维生素皂化原理

[color=#000000]陈芷萱[/color]第1章 维生素[font='times new roman']E[color=#000000]的介绍[/align]维生素E为脂溶性酚类有机化合物，有较强的抗氧化作用，能清除出自由基，抵御人体过氧化产物自由基损害，保持组织完整性，提高机体免疫力、延缓衰老，另外，维生素E通过调整人体机能，对人类肿瘤细胞的生长和增殖有抑制作用[1][2][3]，所以，常用于老年营养保健食品的添加剂。保健食品中维生素E原料来源，有天然型维生素E和合成型维生素E两种，均为α生育酚苯环上酚羟基经乙酰化生成的醋酸酯，其中天然型维生素E为d-α-生育酚醋 酸酯，合成型维生素E为dl-α-生育酚醋 、酸酯，其分子式均为C31H52O3。游离的α生育酚分子式为C29H50O2，在其苯环上被取代官能团数目位置不同，又分为β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚三个同系物，其中β-生育酚、γ-生育酚分子式均为 C28H48O2，δ-生育酚结构为C27H46O2。同系物的结构虽然相似，但其所具有的生物活性并不完全相同，其中α-生育酚的生物 活性与抗氧化能力最强[4]。市场上的含维生素E保健食品种类繁多，产品标签中配方原料来源，有天然维生素E，也有合成维生素E，并且价格差距较大。为科学分析评价保健食品中的维生素E，本文研究报道GC法同时测定维生素E、α-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚含量。1.1 [color=#000000]发现过程公元1920年，美国学者伊万斯和他的同事在研究动物的营养与生殖过程中发现,酸败的猪油可引起大鼠不育,而一旦在膳食中加入莴苣或全麦、麦胚油等就能恢复其生殖能力。接着他们对麦胚油进行了仔细分析,从中提炼出一种促进生殖力的维生素,为了与其他维生素区别,便将其称作维生素E,又名生育酚。公元1938年,另-位叫做费罗尔兹的生物化学家确定了这种维生素的分子结构,不久以后人工合成的维生素E面市。前后经过大约20年时间，科学家对其生物化学性质及其生理作用有了更加广泛的了解,观察到缺乏这种维生素不仅影响到动物的生殖能力,还可诱发渗出性体质、大脑软化、肝脏坏死、贫血、心肌病变等，由此而想到人类健康可能也离不开维生素E。此后的一系列研究证实了这一猜想,维生素E摄取不足在动物身上所产生的病理变化,完全能在人身上重复,从此维生素E便走进了人类保健品的行列。1.2 含量测定[/color][/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]维生素E为脂溶性酚类有机化合物，有较强的抗氧化作用，能清除出自由基，抵御人体过氧化产物自由基损害，保持组织完整性，提高机体免疫力、延缓衰老，另外，维生素E通过调整人体机能，对人类肿瘤细胞的生长和增殖有抑制作用[1][2][3]，所以，常用于老年营养保健食品的添加剂。保健食品中维生素E原料来源，有天然型维生素E和合成型维生素E两种，均为α生育酚苯环上酚羟基经乙酰化生成的醋酸酯，其中天然型维生素E为d-α-生育酚醋 酸酯，合成型维生素E为dl-α-生育酚醋 、酸酯，其分子式均为C31H52O3。游离的α生育酚分子式为C29H50O2，在其苯环上被取代官能团数目位置不同，又分为β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚三个同系物，其中β-生育酚、γ-生育酚分子式均为 C28H48O2，δ-生育酚结构为C27H46O2。同系物的结构虽然相似，但其所具有的生物活性并不完全相同，其中α-生育酚的生物 活性与抗氧化能力最强[4]。市场上的含维生素E保健食品种类繁多，产品标签中配方原料来源，有天然维生素E，也有合成维生素E，并且价格差距较大。为科学分析评价保健食品中的维生素E，本文研究报道GC法同时测定维生素E、α-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚含量。