乳糖液相检测

高效液相色谱使用钙型离子交换柱测低聚半乳糖，流动相是超纯水，柱温80℃，流速0.4ml/min。峰分不开怎么办？[img=,690,516]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712131552_01_3330811_3.png[/img]

乳糖检测，一直是一个令人非常头痛的检测项目。为此，月旭推出了专门用于乳糖检测的色谱柱 XtimateLactose NH2。此次新出台的“乳糖意见征求稿”中，对乳糖检测的标准也有所调整。今天，让我们看看月旭科技的XtimateLactose NH2和另一款色谱柱Ultimate HILIC Amide的测试效果。[align=center][b]XtimateLactose NH2[/b][/align][align=center][b]色谱条件[/b][/align]色谱柱：月旭XtimateLactose NH2（4.6×300mm，5μm）。流动相：乙腈/水=70/30；检测器：示差检测器30℃；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；进样量：10μL。[align=center][b]谱图和数据[/b][/align]1、系统适用性溶液图：[align=center][img=,600,322]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091127022501_3119_932_3.jpg!w690x371.jpg[/img][img=,600,97]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091127122603_5992_932_3.png!w690x112.jpg[/img][/align]2、连续6针测定结果：[align=center][img=,600,192]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091134250946_9404_932_3.png!w690x221.jpg[/img][/align][align=center][img=,600,80]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091127230561_8067_932_3.png!w690x93.jpg[/img][/align]3、有关物质溶液满量程图：[align=center][img=,600,313]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091127277921_8570_932_3.jpg!w690x360.jpg[/img][/align][align=center][color=#333333][img=,600,100]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091127345756_8062_932_3.png!w690x115.jpg[/img][/color][/align][color=#333333][/color][color=#333333]4、有关物质溶液放大图：[/color][align=center][img=,600,313]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091127366321_9765_932_3.jpg!w690x360.jpg[/img][/align][color=#333333][/color][color=#333333][color=#333333][color=#333333][b]结论[/b]月旭科技两量款色谱柱XtimateLactose-NH2和Ultimate HILIC Amide，在“乳糖意见征求稿”的新要求下，做的乳糖检测效果十分出色。柱效能达到“乳糖意见征求稿”中要求的2000以上；在连续进样6针时，RSD仍不超过2%。月旭色谱柱的出色性能，完全能够适应“乳糖意见征求稿”的新要求，解决乳糖检测的疑难杂症。如果您在乳糖检测的过程中遇到类似问题，可以尝试月旭科技的以上两款柱子。[/color][/color][/color]

乳糖作为片剂常用辅料，其HPLC检测效果一直不尽如人意。[color=#000000][b][color=#000000]峰面积RSD5000[/color][/b][/color][b][color=#000000]分离度1.5[/color][/b]这3项《2015版中国药典》要求，每一条都如此难以实现。[b]月旭研发部敏锐的嗅觉和勇于挑战的钻研精神，从未错过每一个困扰色谱分析者的难题。[/b]历时一年，经过二十余次填料键合持续优化，月旭的研发工程师们终于研制出[color=#000000]新型氨基填料[/color]，可以轻松达到乳糖检测的各项指标：[align=center][color=#ff4c00][b]RSD 6000 ！[/b][/align][align=center][b]分离度2.5 ！[/b][/align][align=center][b]远远超过药典标准！[/b][/align][color=#333333]同时，新型氨基柱具有更高的[/color][color=#ff4c00][b]稳定性[/b][/color][color=#333333]和[/color][color=#ff4c00][b]耐受性[/b][/color][color=#333333]，可以明显的抵御人员操作差异、仪器和试剂等变化因素的影响，而丝毫不会影响以上药典指标的实现！[/color][color=#333333][/color][align=center][b][/b][/align][align=center][b]样品名称：乳糖[/b][/align][align=center][/align]色谱条件色谱柱：月旭 Xtimate[sup][/sup]Lactose-NH[sub]2 [/sub][sup][/sup] 5μm，4.6×300mm流动相：乙腈-水（70：30）检测波长：示差检测器柱温：柱温 45℃，检测池 40℃流速：1.0ml/min进样量：10μl[align=center][color=#333333][img=,600,413]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910151128008677_8106_932_3.jpg!w647x446.jpg[/img][img=,600,261]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910151128049442_4660_932_3.jpg!w690x301.jpg[/img][/color][/align][b]结论[/b][color=#333333]蔗糖与乳糖分离度 R为2.80大于1.50，乳糖理论塔板数为6724大于5000，[/color]均满足药典要求，并且连续6针进样峰面积RSD为1.14%小于2.0%。

[align=center][b][font=宋体]分离柱与淋洗液流速对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]检测乳糖时的影响[/font][/b][/align][b]前言[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url][font=&]-[/font][font=宋体]脉冲安培法是近年发展起来的一种糖类物质分析方法，糖类经高效阴离子交换色谱柱分离后在安培检测器的金电极表面发生氧化反应，引起电流变化而被检测，避免了衍生过程。该方法具有选择性好、灵敏度和准确度高的优势，可以用于半乳糖、葡萄糖、甘露糖等单糖及乳糖、麦芽糖等多糖的测定。[/font]影响[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析准确性的因素很多，色谱条件的变化、检测器的性能、样品前处理过程等。色谱条件中包括淋洗液的组成、浓度及[font=&]PH[/font][font=宋体]值，淋洗液的流速；色谱分离柱的影响；检测器的影响等。使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]—脉冲安培检测器检测乳糖时发现，更换不同色谱柱时，相同浓度的乳糖标样的峰高及峰面积差别很明显。推测标样的响应值是否与出峰时间相关，随后使用相同的色谱柱，采用相同的流动相比例，只改变其流动相的流速，发现不同流速下相同的乳糖标样的响应值也有很大差别。说明除了色谱柱的影响之外，流动相的流速也对样品的响应值有所影响。[/font][b]1 实验部分[font=&]1.1 [/font]仪器与试剂[/b]Thermo ICS5000+ 型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]，包括单元四元梯度泵，AS-AP[font=宋体]自动进样器，[/font]DC[font=宋体]模块含安培检测器，[/font][font=&]Chromeleon 6.80[/font][font=宋体]色谱工作站；色谱柱为[/font][font=&]HAMILTN RCX-30[/font]（4.6×250mm） 和Dionex CarboPac PA10 （4×250 mm）；Mettler Toledo AL204型电子分析天平；Millipore-Q Advantage A10[font=宋体]型超纯水机。