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总氮测定原理

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总氮测定原理相关的论坛

  • 【求助】水质中 总氮的测定

    谁告诉下用过硫酸盐消化法 在430nm处测定总氮的原理应该是什么呢?现在的标准都是用过硫酸钾消解紫外分光光度法啊!!

  • 总磷测定的原理

    总磷包括溶解的、颗粒的、有机的和无机磷。总磷可以用人工消解后分光光度法测定,也可以用总磷测定仪测定。二者的原理相似,总磷测定仪法更加智能快速,并将消解和分光在一套仪器上完成。各种形态的磷需要将其转化为一种形态-即在中性条件下用过硫酸钾在120℃消解,将样品中所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中,正磷酸盐与钼酸铵反应,在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后,立即被抗坏血酸还原,生成蓝色的络合物,在700nm处进行测定。

  • 总氮测试是什么原理的?

    请教一下各位专业人士,测总氮是什么原理啊?那个牌子的仪器测试准确一点,性价比高,麻烦各位推荐一下,谢谢了!

  • 【实战宝典】土壤总氮与全氮测定有什么区别?

    [font=宋体]发帖人:[/font][font='Times New Roman']forth[/font][font=宋体]链接:[/font][u][font='Times New Roman'][color=#0000ff]https://bbs.instrument.com.cn/topic/74746890[/color][/font][/u][font=黑体][b]问题描述:[/b][/font][font=宋体]现行的土壤总氮与全氮的测定分别是,《城市污水处理厂污泥检验方法》([/font][font='Times New Roman']CJ/T 221[/font][font=宋体][font=Times New Roman]-[/font][/font][font='Times New Roman']2005[/font][font=宋体])[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]第[/font]49[font=宋体]部分[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定总氮;《土壤全氮测定法(微量开氏法)半》([/font][/font][font='Times New Roman']NY/T 53-1987[/font][font=宋体])[/font][font=宋体]以上两种方法测出来的结果有什么差异呢?哪个标准测出来的结果更加准确?两种方法的氮具体有什么区别?[/font][font=黑体][b]解答:[/b][/font][font=黑体] [/font][font=宋体][font=宋体]《城市污水处理厂污泥检验方法》([/font][font=Times New Roman]CJ/T 221-2005[/font][font=宋体])第[/font][font=Times New Roman]49[/font][font=宋体]部分城市污泥 总氮的测定 碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法中测试的总氮[/font][/font][font=宋体]是指:污泥中的亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机铵盐及大部分有机含氮化合物中氮的总和。[/font][font=宋体]《土壤全氮测定法(半微量开氏法)》([/font][font='Times New Roman']NY/T [/font][font=宋体][font=Times New Roman]53-1987[/font][font=宋体])[/font][/font][font=宋体]全氮分为两种:一种不包括硝态氮和亚硝态氮。一种包括硝态氮与亚硝态氮,包括硝态和亚硝态氮的全氮测定,在样品消煮前,需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后,再用还原铁粉使全部硝态氮还原,转化成铵态氮。[/font][font=宋体]两个方法的测定原理不同,第一个方法是将氮转化为硝酸盐进行测定,第二个方法是将氮转化为铵盐进行测定,假设转化率相等,则两个方法有可比性。因为实际样品非常复杂,因此两种方法有差别,应注明限制条件。[/font]