1.1 [color=#000000]发现过程公元1920年，美国学者伊万斯和他的同事在研究动物的营养与生殖过程中发现,酸败的猪油可引起大鼠不育,而一旦在膳食中加入莴苣或全麦、麦胚油等就能恢复其生殖能力。接着他们对麦胚油进行了仔细分析,从中提炼出一种促进生殖力的维生素,为了与其他维生素区别,便将其称作维生素E,又名生育酚。公元1938年,另-位叫做费罗尔兹的生物化学家确定了这种维生素的分子结构,不久以后人工合成的维生素E面市。前后经过大约20年时间，科学家对其生物化学性质及其生理作用有了更加广泛的了解,观察到缺乏这种维生素不仅影响到动物的生殖能力,还可诱发渗出性体质、大脑软化、肝脏坏死、贫血、心肌病变等，由此而想到人类健康可能也离不开维生素E。此后的一系列研究证实了这一猜想,维生素E摄取不足在动物身上所产生的病理变化,完全能在人身上重复,从此维生素E便走进了人类保健品的行列。1.2 含量测定[/color][/color][/font][align=left]维生素E是维持人体健康必需的营养物质，缺乏和过量都会引起严重的代谢障碍。因此，准确测量维生素E含量有着重要意义。下面着重介绍应用较为广泛的HPLC 测量维生素E含量方法。此方法是检测脂溶性维生素最为常用的方法[5]，实验采用液—液萃取法对样品进行前处理，检测成本较低。甲醇为分离的流动相[6]，使保留时间缩短，从而减少分析时间，利于大量样品快速检测。本方法成本低，简便快速，结果准确，所得色谱峰峰型较好，保留时间长短适中[font='宋体']，[font='宋体']适用于维生素[size=16px]E营养状况调查及相关疾病的诊断。[/size][/font][/font][/align][color=#000000]第2章 [font='times new roman'][color=#000000]维生素E的生理功能[/align]2.1 促生育功能维生素E是一种较强的抗氧化剂，能减少抗原的产生，加强抗体的清除，保护细胞和细胞器的稳定性；可用于孕产妇胎膜早破的防治、妇科习惯性流产、不孕症等领域。早在上世界20年代，科学家们就已经发现缺乏维生素E的小白鼠不能生育后代，而补充维生素E后的小白鼠仍可生育。体外实验表明，维生素E能提高人类胚胎发育率和胚胎质量[7]。有学者指出，抗氧化维生素E对BPA暴露可能造成的雄性生殖系统和抗氧化功能损害具有一定的保护作用[8]。BPA(双酚A)暴露会导致雄性子鼠生殖毒性，机制可能是在精子生成过程中对其产生影响。而维生素E干预能起到一定保护作用，机制可能是其在精子生成后或合成分泌睾酮过 程中起到保护作用，使之免受氧化损伤，但该作用的具体作用机制仍需进一步研究确定。此外，大量研究表明，维生素E对流产起到一定防护作用。流产指妊娠不28周，胎儿体重不足1000g，由于自然或人为因素终止妊娠者。通过对流产者与未流产者绒毛中维生素E含量定量分析，发现后者含量高于前者[9]，这也为未来孕产妇的科学膳食指明方向。2.2 抗肿瘤功能维生素E可以预防癌症，抑制肿瘤细胞的生长繁殖，有可靠的抗肿瘤效果，可能与增强机体的免疫功能，减少基因突变，及时清除肿瘤细胞有关。已经有研究证明，三烯生育酚能够抑制由激素调节的肿瘤细胞的生长 ,例如维生素E可以通过抑制雌激素的分泌而抑制人乳腺癌细胞的增殖。德国学者证明，男子多食含维生素E的食物并且少摄入动物脂质，可以有效的预防前列腺癌，男子在前列腺癌早期每天摄入400mg的维生素E且多食用植物脂质可以有效地抑制前列腺癌的发展。此外，研究发现，维生素E对于治疗宫颈癌、胃癌肺癌及皮肤癌都有一定疗效。天然维生素E的衍生物-微生物E琥珀酸酯(VES)能够特异抑制胃癌细胞生长和DNA合成，诱导其发生细胞凋亡核细胞分化，选择性地抑制人乳腺癌、前列腺癌等多种肿瘤细胞生长[10]，且能促进肿瘤细胞分化，遏制肿瘤细胞DNA的合成，但对正常细胞无毒副作用。