热释光检测

[font=&] [size=18px] 即热式饮水机是小型的饮水机，可以在短短两三分钟内快速的将冷水加热，而这类饮水机的体积是非常小的，要实现液位检测必须采用小体积的液位传感器。[/size][/font][font=&][size=18px] [/size][/font][size=18px][font=&] 光电式液位开关[/font][font=&]是满足这一条件的，光电式液位开关小型的接触式液位开关螺纹尺寸仅11mm，整个传感器比5元硬币还小。[/font][/size][align=center][img=,605,375]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112311009127490_6917_4008598_3.jpg!w605x375.jpg[/img][/align][font=&][size=18px] 而光电非接触式液位开关的体积更小，传感器外置于水箱外部不接触液体，更卫生安全。[/size][/font][font=&][size=18px] [/size][/font][size=18px][font=&] 但有些超小型的即热式饮水机因为空间有限的原因，无法这2种光电液位开关，那可以采用[/font][b]管道液位开关[/b][font=&]。将传感器安装在需要检测的管道中即可检测传感器位置是否有液体。如将需要检测缺水提醒，则将传感器装在水箱底下连接的管道中，在水箱无水时，管道内也处于无水状态，则传感器给出信号提醒控制电路实现报警灯亮起或蜂鸣器鸣叫等提醒。[/font][/size][align=center][size=18px][font=&] [img=,605,375]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112311010190778_1731_4008598_3.jpg!w605x375.jpg[/img][/font][/size][/align][align=center][size=18px] [/size][/align][font=&][size=18px] 如果是检测内部的热水水箱的满液提醒，则将管道液位开关安装与水箱水位平行的水管上。[/size][/font][align=center][size=18px][font=&] [img=,605,375]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112311010366487_6991_4008598_3.gif!w605x375.jpg[/img][/font][/size][/align][align=center][size=18px] [/size][/align][size=18px][font=&] 或是采用[/font][b]非接触式管道液位开关[/b][font=&]。[/font][/size][align=center][img=,605,375]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112311010550956_1648_4008598_3.gif!w605x375.jpg[/img][/align][align=center][size=18px] [/size][/align][align=center][size=18px] [/size][/align]

太阳能热水器性能检测系统绿光设计太阳能热水器性能检测系统在建筑设计中的应用：太阳能在建筑节能中的应用形式主要分为太阳能光热应用和太阳能光电应用。对应形式涵盖内容和特点分述如下。1.太阳能光热应用主要形式（1）被动式太阳能建筑（2）太阳能热水系统（3）太阳能采暖系统（4）太阳能空气集热采暖系统（5）太阳能空调系统2.太阳能光电应用主要形式（1）按系统形式分①独立光伏发电系统②并网光伏发电系统（2）按建筑结合形式分①附着于建筑物上的光伏系统②集成到建筑物上的光伏发电系统②集成到建筑物上的光伏发电系统。被动式太阳能建筑：不实用机械动力，仅通过太阳能的有效利用，使建筑物具备一定冬季采暖和夏季降温的功能。主要形式用：直接受益式被动太阳能建筑；集热蓄热墙式被动太阳能建筑；附加阳光间式被动太阳能建筑；组合式被动太阳能建筑。太阳能热水器性能检测系统在被动式太阳能建筑的应用中要注意冬季采暖应用应在综合考虑气候条件、建筑用途和建筑围护结构保温性能等综合因素后确定合理形式。夏季被动降温应考虑遮阳和建筑通风有效措施。