冰冻血浆解冻箱

RT：农残分析过程中，样品经常需要冷冻，样品的冰冻和解冻稳定性跟样品、农药的性质相关？有相应的实验数据么？？期待跟帖讨论！

血浆速冻技术的新进展血浆是抗凝全血经物理方法分离制备的一种血液成分，其临床应用是现代成分输血的重要组成部分，尤其是新鲜冰冻血浆（PPT），在临床治疗中更有其重要的作用。血浆是多种血浆蛋白质的混合物，其中包含白蛋白、免疫球蛋白和凝血因子类蛋白。为了有效的保护血浆内的有效成分，特别是凝血因子，并随着我国成分输血技术的发展，新鲜冰冻血浆及冷沉淀的制备技术及应用随之也越来越广泛。目前我国《血站基本标准》实施细则中第92条规定：制备新鲜冰冻血浆时，抗凝剂为CPD、CP2D、CPDA-1的血液应在8小时内分离并速冻；抗凝剂为ACD的血液应在6小时内分离并速冻。其质量要求： 含有全部凝血因子。血浆蛋白为6~8g/%;纤维蛋白原0.2~0.4g%;Ⅷ因子含量：≥0.7 IU/ml 规格。可以看出，时间和温度是制备出质量合格的新鲜冰冻血浆两个关键点，尤其是对于活性很高的凝血因子VIII和V，时间和温度是影响其活性的重要因素。中国医学检验杂志1995年3月第18卷第2期《血浆凝血因子测定的影响因素探讨》，作者通过对比经过不同温度和时间后FVIII含量发现：32℃条件下6小时活性只有48%，24小时5%4℃条件下6小时活性有95%，24小时剩29%。由于在血浆结冰过程中，凝血因子VIII含量与时间呈指数下降关系，所以速冻时间越短，凝血因子VIII和V的损失也就越小。国际上通用的标准是1个小时内速冻完成，如果能在30分钟内完成速冻，那么效果将会更好。因此要保证新鲜冰冻血浆及冷沉淀等成分的疗效，必需在采供血过程中控制好冷链和时间链，其中血浆速冻技术是其中一个重要环节，速冻的时间和效果将直接关系到血浆及冷沉淀产品的质量和疗效。 随着《中华人民共和国献血法》的实施和无偿献血的深入开展，血站的采血方式已由有偿献血时代的站内采血为主转向站外无偿流动采血。要达到采血后6h（或8 h）内分离血浆并冻结有时存在一定的困难。因此为保证临床使用新鲜冰冻血浆、血浆冷沉淀的质量尽可能的缩短血浆速冻的时间就显的尤为重要了。我国血站采用的血浆速冻技术主要经过了以下几个发展阶段：1、用超低温冰箱来进行血浆速冻。此种方法的主要不足在于：冰箱内空间有限，将血浆叠加在一起，上下接触不均匀。冰箱制冷效率有限，速冻时间较长（通常需要6-8h）。显然是达不到要求的。2、强制对流型速冻机。最初的血浆速冻设备我们称为强制对流型速冻机（blast freezer）。该类设备的设计思路来源于普通冰箱，也是使用空气作为冷媒。通过更强的制冷功率来得到低温空气，并且使冷空气快速的流动，加快冷空气与溶液的热交换来实现快速冻结的目的，因此，也称之为“冷风制冷”。由于这类设备内冷空气流动速度比冰箱内空气流动速度有了很大提高，使得制冷效果得到提高，缩短了血浆冻结的时间。对于超低温冰箱来说，这种方式使得速冻的时间已经得到了大大的缩短，但由于关键技术的不足，其速冻时间通常都需要2h。3、平板接触式速冻机。这类设备是根据最新的平板接触制冷技术制造而成。它通过改变传统的“空气”冷媒，用特制不锈钢作为冷媒，加快血浆热交换实现速冻，从而达到缩短速冻时间的目的。今天，我们来讲讲血浆速冻技术的新进展：平板接触式血浆速冻技术。平板接触式速冻（contact plate freezing）。该技术通过高效压缩机使金属板稳定在-50℃的温度，血浆袋通过与-50℃的低温金属板直接接触进行热传递，由于空气的热传导率仅为0.28 w/m•k，而金属的热传导率为58.02w/m•k是空气的上百倍。因此使得降温效率得到极大的提高，降温过程所需时间更少，因此可以得到更多的凝血因子，得到更好质量的新鲜冰冻血浆。平板接触式速冻技术，虽然出现的时间不长，但是它已经以其强大的技术优势已经在国际上占据了血浆速冻市场40%的份额。

