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烟包中检测规程

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  • 面包中脱氢乙酸钠的检测

    脱氢乙酸钠是一种常见的食品添加剂,用于延长食品的保质期,但过量摄入会对人体造成伤害。因此,对面包中的脱氢乙酸钠进行检测至关重要。下面,我将为大家详细介绍检测过程中的操作要点以及一些常见的故障排除方法。 检测前的准备工作 选择合适的检测设备:常用的检测设备有高效液相色谱仪、气相色谱仪等。确保设备处于良好状态,并定期进行校准。 准备试剂和标准品:我们需要准备脱氢乙酸钠标准品、甲醇(色谱纯)、磷酸二氢钠等试剂。确保所有试剂均在有效期内,并严格按照说明书配制。 样品采集与处理:采集面包样品后,应尽快进行处理。常用的处理方法有粉碎、提取、净化等步骤。确保样品处理的每一步都严格按照操作规程进行,以保证检测结果的准确性。 操作要点 高效液相色谱法(HPLC): 流动相的选择:常用的流动相为甲醇和水,加入适量的磷酸二氢钠调节pH值。流动相的比例和pH值对检测结果有很大影响,需根据实际情况进行调整。 检测波长的选择:脱氢乙酸钠的最大吸收波长一般在230nm左右,选择合适的检测波长可以提高检测的灵敏度。 进样量的控制:进样量不宜过大,否则会导致色谱峰变形。一般进样量为10-20μL。 气相色谱法(GC): 衍生化处理:由于脱氢乙酸钠极性较强,需要进行衍生化处理,使其转化为挥发性较强的衍生物。常用的衍生化试剂有BSTFA(双(三甲基硅基)三氟乙酰胺)等。 色谱柱的选择:选择适合检测脱氢乙酸钠的色谱柱,如DB-5MS柱。确保色谱柱在使用前进行老化处理,以去除杂质。 进样方式:气相色谱法常用的进样方式有分流进样和不分流进样。根据样品的实际情况选择合适的进样方式。 故障排除 检测结果偏低: 检查样品处理过程:确保样品粉碎充分,提取和净化步骤操作正确。 检查仪器状态:确保仪器处于良好状态,流动相和色谱柱选择正确。 重新配制标准品溶液:标准品溶液可能因保存不当而失效,需重新配制。 检测结果重复性差: 检查进样系统:确保进样针和进样口清洁,无堵塞现象。 检查色谱柱状态:色谱柱可能因使用时间过长而性能下降,需进行老化处理或更换新的色谱柱。 优化实验条件:适当调整流动相比例、检测波长等实验条件,以提高检测结果的重复性。 出现杂峰: 检查样品处理过程:确保样品处理过程中无杂质引入。 检查试剂纯度:使用的试剂可能含有杂质,需更换高纯度的试剂。 优化色谱条件:适当调整流动相比例、流速等色谱条件,以改善峰形。 通过以上操作要点和故障排除方法的介绍,相信大家对面包中脱氢乙酸钠的检测有了更深入的了解。在实际操作中,我们应严格遵守操作规程,确保检测结果的准确性和可靠性。

  • 如何理解39号令中第十三条(三)中"违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法"?

    网友提问:想了解“违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法”的具体含义是什么?比如强制性标准“GB 11607”中指定的检测方法是“GB 7475”,但实际用“HJ 700”检测并进行合格判定,是否属于“违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法”?认可与检验检测监督管理司回复:“国家有关强制性规定”具体包括法律法规、强制性国家标准以及技术性规范等具有强制执行力的相关规定。根据《强制性国家标准管理办法》第四十一条的相关规定,强制性国家标准解释草案由组织起草部门研究提出,建议咨询有关行业主管部门。

  • 如何理解39号令中第十三条(三)中"违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法"?

    网友提问:想了解“违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法”的具体含义是什么?比如强制性标准“GB 11607”中指定的检测方法是“GB 7475”,但实际用“HJ 700”检测并进行合格判定,是否属于“违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法”?认可与检验检测监督管理司回复:“国家有关强制性规定”具体包括法律法规、强制性国家标准以及技术性规范等具有强制执行力的相关规定。根据《强制性国家标准管理办法》第四十一条的相关规定,强制性国家标准解释草案由组织起草部门研究提出,建议咨询有关行业主管部门。

  • 如何理解39号令中第十三条(三)中"违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法"?

