黑曲霉的检测

现在的微生物方法学验证，需要用到黑曲霉菌。由于黑曲霉菌是强致病菌，请问关于黑曲霉菌的管理和使用，以及对实验环境的有关要求有没有国家规定？先谢谢大家！

请教各位大神，现在购买的黑曲霉0代是液体状态的，你们复苏和复壮分别用那些培养基啊？复苏还需要用到SDB吗？

黑曲霉刚从药检所买来，二代冷冻管，用SDA传代后，只有白色菌丝，就是不黑，SDA的ph值是5.46，灭菌温度121℃（实际腔内温度有122℃），20分钟，每次都是把SDA水浴锅煮沸几分钟，分装在灭菌，从12.10传代到现在都不黑，用了商业PDA斜面管，黑了，只是没有白色菌丝，直接就是黑色孢子，不知道哪个环节出问题了，望老师不吝赐教

跪求强酸性阳离子交换树脂分离纯化黑曲霉发酵液中的柠檬酸方法，使用仪器核酸蛋白检测仪（波长多少？）实验步骤？实验所用洗脱剂？洗脱下来之后怎么检测柠檬酸含量？如何证明是柠檬酸？如何侧柠檬酸含量？。。。无语无助ing。。。目前在用280纳米核酸蛋白检测仪，恒流泵，记录仪，百分之一氨水洗脱，，下一步如何测柠檬酸含量啊啊啊啊，，，，，

黑曲霉最好保存孢子，可以用斜面培养基培养3-5天，产生黑色孢子后，用生理盐水冲洗下孢子，加入培养基和甘油，用液氮保存，保存个10年没问题。

请教下大家，黑曲霉的菌种确认是否只是进行菌体生长的形态和显微镜观察？ 大家显微镜的观察中，认为哪种方法比较简单适宜呢？ 显微镜观察后，根据孢子形态辨别？另外，大家做革兰氏染色时候，时间是怎么把握的呢，我按书本里的操作怎么每次做的都不太理想呢？

用黑曲霉第2代斜面上的菌株如何制作甘油冻存管？20%的甘油里面需要有0.05%的吐温80吗？配制20%的甘油是用生理盐水还是用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液？

加拿大发布允许食品中使用菌黑曲霉派生磷脂酶A2的临时营销售批准来源：厦门WTO工作站 2009年10月21日，加拿大发布G/SPS/N/CAN/399号通报，加拿大卫生署拟制定有关用于生产面包、面粉、全麦粉、非标准面包品、非标准整蛋、非标准蛋黄及转基因蛋黄素内的菌黑曲霉PLA-54[Aspergillus niger (PLA-54)]派生磷脂酶A2的临时营销售批准。 加拿大卫生署收到一份要求准用一种转基因菌黑曲霉杆菌派生的，携带该酶的猪胰基因编码的磷脂酶提案。磷脂酶属粗分类脂肪酶。现有数据评估支持由转基因菌黑曲霉派生的这种磷脂酶A2是安全有效的。因此，加拿大卫生署拟议修改食品药物法规，准许这种黑曲霉派生磷脂酶A2按药品生产质量管理规范(GMP)用于生产面包、面粉、全麦粉、非标准面包品、非标准整蛋、非标准蛋黄及转基因蛋黄素。作为改善协调机制应答能力的手段之一，在履行修改法规协调程序的同时，特发布临时营销许可，准许按GMP要求直接使用这种磷脂酶A2；且准许销售用上述物质制作的食品。 有关此项的最终规定将在12-18个月内批准并生效。通报评议截止日期为2009年12月24日。

求购黑曲霉、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌种。最好能提供培养基配方，感谢！我的邮箱：[email]maxx2007@foxmail.com[/email]

各位大侠，我在用柱前衍生，高效液相做黄曲霉检测时，回收率只有百分之七十多，这样子能接受么？请问有用液相，柱前衍生做黄曲霉的前辈，你们的回收率是多少呀？我是用免疫亲和柱净化后再衍生的，能指点一下检测黄曲霉有那些地方是比较关键的控制点么？帮忙提高一下回收率，谢谢

