水相凝胶色谱与普通凝胶色谱的区别?请高手多多指教,有相关资料更好,谢谢!
我先把本板快的知识与大家的问题归归类,大家看看那些是需要留住让后来人看看学习的。大家认为没有必要留驻的帖子(连接),用站内短消息与我联系。[b]另外如果大家发现有我整理的内容里有任何问题,都可以用站内短消息与我联系。另外如果大家对凝胶色谱版块的建设有任何建议或意见可以发新帖或跟帖[/b][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060912/552188/]真希望凝胶版可以旺起来![/url][b]我都会根据情况给予一定的奖励。[/b]谢谢大家!![b]整理一下本板块的知识点:[/b]如何学习凝胶色谱啊?[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20050228/129987/[/url]凝胶色谱技术:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20031110/18764/[/url]凝胶层析法技术简介:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060421/401834/[/url]凝胶层析的知识(基本原理,凝胶类型与选择,凝胶的处理):[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20070110/704521/[/url]《色谱法》电子书:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20050105/114592/[/url]《仪器分析》课件--色谱法:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20040508/46902/[/url]色谱中的一些符号:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20040107/24878/[/url]色谱术语:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20041012/84241/[/url]凝胶色谱(电子书):[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060416/396030/[/url]凝胶色谱手册(英文著作,515页):[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20051220/305998/[/url]凝胶色谱的讲义第一章(1):[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20051102/265886/[/url]凝胶色谱(GPC)电子教材:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20041220/109533/[/url]GPC操作规程:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060328/376128/[/url]凝胶色谱仪检定方法:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20050928/245321/[/url]GPC是指凝胶色谱仪?[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060919/560251/[/url]高温GPC:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060605/448959/[/url]GPC软件-现场培训教材:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20061120/634044/[/url]需要介绍GPC组成方面的资料:[url]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20061106/617390/[/url][em61]
[color=#444444]目前正在实验室做课题需要用到凝胶色谱,请教大家,测酪蛋白溶液(里面还含有一些乳化剂)溶剂是纯水,凝胶色谱要用得流动相和柱子分别是什么?[/color]