设计阶段应进行综合评估，以使被动太阳能建筑即满足使用功能又建造美观、维护方便。[img=太阳能热水器性能检测系统,400,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/06/202206290919584073_5644_4136176_3.jpg!w690x690.jpg[/img]太阳能热水器性能检测系统主动式太阳光建筑：太阳能结合常规能源有效利用，满足建筑物的生活热水、采暖、空调和生活用电需求。主要应用形式有：（1）太阳能热水系统(这是太阳能光热利用最成熟的方式之一，因其技术成熟且经济效益显著，已实现大规模商业化应用）；（2）太阳能采暖系统（将太阳能转化成热能，供给建筑物冬季采暖的系统，系统主要包括集热器、贮热器、供热采暖末端设备、辅助加热装置和自动控制系统等。）；（3）太阳能空气集热采暖系统（由太阳能空气集热器、风机、散流器、温控器等部件组成。当太阳能辐射较好时，风机开启，循环加热室内空气，以解决建筑室内采暖问题。）（4）太阳能空调系统目前的主要形式是太阳能吸收式空调，太阳能热水器性能检测系统主要构成包括太阳集热器、吸收式制冷机和辅助热源。一般夏季空调周期，太阳集热器负责向吸收式制冷机提供所需要的热媒水，吸收式制冷机负责将吸收制冷转化后的冷水提供至建筑室内，供空调使用；冬季采暖周期，由太阳能集热系统直接向建筑供暖。[img=太阳能热水器性能检测系统,400,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/06/202206290920151363_7918_4136176_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

太阳能集热器性能检测装置参数配置太阳能热水系统的性能究竟如何，是否达到了设计的要求，这是使用者最为关心的问题。因此，对太阳能热水系统和集热器产品的检测非常有必要。太阳能热水器测试系统可以取得太阳能热水系统的供热效果和能源消耗情况，对于太阳能热水器的性能评价至关重要。在全球提倡绿色环保并采用新型能源的今天，太阳能热水器得到了广泛的应用，因为具备节省能源，接近零污染，以及使用简便的产品优点。在太阳能热水器的整个系统中，起到至关重要的作用的中心环节就是检测控制系统。[img=太阳能集热器性能检测装置,400,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/04/202204250909212347_8583_4136176_3.jpg!w690x690.jpg[/img]太阳能热水器按结构形式分为真空管式太阳能热水器和平板式太阳能热水器。真空管式太阳能热水器是由集热管、储水箱及支架等相关附件组成。把太阳能转换成热能主要依靠集热管。集热管利用热水上浮冷水下沉的原理，使水产生微循环而达到所需热水。对太阳能热水器做系统性能测试可以检测热水器各项指标性能和运行可靠性。绿光新能源太阳能集热器性能检测装置包括系统热学指标、集热效率、太阳能保证率、实际运行工况等测试项目，提前检测出不符合使用质量的太阳能热水器。[img=太阳能集热器性能检测装置,400,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/04/202204250909573329_8800_4136176_3.jpg!w690x690.jpg[/img]太阳能集热器性能检测装置可以对太阳能热水器做热性能、耐压、水质、过热保护、空晒、外热冲击、淋雨、内热冲击等检验项目，自动采集并记录试验期间的温度、风速、辐照等气象信息。通过全方位的测试项目，提高太阳能热水器的产品质量。

太阳能集热器检测系统技术指标太阳能热水器测试系统组成分别有测试传感器（管路温度，环境温度，水流量，太阳总辐射，风速，电功率），太阳能测试系统数据采集仪，水温控制装置，全自动水路运行控制装置，自动控制台，热水器测试管路连接器，太阳能热水器测试系统平台（含软件），遮阳罩板及配件。太阳能集热器检测系统各部件技术指标与特点：精度2%的专用测试传感器用于测量太阳辐射、温度（水温）、环境温度、环境风速、水流量、电功率等参数。绿光新能源太阳能集热器检测系统数据采集仪：用高性能微处理器为主控CPU，大容量数据存储器，数据采样率高于0.5秒/通道，工业控制标准设计，便携式防震结构，大屏幕汉字液晶显示屏，轻触薄膜按键，操作简单。适合在恶劣工业环境使用。具有停电保护功能，当交流电停电后，由充电电池供电，可维持24小时以上。