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]黄曲霉毒素检测仪检测成本高吗，黄曲霉毒素检测仪的检测成本可以从多个角度进行分析。首先，从单次检测成本的角度来看，黄曲霉毒素检测仪的单次检测成本是相对较低的。这是因为黄曲霉毒素检测仪已经在食品检测领域得到了广泛应用，特别是在花生等农作物的检测中，其重要性不言而喻。此外，一些先进的黄曲霉毒素检测仪，如霍尔德电子生产的型号，具有快速、方便、灵敏度较高等特点，并且内置强大的数据库，可以在同一软件下实现所有检测项目的检测，这进一步降低了单次检测的成本。然而，如果从购买和维护设备的角度考虑，黄曲霉毒素检测仪的成本可能会相对较高。购买一台高质量的黄曲霉毒素检测仪需要一定的资金投入，而且为了保持设备的正常运行和准确性，还需要定期维护和校准。此外，如果需要进行更高级别的检测，如使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]方法进行确认，那么还需要投入更多的资金购买和维护相关设备。此外，黄曲霉毒素检测的费用还可能受到地区、机构、检测项目等因素的影响。目前市场上的黄曲霉检测价格大约在200元到1500元之间，具体价格取决于所选择的机构和检测项目。综上所述，黄曲霉毒素检测仪的单次检测成本相对较低，但购买和维护设备的成本可能较高。在选择黄曲霉毒素检测仪时，需要根据自己的实际需求和预算进行综合考虑。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406040948069346_3131_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]黄曲霉毒素检测仪可以打印哪些信息，黄曲霉毒素检测仪是一种专门用于检测粮食中黄曲霉毒素的仪器。关于黄曲霉毒素检测仪可以打印的信息，它通常可以实时打印检测结果。具体来说，这些检测结果可能包括样品的黄曲霉毒素含量、是否超标以及相关的参数信息。这些信息都是仪器在检测过程中通过内部算法计算得出的，并直接显示在液晶触控显示屏上。此外，黄曲霉毒素检测仪通常具有较大的储存容量，可以储存大量的检测数据。因此，如果需要，仪器也可以打印之前的检测记录或历史数据。这些信息的打印有助于用户随时查看和记录检测结果，方便后续的分析和管理。请注意，不同型号和品牌的黄曲霉毒素检测仪在功能和使用上可能存在一定的差异。因此，在实际使用过程中，建议参考具体仪器的说明书或咨询厂家，以了解仪器可以打印的详细信息。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404191009083341_1492_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

[size=16px][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b]食用油综合检测仪可以检测黄曲霉吗[/color][/font]食用油综合检测仪可以检测黄曲霉毒素的含量。黄曲霉毒素的检测对于确保食用油的安全性至关重要，因为黄曲霉毒素是一种对人体健康有害的物质。食用油综合检测仪通过其专业的检测模块，能够准确地检测食用油中的黄曲霉毒素含量，从而及时发现可能存在的食品安全隐患，为消费者提供更加安全、健康的食用油。此外，食用油综合检测仪通常还具备检测食用油其他质量、成分和安全性的功能，如极性化合物、油温度、脂肪酸组成、酸值和过氧化值、氧化稳定性、残留物、色泽和透明度以及添加剂等。这些检测功能有助于全面评估食用油的品质和安全性，确保消费者能够购买到质量上乘、安全可靠的食用油产品。请注意，使用食用油综合检测仪进行检测时，应遵循相应的操作规范，确保检测结果的准确性和可靠性。同时，对于检测结果异常或超出安全范围的食用油，应及时采取相应的处理措施，以保障消费者的健康和安全。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403221032297769_4484_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/07/202407090908579742_1936_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]　　大豆黄曲霉毒素检测仪在现代农业生产与食品安全检测中发挥着不可或缺的作用。其重要性不仅体现在能够迅速、准确地检测出大豆中的黄曲霉毒素含量，更在于为食品安全提供了一道坚实的防线。　　黄曲霉毒素是一种强致癌物质，对人体健康构成严重威胁。大豆作为重要的粮食作物和食品加工原料，其安全性直接关系到消费者的身体健康。因此，对大豆进行黄曲霉毒素的检测显得尤为重要。　　大豆黄曲霉毒素检测仪的工作原理是通过特定的生化反应，对大豆样品中的黄曲霉毒素进行定量检测。这种仪器操作简便、快速，能够在短时间内给出准确的检测结果。此外，检测仪还具有高灵敏度和高特异性的特点，能够确保检测结果的准确性和可靠性。　　在实际应用中，大豆黄曲霉毒素检测仪被广泛应用于大豆种植、加工和流通等各个环节。种植户可以使用该仪器对种植的大豆进行定期检测，确保大豆在生长过程中不受黄曲霉毒素的污染。加工企业则可以在原料验收和成品检验等关键环节使用检测仪，确保生产出的产品符合食品安全标准。同时，监管部门也可以利用该仪器对市场上的大豆及其制品进行抽检，保障消费者的饮食安全。　　总之，大豆黄曲霉毒素检测仪在现代农业生产与食品安全检测中发挥着至关重要的作用。我们应该充分认识到其重要性，并积极推广和应用这一先进的检测技术，为食品安全保驾护航。

