抗体分子量检测

p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" color: rgb(0, 32, 96) font-family: 楷体,楷体_GB2312, SimKai " 全球抗体药物市场增长强劲，被业内认为是生物制药产业中最为活跃的组成部分。与小分子化学药相比，抗体药进入体内靶向相关细胞，特异性好，副作用低，已成为未来生物医药领域发展的“潜力股”。 随着国家医药生物产业规划升级的推动，中国的抗体药将迎来新的发展机遇期。但是，因抗体药分子量较大，结构复杂，存在多种翻译修饰，生产工艺复杂，使得其研发与质控难度增大，建立抗体表征结构鉴定的一系列方法已成为首要的任务。 /span /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" color: rgb(0, 32, 96) font-family: 楷体,楷体_GB2312, SimKai " 为帮助抗体药相关研究人员及企业用户梳理抗体药物分析检测的仪器耗材、技术方法及相关进展，仪器信息网特别策划“抗体药分析检测技术”专题，并邀请安捷伦公司生物制药行业产品专员张曼玉分享了自己的观点。 span style=" color: rgb(0, 32, 96) font-family: 楷体,楷体_GB2312, SimKai " br/ /span /span /p p style=" text-align: center " img width=" 380" height=" 374" title=" 张曼玉.png" style=" width: 380px height: 374px max-height: 100% max-width: 100% " alt=" 张曼玉.png" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/8b9f8269-bd0a-499b-a4af-ae45e455aa66.jpg" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-align: center " 张曼玉 安捷伦公司 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" color: rgb(0, 32, 96) font-family: 楷体,楷体_GB2312, SimKai " /span /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 仪器信息网：请您介绍一下抗体药物分析的相关情况以及行业现状？ /strong /span /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong 张曼玉： /strong /span 治疗性抗体药物根据结构可分为单克隆抗体、双特异性抗体、抗体药物偶联物和抗体片段等，单抗是获批最多的抗体类型。从分析表征的角度来看，单抗是由四条多肽链通过二硫键连接形成的“Y”字型构象的蛋白质，同时具有生物学活性。单抗的分子量约为150 KDa，属于生物大分子，通常采用基因工程技术进行序列构建、通过细胞培养来进行生产。单抗生产过程中发生的翻译后修饰、聚集等化学物理变化使其具有高度的异质性，如大小异质性、电荷异质性、序列异质性以及结构异质性，生产和纯化的工艺影响着终产品的质量。分析检测和表征手段被用于其关键质量属性的监测，保障其安全性和有效性。 /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 仪器信息网：目前抗体药物及相关分析检测、表征手段有哪些？相关前沿进展及发展趋势如何？ /strong /span /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong 张曼玉： /strong /span 单抗药物的分析表征项目包括滴度分析、聚集体分析、电荷异质性、分子量检测、肽图、糖型、氨基酸组成分析、活性检测、以及宿主蛋白/DNA残留等，分别用于监控抗体的浓度、聚集体含量和酸碱峰比例；确认其氨基酸序列的正确表达，鉴定翻译后修饰并计算其相对含量；检测其生物学活性，及杂质含量。 /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 考虑到单抗的异质性，为了更好的对其进行监控，相关分析方法涵盖了不同的检测机理和不同的分子大小层面，检测项目相对较多。从色谱分离的角度来看，滴度分析属于亲和色谱，聚集体检测采用尺寸排阻色谱，电荷异质性分析采用离子交换色谱或毛细管等电聚焦，分子量和肽图检测采用反相色谱分离，而糖型分析则用到亲水作用色谱。活性检测包含基于细胞和转基因细胞的活性检测，以及表面等离子共振、均相时间分辨荧光、Alpha技术和荧光染料标记法等新技术的检测方法*。宿主细胞蛋白残留采用ELISA方法，DNA残留检测以实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)为最优。从分子大小层面，包括完整分子、聚体、亚基、肽图和游离糖。针对抗体的单项检测，更快更灵敏的分析方法受到关注和欢迎，如快速的聚集体分析和游离糖分析方案；同时，业内也在探讨采用单一检测方法替代多个检测方法的可行性，以加快抗体检测的进度。（*& nbsp 王兰，徐冈，等.& nbsp 抗体类生物治疗药物活性测定方法.& nbsp 中国生物工程杂志，2015，35（6）：101—108） /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 仪器信息网：请介绍贵公司在抗体药物分析检测方面有哪些仪器产品或产品组合？相比于同类产品，贵公司产品有哪些优势？ /strong /span /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" color: rgb(79, 129, 189) " strong 张曼玉： /strong /span & nbsp 安捷伦作为实验室解决方案供应商，致力于提供平台化的完整解决方案，提供高效液相色谱（HPLC）、生物惰性液相色谱（Bioinert LC）、超高效液相色谱（UHPLC）、毛细管电泳仪（CE）及液相-飞行时间联用质谱（LC/QTOF）用于抗体的分析检测。 /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 液相色谱用于抗体的滴度分析、聚集体检测、电荷异质性、肽图和糖型分析，贯穿药物的研发和质控。安捷伦1260液相色谱是生物制药实验室的经典液相，性能稳定、皮实耐用；1290 UHPLC高效混合和耐压高的特点保障肽图和糖型分析的分离度和结果的重现性。采用四元泵系统搭配Buffer adviser软件能实现聚集体检测-尺寸排阻色谱方法和电荷异质性-离子交换色谱方法的快速开发。操作者只需配置3瓶母液，即可通过软件自动调配出不同pH值和盐浓度的梯度进行方法优化，得出最佳的分离条件，省去大量的缓冲盐配制工作，显著提高工作效率。 /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 尺寸排阻色谱和离子交换色谱都是在高盐体系下对非变性抗体进行的检测，分析系统与样品之前无特异性吸附，对提高分离效果、降低系统残留至关重要。安捷伦 1260 Infinity II 生物惰性液相色谱在样品流路中采用了无金属部件及溶剂输送无铁、无钢的设计，耐酸耐碱耐高盐，最大限度减少了不必要的表面相互作用，提高色谱分离度，适合高盐体系下生物大分子的分析。 /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH100320/C252818.htm" target=" _blank" img title=" 1260infinity.jpg" style=" max-height: 100% max-width: 100% " alt=" 1260infinity.jpg" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/3e38a6bc-98fd-4e1f-ba81-81f324b3f778.jpg" / /a /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH100320/C252818.htm" target=" _blank" Agilent 1260 Infinity II 液相色谱系统& nbsp /a /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 毛细管电泳仪用于抗体研发质控中大小异质性、等电点和电荷异质性的检测，分别采用CE-SDS和CIEF等电聚焦模式。在大小异质性的检测中，安捷伦7100 CE具备高分辨和高速两种采样模式，分别满足高分离度和快速的需求。采用CE进行电荷异质性分析具有分析速度快、条件统一和分析方法开发简单的优点，与液相色谱基于表面电荷进行分离的离子交换方法互为补充。 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " & nbsp /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH100320/C99540.htm" target=" _blank" img title=" 安捷伦毛细管电泳.jpg" style=" max-height: 100% max-width: 100% " alt=" 安捷伦毛细管电泳.jpg" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/049220ba-7a1f-40ff-8869-fc592eced7a8.jpg" / /a /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH100320/C99540.htm" target=" _blank" Agilent 7100 毛细管电泳系统 /a /p p style=" line-height: 1.5em text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 液相-飞行时间联用质谱用于抗体药物研发过程中的分子量测定、氨基酸序列确定、翻译后修饰鉴定及二级结构分析。Agilent 6545XT AdvanceBio LC/QTOF 针对生物大分子而设计，通过改善高真空度提升了单抗的谱图质量和灵敏度；特色的一键式SWARM粒子群调技术进一步提升了抗体检测的灵敏度，并实现了氨基酸等小分子检测灵敏度的兼顾。优异的灵敏度使其得以进行完整蛋白层面的药物代谢的分析，以及与毛细管电泳联机用于电荷异质性分析。 /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " & nbsp /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/SH100320/C242488.htm" target=" _blank" /a /p p style=" text-align: center" a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C265348.htm" target=" _blank" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/ceafa485-6375-45d1-8bf6-aa2374aeb4ce.jpg" title=" tx.jpg" alt=" tx.jpg" / /a /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C265348.htm" target=" _blank" Agilent 6545XT Q-TOF 液质联用系统 /a /p p style=" text-indent: 2em " 了解更多请点击 a href=" https://www.instrument.com.cn/zt/ktywjc" target=" _blank" span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong “抗体药物分析检测技术” /strong /span /a 专题。 /p p style=" text-align: center " br/ /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/zt/ktywjc" target=" _blank" img width=" 550" height=" 138" title=" 抗体.png" style=" width: 550px height: 138px max-height: 100% max-width: 100% " alt=" 抗体.png" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/514512f4-a753-43ca-883c-f8744112e0d2.jpg" border=" 0" vspace=" 0" / /a /p p style=" text-align: center line-height: 1.5em text-indent: 0em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " & nbsp /p