    [font=PingFangSC-Regular][size=16px][color=#2a52e1][b]? 网友提问:[/b][/color][/size][/font][font=PingFangSC-Regular]想了解“违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法”的具体含义是什么?比如强制性标准“GB 11607”中指定的检测方法是“GB 7475”,但实际用“HJ 700”检测并进行合格判定,是否属于“违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法”?[/font][font=PingFangSC-Regular][size=16px][b][color=#2a52e1]? 认可与检验检测监督管理司回复:[/color][/b][/size][/font][font=PingFangSC-Regular]“国家有关强制性规定”具体包括法律法规、强制性国家标准以及技术性规范等具有强制执行力的相关规定。根据《强制性国家标准管理办法》第四十一条的相关规定,强制性国家标准解释草案由组织起草部门研究提出,建议咨询有关行业主管部门。[/font]

  • JJG液相检定规程中荧光检测器示值误差测试

    求助各位大神!请问有按照JJG液相检定规程中荧光检测器示值误差测试方法进行最大激发波长测试的吗?我做出来的是280nm,而且用荧光分光光度计测试也是这个结果,最大发射波长是正确的。有做过的大神分享一下吧。谢谢

  • 臭氧气体检测管标准操作规程(SOP)

    关键词:臭氧气体检测目的:建立一个使用臭氧气体检测管的操作规程背景知识:略原理:利用臭氧氧化检测管内还原性兰色化学物质褪色的原理主体内容:1.检测工具1.1真空式采样器(100ml)(北京市劳保所科技发展公司)(存放处:QC理化室冰箱)1.2 气体检测管(O3;2-50ppm)(北京市劳保所科技发展公司)(存放处:QA办公室储物柜)1.3 秒表2.检测方法2.1 检查真空采样器手柄是否在零位,手柄采样标志红点是否对准采样器筒体采样标志线。如否,恢复零位,并将手柄采样标志红点对准采样器筒体采样标志线。2.2 测定前将气体检测管封口插入采样器前端侧面圆孔,依次撇断检测管出气端、进气端封头。检查封头开放情况,应开放,否则重新撇断。2.3 将气体检测管出气端插在采样器进气口上,塞紧。2.4 将测定管进气口接待测空气,将采样器手柄拉至第2档位,前后拉1次,观察秒表,控制进气时间为2~3分钟(0.6~0.9mm/秒),共采样100ml。2.5 待检测管中指示剂变色(兰色→白色)终止,取下检测管,从白色柱所到刻度,读出臭氧浓度。2.6 将真空采样器手柄恢复零位。3.注意事项3.1 臭氧气体检测管应在阴暗处保存。使用前检查指示剂颜色,应为兰色,如变色,不得使用。3.2 操作人员使用前应练习控制进气速度(2~3分钟,手柄速度0.6~0.9mm/秒),保证检测结果的可靠。3.3 采样时采样人员应戴防毒面罩,防止臭氧中毒。主要参考文献:略真空式采样器(100ml) 气体检测管(O3; 2-50ppm) 0http://img.dxycdn.com/upload/2006/05/09/80608808.jpg

  • 如何利用PID传感器检测烟包环保性

    如何利用PID传感器检测烟包环保性

    [align=left]“吸烟有害健康”这句话大家应该不陌生,现在很多公共场合已经禁止吸烟了,而且国家方面也越来越注意环保了,香烟里面很多物质其实是对环境有污染的,这时就要从源头解决污染问题,一些不正规包装的香烟往往一些挥发物都过量了,需要用到专业的仪器进行相应的检测,PID传感器就是利用光离子原理专门可以用来检测香烟包装中的VOC含量,那具体怎么操作呢?[/align]首先我们来说下PID传感器在香烟包装纸中VOC检测的原理吧:香烟包装中的VOC含量检测器采用PID传感器技术原理传感器,主要通过电离VOC气体获得VOC气体浓度。当VOC气体进入PID传感器检测器的气室时,VOC气体被PID传感器内置的UV灯电离,实际的离子浓度被电离后的离子量反射,数字信号被转换为仪器。我们可以直观地了解检测到的VOC气体浓度。那么到底如何在香烟包装中使用PID传感器来检测VOC含量呢?1、在新鲜空气环境中打开电源并检查电池电量是否符合规定要求:2、零点调整(或检查):将指针调整为零或在清洁空气中检查读数为零:3、现场测量和读数据,检测器应该等到指针稳定并且在读取测试数据后读数稳定:4、将便携式烟盒中的VOC含量检测器PID传感器移至新鲜空气环境,并在指示为0时关闭电源。通常,每种电子元器件都有各自的使用寿命,由于应用环境的不同他们各自的使用寿命也是不一样的,PID传感器也是一样,要想使用的久,就要定期进行保养维修,保证后续的正常运转。[img=,348,350]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810221518057130_6186_3422752_3.jpg!w348x350.jpg[/img]OFweek Mall里的英国alphasense 光离子PID气体传感器/TVOC传感器(大量程)-PID-A1在使用寿命上还是相对比较长的,预期寿命是五年左右(这个寿命是不包含灯泡跟电极盖的),如果保养得当的话也可以延长使用寿命:(1)经常检查您的PID传感器是否意外进水。检查PID传感器时,应取下探测器的通风罩进行清洁,以免堵塞 (2)PID传感器不得用于硫磺。在可燃气体浓度低于爆炸下限的条件下,应尽可能使用探测器。否则,组件可能会烧坏 (3)PID传感器不要在缺氧条件下使用,注意不要使用大量易燃气体直接喷射探头。光离子传感器丨PID传感器https://mall.ofweek.com/1889.html丨光离子气体传感器丨VOC传感器丨TVOC传感器