  • 【分享】总氮的测定

    碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法GB 11894-89(国标)Water quality-Determinatlon of total nitrogen-Alkaline potassium persulfate digestion-UV spectrophotometric mcthod1 主题内容与适用范围1.1 主题内容本标准规定了用碱性过硫酸钾在120~124℃消解、紫外分光光度测定水中总氮的方法。1.2 适用范围本标准适用于地面水、地下水的测定。本法可测定水中亚硝酸盐氮、硝酸盐氨、无机铵盐、溶解态氨及大部分有机含氮化合物中氮的总和。氮的最低检出浓度为0.050mg/L,测定上限为4mg/L。本方法的摩尔吸光系数为1.47×103L• mo1-1• cm-1。测定中干扰物主要是碘离子与溴离子,碘离子相对于总氮含量的2.2倍以上,溴离子相对于总氮含量的3.4倍以上有干扰。某些有机物在本法规定的测定条件下不能完全转化为硝酸盐时对测定有影响。2 定义2.1 可滤性总氮:指水中可溶性及含可滤性固体(小于0.45μm颗粒物)的含氮量。2.2 总氮:指可溶性及悬浮颗粒中的含氮量。3 原理在60℃以上水溶液中,过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧,硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子,故在氢氧化钠的碱性介质中可促使分解过程趋于完全。分解出的原子态氧在120~124℃条件下,可使水样中含氯化合物的氮元素转化为硝酸盐。并且在此过程中有机物同时被氧化分解。可用紫外分光光度法于波长220和275nm处,分别测出吸光度A220及A275按式(1)求出校正吸光度A:A=A220-2A275………………………………………………(1)按A的值查校准曲线并计算总氮(以NO3-N计)含量。4 试剂和材料除非(4.1)另有说明外,分析时均使用符合国家标准或专业标准的分析纯试剂。4.1 水,无氨。按下述方法之一制备;(即超纯水)4.1.1 离子交换法:将蒸馏水通过一个强酸型阳离子交换树脂(氢型)柱,流出液收集在带有密封玻璃盖的玻璃瓶中。4.1.2 蒸馏法:在1000mL蒸馏水中,加入0.10mL硫酸(p=1.84g/mL)。并在全玻璃蒸馏器中重蒸馏,弃去前50mL馏出液,然后将馏出液收集在带有玻璃塞的玻璃瓶中。4.2 氢氧化钠溶液,200g/L:称取20m氢氧化钠(NaOH),溶于水(3.1)中,稀释至100mL。4.3 氢氧化钠溶液,20g/L:将(4.2)溶液稀释10倍而得。4.4 碱性过硫酸钾溶液:称取40g过硫酸钾(K2S2OB),另称取15g氢氧化钠(NaOH),溶于水(4.1)中,稀释至1000mL,溶液存放在聚乙烯瓶内,最长可贮存一周。4.5 盐酸溶液,1+9。4.6 硝酸钾标准溶液。4.6.1 硝酸钾标准贮备液,CN=100mg/L:硝酸钾(KNO3)在105~110℃烘箱中干燥3h,在干燥器中冷却后,称取0.7218g,溶于水(4.1)中,移至1000mL容量瓶中,用水(4.1)稀释至标线在0~10℃暗处保存,或加入1~2mL三氯甲烷保存,可稳定6个月。4.6.2 硝酸钾标准使用液,CN=10mg/L:将贮备液用水(4.1)稀释10倍而得。使用时配制。4.7 硫酸溶液,1+35。5 仪器和设备5.1 常用实验室仪器和下列仪器。5.2 紫外分光光度计及10mm石英比色皿。5.3 医用手提式蒸气灭菌器或家用压力锅(压力为1.1~1.4kg/cm2),锅内温度相当于120~124℃。5.4 具玻璃磨口塞比色管,25mL。所用玻璃器皿可以用盐酸(1+9)或硫酸(1+35)浸泡,清洗后再用水(4.1)冲洗数次。6 样品6.1 采样在水样采集后立即放入冰箱中或低于4℃的条件本保存,但不得超过24h。水作放置时间较长时,可在1000mL水样中加入约0.5mL硫酸(p=1.84g/mL),酸化到pH小于2,并尽快测定。