[/font]乳糖，阿拉丁试剂有限公司；[font=&]50% NaOH[/font][font=宋体]（[/font]w/w[font=宋体]），分析纯，德国[/font][font=&]Merck[/font][font=宋体]公司。[/font][b]1.2 溶液的配制[/b]1.2.1 乳糖标准溶液的配制精确称取[font=&]10.0 mg[/font][font=宋体]三乙胺标准品于[/font]50 mL[font=宋体]容量瓶中，用超纯水溶解定容，配制得到[/font][font=&]200 [/font][font=&]mg/L[/font]标准储备液，稀释得到10 [font=&]mg/L[/font]的乳糖标准溶液。1.2.2 NaOH溶液的配制称取[font=&]81.09 g 50%NaOH[/font][font=宋体]（[/font]w/w[font=宋体]）于[/font]2.0 L PP[font=宋体]淋洗液瓶中，加超纯水到[/font][font=&]2000 mL[/font][font=宋体]，摇匀，所得溶液的浓度约为[/font][font=&]500 mmol/L[/font][font=宋体]。[/font][b]1.3 色谱条件[/b]淋洗液：A 超纯水（50%），[font=&]B 500 mmol/LNaOH[/font]溶液[font=宋体]（[/font]50%[font=宋体]），流速为[/font][font=&]1.0 mL/min[/font][font=宋体]；[/font]0.8 mL/min[font=宋体]；[/font]0.5 mL/min[font=宋体]等度淋洗；波形：糖电位；进样量：[/font][font=&]25 [/font][font=&]μ[/font][font=&]L[/font]。[b]2 结果与讨论2.1 色谱分离柱的影响[/b][align=left]实验选取HAMILTN RCX-30（4.6×250mm） 和Dionex CarboPac PA10 （4×250 mm）色谱分析柱作为分离柱分别测定[font=&]10 [/font][font=&]mg/L[/font]的乳糖标准溶液，检测结果如表1所示。二者RSD的差异过大，尤其是RCX-30的RSD高达3.18%，分析其原因可能是因为使用该色谱柱检测时仪器还未平衡，基线波动还较大，导致检测结果不稳定。该问题在往后实验中需要注意。[/align][align=center]表1 不同色谱柱测定10 ppm乳糖的检测结果[/align][align=center] [table][tr][td=1,1,111][align=center][font=宋体]色谱柱[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]保留时间[/font][font=&]/min[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]峰面积[/font][font=&]/nC*min[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]峰高[/font][font=&]/nC[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center]RSD/%[font=宋体]（[/font][font=&]n=5[/font][font=宋体]）[/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,111][align=center]RCX-30[/align][/td][td=1,1,111][align=center]11.80[/align][/td][td=1,1,111][align=center]11.14[/align][/td][td=1,1,111][align=center]21.42[/align][/td][td=1,1,111][align=center]3.18[/align][/td][/tr][tr][td=1,1,111][align=center]PA 10[/align][/td][td=1,1,111][align=center]4.14[/align][/td][td=1,1,111][align=center]35.11[/align][/td][td=1,1,111][align=center]152.60[/align][/td][td=1,1,111][align=center]0.54[/align][/td][/tr][/table][/align][align=center][img=,388,254]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311504520346_4853_3426139_3.png!w388x254.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体]图[/font]1 [font=宋体]不同色谱柱检测[/font][font=&]10 ppm[/font][font=宋体]乳糖的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]图[/font][/align][align=left]保留时间的差异可能源于色谱柱RCX-30的内径要小于PA 10色谱柱，且二者填料的保留性不同。根据峰面积和峰高的差异表明[font=&]PA 10[/font][font=宋体]色谱分离柱灵敏度高于[/font][font=&]RCX-30 [/font][font=宋体]色谱分离柱。[/font][/align][b]2.2 淋洗液流速的影响[/b][align=left]实验采用PA 10色谱分离柱，且淋洗液浓度及比例不变的情况下，使用[font=&]1.0 [/font][font=&]mL/min[/font][font=宋体]、[/font][font=&]0.8[/font][font=&] mL/min[/font][font=宋体]、[/font]0.5 mL/min[font=宋体]流速分别测定[/font][font=&]10 [/font][font=&]mg/L[/font]的乳糖标准溶液，结果如表2。[/align][align=center]表2 不同淋洗液流速测定10 ppm乳糖的检测结果[/align][align=center] [table][tr][td=1,1,111][align=center][font=宋体]流速[/font][font=&]/[/font][font=&]mL/min[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]保留时间[/font][font=&]/min[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]峰面积[/font][font=&]/nC*min[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]峰高[/font][font=&]/nC[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center]RSD/%[font=宋体]（[/font][font=&]n=5[/font][font=宋体]）[/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,111][align=center]1.0[/align][/td][td=1,1,111][align=center]4.14[/align][/td][td=1,1,111][align=center]35.11[/align][/td][td=1,1,111][align=center]152.60[/align][/td][td=1,1,111][align=center]0.54[/align][/td][/tr][tr][td=1,1,111][align=center]0.8[/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]5.16[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]41.71[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]148.45[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center]0.55[/align][/td][/tr][tr][td=1,1,111][align=center]0.5[/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]8.24[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]57.59[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center][font=宋体]132.29[/font][/align][/td][td=1,1,111][align=center]0.57[/align][/td][/tr][/table][/align][align=center][img=,416,281]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311505067316_7897_3426139_3.png!w416x281.jpg[/img][/align][align=left]淋洗液流速的变化最直接的影响是保留时间，但对峰面积及峰高也有影响，且对峰面积的影响要大于对峰高的影响。