  • 水产品中己烯雌酚检测操作规程

    水产品中己烯雌酚残留量的测定 气相色谱-质谱法 1、安全要求操作时穿工作服、戴口罩和手套,提取、净化和浓缩时在通风橱中进行,避免溶液、气体吸入和皮肤接触,废液和废渣分别倒入专用容器中,按要求处理。2、急救措施皮肤接触到有机溶剂或酸、碱溶液后用清水清洗,有机溶剂或酸、碱溅入眼中用清水冲洗。3、适用范围该标准操作规程适用于鱼、虾可食部分中己烯雌酚残留量的测定。4、检测原理以乙酸乙酯提取样品中的己烯雌酚,固相萃取柱净化,硅烷化试剂衍生化后,用气相色谱-质谱仪测定,外标法定量。5、仪器设备5.1 气相色谱质谱联用仪:配备电子电离(EI)离子源。5.2 分析天平:感量0.000 01 g。5.3 旋涡混合器。5.4 高速冷冻离心机。5.5 氮吹仪。5.6 旋转蒸发仪。5.7 固相萃取装置。5.8 具塞玻璃离心管:10 mL。5.9 SLH固相萃取柱:500 mg,6 mL。5.10 样品反应瓶:2 mL,去活,螺纹口。6、试剂和溶液6.1 试验用水应符合GB/T 6682中一级水的规定。6.2 己烯雌酚标准品:纯度≥ 99%。 6.3 乙酸乙酯:色谱纯。6.4 甲醇:色谱纯。6.5 正己烷:色谱纯。6.6 无水碳酸钠:分析纯。6.7 碳酸钠溶液:10%(W/V),称取10 g无水碳酸钠,溶于100 mL水中。6.8 己烯雌酚标准贮备液:准确称取己烯雌酚标准品0.010 g,用甲醇溶解,定容于100 mL容量瓶中,即浓度为100 μg/mL的标准贮备液,置于-18℃冰箱中保存,有效期为6个月。6.9 己烯雌酚标准工作液:临用前,准确吸取己烯雌酚标准贮备液,用甲醇稀释成浓度为0.0