凝胶色谱的资料又积攒了不少,接力前辈,汇总一下,方便查找。要注意帖子的回复,里面也有宝藏哦~~【原创】凝胶色谱的应用 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20061228/685978/【资料】GPC分析的聚合物可以选择的良溶剂方案 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101214/2999859/【资料】最近凝胶色谱相关的文献资料http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100401/2476606/ 【资料】GPC高级课程培训-柱选择 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110519/3315288/【资料】《凝胶渗透色谱操作手册》北京大学化学院 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101228/3045365/【分享】凝胶色谱的讲义 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101106/2908677/【资料】凝胶色谱柱操作 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101105/2907744/【分享】凝胶色谱仪标准操作规程(SOP) http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101012/2855479/【原创】多功能凝胶色谱仪(GPC)测聚合物分子量分布 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100510/2546330/【资料】凝胶色谱法的基本理论 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100406/2483413/下面是前辈整理的资料:2010.4【资料】凝胶色谱 和 超临界流体色谱 资料汇总http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100411/2493256/2006年【公告】凝胶色谱版的知识点汇总! http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20061215/669019/
高分子工业材料及生物高分子分析是近年来新兴的课题。凝胶色谱是分离分析高分子组成及鉴定其性能的最好方法。高分子材料中填充各种助剂、乳化剂、分散剂等物的分离,色谱技术也独具特点。 ①控制高分子产品质量 在生产工艺中,可利用凝胶色谱测定聚合物小分子杂质。如用凝胶色谱测定环氧树脂中未聚合的双酚A,用C18柱分离小分子环氧化合物,小分子聚苯乙烯或不能成膜的聚脂等,用以鉴定聚合物的质量。 ②测定聚合物的分子量分布宽度 分子量大小和分子量分布宽度是衡量聚合物质量的一种重要指标,用凝胶色谱可以测定。 ③高温凝胶色谱测聚合物的老化、降解现象及分级。如测定聚乙烯分子量应为四万左右,通过分析可将分子量1000以下的聚乙烯蜡分开。还可用来观察高密度聚乙烯的氧化过程,观察聚苯乙烯、环氧树脂、聚磺酸脂、尼龙及聚醚聚砜等的降解情况。 ④测定高分子材料的适用性 日常食品的高分子材料包装的很多,如果测定食品中有高分子材料,则说明这种高分子材料不适于做食品和包装。
耗材配件栏目,想在液相色谱柱的分类里,添加凝胶色谱柱,现做以下调查,请大家多多支持,多多关注。耗材配件:http://www.instrument.com.cn/Consumables/ 液相色谱柱:http://www.instrument.com.cn/Consumables/P1903.htm1、是否希望增加凝胶色谱柱的分类,是否方便查找?2 、对液相色谱柱的分类,有何建议?3、市面的凝胶色谱柱,现在都有哪些厂家?4、各家都有什么主推的特点?5、。。。。。。
凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography、GPC)) http://chemlab.gzhu.edu.cn/gzhugfz/fenxishouduan/4.jpg 1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定,而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物。(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开) 1.基本原理1.1.分离原理:让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱,柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙(较大)和粒子内的通孔(较小)。当聚合物溶液流经色谱柱时,较大的分子被排除在粒子的小孔之外,只能从粒子间的间隙通过,速率较快;而较小的分子可以进入粒子中的小孔,通过的速率要慢得多。经过一定长度的色谱柱,分子根据相对分子质量被分开,相对分子质量大的在前面(即淋洗时间短),相对分子质量小的在后面(即淋洗时间长)。自试样进柱到被淋洗出来,所接受到的淋出液总体积称为该试样的淋出体积。 当仪器和实验条件确定后,溶质的淋出体积与其分子量有关,分子量愈大,其淋出体积愈小。(1) 体积排除 (2) 限性扩散 (3) 流动分离 1.2.