色谱技术发展到今天,那叫一个日新月异。超高效合相色谱,你喜欢吗?
安捷伦的1290的液相,四元泵,泵前混合,是超高效液相色谱仪吗
[b]超高效液相色谱[/b][i]高效液相色谱方法及应用(第二版)作者:于世林[/i]由以上讨论中,可知在HPLC分析中,使用粒度dp为5~10μm固定相,色谱柱长10~25cm, Δp为3~10MPa,就可获得n≥3000的柱效,使用大多数有机溶剂或水作流动相,可在2~30min内,实现大多数不同组成样品的分析要求。上述结论是在20世纪80年代末期获得的,90年代后,液相色谱使用了粒度dp=3.5μm的固定相,2000年很道了使用dp=2.5μm的固定相,由于高压愉液泵提供压力的限制,实现了仅用色谱柱长为3~5cm的快速分析。直至2004年美国Waters公司在匹茨堡会议上展出了最新研制的ACQUITY超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatographay,UPLC),它使用dp仅为1.7μm的新型固定相,色谱仪提供的Δp达140MPa(2000psi),可使在常规高效液相色谱需要30min时间的样品分析在超高效液相色谱短短为仅需5min,.并呈现出色谱柱柱效达20万块/m理论塔板数的超高柱效。 UPLC保持了HPLC的基本原理,全面提升了液相色谱的分离效能,不仅提高了分辨率,也使检侧灵敏度和分析速度大大提高、使液相色谱更高水平上实现了突破。因此,必将大大拓宽液相色谱的应用范围,井大大加强了UPLC在分离科学中的重要地位。一、超高效液相色谱的理论基础在高效液相色谱的速率理论中,范第姆特方程的简化表达式(7-23):[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/11/200611251040_33593_1613333_3.jpg[/img]如果仅考虑固定相的粒度dp对H的影响,其简化方程式可表达为[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/11/200611251042_33595_1613333_3.jpg[/img]
[color=#156200][size=3]超高效液相色谱是大家谈论的热点,你认为是厂家故意炒作还是真的有其发展的空间和生存的价值?超高效液相色谱会取代高效液相色谱么?他们的关系如何?超高效液相色谱的发展前景如何?你使用过超高效液相色谱么?使用的情况如何?欢迎大家一起来PK~[/size][/color]============================================================2010中国科学仪器发展年会的下午让我们一起与业内专家和知名厂商一起解读此问题。
要实现超高效液相色谱分析,除必须制备出装填粒度小于2μm固定相的色谱柱外,还必须提供高压溶剂输送单元、低死体积的色谱系统、快速的检测器、快速自动进样器和高速数据采集、控制系统等,才能促成超高效液相色谱的实现。超高效液相色谱的优点基于1.7μm小颗粒技术的超高效液相色谱与人们熟知的高效液相色谱(HPLC)技术,具有相同的分离原理。不同的是,超高效液相色谱不仅比HPLC具有更高的分离能力,而且结束了人们多年不得不在速度和分离度之间取舍的历史。使用超高效液相色谱可以在很宽的线速度、流速和反压下进行高效的分离工作,并获得优异的结果。提高分离度超高效液相色谱发挥了1.7μm颗粒提供柱效增高的全部优越性。尤其是1.7μm颗粒提供的柱效比5μm颗粒提高了3倍。因为分离度与粒度的平方根成反比,1.7μm颗粒的分离度比5μm颗粒提高了70%。在梯度分离中也具有同样的优越性。提高分析速度由于超高效液相色谱系统采用1.7μm颗粒,柱长则可以比使用5μm颗粒时缩短3倍而保持柱效不变,而且使分离在高3倍的流速下进行,结果使分离时间缩短而分离度保持不变。提高检测灵敏度浓缩样品和采用各种高灵敏度的检测器都能提高灵敏度,而在超高效液相色谱中通过减小颗粒度,使色谱峰变得更窄,信噪比(S/N)增大,灵敏度得到额外的提高。提高质谱离子化效率减小基质效应[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]已经是液相色谱发展的主流,能够充分发挥LC高分离度和MS高灵敏度的优势,超高效液相色谱与MS的联用使这种优势更加明显:一方面,超高效液相色谱系统达到最佳线速度时,其流动相流速一般在0.25~0.50ml/min之间,这与质谱能承受的流速更加匹配(API接口一般能承受0.20ml/min),使离子化效率增加,而新的nano超高效液相色谱的流量更可低至200nl/min,可以不需分流而直接进入质谱 另一方面,超高效液相色谱的分离度比HPLC有很大提高,其色谱峰扩展很小,峰浓度很高,这样不但有利于化合物的离子化,同时有助于与基质杂质分离,在一定程度上能降低基质效应,从而使灵敏度和重现性得到提高。
对于超高效(超高压)液相色谱你们使用了吗?日常使用更换配件的频度是多长时间?一般介绍说使用成本高,高在哪里?使用的流动相与常规液相有何特殊要求?