  • 真菌毒素检测仪检定规程介绍

    [font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#05073b]  真菌毒素检测仪检定规程介绍,真菌毒素检测仪检定规程是为了确保真菌毒素检测仪在正常使用之前和期间,其基本性能指标能够满足规定的要求,从而保证检测结果的准确性和可靠性。以下是关于真菌毒素检测仪检定规程的详细介绍:  一、检定前准备  检定仪器应按照制造厂家提供的操作手册进行检查、清洁和校准,确保仪器的正常运转、精度和稳定性。  检定仪器需进行零点、灵敏度和漂移校正测试,以确保仪器能够准确测量真菌毒素的含量。  检定仪器需采用标准物质进行检定测试,标准物质应符合国家相关检测标准的要求。  检定仪器需进行空白对照测试,以排除环境中可能存在的其他干扰因素对检定结果的影响。  二、检定过程  检定仪器应按照操作手册要求进行测试或标定,确保仪器的灵敏度、准确性和稳定性。  检定过程中,仪器应与检定程序保持一致,同时应注意仪器的运转状态和数据记录。  检定结束后,需记录检定结果,并对其进行数据处理和分析,计算出检定仪器的测量误差范围。  三、检定结果验收  检定结果需进行数据分析,并结合实际检测情况进行判断,判定检定结果是否符合国家相关检测标准的要求。  如检定结果符合检测标准的要求,则可以确认检定仪器的指标合格。  如检定结果不符合检测标准的要求,则需针对检定结果进行数据分析和原因排查,并对检定仪器进行维修和调整。  四、检定后维护  检定后需对检定仪器进行清洁、维护和保养,保证仪器的正常运转和使用寿命。  检定记录需进行保存,以备后续参考和比对,同时需定期对记录进行审核和更新。  检定后需及时反馈相关问题和意见,以完善检定工作和提高检定质量。  五、检定规程内容概述  范围:明确规程适用于哪些类型的真菌毒素检测仪,以及不适用的范围。  检定项目:包括仪器的基本性能、准确性、重复性、线性范围、稳定性等。  检定方法:详细描述每个检定项目的具体操作方法、使用的工具或试剂、以及合格标准。  检定周期:根据仪器的使用情况和关键性能指标,制定合理的检定周期。  记录与报告:明确记录检定结果的要求,以及编写和提交检定报告的格式和内容。  不合格处理:制定在检定过程中发现不合格时的处理措施,包括暂停使用、维修或更换等。  培训与监督:对负责进行检定的人员进行培训,确保他们具备相应的技能和知识。同时,建立监督机制,以确保规程得到正确执行。  通过以上规程的介绍,可以确保真菌毒素检测仪的检定过程规范、准确,从而保障食品安全和公众健康。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406201022152531_9846_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/color][/size][/font]

  • 【原创大赛】谈谈我们实验室的检验规程

    【原创大赛】谈谈我们实验室的检验规程

    我们实验室的检验规程规程是指规则和流程,检验规程对检验工作至关重要。只有遵照检验规程进行检验,才能使检验工作按章就绪、有根有据。常用的农产品(蔬菜水果类)检验规程有抽检规程和送检规程两种。抽检规程是指由检测机构到对方抽取样品进行检验的规则流程,包括8个环节。送检规程是指由委托方向检测机构送达样品进行检验的规则流程,包括10个环节。(一)抽检规程抽检规程是指由检测机构派出人员到对方抽取样品进行检验的规则流程,包括下达任务、制定方案、抽取样品、样品流转、检验报告、样品管理、资料存档、异议处理共8个环节。1.下达任务由检验中心负责人下达抽检任务。2.制定方案业务办公室制定具体方案,质量负责人审核批准。3.抽取样品抽样人员现场抽取样品,送交业务办公室。4.样品流转(1)样品接收登记:业务办公室负责对样品接受登记,保证样品的信息完整。(2)样品编号:业务办公室负责样品的实验室编号,保证样品编号的唯一性。(3)下达检验任务:业务办公室根据样品的检测项目向相关检验室下达检验任务,填写检验流程卡。(4)检验室接受任务:由检验室主任接受检验任务。(5)样品前处理:检验室按照检验依据对样品进行前处理。(6)检验:检验室对已处理的样品按规定时间完成检验。(7)审核原始数据:主检室主任对原始记录和相关图谱审核。(8)结果汇总:剩余样品、原始记录由室主任在检验流程卡上签名后,送交业务办公室汇总。样品到达实验室后,流转程序见下图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309091751_463296_1612314_3.jpg5.检验报告业务办公室编制检验报告,由技术负责人批准;业务办公室将检验报告正本发出。6.样品管理业务办公室根据《程序文件》中的保管、处理和销毁样品。7.资料存档业务办公室对检验报告副本和检验资料按规定存档。8.异议处理被抽检方或第三方对检验提出异议的,由质量负责人处理。(二)送检(委托)规程送检规程是指由委托方向检测机构送达样品进行检验的规则流程,包括提出申请、下达任务、制定方案、办理手续、送达样品、样品流转、检验报告、样品管理、资料存档、异议处理共10个环节。1.提出申请送检(委托)方向业务办公室提出送检(委托)申请,业务办公室评估后,上报检验中心负责人。2.下达任务由检验中心负责人下达送检(委托)任务。3.制定方案业务办公室制定具体方案,质量负责人审核批准。4.办理手续业务办公室负责《委托检验合同》的完成,合同内容应包括送检(委托)方信息、对样品的要求、样品的状态、检验项目、检验依据、异议处理、样品处理方式和保存期、双方权利和义务等,并注明送检(委托)方对样品及其相关信息的真实性负责。5.送达样品送检(委托)方必须携带单位介绍信或身份证,样品要资料齐全,信息真实。业务办公室负责接受验收样品。6.样品流转按照抽检规程第4部分规定。 任何人员不得泄露委托方的技术秘密、商业秘密、检验结果、资料信息。检验结果只对检验样品负责。样品在检验中发现问题,经与送检(委托)方联系15天内未获答复的,视为自行放弃检验,样品不予保管。7.检验报告按照抽检规程第5