抗体药物中的糖链对抗原性、生物活性、高级结构的稳定性均有很大的影响，因此直接关系到药品的安全性和有效性。由于培养工艺条件的变化会导致抗体药物中的糖链分布不均匀，所以在生产阶段对糖链的管理非常重要。现阶段虽然在日本药典中并未收录糖链的测定方法等内容，但在相关领域有关于介绍测定方法的需求。 本文为您介绍使用超快速液相色谱仪“Nexera X2”和高灵敏度荧光检测器“RF-20AXS” 对抗体药物中的糖链进行分析的方法。该测定方法使用了Core-Shell 型快速分析液相色谱柱“AerisTMPEPTIDE XB-C18”。 因为该色谱柱用于分离分子量较小的肽或进行肽图分析，所以可有效分离抗体药物中所含的糖链与杂质。 岛津荧光检测器RF-20Axs RF-20Axs是带温控功能的分光荧光检测器，采用新光学系统，实现了领先世界水平的高灵敏度。通过附加流通池的温控功能，大幅提升了峰响应对环境温度变化的稳定性。采用帕尔贴元件温控荧光检测器的流通池，可以将流入流通池中的样品的温度保持恒定。伴随温度变化发生荧光强度变化的化合物也可以进行稳定的定量分析。　 了解详情 请点击“使用荧光检测器RF-20AXS 对抗体药物进行高灵敏度糖链分析” 关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司，在中国全境拥有13个分公司，事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心，并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站，已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念，始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务，为中国社会的进步贡献力量。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn/an/ 。

p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 国务院联防联控机制5月6日召开新闻发布会。据介绍，新冠病毒检测目前主要分为抗体检测和核酸检测两种，那么它们的区别是什么呢？ /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202005/uepic/900d3500-db25-46cf-b258-6a4731dbf686.jpg" title=" 国务院联方控制.webp.jpg" alt=" 国务院联方控制.webp.jpg" / /p p 　　 strong 中国疾控中心驻黄冈检测队队长、中国疾控中心病毒病预防控制所曾毅院士、实验室副主任张晓光 /strong 介绍，新冠病毒感染人体之后，首先会在呼吸道系统中进行繁殖，因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的 span style=" color: rgb(192, 0, 0) " strong 病毒核酸判断 /strong /span 人体是否感染病毒。（ strong 核酸检测 /strong ） /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 在感染一段时间，一般是7-10天之后，人体会产生针对病毒的特异性抗体。最先出现的是IgM抗体，随后会出现IgG抗体，所以使用免疫学检测方法能够检测这些特异性抗体，判断人体是否感染过病毒。（ strong 抗体检测 /strong ） /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(192, 0, 0) " strong 新冠的抗体检测和核酸检测的区别 /strong /span /p p style=" text-align: justify " 　　至于两者的区别，核酸阳性说明标本中存在病毒核酸，意味着感染者可能具有传染性。IgM抗体阳性，说明患者处于感染早期，IgG抗体阳性说明感染过新冠病毒，但不能确定其是否具有传染性。康复者一般检测IgG抗体阳性，如果核酸检测阴性，间隔24小时再测核酸仍然是阴性，那提示其不具有传染性。与抗体检测相比，核酸检测更加灵敏，也是实验室检测的“金标准”。 /p p style=" text-align: justify " 　　张晓光表示， strong 无论是抗体检测还是核酸检测，都存在一定比例的假阳性和假阴性 /strong ，所以由临床医生根据临床症状和流行病学调查结果综合进行判断。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " a href=" https://www.instrument.com.cn/news/20200423/536777.shtml" target=" _blank" 【相关资讯】 strong 中央：大规模开展核酸和抗体检测 /strong /a /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " a href=" https://www.instrument.com.cn/news/20200423/536777.shtml" target=" _blank" strong https://www.instrument.com.cn/news/20200423/536777.shtml /strong /a /p

1890年冯˙贝林（von behring）发现了抗白喉毒素血清，发明了人工被动免疫，并提出了抗原和抗体的概念，在后续漫长的抗体研究中，人类相继发展出三代抗体制备技术：①第一代抗体：以抗原免疫高等脊椎动物制备的多克隆抗体；②第二代抗体：由杂交瘤技术产生的只针对某一种特定抗原决定簇的单克隆抗体；③第三代抗体：应用分子克隆技术、基因突变技术改造某种抗体的基因编码序列，生产出的性能更优越的抗体，也称为基因工程抗体或重组抗体。单抗的出现及其显着的优越性（特异性高、蛋白类天然产物等特性）使其在疾病的研究、诊断和治疗中得到广泛应用，但也受到人体的强烈排斥。第三代抗体的产生在一定程度上解决了由于鼠单抗的异源性导致的排斥反应。从最初的人-鼠嵌合抗体将人源化比例升到60~70%，到通过cdr嫁接技术产生的人源化比例更高的人源化抗体，再到由噬菌体展示技术获得的全人抗体，技术的发展不断提高着抗体的质量及人类对抗疾病的能力。除此之外，基因工程除了可获得全长抗体，还可获得抗体片段——小分子抗体，例如单链抗体、fab片段等。这些小分子抗体由于其独特的分子量小、组织渗透性强等特点，也被广泛应用于临床诊断及治疗。下面小编带大家看看这些重组抗体是怎么产生的：1.人-鼠嵌合抗体。用人抗体恒定区基因与小鼠单抗抗体可变区基因组合表达，形成人-鼠嵌合抗体，人源区域占比在60-70%。2.人源化抗体。因为嵌合抗体仍然有较大比例的鼠源性区域，在临床实践中仍会产生比较强烈的排斥反应。为了进一步降低鼠源性区域，产生了cdr嫁接技术（cdr grafting），该技术仅仅保留了鼠源单抗的可变区cdr区域，其他区域是人源的，得到的人源化抗体的人源化比例可高达80-90%。此处科普下cdr区域，它是抗体互补决定区（complementary determining regions，cdrs），是与抗原分子上的表位氨基酸相互作用的区域，也称高变区（hypervariable region，hvr）。后续科学家们又发展出表面重塑技术，即对鼠源抗体的可变区进行表面残基的修饰处理，以降低其免疫原性。3.全人抗体。人源化抗体虽然显着降低了异体排斥反应，然而并未完全消除，其潜在的安全隐患使得科学家不断进行探索。近年来人们将核糖体展示技术、噬菌体展示技术应用于抗体药物的研发，使得制备全人抗体成为可能。噬菌体抗体库筛选是利用噬菌体展示技术，将编码抗体可变区的基因片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合（插入信号肽与衣壳蛋白基因间），以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面，利用特定蛋白/抗原进行筛选获得高亲和力可变区的抗体片段。当使用人源的免疫细胞（或组织）得到的人抗体可变区基因片段构建噬菌体库，然后利用特定抗原进行展示库的筛选，即可获得针对某抗原的人源抗体片段及对应基因序列，最后通过体外蛋白表达及筛选可得到包含人抗体重链和轻链的特异性全人抗体。4.小分子抗体通常我们所说的抗体是全长抗体，包括了轻链和重链全长，全长抗体分子分子量在150~196kda之间。这么大的分子量在实际运用中常遇到组织渗透性差、易降解等问题，为解决这些问题，科学家开发出分子量小、结合力强的抗体片段，如单链抗体、fab抗体等。4.1 单链抗体（single chain variable fragment，scfv）由抗体的重链可变区与轻链可变区连接而成，分子量仅全长抗体的1/6，具有很好的组织穿透性，在临床治疗中得到很好的应用。单链抗体由于保持了全长抗体轻链和重链的可变区，其抗原结合位点没有变化因此仍具有良好的结合特异性。另外，单链抗体的多肽接头可根据需要设计为其他位点如金属螯合位点、连接药物位点等，在临床应用中是一种强有力的工具。4.2 fab片段（antigen binding fragment，抗原结合片段）保留了抗原结合区域，分子量是抗体全长的1/3，具有较好的组织渗透性，同时因为其没有fc段故免疫原性低，常用作导向药物载体及显影等。4.3 多价抗体是能结合多个抗原的抗体，是联合基因工程技术和化学偶联技术制备的一种新型抗体。目前关注较多的“双特异性抗体”，能结合两种不同的抗原，在肿瘤免疫治疗中具有显着的优势。例如，能结合肿瘤细胞表面抗原和杀伤性ｔ细胞表面抗原的双特异性单抗，可以促使这两种细胞彼此靠近，利于杀伤性ｔ细胞杀伤肿瘤细胞，起到促进治疗的作用。

