色谱柱接检测

色谱柱在检测中的核心地位 色谱法是一门色谱分离与分析技术的分析方法。色谱分离的核心元素是流动相与固定相，固定相就是我们通常所说的色谱柱（具体指的是色谱柱中的填料）。样品随着流动相进入到色谱柱，流动相和固定相之间连续、不间断发生着某种（或某些）作用力，比如吸附-解吸-再吸附-再解吸等。不同样品受这种作用力的影响程度不同，从而达到分离。 色谱柱是高效液相色谱最核心的部件，在液相色谱检测中（起分离作用）的作用不言而喻，下面我们就以高效液相色谱法检测自来水中草甘膦含量为例加以说明。 草甘膦是一种广谱除草剂，在现代化农业生产中被大量使用。它常温下比较稳定，残留物严重污染了水质、土壤、草料、粮食等，同时也存在畜牧产品和粮食加工品中。其中在各种水质、水源中存在比较广泛和严重。水质污染影响着我们的生存、生活，检测尤为重要。 现在草甘膦检测方法主要有气相色谱法、气质色谱法、液相色谱法（包括荧光检测法和紫外检测法等）等。 下面我们以高效液相色谱法检测自来水中草甘膦含量并以此为例来说明色谱柱在检测中的核心作用。 现在能检测草甘膦的色谱柱一般都是专用色谱柱，很多厂家都有生产。通过大量实验我们找到了两款非常优秀的色谱柱，一款是紫外检测法用的天津博纳艾杰尔科技有限公司生产的Venusil SAX 色谱柱，另一款是荧光检测法用的美国美瑞泰克科技有限公司生产的Pickering阳离子交换色谱柱。国标GBT 5750.9-2006 生活饮用水标准检验方法中提到了阳离子交换色谱法和阴离子交换色谱法，其中阴离子交换色谱法检测效果一般，且色谱柱已不好找到，所以该类样品检测现在主要采用阳离子交换色谱法。 下面我们先介绍下高效液相色谱荧光检测法（该方法需要柱后衍生）检测自来水中草甘膦。原理 精密量取适量自来水样品经过滤、浓缩等前处理处理后注入高效液相色谱系统，经流动相磷酸二氢钾溶液洗脱，在色谱柱中分离。分离后的样品在经过柱后衍生系统反应，生成反应产物经荧光检测器检测。外标法（保留时间定性，峰面积定量）分析计算。柱后衍生与荧光检测器结合使得本方法具有很高的灵敏度和选择性，因而被广泛使用。设备 高效液相色谱仪（梯度泵1套+柱温箱+柱后衍生仪+衍生注射泵2台+荧光检测器+数据采集器+草甘膦专用阳离子交换色谱柱+色谱工作站等），超声波清洗仪，溶剂过滤器，固相萃取装置，离心机，浓缩仪（恒温水浴或氮吹仪），电子天平等。材料及试剂 磷酸二氢钾（分析纯）；磷酸、硫酸、盐酸（分析纯）；氢氧化钠、氢氧化钾、氯化钠（分析纯） ；次氯酸钠（分析纯）；硼酸钠（分析纯）；OPA（邻苯二醛，色谱纯）；MERC（2-巯基乙醇，优级纯）；甲醇（色谱纯）；超纯水；草甘膦标准品，纯度≥99%；氨甲基膦酸标准品，纯度≥99%等。试剂和标准品的准备氧化试剂(衍生试剂1): 取0.5g次氯酸钠溶解于500ml超纯水中，搅拌，待完全溶解，作为储备液。取10ml次氯酸钠储备液于1L容量瓶中，加入1.74g磷酸二氢钾，11.6g氯化钠，0.4g氢氧化钠，加水稀释，定容，旋转，混匀，0.45um水系滤膜过滤，超声波超声脱气15min，备用。OPA试剂(衍生试剂2): 将100g硼酸和72g氢氧化钾置于1L容量瓶中，加700ml超纯水溶解（完全溶解需1-2小时）。加入含0.8g OPA的甲醇溶液5ml，加入MECR 2.0ml，旋转，混匀，0.45um有机系滤膜过滤，超声波超声脱气15min，备用。注意：加入OPA和MECR试剂步骤应在尽可能短的时间内完成，因为此试剂对氧气和光敏感。此衍生试剂为荧光标记溶液，OPA和MECR试剂为荧光标记试剂，它们两种试剂的质量和配置一定得保证。 样品前处理这就不多介绍了，具体可参考《GBT 5750.9-2006 生活饮用水标准检验方法 农药指标》中草甘膦检测部分。色谱条件检测器：荧光检测器分析柱：草甘膦分析柱，Pickering阳离子交换色谱柱，4 mm x 150 mm ，8um保护柱：草甘膦保护柱，Pickering阳离子交换保护柱，3 mm x 20 mm ， 8um柱温：55℃流动相：(A)磷酸二氢钾（5mmol，磷酸调pH 2.0）；(B)氢氧化钾（5mmol）流速：0.5 mL/min衍生试剂1：氧化试剂，36℃，流速为0.5mL/min衍生试剂2：OPA-MERC试剂，室温，流速为0.4mL/min荧光激发波长：330nm，发射波长：460nm进样量：20ul剃度表： 序号时间（min）A（%）B（%）1010002151000315.101004180100518.110006251000标准品色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508151323_560948_2536753_3.png某自来水样品色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508151323_560949_2536753_3.png 有人可能会问，不是检测草甘膦吗，怎么还检测氨甲基膦酸呢。大家可以看前面有一种衍生试剂叫氧化试剂，它是把没有荧光效应的草甘膦氧化成了氨基乙酸（又叫甘氨酸）和氨甲基膦酸，氨基乙酸通过荧光标记物衍生试剂衍生，会具有很强的荧光效应。如果草甘膦被完全氧化的话，氨基乙酸的摩尔数量就等于草甘膦的摩尔数量，用氨基乙酸的色谱峰假设成草甘膦的色谱峰，利用其就可以准确的计算出样品中草甘膦的含量，因此可以把氨基乙酸色谱峰叫做草甘膦色谱峰。而氨甲基膦酸在这个过程中是必然存在的，它的色谱峰是肯定有的，只是在这它不是检测物，因此图谱上它一定存在，但我们不会去计算它。 这个方法检测自来水中草甘膦，具有检出限非常低，线性良好且范围宽，重复性好，回收率高等众多优点，检测结果准确、可靠，是该类样品检测的理想方法。 做过该类样品（含草甘膦的样品）检测的同僚们都知道，这类样品检测大多选用荧光检测