  • 检验检测直报系统提问?市场监管总局回复

    您好。我司5月份刚获得CMA资质认定证书,在了解关于检验检测直报系统操作过程中,发现:在上传检测报告编号的对话框内,不能选择“上传机构”,直报系统的信息维护正常。目前发现的情况是,国家市场监督总局官网不能查到我司已获得的资质。省级监督局官网可以查到,应该是信息存在延迟。提问:直报系统上传对话框内不能选择“上传机构”,是不是也因为信息延迟的缘故?,信息延迟一般要多久才信息统一?[align=center][img]https://xgzlyhd.samr.gov.cn/gjjly/img/fd-a-avator.png[/img][/align][b]回复部门: 认可与检验检测监督管理司[/b][color=#999999][back=transparent]时间:2024-05-14[/back][/color]在检验检测统计直报系统上传报告编号需完成过最近一期的统计直报,2024年的统计工作已于4月底结束,你司可于次年完成统计后再开始上传报告编号,或经发证机关与我司联系后单独开启上传编号的功能。 现阶段国家市场监督总局官网查询省级市场监管局发放资质信息也与统计系统相关联,你司可与省级市场监管部门联系请他们通过统计直报系统手动为你司修改相关信息。

  • 检验检测机构监督管理办法讨论

    检验检测机构监督管理办法第八条 检验检测机构应当按照国家有关强制性规定的样品管理、仪器设备管理与使用、检验检测规程或者方法、数据传输与保存等要求进行检验检测。第十三条 检验检测机构不得出具不实检验检测报告。(三)违反国家有关强制性规定的检验检测规程或者方法的有个问题哈,根据条款理解是强标必须做全套,那么万一客户来重测某个项目呢?我如果只测了这个重测项目是不是就会被定义为检验检测报告呢?

  • 【求助】环境中厌氧微生物的检测

    请问,老师们,环境中厌氧微生物的检测如何做?环境中厌氧微生物的检测不能像需氧微生物那样,可以直接暴露在空气中取样?请问环境中厌氧微生物的检测,如何取样?

  • 有没有哪位版友做过烟花爆竹的检测

    又是一年春节时,很多地方都放开了烟花爆竹的燃放,对大气的污染还是挺大的,有没有哪位版友做过烟花爆竹的检测,其中除了二氧化硫、三氧化硫等之外,还有哪些有毒有害物质?

  • 【求助】如何同时进行面包、糕点中的8中合成着色剂的检测?

    按照GB/T5009.35方法检测: 新红、柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝、赤藓红8种合成着色剂1.按照方法如何进行面包糕点的样品处理?聚酰胺吸附法和液液分配法能不能用一种方法代替?2.如何设置流动相比例和时间才能使新红和柠檬黄达到很好的分离度?

  • 中检院官方发布CHO细胞宿主DNA残留检测标准试剂盒(附中检院说明书)