样品可贮存在玻璃瓶中。6.2 试样的制备取实验室样品(6.1)用氢氧化钠溶液(4.3)或硫酸溶液(4.7)调节pH至5~9从而制得试样。如果试样中不含悬浮物按(7.1.2)步骤测定,试样中含悬浮物则按(7.1.3)步骤测定。7 分析步骤7.1 测定7.1.1 用无分度吸管取10.00mL试样(CN超过100μg时,可减少取作量并加水(4.1)稀释至10mL)置于比色管中。7.1.2 试样不含悬浮物时,按下述步骤进行。a.加入5mL碱性过硫酸钾溶液(4.4),塞紧磨口塞用布及绳等方法扎紧瓶塞,以防弹出。b.将比色管置于医用手提蒸气灭菌器中,加热,使压力表指针到1.1~1.4kg/cm2,此时温度达120~124℃后开始计时。或将比色管置于家用压力锅中,加热至顶压阀吹气时开始计时。保持此温度加热半小时。c.冷却、开阀放气,移去外盖,取出比色管井冷至室温。d.加盐酸(1+9)1mL,用无氨水稀释至25mL标线,混匀。e.移取部分溶液至10mm,石英比色皿中,在紫外分光光度计上,以无氨水作参比,分别在波长为220与275nm处测定吸光度,并用式(1)计算出校正吸光度A。7.1.3 试样含悬浮物时,先按上述7.1.2中a至d步骤进行,然后待澄清后移取上清液到石英比色皿中。再按上述7.1.2中e步骤继续进行测定。7.2 空白试验空白试验除以10mL水(4.1)代替试料外,采用与测定完全相同的试剂、用量和分析步骤进行平行操作。注:当测定在接近检测限时,必须控制空白试验的吸光度Ab不超过0.03,超过此值,要检查所用水、试剂、器皿和家用压力锅或医用手提灭菌器的压力。7.3 校准7.3.1 校准系列的制备:a.用分度吸管向一组(8支)比色管(5.4)中,分别加入硝酸盐氮标准使用溶液(4.6.2)0.0,0.5,1.0,2.0,3.0,5.0, 7.00,8.0mL。加水(4.1)稀释至10.00mL。b.按7.1.2中a至e步骤进行测定。7.3.2 校准曲线的绘制:零浓度(空白)溶液和其他硝酸钾标准使用溶液(4.6.2)制得的校准系列完成全部分析步骤,于波长220和275nm处测定吸光度后,分别按下式求出除零浓度外其他校准系列的校正吸光度As和零浓度的校正吸光度Ab及其差值ArAs=As220-2As275 ………………………………………………(2)Ab=Ab220-2Ab275………………………………………………(3)Ar=As-Ab ……………………………………………………(4)式中:AS220——标准溶液在220nm波长的吸光度;AS275——标准溶液在275nm波长的吸光度;Ab220——零浓度(空白)溶液在220nm波长的吸光度;Ab275——零浓度(空白)溶液在275nm波长的吸光度。按Ar值与相应的NO3-N含量(μg)绘制校准曲线。8 结果的表示8.1 计算方法按式(1)计算得试样校正吸光度Ar,在校准曲线上查出相应的总氮μg数,总氮含量(mg/L)按下式计算:式中:m——试样测出含氮量,μg;V——测定用试样体积,mL。9 精密度与准确度9.1 重复性21个实验室分别测定了亚硝酸钠,氨基丙酸与氯化铵混合样品;CW604氨氮标准样品;L-谷氨酸与葡萄糖混合作品。上述三种作品含氮量分别为1.49,2.64和1.15mg/L,其分析结果如下:各实验室的室内相对标准偏差分别为2.3,1.6和2.5%。室内重复测定允许精密度分别为0.074,0.092和0.063mg/L。9.2 再现性上述实验室对上述三种统一合成样品测定。实验室间相对标准偏差分别为3.1%,1.1%和4.2%;再现性相对标准偏差分别为4.0%,1.9%和4.8%;总相对标准偏差分别为3.8,1.9和4.9%。9.3 准确度上述实验室对上述三种统一合成样品测定,实验室内均值相对误差分别为6.3%,2.4%和8.7%。室内单内相对误差分别为7.5%,3.8%和9.8%。实验室平均回收率置信范围分别为99.0±6.4%,99.0±5.1%和101±9.4%。附加说明:本标准由国家环境保护局规划标准处提出。本标准由上海市环境监测中心负责起草。本标准起草人戴克慧。本标准委托中国环境监测总站负责解释