采集的小鼠血样因为当天离心机坏了不能离心分出血浆，就在-20℃的冰箱里冻了一晚上。第二天解冻后离心发现不能分离出血浆，跟没离心一样。是不是因为冷冻全部溶血了？这样的血浆还有什么方法分析其中的药物浓度？

摘要：扫描电镜工作者都面临着一个不能回避的事实，就是所有生命科学、以及许多材料科学的样品都含有液体成分。很多动植物组织含水量达到98%，这是扫描电镜工作者最难对付的样品问题。冰冻扫描电镜技术是克服样品含水问题的一个快速、可靠和有效的方法。这种技术还广泛地被用于观察一些“困难”样品，如那些对电子束敏感的具有不稳定性的样品。冰冻扫描电镜技术还有一个常被忽略的应用领域，即通过不同的时间间隔的样品溶解来研究动态过程（工业上或其他方面应用）。各种“高压”模式如VP、LV和ESEM的出现，已允许扫描电镜观察未经冷冻和干燥的样品。但是，冰冻扫描电镜仍然是防止样品丢失水分的最有效方法，它能应用于任何真空状态，包括装置于SEM的Peltier台上以及向样品室内冲以水气。冰冻扫描电镜还有一些其他优点，如具有冷冻断裂的能力以及可以通过控制样品升华刻蚀来选择性地去除表面水分（冰）等。常规扫描电镜样品制备的缺点： 皱缩和变形 可溶性物质被提取 可弥散性物质的移位 机械损伤，脆弱样品在常规操作时易损伤 制备过程慢（常在24小时以上） 有毒试剂冰冻扫描电镜技术的优点： 能保持可溶性物质 可弥漫物质很少移位 机械损伤小 基本上不用有毒试剂 是对样品进行动态实验的唯一方法（不同时间间隔冷冻-在实验室内或外面） 过程快，从新鲜材料到观察冷冻、断裂和喷涂样品可在5分钟内进行 高分辨能力（与低真空技术相比） 通过低温断裂获取额外信息（与常规和低真空SEM方法比较） 很适合液体、半液体、和电子束敏感样品 具有选择性刻蚀能力（通过升华显露内在信息） 具有重复使用样品能力（例如：对样品重复断裂和涂覆）冰冻扫描电镜的方法首先将样品固定在适当的样品支架上，具有各种不同类型的支架可选择以适合不同的样品。样品支架本身安放在巧妙设计的冷冻/真空转移杆上。将样品插入冷冻剂，通常是液氮，然后在真空下转移至冰冻扫描电镜Polaron PP2000或PP2000T样品制备室的冷台上，这一样品制备室直接安装在扫描电镜腔室的一个扩展口上。样品制备室可由机械泵和涡轮分子泵抽真空。样品制备室内有进行样品操作、断裂、刻蚀（升华）和涂覆的设备。最后，将位于样品制备室与扫描电镜室之间的阀门打开，将样品转移到扫描电镜的冷台上。冰冻扫描电镜技术的应用冰冻扫描电镜最常用与生命科学，包括植物学、动物学、真菌学、生物技术、生物医学和农业科学。最近，冰冻扫描电镜技术已成为药物学、化妆品和保健品工业的重要工具，主要用于应用基础研究以及对许多产品如乳制品、化妆品和药物递送系统的QA。冰冻扫描电镜技术一直是食品工业的标准检测方法，特别是多项产品如冰淇淋、果糖蜜饯和乳制品。详见附件，英文原作者：Mike wombwell 迈克.沃姆维尔[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=49265]冰冻扫描电镜技术[/url]

牛奶放到冰箱冷冻，再解冻还能喝吗？

[font=黑体]本人想向高人咨询关于冰冻切片机的相关信息：１．目前市场上公认的最好的冰冻切片机是哪个公司产的，哪一款，，价位大概是多少，以及一些相关技术相关指标２．以及与此仪器相关的高清晰病理图文报告系统的相关信息　　　　急需！！！！！！！！！！　　谢谢！[/font]