    2015年3月底,第一个中国科学院和中国食品药品检定研究院联合开发的试剂盒出现在中国食品药品检定研究院网站的国家药品标准物质目录中:CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(PCR-荧光探针法)。在2016年7月举办的生物制品研讨会上,中检院吕萍主任对这个试剂盒做了精彩的说明。这个由中检院与中科院联合研发,由生物制药企业参与标定的试剂盒与现行美国药典(USP)建议的检测方法同步,但与2010版药典附录中外源性 DNA 残留量测定法有所不同,将是国内生物制品的研发和生产的上下游企业检测宿主细胞DNA残留的第一选择,其后又联合开发了宿主细胞DNA残留样本前处理试剂盒,E.coli宿主细胞DNA残留检测试剂盒,Vero宿主细胞DNA残留检测试剂盒,毕赤酵母DNA残留检测试剂盒,大大的方便的广大厂商的选择。产品优势:1:中检所参与开发并认可其质量2:灵敏度高,稳定性好3:高效回收微量dna,回收率70-130%4:操作快捷,整个过程只要4小时5:满足自动化操作要求,可以高通量检测 ,6:参考品溯源至中检所DNA国家标准品7:价格便宜,基本价格都在ABI公司价格的一半以下,大大节约了企业成本订货信息货号 品名 包装SK030203D100 宿主细胞DNA残留样本前处理试剂盒 100TSK030201c100 CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒 100TSK030202e100 E.coli宿主细胞DNA残留检测试剂盒 100TSK030204v100 Vero宿主细胞DNA残留检测试剂盒 100TSK030205p100 毕赤酵母DNA残留检测试剂盒 100T生物制品中宿主细胞残留DNA具有潜在致瘤和传染风险,所以各国药品监管部门对DNA杂质的限量要求非常严格。美国药典在General Chapter 介绍了三种常用技术,但将在2015年颁布的新版(USP38-NF33)中增加全新章节(General Chapter )来进一步规范残留DNA检测的方法和标准物质。与1000号以上的章节不同的是,USP编号1000以内的章节详细规定了检测技术、系统适应性标准和标准物质。新版USP中将唯一推荐qPCR法作为生物制品中宿主残留DNA的标准方法。qPCR法的技术优势在于序列特异性高、灵敏度高、重现性好,可以为生物制药工业在工艺研究和成品质量控制方面提供可靠的检测手段。我国参照WHO、FDA和欧盟的标准,很早以前开始就对生物制品中残余DNA含量进行限制。从卫生部颁布的《人用重组DNA制品质量控制要点》到近年的《中国生物制品规程》都对DNA含量做了严格要求,部分标准高于国际标准。2010年版中国药典附录收录了DAN探针杂交法和荧光染料法,这两种方法都存在技术缺陷,很难达到杂质限量检测的灵敏度,已经被欧美药典摒弃。目前,仍有很多国内企业沿用这两种方法检测残留DNA,致使生产工艺和产品质量很难达到国际一流水平。根据残余DNA检测技术的发展趋势,小编预计我国2015版药典或增补版本中将出现qPCR方法。企业在生产与研发中采用中检院标准物质目录中提供的成套试剂盒,可以大幅度减少费时、耗力、成本高昂的方法学考察,只需开展少量方法适应性实验,就可以在生产工艺和质控体系的优化方面发挥实际作用,同时满足美国FDA相关标准的要求。同时,联合研发单位中科院湖州营养中心提供免费技术咨询和培训,帮助企业解决试剂盒应用中的各种技术问题。生物制品可用于治疗和预防疾病,关系到患者和健康人的用药安全,产品质量必须得到保障。我国药品监管部门对生物制品中残留DNA的限量标准制订的非常严格,但药典修订存在一定滞后性,附录中的检测技术与先进国家尚存在差距,企业在研发和生产中应具有一定前瞻性,否则会使改进工艺、提高质量、保障安全的努力大打折扣。为什么要检测残余DNA?生物制剂是制药行业中发展最快的领域,2014年全球十大畅销药中7个是生物制剂。这些销售在临床上疗效确切,但研发成本高,生产和质量控制要求非常严格。绝大部分生物制剂是不经过胃肠道直接进入体内,所以除了生物活性外,监管部门对药品中杂质的限量要求非常严格。其中,宿主细胞残留DNA因为具有特别的潜在安全风险,一直是国内外药品监管机构关注的重点。美国药典会从2011年开始就组织专门小组讨论修订生物制品中残留DNA检测方法,并在2014年Prescription/Non-Prescription Stakeholder Forum Meeting#5上宣布将在2015年药典修订版中增加新的章节(General Chapter )来规范检测方法和标准物质。