有研究认为VES在体外可调控细胞周期，阻滞细胞周期G/S期进展，从而达到抑制肿瘤生长的作用[11]。2.3 皮肤保护功能维生素E是脂溶性维生素，较易进入皮肤细胞，阻断细胞内的自由基链式反应，保护皮肤免受紫外线照射产生的自由基的损伤，减少皱纹的产生，避免皮肤提早老化。外用具有增加皮肤弹性、保持光滑湿润的作用，也可以预防皮肤的角质化。维生素E还可以促进疤痕的愈合，减少色素的沉积。故天然维生素E作为理想的美容产品备受人们青睐。在治疗皮肤方面疾病，维生素E也发挥着独特的疗效。 临床上，维生素E主要与其他药物联合应用起辅助作用，并且主要依靠其抗氧化作用。有研究表明维生素E在治疗黄褐 斑领域有明确的治疗效果，且安全性好，无明显不良反应，可作为黄褐斑的一种治疗选择[12]。国外学者采用维生素E联合用药治疗黄褐斑，也取得一定成果[13]。维生素E能够促进 周围循环的建立，改善毛细血管的韧性，促进肉芽组织的生成，加快新皮肤的代谢生长。在不易愈合的创面局部换药中，阮莫英等[14]应用维生素E联合治疗褥疮、感染、烫伤其他不易愈合创面25例，有效率高达98%，且明显缩短了病程。2.4 保护心血管　由于维生素E的缺乏，可导致骨骼肌的损害，当然也可导致心肌功能的受损，受损严重程度不同，有时可导致心力衰竭的发生。研究表明，完全缺乏维生素E的小白鼠会出现心、肝、肌肉的退化；猴子缺乏维生素E时会出现心肌异常。而且，维生素E和维生素C可以保护心肌免受氧化性损伤。维生素E在血液中可以降低胆固醇，增加高密 度脂蛋白(H-LDL)的含量，降低低密度脂蛋白(L-LDL) 的含量。李爱阳等[15]研究了在家兔动脉粥样硬化治疗中维生素E的重大作用，得出结论维生素E能够通过抑制血清过氧化脂质(LPO)的产生，使H-LDL合成增加，促进血脂进入组织内，使血脂降低，进而降低动脉粥样硬化的风险。并且，通过抗氧化的作用，调节血栓素和血浆前列环素的比值，抑制血小板的聚集，改善血流状况。长期摄入维生素E可以有效的降低心血管疾病的发生率。2.5 治疗早产儿相关疾病　维生素E能够保护细胞膜上的多不饱和脂肪酸脂质不被过氧化，如维生素E缺乏，可导致细胞膜破坏，如红细胞(RBC)破坏，则发生溶血性贫血[16]，镜下可见RBC形态改变，有时可见棘形RBC及碎片，体征主要是皮肤松弛部位的浮肿，甚至是全身浮肿。维生素E缺乏多见于人工喂养婴儿，尤其是早产儿。建议早产儿出生后需常规补充维生素E20mg/d，维持3个月。此外，维生素E在治疗新生儿 硬肿症上取得肯定疗效。按摩中加入维生素E，可促进局部血液循环，减少热量散失，使皮温升高，硬肿消退，具有操作简便，节省费用等优点，有望广泛应用于临床。2.6 其他功能维生素E与硒协同可以提高胰岛B细胞的分泌功能，升高血清胰岛素，提高胰岛素的体内储备，并且能够保护胰岛细胞，对糖尿病的治疗有积极的作用[17]。此外，维生素E对改善非酒精性脂肪肝起到一定作用，机制可能与清除自由基，抑制脂质过氧化有关[18]。而维生素E在减轻肾脏损伤，提高机体免疫力等方面也有部分研究[19]。维生素E与阿尔兹海默病的关系及相关机制已成为医疗工笔者研究的热门课题[20]，但其待解决的问题也很多，二者相互作用机制一旦确立，有望迎来脑认知研究领域的新纪元。综上所述，维生素E是机体所必需的物质，有着很广泛的功能。但摄入维生素E过多也会导致相应的过量反应或副反应，导致骨质疏松。根据日本厚生劳动省的摄取标准，成人每天摄取维生素E不应超过900mg。对维生素E，我们在广泛应用其功能的同时，也要避免使用不当带来的诸多副作用，使其更好的服务于大众。第3章 维生素E的提取[/align]3. 1 天然VE的存在形式 维生素E主要存在于各种植物原料中,油料种籽、某些谷物、坚果和绿叶蔬菜中均有相当数量,但在动物组织中含量极低。[21]由于VE是脂溶性的 ,因此在种籽油或果肉油中一般均富含VE,表1是几种主要食用油脂中维生素E含量及各种生育酚的分布概况。在各类植物油脂中以小麦胚芽油中的VE含量最高 ,根据文献报道其生育酚含量的变化范围180～450mg/100 g油,而且在一般油脂中均不含有的β-生育酚含量也达到40mg/100g油以上,α-、β-三烯酚在小麦胚芽油中含量也颇高。