在全球病毒感染性疾病此起彼伏的形势下，人们把疾病的预防提升到了一个新的高度，尤其是免疫疫苗、抗病毒疫苗、抗肿瘤疫苗已成为开发的热点。为了进一步推动我国疫苗抗体药物研究领域的发展，促进国际研发合作，第三届北京疫苗与抗体创新国际论坛于2021 年7月8-9日在北京亦庄生物医药园成功举办，岛津企业管理（中国）有限公司（以下简称“岛津”）受邀参加了此次大会，发表最新报告并分享疫苗抗体最新技术。此次论坛受到了中国生物器材网、分析测试百科网及仪器信息网等多家业内知名媒体的关注，论坛除主会场外共设置疫苗研发与评价、生物制药研发技术及生物制药研发技术三个专题。论坛首日主会场，岛津分析计测事业部市场部程汉兴发表了题目为《助力创新，岛津赋能中国疫苗与抗体行业发展方案》的报告。 岛津分析计测事业部市场部程汉兴 在报告中程汉兴首先介绍了岛津有关抗体药物以及疫苗相关工作，以抗体药物为例，围绕工艺监测和质量控制推动生物药高质量发展。岛津现有基于LC MS/MS方法的培养基和工艺监测方案可以通过离线和在线模式实现分析培养基以及细胞上清液中有机组分，监控培养基中的氨基酸，核苷酸等125种以上物质浓度变化，研究培养基中营养成分消耗变化，进而优化培养基配方及补料成分，保证抗体产品高质量生产。 从质量分析角度，在抗体以及抗体偶联药物（ADC）的表征分析实验中，可利用岛津生物兼容型液相以及高分辨飞行时间质谱，可以分析抗体的分子量，蛋白序列，二硫键以及糖型分析。如需要对抗体偶联药物关键参数DAR值进行研究，可使用针对ADC专门开发的SHIMSEN Ankylo HIC-Butyl色谱柱，可有效实现不同偶联药物抗体的分离，岛津将提供从色谱到耗材等整体解决方案。 在疫苗研究方面，程汉兴还介绍了岛津多年来与用户合作开发的多种类型疫苗解决方案。利用生物兼容型液相分析病毒疫苗抗原蛋白含量测定，使用LC-MS/MS用于百白破疫苗成品中多种抗原蛋白的定量以及TCT毒素分析。针对肺炎多糖结合疫苗，使用液相质谱快速定量糖醛酸等成分，效率大大提升。围绕mRNA疫苗相关的核酸定性分析，使用高分辨飞行时间质谱可以对核酸分子量及序列进行定性表征。 现场传真 大会期间，岛津设立相应展位与参会的专家学者进行交流，与嘉宾一同交流探讨岛津有关抗体药物以及疫苗相关方案，主要围绕工艺监测和质量控制以推动生物药高质量发展。

新冠抗体特别是中和抗体的快速检测，不仅有利于新冠疫苗的安全效用评估，而且有助于阐明新冠病毒免疫学、流行病学和个体化医学的多项关键性问题。西湖大学Mohamad Sawan院士团队利用光纤生物膜干涉技术（Fiber optic-biolayer interferometry (FO-BLI，图1A）实现了对SARS-CoV-2结合抗体与中和抗体的快速检测（图1B,1C），成果发表于Biosensors and Bioelectronics。图1. 光纤结构 (A)，光纤表面新冠结合抗体(B)与新冠中和抗体(C)检测原理图。生物膜干涉技术是一种通过检测干涉光谱的位移变化来检测传感器表面反应的技术，被广泛用于分子间亲和力的表征。此项目巧妙地利用3,3′-Diaminobenzidine (简称DAB, 一辣根过氧化物酶HRP的反应底物）放大信号，实现了对新冠抗体的精准定量分析。本课题的特别之处在于，实现了对结合抗体高灵敏性（10 ng/mL）与全程13分钟的检测，以及对中和抗体高灵敏性（10 ng/mL）与全程7.5 min的检测（图2）。图2. FO-BLI生物传感器对新冠结合抗体与中和抗体的检测流程。通过对多种新冠抗体与新冠适配体的预临床分析，与接种疫苗后健康人群体内血清样本的临床研究，此技术所产生的结果与商业化试剂盒产生的结果有很好的一致性。考虑到检测方案具有很强的灵活性，它可用于对新冠变异体Delta与Omicron等中和抗体的快速筛选。该技术不仅适用于对单个血清样本的个体化分析，同时适用于高通量的样本分析。目前，技术成果已申报两项国家发明专利。西湖大学工学院CenBRAIN团队助理研究员卞素敏博士为本文第一作者，浙江大学医学院附属邵逸夫医院尚敏研究员为共同第一作者，CenBRAIN创始人Mohamad Sawan院士为通讯作者。该工作得到了国家自然科学基金与浙江省领军型创新创业团队项目等经费的资助。原文链接：https://doi.org/10.1016/j.bios.2022.114054