  • 为什么水质测定总氮含量低于氨氮含量?

    [color=#333333][font=&][color=#333333]总氮是各种无机态氮(硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、氨氮)和有机态氮(蛋白质、氨基酸、有机胺)的总量,它是衡量水质的重要指标。[/color][/font][font=&][color=#333333]目前,比较常用的总氮检验方法是碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法(HJ636-2012)。[/color][/font][font=&][color=#333333]但很多水友反应该方法不好做,其中代表性问题有:[/color][/font][font=&][color=#333333]氨氮高于总氮的测定结果;[/color][/font][/color][font=&][color=#333333]按道理来说,氨氮包含于无机氮,而无机氮包含于总氮中。[/color][/font][font=&][color=#333333]但在实际测定中,氨氮总氮的情况还是很常见的。[/color][/font][font=&][color=#333333]对于这种现象来说,一般看法是样品中氨氮含量较高时,加入碱性过硫酸钾,在碱性条件下形成氨水,氨水挥发生成氨气,从比色管中释放出来,导致测定的总氮量只包含了部分氨氮,从而低于氨氮含量。[/color][/font][font=&][color=#333333]因此,利用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法处理样品时,可以在所有样品都加入过硫酸钾溶液后,统一加盖。这样就给氨氮含量较高的样品中氨氮以氨气形式挥发出来创造了时间。[/color][/font][font=&][color=#333333]当然,也有操作人员采用双管消解法。即将样品加入比色管用无氨水稀释至10mL后,将碱性过硫酸钾加入另一小试管中,再将装有碱性过硫酸钾的小试管放入比色管中,小试管顶部的高度应超出比色管中的试样液面以避免样品处于碱性环境,盖上比色管盖后,再进行比色管内两种液体的混合。[/color][/font][font=&][color=#333333]但双管法在实际操作过程中过于繁琐,测试结果也不是很理想。[/color][/font][font=&][color=#333333]其实,针对氨氮总氮这个问题应该如HJ636-2012的征求意见稿所说,“不应该仅仅停留在总氮测定本身上,而是应该从测定总氮和氨氮两者之间存在的一些联系上查找原因”,“在不断完善总氮测定的过程中,还应同步完善氨氮测定中包括实验用水、器皿、试剂和实验环境,使两者同步远离氮的污染,才能保证测定结果的正确性。”转自食品伙伴网[/color][/font]