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191728037206_3230_1608728_3.png[/img]天然生育酚在C2 ,C′4 及 C′8,的不对称碳原子上各基团的排列绝大多数为R型,即为C2 R C′4R ,C ′8R型,简称为d型。d-α-生育酚型的活力大于dl(外消旋型 )-α-生育酚。设为脂则d-α-生育酚 d-α-生育酚乙酸酯 dl-α-生育酚乙酸酯.人工合成的均为 dl-α-生育酚乙酸酯 ,其活性小于dl-α-生育酚,更小于d-α-生育酚。目前 ,维生素 E活性的国际单位是以人工合成的dl-α-生育 酚乙酸酯1mg为一个国际单位(1 I.U=1U.S.P美国药典单位),而1mg/dl-α-生育酚乙 酸酯的活性仅相当于0.67mgd-α-生育酚的活性,1mgd-α-生育酚的活性应为1/0.69=1.49I.U. 另一方面,近二十年来,国际社会特别注重食品的安全性问题,许多国际性组织都竭力反对在食品中使用化学合成产品,1977年美国食品与药物管理局(FDA)撤销了对BHT使用的认可 BHA、BHT也相继为日本通产省所禁用。[22]因此,尽管目前人工合成维生素E的产量很高,[23]但天然VE的提取正受到越来越多的关注。3.2 天然VE的提取、浓缩与精制由于小麦胚芽油中天然维生素E的含量较高(见表1) ,因此可以把此麦胚油直接用于营养补助食品中。但要制成维生素E含量超过250mg/100g油 ,乃至550mg/g油的制剂,还必须进行浓缩与精制。从油脂精炼过程中富集维生素 E的办法是最经济合理的办法 ,而从油脂脱臭时所得的馏出物中富集VE是一个很好的源泉,在脱臭时随高真空、高温的蒸汽带出了很多的物质，其中含有较多的VE 另一源泉得自油脂碱炼时所得的皂脚 ,因为皂化时生成的胶体吸附了大量的不皂化物 ,其中包括VE。因此,目前国际上提取的天然VE大都来自这两个方面。下面介绍几种VE的提取、浓缩及纯化技术。3.2.1 从皂脚中提取 (1)从小麦胚芽油皂脚中以0.5NNaOH乙醇液进行补充皂化,用极性溶剂甲醇、乙醇或丙酮萃取,得不皂化物溶液,经冷冻后分离出蜡及部分甾醇,溶液经活性碳脱色得浓缩维生素E,含量在10%～15%,若再经分子蒸馏可得浓度更高的生育酚。[24](2)皂脚先经甲酯化使脂肪酸变成脂肪酸甲酯,把甲酯蒸馏除去,残余物用有机溶剂提取,萃取液经柱色谱分离,可制得食品级生育酚。[25]3.2.2 从脱臭馏出物中提取 (1) 在大豆油馏出物(生育酚含量约15%～17%)中加入5倍量的甲醇使之溶解,用浓硫酸作催化剂,加热回流使之酯化 ,中和后将甲醇溶液冷却至1～2℃,有时可达-5～-8℃,过滤除去甾醇结晶,滤液除去溶剂后在1.33～0.133Pa下进行分子蒸馏,将脂肪酸酯类与生育酚的浓缩物分开,按次序反复进行分子蒸馏,则可得到较高浓度的生育酚浓缩物。[26] (2) 脱臭馏出物用CO2,N2蒸馏以除去低沸点杂质,残余物经碱处理后用真空蒸馏或阳离子交换树脂作选择性处理,可得提纯的生育酚而用作食品添加剂及药物中。 [27](3)100g含生育酚的豆油浓缩物(含生育酚60.6%)溶于己烷后用NaOH/MeOH处理 得水溶液相,其中含有生育酚和极少量的己烷,分出水溶液相,用HOAC中和并加入水,得到一个富含生育酚的己烷相,除去己烷就可以得到含生育酚81.6%的产品。[28]氧化,因此产品得率不高 而分子蒸馏要求的压力需0.133 Pa,一般设备很难达到这一真空度,且设备成本昂贵(每台超过10万美元)。因此,不断完善现有技术,研究开发新工艺无疑是迫在眉睫的。(4)尿素络合法将1000g含脂肪酸、三甘酯(85%)、生育酚(6%)、甾醇(3%)的脱臭馏出物,用1758g尿素(溶于8400g甲醇)在64℃下处理60 min,把回流混合物冷却至0℃,得到沉淀,经过滤除去沉淀固,将母液用过滤用柠檬酸调节pH至5.8,并浓缩成一种油,此油用CHCl3萃取并进一步浓缩成一种红色的油,此油无固态物 ,油中生育酚的含量为75%。