校正原理:用已知相对分子质量的单分散标准聚合物预先做一条淋洗体积或淋洗时间和相对分子质量对应关系曲线,该线称为“校正曲线”。聚合物中几乎找不到单分散的标准样,一般用窄分布的试样代替。在相同的测试条件下,做一系列的GPC标准谱图,对应不同相对分子质量样品的保留时间,以lgM对t作图,所得曲线即为“校正曲线”。通过校正曲线,就能从GPC谱图上计算各种所需相对分子质量与相对分子质量分布的信息。聚合物中能够制得标准样的聚合物种类并不多,没有标准样的聚合物就不可能有校正曲线,使用GPC方法也不可能得到聚合物的相对分子质量和相对分子质量分布。对于这种可以使用普适校正原理。1.2.1.普适校正原理:由于GPC对聚合物的分离是基于分子流体力学体积,即对于相同的分子流体力学体积,在同一个保留时间流出,即流体力学体积相同。两种柔性链的流体力学体积相同: 1M1=2M2k1M1α1+1=k1M2α2+1 两边取对数:lgk1+(α1+1)lgM1=lgk2+(α2+1)lgM2即如果已知标准样和被测高聚物的k、α值,就可以由已知相对分子质量的标准样品M1标定待测样品的相对分子质量M2。 2.实验部分直接法:在测定淋出液浓度的同时测定其粘度或光散射,从而求出其分子量。间接法:用一组分子量不等的、单分散的试样为标准样品,分别测定它们的淋出体积和分子量,则可确定二者之间的关系。2.1.仪器:GPC仪的组成:泵系统、(自动)进样系统、凝胶色谱柱、检测系统和数据采集与处理系统。1.1.泵系统:包括一个溶剂储存器、一套脱气装置和一个高压泵。它的工作是使流动相(溶剂)以恒定的流速流入色谱柱。泵的工作状况好坏直接影响着最终数据的准确性。越是精密的仪器,要求泵的工作状态越稳定。要求流量的误差应该低于0.01mL/min。 2.1.2.色谱柱:GPC仪分离的核心部件。是在一根不锈钢空心细管中加入孔径不同的微粒作为填料。每根色谱柱都有一定的相对分子质量分离范围和渗透极限,色谱柱有使用的上限和下限。色谱柱的使用上限是当聚合物最小的分子的尺寸比色谱柱中最大的凝胶的尺寸还大,这时高聚物进入不了凝胶颗粒孔径,全部从凝胶颗粒外部流过,这就没有达到分离不同相对分子质量的高聚物的目的。而且还有堵塞凝胶孔的可能,影响色谱柱的分离效果,降低其使用寿命。色谱柱的使用下限就是当聚合物中最大尺寸的分子链比凝胶孔的最小孔径还要小,这时也没有达到分离不同相对分子质量的目的。所以在使用凝胶色谱仪测定相对分子质量时,必须首先选择好与聚合物相对分子质量范围相配的色谱柱。2.1.3.填料(根据所使用的溶剂选择填料,对填料最基本的要求是填料不能被溶剂溶解):交联聚苯乙烯凝胶(适用于有机溶剂,可耐高温)、交联聚乙酸乙烯酯凝胶(最高100℃,适用于乙醇、丙酮一类极性溶剂)多孔硅球(适用于水和有机溶剂)、多孔玻璃、多孔氧化铝(适用于水和有机溶剂) 2.1.4.柱子:玻璃、不锈钢2.1.5.检测系统:通用型检测器:适用于所有高聚物和有机化合物的检测。有示差折光仪检测器、紫外吸收检测器、粘度检测器。2.1.6.示差折光仪检测器:溶剂的折光指数与被测样品的折光指数有尽可能大的区别。2.1.7.紫外吸收检测器:在溶质的特征吸波长附近溶剂没有强烈的吸收。2.1.8.选择型检测器:适用于对该检测器有特殊响应的高聚物和有机化合物。有紫外、红外、荧光、电导检测器等。2.2.操作:2.2.1.溶剂的选择: 能溶解多种聚合物;不能腐蚀仪器部件;与检测器相匹配。2.2.2.把激光光散射与凝胶色谱仪联用,在得到浓度谱图的同时,还可得到散射光强对淋出体积的谱图,从而计算出分子量分布曲线和整个试样的各种平均分子量2.2.3.激光光散射实验中必须对样品严格除尘,溶液中的灰尘会产生强烈的光散射,严重干扰聚合物溶液光散射的测量。溶液除尘是光散射成败的关键。首先是溶剂除尘,配置测试样品的溶剂应进行精馏,并经过0.2μm超滤膜过滤后方可使用。配好的溶液也要用0.2μm的超滤膜过滤。另外,测试中所用的器械,如:注射器等,使用前要用洗液浸泡,清水强力冲洗
最近想采购一些设备,有同事提到了凝胶色谱,我们是做食品和酒类检测,不知道这个凝胶色谱对我们的检测会有那些项目的应用呀?还有就是食品中塑化剂的检测,有个标准中提到一个前处理设备是凝胶色谱,不知道这两个是不是一个概念呀?我不懂,希望给我指教啊!谢谢
最近有个实验要用到凝胶色谱仪净化样品,可我公司没有,对这个也不太懂。请问有没有其他可替代的办法?能否买方法中要求的凝胶色谱柱,接到液相上分离?样品基质中有大量高分子脂类,试过SPE小柱,效果不佳,干扰太大。或者有没有类似SPE小柱那样的凝胶色谱小柱,可以起到分离大分子物质的东西?
本单位有一台GPC,目前在做农残的净化方法研究吗,但是我们买的美国J2的凝胶色谱净化系统,净化效果比较差,询问工程师说,我们的凝胶柱配备的是快速柱,净化效果比较差,因此想询问各位高手,推荐几款凝胶色谱柱给我们,我们是用来净化辣椒酱,酱油之类的复杂基体。谢谢
