰,或者除去溶剂或者已知含量的组分之外的物质均可出峰。例如需要测定某固体样品的纯度,需要使用溶剂溶解样品,归一化定量时需要扣除溶剂峰面积。使用FID检测含水有机物时,因为水一般情况下在FID检测器上不能出峰,定量时需要扣除水含量再进行归一化计算。归一化法常用于常量分析,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的FID和TCD检测器是较为常见,其定量上限可以达到100%。ECD、FTD、FPD等选择性检测器,一般不会使用归一化法定量。[align=center]归一化法定量的准确性和重复性[/align]3-1 线性范围采用归一化法定量时,首先需要考虑的是分析方法的线性范围。归一化法常用于化工产品的纯度分析,要求对于接近100%含量的主成分和百万分之一左右的杂质同样可以准确定量,那么就要求分析方法需要有较大的线性范围。如果样品进样量过低,可能会造成杂质峰强度过低而难以检出,从而造成主峰归一化定量结果偏高,如图2所示。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110072204197567_9185_1604036_3.jpg[/img][/align][align=center]图2 进样量过低[/align]如果样品进样量过大,可能会造成主峰超载——色谱峰往往表现为平顶或者圆顶,或者说色谱峰高超出检测器的线性响应范围,此时归一化定量结果主峰含量会偏低,如图3所示。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110072204195319_5064_1604036_3.jpg[/img][/align][align=center]图3 进样量过高[/align]当使用线性范围较窄的模拟信号工作站时,获得平头峰是超载的标志。但是现今实验室常见的色谱仪,较多使用了宽量程检测器和辅助的数学处理技术,不容易观察到平顶峰,即使检测器已经出现过载。这种情况下需要对色谱图中的每个色谱峰进行仔细比对,考察是否存在线性范围问题。下面举例说明:某样品两次进样的面积归一含量差距较大。考察两色谱图时,以某杂质峰的强度为基准,将两次进样的谱图进行缩放比较,考察发现两数据主峰强度不同,虽然主峰并没有出现平顶或者圆顶的现象,怀疑存在主峰超出线性范围问题。降低进样量再次进行实验,结果重复性良好。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110072204201435_4065_1604036_3.jpg[/img][/align][align=center]图4 两次进样谱图的比较[/align]3-2 积分准确性此外需要注意色谱图的积分问题,采用归一化法定量时,色谱图的总峰面积的积分需要准确。色谱工作者在化工分析中经常会获得较为复杂的色谱图,分析的目的往往是某种或者某几种组分的含量,只要保证目标组分色谱峰积分正确,同时杂质色谱峰总面积和全体色谱峰总面积正确即可。如图5所示,2.5min左右的杂质峰积分只需要总体面积准确即可。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110072204203310_9539_1604036_3.jpg[/img][/align][align=center]图5 范例色谱图[/align]尽量避免采用峰谷连线方式积分,此方式会导致总峰面积偏低,从而影响归一化结果的准确,如图6所示。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110072204200338_3059_1604036_3.jpg[/img][/align][align=center]图6 峰谷联系方式积分[/align]3-3 谱图失真问题[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]方法使用归一化法,一般用于分流方式下采集数据,如果样品组成复杂,各组分沸点分布范围较宽,那么较为容易产生分流歧视问题,即样品失真。此外由进样方式或者进样技术问题,也会导致样品歧视的问题。3-4 定量结果的精密度与常规的分析方法不同,面积归一的定量结果精密度要求较高。例如常规的外标或者内标定量方法,连续测定中峰面积或者定量结果数值的相对标准偏差在1%附近,一般认为定量精密度尚可。但是面积归一定量结果实际评价的是各个色谱峰之间的总体对应关系,并不关注组分峰面积的重复性,在化工分析的实际工作中,结果精密度的控制往往会远小于1%。尤其是精细化工产品成品的分析,归一化含量99.6%的和含量99.3%的产品售价会相差较大,如果成品的连续两次分析出现上述的结果,此结果是会被认为有问题的。[align=center]小结[/align]归一化法定量原理虽然较为简单,但是色谱工作者在实际操作中,需要给予一定的注意。注: 原文有某些公式存在处理困难问题, 详见附件文件。