[img=太阳能集热器检测系统,400,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/05/202205171017048732_5440_4136176_3.jpg!w690x690.jpg[/img]太阳能集热器检测系统全自动水路运行控制装置，内部装有高温电磁阀组，采用逻辑组合管路结构，与微型混水泵配合，通过智能控制器，自动实现水路进入，流出，混水，测试等功能。并通过混合搅拌，使水箱中水温均匀一致，满足测试需要。热水水温控制装置根据国标检测要求，测试前热水器中的水具有一定的温度，因此需对水温进行定温加热控制.本系统采用动态加热原理，循环泵配合完成，具有加热均匀，升温速度快等特点。绿光新能源自动控制台是将测试仪器与检测设备中的控制部分集成一体的综合自动控制装置。其采用微机控制技术对混水泵，电磁阀，自动加热，水泵等设备进行集中控制，并使测试数据自动登录微机打印检测报告，使太阳能热水系统性能检测过程自动进行，提高工作效率。室外防水结构设计，保证室外全天候工作。[img=太阳能集热器检测系统,400,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/05/202205171017271783_2105_4136176_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

[size=24px][font=宋体]管道式光电水位开关采用的是光学原理检测，通过光在液体和空气中的光折率不同，来判断有水无水。[/font][font=宋体]当管道内有液体经过时，传感器发射管发出的光会折射到液体中，接收器就会接收不到光或只能接收到少量的光线，当管道内无水流经过时，传感器内发射管发出的光线折射回接收器，传感器在接收到信号后，会立即启动报警系统提醒加水。[/font][font=宋体]管道光电水位开关有接触式（接管式）和非接触式（夹管式）两种，此类传感器具有体积小、检测精度高、内部无机械运动部件、免调试、可靠性高、安装方便等特点。光电管道水位开关不仅解决了传统机械式易卡死失效问题，还有效的解决了电容式水位开关不可控失效问题。[img=,577,435]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211150937298875_2508_4008598_3.jpg!w577x435.jpg[/img][/font][/size]

[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/11/202311081104019330_9543_5604214_3.png!w690x690.jpg[/img]　 　拉曼光谱仪在食品安全检测中具有广泛的应用，其主要用途包括以下几个方面：　　成分分析：拉曼光谱仪可用于分析食品中的化学成分，包括脂肪、蛋白质、碳水化合物、维生素、矿物质等。这有助于确定食品的组成和质量。　　质量控制：食品生产商可以使用拉曼光谱仪来监测产品的质量，检测潜在的污染物、变质、或不合格成分，以确保产品的一致性和合规性。　　污染检测：拉曼光谱仪可以用于检测食品中的微生物、有害化学物质、重金属等污染物质。这有助于预防食品中毒事件和确保产品的安全性。　　原料鉴别：用于验证食品原料的真实性，以防止掺假或替代品的出现，特别是对于高价值的食品和饮料，如葡萄酒、奶制品、香料等。　　残留农药和化学物质检测：拉曼光谱仪可以检测食品中的残留农药、化肥和其他化学物质，以确保它们在食品中的含量在安全限度内。　　食品标签和包装的真实性：用于验证食品标签和包装的真实性，以确保产品的标签信息与其实际成分和质量一致。　　过敏原检测：拉曼光谱仪可以用于检测食品中的过敏原，帮助食品制造商遵守过敏风险管理法规，以确保敏感消费者的安全。　　快速检测：拉曼光谱仪通常具有快速检测的能力，可在短时间内提供结果，从而有助于提高生产效率和食品安全性。　　总之，拉曼光谱仪在食品安全检测中可以用于成分分析、质量控制、污染检测、原料鉴别、残留物检测、过敏原检测等多个方面。它们提供了一种高效、非侵入性的分析方法，有助于确保食品的质量、安全性和合规性。