为什么美国药典会的专家组花几年时间讨论一个微量成分(100pg/剂量)的检测方法?还要专门增加章节来规范化?回答这些问题,先要了解它的来源和潜在危害性。生物制品中的重组蛋白药、抗体药、疫苗等产品是用连续传代的动物细胞株表达生产,虽然经过严格的纯化工艺,但产品中仍有可能残余宿主细胞的DNA片段。这些残余DNA可能带来传染性或致瘤性风险,比如残留DNA可能携带HIV病毒或Ras癌基因。分布在哺乳动物细胞基因组的LINE-1序列可能发挥逆转录转座子作用插入到染色体中,这种插入可能影响关键基因功能的发挥,比如激活癌基因或抑制抑癌基因。此外,由于微生物来源的基因组DNA富含CpG和非甲基化序列,增加了重组蛋白药物在体内的免疫源性风险。目前的研究结果显示,残留DNA的致瘤性相比传染性风险要低,但考虑到致瘤性实验是动物实验,传染性实验是在细胞水平做的,或许对两方面的风险都不能掉以轻心。众所周知,外源蛋白可能引起严重免疫反应,但关于残留DNA诱导的免疫反应的研究还不多。在一些临床前和临床研究中报道了高剂量的核酸样品,比如DNA疫苗或佐剂中的CpG寡聚核苷酸,可以诱导免疫反应,还诱导产生DNA抗体。生物制品中宿主残余DNA既是是生产中带来的杂质,还存在一定安全隐患。因此,WHO和各国药物注册监管机构一般只允许生物制剂中存在100pg/剂量以下的残留DNA。根据杂质来源和工艺,特殊情况下最高允许10ng/剂量。各种残余核酸检测技术的优劣正如前面讲过,2015年版的美国药典将新增章节对残余DNA检测进行规范化,那究竟和现有方法有什么不同?为什么最后只确定了一种方法?我们来看看现行美国药典对于残余DNA检测的总体要求。"因为残留DNA涉及到潜在来源(传染性病毒DNA)、管理规程等关键问题,药品监管部门建议必须建立产品的DNA残留检测方法。不论是否成品的常规检测包含DNA残留含量检测,还是工艺开发中已经证实了DNA清除率,残留DNA技术指标和定量分析监测规程都必须确立。分析方法包括杂交法、基于DNA结合蛋白的免疫色谱法(阀值法)、定量PCR(Q-PCR)或其他DNA扩增方法。理想的定量检测方法的灵敏度应该能够检测到约10pg/剂量的残留DNA。杂交法、阀值法和定量PCR方法因为灵敏度可以达到检测要求,所以属于经典方法。"下面我们引用美国药典(USP)的内容分别介绍一下这三种方法。杂交法(Hybridization-based):在这种方法中,根据宿主DNA序列设计DNA探针用于测定产品中配对DNA的数量。双链DNA被变性成单链后固定在尼龙膜或硝化纤维膜上,DNA探针被放射或荧光随机掺入标记以后,与膜上固定的样品宿主DNA杂交结合,并在胶片或成像仪对应位置中显现斑点。对于荧光标记的探针,斑点的光密度结果可以在仪器中定量分析。斑点光密度对应结合在目标DNA上的探针数,进而推测出残留DNA的数量。通过目测方法可以半定量地检测样品中残留DNA,仪器读片可以对应斑点光密度绘制标准曲线,对应检测结果更加准确。DNA结合蛋白免疫阈值法(DNA-BINDING PROTEIN-BASED):这种方法使用DNA结合蛋白和DNA抗体,分四步检测。第一步,通过加热把DNA变性成单链DNA,变性后DNA与偶联了亲和素的DNA结合蛋白以及偶联了尿素酶的DNA单克隆抗体混合反应,液相中的单链DNA、DNA结合蛋白、DNA抗体共同形成序列非特异的复合物。第二步,样品混合液通过生物素标记的膜,亲和素-生物素结合把DNA复合物固定在膜上,洗去非特异吸附。第三步,膜放入检测仪器中与尿素溶液反应,反应产物氨改变溶液pH值并被仪器记录变化。这种pH值的变化直接与样品中的DNA数目相关。第四步,仪器软件自动分析原始数据确定样品中残留DNA数量。定量PCR法(QUANTITATION PCR-BASED):qPCR方法以其快速、高通量的特点已经被应用于生物制药的一些领域(拷贝数检测与病毒检测)。这项技术能够确定各种样品中目标DNA序列的准确数量。DNA探针的设计非常关键,这种DNA探针包含一端染料分子和另一端淬灭分子。当特殊设计的DNA引物引导DNA聚合酶沿着模板序列复制合成另一条对应序列时,DNA聚合酶切断结合在目标DNA上的探针染料端,释放到反应液里的染料信号被仪器测量。经过数十个循环的DNA扩增,荧光信号与起始DNA模板成对应关系,对应标准曲线可以准确计算出样品中残留DNA的数量。美国药典附录进一步对三种方法进行了应用评价。杂交法可以序列特异性地检测目标DNA,但32P标记的探针因为存在半衰期短、放射等问题,实际应用并不广泛。