[29] 以上几种VE提取、精炼的方法大致可分为二类,即:酯化蒸馏法和皂化萃取法 ,其基本流程分别是:(1)原料→浸出→脱溶 (脱胶)→分子蒸馏 (200～240℃）, 0.133 Pa→VE浓缩物 (2)原料→浸出→脱溶 (脱胶)→皂化 (20%～30% 碱液)→有机溶剂提取→VE浓缩物。其优点是工艺流程短,操作简单且产品色味纯正.但缺陷也是显而易见的,皂化法在皂化过程中,由于强碱的存在VE极易。第4章 维生素E在食品添加剂中的应用4.1 维生素E作食品添加剂食品的氨化酸败常在含油脂的食品中发生，其原因是由于空气中的氧气与脂肪酸酯的不饱和转团作用形成过氧化物、过氧化瓴及羰基化合物，如醛、酸、酮及酒精等在食品中产生异味。抗氧剂用于延缓食品的氧化变质已有多年历史。抗氧剂能阻止脂肪中自由基的产生，将氧化反应终止在开始阶段。天然抗氧剂主要有生育酚(维生素E)、卵磷酯、迷迭香属提取物、愈创树脂和抗坏血酸。天然植物油，如小麦胚芽油、大豆油中含生育酚主要从植油精加工过程的汽提副产物(脱臭工艺馏出物)中提取。主要流程是将汽提副产物溶于丙酮，冷却脱甾醇，再用氢氧化钾、乙醇皂化，然后用乙醚抽提得到的非皂化物进行分子蒸馏和浓缩,得生育酚浓缩物。合成生育酚的主要原料是三甲基氢醌和溴植烯，在氯化锌等脱水剂的作用下进行缩合而得dl-a-生育酚。反应催化剂可用三氟化硼。最初a-生行酚被认为是维生素E的主要成份，如天然品是d-a-生育酚、合成品是dl-a-生育酚。现已知道，γ-生育酚具有某些抗氧化剂特征，但其γ-及β-异构体更为有效。因此在一些抗氧剂品种中，γ-和β-异构。4.2 维生素E在食品中的应用维生素E在食品工业中应用不断扩大是因为不仅有营养作用,而且还兼有抗氧化作用,维生素E作为食品添加剂添加于食品作抗氧剂使用时，其优点是耐热性好,即使加热200C损失也较小。我国《食品营养强化剂使用卫生标准》(GB14880-1994)规定维生素E的用量:用于芝麻油、人造奶油、色拉油乳制品为100-180ug/kg 用于婴幼儿食品,为40-77mg/kg 乳饮料10-20mg/kg 强化饮料20-40mg/kg。食品中加入适量维生素E,特别是天然维生素E可以防止食品中的油脂因氧化而酸败,大大提高食品的贮存期及其营养价值,这也是其他食品抗氧剂、防腐剂所不具备的优点。天然维生素E作为抗氧化剂还可用作水果、蔬菜、冻鱼、冻肉及罐头等的保鲜剂。第5章 维生素E的开发前景[/align]5.1 国外维生素E市场现状世界维生素E的主要生产厂家有瑞士罗氏公司、Henkel公司、BASF公司、Eastman化学品公司、罗纳一普朗克公司和日本卫材公司等,目前,世界维生素E的市场总的来讲、呈需求猛增、市场看好、价升利大的态势。仅以美国为例,其维生素E近年来需求和销售高速增长,1992年总销售额达3.38亿美元，比1991年增长23%以上 而1993年上半年的零售额又比1992年同期增长了40%。据市场分析家分析认为，引起维生素E市场俏销的直接原因是临床新用途不断被发现,刺激了公众的消费量,因为有研究报告显示,维生素E有益于人类的健康,增加维生素E的摄人量,可降低心脏病的发病率,减少致口腔癌的危险性,并具有预防静脉、动脉和生命器官中的血流阻塞的功效，有关维生素E新用途的研究近一年多来层出不穷,这是影响该产品市场畅销和刺激其需求高速增长的根本原因。有专家预测，1994年的销售额将比去年增长20-25%左右。随着市场需求量的增加,维生素E的价格在今明两年内也将上深,即使所有生产厂家都增加产量,其实际增长也低于40%。目前,天然桶装维生素E的价格为:D-维生素E为43.63美元/公斤,D-维生素E乙酸酯为50.08美元/公斤,D——维生素E丁二酸酯为73.30美元/公斤 而合成化学品维生素E的价格为:符合USP(美国药典)的DL--维生素E乙酸酯为34.5美元/公斤,半干粉状的DL维生素E是24.25美元/公斤。