分布式光伏环境监测系统自动监测能力分布式光伏环境监测系统是应用于光伏发电站的环境监测系统，该设备采用新型一体化结构设计，便于携带，测量精度高，使用方便，可采集温度、风速风向、太阳辐射、雨量、气压、电池板背板温度等多项信息并作公告和趋势分析，同时可通过多种通讯方式将气象数据传输到气象中心计算机气象数据库中，便于用户对气象数据的使用、分析和处理，是光伏电站监测环境要素的理想设备。分布式光伏环境监测系统具有停电保护功能，断电后已存储数据不会丢失，当交流电停电后，可自动由充电电池供电。配备太阳能供电系统，由太阳能电池板与蓄电池组联合使用，可用于野外作业，适合无电地区常年使用。环境监测系统提供了有线传输和无线传输两种通讯方式。其中有线传输方式包括：通过标准RS485/USB通讯接口，无线传输方式分为短距离无线传输、中距离无线传输、长距离无线传输三种无线传输方式。通讯方式可由用户根据自身使用要求灵活搭配。[img=分布式光伏环境监测系统,400,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/05/202205050913126624_2714_4136176_3.jpg!w690x690.jpg[/img]分布式光伏环境监测系统便于安装，使用方便，测量精度高，集成多项气象要素的高可靠性和高精度观测系统。分布式光伏环境监测系统采用新型一体化结构设计，可采集温度、湿度、风向、风速、太阳辐射、雨量、气压、光照度、土壤温度、土壤湿度、露点和雪深等（任意选择要素参数）多项信息并做公告和趋势分析。分布式光伏环境监测系统分有线站和无线站两种形式，配合软件可以实现网络远程数据传输和网络实时光伏电站气象状况监测，是功能突出的分布式光伏环境监测系统，适用于光伏并网电站项目选址、光伏发电站现场监测和风力及传统发电站等领域。虽然分布式光伏环境监测系统在一个光伏电站中是一个很小的一个设备，被多数人忽略，但它起着很大的作用，提供了电站及周围环境数据，及时预告，便于运维人员及时发现问题和预防问题。[img=分布式光伏环境监测系统,400,400]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/05/202205050913592504_8791_4136176_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

[size=18px]在一些家用电器中，液位检测和监测起着重要的作用，各种电器的液位监测将直接影响到电器的使用，目前市场上很多家电水位检测功能实现都被光电传感器取代。过去很多厂家使用浮子式液位开关检测液位，但是浮球容易藏污垢且最低水位会受到很大限制，安装空间大，结构松散，设计安装复杂。而光电式水位传感器，结构紧凑，安装空间小，可上、下、侧、斜安装。而浮球只能安装在顶部或底部[url=http://www.eptsz.com][color=#000000]光电水位传感器[/color][/url]的稳定性和可靠性高于浮球，在电蒸锅的应用中，一般要实现的功能是低液位检测，主要是防止干烧导致的，光电水位传感器可安装在底部进行液位检测。而光电水位传感器有2种类型，一种是光电式一体式水位传感器，一种是分离式光电传感器。分离式是光锥设计在水箱上，一体式是开孔安装在水箱。不同的应用环境采用不同的光电传感器。一般水箱不移动的话，采用的是光电一体式，如果水箱需移动清洗，那可采用光电分离式。[/size][align=center][img=,498,288]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108021641445767_5529_4008598_3.png!w498x288.jpg[/img][/align][align=center][size=18px] [/size][/align][align=center][size=18px] [/size][/align][align=center][size=18px] [/size][/align][align=right][size=18px]——深圳市能点科技有限公司[/size][/align]

[align=center][b]双光子激光扫描显微镜的检测模式及其在生物医学领域的应用[/b][/align][align=center][font=宋体]刘皎[/font][sup]1[/sup]，吴晶[sup]1[/sup][/align][align=center]1. [font=宋体]北京大学医药卫生分析中心，北京，[/font]100191[/align][b][font=黑体][[/font]摘要] [/b]双光子激光扫描显微镜（two-photon laser scan microscope, TPLSM[font=宋体]）具有低光毒性、高时空分辨率、高信噪比等优点，结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术，广泛应用于脑科学、免疫学、肿瘤、胚胎发育等生物医学相关研究领域。