输血是临床上治疗急性失血、贫血和凝血障碍的主要手段，挽救了无数患者的生命。然而，输血不相容会导致多种输血不良反应，增加溶血性疾病（如新生儿溶血病、自身免疫性溶血病、药物免疫性溶血病）和肾功能衰竭的风险，严重者导致死亡。不完全抗体是引发溶血性输血反应的主要因素，为有效避免输血不良反应，输血前应借助抗人球蛋白试验方法对患者进行不完全抗体反应强度的检测。不完全抗体检测反应强度分为五级，强度越大，输血不相容的程度越高，若输入血液与患者自身血液不相容的程度越高，输血不良反应越严重。　　目前，临床上广泛应用的是微柱凝胶抗人球蛋白试验，但存在易出现假阳性结果、试剂原材料价格高等问题。中国科学院苏州生物医学工程技术研究所血液免疫学中心团队提出水性胶抗人球蛋白试验方法（Transfusion and Apheresis Science，DOI：10.1016/j.transci.2015.06.003），并开展不完全抗体检测智能化设备研发。然而，该试验设备的反应装置遮挡试验人员视线，使其无法直接观测结果，且打开反应装置直接进行观测又易造成血样污染。同时人工判读主观性强、准确率低（平均准确率为88.5%）、效率低。因此，提升不完全抗体检测反应强度的分级效率，客观精准地进行智能化检测分级，实现临床检测判读的规范化和标准化，将有助于建立检测不完全抗体反应强度量化分级体系，推动不完全抗体检测智能化判读设备的研发。　　苏州医工所高欣团队协助血液免疫学研究中心团队为自行研制的不完全抗体智能化判读设备，提出了一种不完全抗体反应强度分级检测新方法（CBAM-CNN Ensemble Model）。研究借助集成深度学习方法，基于多种深度卷积神经网络架构，利用端到端的并行混合处理模式构建了不完全抗体反应强度自动分级模型，同时运用毫秒级决策融合计算方法，自动输出反应强度级别。实验结果表明，集成深度卷积网络具有优秀的检测能力，准确率高达99.8%，与三名实验人员组成的专家团队（从业时间介于2-5年）的结果比对，所提方法具有明显优势（准确率提升11.3%），检测判读速度提高了约60倍（0.094秒/张 vs. 5.528秒/张）。相关成果发表在Medical & Biological Engineering & Computing上。　　上述方法在训练卷积神经网络的过程中，需要预先对小样本集进行数据增强操作。而增强样本无法完全实现图像的语义不变性，导致临床应用受限。为此，进一步，研究提出一种神经网络和机器学习相结合的分类方法（CNN-ML Ensemble Model）。研究利用套索回归算法（Least Absolute Shrinkage and Selection Operator，LASSO）过滤冗余非线性特征，在高维空间中对小样本数据进行高效分析，克服样本量不足的问题，实现精确拟合不完全抗体的数据分布。实验结果表明，使用原始集训练的卷积神经-机器学习集成模型分级准确率达到99.2%，接近增强训练的集成深度卷积网络模型精度。同时，在人机交互实验中，实验人员在该模型辅助下准确率提升了17.9%，增加了智能模型辅助诊断的可信度。相关成果发表在Technology and Health Care上。　　上述工作探索并验证了人工智能方法在不完全抗体检测上的潜在价值，可精准高效地实现不完全抗体反应强度分级检测。该方法将提升溶血性疾病筛查设备的自动化和智能化程度，具有临床应用潜力，有助于我国血液安全保障事业的发展。当前，科研团队正在利用相关技术，应用嵌入式软硬件结合方法，开展智能化判读设备的研发工作，以保证采集图像的真实性和分析结果的有效性，推进智能精准诊断设备的自动化建设。研究工作得到山东省重点研发计划、国家自然科学基金等的支持。

Flag标签蛋白检测抗体　　远慕生物提供可用于WB，IF，IP应用的Flag抗体，特异性检测Flag标签融合蛋白，Flag标签抗体可识别在细胞内表达的Flag标记重组蛋白，包括Flag位于氨基末端、中段以及羧基末端的重组蛋白。　　Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽（ DYKDDDDK）融合到目标蛋白。Flag标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于细菌、酵母和哺乳动物细胞等多种细胞类型，相应的Flag标签抗体也被广泛应用。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的，因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。Flag标签可以通过加入肠激酶处理去除，肠激酶专一识别该肽序列C末端的5个氨基酸残基。Flag抗体可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。　　由于Flag标签蛋白检测抗体亲水特性，Flag标签往往位于融合蛋白的表面上，因此比较容易被抗体接近并识别。不同的Flag标签抗体与Flag标签 有不同的识别和结合特性。　　Fig. 1. Flag标签蛋白IP实验，IP (1:200) - WB (1:5,000)：未转染的293细胞裂解液(lane A), 转染了Flag标签蛋白的293细胞转染裂解液 (lane B), 使用小鼠IgG作为阴性对照免疫沉淀293细胞裂解液(lane C),使用Flag单克隆抗体（1B10）IP转染后的293细胞裂解液(lane D), 293细胞裂解液 中仅加入Protein G Beads (lane E).　　Fig. 2. 使用Flag标签单克 隆抗体，通过免疫荧光实验（1:2000），分析转染的Flag 重组蛋白在293细胞中的定 位，二抗为IFKine? Red 驴抗 小鼠，蓝色为DAPI染色的细 胞核。

尽管疫苗技术取得了重大而惊人的进步，但新冠疫情尚未结束。控制新冠病毒传播的一个关键挑战是识别受感染的个体。日本研究人员开发了一种基于抗体的新方法，用于快速可靠地检测新冠病毒，且不需要血液样本。研究成果近日发表在《科学报告》杂志上。　　对新冠病毒感染者的无效识别严重限制了全球对新冠疫情的反应，而较高的无症状感染率（16%—38%）加剧了这种情况。迄今为止，主要的检测方法是通过擦拭鼻子和喉咙来收集样本。然而，该方法的应用受到其检测时间长（4—6小时）、成本高以及对专业设备和医务人员的要求的限制，特别是在资源有限的国家。　　确认新冠感染的另一种补充方法是检测新冠病毒特异性抗体。基于金纳米颗粒的测试条目前在许多国家广泛用于即时测试。它们在10到20分钟内产生灵敏且可靠的结果，但其需要使用采血装置通过手指针刺采集血样，既痛苦又增加了感染或交叉污染的风险，此外，使用的试剂盒组件也存在潜在的生物危害风险。　　东京大学工业科学研究所的研究人员解释说：“为了开发一种可避免这些缺点的微创检测方法，我们探索了对间质液进行采样和检测的想法，间质液位于人体皮肤的表皮层和真皮层中。尽管间质液中的抗体水平约为血液的15%—25%，但仍然可以检测到抗新冠病毒IgM/IgG抗体，并且间质液可作为血液采样的直接替代品。”　　在证明间质液可能适用于抗体检测后，研究人员开发了一种采样测试的创新方法。首先，研究人员开发了由聚乳酸制成的可生物降解的多孔微针，可从人体皮肤中提取间质液。然后，他们构建了一种基于纸张的免疫测定生物传感器，用于检测新冠病毒特异性抗体。通过整合这两个元素，研究人员创建了一个紧凑的贴片，能够在3分钟内现场检测抗体。

p style=" margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em " 日前，为落实国家和湖北省关于常态化疫情防控工作的相关要求，湖北省医疗保障局下发通知，将新型冠状病毒核酸检测、新型冠状病毒抗体检测项目临时纳入湖北省基本医疗保险诊疗目录，按乙类支付，自5月6日起在全省正式执行。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 337px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202005/uepic/4236cfed-d6f7-4705-8ee6-5ba9dc9307c4.jpg" title=" 1 核酸检测.jpg" alt=" 1 核酸检测.jpg" width=" 600" height=" 337" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em " 通常新增医疗服务项目纳入医保目录，要根据“临床诊疗必需、安全有效、费用适宜”的原则，经过申请、初核、专家评审、公示、批准等一系列流程，才能纳入医保支付范围。为了确保新冠肺炎患者得到及时救治，疫情之初，湖北省率先明确将确诊和疑似患者在医疗机构治疗期间，进行核酸检测、抗体检测费用纳入医保支付范围。此后又启动新型冠状病毒相关检测试剂集中采购，制定全省核酸检测、抗体检测最高限价。此次又按照特事特办原则，将相关检测项目临时纳入医保目录，在疫情期间，按现行医保政策规定执行。 /p p style=" margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em " 核酸、抗体检测项目纳入医保支付，医保支付具体标准由湖北省各地根据本地实际，自行确定，但不得高于此前全省核酸检测180元/次、抗体检测50元/项的最高限价，实行动态调整。 /p