因此若往后实验中用标准曲线法定量时，遇有淋洗液流速有变化的情况下，选择峰高定量更准确。[/align][b]3 结论[/b]采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url][font=&]-[/font][font=宋体]脉冲安培检测法检测乳糖时，影响因素很多。色谱分离柱的不同对保留时间和响应值（峰高和峰面积）的影响很大，并且淋洗液的流速不仅对保留时间有影响，对保留时间和响应值（峰高和峰面积）也会产生一定的影响。[/font]

[font='calibri'] [/font][font='calibri'][size=14px] [/size][/font][size=29px]食品添加剂异构化乳糖[/size][font='calibri'][size=29px] [/size][/font][font='calibri'][size=21px] [/size][/font][font='等线'][size=21px]董堃河[/size][/font][font='黑体'][size=14px]摘要[/size][/font][font='黑体']：[/font][font='黑体']异构化乳糖是以乳糖为原料通过异构化作用制得的一种半合成双糖，具有益生元的作[/font][font='黑体']用特点。近年来，食品工业尤其是乳制品工业中益生元的应用已经成为了趋势。异构化乳糖[/font][font='黑体']是以乳糖为原料，由乳糖的葡萄糖部分在碱性条件下异构为果糖而形成的双糖。异构化乳糖[/font][font='黑体']因其对人体的有益作用而广泛应用于医药、营养和食品工业。异构化乳糖是一种双糖益生元，[/font][font='黑体']有效增殖肠道内的双歧杆菌菌群。它在食品领域中应用时添加量比较低且容易检测；又因其[/font][font='黑体']能减少肠道运转时间和降低体内氨含量，异构化乳糖被全球用于治疗慢性便秘和肝性脑病等[/font][font='黑体']医疗行业。鉴于国外对异构化乳糖的研究与应用一直未停步并为了提高我国消费者和 研发[/font][font='黑体']人员对于异构化乳糖的认知程度，本文从异构化乳糖的[/font][font='黑体']理化性质，应用，检测，限量，标准[/font][font='黑体']出发，综述了其常见的生理功能及在食品工业中的应用现状。[/font][font='黑体'][size=16px]关键词[/size][/font][font='黑体']：异构化乳糖，理化性质，应用，检测，限量，标准[/font][font='黑体']异构化乳[/font][font='黑体']糖即[/font][font='黑体']4-O-β-吡喃半乳糖-D-果糖[/font][font='黑体']，[/font][font='黑体']也被称为乳果糖或乳酮糖，是由半乳糖和果糖经 β-(1 → 4）糖苷键连接的双糖。它不能自然产生，是使用不同的催化剂（化学试剂、酶制剂或电激活）由乳糖发生异构化而产生的[/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']研究表明，异构化乳糖具有促进双歧杆菌增殖[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']1]，改善肠道菌群，防止便秘，增强机体免疫，促进人体对钙、镁的吸收等作用[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']2]，因此异构化乳糖可广泛用于保健食品中，可添加到乳饮料、碳酸饮料、果汁饮料、糖果、乳粉等食 品中作膳食疗效食品，也可单独作医疗用品[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']3][/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']我国GB 2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中规定异构化乳糖液可应用于乳粉（包括加糖乳粉）和奶油[/font][font='黑体']粉及其[/font][font='黑体']调制产品、饼干、婴幼儿配方食品和饮料（包装饮用水除外）。[/font][font='黑体']目前[/font][font='黑体']，异构化乳糖在中老年奶粉中已经有所应用，但是在其他食品行业中的开发应用还很少。[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']4]本文着重介绍异构化乳糖的生理功能及[/font][font='黑体']应用、检测及限量标准，[/font][font='黑体']以期为科研工作者开发异构化乳糖产品提供参考[/font][font='黑体']。[/font][font='等线'][size=13px]1. [/size][/font][font='等线'][size=13px]异构化乳糖液的理化性质[/size][/font][font='等线'][size=13px]异构化乳糖是乳糖的异构化产物，因此它们具有相同的分子式[/size][/font][font='等线'][size=13px]C[/size][/font][font='等线'][size=13px]12[/size][/font][font='等线'][size=13px]H[/size][/font][font='等线'][size=13px]22[/size][/font][font='等线'][size=13px]O[/size][/font][font='等线'][size=13px]11[/size][/font][font='等线'][size=13px]和分子量[/size][/font][font='黑体']（Mr=342.3）。碱金属类氢氧化物和硼酸通常用来催化该异构化反应。异构化乳糖是由乳糖[/font][font='黑体']的葡萄糖部分异构为果糖而形成的双糖，且半乳糖和果糖以β-（1 → 4[/font][font='黑体']）[/font][font='黑体']糖苷键连接。商[/font][font='黑体']业生产异构化乳糖一般以氢氧化钠为催化剂，在一定条件下使乳糖的末端葡萄糖发生异构化[/font][font='黑体']反应转化成果糖而[/font][font='黑体']得（见图1）。[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012362007_2338_1608728_3.jpeg[/img][font='黑体']图1[/font][font='黑体'] [/font][font='黑体'] 异构化乳糖 , 通常是淡黄色的透明的糖酱状糖液,有令人舒适的甜味[/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']异构化乳糖的[/font][font='黑体']实测值是砂糖的60[/font][font='黑体']~[/font][font='黑体']70[/font][font='黑体']%。[/font][font='黑体']异构化乳糖的颜色是透明的淡黄色[/font][font='黑体']，[/font][font='黑体']长期保存或在高温下连续加[/font][font='黑体']热[/font][font='黑体']，[/font][font='黑体']异构化乳糖和果糖的着色程度相仿[/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']因此在气温高的季节[/font][font='黑体']，[/font][font='黑体']最好储放在冷暗的地方[/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']添[/font][font='黑体']加山梨醇等糖醇[/font][font='黑体']，[/font][font='黑体']可防止异构化乳糖色泽的加深[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']5][/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']异构化乳糖粉末是白色到近白色无味结晶粉末（相对甜度0.6～0.8）[/font][font='黑体']，[/font][font='黑体']可溶于水，微[/font][font='黑体']溶于甲醇，不溶于乙醚，熔点介于168.5 和170 ℃。