[font=宋体]链接:[/font]https://bbs.instrument.com.cn/topic/7685771问题描述:[font=宋体]凝胶色谱使用注意事项有哪些?[/font]解答:[font=宋体]使用凝胶色谱仪的一些注意事项:[/font]a)[font=宋体]溶剂准备:使用[/font]HPLC[font=宋体]纯溶剂,如有必要,进行过滤。保证溶剂的相溶性,避免使用对不锈钢有腐蚀性的溶剂。[/font]b)[font=宋体]溶剂脱气:超声脱气。[/font]c)[font=宋体]样品准备:过滤样品,确保样品中不含固体颗粒,用流动相溶解样品。[/font]d)[font=宋体]色谱柱的保护:[/font](1)[font=宋体]防止气体进入色谱柱。凝胶柱是不允许气泡进入的,否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])色谱柱的清洗。为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中,在每次的样品分析工作完成之后,都应及时地清洗色谱柱。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])色谱柱的存放。如果色谱柱暂时不用,存放时要注意以下几点:短期放置,凝胶柱则用蒸馏水来冲洗,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可;长期不用时,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱。[/font][font=宋体]([/font]4[font=宋体])不要高温使用。[/font][font=宋体]([/font]5[font=宋体])不要高压冲洗柱子。[/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》
[color=#444444]我们现在在分析水溶性样品的凝胶色谱柱(分析聚乙二醇类样品),用得是shodex的为型号OHpak SB-802.5和OHpak SB-803 HQ的凝胶色谱在,我们想自制相当的液相柱,请问可以自制吗?填料和空柱哪能买到呐?[/color]
使用凝胶色谱仪的一些注意事项: 溶剂准备:使用HPLC纯溶剂,如有必要,进行过滤。保证溶剂的相溶性,避免使用对不锈钢有腐蚀性的溶剂。 溶剂脱气:超声脱气。 样品准备:过滤样品,确保样品中不含固体颗粒,用流动相溶解样品。 色谱柱的保护: (1) 防止气体进入色谱柱。凝胶柱是不允许气泡进入的,否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。因此,为了防止气泡进入色谱柱,一定要使用经过脱气的流动相,并且要严格按照下列步骤来安装色谱柱。a.拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝,观察是否有溶剂渗出;b.如有溶剂渗出,即可将色谱柱接到管路上,以避免气泡的进入;c.如无溶剂渗出时,表明色谱柱的此端已经进去空气了,此时,可将色谱柱的出口端接到进样阀上,以流动相来反方向冲洗色谱柱,以便将柱内的空气排除。最好以0.2ml/min的小流量来冲色谱柱,如果溶剂的流速太快或者是压力突然的上升都将会导致柱性能的降低;d.如果流出的溶剂里不含有气泡,说明柱内的气体已经被排出了,再将色谱柱以正确的方向接好,这样气泡就进不到色谱柱里面了。 (2) 色谱柱的清洗。为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中,在每次的样品分析工作完成之后,都应及时地清洗色谱柱。首先要用对被测样品洗脱能力强的溶剂来洗脱色谱柱,以分析工作中常用的反相色谱分析法为例,因其先流出的物质是极性大的物质,此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗脱下来,洗脱液的用量一般为柱体积的20倍即可。如果流动相是缓冲溶液,则应先用蒸馏水来冲洗色谱柱,以冲掉柱内的盐,然后再用合适的溶剂来冲洗。 凝胶滤过色谱法(Gel Filtration Chromatography)中所使用的凝胶柱常用缓冲溶液做流动相,用完之后当然要用蒸馏水来冲洗。如果是连续操作,可以将缓冲溶液置于柱内过夜,但最好是维持小流速(<0.5ml/min)以防止缓冲盐的析出,如果流动相中含有卤化物,即使是停一夜,也必须要用蒸馏水将色谱柱冲洗干净,以防止它们对柱体的腐蚀。 (3) 色谱柱的存放。如果色谱柱暂时不用,存放时要注意以下几点:a.几天之内的短期放置,凝胶柱则用蒸馏水来冲洗,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。b.如果色谱柱长期不用,仅用上述方法来处理就不行了,这时应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,凝胶柱则不能用水了,因柱内如果有微生物的生长则会使柱效降低,此时应用0.05%的NaNs水溶液(防腐剂)来冲洗色谱柱,再将色谱柱封严。色谱柱长期放置时,一定要将色谱柱的两端封严,以防止由于溶剂挥发而造成的柱填料干缩现象,因这可导致柱效的严重降低。c.色谱柱应贮存在室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。 (4)不要高温使用。 (5)不要高压冲洗柱子 对仪器的维护和保养进行记录。