一、石蜡切片 把修好的蜡块装在旋转切片机上，即可进行切片(section)。切片必须保持切片刀锐利，切片厚度通常为5～7um，也可根据染色需要切成不同厚度，一般不旋转式切片机超过10um。切好的蜡带，放人40℃左右的温水中将蜡片展平。良好的切片应无刀痕、裂痕，切片厚度均一平整。切片如有上述问题，在进行免疫组织化学染色时会出现假阳性现象。为能得到平整无皱褶的组织切片。可采用两次展片，即先将组织切片漂浮在30％的乙醇溶液中进行第一次展片，然后将切片捞起，再次放人45～50℃的水浴中进行第二次展片，乙醇的浓度和水温可视组织不同和石蜡熔点的高低自行调整。此过程是利用乙醇溶液与水之间的张力差展开切片的皱褶。为防止脱片，载玻片要涂黏片剂。对HE染色的切片，可在载玻片上涂抹薄层蛋白甘油，但蛋白甘油因含蛋白易导致非特异性免疫反应，故用于免疫组织化学染色的切片常用多聚赖氨酸、3—氨丙基—乙氧基甲硅烷等处理。二、冰冻切片 冰冻切片(fiozen section)是酶组织化学和免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法，其最突出的优点是能够较[font='Songti SC Regu

请问利用有机溶剂沉淀蛋白法处理血清，为什么有人用室温或是加热的乙腈，还有人使用冰冻乙腈到底哪个效果更好呢，提取有机盐成分。谢谢喽！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif

[b]冰冻干燥机[/b]　　1.必须专人操作，未经允许不得开机。　　2.样品必须事先冰冻，冰冻的样品要尽量薄，增大表面积。　　3.温度达到－30℃以下方可放入样品，开启真空泵。　　4.开泵后必须确认抽上了真空方可离开。　　5.样品抽干后要及时取出。　　6.冰层太厚，真空度＞300millitorr则应除霜。　　7.压缩机不准频繁启动。

最好用微波炉解冻肉，将功率调到低火；其次是提前将肉放在冰箱冷藏室，让它慢慢自行解冻；再次是用流水冲泡冻肉；最不建议的方式是用非流水泡肉解冻。

大批量样品进行前处理时，会将样品破碎放冷冻柜里，做时拿一部分解冻进行前处理，一般会提前一天拿出，比如明天早上要做20个样品，今天下班时从冰柜里拿出样品，放室温下解冻，可是当周一要处理样品时，需要周日下午来单位拿出样品，有什么好的方法吗？

小窍门：肉如何快速解冻2009年02月09日13:55 来源：人民网-《生命时报》解冻肉类，恐怕是每个人都遇到过的难题。现在，就为您支几招，让肉类快速解冻。[IMG]http://shipin.people.com.cn/mediafile/200902/09/P200902091356552191730938.jpg[/IMG]　　 　　冷冻前先将肉切成小块或将其压成“饼状”。中国农业大学食品科学与营养工程学院副教授范志红在接受《生命时报》采访时建议，将肉类切成小而薄的小块，够一顿饭的分量就单独装一袋；或者将排骨等带骨的肉类平铺为“饼状”，再放入冰箱。这样就能增加冻肉的受热面积，可避免受热不均的现象，以此加快解冻速度。　　用铝盆解冻冻肉。先把一个铝盆底朝上放在桌上，然后把冻肉放在铝盆的底上，接着再把另一个铝盆底部朝下，轻轻地压在冻肉上。大约压5分钟左右，即可解冻。这是利用了铝制品极强的导热性，把冻肉两端紧贴在铝锅上时，冻肉就通过铝盆迅速和周围空气做热交换，不停的热交换后，冻肉就会在很短的时间化开了。如果家中没有铝锅，铝盖、铝盆同样可以。　　用盐水或醋解冻。把冻肉先放在冰箱冷藏室1—2个小时，就能让冻肉变软。这是因为冷藏室的温度一般在0摄氏度左右，可以先软化冻肉。然后可将肉放在盐水里彻底解冻。这是因为，盐水可以加速冰的融化，而且不会孳生细菌。范志红提醒，自来水不适宜解冻冻肉。此外，还可以将叉子蘸点醋叉入肉中，也可以加快解冻速度。　　微波炉解冻用最低档。范志红提示用微波炉解冻时，一定要用最低档，而且要逐步加热。一开始要先加热两分钟左右，然后根据肉解冻的程度再确定加热时间，直到完全解冻。切忌一开始就加热10分钟。（生命时报 江大红）