本文结合作者所在的北京大学医药卫生分析中心共聚焦平台的工作经验，概述了[/font]TPLSM适用的样本、检测模式以及在生物医学领域的应用，以期为相关科研技术人员提供参考。[b][font=&][Abstract][/font] [/b]Two-photon laser scan microscopy (TPLSM) has the advantages of low phototoxicity, high spatial and temporal resolution, and high signal-to-noise ratio.TPLSM combines laser scanning confocal microscopy with two-photon excitationtechnology and it is widely used in brain science, immunology, tumor, embryodevelopment and other biomedical related research fields. Based on the author'swork experience in the confocal center of Peking University Medical and HealthAnalysis Center, this paper summarizes the applicable samples, detection modesand applications of TPLSM in the biomedical field, in order to provide referencefor related scientific researchers and technicians.[b][font=黑体][[/font]关键词] [/b]显微镜双光子，检测模式，应用[b]1 引言[/b]双光子激发技术的基本原理是在高光子密度情况下，荧光分子可同时吸收2个长波长光子，产生一个一半波长光子去激发荧光分子的相同效果。双光子激光扫描显微镜（two-photon laser scan microscope, TPLSM[font=宋体]）在激光扫描共聚焦显微镜的基础上，以红外飞秒激光作为光源，长波长的近红外激光受散射影响小，易穿透标本，可深入组织内部非线性激发荧光，对细胞毒性小且具有高空间分辨率，适合生物样品的深层成像及活体样品的长时间观察成像[/font][1]。使用高能量锁模脉冲激光器，物镜焦点处的光子密度最高，在焦点平面上才有光漂白及光毒性，焦点外不损伤细胞。双光子效应只发生在焦点处，所以双光子显微镜无需共聚焦针孔，也能做到点激发点探测，提高了荧光检测效率[2]。[b][/b]双光子激光扫描显微镜显微镜可以通过XYZ，XYT，XYλ，XYZT，XYλT等多种模式实现多维成像，亦可进行更复杂实验的拍摄，比如二次谐波成像（Second Harmonic Generation Imaging,SHG[font=宋体]）、双光子荧光寿命成像（[/font]Two-photon Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy, TP-FLIM[font=宋体]）、荧光寿命[/font]-[font=宋体]荧光共振能量转移成像（[/font]FluorescenceLifetime - Fluorescence Resonance Energy Transfer Imaging, FLIM-FRET[font=宋体]）等实验以满足对样品的定性、定量、定位、共定位等多维度多功能的研究。[/font]TPLSM已成为生命科学各领域重要的研究工具，可在细胞及亚细胞水平对活体动物的神经细胞形态结构、离子浓度、细胞运动、分子相互作用等生理现象进行直接的长时间成像监测，还能进行光激活染及光损伤等光学操纵，广泛应用于脑科学、免疫学、肿瘤、胚胎发育等生物医学相关研究[3-5]。本文拟通过按TPLSM常见的检测模式分别阐述其在生物医学领域的应用，以其为相关科研技术人员提供参考。[b]2. TPLSM适用的样本[/b]TPLSM适用的样本非常广泛，从液体、固体等形式的材料或制剂、细菌、细胞、细胞团、类器官、组织切片、到各种模式动物（如线虫、果蝇、斑马鱼、小鼠、大鼠、兔、猴等）及其[font=宋体]脑、脊髓、肝脏、肺、皮肤等器官[/font]，都可以通过搭载不同载物台进行测试。相对于传统激光扫描共聚焦显微镜200μm的成像深度极限，双光子显微镜成像深度可达800μm，如果是透明化样品可更厚。