核酸检测原理

核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置，核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统（根据需要选配）和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质（样品）对紫外光有明显吸收的特征，实现对样品成份含量比对分析，以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。在生化分析、环保科学、食品研究、毒理研究、新药开发等领域中对核酸、蛋白检测、纯化和提取提供了一种独特的分析手段。

这次疫情严重，我们几乎是24小时做一次核酸，检测压力一定非常大，作为分析人深知核酸检测以为什么，如果有需要自己也想加入到检测人员中，做好筛查工作，愿疫情早日结束。

所在社区需要做核酸检测了

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=18px]5月1日到6月30日，上海常态化核酸检测点实行免费核酸检测。[/size][/font]

核酸检测繁忙中[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/02/202202211755369538_6188_1642069_3.png[/img]

核酸检测和抗原检测哪个更准确？

想做核酸检测，但因为是新手，所以N多问题都不是很懂，还望各位大神不吝赐教！1、用质谱对核酸进行定性分析，这样的方法可行吗？2、如果可行，那是不是就是将我做出的质谱图拿来与质谱数据库中的该核酸标准质谱图进行对比，以确定我所得出的就是我想检测的核酸呢？这个不知道思路是不是这样的，如果不是，还望帮我指条明路http://assets.dxycdn.com/gitrepo/bbs/emotions/default/078.gif 如果是这样思路的话，那标准质谱图/质谱数据库我该去哪儿找呢？

[font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=18px][color=#222222]　[/color][/size][/font][b]上海：[/b][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=18px][color=#222222]全市常态化核酸检测点免费检测服务延长至9月30日，市民应每周至少进行1次核酸检测。[/color][/size][/font]

实验室人员如何组织核酸检测？

不知道发生过疫情高风险的地区有没有把核酸检测也变成了常态。

实验室如何组织核酸检测？

超想知道，核酸检测的准确率，是不是100%？

在防疫中，我们所做核酸检测排查这么快，是因为将一部分子样混合成一个样品，直接检查这个样品，如果都是阴性说明这部分的子样没有被感染，如果混合样品有阳性，再在这批子样中逐个筛查，最终确定感染的人。我们是不是可以把这个方法用到实际分析工作中，这样可以减轻分析的工作量，同时提高分析效率节约分析时间。

单位每周一次核酸检测，

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=18px]截至4日，新疆霍尔果斯市第一轮核酸检测结果全部为阴性。目前已开展第二轮核酸检测。[/size][/font]

[size=18px]河南郑州5日起开展全员核酸检测，不参加本次全员核酸检测的居民，健康码一律标记为黄码。[/size]

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=18px]19日，北京通州区宋庄镇某画室一学生核酸检测结果阳性，宋庄镇连夜开展全员核酸检测。[/size][/font]

话说无论是初接触分子生物学的新手，还是久经考验的“老鸟”，都知道EB染料的有害性，这种有害性表现在三个方面：接触致癌性，紫外观测的诱变性，以及麻烦的后处理。但是要说到EB的替代品，好像又都不是那么合心意，比如SYBR类染料在紫外下不稳定，容易降解，一些像是GelRed之类的染料虽然毒性低，但是价格却不亲民。想要避免EB的影响，又不想影响实验的效果，许多实验人员常陷入两难中，另一方面，经典的凝胶成像系统一般都是采用的紫外成像，在这种波长下，EB的灵敏度和价格都是比较合适的，而其它的染料又存在不稳定性这一瓶颈式缺点，所以导致了虽然知道EB的有害性，但许多实验室还是采用EB染料的现状。国内生物技术自主研发着名企业：百泰克公司2009年推出了新一代的凝胶透射仪，可用于核酸和蛋白质电泳凝胶样品的观察、处理、分析和拍照。这种凝胶透射仪：UltraPowerTM采用的是可见光光源，如果配合新一代核酸染料UltraPowerTM或者其他花菁类荧光染料，可检测出几十pg的dsDNA，灵敏度比紫外凝胶透射仪配合EB染料高10-25倍。这是由于花菁染料具有摩尔吸收系数大和荧光量子产率高的优点，通过共轭链长度的调节，花菁的光谱可以从可见光区一直延伸到近红外区，采用红区测量可有效地排除背景干扰，获得更为理想的分析灵敏度和选择性。花菁染料的光谱对外界微环境的变化极为敏感，非常适合生物及环境样品的分析研究。除此之外，UltraPowerTM可见光凝胶透射仪还可以用于多数荧光染料，比如SYBR Green I、绿色荧光蛋白（EGPF）等（具体染料见附表）。这可以算得上是一套多色荧光成像分析系统，而且UltraPower可以采用普通数码相机拍照，从而摆脱了高昂造价得黑白CCD时代，可以拍出多姿多彩的电泳图片来。