环境温度的改变对液相色谱检测器有影响，会使基线漂移，噪音增大，影响检测，化验员都有亲身体会，那么环境温度除了对检测器有影响外，对柱压会有什么影响呢？检测组分的保留时间会有什么变化呢？组分先出的峰与后出的峰面积之比又会发生什么改变呢？ 针对上面的问题我们做了下列实验： 色谱仪：岛津SPD-20A ，LC-20AT 检测波长：254nm 流动相：乙腈：水=1:4， 流速：1.00ml/min 检测组分：标准样品（前峰）+内标（后峰） 检测条件：流动相稀释样品，没有柱温箱，空调改变环境温度，但空调并没有对着检测器。一：分别在室温24度，20度，19度，18度的条件下连续进样五针，分别为：A B C D E 五针，后出的峰{内标峰）保留时间明显变化，DE 两针重叠。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602222235_584857_2960432_3.png二：在室温18度的条件下，连续进样三针，分别为D E F 三针，色谱峰重叠。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602222235_584858_2960432_3.png三：分别在室温27度的条件下，连进两针，分别为G H 两针，在室温26度和25度的条件下，进样两针，分别为 I 和 J 两针。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602222236_584859_2960432_3.png四：做一个明显的对比 C 室温27度，A 室温24度，B 室温20度，F 室温18度，四针做对比。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602222236_584860_2960432_3.png五：连续进样十针室温，柱压，内标法校正因子对照表http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191700_667939_2960432_3.png注：内标法校正因子=标准品称重×标准品含量÷（准品峰面积÷ 内标峰面积× 内标称重量）=常数×内标峰面积÷标准品峰面积 通过上述公式看出：校正因子越大，内标峰面积/标准品面积 比值越大，相反，校正因子越小，内标峰面积/标准品面积 比值越小。=======================================================================元宵节里写灯谜，看图判断结谜底，其实问题很简单，只是让你猜答案！哈哈......元宵节乐呵一下，祝各位元宵节快乐！仔细分析上述提供的材料回答下面的问题：1：室温对柱压的影响2：室温对保留时间的影响3：室温对色谱峰的影响4：室温对校正因子的影响具体结论是什么呢？室温对色谱检测的影响 对我们 有什么启发呢？欢迎各位版友参与讨论和提出合理的建议， 赶快行动吧，看谜底花落谁家？

安捷伦色谱阀如图，通过十通阀两根色谱柱分离高沸点的醇醛等有机物和CO,CO2，空气HE等气体。高沸点有机物通过反吹直接排空，其他气体进入TCD检测。这两根色谱柱要买什么型号的，才能达到好的分离效果[img=,690,253]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907031328164364_5902_1773263_3.jpg!w690x253.jpg[/img]

气相色谱检测器并联法快速检测蔬菜中多农药残留1 检测器并联改装安捷伦6890N气相色谱仪（带ECD和NPD检测器，检测器并联方式见图1。 主色谱柱2（DB-1701,30m×0.53μm×0.25μm），辅色谱柱5（DB-1701, 15m×0.32μm×0.25μm）接氮磷检测器（NPD）7，辅色谱柱4（DB-1，15m×0.32μm×0.25μm）接电子捕获检测器（ECD）6；分配器3为石英 “三通”）； http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011162235_260056_2961690_3.jpg图1： ECD-NPD检测器并联气相色谱仪Figure 1:ECD - NPD detectosr parallel gas chromatograph 1.进样口 2.主色谱柱 3.分配器 4.5.辅色谱柱 6.ECD检测器 7.NPD检测器 8.柱温箱2 检测农药项目 敌敌畏、乐果、倍硫磷、喹硫磷、谷硫磷、丙溴磷、氧化乐果、甲基内吸磷、磷胺、地毒磷、杀螟硫磷、甲基硫环磷、乙基谷硫磷、甲胺磷、甲基对硫磷亚胺硫磷、治螟磷、特丁硫磷、久效磷、毒死蜱、对硫磷、硫环磷、伏杀硫磷、蝇毒磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、地虫硫磷、马拉硫磷、水胺硫磷；莠去津、西玛津、异菌脲、五氯硝基苯、氯硝胺、百菌清、三唑酮、腐霉利、乙烯菌核利；甲氰菊酯、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯、氟氯氰菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯、胺菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯；仲丁威、速灭威、甲萘威、残杀威、异丙威、克百威、抗蚜威。[font=Times New Roman