在30 ℃时它在水中的溶解度为76.4%[/font][font='黑体']（w/w），在90[/font][font='黑体']℃[/font][font='黑体']增加到86%。它的甜度为蔗糖的 0.48～0.62，比乳糖的甜度高1.5 倍。异[/font][font='黑体']构化乳糖经酸水解得到半乳糖和果糖。在低pH值条件下加热到 130 ℃10 min，异构化乳糖[/font][font='黑体']能保持稳定，很少被降解。这种相对较高的稳定性使得其能够满足正常食品加工的需要[6][/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']具体理化性质见图2。[/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012366088_2515_1608728_3.jpeg[/img][/align][align=center][font='黑体']表1[/font][font='黑体'] 异构化乳糖液和粉末的主要成分[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']4][/font][/align][font='黑体'] [/font][font='黑体'] 以上是药典上的要求；异构化乳糖之外的其它糖的浓度通常低的多。成分上的差异在药学上 和药理学上不重要；在非常低的残糖浓度和/或高异构化乳糖浓度下，糖浆微生物会变得不稳定。[/font][font='黑体'] [/font][font='黑体'] 市场上的异构化乳糖有两种类型：异构化乳糖液和异构化乳糖结晶粉。异构化乳糖液[/font][font='黑体']是无色 或微黄色、无味和微甜的糖浆。其微黄和微甜可 能是由于糖浆中含半乳糖、乳糖、[/font][font='黑体']依匹乳糖、塔格糖和果糖引起的。异构化乳糖糖浆应储存在室温下。颜色改变或不透明可[/font][font='黑体']能是受热或见光引起的，但并不影响异构化乳糖的活性。粉状的异构化乳糖是白色、无味[/font][font='黑体']的结晶粉。异构化乳糖的理化性质见[/font][font='黑体']图2[/font][font='黑体']。[/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012367283_5497_1608728_3.jpeg[/img][/align][align=center][font='黑体']图2[/font][/align][font='黑体']与其底物乳糖相比，异构化乳糖中的 β-1，4糖苷键不能被人肠道消化酶所分解。虽[/font][font='黑体']然绝大多数白种人可以消化吸收乳糖，但不能吸收异构化乳糖，主要因为其是通过可分解糖[/font][font='黑体']的结肠细菌所代谢。异构化乳糖有益于乳酸菌的生长和代谢，而不利于许多水解蛋白的致病[/font][font='黑体']菌的生长，这种特征受生物、医学等多方面作用，表现出与其它益生元接近的效果。例如，[/font][font='黑体']乳糖醇同异构化乳糖具有相同的分子式和分子量，都不在小肠中分解，但二者对细菌代谢、[/font][font='黑体']粪便pH值和转运时间等参数的影响差异显著。已有研究表明乳糖醇在相同剂量下效果明显[/font][font='黑体']较差，且只有其环状部分才起到益生元作用，而醇基被认为是通过渗透方式发挥作用。[/font][font='黑体'] [/font][font='等线'][size=13px]2. [/size][/font][font='等线'][size=13px]异构化乳糖的应用[/size][/font][font='等线'][size=13px]异构化乳糖应用于食品行业已经50多年。 1991年日本政府为特殊保健用食品（FOSHU）[/size][/font][font='黑体']立法，异构化乳糖作为功能性配料允许添加到保健食品中。2010年，欧盟食品安全局 [/font][font='黑体']（EFSA）对异构化乳糖得出的结论是：在单份食物消耗下[/font][font='黑体']，[/font][font='黑体']消耗至少10g的异构化乳糖，能够建立“消耗异构化乳糖”和“减少肠道转运时间” 的因果关系[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']7]。异构化乳糖液是双歧杆菌的增殖因子，具有帮助消化吸收蛋白质、乳糖和产生维生素 B 组等功能；在我国批准使用并可以添加到乳粉、婴儿配方粉、饼干和饮料中等[/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']异构化乳糖作为食品原料具有稳定性高，耐高温，耐酸，添加量低，良好的水溶性，较[/font][font='黑体']低的热量值，增强风味、不引起龋齿以及加工性能好［11］。 异构化乳糖是乳糖的差向异构[/font][font='黑体']体，甜度比乳糖高且溶解性好，可以用于甜味剂和矫味剂［[/font][font='黑体']1[/font][font='黑体']2］。1960年日本森永乳业在全[/font][font='黑体']球率先开发出添加异构化乳糖的婴幼儿配方奶粉。1995 年，R. Nagendra［13］等研究了含[/font][font='黑体']异构化乳糖的婴儿配方奶的稳定性。测试温度是 5℃，27℃和 38℃ ；测试时间 20w[/font][font='黑体']；[/font][font='黑体']产[/font][font='黑体']品马口铁罐包装和氮气密封。结果表明在任何温度下含异构化乳糖的奶粉和无异构化乳糖的[/font][font='黑体']奶粉在湿度和溶解度上没有变化。添加异构化乳糖并没有影响产品的可接受度而且在 38℃[/font][font='黑体']下能达到 16w 的保质期。[/font][font='黑体']临床上，异构化乳糖适用于10[/font][font='黑体']~[/font][font='黑体']30g 剂量的便秘的对症治疗和60[/font][font='黑体']~[/font][font='黑体']100g 剂量的门静脉系统脑病的治疗[/font][font='黑体']，[/font][font='黑体']但是当其作为一种功能性食品的成分时，使用的剂量往往低于10g［8］[/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']Melanie 等［8］采用了2[/font][font='黑体']~[/font][font='黑体']5g /d并持续5d的剂量的异构化乳糖[/font][font='黑体']，[/font][font='黑体']作用于TIM-2 系统，这[/font][font='黑体']是一种近端大肠的计算机控制模型，代表人来源的复杂、高密度、代谢活跃的 厌氧微生物[/font][font='黑体']群，结果发现，虽然 2g 的异构化乳糖已经增加了肠内容物的短链脂肪酸水平，但仍需要 [/font][font='黑体']5g 的异构化乳糖，来充分发挥出其益生元效应，即双歧杆菌、乳酸杆菌和厌氧菌的较高细[/font][font='黑体']菌计数，乙酸盐、丁酸盐和乳酸盐的增加，以及支链脂肪酸的减少、pH 值的下降和氨气的[/font][font='黑体']减少。另一方面，Tsunesuke T 等［9］研究发现，每天摄入 0. 65g 的异构化乳糖，能够[/font][font='黑体']起到促进成年人肠道内双歧杆菌的增殖、软化大便和改善肠道菌群的作用。Mizota 等［10］[/font][font='黑体']通过临床试验研究了低剂量的异构化乳糖对成人肠道功能的影响，发现正常成人摄入异构化[/font][font='黑体']乳糖( 3g /d 和 5g /d) 后排便次数和粪便软化程度增加 还发现服用期 间粪便中双歧菌[/font][font='黑体']的比率由之前的 22. 4% 增加至 50. 5%，且粪便中腐败物的含量显著减少。[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012368236_4210_1608728_3.jpeg[/img][font='黑体'] [/font][font='黑体']表2[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012371212_9056_1608728_3.jpeg[/img][font='黑体']表3[/font][font='等线'][size=13px]3. [/size][/font][font='等线'][size=13px]异构化乳糖的检测[/size][/font][font='黑体'] [/font][font='黑体'] 目前，测定异构化乳糖的方法包括分光光度法[3]、液相-质谱法[14]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法[15]、[/font][font='黑体']薄层色谱法[16]、液相色谱法[17]等。