超高效液相色谱能使用普通色谱柱么,
我公司有台岛津LC-20A高效液相色谱仪,双泵,单泵最高压可达25mpa ,有没有可能配置成超高效液相色谱,请大家指点!
高效液相色谱和超高效液相色谱有什么区别与联系吗?
[align=center][b]浅谈超高效液相色谱柱和液相色谱柱的区别[/b][/align]从色谱柱填料的发展大趋势来讲,色谱柱填料一直是超更小粒径微粒的方向发展的,2004年超高效液相色谱应运而生。更小的粒径,意味着更高的泵压。在色谱柱的发展历程中,泵压、粒度、柱长、柱效这四个因素是相互制约的。随着技术的发展超高效液相色谱可以提供的泵压为140Mpa,而大多数液相色谱仪的最大压强仅为40Mpa。泵技术的突破为超高效液相色谱的产生奠定了基础。两者的区别如下:1、UPLC比HPLC有更好的分离度;我们不难理解填料粒径变小以后,分离度会变好。1.8um颗粒的分离度比5um颗粒提高了70%;2、UPLC比HPLC有更高的分析速度;常规的液相色谱通常在20分钟内完成分离,而超高效液相通常情况下5分钟内就可以完成分析;3、UPLC比HPLC有更高的灵敏度。分析过程中峰展宽变窄,峰高会更高,提升了色谱检测的灵敏度。单纯从色谱柱填料来讲,主要有三个方面的区别 1、Kromasil提供给超高效液相色谱柱的填料粒径为1.8um,普通色谱柱通常填料的粒径为5um。作为液相色谱来说,填料硅胶球的尺寸分布要求非常严格,填料的粒径越小,实际上对硅胶球的要求更高。所以超高效液相色谱柱的填料成本也是高于液相色谱柱的。2、超高效液相的柱压更高,要求填料的抗压性更强,这就要求在填料合成过程中要考虑抗压性的影响,无疑增加了合成难度。3、色谱柱的装填也更加严苛,超高效液相对装填工程师的要求也更高。超高效液相的柱管和柱塞板也是升级和优化过的。
为什么超高效液相色谱采用细粒径、细内径可以提高柱效?[em0910]
最近公司准备买一台超高效液相色谱仪做中控,有没有用过的大神推荐一下哪种的比较好用,之前单位一直用的安捷伦1260,不知道换到超高效液相上方法需不需要变动,麻烦用过的告知一下各个品牌的仪器性能,价格,售后……谢谢大家!
[font=宋体][font=宋体]超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]是在传统高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的基础上升级改进,使之获得更高的系统耐受压力。这样就可以适配更小填料粒径的色谱柱,因为越小粒径的色谱柱,柱效越高,反压也越高。常规的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统无法承受亚[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]微米的色谱柱带来的高反压。超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]搭配小粒径色谱柱,能够提供更高的分辨率、更快的分离速度和更高的灵敏度,是搭载质谱检测器的理想分离系统。目前超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]国产与进口品牌种类繁多,如何选择合适的设备,这里谈谈我的经验。[/font][/font][font=宋体]1、[/font][font=宋体]输液系统[/font][font=宋体]1)[/font][font=宋体]输液泵[/font][font=宋体]目前市面上主流的是凸轮往复泵和直线电机泵两种。凸轮泵因为设计上的原因需要加装阻尼器来稳定压力脉冲,系统的延迟体积要大于电机泵。流量的准确度与精密度上电机泵也要更出色。但成本上电机泵会更高一些。[/font][font=宋体]2)[/font][font=宋体]泵组合[/font][font=宋体][font=宋体]分为二元泵系统和四元泵系统,二元泵是两组输液泵分别控制有机相与水相流路,混合比例靠控制[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]泵跟[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]泵的流量,混合点位于泵后,属于高压混合,混合效果更好,不足是只能同时使用四路溶剂中的两路。四元泵系统只有一组输液泵,通过控制比例阀的开合时间,控制溶剂混合比例,混合器位于泵前段,属于低压混合,混合精度上不如二元泵系统。