section data-role=" outer" label=" Powered by 135editor.com" section data-role=" outer" label=" Powered by 135editor.com" section data-role=" paragraph" class=" _135editor" section class=" _135editor" data-tools=" 135编辑器" data-id=" 32290" section style=" clear: both padding: 0px border: 0px none margin: 5px 0px box-sizing: border-box " section style=" border-top-width: 2.5px border-top-style: solid border-color: #ef7060 font-size: 1em font-weight: inherit text-decoration: inherit color: #fefefe box-sizing: border-box " section style=" border: 0px rgb(239, 112, 96) margin: 2px 0px 0px overflow: hidden padding: 0px color: inherit box-sizing: border-box " section style=" display: inline-block font-size: 1em font-weight: inherit text-align: inherit text-decoration: inherit color: inherit border-color: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box " section class=" 135brush" data-bcless=" darken" data-brushtype=" text" style=" display: inline-block line-height: 1.4em padding: 5px 10px height: 32px vertical-align: top font-weight: bold float: left color: inherit border-color: rgb(212, 43, 21) background: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box !important " “应检尽检、愿检尽检” /section section class=" assistant" style=" display: inline-block vertical-align: top width: 0px height: 32px border-top: 32px solid rgb(239, 112, 96) border-right: 32px solid transparent border-top-right-radius: 4px border-bottom-left-radius: 2px color: inherit overflow: hidden box-sizing: border-box !important " /section /section /section /section /section /section p style=" text-align:justify text-indent: 32px " 中央应对新冠肺炎疫情工作领导小组22日召开会议。会议指出，做到“四早”首要是早发现。做好常态化防控要加快提升检测能力，大规模开展核酸和抗体检测。要加快提升检测技术，抓紧增加更简便、更高效准确的检测设备生产，广泛配备到医院、口岸等急需方面，扩大商业化应用，做到对重点人群应检尽检，对复工复产中人员聚集的单位、场所优先做到愿检尽检。 /p p style=" text-align:center text-indent: 0em " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/eeda61a4-d35e-478a-87f7-b8ac2e7e5303.jpg" title=" image001.jpg" alt=" image001.jpg" width=" 312" height=" 326" data-ratio=" 1.0440097799511003" data-w=" 409" style=" caret-color: red max-height: 100% width: 312px height: 326px " / span style=" caret-color: red " /span /p p style=" text-align:justify text-indent: 32px " 目前主要的检测方法就是核酸检测、抗体检测和抗原检测，但是国家药监局目前仍然没有批准抗原检测产品（敏感性不及核酸），所以我们暂不进行讨论。截至2020年4月23日，国家药品监督管理局应急审批批准30个新冠病毒检测试剂，其中包括19个核酸检测试剂和11个抗体检测试剂。从技术角度出发，现有的检测技术可以满足大部分需求，但仍然存在一些局限性，因此加快提升检测技术是关键。 /p section class=" _135editor" data-tools=" 135编辑器" data-id=" 32290" section style=" clear: both padding: 0px border: 0px none margin: 5px 0px box-sizing: border-box " section style=" border-top-width: 2.5px border-top-style: solid border-color: #ef7060 font-size: 1em font-weight: inherit text-decoration: inherit color: #fefefe box-sizing: border-box " section style=" border: 0px rgb(239, 112, 96) margin: 2px 0px 0px overflow: hidden padding: 0px color: inherit box-sizing: border-box " section style=" display: inline-block font-size: 1em font-weight: inherit text-align: inherit text-decoration: inherit color: inherit border-color: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box " section class=" 135brush" data-bcless=" darken" data-brushtype=" text" style=" display: inline-block line-height: 1.4em padding: 5px 10px height: 32px vertical-align: top font-weight: bold float: left color: inherit border-color: rgb(212, 43, 21) background: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box !important " 核酸检测准确度低，容易出现假阴性 /section section class=" assistant" style=" display: inline-block vertical-align: top width: 0px height: 32px border-top: 32px solid rgb(239, 112, 96) border-right: 32px solid transparent border-top-right-radius: 4px border-bottom-left-radius: 2px color: inherit overflow: hidden box-sizing: border-box !important " /section /section /section /section /section /section p style=" text-align:justify text-indent: 2em " 核酸检测是确诊新冠肺炎的“金标准”，目前是最可靠的筛查和确认手段，主要是利用实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术，相比于抗体检测灵敏度高。 strong 但是阳性率还是较低只有30%至50%。 /strong 主要的原因是样本处理、试剂质量问题以及方法学本身的问题综合导致，因此这也为技术厂商提供一定的仪器试剂发展方向。 /p section class=" _135editor" data-tools=" 135编辑器" data-id=" 32290" section style=" clear: both padding: 0px border: 0px none margin: 5px 0px box-sizing: border-box " section style=" border-top-width: 2.5px border-top-style: solid border-color: #ef7060 font-size: 1em font-weight: inherit text-decoration: inherit color: #fefefe box-sizing: border-box " section style=" border: 0px rgb(239, 112, 96) margin: 2px 0px 0px overflow: hidden padding: 0px color: inherit box-sizing: border-box " section style=" display: inline-block font-size: 1em font-weight: inherit text-align: inherit text-decoration: inherit color: inherit border-color: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box " section class=" 135brush" data-bcless=" darken" data-brushtype=" text" style=" display: inline-block line-height: 1.4em padding: 5px 10px height: 32px vertical-align: top font-weight: bold float: left color: inherit border-color: rgb(212, 43, 21) background: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box !important " 抗体检测技术存在滞后性 /section section class=" assistant" style=" display: inline-block vertical-align: top width: 0px height: 32px border-top: 32px solid rgb(239, 112, 96) border-right: 32px solid transparent border-top-right-radius: 4px border-bottom-left-radius: 2px color: inherit overflow: hidden box-sizing: border-box !important " /section /section /section /section /section /section p style=" text-align:justify text-indent: 32px " 抗体检测属于免疫学检测方法，主要是看样本中有没有病毒相关蛋白或者相关抗体。主要使用的是 strong 胶体金方法 /strong ，类似于血糖仪的检测场景，该类检测最大的优势在于方便快捷，能够有效突破现有检测技术对人员、场所的限制。 strong 但抗体检测主要存在窗口期时间较长的局限性 /strong ，新型冠状病毒侵入人体5-7天后才会出现IgM抗体，然后在10-15天后出现IgG抗体，所以最大的缺点就是 strong 容易导致漏诊的情况出现 /strong 。 /p section class=" _135editor" data-tools=" 135编辑器" data-id=" 32290" section style=" clear: both padding: 0px border: 0px none margin: 5px 0px box-sizing: border-box " section style=" border-top-width: 2.5px border-top-style: solid border-color: #ef7060 font-size: 1em font-weight: inherit text-decoration: inherit color: #fefefe box-sizing: border-box " section style=" border: 0px rgb(239, 112, 96) margin: 2px 0px 0px overflow: hidden padding: 0px color: inherit box-sizing: border-box " section style=" display: inline-block font-size: 1em font-weight: inherit text-align: inherit text-decoration: inherit color: inherit border-color: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box " section class=" 135brush" data-bcless=" darken" data-brushtype=" text" style=" display: inline-block line-height: 1.4em padding: 5px 10px height: 32px vertical-align: top font-weight: bold float: left color: inherit border-color: rgb(212, 43, 21) background: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box !important " 新冠检测技术进展各有亮点 /section section class=" assistant" style=" display: inline-block vertical-align: top width: 0px height: 32px border-top: 32px solid rgb(239, 112, 96) border-right: 32px solid transparent border-top-right-radius: 4px border-bottom-left-radius: 2px color: inherit overflow: hidden box-sizing: border-box !important " /section /section /section /section /section /section p style=" text-align:justify text-indent: 32px " 近期处于热议中的雅培ID NOW COVID-19检测试剂，官方称可在5分钟内获得新冠阳性结果。但该方法的检测限相比于荧光定量PCR高，即灵敏度较低。此后，它的检测准确率又被美国白宫质疑，基于NEAR技术(切口酶扩增反应技术)的核酸检测方法，虽有速度和灵敏度的优势，但短序列的设计确实存在高假阳性的可能。 strong 因此后续的升级款是否会在准确率方向进行提升值得期待 /strong 。 /p p style=" text-align:center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/af9ed3cc-e20c-4f26-ab18-e10431250c3a.jpg" title=" image002.jpg" alt=" image002.jpg" style=" width:auto max-width: 100% max-height: 100% " data-ratio=" 1.0268817204301075" data-w=" 186" / /p p style=" text-align:center text-indent: 0em " 雅培ID NOW设备 /p p style=" text-align:justify text-indent: 32px " 罗氏在三月中旬推出的用于检测该疾病病毒活性的 strong 高通量PCR检测系统 /strong cobas 6800/8800，据悉将显著提高现有的SARS-CoV-2检测能力，可在3个半小时内提供多达96个检测结果，在24小时内，cobas 6800和8800系统可分别提供1,440和4,128个检测结果。系统无人值守时间分别长达8小时（cobas 6800系统）和4小时（cobas 8800系统），提高了工作效率和灵活性。 strong 只是目前cobas SARS-CoV-2检测尚未获得FDA许可或批准，在大规模检测过程中，高通量是检测仪器必要的。 /strong /p p style=" text-align:justify text-indent: 32px " 近日，麻省理工学院称其开发的核酸检测系统绕开PCR扩增、采用等温扩增技术RPA，有望在一小时内实现病毒检测。 /p p style=" text-align:justify text-indent: 32px " 检测试剂不是万能的，不同的方法，具有不同的特点，针对不同的景，也有其局限性。中国对抗体的定位是核酸阴性的补充确诊手段，疫情防控的目的是发现所有的感染者。通过核酸、抗体检测方式联合应用，缩短检测窗口期，提高阳性检出率，在新冠肺炎的辅助诊断方面，具有十分重要的作用，毕竟不是所有的机构都适合做核酸检测。 /p section class=" _135editor" data-tools=" 135编辑器" data-id=" 32290" section style=" clear: both padding: 0px border: 0px none margin: 5px 0px box-sizing: border-box " section style=" border-top-width: 2.5px border-top-style: solid border-color: #ef7060 font-size: 1em font-weight: inherit text-decoration: inherit color: #fefefe box-sizing: border-box " section style=" border: 0px rgb(239, 112, 96) margin: 2px 0px 0px overflow: hidden padding: 0px color: inherit box-sizing: border-box " section style=" display: inline-block font-size: 1em font-weight: inherit text-align: inherit text-decoration: inherit color: inherit border-color: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box " section class=" 135brush" data-bcless=" darken" data-brushtype=" text" style=" display: inline-block line-height: 1.4em padding: 5px 10px height: 32px vertical-align: top font-weight: bold float: left color: inherit border-color: rgb(212, 43, 21) background: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box !important " 核酸检测商业化应用 /section section class=" assistant" style=" display: inline-block vertical-align: top width: 0px height: 32px border-top: 32px solid rgb(239, 112, 96) border-right: 32px solid transparent border-top-right-radius: 4px border-bottom-left-radius: 2px color: inherit overflow: hidden box-sizing: border-box !important " /section /section /section /section /section /section p style=" text-indent: 33px " span style=" font-size: 15px letter-spacing: 1px background: white " 在大规模检测的政策环境下，检测仪器与试剂的 /span 生产成本及销售价格也是大家所关注的。目前市面上 span style=" font-size: 15px letter-spacing: 1px background: white " 新冠核酸检测的成本较高，在某平台上单次检测价格是 /span span style=" font-size: 15px letter-spacing: 1px background: white font-family: Helvetica, sans-serif " 200-300 /span span style=" font-size: 15px letter-spacing: 1px background: white " 元不等。要知道扩大检测规模后，谁能保证每个人只筛查一次，这样的投入不论是个人、企业还是政府而言，都可能是一种负担。 strong 那么研发更加低廉的核酸检测试剂与平台也会是当下厂商面临的发展方向。 /strong /span /p p style=" text-align:center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/13f4bbf3-173a-4d95-be24-be6716586678.jpg" title=" image003.jpg" alt=" image003.jpg" width=" 552" height=" 227" style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 100% height: 227px " data-ratio=" 0.41040462427745666" data-w=" 692" / /p p style=" text-align:center text-indent: 0em " 某平台核酸检测服务价格在200-300不等 /p p style=" text-align:justify text-indent: 2em " 截止发稿前，笔者发现 strong 华大基因 /strong 在电商平台拼多多已经开卖核酸检测服务，24h即可出具电子版本检测报告。 /p p style=" text-align:center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/fdf55210-f682-4935-9e82-50360e2ef09b.jpg" title=" 华大基因.拼多多.jpg" alt=" 华大基因.拼多多.jpg" width=" 187" height=" 283" style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 187px height: 283px " data-ratio=" 1.44" data-w=" 750" / /p section class=" _135editor" data-tools=" 135编辑器" data-id=" 32290" section style=" clear: both padding: 0px border: 0px none margin: 5px 0px box-sizing: border-box " section style=" border-top-width: 2.5px border-top-style: solid border-color: #ef7060 font-size: 1em font-weight: inherit text-decoration: inherit color: #fefefe box-sizing: border-box " section style=" border: 0px rgb(239, 112, 96) margin: 2px 0px 0px overflow: hidden padding: 0px color: inherit box-sizing: border-box " section style=" display: inline-block font-size: 1em font-weight: inherit text-align: inherit text-decoration: inherit color: inherit border-color: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box " section class=" 135brush" data-bcless=" darken" data-brushtype=" text" style=" display: inline-block line-height: 1.4em padding: 5px 10px height: 32px vertical-align: top font-weight: bold float: left color: inherit border-color: rgb(212, 43, 21) background: rgb(239, 112, 96) font-family: inherit box-sizing: border-box !important " 未来新冠检测应用场景带来的市场“福利” /section section class=" assistant" style=" display: inline-block vertical-align: top width: 0px height: 32px border-top: 32px solid rgb(239, 112, 96) border-right: 32px solid transparent border-top-right-radius: 4px border-bottom-left-radius: 2px color: inherit overflow: hidden box-sizing: border-box !important " /section /section /section /section /section /section p style=" text-indent: 33px " span style=" font-size: 15px letter-spacing: 1px " 目前各方判断，新冠病毒有可能成为类似流感病毒一样和人类长期共存的病毒。因此 /span 当新冠检测规模扩大，甚至下沉到社区，必然会产生巨大的样本检测量，理论上就要求检测仪器必须满足 strong 现场大规模快速检测、准确度高 /strong 、 strong 操作简单、自动化程度高价格低、便携小型化、价格低廉 /strong 等特点。此外，企业想要把握这次市场“福利”，不仅要尽可能满足上述仪器试剂的发展要求，也要保证仪器试剂的 strong 产能足够高 /strong ，满足大规模检测的需求。 /p section class=" _135editor" data-tools=" 135编辑器" data-id=" 86318" section class=" _135editor" data-tools=" 135编辑器" data-id=" 86318" data-color=" #ef7060" section class=" layout" style=" margin: 0px auto " section class=" " style=" margin-top: 2em padding-top: 0.5em padding-bottom: 0.5em font-size: 1em font-weight: inherit line-height: 22.4px border-style: solid none none border-top-width: 1px border-top-color: rgb(204, 204, 204) text-decoration: inherit color: rgb(166, 166, 166) box-sizing: border-box font-family: inherit " section class=" " style=" margin-top: -1.2em text-align: center border: none line-height: 1.4 box-sizing: border-box " span class=" 135brush" data-brushtype=" text" style=" padding: 8px 23px border-radius: 25px color: rgb(255, 255, 255) font-weight: inherit text-decoration: inherit border-color: rgb(17, 17, 17) background-color: rgb(17, 17, 17) font-family: inherit " 后记： /span /section /section /section /section /section p style=" text-indent: 32px " 据悉目前核酸等温扩增仪器的最新进展是，在某些针对贫困地区的设备甚至不需要电即可在常温或温水里运行（目前处于研究阶段）。这也为仪器试剂厂商指出了一定的技术方向。如果能实现该项技术，那么核酸检测的应用场景将被进一步扩大，市场机遇也会随之而来。 /p /section /section /section