而且这种价格和销量的增长势头将会持续3-5年。瑞士写氏公司由于生产成本提高、市场需求全球性增长，加上食品工业对维生素类需求迅猛增长，自今年4月1日起提价,维生素E乙酸酯液体36美元/公斤,游离态维生素E41美元/公斤，液态维生素E(1.7)82.45美元/公斤。5.2 我国维生素E产销现状 我国自70年代末开始化学合成维生素E,到目前为止,全国共有原料药生产厂家8个,年总生产能力近900吨。产量及出口量逐年增加:1980年产维生素E乙酸酯3吨 1981年产量增至12吨,增长4倍,1982的产量增至15吨 1983年产量又增近3倍,达44吨 1984年又增至71吨,比上年约增1.6倍 1985年又增长1倍,达136吨。1986年产量增至206吨，并且开刨出口之举，当年出口量为20吨 1987年产量为292吨,出口49吨 1988年产量为378吨，出口88吨 1989年产量为401吨，出口量达134吨 .1990年产量为251吨,出口49吨 1991年产量为220吨，出口90吨 1992年产量634.6吨,出口238.5吨 1993年前半年原料药产量比上年同期增55吨,出口增48吨,出口量增幅大于内销量增幅。全年出口量增加100吨以上,出口量约占年总产量的40%,由于该品用途很广,除了医用外,还可作曾用、食用和用于美容,因此内销形势也相当好，出口需求旺盛,1994年出口及内销量仍将呈上升趋势,产量可适当增加。由于市场看好，国内维生素E价格也扶摇直上,直接原因是市场需求量增加和出口量大于供应出口量，1993年郑州会维生素E价格为250元/公斤,哈尔滨会价格升为320元/公斤,1994年杭州会又升至330元/公斤,贵阳会又增至360元/公斤。制剂,维生素E胶丸(0.1gX30s)目前市场价为1.7-1.8元/瓶。我国维生素E的原料药生产品种有维生素E、维生素E烟酸酯和维生素E乙酸酯三种，制剂品种有胶丸(50mg、5mg)、片剂(5mg、10mg)和针剂(5mg/ml,50mg/ml)三种,月前原料药和制剂生产厂有北京第二制药厂、上海三维制药有限公司、东北制药总厂浙江新昌制药股份公司、广东制药厂、海南制药厂、西南合成制药厂、无锡第二制药厂等15个,生产规模和品种不尽相同。因此，十余年来，维生素E的产量在我国增加了近300余倍。生产技术水平也有所提高，质量标准除了《中国药典》载有药用标准外,还由上海三维制药公司负责起草了食品添加剂用《DLα-乙酸生育酚质量标准》,(GB14756-93),已经国家技术监督局批准自今年8月1日起执行,这将为年产量达5000吨的饲料添加用维生素E提供了质量依据。虽然维生素E在我国的生产在近十年来取得了长足的发展,出口从无到有而且增幅较大,但是，面对未来“复关”的挑战.我们应清醒的认识到我们的“卡脖子”问题--原料中间体国产化。目前我们化学合成维生素E所需的主要原料“芳樟醇”全靠依赖进口,没有生产及成本降低的主动权，因此想要迎接“复关"的挑战，抓住市场看好的机遇,扩大生产，多出口创汇，就必须解决这一重大问题。[30][/color][/font][/color]第6章 展望维生素E作为一种维生素，具有其它物质所不具备的、生命有机体必需的生物活性。随着营养学与病理学的发展，维生素E的一系列生物化学功能将不断被发现和证实，维生素E的高档营养制剂的需求量也必将越来越大，在美国已有35%的人经常服用VE制品。目前，在全世界维生素E市场中，VE是需求量和销售额增长最快的品种，其全球销售额每年都保持10%-20%的速度增长。全世界每年VE的用量约2.5万吨，在整个VE市场中，合成VE占据约80%的市场份额，天然维生素E占20%(现美国天然维生素E产量已超过1000吨)。[31]由于天然维生素E活性比合成维生素E高许多，再加上人们对绿色食品的兴趣逐年增大，在西方市场上呈供不应求的态势，处于卖方市场，故天然维生素E是一种具有良好市场前景的热门产品，特别是作为保健食品或化妆品原料的发展前景十分乐观。