安捷伦1260，荧光检测器，光化学衍生，检测黄曲霉毒素B1，响应值太低，进样量2ppb 20微升？

现在在开展黄曲霉的检测方法，使用的柱后衍生的荧光检测法，可是效果老是不是太好，咨询下各位前辈，需要主要以什么呢？

我用安捷伦1260液相荧光检测器，检测黄曲霉毒素，为什么标准品溶液B1/B2/G1/G2的响应值很低？

最近药典增加了14味中草药的黄曲霉毒素检测， 不少企业开始检测黄曲霉毒素了，所以做了一个药材中黄曲霉毒素计算模板供大家使用~

哪些方法是国标、行标或者是国家承认的，检测结果是具有权威性的方法呢？最近要开展黄曲霉素的检测试验，但是薄层色谱法太麻烦了，定量也不准，免疫法可以作为标准检测法吗？有相关的标准吗？

[center]大家知道吗？中医药材也要检测黄曲霉毒素？[/center]

使用酶联免疫法检测干酪中的黄曲霉毒素M1，需要在单独的实验室进行吗？实验室需要负压吗？谢谢前辈们指导！

检测花生油中的黄曲霉毒素主要有以下方法： [color=initial]一、薄层层析法（TLC）[/color] [list=1][*] 原理 [list][*]利用样品中的黄曲霉毒素在特定的展开剂作用下，在薄层板上展开分离。然后通过显色剂显色，根据黄曲霉毒素在薄层板上显示出的特定斑点的颜色和强度与标准品进行比较，从而确定样品中黄曲霉毒素的含量。[/list][*] 步骤 [list][*]提取：将花生油样品用适当的溶剂（如甲醇、氯仿等）进行提取，以分离出黄曲霉毒素。[*]净化：通过柱层析等方法对提取液进行净化，去除杂质干扰。[*]展开：将净化后的样品溶液点在薄层板上，放入展开槽中，用特定的展开剂进行展开。[*]显色：取出薄层板，喷上显色剂，在一定条件下使黄曲霉毒素显色。[*]定量：通过与标准品斑点的比较，估算样品中黄曲霉毒素的含量。[/list][/list] [color=initial]二、高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法（HPLC）[/color] [list=1][*] 原理 [list][*]利用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]将样品中的黄曲霉毒素分离出来，然后通过检测器检测其含量。HPLC 具有分离效率高、分析速度快、灵敏度高等优点。[/list][*] 步骤 [list][*]提取和净化：与薄层层析法类似，对花生油样品进行提取和净化处理。[*]色谱分离：将净化后的样品溶液注入高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]，在特定的色谱柱和流动相条件下进行分离。[*]检测：采用荧光检测器或紫外检测器等对分离后的黄曲霉毒素进行检测。[*]定量：根据检测器的响应信号，通过与标准品的比较，确定样品中黄曲霉毒素的含量。[/list][/list] [color=initial]三、酶联免疫吸附法（ELISA）[/color] [list=1][*] 原理 [list][*]基于抗原抗体特异性结合的原理。将黄曲霉毒素的抗体固定在酶标板上，加入花生油样品提取液和酶标记的黄曲霉毒素抗原，样品中的黄曲霉毒素与酶标记抗原竞争结合抗体。通过酶催化底物显色，根据显色强度与标准曲线比较，确定样品中黄曲霉毒素的含量。[/list][*] 步骤 [list][*]样品处理：将花生油样品进行适当的提取和稀释。[*]加样和反应：将处理后的样品、酶标记抗原和抗体加入酶标板中，进行孵育反应。[*]显色：加入底物溶液，酶催化底物显色。[*]测定：用酶标仪测定显色后的吸光度值，根据标准曲线计算样品中黄曲霉毒素的含量。[/list][/list] [color=initial]四、免疫亲和柱 - 荧光光度法[/color] [list=1][*] 原理 [list][*]利用免疫亲和柱特异性吸附黄曲霉毒素，然后用洗脱液将黄曲霉毒素洗脱下来，通过荧光光度计测定其含量。该方法具有特异性强、灵敏度高、准确性好等优点。[/list][*] 步骤 [list][*]样品提取：将花生油样品用适当的溶剂提取黄曲霉毒素。[*]免疫亲和柱净化：将提取液通过免疫亲和柱，黄曲霉毒素被特异性吸附在亲和柱上，其他杂质被洗脱。[*]洗脱：用特定的洗脱液将黄曲霉毒素从亲和柱上洗脱下来。[*]荧光测定：将洗脱液注入荧光光度计，测定黄曲霉毒素的荧光强度，根据标准曲线确定样品中黄曲霉毒素的含量[/list][/list]