[em09] 请问有没有可以测冰冻条件下微观组织的仪器，最好是可以拍照的？谢谢！

6 种固定液短时间固定对冰冻切片制片效果影响冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。由于其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。但在冰冻切片制过程中影响制片的质量因素较多，从而影响手术中的快速病理诊断。因此，快速制作一张高质量的冰冻切片对于确保病理诊断极其重要。其中固定是冰冻切片制作中关键步骤之一，对切片的制片质量有着重要的影响。本文通过6种不同固定液短时固定对冰冻切片制片染色的比较，探讨不同固定液对冰冻切片制片效果的影响。1资料与方法1.1材料选自病理科手术切除的新鲜组织标本40例，包括有乳腺、甲状腺、胃、子宫、卵巢等组织。1.2固定液6种固定液分别为：10%福尔马林；95%酒精；AF固定液；丙酮∶甲醇∶乙醚酒精（乙醚∶酒精1∶1）。1.3方法1.3.1取材及切片取材大小为1.5cm×1.5cm，厚2～3mm的新[/font

冻品（肉制品、水产品、豆制品等）解冻后售卖还标榜宣传为鲜品，比如解冻肉制品分切穿串后冷藏当鲜串售卖，个人认为这就是虚假宣传，既不是热鲜也不是0～4℃的冰鲜，冻转鲜还标榜鲜品合法合规么？？？

2008-02-20 各省、自治区、直辖市环境保护局（厅），副省级城市环境保护局，新疆生产建设兵团环境保护局，解放军环境保护局: 　　2008年1月下旬以来，我国南方遭遇五十年未遇的雨雪冰冻灾害。在党中央、国务院的正确领导下，抗灾工作取得了重大胜利。雨雪冰冻灾害造成电网损害，导致环境保护设施不能正常运行，溶雪剂的大量使用也可能引发突发环境事件。为应对潜在环境风险，我局组织编写了《南方雨雪冰冻灾害环境保护应对技术措施》。现印发给你们，请据此指导雨雪冰冻灾害应对工作，防止发生次生突发环境事件。　　　　附件：南方雨雪冰冻灾害环境保护应对技术措施　国家环境保护总局二OO八年二月十八日