艾滋病抗体检测采用原来酶联法需要一个星期左右才能拿到结果，而快速检测法，只需约40分钟即能出结果。 　　目前，艾滋病抗体快速检测法，在杭州江干、下城区等疾病控制中心的艾滋病自愿咨询检测室(VCT)使用，相关部门也对其实际效果进行了评估，有望在全国范围内推广运用。 　　艾滋病抗体快检法目前已在江干、下城等主城区的疾控中心艾滋病自愿咨询检测室(VCT)门诊运用。所有前来咨询检测的人只要凭身份证即可享受该项服务，并且全部免费。 　　在受检当中，男男同性恋(MSM)是艾滋病感染的高危人群，也是疾控中心工作人员的重点干预对象。为便于男男同性恋人群进行检测，江干区疾病控制中心从2010年11月开始，在辖区的两家浴室设立了快速检测点，并在每周星期6下午至晚上在浴室为男男同性恋提供艾滋病检测服务。下城区疾病控制中心近期在辖区男男同性恋志愿者办公室设立了快速检测点，疾控中心的工作人员定期来此帮助检测者进行艾滋病自测。 　　根据下城区疾病控制中心负责人的介绍，“按照以前常规的检测方法，需几天时间，受检者在等待结果的过程中，心情是十分紧张焦虑的，而通过快速检测法，只需要等40分钟，就能取得结果。另外一个好处是减少了一次抽血，缩短了最终结果的确认时间。采用以前常规的方法检测，如果7天后取得的检测结果是阳性者的话，还需再来疾控中心抽血样，送上级疾控部门检测确认。而快检就不需要了，如果发现是阳性，直接送上级疾控部门确认。此外，检测者只需提供身份证就可以免费检测，这样避免了核查阳性感染者的真实身份信息。”通过快速检测，下城区疾病控制中心在近的一个月内，已通过快速检测法发现4例HIV阳性者。 　　江干区疾病控制中心，开展了已近一年的快速检测，该中心倪科长介绍说，经过一年的快速法检测，其检测准确率很高，与常规方法无异，但他们现在还是用两种方法都测一遍，结果完全一致。从2010年11月至2011年4月，该中心共检测了180人，发现了25例HIV阳性感染者。其中在浴室通过快速检测法检测的87人当中，发现了10位HIV阳性感染者。 　　杭州市卫生局负责人提醒广大市民，市疾控中心和各区、县(市)疾控中心均设有艾滋病自愿免费咨询检测室。有过危险性行为者，应主动就近进行艾滋病检测。检测结果直接通知受检者本人，因此不要有顾虑。