请教各位大虾：赭曲霉素Ａ的检测，除了国标的薄层法（操作太烦琐，毒性大）外，有没有其它准确，快速点的方法呀

中药材黄曲霉毒素检测技术方案一、 中药材质量安全现状 中药材是中医防病治病的重要基础。中药材在田间生长、采收加工、储藏运输等各个环节都会因污染霉菌而发生霉变。这些霉菌分泌的有毒代谢产物使中药材发霉变质，直接威胁到群众的用药安全。中药中的霉菌毒素主要有黄曲霉毒素，赭曲霉毒素，玉米赤霉烯酮，展青毒素，伏马毒素等。中药材的种类是影响真菌毒素污染的主要因素,易污染的中药材,在不同的温、湿度条件下均可产生真菌毒素。温度和湿度条件也可以影响真菌毒素的增长,如：黄曲霉毒素在不同的温、湿度条件下均可以产生；赭曲霉毒素需要在湿度较高的条件下才能产生。 近年来,随着中药材在国际市场上的持续升温,其安全性越来越引起人们的关注。真菌毒素残留作为中药材微量外源性有毒有害物质,一般不表现出急性毒性,但通常有较强的蓄积性,致癌、致畸、致突变作用明显,严重影响中药材的安全性。二、 中药材真菌毒素控制相关国家法规 近年来，各级食品药品监管部门不断加大中药监管力度，努力保持中药质量总体稳定。国家食品药品监督管理局关于规范中药生产经营秩序严厉查处违法违规行为的通知（国食药监安187号文件）中 ，要求加强对黄曲霉毒素、重金属及有害元素、农药残留量等安全性指标的检测和控制，切实保证中药材质量和安全，另要求企业具备与生产品种相适应的检验设备和能力，严把质量检验关。 《国家药品安全“十二五”规划》，规划中明确指出“开展药品快速检验技术研究，搭建检验技术共享平台”、“加快推进药品快速检验技术在基层的应用，配置快速检验设备”，“加强县级机构快速检验能力建设”的要求。三、 中药材真菌毒素检测项目及限量标准 国家食品药品监督管理局对柏子仁、莲子、使君子、槟榔、麦芽、肉豆蔻、决明子、远志、薏苡仁、大枣、地龙、蜈蚣、水蛭、全蝎等14味药材及其饮片品种项下增加“黄曲霉毒素”检查项目，限度为“黄曲霉毒素B1不得过5 μg/kg；黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2总量不得过10 μg/kg”。2010 版《药典》附录IX V 黄曲霉毒素测定采用高效液相色谱法，另外增补药典描述该法检测建立增加光化学柱后衍生法。四、 检测方案介绍（一） HPLC仪器分析法 免疫亲和柱-高效液相色谱法：符合2010版《药典》附录IX V中黄曲霉毒素测定高效液相色谱法，另外增补药典描述该法检测建立增加柱后光化学衍生法。1. 设备和耗材配置序号品名规格及参数数量用途1高效液相色谱仪配备荧光检测器一台分析检测2真菌毒素色谱柱150/250mm一支 3黄曲霉毒素总量免疫亲和柱1ml，25支/盒：若干高特异性，纯化样本4KRC光化学柱后衍生反应装置货号：PHRED-KRC-KRC一台适用于黄曲霉毒素检测5高速均质器达到22000rpm以上，一台耐腐蚀，高速6玻璃纤维滤纸100P,110mm，1.5μm一盒霉菌毒素专用过滤7八位泵流操作架货号：EQ-PUMP-8一台用于控制免疫亲和柱过柱流速8黄曲霉毒素混标黄曲霉毒素B1, G1; B2;G2(4/1/4/1),1ml用于定量分析标准品的配制2. 样品前处理:普瑞邦为中药材提供不同的处理方案(详细方案请联系普瑞邦，普瑞邦开发了针对多种中药材基质提供优化的处理方案)3. 免疫亲和柱净化:富集--洗涤--洗脱--收集全部洗脱液供化学衍生检测用。4. 化学衍生为什么使用光化学衍生器？ 由于黄曲霉具有较强的紫外吸收和产生荧光的特性，因此可以进行HPLC-紫外或荧光检测，但是同时黄曲霉毒素中的B1、G1 由于其在含水的流动相中容易产生荧光淬灭，因此在很多的实验中都会采用衍生法测定黄曲霉毒素。衍生的方法也很多：有柱前的，柱后的，在线的，由于在线的柱后光化学衍生有明显的优势，所以现在被增补为药典的检测方法，优势主要在于无需任何化学试剂、对人员无伤害；无需人员直接操作、避免误差; 无需担心衍生液腐蚀检测器。5. 高效液相色谱分析（HPLC）（二）酶联免疫法优点缺点灵敏度高、耗时较短、样本处理比较简单、对技术人员要求不高、检测成本低、可同时检测大批量样本。适用于大量样本快速定量筛查。可能存在一定假阳性率（交叉反应率）。 黄曲霉毒素总量试剂盒具有较高的灵敏度和准确度，适用于大量样本的定量分析。1. 方法原理采用直接竞争酶联免疫法，在微孔板上预包被黄曲霉毒素抗原，加入样本（或黄曲霉毒素标准品溶液）及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素特异抗体。样本或标准品溶液中的抗原与预包被在板孔上的抗原竞争结合酶标抗体。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液，读取吸光值。样品吸光值与其所含黄曲霉毒素总量成负相关，与标准曲线比较即可得出样品中黄曲霉毒素总量的含量。2. 设备和试剂配置：序号品名规格及参数数量用途1黄曲霉毒素总量试剂盒96T，灵敏度：0.1ppb货号：EKT-011一盒定量分析检测2离心小柱25T一盒净化样本3酶标仪（酶联免疫检测仪）滤光片：450nm一台测定结果3. 样本前处理：中药材：粉碎、溶解、离心，取上清液加入PriboSpin离心小柱进行净化。 为什么要用PriboSpin离心小柱？中药材的基质复杂，提取时样本液颜色较深，而且不容易去除。有机试剂提取净化方法繁琐，试剂挥发对环境及人体造成危害，且净化效果不稳定。用PriboSpin离心小柱，则只需提取液离心过柱，即可去除提取液中的杂质，方便快捷，净化效果好，且回收率可以达到85%以上。4. 检测步骤免疫反应30min；洗板5次；显色反应30min；终止反应，酶标仪读OD值。5. 分析结果的表述 用酶标仪判读结果。五、 温馨TIPS1. 中药中真菌生长繁殖的有利条件主要是适宜的温度与水分。如能将中药贮存于10℃以下，水分保持在10％以下，就能有效地防霉。2. 从事真菌毒素科研及检测的人员，必须注意防护，如穿戴隔离衣帽，在进行真菌分离培养工作时，应戴口罩，并尽量防止孢子飞扬。3