ZHD型紫外蛋白核酸检测仪使用说明 一、系统简介 蛋白核酸检测仪是层析分析的主要装置，配上层析柱、恒流泵、部分收集器（根据需要选配）和电脑打印设备即构成一套完整的液相色谱分离系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质（样品）对紫外光有明显吸收的特征，实现对样品成份含量比对分析，以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。然而，目前国内生产的蛋白检测仪虽然种类繁多，但均采用记录仪描谱且预热时间较长。 ZHD型紫外蛋白核酸检测仪的研制成功，为科研和实验人员利用电脑系统实现核酸蛋白检测和分析提供了一种先进的手段，其特点是系统稳定、操作简便、电脑显示谱图、数据分析和打印谱图。 二、系统特点 本系列检测仪有别于其他检测仪，主要有以下特点： 1、预热时间短，一般做实验只要预热10分钟左右。 2、稳定性高，预热后每小时漂移一般小于0.001。 3、操作简洁，开机后仪器自动调整透光率（T）到100%，吸光度（A）调整到0.000。 4、透光率（T）和吸光度（A）对应准确，点两者误差小于1%。 5、双数据显示，仪器适时显示吸光度（A）和透光率（T）。 6、仪器带有电脑接口和记录仪接口（吸光度0—200mv）。 7、工作软件提供谱图采集、分析计算、保存、打印等功能，可将谱图插入文档（word）文件中。 8、一台电脑可配多台检测仪（由电脑有效端口数决定）。 三、 技术性能 1、通过测量选择菜单，在电脑屏幕上可描出吸光度（A）谱图，透过率（T%）谱图以及A-T%谱图。 2、通过图形平移、复读伸缩和压缩选择等菜单，可对谱图并进行幅度、宽度调整和谱图参数计算，预览满意后打印输出。 3、在描谱过程中，电脑会自动将图形左移（也可人工调整），电脑描谱最长时间为20小时。 4、采集数据自动保存。 四、主要参数： 1、波长：254nm，280nm（可根据用户需要调配）。 2、样品池100ul，光程3mm。 3、量程：吸光度（A）：0--2.000 透光率（T）：1%—100%。 4、分辩率：吸光度（A）：0.001 透光率（T）：0.1%。 5、电脑分析参数：峰高、峰宽、峰面积、峰面积比、保留时间、面积含量（归一化）、层析柱分辩率等。 6、电源220V±10%，50HZ。 7、主机重量：约3.5Kg。 五、系统安装与操作步骤 1、将仪器背板上的输出端通过一根串行口连接电缆与电脑主机的COM1或COM2串行口相连。 2、打开紫外蛋白核酸检测仪电源，仪器预热10分钟左右。 3、打开电脑后，将应用软件（ZHD.exe）复制到硬盘上。钦一下仪器面板上的复位按钮，待仪器显示0.000A和100%T后，双击ZHD.exe启动应用软件，系统进入采集（分析）状态。 4、在“测量选择”菜单下，用鼠标选择检测项目。 5、在“检测操作”菜单下点击“测量开始”，电脑开始采集。 6、要停止采集，点击“检测操作”下的“测量结束”菜单，然后关闭紫外蛋白酸检检测仪。 六、层析普工作站软件使用 1、 对硬件的基本要求： a、电脑在简体中文Windowsxp操作系统上运行； b、显示器分辩率为1024*768，小字体，256色配置； c、图形打印机； d、电脑系统必须正常工作，并保证串行口（COM2或COM1）有效； 2、系统连接无误后先让检测仪工作，再执行应用软件ZHD.exe； 3、 点击文件操作菜单下的“打开谱图”，出现文件操作对话框，打开随机盘上的数据文件(.ran)，图形被打开，熟悉菜单操作。菜单介绍如下： a、“文件操作”菜单下有打开谱图、保存谱图、打印谱图、打印预览等； b、“检测操作”菜单下有测量开始、测量结束(测量结束后,系统在应用程序目录下生成“文件名.TXT”文件,此格式文件可在Excel软件中打开,并可转贴到Word文档中使用)； c、“灵敏度选择”菜单下有A、T%、A-T%选项； d、“谱图平移”菜单后有向左慢移动 []和向右快移动[]； e、“谱图重绘”菜单：从起始点描谱；清理屏幕；释放压缩； f、“谱图全貌”菜单：在屏幕上观察全部谱图。 g、“参数选择”菜单:可对谱图进行参数分析计算。方法如下：在吸光度状态下，点击鼠标左键选取基线及时间范围（第一次点击选取第一点，第二次点击选取第二点），点击“选择参数”下拉菜单的峰高、标准差、半峰宽、峰底宽、峰面积、峰面积比、面积含量及保留时间等参数进行计算，还可间接计算出层析柱分辨率；双击鼠标左键，即可取消本次计算。 ｈ、在吸光度(A)或透光率(T%)状态下，单击鼠标右键，屏幕显示该鼠标点的数值；双击鼠标右健，擦除屏幕显示数值。 七、注意事项： a、 更改波长方法：打开样品池挡板后，可见到滤光片的燕尾型支架和印字（245或280代表当前所使用的波长），用手将其轻轻抽出，换向后插入原位，再将样品池挡板装上，拧紧固定螺钉即可。 b、 在检测仪和电脑正常工作后才能运行应用软件； c、 应用软件执行后，十秒钟后不出现采集分析界面，说明电脑未收到数据，需检查系统连接是否正常； d、 在A—T%描谱过程中，开始1小时内，T%谱以实蓝线表示；1小时后（或点击“图形重绘” ），已描过的T%谱会以虚蓝线表示； e、 测量开始后（特别是出峰以后）不要按复位按钮。 f、 要停止采集，请点击“测量结束”后，先点击“EXIT”，再关闭检测仪。 g、 开始测量时，屏幕会弹出保存文件对话框，要求输入数据文件名及存放路径；之后，电脑自动保存数据。 I、基线选取要保证基线与所选峰必须要有两个焦点，并与其他峰无焦点。