分光光度法前处理复杂结果易受干扰，检测需要多种[/font][font='黑体']酶试剂费用高，对人员要求较高；液相-质 谱法和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法定量准确，但是仪器价格昂贵[/font][font='黑体']或普及 率低，不便于日常监测；薄层色谱法灵敏度低，只能作半定量分析，不能准确定量[/font][font='黑体']；以上方法均不便在实际检测中应用。液相色谱检测异构化乳糖的方法具有准确、快速、成[/font][font='黑体']本低等特点，是目前检测异构化乳糖的理想的方法。[/font][font='黑体']同时[/font][font='黑体']酶法以其仪器成本低、操作简单，检测结果准确、稳定等优点，成为目前较为成熟且应用广泛的一种方法[3][/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']对于液相色谱检测的色谱条件选择[[/font][font='黑体']17][/font][font='黑体']：[/font][font='黑体']选择粒径5 μm的氨基柱，调节流动相乙腈和水的比例，但出峰时间早，异构化乳糖[/font][font='黑体']和乳糖分不开，出峰时间晚可以分开但是峰型展宽，灵敏度降低，为了保证灵敏度和较短检[/font][font='黑体']测时间选择柱效高的3 μm粒径的氨基柱，在短时间内可以实现分离，检出限也达到要求。[/font][font='黑体']选择70%乙腈溶液作为流动相，样品中异构化乳糖和乳糖的分离度不好，无法检测；调整[/font][font='黑体']为乙腈为90% 时，异构化乳糖和乳糖可以分离，但出峰时间拖后至 30 min以后，峰型展[/font][font='黑体']宽，也不利于准确定量；选择80%乙腈可使样品中异构化乳糖和乳糖分离度达到要求，而且[/font][font='黑体']在20 min内出峰，峰型较好，可准确定量检测[/font][font='黑体']。[/font][font='黑体'] [/font][font='黑体'] [/font][font='黑体']酶法测定乳饮料中异构化乳糖的含量即[/font][font='黑体']乳饮料样品经过亚铁氰化钾和硫酸锌沉淀蛋白 质、β-D-半乳糖苷酶水解乳糖和异构化乳糖、葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖等处理过程，用紫外分光光度计检测乳饮料中异构化乳糖的含量。该方法具有良好的回收率，为83.5%～92.7%，以及良好的重复性，相对标准偏差（RSD）为 4.04%～6.05%（n=6）。该方法检测结果准确且稳定性好，适用于乳饮料中异构化乳糖的检测[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']18]。[/font][font='黑体']在酶法中，酶的种类及沉淀剂的种类都会对异构化乳糖回收率造成影响。[/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012374933_8502_1608728_3.jpeg[/img][/align][align=center][font='黑体']表4[/font][font='黑体']不同沉淀剂对异构化乳糖回收率的影响[/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012375761_4184_1608728_3.jpeg[/img][/align][align=center][font='黑体']表5[/font][font='黑体']不同酶的种类对异构化乳糖回收率的影[/font][font='黑体']响[/font][/align][font='等线'][size=13px]4. [/size][/font][font='等线'][size=13px]异构化乳糖的限量[/size][/font][font='等线'][size=13px][color=#333333]常见【异构化乳糖液】限量信息如下表6所示：[/color][/size][/font][table][tr][td][align=left][font='黑体'][color=#333333]类号[/color][/font][/align][/td][td][font='黑体'][color=#333333]食品名称[/color][/font][/td][td][font='黑体'][color=#333333]最大使用量[/color][/font][/td][td][font='黑体'][color=#333333]备注[/color][/font][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]01.03[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail9.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]乳粉（包括加糖乳粉）和奶油粉及其调制产品[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]15.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]01.03.02[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail11.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]调制乳粉和调制奶油粉[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]15.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]07.03[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail181.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]饼干[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]2.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]07.03.01[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail182.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]夹心及装饰类饼干[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]2.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]07.03.02[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail183.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]威化饼干[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]2.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]07.03.03[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail184.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]蛋卷[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]2.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]07.03.04[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail185.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]其他饼干[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]2.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]13.01[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail296.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]婴幼儿配方食品[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]15.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]13.01.01[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail297.