为了适应市场需求，全球(特别是我国)维生素E产家应加大对天然维生素E的开发研究及生产力度，同时还要对维生素E的剂型进行多样化研究及扩大应用领域，相信维生素E行业必将有更加灿烂的的明天。[font='times new roman'][color=#000000]参考文献[/color][/font][1] 刘成梅,冯妹元,刘伟,等.天然维生素E及其抗氧化机理[J].食品研究与开 发,2005,60:205[2] 林茂松,陈卫昌,白霞.PPARγ活化诱导细胞凋亡和周期阻滞来抑制结肠癌细胞生长[J].肿瘤,2006(2):131～134[3] 周怡韵,杨永宾,蔡美琴.维生素E及其对癌症作用的新进展[J].中国临床营养杂志,2007,15(5):326～331[4] 韩国 ,徐学兵,李柱华.维生素E[J].郑州粮食学院学报,1993(1): 94～101[5] Mao Xuanxia,Cai Meiqin.Clinical research on safety of fat soluble vitamins[J].Chin J Clin Nutr,2004,12(4):280-283.[6] Kamisha L JD,Steve JM,William E,et al.A rapid HPLC method used to establish pediatric intervals for vitamin A and E[J].Clin Chim 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前段时间拿到一个饲料样品，要检测饲料中维生素A和维生素K3，看标准两者用的流动相都是甲醇-水，第一反映就是不是可以梯度洗脱同时测定两个成分，采用定时变换检测波长的方法实现检测。结果很失败，在此分享一下分析过程。 先看标准方法： GB/T 17817-2010 饲料中维生素A的测定 高效液相色谱法[img=,682,136]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709292030_01_1638724_3.png[/img][img=,690,336]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709292030_02_1638724_3.png[/img] GB/T 7294-2009 饲料添加剂亚硫酸氢钠甲萘醌（维生素K3）[img=,690,506]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709292024_01_1638724_3.png[/img] GB/T 18872-2002 饲料中维生素K3的测定 高效液相色谱法 维生素K3的检测原理是在碱性条件下，水溶性的亚硫酸氢钠甲萘醌脱去亚硫酸氢钠生成脂溶性的甲萘醌，用三氯甲烷萃取，吸取适量经甲醇稀释后上机检测。[img=,680,508]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709292025_01_1638724_3.png[/img]一、第一次实验：按标准维生素K3的提取过程太麻烦了，且三氯甲烷并不是随便可以买到，那能不能像维生素A一样直接甲醇提取后检测？1、查维生素K3（亚硫酸氢钠甲萘醌）理化特性:易溶于水和热乙醇，难溶于冰乙醇，不溶于苯和乙醚，水溶液PH4.7-7.常温下稳定，遇光易分解。看下面的结构式：[img=,247,199]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709292009_01_1638724_3.png[/img]看性质肯定可以溶解在90%甲醇-水里，取亚硫酸氢钠甲萘醌适量，在棕色容量瓶中90%甲醇溶解后上机检测。2、结果出峰极快，受亚硫酸根强极性基团的影响，维生素K3在反相色谱上完全不保留且峰形很差，说明不能直接提取后上机检测，第一次以失败告终。