TPLSM尤其适合活体动物成像，且比小动物荧光成像有更高的分辨率和信噪比，一般TPLSM的XY轴分辨率为200 nm左右，Z轴分辨率为300 nm左右。[b]3. TPLSM的检测模式[/b]3.1 二维成像模式TPLSM可以实现点扫描、点探测，得到生物样品高反差、高分辨率、高灵敏度的二维图像，从而获得细胞/组织等光学切片的物理、生物化学特性及变化。也可以对所感兴趣的区域进行准确的定性、定量及定位分析。激光扫描显微镜的zoom功能，可以用来调节扫描区域的放大倍数。但受物镜分辨率的限制，一味的增大zoom值，不能得到相应的高清图像，需根据实际情况参考piexl size进行设定。TPLSM可以实现XY、XZ或XT的二维成像模式，XT线扫会在后文与XYT时间序列成像一起进行举例说明（图2b）。3.2 三维成像模式3.2.1 Z轴序列三维成像（XYZ）[align=left]TPLSM可沿Z轴方向通过电动载物台的连续扫描对样品进行无损伤的光学切片（XYZ），获得三维立体图像。同理，通过沿Y轴方向连续扫描，可获得连续的XZY图像。如图1所示TPLSM[font=宋体]可以顺利观察到可以观察到血管清晰形态结构：单个胚胎的胎盘微血管（图[/font]1a）、肝脏血窦微血管（图1b）和后肢微血管（图1c）[6]。[/align][align=center][img=,690,230]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151626576232_4807_3237657_3.png!w690x230.jpg[/img][/align][align=center]图1（a）胚胎胎盘微（b）肝脏血窦和（c）后肢的微血管三维成像[/align]3.2.2 时间序列扫描模式（XYT）[align=left]按照一定的时间间隔重复采集，则可实现对该样品的实时监测（XYT）。此类实验可观察组织区域内特异荧光探针标记的单个细胞或细胞内不同部位接受刺激后的整个变化过程。[font=宋体]如图[/font]2[font=宋体]（[/font]a[font=宋体]），可以根据微血管[/font]XYT[font=宋体]序列扫描的成像结果中某一血细胞在前后两张图的位置移动和这两帧图的扫描时间间隔计算血流速度。若血流速度很快，[/font]XYT扫描不足以捕捉实际流速，可以使用XT线扫计算。如图2（b），微血管XT扫描图像中绿色荧光背景里的黑色线条代表单个血细胞的流动轨迹，每条线条的横坐标代表血细胞移动的距离（distance / μm[font=宋体]），纵坐标代表此段时间（[/font]time/ ms[font=宋体]），根据这两个数据可以计算出单位时间内血细胞的流动速度（[/font]μm / ms）[6]。[/align][align=center][img=,690,262]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151627102569_8367_3237657_3.png!w690x262.jpg[/img] [/align][align=center]图2 微血管（a）XYT扫描结果和（b）XT一维扫描结果图像计算血流说明示意图[/align]3.2.3 光谱扫描模式（XYλ/XYΛ）通常配置有可调节接受范围的检测器的TPLSM，可以实现从400nm-800nm的发射波谱扫描。通过配置具有连续可调波长的双光子激光器，还可以实现750nm-1300nm激发波谱扫描。这对于开发研制特殊染料探针的课题来说是很方便、全面的检测功能。3.3四维成像模式（XYZT/XYλT/XYΛT）基于上述三维成像模式，结合时间序列扫描，可以实现TPLSM的四维成像。3.4二次谐波成像（SHG）SHG是一个二阶非线性过程，且一般为非共振过程，适合富含胶原纤维的样本成像，如角膜、鼠尾肌腱、皮肤等。生物组织产生的二次谐波最主要的转换源自胶原，不同生物组织中的二次谐波信号强弱与组织中的胶原含量密切相关，含胶原丰富的组织包括结缔组织和肌肉组织等二次谐波信号也比较强，另外还有一些能产生强二次谐波的生物结构是微管，如细胞分裂中纺锤体。对于具有中心对称性的生物结构，如果局部中心对称性的破坏也会产生二次谐波：在两中心对称介质的界面，不同物态分子的相互作用使局部微观场特性在交界面（如细胞膜）发生突变，从而产生界面二次谐波[7]。除了动物组织外，一些含有特殊分子结构的植物组织也能产生二次谐波。二次谐波显微成像具有高空间分辨率、深成像深度、低损伤、以及对结构对称性的高度敏感性的特点，如果能与其他成像技术结合，将成为生物样品研究的有力工具[8]。