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]婴儿配方食品[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]15.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]13.01.02[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail298.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]较大婴儿和幼儿配方食品[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]15.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]13.01.03[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail299.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]特殊医学用途婴儿配方食品[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]15.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]14[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail306.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]饮料类[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]1.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]固体饮料按稀释倍数增加使用量(14.01包装饮用水除外)[/color][/size][/font][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]14.02[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail311.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]果蔬汁类及其饮料[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]1.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]固体饮料按稀释倍数增加使用量(14.01包装饮用水除外)[/color][/size][/font][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]14.02.03[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail314.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]果蔬汁（浆）类饮料[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]1.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]固体饮料按稀释倍数增加使用量(14.01包装饮用水除外)[/color][/size][/font][/td][/tr][tr][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]14.03[/color][/size][/font][/td][td][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail315.html][font='黑体'][size=13px][color=#2d96cf]蛋白饮料[/color][/size][/font][/url][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]1.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/td][td][font='黑体'][size=13px][color=#333333]固体饮料按稀释倍数增加使用量(14.01包装饮用水除外)[/color][/size][/font][/td][/tr][/table][font='黑体'][size=16px] [/size][/font][font='黑体'][size=16px] [/size][/font][font='黑体'][size=16px]表6[/size][/font][font='黑体'][size=16px]5[/size][/font][font='黑体'][size=16px].[/size][/font][font='黑体'][size=16px]异构化乳糖液的国家标准[/size][/font][font='黑体']食品安全国家标准[/font][font='黑体']GB1886.176—2016[/font][font='黑体']异构化乳糖液在2[/font][font='黑体']016[/font][font='黑体']年8月3[/font][font='黑体']1[/font][font='黑体']号发布，2[/font][font='黑体']017[/font][font='黑体']年1月1号实施。[/font][font='黑体']本标准代替GB8816—1988《食品添加剂 异构化乳糖液》。本标准与[/font][font='黑体'] GB8816—1988相比,主要变化如下:修改了感官要求 修改了异构化乳糖含量、果糖含量、[/font][font='黑体']半乳糖含量、乳糖含量、砷(As)的指标要求 删除了比重、折光率、大肠菌群的指标要求 增[/font][font='黑体']加了依匹乳糖含量、pH、灼烧残渣、大肠埃希氏菌的指标要求和检验方法 增加了鉴别试验[/font][font='黑体']方法 修改了异构化乳糖含量、果糖含量、半乳糖含量、乳糖含量的检验方法 部分检验方法[/font][font='黑体']的引用标准调整为最新发布的版本[/font][font='黑体']。[/font][font='黑体']该[/font][font='黑体']标准适用于以乳糖为原料,在加热条件下经碱或不经碱异构化制得的食品添加剂异构[/font][font='黑体']化乳糖液, 或再经干燥制成的固体产品。[/font][font='黑体'] [/font][font='黑体'] 感官要求应符合表7的规定。[/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012377853_3322_1608728_3.png[/img][/align][align=center][font='黑体']表7[/font][/align][font='黑体']理化指标应符合表8的规定。[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012378664_191_1608728_3.png[/img][align=center][font='黑体']表8[/font][/align][font='黑体']微生物指标应符合表9的规定。[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262012379738_1039_1608728_3.png[/img][align=center][font='黑体']表9[/font][/align][font='黑体']附录：[/font][font='黑体']A.3 异构化乳糖、果糖、半乳糖、依匹乳糖、乳糖含量的测定 [/font][font='黑体']A.3.1 试剂和材料 [/font][font='黑体']A.3.1.1 水:符合 GB/T6682规定的一级水。 [/font][font='黑体']A.3.1.2 乙腈:色谱纯。[/font][font='黑体']A.3.1.3 异构化乳糖标准品、果糖标准品、半乳糖标准品、依匹乳糖标准品、乳糖标准品:纯度≥99.0%。[/font][font='黑体']A.3.1.4 磷酸缓冲液:称取无水磷酸二氢钠1.15g,用水溶解后定容至1000mL。[/font][font='黑体']A.3.2 仪器和设备 [/font][font='黑体']A.3.2.1 高效液相色谱仪,配备示差折光检测器、恒柱温及真空脱气系统。 [/font][font='黑体']A.3.2.2 色谱柱:以全多孔硅胶为填充剂的氨基柱(Φ4.6mm×15cm,填料粒径3μm)或其他等效的色谱柱。 [/font][font='黑体']A.3.3 参考色谱条件 A.3.3.1 流动相:乙腈∶磷酸缓冲液=82∶18。 [/font][font='黑体']A.3.3.2 流速:1.3mL/min。 