但四元泵可以灵活使用四路流动相中的任意[/font][font=Calibri]1-4[/font][font=宋体]种,更适合方法开发。因为四元泵系统中,有机相和水相共用一组输液泵,泵内更容易析出结晶盐损害密封组件。所以在使用四元泵时,需要特备注意缓冲盐溶液与有机相的混合比例,避免结晶盐析出。[/font][/font][font=宋体]3)[/font][font=宋体]电动放空阀,手动是真的不方便。溶剂压缩补偿技术,这也是很重要的参数,但各厂家技术的优劣难以把握。各厂商一般都会提供流量准确度与紧密度参数,但测试条件各厂家都不一样。漏液传感器、真空脱气、柱塞清洗等功能基本都是标配了。[/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]自动进样器[/font][font=宋体]1)[/font][font=宋体]进样器[/font][font=宋体]主要关注的就是进样误差和进样重复性,这两个厂商基本都会提供,可比性还是很高的。虽然各厂家都会提供交叉污染的测试数据,但我们用户在选择时,更应该关注进样针时流路设计还是旁路设计。旁路设计的进样方式有个天然缺陷,就是无法清洗进样口,导致交叉污染会比流路设计大。而流路针也有缺陷,因为针跟针座会在运行样品时连接到流路中,针座密封就需要做到耐高压。但是在反复进样的过程中,针座密封圈不不断磨损而漏液。[/font][font=宋体]2)[/font][font=宋体]附加功能[/font][font=宋体][font=宋体]类似于瓶位检测、顶针堵针保护等附加功能可以很好避免误操作时带来的仪器损害。温控功能主要考虑组件的耐用程度,温控的准确度和稳定性在[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]℃以内都是可接受的。[/font][/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体]柱温箱[/font][font=宋体]主要关注温控范围、准确度、稳定性,最关键的参数是温度的稳定性,这将直接影响分析测试时保留时间的稳定性与峰面积的重现性。流动相预加热功能可以保障进入色谱柱的流动相与色谱柱的温差尽可能小,提供更好的色谱峰重现性。温控组件目前市面上性能最好的是帕尔帖元件。[/font][font=宋体]近年来国产[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的发展越来越好,性能上并不比进口产品差。但是由于超高效设备主要配置质谱检测器,进口质谱厂商多有配套[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]设备,加上国产质谱发展水平受限,国产超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的市场占有率并不高。希望此次分享能为大家在今后的仪器选购中提供帮助,也祝愿国产仪器越来越好。[/font]
萌新刚开始做超高效液相色谱要做多久?
高效液相色谱法与超高效液相色谱法的区别?
随着技术的发展,超高效液相色谱会取代高效液相色谱吗?
各位老师好,我现在需要检测一个极其微量的物质,为了提高它的检测灵敏度,打算采用超高效液相色谱,因为我查资料说超高效液相色谱的检测灵敏度是普通液相的3倍多,超高效液相色谱为什么比普通液相色谱的灵敏度更高呢?希望大家不吝解惑。
[align=left]超高效聚合物色谱仪(Advanced Polymer Chromatography,APC),在高分子化合物的分子量及分子量分布测定中具有显著优势,与传统的凝胶色谱仪比较,提高了分离度,尤其在相对较小分子部分,获得了更好的分离效果,可以得到较为准确的分子量和分子量分布,分析速度快,由于使用了小颗粒的凝胶色谱柱,分离速度大大提升,平均分析时间缩短了3-5倍。该仪器在生命科学、生物医药、日用化工、新材料等领域应用广泛。[/align][align=left][/align]
我用了超高效的液相色谱柱,使用前用0.22微米的膜过滤了水,溶剂是用0.45的过滤的。使用几天后,柱压升高到420,没办法用了,再用水冲洗,不知道能不能有效,求助各位。
各位好,想请问一下,超高效液相色谱的工作压力一般在什么范围内?谢谢
GMP、CNAS等认证体系对超高效液相色谱的认证情况如何,尤其是GMP,一些药典普通的液相方法无法直接移植到超高效液相上。
请问有没有超高效手性液相色谱?