液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。（2）程序降温：利用已设定程序的等速降温机以-1～-3℃/分钟之速度由室温降至（-80℃以下）-120℃，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。3、步骤：（1）冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。（2）配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜（DMSO）至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。（3）离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0.1ml)计数细胞浓度及冻前存活率。（4）取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液（DMSO最后浓度为5～10％），使细胞浓度为1～5×106cells/ml，混合均匀，分装于已标示完全之冷冻保存管中，1～2ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。4、注意事项：（1）欲冷冻保存之细胞应在生长良好(logphase)且存活率高之状态，约为80～90％致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质，例如hybridoma应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。（2）细胞在液氮中可长期冻存无限时间，而不会影响细胞活力；在-70度可保存数月。（3）注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级，无菌且无色(以0.22micron　FGLP　Telflon过滤或是直接购买无菌产品，如Sigma D-2650)，以5～10ml小体积分装，4℃避光保存，勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级，以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液，可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗，可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化，可换用10%甘油冻存。（4）冷冻保存之细胞浓度：①normal human fibroblast:1～3×106cells/ml②hybridoma:1～3×106cells/ml，细胞浓度不要太高，某些hybridoma会因冷冻浓度太高而在解冻24小时后死去。③adherent tumor lines:5～7×106，依细胞种类而异。Adenocarcinoma解冻后须较高之浓度，而HeLa只需1～3×106cells/ml④other suspensions:5～10×106cells/ml，human lymphocyte须至少5×106cells/ml。（5）冷冻保护剂浓度为5或10％DMSO，若是不确定细胞之冷冻条件，在做冷冻保存之同时，亦应作一个backup culture，以防止冷冻失败。（6）冻存可用10%～90%的血清，一般高浓度血清有助于维护细胞活力，此处介绍20%终浓度有利于细胞悬浮而少沉积（4度时），复苏存活率在80%～90%以上，对原代培养细胞，以90%血清冻存更为有效。二、冷冻细胞活化1、冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。2、细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。3、材料37℃恒温水槽、新鲜培养基、无菌吸管/离心管/培养瓶、液氮或干冰容器4、步骤：（1）操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤害。（2）自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。（3）将新鲜培养基置于37℃水槽中回温，回温后喷以70%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。（4）取出冷冻管，立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，以70%酒精擦拭保存管外部，移入无菌操作台内。（5）取出解冻之细胞悬浮液，缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例为1:10～1:15)，混合均匀，放入CO2培养箱培养。取0.1ml解冻细胞悬浮液作存活测试。（6）解冻后是否立即去除冷冻保护剂(例如DMSO或glycerol)，依细胞种类而异，一般而言，大都不需要立即去除冷冻保护剂。惟若要立即去除，则将解冻之细胞悬浮液加入含有5-10ml培养基之离心管内，离心1000rpm，5分钟，移去上清液，加入新鲜培养基，混合均匀，放入CO2培养箱培养。（7）若不需立即去除冷冻保存剂，则在解冻培养后隔日更换培养基。三、细胞计数与存活测试1、原理：（1）计算细胞数目可用血球计数盘或是Coultercounter粒子计数器自动计数。（2）血球计数盘一般有二个chambers，每个chamber中细刻9个1mm2大正方形，其中4个角落之正方形再细刻16个小格，深度均为0.1mm。当chamber上方盖上盖玻片后，每个大正方形之体积为1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用时，计数每个大正方形内之细胞数目，乘以稀释倍数，再乘以104，即为每ml中之细胞数目。（3）存活测试之步骤为dyeexclusion，利用染料会渗入死细胞中而呈色，而活细胞因细胞膜完整，染料无法渗入而不会呈色。一般使用蓝色之trypan blue染料，如果细胞不易吸收trypan blue，则用红色之Erythrosin bluish。计算细胞活率：活细胞数/（活细胞数+死细胞数）×100%。计数应在台盼兰染色后数分钟内完成，随时间延长，部分活细胞也开始摄取染料；因为台盼兰对蛋白质有很强的亲和力，用不含血清的稀释液，可以使染色计数更为准确。2、材料：0.4%w/v trypan blue(GibcoBRL15250-061)；Erythosin bluish stain；取0.1gram Erythrosin bluish(SigmaE-9259)及0.05gram preservative methyl paraben(SigmaH-3647)溶于100mlCa++/Mg++freesaline；血球计数盘及盖玻片(Hemocytometerandcoverslip)；计数器(counter)；低倍倒立显微镜；粒子计数器(Coultercounter,CoulterElectronics)。白细胞稀释液（4%乙酸溶液）。3、步骤：（1）取50μl细胞悬浮液与50μl trypan blue(orErythrosinbluish)等体积混合均匀于1.5ml小离心管中。（2）取少许混合液(约15μl)自血球计数盘chamber上方凹槽加入，盖上盖玻片，于100倍倒立显微镜下观察，活细胞不染色，死细胞则为蓝色(或红色-Erythrosin bluish)。（3）计数四个大方格之细胞总数，再除4，乘以稀释倍数(至少乘以2，因与trypanblue等体积混合)，最后乘以104，即为每ml中细胞悬浮液之细胞数。若细胞位于线上，只计上线与右线之细胞(或计下线与左线之细胞)。注：4大格细胞总数×稀释倍数×104/4=细胞数/ml；每一大格的体积=0.1cm×0.1cm×0.01cm=10-4ml计数板计数时，最适浓度为5～10×105细胞/ml，此范围外计数误差偏大。高浓度细胞悬液，可取出部分作稀释或连续稀释后计数。5、范例：T75 monolayer culture制成10ml细胞悬浮液，取0.1ml溶液与0.1ml trypan blue混合均匀于试管中，取少许混合液加入血球计数盘，计数四大方格内之细胞数目。活细胞数/方格：55，62，49，59；死细胞数/方格：5，3，4，6；细胞总数=243平均细胞数/方格=60.75；稀释倍数=2；细胞数/ml：60.75×104×2（稀释倍数）=1.22×106；细胞数/flask（10ml）：1.22×106×10ml=12.2×106存活率：225/243﹦92.6%