该研究首次提出了一种聚合物多模波导，其特征在于开创性的匙形几何形状，用于设计表面等离子体共振（SPR）生化传感器。通过在匙形波导上层叠约60nm的金纳米膜来实现等离子体元激发。由于波导的特殊几何结构，确定了两个不同的传感区域：一个位于勺子颈部的平面传感区域和一个位于碗上具有倾斜表面的凹面传感区域。体感度（Sn）与传感器发射/收集光的方式（平行或垂直于波导的主轴）和被询问的感测区域（平面颈部或角碗）相关，表明传感器的性能可以根据所选的测量配置方便地调整。SPR传感器的特性表明，颈部的Sn为750nm/RIU，碗部的Sn为950nm/RIU。为了进一步检查特殊的传感特征并评估应用环境，这两种受体都对人血清白蛋白（HSA）具有特异性：碗区的抗体（高Sn）；颈部区域（低Sn）上的分子印迹纳米颗粒（纳米MIP）。实验结果表明，免疫传感器的检测限（LOD）为280 pm，纳米MIP传感器的检测极限（LOD），为4.16fm。HSA多传感器的总体响应包含八个数量级，表明匙形波导提供多尺度检测，并具有设计多分析物传感平台的潜力。图1（A）匙形光波导的几何形状（B）碗面角度的细节（C）等离子体传感平台的设置（D）光导效应的变化可以在未涂覆波导上被理解为光散射的变化。图2基于匙形聚合物波导的实验SPR传感器配置。图3（A）共振波长变化。图4是（A）纳米MIP的功能化感测区域的表面形貌的原子力显微镜3D视图；（B）抗体功能化传感区。图5（A ）具有抗体受体的等离子体光谱，获得的HSA浓度范围为0.53-5300nm。（B）相对于空白的共振波长变化的绝对值，绘制为HSA浓度的函数（半对数标度）；(C）具有纳米MIPS受体的等离子体光谱，HSA浓度范围为0.53–530 fM。(D）相对于空白的共振波长变化的绝对值。原文题目：Spoon-shaped polymer waveguides to excite multiple plasmonic phenomena: A multisensor based on antibody and molecularly imprinted nanoparticles to detect albumin concentrations over eight orders of magnitude.原文链接：https://doi.org/10.1016/j.bios.2022.114707