  • 【原创大赛】浅谈水质测定指标总氮的测定方法中遇到的问题与解决方法

    [align=center][b]浅谈水质测定指标总氮的测定方法中遇到的问题与解决方法[/b][/align]大 量的生活污水、农田排水或含氮工业废水排入天然水体中中,使水中有机氮和各种无机氮化物的含量增加,生物和微生物大量繁殖,消耗水中的溶解氧,使水体质量 恶化。若湖泊、水库中的氮含量超标,会造成浮游植物繁殖旺盛,出现水体富营养化状态。因此,总氮是衡量水质的重要指标之一。用"碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法"测定水中的总氮时, 通过减少氧化剂中氢氧化钠的浓度, 使消解后溶液可以直接在波长210nm处进行测定. 与原法相比, 简化了分析步骤, 节约了试剂 而且灵敏度提高了约2倍, 保证有很好的精密度和准确度.在利用(GB11894-89)测定水质总氮过程中,经常出现标准曲线线性较差,空白值偏高等影响试验准确性的问题.本研究运用控制变量法的基本原理,以不同药品、消解时间和消解温度为研究对象进行验证试验,寻求最优化的试验条件组合.通过试验发现,过硫酸钾、氢氧化钠的纯度是影响测定准确性的最重要因素,其中分析纯AR级的过硫酸钾(K2S2O8)经纯化处理可以降低空白值 消解时间的延长和消解温度增加对提高实验准确性的影响不显现。从试剂纯度、消解过程、实验用水、实验室环境条件、器皿和高压蒸汽灭菌器的污染状况及波长定位准确性等方面探讨分析了碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法总氮测定过程中的影响因素,在过硫酸钾溶解及提纯步骤中引入超声波促溶技术,较好地解决了实际实验中过硫酸钾溶解及提纯过程耗时繁琐的问题,对该国标方法做了补充完善,并以2个有证标准样品和4个实际水样测定予以验证。氮超标是水体富营养化的原因之一,因此总氮质量浓度是水质监测的重要指标之一。但由于在实际分析过程中容易产生空白值偏高、拟合曲线线性差等问题,对试验的操作要求比较严格。通过对比试验和数据分析,对过硫酸钾氧化一紫外分光光度法(GB11894—89)的试验条件进行了优化。结果表明,在标准分析方法的基础上,延长加热氧化时间至55min,消解之后,自然冷却2h,比色时间30min,可得到更为准确的校准曲线。性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定水中总氮采用的消解器皿是玻璃比色管,易造成空白偏高、结果偏低等问题.采用双圆柱状的消解杯对水样进行消解.结果表明,消解杯消解水中总氮,线性相关系数均大于0.999,检出限为0.05mg/L,相对标准偏差小于5%,相对误差为0.88%~1.00% 改进后的消解器皿具有较好的精密度和准确度,能够更加准确测定水中总氮的含量。

  • 【求助】硝酸铝显色法测定总黄酮的原理

    硝酸铝显色法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在510nm波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般以芦丁标准品定量。 先用亚硝酸钠还原黄酮, 然后加入硝酸铝络合,最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环,生成 2''''羟基查耳酮而显色。显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时不显色。用亚硝酸钠还原黄酮,还原那个基团?硝酸铝络合,与那个基团?