广东：新冠核酸检测费用下调至全国最低，每次60元

由于传播途径多样、影响范围广泛，症状发展迅速，传染病仍然是世界范围内引起人类大量死亡的重要原因。21世纪以来多次严重疫情给我们留下深刻印象：一是2003年的“非典”（SARS），二是2009年的甲型H1N1流感（人感染猪流感），再有就是现在席卷全球的新型冠状病毒肺炎疫情。因此，传染病的防控一直是医学科学工作者面临的巨大挑战。其中，对病原体进行快速准确的鉴定是传染病精准防控的基础。中国医学科学院病原生物学研究所彭俊平研员自2000年起即深耕于病原体检测技术方法及基因组学、耐药机制相关的研究工作。近日，仪器信息网特别采访了彭俊平研究员，与他就核酸质谱技术在病原体检测领域的应用现状及前景进行了深入交谈。[align=center][img=彭俊平个人.JPG,600,337]https://img1.17img.cn/17img/images/202204/uepic/3407a132-360a-4424-b8f8-73b9d8028642.jpg[/img][/align][align=center]中国医学科学院病原生物学研究所 彭俊平研究员[/align][color=#ff0000]“国内最早开展核酸质谱病原体检测研究的团队之一”[/color]随着各项科学技术的进步，病原体检测技术也在不断发展，由病原分离、电镜观察、免疫学检测等传统生物学方法发展到[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]技术、芯片技术、测序技术、质谱技术等分子生物学方法。“因为引起疾病的病原体种类繁多，单一的平台技术不能解决所有问题，所以，我们的主要工作是利用各种平台技术对病原体进行筛查。”彭俊平介绍到，“多年来我们课题组一直致力于搭建一个病原体组合筛查技术体系，这也是我国在传染病防控领域的一个重要工作。另外，我们利用多重[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]反应结合飞行时间质谱技术（以下简称：核酸质谱）在病原体检测领域开展了10多年的工作，这也是我们多年来的一个重点发展方向。”核酸质谱是什么？彭俊平为笔者解答到，核酸质谱其实是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）在核酸水平的应用，是一种将多重[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]反应与质谱结合的复合技术。此前，MALDI-TOF主要应用于蛋白质水平的微生物鉴定研究，应用发展不过30多年，而MALDI-TOF在核酸水平的相关应用则是近些年提出的概念，应用发展时间就更短。最初，MALDI-TOF在核酸研究领域开展的应用是SNP基因分型，其首先通过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]扩增含有SNP的基因组片段，再通过检测核酸分子在真空管中的飞行时间而获得样品分析物的精确分子量，从而检测出SNP位点信息。因为MALDI-TOF本身的高灵敏度和高通量等特点，使其非常适合应用于SNP多位点的筛查。而MALDI-TOF在病原体检测领域的研究则鲜少有报道。彭俊平课题组是国内最早开展核酸质谱病原体检测研究的团队之一。“我们是在2009年引进的这个技术平台，正好是H1N1全球大流行的时候，当时核酸质谱的技术水平还不足以帮助我们开展相关工作，因此我们就开始自己开发方法。”