[align=center][font='宋体'][size=16px]超高效聚合物色谱仪的应用[/size][/font][/align][font='宋体'][size=16px]中广测配备了超高效聚合物色谱仪(Advanced Polymer Chromatography,APC),在高分子化合物的分子量及分子量分布测定中具有显著优势,与传统的凝胶色谱仪比较,提高了分离度,尤其在相对较小分子部分,获得了更好的分离效果,可以得到较为准确的分子量和分子量分布,分析速度快,由于使用了小颗粒的凝胶色谱柱,分离速度大大提升,平均分析时间缩短了3-5倍。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310271120073626_404_2862401_3.png[/img][/align][font='宋体'][size=16px]一、仪器信息[/size][/font][font='宋体'][size=16px]1.仪器名称:超高效聚合物色谱仪[/size][/font][font='宋体'][size=16px]2.英文名称:Advanced Polymer Chromatography[/size][/font][font='宋体'][size=16px]3.生产制造商:美国沃特世公司[/size][/font][font='宋体'][size=16px]4.型号:ACQUITY APC[/size][/font][font='宋体'][size=16px]二、仪器配置[/size][/font][font='宋体'][size=16px]1.超高效聚合物系统(Waters ACQUITY APC):ACQUITY APC溶剂管理器;ACQUITY APC样品管理器;ACQUITY APC Column Manager-30S柱温箱;ACQUITY UPLC示差折光(RI)检测器。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]2.色谱柱:[/size][/font][font='宋体'][size=16px]ACQUITY APC XT系列脂溶性色谱柱,适用分子量范围200~2000000Da [/size][/font][font='宋体'][size=16px]ACQUITY APC AQ系列水溶性色谱柱,适用分子量范围200~2000000Da。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]三、应用领域[/size][/font][font='宋体'][size=16px]生命科学、生物医药、日用化工、新材料等领域。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]四、服务范围[/size][/font][font='宋体'][size=16px]1.水溶性合成高分子材料如聚乙二醇及其衍生物、聚丙烯酸钠、聚羧酸、甲氧基聚乙二醇丙醛等的分子量及分子量分布的快速测定。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]2.水溶性天然高分子化合物如多糖、蛋白质、真菌多糖、多肽、硫酸软骨素等的分子量及分子量分布的测定。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]3.脂溶性合成高分子材料如聚丙烯酸树脂、聚苯乙烯、聚氨酯、聚乳酸、聚醚、聚乙二醇单甲醚-聚乳酸嵌段共聚物。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]五、应用案例[/size][/font][font='宋体'][size=16px]中广测已为多家高校、科研机构、生物医药企业等提供相关分析测试服务。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]1.超高效凝胶色谱法测定聚乙二醇衍生物的分子量及其分布[/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310271120078235_8986_2862401_3.png[/img][font='宋体'][size=16px]采用APC系统,以单甲氧基聚乙二醇丙醛(monomethoxy polyethylene glycol propyl aldehyde , mPEG_pALD)为代表,建立了凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography, GPC)法测定聚乙二醇衍生物的相对分子质量及其分布和杂质(目标分子量的二倍体、三倍体)的相对含量。本方法与常规GPC相比,分辨率高,分析速度快,能快速测定mPEG_pALD的相对分子量及其分布,并能得到其纯度和杂质的相对含量,为其工艺研发、质量控制提供科学的依据,同时也可用于其它PEG衍生物的相对分子量及其分布和纯度的测定。[/size][/font][align=center][/align][align=center][font='宋体'][size=16px]mPEG_pALD传统GPC系统分析色谱图[/size][/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310271120079800_4942_2862401_3.png[/img][/align][align=center][font='宋体'][size=16px]mPEG_pALD APC系统分析色谱图[/size][/font][/align][font='宋体'][size=16px]2.超高效凝胶色谱法测定脂溶性高分子材料的分子量及其分布[/size][/font][font='宋体'][size=16px]采用APC系统,以聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)为对照品,建立了GPC法测定脂溶性高分子材料如聚丙烯酸酯、聚酰胺树脂等的相对分子质量及其分布,本方法对10种不同分子量的PMMA标样分离良好,特别是对于分子量相差不到1000的PMMA 如2460 Da、1750 Da、904 Da,都能得到良好的分离。