为什么不建议泡水里解冻？把冷冻食物放进水里，操作容易，而且比肉类在室温中化冻要有效率的多。但是，很多人也发现了，水泡解冻的肉类，口感上远不及自然化冻的肉。这是为什么呢？1. 冷水解冻与空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]比，水的热量传导能力更强，所以会比室温解冻花的时间更少，操作起来也方便。但这种方法的缺点也不少：（1）冷水中的细菌多，泡久了容易变质。（2）水很容易带走肉类中的肉汁，使得营养流失更快。（3）水太多容易让肉类的细胞破裂，使得外层的肉变软发白，降低品质和营养。当然，很多生活妙招会建议大家泡盐水来解冻。这虽然可以在一定程度上降低水中微生物的影响，也不容易让细胞破裂，但是盐的浓度比较难控制，要想获得绝佳口感，操作起来比较有难度。2. 热水解冻热水其实可以分两种：60℃以上或60℃以下。如果用60℃以上的，很容易外面熟了，里面还是冰的。如果用60℃以下的，解冻速度确实会快很多，但流失的营养也多，而且这个温度下特别容易滋生细菌。除了省时间外，并不是很理想。3. 流水解冻流水的热量传导效果更好，化冻时间也更短。相比冷水浸泡，流水可以带走一部分细菌，让食材更卫生，但同时也会加速营养流失。而且，这种方法十分浪费水，故而并不提倡。

一块肉反复冷冻解冻四次，最后测得的菌落数，竟然是未冷冻前的15倍？日前，央视记者做出这样的实验结论。那么，这种结果是否有可能出现？昨天，记者采访了中国畜产品加工研究会的刘登勇博士，刘登勇博士的专业是肉品加工和质量安全控制，他告诉记者，这种情况是有可能出现的，所以肉解冻完还是最好一次吃掉。反复冷冻解冻，肉变质更快？4次解冻实验后，细菌竟然飙升15倍近日，网上流传一种说法，称肉类反复冷冻解冻后，会加快肉类腐败变质，增加细菌含量。针对这种说法，央视记者找到上海一家实验室，将从市场上买来的鲜肉，在五天中，先进行冰箱冷冻，取出后进行解冻，观察细菌生长的趋势。经过反复四次冷冻和解冻后，最后一次测得的结果，是最初没有冷冻时测试结果的15倍左右，很令人吃惊。为什么低温没把细菌杀死？解冻时细胞膜破裂，流出液体滋生细菌那么，这一实验结果是否有可能出现？对此，记者采访了中国畜产品加工研究会的刘登勇博士。刘登勇博士告诉记者，反复冷冻再解冻，是有可能出现菌落总数增加的情况的，而根据实验所处具体环境的不同，菌落总数增加的情况也会有所不同，不能说就一定会增加15倍或其他倍数。在极低温的冷冻环境下，肉品中的微生物不是应该被冻死了吗？为什么把冷冻完的肉取出来之后，细菌又会滋生呢？这其中又有哪些奥妙呢？对此，刘登勇博士告诉记者，在极低温度的情况下，肉品表面的细菌并不会被完全冻死，只是活力被暂时抑制住了。一旦肉品被从低温环境下取出，细菌就会重新获得有利于其生长的环境。而在这种过程中，有一个因素尤其有助于细菌繁殖。“在冷冻过程中，肉品中的水分会形成很多细小的冰晶，反复多次冷冻和解冻会导致冰晶不断长大，这些冰晶会刺破细胞膜，导致细胞中的液体流出来”，刘登勇博士说，这就是为什么肉解冻后会有少量液体流出来的原因，这些细胞中的水分富含营养，会让细菌繁殖得飞快，而每冷冻一次，就意味着细胞膜被多破坏一次，解冻后流出来的养分就会增加，所以细菌总数也会相应增加。

