母牛原乳中乳腺炎病原体的qPCR检测
支原体尤其是牛支原体,以及金黄色葡萄球菌和无乳链球菌是母牛和犊牛中常见的有害病原体,可引起炎症和乳腺炎。牛患乳腺炎将导致牛奶数量的减少,除了影响动物健康外,还将对经济产业产生重大影响。在兽医诊断中,从牛奶中有效分离出有害病原体并快速准确地检测出来显得尤为重要。由于牛支原体没有细胞壁,因此对抗生素治疗具有天然抗性,治疗特别困难,只有隔离有病症的母牛才能阻止其传播。由于牛奶的成分比较复杂,如含有大量的蛋白、脂肪和糖类,从牛奶中提取病原体DNA是一项比较大的挑战。因此,我们建议采用专门的提取试剂盒或程序,例如DNA Diagnostic公司的Mastit 4C提取试剂盒,该试剂盒专门针对从牛奶中提取病原体DNA进行了优化,以提供高效稳定的提取效果。从牛奶中提取获得的DNA配合DNA Diagnostic公司的Mastit 4C检测试剂盒,在qTOWER³ 荧光定量PCR仪上进行检测。检测试剂盒Mastit 4C可同时检测四个靶标基因,如金黄色葡萄球菌,无乳链球菌,牛支原体和支原体,并提供扩增内质控IAC。本应用方案介绍了在qTOWER³ 上配合Mastit 4C检测试剂盒,进行多种病原体检测的方法,并证明了其特异性。