  • 蛋白质浓度测定的各种方法及原理

    [font=宋体][font=宋体]蛋白质浓度测定的各种方法及原理是生物化学和分子生物学实验中的重要环节。蛋白质浓度的准确测定对于研究生物分子相互作用、蛋白质功能和动力学、以及生物样品的分析和鉴定等方面都具有重要的意义。本文将介绍几种常用的蛋白质浓度测定方法及其原理,包括紫外吸收法、微量凯氏定氮法、双缩尿法、[/font][font=Calibri]Lowry [/font][font=宋体]法和考马斯亮蓝法等。通过对这些方法的比较和分析,可以更好地了解它们的优缺点,以便根据实际实验需求选择合适的方法来测定蛋白质浓度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]①紫外吸收法[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]检测原理:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共扼双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在[/font][font=Calibri]280nm[/font][font=宋体]处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在[/font][font=Calibri]238nm[/font][font=宋体]的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,进行蛋白质含量的测定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]方法特点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]优点:简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点:测定蛋白质含量的准确度较差,干扰物质多。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]干扰物:含有嘌呤、嘧啶、核酸等吸收紫外光的物质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]检出限:[/font][font=Calibri]50~100ug[/font][font=宋体]蛋白含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用范围:适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②微量凯氏定氮法[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]凯氏定氮法被国内外视为蛋白质含量的标准检验方法,可作为衡量其他蛋白质含量检测方法准确性的标准。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]实验原理:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]样品与浓硫酸共热,含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]方法特点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]优点:通用性强,测定费用低,易实现,仪器简单且测定结果的重复性和重现性好。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点:实验耗时长、灵敏度低。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]检出限:[/font][font=Calibri]0.2~1mg[/font][font=宋体]蛋白含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用范围:凯氏定氮法测的是总蛋白的量,一些非蛋白氮无法检测出。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]③双缩尿法[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]实验原理:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双缩尿([/font][font=Calibri]NH3CONHCONH3[/font][font=宋体])是两个分子经[/font][font=Calibri]180[/font][font=宋体]℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱溶液中,双缩尿与[/font][font=Calibri]CuSO4[/font][font=宋体]形成紫色络合物,称为双缩尿反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽链,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩尿反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,与蛋白质分子量及氨基酸成分无关。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]方法特点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]优点:适合检测总蛋白质的含量,操作简单、测量速度快。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点:标准物质必须使用代表性很强的样品,需使用其他参考方法测出标准物质中的蛋白质总含量,故测定工作费力费时。不宜测定样品种类多、彼此差异大的样品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]检出限:测定蛋白质含量测定范围为[/font][font=Calibri]1-20mg[/font][font=宋体]蛋白质。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]干扰物:硫酸铵、[/font][font=Calibri]Tris[/font][font=宋体]缓冲液和某些氨基酸等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用范围:常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]④[/font][font=Calibri]Lowry [/font][font=宋体]法[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Lowry [/font][font=宋体]法是双缩脲法的发展,结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应,是最灵敏的蛋白质测定方法之一,在生物化学领域得到广泛的应用,目前分为基本法和改良简易法,改良简易法可获得与基本法相近的结果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]基本法实验原理:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]显色原理与双缩尿法相同,但加入了[/font][font=Calibri]Folin-[/font][font=宋体]酚酞试剂,以增加显色量,从而提高检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是:①在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。②[/font][font=Calibri]Folin[/font][font=宋体]一酚试剂中的磷钼酸盐一磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深兰色(钼兰和钨兰的混合物)。在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]特点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]优点:灵敏度高。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点:耗费时间长,操作时间需精准控制,标准曲线绘制麻烦,专一性较差,干扰物质比较多。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]检出限:可检测的最低蛋白质量达[/font][font=Calibri]5ug[/font][font=宋体]。通常测定范围是[/font][font=Calibri]20~250ug[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]干扰物:酚类、柠檬酸、硫酸铵、[/font][font=Calibri]Tris[/font][font=宋体]缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用范围:除蛋白含量测定,也可用于酪氨酸和色氨酸的定量测定。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]⑤考马斯亮蓝法[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]实验原理:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]考马斯亮蓝[/font][font=Calibri]G-250[/font][font=宋体]染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置([/font][font=Calibri]max[/font][font=宋体]),由[/font][font=Calibri]465mm[/font][font=宋体]变为[/font][font=Calibri]595nm[/font][font=宋体],溶液的颜色也由棕黑色变为蓝色。经研究认为,染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。在[/font][font=Calibri]595mm[/font][font=宋体]下测定的吸光度值[/font][font=Calibri]A595[/font][font=宋体],与蛋白质浓度成正比。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]方法特点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]优点:灵敏度比[/font][font=Calibri]Lowry[/font][font=宋体]高约[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]倍,高效率、检测过程简便、只需要一种试剂,抗干扰能力强。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点:测定误差大,不适用于不同蛋白的检测。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]检出限:其最低蛋白质检测量可达[/font][font=Calibri]1ug[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]干扰物:干扰物质少,但去污剂、[/font][font=Calibri]TritonX-100[/font][font=宋体]、十二烷基硫酸钠、[/font][font=Calibri]0.1N[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]NaOH[/font][font=宋体]会干扰实验测定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]蛋白质含量测定方法选择[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质含量测定时,考虑以下因素后选定适用的检测方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①实验对测定所要求的灵敏度和精确度;[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②蛋白质的性质;[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③溶液中存在的干扰物质;[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④测定所要花费的时间。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供多种类型的[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]蛋白资源[/b][/url],不仅有重组蛋白服务还有各种大咖讲座,详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/font][font=Calibri] [/font]