1. 新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片( 也可- 80℃保存)，厚度为 5～6μm。2. 载玻片可不打底，裱片后，立即用电吹风吹干。3. 如不马上染色，可密封后- 20℃保存。4. 染色前用冷丙酮在 4℃固定 10-20 分钟。5. PBS 洗 2 次，每次 5 分钟，( 必要时应用 0.1%柠檬酸钠+0.1%triton打孔)6. 3% H2 O2灭活内源性过氧化物酶，20 分钟，避光；7. 用 PBS 洗 2 次，每次 5 分钟；8. 正常血清封闭：从染片缸中取出切片，擦净切片背面水分及切片正面组织周围的水分 （保持组织呈湿润状态,）滴加正常山羊或兔血清 （与第二抗 体 同源动物血清）处理，37℃，15 分钟。附：正常血清配制 ( 或按试剂盒规定的浓度配制)：按 1:20比例，用 PBS 配制，每张切片需要量按 50μ+5μl (10%抛洒量) 计算。9．滴加第一抗体：用滤纸吸去血清，不洗，直接滴加第一抗体，37℃ 2 小时（也可置于 4℃冰箱过夜） 。10．PBS：5 分钟，2 次（置于摇床） 。11．滴加生物素化的二抗，37℃，40 分钟。12．PBS：5 分钟，2 次（置于摇床） 。13．滴加三抗 （SAB 复合物） ，37℃，40 分钟。14．PBS：5 分钟，2 次（置于摇床） 。15．DAB 显色，镜下观察，适时终止（自来水冲终止） 。附：DAB 的配制① 储备液(DAB 25mg/ml)的配制：DAB 250mg + PBS 10ml，待完全溶解后分装成 1ml，100μl，50μl ，20μ l 等，-20℃，冻存。② 工作液：DAB 储备液 20μl + PBS 1000μl + 3% H2O2 5μl16．自来水（细水）充分冲洗。17．苏木素复染，室温，30 秒，自来水冲洗。18．自来水冲洗返蓝，15 分钟。19．梯度酒精脱水：80%，2 分钟 95%，2 分钟 100%，2 次，5 分钟。20．二甲苯透明：I ，II （二甲苯）各 5 分钟21．封片：加拿大树胶（或中性树胶）封片。

水质营养盐测定前，水样是冷冻的，如何快速解冻啊，我解冻了一天也还是不行

冷藏室解冻是最推荐的解冻方式。把要解冻的食物提前从冷藏室取出，用保鲜盒或保鲜袋装好后，放在冷藏室下层解冻。这不仅能最大限度地保留食物的营养和美味，还规避了微生物大量滋生的问题。

寒冬腊月，压力罐该怎么防冻呢？南京捷登流体设备在此提醒广大用户要及时准备，防止气温突降构成户外水管、水表结冻，影响正常用水。管道安装在北面、迎风的用户也要予以重视。此外，镀锌铁管较热熔管更易结冻，要做好充分保温包扎。首先关于wozi压力罐安装在室外的水表，可选用厚实的毛巾或布块将水表包实，也可以翻开家中的水龙头，使水流成线状流出，使水管中的水活动，可防水表、水管结冻。假若水表早年被冻住，用热毛巾包在水表上，用温水(不跨过60摄氏度)浇洒直到管内的冰冻消融，水顺利流出，切勿浇沸水、用火烘烤，防止损坏水表内塑料部件。其次wozi压力罐露出在户外的水管及室内的水管均可选用保暖材料(如旧衣裳、棉絮、海绵等)包捆，在保温材料外再包裹一层防水材料(塑料布等)免其受冻。假若水龙头和水管被冻住，可以自行用电吹风烘吹，或用毛巾包裹后慢慢用温水浇淋，一同可取硬物悄然击打水管，直到管内的冰冻消融，自来水顺利流出。

各位 蔬菜样品冷冻后，解冻到什么程度就可以称样了，冰碴状态还是完全解冻。因为含水分较大。总感觉完全解冻不合适。大家都说说吧，这个感觉很重要，直接关系到你的检测结果是否完全是真实的啊。

血清冷冻后又解冻产生的絮状沉淀是什么物质，怎么产生，如何分离，对血液中药物浓度的检测有怎样的的影响？检测时取样，如何避免取到絮状沉淀，若无法避免，取样量将怎样折算？求大神指教，拜托( ??? ? ??? )