A.3.3.3 柱温:40 ℃±1 ℃。 [/font][font='黑体']A.3.3.4 进样量:20μL。[/font][font='等线'][size=13px]5. [/size][/font][font='等线'][size=13px]总结[/size][/font][font='等线'][size=13px]综上所述，[/size][/font][font='等线'][size=13px]异构化乳糖是功能性低聚糖中少的双糖。其显著的益生特性和多样的生理功[/size][/font][font='黑体']能使异构化乳糖广泛应用于食品领域和医药领域[/font][font='黑体']。目前[/font][font='黑体']我国异构化乳糖的生产面临的问题是[/font][font='黑体']国内工业生产的异构化乳糖糖浆和晶体的纯度不高，生产成本较高等。它们极大地影响了异[/font][font='黑体']构化乳糖的广泛应用；再者我国将异构化乳糖应用于食品行业和饲料行业还处于起步阶段，[/font][font='黑体']异构化乳糖的使用还仅限于一些特殊产品中（如药品）。相信随着科学的进步发展，功能[/font][font='黑体']性[/font][font='黑体']异构化乳糖的生产技术会大幅提高且其[/font][font='黑体']在食品医疗等方面的[/font][font='黑体']应用也会受到我国研究者的广泛关注。[/font][font='黑体'][size=18px]参考文献：[/size][/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']1] 许本发. 异构化乳糖促进肠道中双歧杆菌增值作用的观察[J]. 中国乳品工业, 1986, 4(14): 104-108.[/font][font='黑体'][2] 王凤仙, 刘博亚. 异构化乳糖的生理功能及在食品工业中的应用[J]. 中国食品添加剂, 2015(5): 179-182. DOI:10.3969/ j.issn.1006-2513.2015.05.022.[/font][font='黑体'][3] 黄萌萌, 王加启, 卜登攀. 牛奶乳果糖的研究进展[J]. 中国乳品工业, 2007, 35(6): 54-57. DOI:10.3969/j.issn.1001-2230.2007.06.014.[/font][font='黑体'][4] 杨 凯,薛江超,张天博,贾云虹,宋晓青[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']李朝旭[/font][font='黑体'].[/font][font='黑体']异构化乳糖在婴幼儿配方奶粉中的应用[J]. DOI:10.16172/j.cnki.114768.2017.10.021.[/font][font='黑体'][5][/font][font='黑体']王建中.异构化乳糖的性质及利用[/font][font='黑体']—[/font][font='黑体']双裂乳酸杆菌因子.[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']6]McSweeney P L H，Fox P F. Advanced dairy chemistry volume 3：lactose，water，salts and minor constituents[M]. New York：Springer Science+Business Media，LLC，2009.[/font][font='黑体'][7] Scientific Opinion on the substantiation of health claims related to lactulose and decreasing potentially pathogenic gastro intestinal microorganisms （ID 806）and reduction in intestinal transit time （ID 807）pursuant to Article 13（1）of Regulation （EC）No 1924/2006；EFSA Journal 2010；8（10）:1806[/font][font='黑体'][8] othe M K，Maathuis A，Bellmann S，et al. Dose-dependent prebiotic effect of lactulose in a computer-controlled in vitro model of the human large intestine ［J］． Nutrients， 2017，9( 7) : 767.[/font][font='黑体'][9] Tomoda T，Nakano Y，Kageyama T. Effect of yogurt and yogurt supplemented with Bifidobacterium and / or lactulose in healthy persons: a comparative study ［J］．Bifidobacteria and Microflora，1991，10( 2) : 123-130[/font][font='黑体'][10] Mizota T，Mori T，Yaeshima T，et al. Effects of low dosages of lactulose on the intestinal function of healthy adults ［J］．Milchwissenschaft，2002，57( 6) : 312-315.[/font][font='黑体'][11] Schumann，Christian. Medical，nutritional and technological properties of lactulose. An update[J]. European Journal of Nutrition，2002，41（1）：17-25.[/font][font='黑体'][12][/font][font='黑体']张[/font][font='黑体']宗岩，侯万喜.异构化乳糖 - 新型婴儿食品添加剂 [J]. 中国乳品工业，1994，22（14）:168-170.[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']13] Nagendra R，BASKARAN M V and Rao S V. Shelf life of spray dried infant formula supplemented with lactulose [J]. Journal of food processing and preservation，1995，19（4）： 303-315[/font][font='黑体'] [14] 胡强, 徐红兵, 李水军, 等. 液相色谱-串联质谱法测定尿中乳果糖、 甘露醇和乳糖含量[J]. 中国现代医学杂志, 2008, 18(13): 1810-1813[/font][font='黑体'][15] 曾文芳, 时巧翠, 陈永欣, 等. [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]电化学测定牛奶中的乳糖和乳果糖[J]. 食品科学, 2006, 27(5): 205-207. DOI:10.3321/ j.issn:1002-6630.2006.05.043[/font][font='黑体'][16] 刘芳, 杨瑞金, 张文斌, 等. 薄层色谱法快速分析乳果糖[J]. 食品 与发酵工业, 2008, 34(1): 119-123. DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ ts.2008.01.029.[/font][font='黑体'][17] 任一平, 陈青俊, 黄百芬. 高效液相色谱示差折光法测定食品中的乳果糖[J]. 中国乳品工业, 1997, 25(4): 35-37[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']18] 刘丽君[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']李素琴[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']赵贞[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']岳虹[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']李翠枝[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']邵建波[/font][font='黑体'].[/font][font='黑体']高效液相色谱法测定乳粉中异构化乳糖的含量[/font][font='黑体'].[/font][font='黑体'] 1671-5187（2016）01-0011-03 DOI:10.15922/j.cnki.jdst. 2016.01.004.[/font][font='黑体'][[/font][font='黑体']19] 付云双[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']赵 贞[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']万 鹏*[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']温国艳[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']黄文强[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']徐 红[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']李翠枝[/font][font='黑体'],[/font][font='黑体']吕志[/font][font='黑体'].[/font][font='黑体'] 酶法测定乳饮料中异构化乳糖的含量. 1007-7871（2020）04-0035-04.[/font]