  • 核查中的光谱检定规程是否真的满足我们的日常要求

    相信大家对《GB768-2005光谱仪检定规程》不默认,里面主要针对的就是6个元素,而现实中我们测试的元素远不止这6种,大家在做ICP-OES核查的时候是一味参照规程,还是有更多的内部SOP,比如增加到检测方法的所有元素还是有更好的做法严整设备是满足测试方法要求的,欢迎大家交流

  • 检验检测机构统计直报工作 环境监测机构(事业单位)的任务分工

    2014年3月开始填报统计直报数据,所填报的是上一年度(2013年)的数据。2015年与2014年填报内容一致,仅填报统计直报数据2016年,除填报2015年统计直报数据,另新增2016年监督检查表(A表和B表)。2017年,除填报统计直报数据、监督检查A、B表,另新增2016年年度报告。2018年与2017年一致2019年填报的统计直报信息为三部分内容,分别是基本情况、业务情况、从业人员。业务情况主要包括:1. 业务量及组成:业务量以检测报告份数行政执法或政府委托检测、社会委托检测、司法鉴定和仲裁检测、其它技术服务。2. 仪器设备资源状况3. 工作面积状况4. 检测能力状况:机构资质认定的检测能力5. 人员资源状况2019年,除填报统计直报数据、监督检查A、B表、2016年年度报告,新增上报检测报告编号,这个内容由下面文件而来。《市场监管总局办公厅关于开展2018年度认可及检验检测服务业统计工作的通知》填报说明中:[color=#333333]为加强检验检测机构监管,便于社会查询和监督,各检验检测机构应在检验检测统计直报系统上传本机构2016-2018年度出具的全部有效检验检测报告和证书编号,并于2019年起,每季度后一个月内报送上一季度出具的全部有效检验检测报告和证书编号。市场监管总局将据此向社会提供检验检测报告和证书编号有效性的网上查询平台。[/color][color=#333333]2016[/color][color=#333333]年-2018年出具的检测报告和证书编号。4月报1-3季度,7月报4-6季度,10月报7-9月,下一年的1月报10-12月的。[/color][color=#333333]按文件要求需要上传检测报告和证书编号,网站模板要填报告编号,报告签发时间,签发年份,报告是否有效。[/color][color=#333333]填报数据涉及办公室,内容包括人员、仪器、收入、支出、职称、机构类型、保险投保等内容;[/color][color=#333333]综合室,内容包括2016年度-2018年度的检测报告编号、签发时间等,2019年开始检测报告编号每季度一上报。[/color][color=#333333]质保科,内容包括资质认定检测能力、参加能力验证、被评审、被监督检查等内容。[/color][color=#333333]需要相关科室共同配合,填报结束后,纸版内容打印,相关科室负责人或指定人员签字确认,存档保存。[/color][color=#333333]填报工作截止2019年3月完成。[/color][color=#333333] [/color]填报内容为三部分,分别是基本情况、业务情况、从业人员。(数字代码为填报内容的第一列序号,对应相应需要填报的文字内容)基本情况:质保室:06、17、18、19、20办公室:01、02、03~05、07、08~15、21~24综合室: 16业务科室:19(分析室、生态室、污染源、现场室、应急室、质量保证科)业务情况:质保室: 02、03-3、03-408、06、11办公室: 03(不包括03-3、03-408)、05、07、08综合室:00、01、04、09、10、12从业人员:办公室[color=#333333] [/color][color=#333333]个人观点,欢迎各位同仁指正。[/color]

  • 【讨论】国产和进口仪器PK 烟包、油墨、涂料中残留溶剂检测 顶空-气相色谱法

    大家好! 对于烟包中残留的16中有机溶剂,检验标准《YC/T 207-2006》、《YC263-2008》,请大家把使用的仪器型号、厂家拿出来晒晒! 苯为A类检测,一票否决,因此不少印刷厂、复合纸厂、油墨厂对苯的检测要求为小于0.002mg/m2,因此,你的仪器能检测到吗?你可以把标样五级和最低检测限(把标样五稀释6倍)的图谱附上,看你的仪器是否达到要求。 对于油墨、胶水、光油、色素等有两种检测方法,mg/m2和ppm,你都知道吗? 烟用白乳胶中乙酸乙烯酯你们有检测吗?

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