前天立冬，市区各大超市的速冻食品区多了不少买饺子的顾客。平常上班辛苦，可风俗和习惯咱不能丢，再说这速冻饺子储存方便，做法也简单，无怪乎它倍受年轻人的推崇。 不过银子发现，许多市民在挑选速冻食品时，不注意看生产日期，这可不是个好习惯，长期从事消费者维权工作的张先生提醒说，速冻食品如果保存环境发生变化，很难保证其不变质。 比如大家常接触的速冻水饺，一般标明在-18℃下可以保存3个月时间。其含义是：只要出厂后一直保存在-18℃，那3个月之内就不会发生明显的质量问题。但实际上，不少产品在运输、储存等环节，无法保证-18℃。有的产品甚至出现解冻现象，经商家重新冰冻，肯定会影响其品质。所以，咱老百姓在购买时一定要看看袋子上打印的出厂日期，尽量选择一个月内的产品。含脂肪越高的食品，越要注意新鲜度。 另外，提醒大家，如果在超市冷柜中发现速冻鱼、肉、虾等商品包装内出现了冰块和冰晶，饺子、馄饨等表面出现开裂的现象，说明食物品质已经明显降低，口感风味将大打折扣。如果继续存放下去，含脂肪的内部馅料接触氧气，可能发生明显的氧化变味。因此，大家在购买时切记要细看商品的状态，那些已经结成“冰砖”的最好不要购买。

样品解冻后还可以复冻保存吗？

随着冷链完善，速冻食品走进越来越多的家庭。市疾控中心专家提醒消费者，速冻食品如果保存环境发生变化，很难保证其不变质。挑选速冻食品时应注意“三看”，看产品的生产日期、保质期，看包装和看标签。　　结成“冰砖”的就别买了　　“像消费者经常会购买的速冻水饺，一般标明在-18℃下可以保存3个月。”疾控中心专家解释，“其实它的含义是，只要出厂后一直保存在-18℃，那3个月之内就不会发生明显的质量问题。但实际上，不少产品在运输、储存等环节，无法保证一直处在-18℃的环境中。”据了解，这类速冻产品一旦在运输过程中出现解冻现象，重新冰冻后，也会影响到品质。因而，消费者在购买时一定要看清袋子上打印的出厂日期，尽量选择生产日期在一个月内的产品。　　此外，含脂肪越高的食品，越要注意新鲜度。如果在超市冷柜中发现速冻鱼、肉、虾等商品包装内出现了冰块和冰晶，饺子、馄饨等表面出现开裂的现象，说明食物品质已经明显降低，口感风味将大打折扣。如果继续存放下去，含脂肪的内部馅料接触氧气，可能发生明显的氧化变味。因此，大家在购买时切记要细看商品的状态，已经结成“冰砖”的速冻食品最好不要购买。　　存放时间过长易变质　　选购冷冻食品时应注意看该产品的生产日期、保质期、包装。冷冻食品存放时间过长也容易变质，专家提醒，冷冻食品冷冻时长超过2个月的食品尽量不要食用。　　越接近保质期的食品越容易出现问题。冷冻食品应在-18℃以下的冷库中冷藏，否则容易变质。冷冻食品存放时间过长也容易变质，因为，食品中的蛋白质可分解产生“可溶性毒蛋白”“胺类”“恶臭素”等，而这些毒素即便高温加热也很难被破坏，人食用后会造成胃肠道感染，冷冻时间超过两个月的食品尽量不要食用。　　需要注意的是，包装袋上的结晶霜洁白发亮，食品冷冻坚硬，应该是保存良好的。一旦包装袋破损，食品比较容易被细菌污染。如果包装袋内食品部分发白，大多是由于温度变化太大，水分散失，严重的会变成焦黄色。　　先冷藏后浸泡最安全　　市民在选购时，还应该仔细观察其标签，尽量选择知名企业生产的，食品名称、配料表、生产日期、保质期、生产厂家、贮存条件、食用方法等标签详细的速冻产品。　　疾控中心专家提醒，买回冷冻食品后一定要尽快把其放进冰箱的冷冻室，如果已经完全化开最好马上食用，因为冷冻食品充分溶解后再上冻对食品本身非常不好，对人体也有弊无利。　　而从冰箱冷冻室中拿出来的冷冻食品，如何解冻才是最正确的?市疾控中心专家认为，快速解冻，会使食品中的蛋白质、维生素受到损失，同时还会加速丙醛致癌物的产生。但如果解冻过程过慢，则容易导致细菌繁殖，也不合适。正确的解冻方法是，将冷冻食品从冷冻室中取出后，先放到冷藏室内，几小时后取出，放入温度为15℃左右的冷水中浸泡，直至解冻后使用。（来源：中国食品网）

冷冻之后的牛奶，解冻后检测会影响那些理化指标？一些牛奶检测，由于保质期比较短，需要封存备样，通过冷冻保存，能够到达预想的效果吗？解冻之后会改变那些理化指标呢？