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    【原创大赛】水质总氮测定的有关影响因素分析

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    请教大家:有没有同时测定COD、氨氮、总磷、总氮的仪器,或者是可以同时测定COD、氨氮、总磷的仪器,刚在仪器版面看到一个仪器COD、氨氮、总磷多元测定仪5B-6C型,产地北京,但发现氨氮和总磷可测量程偏小,请问有没有其他的仪器。我测得是散养养殖户的畜禽废水[em0808]

  • 总氮的测定探讨

    各位老师好!我是作总氮的,经常会出现总氮的结果比硝酸盐\亚硝酸盐氮\氨氮\非离子氨等之和小,有时候会出现某一单项测定值大于总氮的测定值,结果很难确定,有没有一些权威的有关此话题的书籍或者论文,请上传给大家,让大家一起分享!!!谢谢!!! 另外,出现上述结果的原因只有:温度压力\过硫酸钾\沉淀吗? 为人民服务!!![em04] [em01] [em09]

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  • 总氮测定

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    海水中总磷总氮在我知道的都是分开测定的,这段时间要做几个海水样品,拿到了一个海水中总磷总氮的同时测定的文章,虽然写的不是很明白,不过自己琢磨琢磨居然也能运作起来,大概是这样的:1、配制氧化剂:将5g过硫酸钾和3g硼酸溶于35ml1mol/L的氢氧化钠溶液中,定容至100ml,贮于棕色瓶比光保存。2.消解:取10ml待测样品于25ml巨塞比色管中,加入1.5ml氧化剂,旋紧杯盖,于120℃下在高压蒸汽灭菌锅中消解60min,冷却至室温后定容至25ml。3、按总但和总磷的方法(消解除外)接着进行分光光度测定。4、校准曲线:用乙二胺四乙酸二钠盐和磷酸二氢钾作为总氮和总磷标液的基准物质,分别配制浓度为100mg/L(以N计)的总氮标液和50ug/ml的总磷标液,分别依据水质总氮总磷国标测定方法稀释配成标准系列,按样品测定步骤进行测定。

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    有哪些公司生产的总氮快速测定仪器比较好用,进口的,国产的都帮忙推荐推荐,谢谢!

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    各位版友 有两个问题 因为首次做水质常规,需要大家帮忙解答1、现有的环境监测法规,GB/T 11893-1989测定总磷,HJ 636-2012测定总氮时,是否可以使用民用高压锅?是否一定需要可控温可定时的高温蒸汽灭菌锅?如果使用民用高压锅(通常1.7MPa-1.9MPa),那么如何实现法规中的120摄氏度30分钟?我们是需要申请CMA和CNAS资质的,所以需要有对应的法规,并且要做方法验证报告。2、我们使用密闭消解法做COD,这种消解仪和消解管也可以用来做总氮、总磷,那么想问如果用比色管法做总氮、总磷是否符合GB/T 11893-1989测定总磷,HJ 636-2012测定总氮的要求?或者有其他对应的法规?理论上如果自己做研究技术都是做的通的,问题是我们要做资质申请,想了解和法规的符合情况,如果不符则需要进行方法比对和验证。

  • 总氮测定问题

    总氮测定过程中,做标准曲线应用纯水调零,可纯水的吸光度很高1.4左右,高于配置的标准试剂,标准试剂的零浓度吸光度0,24,也没有低于0.03,请问什么原因啊

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    以前没做过水质总氮 碱性过硫酸钾紫外分光光度法,只是听过别人做过,现在需要自己测定,除了需要注意过硫酸钾的纯度不够会导致吸光度过高,还有那些需要注意的地方?

  • 【求助】水中总氮的测定方法

    国标中水质总氮的测定是用过硫酸钾氧化,紫外分光光度法,可是实验室中没有压力锅,想知道还有什么方法可以测水中的总氮,谢谢!

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    请问:废水总氮测定时,标准系列线性不好是什么问题,高压蒸汽消解应注意什吗问题?

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