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310271120081167_3965_2862401_3.png[/img][/align][align=center][font='宋体'][size=16px][color=#444444]PMMA[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#444444]对照品(分子量[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#444444]904/1750/2460/3480/4680/6780/9680/14700/18700/31000[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#444444])的[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#444444]APC[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#444444]系统重叠[/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#444444]色谱图[/color][/size][/font][/align]
大神们用的是哪家的超高效液相色谱,多少钱买的,用到现在感觉怎么样。
近些年来,随着科技的飞速发展,液相色谱技术应用也逐渐步入快车道,沃特世、岛津、安捷伦、戴安等分析仪器知名公司都相继研发成功并将最新的的超高效液相色谱仪推向市场,业界内外纷纷一味追求高精尖,追逐快速高效,殊不知液相色谱类仪器并非一味追求快速,而是好比谈恋爱,要看是不是适合自己的工作要求,这其中难免就会涉及到分析项目、分析精度以及工作成本等等一系列因素,本文就自己心得以及所学在此做与大家一起来探讨交流: 首先,众所周知,高效液相色谱是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有异极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入不同类型的检测器进行检测,从而实现对样品的定性定量分析。而超高效液相色谱与高效液相色谱原理基本相同,不同之处就是:1、色谱柱发生了变化 小颗粒高性能微粒固定相出现,2、流动相超高压输液泵出现 3、采集速度更快的检测器出现 ,主要因素就是基于这三点。但是,超高效液相色谱仪并非针对每一种分析样品,每一种分析化合物都如此高效快速,必须因样而选,否则的话,就会适得其反,事倍功半,前功尽弃。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508201023_561650_2328678_3.jpg 笔者单位去年采购一台 Waters ACQUITY UPLC H-CLASS,在国内环境监测业界还算是高大尚的液相色谱仪器,根据介绍可以实现:无需更改现有工作流程即可获得UPLC性能灵活和简便的四元溶剂混合和直接注射取样 完美兼容HPLC方法,无缝转换至UPLC方法 方法转换包可保证分离方法的一致性,流速范围0.010 ~ 2.000 mL/min,以0.001 mL增速步进,最高操作压力:15,000 psi最高到1 uL/min,9,000 psi最高到2 mL/min,据于此类性能,加之单位以前有一台服役多年面临脱保的安捷伦LC-1100,可以接班服役,同时提高工作效率,不必再劳神费心,一个样品等待大把时间,因此,趁着还在维保范围内,迅速入手,希望短时间之内形成"作战“能力,投入实战。 恰逢迪马科技在论坛搞一个色谱柱试用活动,遂参加尝试用液相色谱法分析水中苯系物,以做直观比较:色谱柱型号:迪马 DiamonsilPlus (固定相),250mm(柱长)4.6 mmx5 μm色谱柱型号:Agilent Eclipse PAH固定相),250mm(柱长) 4.6 mm x 5 μm WATERS XBridge C18 250mm(柱长)4.6 mmx 5 μm 以及 UHPLC WATERS 50mm(柱长)2.1mm x 1.7 μm,其中HPLC分析条件如下: 流动相: 甲醇 :水= 65: 35 (如有梯度请注明梯度表)流速: 1.0 mL/min柱温: 40 ℃检测器:UV 260 nm 或其他检测器 进样量: 10 μL分析结果如下:Diamonsil Plus谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508201112_561654_2328678_3.jpgAgilent Eclipse PAHhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508201113_561655_2328678_3.jpgWATERSXBridge C18http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508201114_561656_2328678_3.jpg上述结果分析:分析比较:Diamonsil Plus与Agilent EclipsePAH WATERS XBridge C18所分析谱图比较:前者为甲醇中的六中苯系物谱图,后者为二硫化碳中的苯系物,其他条件相同,前者流速为1mL/min进样量为20ul,后者流速为0.5mL/min进样量为5ul,通过比较可以基本得出如下结论:Diamonsil Plus 可以承受大进样量的化合物分析,柱效表现良好,在20/5的情况下,峰形保持较好;Agile
[b]超高效液相色谱串联质谱法是什么方法[/b]
waters的超高效液相色谱仪价格,大概是个什么价格?
有没有相关标准?我们公司买了耐压103MPa的色谱仪,领导非得要对外宣传叫 “超高效”,而且还得让我们找到这种说法的参考依据。我听说40Mpa内的是高效,大于40就是超高效,对吗?
市场上常见的四款进口超高效液相色谱仪比拼,欢迎拍砖!
单位可能会获得一个项目的资助,目前正在争取中,什么时候能批准不知道,但是作为技术人员,想把宝贵的资金得最好的性价比,所以提前来做准备工作。做中药分析,药物代谢使用,想买一台超高效液相色谱仪,不知大家有没有了解的,需要采购时注意什么情况。比如,目前都有哪些厂家,仪器的售后比较靠谱。各个厂家仪器特点,大致价格范围。欢迎大家发表。看信息量的程度,给加分。