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709081927_01_1638724_3.jpg[/img]二、第二次实验：老实的按标准方法（GB/T 18872-2002 饲料中维生素K3的测定 高效液相色谱法）？显然不好，还是不能同时测定维生素A和维生素K3，能不能碱性条件下脱亚硫酸氢钠后纯甲醇提取后上机检测呢？1、由于维生素A的提取方法是65度纯甲醇超声提取30分钟，那么就先取适量维生素A和维生素K3置100mL棕色容量瓶中，由于手上没有氢氧化铵，所以加入5mL碳酸钠溶液代替，加入后超声振摇1min，即有白色沉淀析出（可能是碳酸钠与甲萘醌的混合物），立即加入80mL甲醇，65度超声提取30分钟，过滤取，取滤液稀释至合适浓度上机检测。2、结果几乎无甲萘醌峰出现，观察提取液的颜色，基本可以确定是甲萘醌都氧化成了[color=#cc0000]羟基苯醌[/color]。如下呈褐色的滤液。第二次失败。[img=,602,337]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709292059_01_1638724_3.png[/img] 还有一个原因是用甲醇提取与用三氯甲烷提取有明显的区别，是甲醇与碳酸钠溶液是有一定互溶性的，而三氯甲烷与碳酸钠溶液不互溶。甲醇的碳酸钠溶液可能也会促进甲萘醌的破坏。三、第三次实验1、实验方法：维生素A与维生素K3分别按标准方法提取，再吸取甲萘醌的三氯甲烷溶液适量置提取好的维生素A提取液中，混匀，上机检测，梯度洗脱程序如下：[img=,509,384]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709292142_01_1638724_3.png[/img]2、结果甲萘醌与维生素A可以实现分离与同时检测，但每针的分析时间太长，与分别单独检测维生素A与维生素K3，每针分析时间只要10分钟相比，没有优势，如果还要同时分析维生素D与维生素E的话，分析时间就会更长，另外也有可能存在提取维生素A时有少量甲萘醌生成，造成结果偏高的误差。其它实验证明维生素A、D、E可能在98%甲醇下同时分析。至此，第三次实验也算失败。[img=,620,512]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709300842_01_1638724_3.jpg[/img]　　　　　　　　　　　　　维生素Ｋ3（7.1min）与维生素Ａ(21.4min)同时检测图谱[img=,581,500]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709300842_02_1638724_3.jpg[/img]　　　　　　　　　　　　　　　　维生素Ａ样品图谱（98%甲醇等度洗脱）[img=,588,492]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709300842_03_1638724_3.jpg[/img]　　　　　　　　　　　　　　　维生素Ｋ3样品图谱（80%甲醇等度洗脱） 综上，本次最终还是选择按标准方法分别检测维生素A与维生素K3，在检测维生素K3由标准方法的旋转振荡器改为普通摇床振荡。这次的经验告诉我，要改进方法真的不容易，进行方法开发前一定要充分了解待测组分的理化性质，充分理解参考文献的检测原理与注意事项。看到亚硫酸根有没有人会考虑使用离子对试剂四丁基氢氧化铵和四丁基溴化铵的，估计也是不行的，碱性条件下会水解。

[img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708311603_01_3081717_3.jpg[/img]奶粉标签中对于维生素A的标识是μgRE,是在做维生素A的同时需要测定胡萝卜素吗？最后维生素A的含量是维生素A的含量加上胡萝卜素的含量吗？