  • 气相色谱定量分析的基本原理

    [font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]相色谱定量分析原理[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]:[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法是一种分离分析方法。操作时使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url],被分析样品(气体或液体汽化后的蒸汽)在流速保持一定的惰性气体(成为载气或流动相)的带动下进入填充有固定相的色谱柱,在色谱柱中样品被分离成一个个的单一组分,并以一定的先后次序从色谱柱流出,进入检测器,转变成电信号,再经放大后,由记录器记录下来,在记录纸上得到一组曲线图,根据色谱峰的峰高或峰面积就可以定量测定样品中各个组分的含量。[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的定量检测方法一般有归一化法、内标法和外标三种方法,其各有优缺点。[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]归一化法是将有机样品中所有组分的含量之和定位,计算出其中某一组分含量的百分数,其方便简单,样品进样量和流动相载气流速等对计算结果影响不大,但要求每个组分色谱峰面积能准确地计算,因此仅适合组分少的有机样品。[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]内标法是向有机样品中加入标准已知含量的纯有机物(可以和样品中组分相同,也可以不同)进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]测定,然后利用欲测组分和内标物的色谱峰面积和定量校正因子进行定量分析,其避免了归一化方法的缺点,但需要标准标准称取有机样品和内标物的重量,而且选用的内标物的选取要求较高。[/color][/size][/font]

  • 粮食真菌毒素检测仪:荧光定量原理守护食品安全

    [url=https://www.instrument.com.cn/netshow/SH116147/C541443.htm][b][color=#000000]粮食真菌毒素检测仪[/color][/b][/url][color=#000000]采用荧光定量快速检测原理,主要应用于粮油、谷物、饲料等多种领域,对多种真菌毒素进行准确检测,为确保食品安全贡献力量。[/color][color=#000000]荧光定量快速检测原理即粮食真菌毒素检测仪通过特定的荧光信号,准确、快速地识别和测量样品中的真菌毒素含量。这项技术具有高效、灵敏度高、操作简便等特点,使得检测过程更加迅速和可靠。[/color][align=center][color=#000000][img=10.jpg,450,450]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/67aa6330-9564-4eb4-9bbb-e6f3071189ee.jpg[/img][/color][/align][b][color=#000000]核心特性及优势[/color][/b][color=#000000]全方位检测:涵盖多种真菌毒素,包括黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、玉米赤霉烯酮等,实现全面监测。[/color][color=#000000]任意样品数量:粮食真菌毒素检测仪允许用户既可单个或少量样本随到随检,也可大量样本同时检测。[/color][color=#000000]内置定量标准曲线:在检测过程中无需使用外部标准品进行校准,避免了操作人员与呕吐毒素直接接触的可能,从而提高了操作的安全性。[/color][color=#000000]随到随检:检测仪器的便携性使其适用于现场检测,无论是在生产线上、仓库中,还是在野外环境中,都能轻松进行检测操作。[/color][color=#000000]多领域应用:适用于粮库、谷物生产企业、饲料厂、畜牧养殖企业、食品加工厂、第三方检测机构等多个行业。[/color][b][color=#000000]应用场景[/color][/b][color=#000000]保障粮库质量:对存储的粮食进行定期检测,预防真菌毒素污染。[/color][color=#000000]提升饲料质量:对饲料原料进行检测,确保畜牧养殖健康生长。[/color][color=#000000]食品生产控制:在食品生产过程中对油脂、面粉等原材料进行检测,确保成品质量。[/color][color=#000000]第三方检测服务:为各行业提供真菌毒素检测服务,为食品安全保驾护航。[/color][color=#000000]通过使用粮食真菌毒素检测仪,我们能够更全面地了解食品和饲料的安全状况,从而更好地保障我们的健康。[/color][来源:山东优云谱光电科技有限公司][align=right][/align]

  • qPCR定量分析原理及荧光标记方法有哪些?