核酸质谱病原体检测的原理是利用MALDI-TOF检测多重[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]反应的产物，即单碱基延伸的产物质量大小，来判定检测靶基因的有无，从而进一步判定样本中目标病原体的有无。与传统的病原体检测技术相比，核酸质谱在灵敏度、检测通量以及操作简便性等方面均有一定优势。此外，核酸质谱检测的核酸序列均来源于公共数据库，不需要依赖其他的数据库。[color=#ff0000] “开发了7种人冠状病毒的检测方法，成功申请专利”[/color]经过多年的技术摸索，彭俊平团队利用核酸质谱在病原体检测领域做出了很多成果。最近其团队开发了7种人冠状病毒的检测方法，并申请了发明专利。目前，已知可以感染人的冠状病毒共有7种，其中包括2003年的“非典”SARS冠状病毒、2012年在中东地区出现的MERS冠状病毒以及2019年12月爆发的严重性呼吸系统综合征冠状病毒SARS-Cov-2。彭俊平介绍到，课题组是从2012年开始开展人冠状病毒的检测技术研究，其中一部分工作内容就是利用核酸质谱进行检测应用。该部分成果是与岛津公司合作开发的，利用一步法多重反应[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]与MALDI-TOF质谱联用鉴定7种人冠状病毒与新型冠状病毒的重要突变位点。“本次合作中我们将多重[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]反应从两步法改进为一步法，既缩短了实验时间，又减少了人为操作的工作。而且我们改进的方法适用于所有的RNA病毒，可以说是摸索出了一种通用的解决方案。”彭俊平介绍到，“和岛津合作成果的应用价值很明确，我非常期待未来该方法的推广。接下来我们也将继续和岛津合作在MALDI-TOF平台上开发出更多病原体检测解决方案，并合力推动核酸质谱在临床领域的应用。”笔者追问到目前国际上核酸质谱在病原体检测领域的应用现状如何？彭俊平坦言道，国际上相关的成果并不多，而团队于2009年就开展了相关研究，可以说是走在了国际前列。不过，目前核酸质谱病原体检测的应用还以科研阶段为主，临床应用正处于拓展阶段。此外，彭俊平也谈到他认为核酸质谱走向临床所面临的瓶颈，一是MALDI-TOF本身的硬件设备比较贵；其次，基于MALDI-TOF平台提供给临床应用的成熟方法不多。因此，核酸质谱这样的技术平台想要真正推广到临床，首先需要提供“一揽子”的解决方案，这样应用场景就会被打开。不过，彭俊平也观察到，无论国内还是国外，越来越多的团队和厂商开始关注这一领域，相信核酸质谱的临床应用情况将在短短几年之内得到很大的改变。最后彭俊平表示，未来核酸质谱病原体检测值得重点关注的方向有呼吸道感染疾病、腹泻性疾病和性传播疾病等，其涉及的病原体种类繁多，是核酸质谱可以“大展身手”的方向。后记：采访中彭俊平反复提到“病原体的组合筛查技术体系”，他也为笔者解释到，为了获取更全面的生物信息，往往需要多种技术平台共同解决问题，而不是希望用一个技术平台去解决所有的问题。回到MALDI-TOF这一技术来说，总有人拿质谱与NGS测序相比较，其实它们的应用场景和目标都不一样，发展核酸质谱也并不是为了替代测序技术。事实上，核酸质谱只需要在中高通量的检测中建立并巩固其“王者地位”，在此基础上能够再提升灵敏度和分辨率等性能，就为自身的发展开辟了新天地。

是自己购买光谱合算还是外单位送样检测合算？做个小比喻，有些类似个人是买房好还是租房好的意思。