[b]凝胶色谱的应用[/b]:1、[b]分子量的测定[/b]根据凝胶色谱的原理,样品物质在凝胶色谱柱中的洗脱性质与该物质的分子大小有关。因此选用不同的凝胶色谱柱后,能方便地测定物质的分子量。用此法测定分子量时,可以在各种PH值、离子强度和温度条件下进行。所测定的物质可以是天然状态,也可以是变性后的。实际应用中,可先选用一系列已知分子量的标准样品在同一色谱条件下进行色谱分离分析,并以保留体积(或保留时间)对分子量的对数作图,在一定分子量范围内得到一直线(标准曲线),而后根据待测定物在同一条件下的保留体积(或保留时间),从标准曲线上查得/计算出其分子量。目前用本法测定分子量的应用范围非常广泛。[u]高分子物质的分子量及其分布的测定[/u]:特别是近年来,随着各种高分子材料的问世,人们对高分子科学的不断探索,高聚物的分子量及其分布的测定显得尤为重要,成为科研和生产中不可缺少的测试项目之一。例如:常见的聚苯乙烯塑料制品,其分子量为十几万,如果聚苯乙烯的分子量低至几千,就不能成型;相反,当分子量大到几百万,甚至几千万,它又难以加工,失去了实用意义。科研和生产上通过控制高聚物的分子量及其分布宽度指数D(D=Mw/Mn)、分子量微分分布曲线、分子量积分分布曲线来生产出性能最佳的高聚物产品。同样,除了快速测定分子量及其分布以外,凝胶渗透色谱还广泛被用于研究高聚物的支化度,共聚物的组成分布及高聚物中微量添加剂的分析等方面。如果配以在线的绝对分子量检测器(如:LALLS、Multi-Angle LS、Dual-Angle LS等),凝胶渗透色谱可以测定高聚物的绝对分子量。[u]蛋白质分子量的测定[/u]:现代蛋白质药物的研究中,凝胶色谱法测定分子量是蛋白质分子量的快速测定方法之一。一般选用标准分子量蛋白质(如:铁蛋白、醛缩酶、牛血清白蛋白、卵清蛋白、胃蛋白酶、核糖核酸酶,这就是一组分子量从300KD到14KD的标准品)。
如题,大家的凝胶色谱有实时显示流量吗?假设设定1.0ml/min,误差相差多少?我觉得流量对标准曲线的建立有很大关系。我的凝胶色谱没有显示实际流量是多少,我发现有时会流量变很小,这是怎么回事?单向阀有问题?
5009.19第一法做有机氯净化是用凝胶色谱净化,我们没有全自动凝胶渗透色谱系统,选择手动的话问题就来了,Bio-Beads S-X3聚苯乙烯凝胶100g大概三千块钱,按标准要求装一个要多少克凝胶?装的凝胶色谱柱过完一个样还可以继续过另外的样品吗?自己装的凝胶色谱柱可以用多久?麻烦做过的前辈给点指导····
哪位高手能告诉我装凝胶色谱柱的匀浆液用什么好吗?
[color=#ff483f][size=5]凝胶色谱相关理论 征集1.什么是凝胶色谱?2.什么情况下用凝胶色谱?3.凝胶色谱和一般的HPLC有什么区别?4.凝胶色谱的优点及缺点?5.你用什么牌子的凝胶色谱?6.你所在实验室有几台凝胶色谱,一般HPLC又有几台?[color=#6eb5ff]请跟帖,我会给大家加分![/color][/size][/color]
[color=#444444]凝胶色谱装柱的几个问题,在装柱之前要对凝胶进行溶胀,我准备用G-15的,直接用缓冲液(我用的是tris-hcl)进行沸水溶胀2h,这样可以不呢?还有G-15装一个柱子需要多少克?用缓冲液进行溶胀的时候的用量大概是多少呢?谢谢~~[/color]
凝胶渗透色谱色谱好东西如题 点击浏览该文件[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=20652]凝胶渗透色谱色谱[/url]
凝胶色谱法GPC[b]分析原理:[/b]样品通过凝胶柱时,按分子的流体力学体积不同进行分离,大分子先流出[b]谱图的表示方法:[/b]柱后流出物浓度随保留值的变化[b]提供的信息:[/b]高聚物的平均分子量及其分布根据所用凝胶的性质,可以分为使用水溶液的凝胶过滤色谱法(GFC)和使用有机溶剂的凝胶渗透色谱法(GPC)。
各位朋友们,我的课题是分离检测陈酿红酒中的聚合色素。在色素检测的领域,常规的是HPLC(MS),采用C18反相色谱。但只是对单体花色苷和寡聚花色苷有好的效果。聚合度提升(花色苷,黄酮类物质的互相聚合物)导致色谱分离效果下降,显示出的是一大块不能分开的大峰(hump)。这是现在问题的瓶颈所在。因为聚合色素的分子量一般都在1000以上,所以想试一试凝胶色谱的分子筛效应筛选,但是我之前没有做过分子筛,对之很不熟悉。所以想请各路朋友探讨一下方法的可行性。下面是我针对凝胶色谱的几个疑问,希望有经验的朋友帮我解答:、1,凝胶色谱是一个配备有特殊检测器和别的装置的大型仪器吗?还是只是色谱柱是凝胶色谱柱?如果将HPLC(MS)的色谱柱更换为凝胶色谱柱,是不是就达到了凝胶分离的效果,操作上可不可行?2,因为聚合色素的结构复杂,同分异构体也会很多,我自认将其每个分离纯化出来都是不可能的工作。而且,因为凝胶色谱的分离只能达到将不同水力半径的物质分离的目的所以,其最终的分离效果如何仍然未知,望有经验的朋友指点一二,不胜感激!3,我认为,聚合色素分离的关键在于色谱柱,只有符合聚合色素物理化学特性的色谱柱才能解决分析检测的能力。希望有详细介绍和讲解色谱柱技术的朋友不吝分享一下资源,小弟QQ邮箱为543351984@qq.com,万分感激!
凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。[B]凝胶色谱-分类[/B]根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子, [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903190825_139314_1608025_3.jpg[/img]凝胶过滤色谱柱 如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离油溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。近年来,凝胶色谱也广泛用于分离小分子化合物。化学结构不同但相对分子质量相近的物质,不可能通过凝胶色谱法达到完全的分离纯化的目的。[B]凝胶色谱-分子筛效益[/B]一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出,这种现象叫分子筛效应。具有多孔的凝胶就是分子筛。各种分子筛的孔隙大小分布有一定范围,有最大极限和最小极限。分子直径比凝胶最大孔隙直径大的,就会全部被排阻在凝胶颗粒之外,这种情况叫全排阻。两种全排阻的分子即使大小不同,也不能有分离效果。直径比凝胶最小孔直径小的分子能进入凝胶的全部孔隙。如果两种分子都能全部进入凝胶孔隙,即使它们的大小有差别,也不会有好的分离效果。因此,一定的分子筛有它一定的使用范围。 [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903190826_139315_1608025_3.jpg[/img]凝胶色谱法原理 在凝胶色谱中会有三种情况,一是分子很小,能进入分子筛全部的内孔隙;二是分子很大,完全不能进入凝胶的任何内孔隙;三是分子大小适中,能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分。大、中、小三类分子彼此间较易分开,但每种凝胶分离范围之外的分子,在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。对于分子大小不同,但同属于凝胶分离范围内各种分子,在凝胶床中的分布情况是不同的:分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶孔隙内,而分子较小的可进入较多的凝胶颗粒内,这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短,分子较小的移动距离较长。于是分子较大的先通过凝胶床而分子较小的后通过凝胶床,这样就利用分子筛可将分子量不同的物质分离。另外,凝胶本身具有三维网状结构,大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大,小分子通过时阻力较小。分子量大小不同的多种成份在通过凝胶床时,按照分子量大小排队,凝胶表现分子筛效应。
大家好 因为不知凝胶色谱怎么找,所以上这里找高手求救。 我初次用WATERS的凝胶色谱仪测树脂分子量,用四氢呋喃作流动相。 正常情况下,所得色谱主峰是凸起对称的抛物线(不好意思,不会传图谱); 此次测得的色谱主峰却是急剧上升的陡直曲线,下落时才有一点弧度,请教是什么原因并解释一下,感激不尽。 可以确定不是样品的问题。 测试之前往吸液瓶里加入了与里面不同批号的新四氢呋喃,想来不会有影响吧。
如题,请问凝胶色谱的原理是什么?
1、凝胶渗透色谱GPC的概念2、凝胶渗透色谱GPC的原理3、凝胶渗透色谱GPC的用途4、聚合物的各种平均分子量计算 5、凝胶渗透色谱GPC 的仪器组成6、影响凝胶渗透色谱数据置信度的因素分子量的一般定性关系之一: 性质/工艺参数 随MW增加§融化粘度 向上§冲击强度 向上§加工温度 向上§脆性 向上§拉伸能力(纤维) 向下§融流 向下G聚合物的支化度及粘度系数--------------粘度检测器G聚合物的功能基团,如短链支化--------------红外检测器G聚合物的绝对分子量及回转半径------------------激光光散射检测器
离子色谱和水相凝胶色谱有哪些相同点和差异?不是列数据的那种。本人用过凝胶色谱,正欲学习离子色谱,看一些资料发现有些类似,所以想求教学习离子色谱的时候那些GPC的知识可以借鉴,那些又要特别注意不要混淆。谢谢~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif
是关于介绍凝胶色谱的一本电子书,共392页,为PDF格式。希望对大家有用!来源:食品伙伴网。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=16888]凝胶色谱[/url]
凝胶色谱是什么
凝胶色谱的原理是什么?