3.5双光子荧光寿命成像（TP-FLIM）[9]FLIM技术是研究细胞内生命活动状态的一种非常可靠的方法。荧光寿命是荧光团在返回基态之前处于激发态的平均时间，是荧光团的固有性质，因此其不受探针浓度、激发光强度和光漂白效应等因素影响，且能区分荧光光谱非常接近的不同荧光团，故具有非常好的特异性和很高的灵敏度。此外，由于荧光分子的荧光寿命能十分灵敏地反映激发态分子与周围微环境的相互作用及能量转移，因此FLIM技术常被用来实现对微环境中许多生化参数的定量测量，如细胞中折射率、黏度、温度、pH值的分布和动力学变化等，这在生物医学研究中具有非常重要的意义。目前FLIM技术在细胞生物学中一些重要科学问题的研究、临床医学上一些重大疾病的诊断与治疗研究以及纳米材料的生物医学应用研究等方面均有广泛应用，并取得了许多利用传统的研究手段无法获取的数据。FLIM检测需要脉冲激光，TPLSM带有的高能量锁模脉冲激光器可以满足激发要求。3.6荧光寿命-荧光共振能量转移成像（FLIM-FRET）[10]传统的FRET过程分析通常是基于荧光强度成像来实现，分析的结果容易受光谱串扰的影响。而将FLIM技术应用于FRET过程分析，利用FLIM技术可定量测量这一优势，可非常灵敏地反映供体荧光分子与受体荧光分子之间的能量转移过程。当受体分子与供体之间的距离10nm时，供体的能量转移到受体，受体从基态发生能量跃迁，从而影响供体的荧光寿命。与没有受体分子的时候相比，发生FRET的供体分子的荧光寿命降低。因此，FRET-FLIM联合能够实时监测生物细胞中蛋白质的动态变化，如蛋白质折叠、分子间（蛋白-蛋白，蛋白-核酸）相互作用和细胞间信号分子传递、分子运输以及病理学研究等。[b]4 结论和展望[/b]综上，TPLSM应用灵活，具备多种检测模式，适用于多种样本，亦可实现多种实验目的，如荧光的定量、定性、定位、共定位，动态荧光的测定等。一些特殊的实验模式，将TPLSM在生物医学领域的应用进一步扩大。通过结合其他技术（多手段联合拓展，如膜片钳、原子力显微镜、光电联用等），TPLSM必将成为助力生物医学领域研究的有力工具。双光子荧光成像由于具有天生的三维层析能力以及深穿透能力，在活体生物组织成像上广受欢迎。双光子显微镜镜下空间增大后，可广泛应用于猴、大小鼠、兔等较大的模式动物的活体成像。且可结合电生理技术、光遗传技术，广泛应用于麻醉、清醒或运行行为等生理状态下的动物脑科学神经相关研究，在单细胞、单树突精度上对神经元群体活动进行监控。如结合膜片钳技术，对活体脑组组急性切片神经元进行双光子深层成像[11]；结合光遗传技术，实现视觉皮层同一神经元和神经元群体的稳定操控和长期多次重复记录[12]；对在健身球上移动的头部固定小鼠小脑进行成像，探讨觉醒状态和运动行为对胶质网络中钙离子的激发的影响[13]；结合多种疾病模型，探讨大脑皮层神经元及胶质细胞活性的改变及作用等[14]。随着多种双光子显微镜系统的出现，双光子显微镜成像技术将以其实时、无损地探测、诊断及检测能力，在生物医药及临床医学应用中发挥更大作用。[b]参考文献[/b][1] [font=宋体]李娟[/font],[font=宋体]张岚岚[/font],[font=宋体]吴珏珩[/font].[font=宋体]双光子显微镜的应用优势与维护要素[/font][J].[font=宋体]中国医学装备[/font],2021,18(12):158-163.[2] HendelT,Mank M, Schnell B,et al.Fluorescence changes of genetic calcium indicatorsand OGB1correlated with neural ac tivity and calcium in vivo and in vitro[J].JNeurosci, 2008,28(29):7399-7411.[3] DolginE.What leva lamps and vinaigrette can teach us about cellbiology[J].Nature,2018,555(7696):300-302.[4] Noguchi J,Nagaoka A, Watanabe S,et al.in vivo two-photon uncaging of glutamate revealingthe structure-function relatio nships of dendritic spines in the neocortex ofadult mice[J]. 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