    [font=宋体][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]常常被用来对[/font][font=Calibri]RNA-seq[/font][font=宋体]或芯片测序得到的有意义的基因表达情况进行准确的定量分析,本文主要从[/font][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]的原理、定量方法等方面进行讲解。[/font][/font][font=宋体] [/font][table][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]区别[/font][/b][/align][/td][td][align=center][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]荧光定量[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][/font][/b][/align][/td][td][align=center][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]常规[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][/font][/b][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]检测时间[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑][font=微软雅黑]实时[/font][font=微软雅黑]+终点[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]终点[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]检测信号[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]荧光染料或者探针[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]核酸染料[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]准确度[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]定量[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]半定量[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]是否能检测终点产物[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]能[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]能[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]是否能计算起始浓度[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]能[/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑]否[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][b][font=微软雅黑]仪器要求[/font][/b][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑][font=微软雅黑]荧光定量[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=微软雅黑][font=微软雅黑]常规[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪[/font][/font][/align][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]一、[/font][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]定量原理[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体],即实时荧光定量[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体],就是通过对[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增反应每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板的定量分析。因为在[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增的指数时期,模板的[/font][font=Calibri]Ct [/font][font=宋体]值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以可以定量。([/font][font=Calibri]Ct [/font][font=宋体]值:每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数 [/font][font=Calibri](cycle)[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]Ct [/font][font=宋体]值越小,反应扩增到达平台期所需循环数越少,目的基因起始含量越高)。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]的荧光标记方法分为以[/font][font=Calibri]SYBR Green I[/font][font=宋体]染料法为主的荧光染料嵌合法,以[/font][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针法为主的荧光探针法([/font][font=Calibri]Cycling Probe[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]Molecular Bracon[/font][font=宋体]等),淬灭染料引物法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]SYBR Green I[/font][font=宋体]染料法[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]是高灵敏度的非特异性双链[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]荧光染料,具有绿色激发波长。它以非特异性方式结合在[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]双螺旋小沟区域。游离的[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]只发出微弱的荧光信号,[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]过程中,当扩增生成[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]时,[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]逐渐与[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]结合,荧光信号被千倍放大,荧光信号的强度与扩增得到的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度成正比。荧光信号被仪器检测并采集得到“扩增曲线”,通过荧光信号的强度反映出体系中[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]但[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]与特异性扩增产物结合时还可以同引物二聚体、非特异性扩增的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]结合,影响结果判断。所以扩增反应结束后,还必须对生成的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]进行分析:即通过升温,[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]双链解开,[/font][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]染料脱落,荧光值逐渐下降,形成温度和荧光强度的曲线即“熔解曲线([/font][font=Calibri]Melting curve[/font][font=宋体])”,由此判断体系中是否存在引物二聚体、非特异性扩增。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]SYBR Green I [/font][font=宋体]染料法操作简单、灵敏度高、成本较低,被广泛地应用于[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]定量、 基因表达量的研究、转基因重组动植物的研究等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针法[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针是由[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’端标记有荧光报告基团和[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]’端标记有淬灭基团以及与目标基因特异性结合的寡核苷酸序列组成。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,此时仪器不会检测到荧光信号。在[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增时,模板[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]变性解链,[/font][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针特异性结合到目标基因处,而[/font][font=Calibri]Taq[/font][font=宋体]酶具有[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’[/font][font=Calibri]-3[/font][font=宋体]’核酸外切酶活性,延伸至探针结合处,可将探针水解,使荧光报告基团和淬灭基团分离,从而检测到荧光信号,荧光信号的强度与扩增得到的[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度成正比。荧光信号被仪器检测并采集得到“扩增曲线”,通过荧光信号的强度反映出体系中[/font][font=Calibri]dsDNA[/font][font=宋体]的浓度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Taqman[/font][font=宋体]探针法因其特异性高,被广泛地应用于等位基因鉴别、[/font][font=Calibri]SNP[/font][font=宋体]分型、病原体和病毒检测、疾病耐药基因研究、多重定量等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注[font=宋体]义翘神州[/font]qPCR定量分析服务:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/real-time-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-service[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 【原创大赛】二氧化碳还原分析系统方案二(十通阀定量环方式) 原理介绍