求各位大虾们支支招，菇凉我最近在做乳糖的液相时遇到各种问题，心力交瘁啊！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif换了四根氨基柱都出现不同问题，用第一根时，样品会在9分钟出现一个大的杂质峰，溶剂和对照均没有。刚开始怀疑是样品本身的问题，可是测试了一批合格的样品也出现同样的杂质峰；然后换了两根新柱子，杂质峰是没有了，可是样品峰拖尾严重，对称因子都达到1.4了；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501082152_531671_2977186_3.jpg换最后一根时，前面问题倒没有，可是理论塔板数不符合要求啊，才3000多点，要求规定要大于5000。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif跪求各位大虾解救！

[align=center][img=,600,315]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121529312583_1508_932_3.jpg!w640x337.jpg[/img][/align][color=#5f9cef][b][/b][/color][color=#5f9cef][b]新柱活化[/b][/color][color=#595959]（月旭NH2柱建议使用该方法，其他品牌请咨询厂家）：[/color][color=#595959]异丙醇0.2ml/min流速过夜平衡，纯乙腈1ml/min的流速3小时，流动相一个小时。（整个期间，仪器的温度按照方法设置，实验室空调正常开启）[/color]注意事项：[color=#595959]1、流动相手动混合在一个瓶子中，使用一个通道，过滤后超声脱气10分钟，尽量使用在线脱气机；[/color][color=#595959]2、温度和流动相比例的微小改变都会导致基线变差，故柱温尽量保证柱头端和柱尾端一致。建议进样前用手触摸一下柱身（小心不要烫伤），如果差异大，使用干毛巾或者脱脂棉进行色谱柱的包裹，以保证良好的柱温。色谱柱管传递过来的温度明显没有45℃的话，可以将流动相用水浴或者加热套预加热；仪器的任何部件不要被风直吹（有时人员走动都会有影响）；[/color][color=#595959]3、RID检测器的温度比柱温小5℃比较好，避免温差太大导致基线噪音增加；[/color][color=#595959]4、进样体积对柱效影响较大，严格按照药典进样10微升，如果峰面积太小，可以增加样品浓度，并且手动进样器的死体积小于自动进样器；[/color][color=#595959]5、如果噪音一直很大，建议使用流动相冲洗色谱柱30分钟后，将废液端的出口（安捷伦仪器有一个切换阀）将流出液返回到流动相瓶子中，冲洗参比池，循环12小时，整个过程仪器的设置和做样条件设置一致，实验室空调正常开启。[/color]使用完的冲洗流动相冲洗至样品完全流出，纯乙腈冲洗40分钟，保存，放置于阴凉干燥处。异常冲洗色谱柱出现不满足要求的情况下，建议使用纯甲醇1ml/min 正向冲洗3个小时，再使用流动相平衡后检测，如果还不满足，那就需要更换色谱柱了，这是因为NH2这一类的色谱柱，检测糖，其内部环境是碱性的，会导致硅胶较快的溶解破碎，所以甲醇冲洗后还不能恢复就是硅胶破碎的可能性比较大，不建议再冲洗浪费时间，需要直接更换柱子。[color=#595959]月旭Xtimate Lactose-NH2色谱柱检测乳糖详细数据请点击：[/color][url=http://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MjM5MTEwMjIxNA==&mid=2650739973&idx=1&sn=d6fa7757f9d1a1406086cfc1e8e0ec33&chksm=beb1116c89c6987a4bc40f424daccfa76e40df1807c5fd11610acbfc5620a5d6bc50527b01b6&scene=21#wechat_redirect]新型氨基柱攻克乳糖检测[/url][align=center][img=,600,295]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121529342516_1483_932_3.jpg!w640x315.jpg[/img][/align][align=center][img=,600,116]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121529391276_3409_932_3.jpg!w640x124.jpg[/img][/align]柱温对基线影响数据：[align=center][img=,600,295]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121529420284_950_932_3.jpg!w640x315.jpg[/img][/align]

HPLC-RID法测定乳糖含量和有关物质 前言： 乳糖是我们制药领域，最常用的辅料之一，我们药用乳糖对其含量和杂质的限量有极其严格的要求。以下就是我们使用《中国药典》2015年版四部标准方法，对购入的一批药用乳糖的含量和有关物质进行分析的过程 ，与大家一起分享，希望各位老师多多指导。一、【含量测定】仪器型号电子分析天平：赛多利斯 BT125D型十万分之一电子分析天平 液相色谱仪：Agilent 1260 四元梯度液相色谱仪色谱条件：色谱柱：氨基柱（上海月旭 拓扑 250*4.6） 检测器：示差折光检测器 检测器温度:40℃ 流速:1.0ml/min 柱温： 45 ℃ 流动相: 乙腈-水（70 ：30 ） 进样量: 10μl 对照品乳糖、蔗糖对照品使用来源： 中国食品药品检定研究院 系统适用性试验： 精密称取乳糖对照品10.15mg、蔗糖对照品10.21mg，置10ml容量瓶内，用水稀释至刻度摇匀。乳糖峰与蔗糖峰的分离度应大于1.5，理论塔板数以乳糖峰计不得低于5000。对照品溶液的制备: 精密称取乳糖对照品两份分别为10.10、10.08mg置10ml容量瓶内，用水稀释至刻度摇匀，即得。供试品溶液的制备:取本品适量，精密称定，两份分别为10.05、10.03mg, 置10ml量量瓶内，用水稀释至刻度摇匀，即得。检测结果:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191701_669315_2204446_3.png 系统适应性试验: 乳糖、蔗糖分离度均大于1.5，乳糖理论塔板数大于5000http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016093023083649_01_2204446_3.png 乳糖对照品色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016093022320255_01_2204446_3.png 乳糖供试品色谱图通过外标法计算本批按无水物计算含量为98.9%，在药典规定的98.0%至102.0之间，符合标准规定。二、【有关物质】色谱条件同含量测定项下方法测定供试品溶液的配制：取本品，精密称定 1.0023g,置10ml量瓶中，用适量水使溶解，并稀释至刻度，摇匀，过滤，即得。对照品溶液的配制：精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，过滤，即得。有关物质供试品色谱图如下：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016093022502870_01_2204446_3.png通过计算个杂质峰面积之和小于对照峰面积的0.5倍，小于0.5%。 总结：HPLC-RID测定乳糖含量和有关物质，样品处理简单，要注意的是RID平衡很关键，保证检测器外部环境的稳定很受到重要。RID为通用型检测器，容易受到气体流动和温湿度的影响。另外色谱柱的选择也很重要，一般的柱子乳糖理论踏板数上5000很容易，上海月旭拓扑氨基柱优越的性能为检测节省很多宝贵的工作时间。