最近想用液相做黄曲霉毒素B1，但没配荧光检测器，请问各位大虾们，可以用紫外检测器测定吗？

黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株所产生的有毒代谢产物，最主要的4种分别为：B1、B2、G1、G2。黄曲霉毒素具有很强的急性毒性，也有明显的慢性毒性及强致癌性。黄曲霉毒素主要污染粮、油及其制品，其中受污染最严重的是花生、棉籽、玉米及其制品；其次是稻米、小麦、大麦、高粱、芝麻等等【检测步骤】 样品处理：称取1g样品（大米、玉米、小麦、花生及其制品经过磨细其粒度小于2mm）于1瓶提取剂中,振摇2分钟，静置3分钟，用滤纸过滤，收集2mL样液于1个5mL离心管中，备用；萃取：用1mL一次性吸管吸取1mL萃取剂，加入到收集了样液的离心管中，振摇1分钟，静置分层后，取大约0.8mL的下层清液至点滴板的一个孔中，自然挥干或冷风吹干；样品检测：向点滴板上滴4滴缓冲液，使其充分溶解点滴板上的残留物；从检测卡袋中取出检测卡，在卡上做好样品编号标记；用吸管吸取点滴板上全部待检样液，滴入加样孔中，加样后开始计时，5-10分钟内观察结果；本方法是专家根据多次反复试验，开发出来的。可以广泛应用于，畜牧部门、养殖、饲料生产企业的现场快速检测。