    【原创大赛】二氧化碳还原分析系统方案二(十通阀定量环方式) 原理介绍

    二氧化碳还原分析系统方案二(十通阀定量环方式) 原理介绍[align=center]概述[/align]采用自动十通阀一次切换的方法,实现对二氧化碳还原实验样品中微量氢气、氧气、氮气、甲烷、一氧化碳、乙烷、乙烯的定量的分析系统原理介绍。[color=black]本文介绍利用自动十通阀,单次切换的方法实现该样品测定的分析方案。参照https://bbs.instrument.com.cn/topic/7866429[/color][align=center][color=black]方案介绍[/color][/align][color=black]本系统使Shimadzu公司的GC-2014型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url],配置有三个检测器——两个FID检测器和一个TCD检测器——和三根色谱柱PC1、C1、C2。通过十通阀V1在合适的时间切换状态,实现三根色谱柱的不同组合,实现样品分离。系统原理如图1所示:[/color][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110052322297338_2831_1604036_3.jpg[/img][align=center]图1 系统原理图[/align][color=black]参照https://bbs.instrument.com.cn/topic/7866429的六通阀系统,两者差异主要在于本系统具有定量环,本系统适合连接连续式气源进样。如果系统前端的微反应装置体积较小,每次只可以获取较少体积的样品,建议采用六通阀系统;如果微反应装置可以提供连续不断的样品气流,那么就可以采用本系统。[/color][align=center][color=black]系统工作过程[/color][/align][color=black]1 进样[/color][color=black]色谱系统需要采集数据的时候,控制十通阀旋转36°,此时系统状态如图2所示,样品此时经由十通阀进入预分离柱PC1,样品中的微量氢气、氧气、氮气和甲烷在PC1柱上不能完全分离,作为合峰进入C1色谱柱。样品流经的通路为“sample in——Loop——PC1色谱柱——C1色谱柱——TCD检测器——镍转化器——FID1检测器”。[/color][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110052322299555_5000_1604036_3.jpg[/img][align=center]图2 系统进样状态[/align][color=black]样品中各个组分在PC1柱内的分布情况,如图3所示:[/color][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110052322299508_9460_1604036_3.jpg[/img][/align][align=center]图3 预分离色谱柱内样品的分布状态[/align][color=black]合峰中的所有组分进入色谱柱C1后可以得到分离,出峰顺序为氢气、氧气、氮气、甲烷、一氧化碳。[/color][color=black]样品中的微量氢气、氧气、氮气在TCD检测器被检测到,微量的甲烷、一氧化碳经由镍转化器(一氧化碳通过镍转化器之后生成可以被FID1检测的甲烷),在FID2检测器出峰。[/color][color=black]2 反吹切换[/color][color=black]当合峰组分全部进入C1色谱柱后,如图3箭头所示的时间点,色谱系统控制十通阀旋转进行色谱柱切换,系统流路变为图1所示的状态。[/color][color=black]样品流经的通路为“Car1——PC1色谱柱——C2色谱柱——FID2检测器”。[/color][color=black]此时PC1中的载气流量发生倒转,二氧化碳、乙烷、乙烯作为合峰进入色谱柱C2,在C2中三个组分可以实现分离,从色谱柱C2流出后进入FID2检测器,乙烯、乙烷出峰。[/color]同时系统完成复位,PC1色谱柱内的较重组分被反吹掉,等待下次进样。[align=center]小结[/align]二氧化碳光催化分析系统原理简介。

  • 定量PCR仪的原理是什么?

    在我概念里PCR就是程序控制升温和降温,主要指标是升温降温的速度和温度的准确性,请哪个给介绍一下定量PCR到底是怎么一回事?

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