大家好，本周为大家分享一篇发表在mAbs上的综述，A perspective toward mass spectrometry-based de novo sequencing of endogenous antibodies1，通讯作者是来自荷兰乌得勒支大学Bijvoet生物分子研究中心的Albert J.R. Heck。　　据估计，人体可以产生的抗体理论序列超过1015种，这些序列是独一无二但又高度相似的，这使得它们的表征和测序非常复杂。抗体的结构从功能上分为Fab段和Fc段，其中Fab负责与抗原结合，具有高度变异性，这种突变主要集中在Fab段的互补决定区(CDR)，阐明这部分的序列对抗体的发现非常重要。 图1展示了用于抗体序列分析的三种组学策略。Bottom-up(BU)是最流行的测序方法，可以通过数据库匹配或完全的从头测序实现对抗体的序列分析，但主要用于高度纯化的重组抗体。第二种策略是通过将基于MS的技术与基因组学/转录组学相结合，例如全基因组测序或 BCR 测序，通过B细胞测序生成个性化序列数据库，将BU MS数据靶向该数据库搜索，是一个部分从头测序的流程。第三种策略是结合几种基于MS的de novo方法，如Top-down(TD)和Middle-down(MD)，旨在直接从临床样本中确定选定抗体克隆的完整序列，而无需其他组学数据的帮助。　　图1 基于MS的抗体测序的三种策略　　通过BU方法进行的从头测序需要高度的序列覆盖，理想情况下，抗体中的每个序列位置都由多个重叠的肽段支持。通过缩短酶的孵育时间、微波辅助水解，或使用具有协同序列特异性的多种酶，可以产生较长的肽段或较多的重叠序列。图2所示的工作使用总共9种蛋白酶(包括特异性和非特异性)成功地从头测序抗 FLAG-M2小鼠mAb全长。通过覆盖整个CDR的高分肽获得了高置信度的CDR序列，所选择的6条肽段来自5种不同蛋白酶的消化。　　图2 单克隆抗体Anti-FLAG M2的测序。　　对于抗体这种具有高度变异性的蛋白质，通常无法获得完整和准确的序列数据库来进行匹配。相反，可以使用来自基因组或转录组实验的同源序列。抗体种编码每个区域的基因可作为种系序列获得，基于序列对齐或序列标签提取的容错片段匹配算法可以使用同源数据库对实验确定的序列进行评分。同源序列数据库还可以作为种系模板来辅助从头测序肽段的组装。　　TD/MD策略虽存在对分子量较大蛋白的电离效率低、分辨率低等限制，但近年该领域的一些进展也报告了相对较高的序列覆盖率。Shaw 等人报道了使用现代仪器将完整的 mAb 在非变性状态下片段化(图3)。通过在单个串联 MS 实验中结合 ECD 和 HCD，获得了曲妥珠单抗 42% 的轻链序列覆盖率和 20% 的重链序列覆盖率。产生的碎片谱不仅包含多电荷主链碎片产物，还包含链间二硫键断裂产生的完整轻链。　　图3 轻链 (a) 和重链 (b) 片段图显示了曲妥珠单抗上 ECD 和 HCD 组合产生的序列覆盖率。二硫键用虚线表示，CDR3 区域以黄色高亮显示。(c)为完整曲妥珠单抗的 25+ 电荷态的相应碎片谱，插图显示了轻链的 9+ 电荷态和各种碎片离子。红色和蓝色碎片离子标签分别对应轻链和重链。星号表示质量选择的母离子。　　将抗体测序拓展到内源性抗体存在许多挑战。首先，血浆中单个克隆的中位浓度约为 1 µg/mL，比 mAb 低几个数量级，并且单个克隆的分离极具挑战性，使测序过程进一步复杂化 因为大多数软件工具专为组装单个抗体而设计，当数据代表几个相似的 Ig 序列时可能导致分析失败。此外，在复杂的内源性多克隆抗体混合物中，由于来自恒定区的序列信息被放大并抑制CDR的信号，因此通常无法检测到CDR区的关键序列。使用多组学方法，例如通过使用来自同一供体的基因组学或转录组学数据补充 BU MS 数据，可以绕过从头测序的一些具有挑战性的方面。　　Guthals等人报道了一个例子，使用糖蛋白B抗原从患者的血清中纯化抗体后，进行了完整质量和BU MS分析(图4c)。通过半自动软件PolyExtend用完整质量来检索抗体混合物中最丰富的物种的平均质量，并以此来约束BU MS数据导出的序列结果。在最近的一项研究中，Bondt等人从败血症患者的血清中制备IgG1的Fab亚基，成功地在不经过抗原特异性捕获的条件下，通过MD/BU结合和ETD活化的MS方法，在一个供体的血清中直接对一个高丰度的抗体克隆进行从头测序(图4d)。首先，从IMGT数据库中选择高度匹配的轻链和重链种系模板。然后用采集的从头测序数据来迭代和改进这些模板，产生最终的成熟序列。值得注意的是，确定的序列包含的突变比BCR测序研究报告的突变率所预期的要多，这表明蛋白质水平测序和基因水平测序之间存在潜在的差异。　　图4　　尽管从抗体混合物中重新组装序列仍然是艰巨的任务，但一些研究团队最近已经设法获得了令人兴奋的数据。随着现有方法的众多进步，很可能只需把这些碎片拼凑在一起，创建一个基于MS的方法，以更常规地用于抗体发现。所有近期发表的这些策略概念的验证为更高效的下一代方法铺平了道路。

单克隆抗体制备的原理：B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力、B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的、将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体.这种技术即称为单克隆抗体技术。单克隆抗体制备的过程：免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。细胞融合采用二氧化碳气体处死小鼠，无菌操作取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，不能利用补救途径合成DNA而死亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT培养基中存活和增殖。杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后，及时进行冻存。单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法 取BALB/c小鼠，首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体。(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现，大大提高了抗体的生产量。单克隆抗体制备的意义：用于以下各种生命科学实验并具有医用价值（1）沉淀反应：Precipitation reaction（2）凝集实验：haemaglutination（3）放射免疫学方法检测免疫复合物（4） 流式细胞仪：用于细胞的分型和细胞分离.（5）ELISA 等免疫学检测（6）BIAcore biosensor:检测Ab-Ag或与蛋白的亲和力 .（7）免疫印记（western blotting)（8） 免疫沉淀：（9） 亲和层析：分离蛋白质（10） 磁珠分离细胞（11）临床疾病的诊断和治疗；

安捷伦公司参与并支持&ldquo 全球抗体聚焦峰会2011&rdquo 根据国家&ldquo 十二五&rdquo 规划，战略性新兴产业将成为先导性、支柱性产业，在政策支持的推动下，2010-2011 年生物医药产业整体保持快速发展趋势。&ldquo 十二五&rdquo 期间，生物产业将成长为我国经济的快速增长点。 2011年11月17-18日，全球抗体聚焦峰会在上海浦东世纪皇冠假日酒店成功召开。本次全球抗体聚焦峰会广泛吸引到近150位来自全球的相关政府监管部门、行业协会，科研机构，大学院校等世界级抗体从业专家领袖，工业和信息化部规划司处长姚珺博士、抗体药物国家工程研究中心主任郭亚军教授等专家进行了精彩大会发言。峰会就单克隆抗体治疗，生物改良药与生物仿制药，相关政策解读，抗体工程，临床前和临床阶段的发展，蛋白工艺等当前最热门话题进行探讨，为推动全球尤其是中国抗体产业快速发展提供最佳方案。 作为生物医药行业领先的解决方案供应商与合作伙伴，安捷伦公司密切关注并紧密结合市场发展趋势、行业动态及用户需求，为生物制药行业应用提供全方位的解决方案。我们关注与蛋白质的聚集和裂解相关的问题，我们为宿主细胞的DNA、病毒、溶出物、萃取物、细胞培养基组分提供完整的解决方案，以及确保结果最高可靠性的高纯试剂和化学品。 应用领域举例： 生理化学性质表征 完整新生物成分（NBE）分析 糖基化与磷酸化蛋白分析 氨基酸分析 肽谱分析 产物相关的杂质分析 工艺流程相关的污染物检测 蛋白和抗体的质量保证/质量控制 稳定性和剂型测试 蛋白治疗药物的生产工艺优化等 安捷伦全面解决方案平台举例： &bull 液相色谱系统 &bull 液质联用系统 &bull 毛细管电泳仪 &bull 离子分析技术（毛细管电泳和液相色谱） &bull 等电聚焦技术 &bull 蒸发光散射技术 &bull 气相色谱系统 &bull 气质联用系统 &bull QPCR分析仪 &bull 蛋白质标准品和蛋白质样品前处理试剂包 &bull 芯片实验室 单克隆抗体-糖链芯片技术 高通量自动化解决方案 其他生物医药相关技术、设备、耗材等 11月17日第一天大会报告中，安捷伦公司液质联用资深应用工程师冉小蓉博士进行了题为&ldquo 抗体表征最新技术策略及应用介绍&rdquo 的精彩报告，同与会专家分享并讨论了安捷伦公司有关抗体表征及生物鉴定领域的最新进展。单克隆抗体药物正成为生物医药领域研究的热点，在抗体的表达合成及纯化过程中，对抗体的质量控制是十分重要的环节。安捷伦公司基于超高解析度的QTOF/TOF技术与1290 UHPLC及nano LC+HPLC-Chip系统联用，并配合BioConfirm软件，可以提供单克隆抗体质控分析高通量、全流程的解决方案：从完整蛋白分子量的测定，到肽指纹谱与翻译后修饰分析，及到糖基的快速鉴定。整套方案相对于传统抗体分析方法更准确、快速、可靠。尤其是安捷伦独特的糖芯片在线糖酶切及富集分离技术，可以在短短10-30分钟内完成糖基的鉴定，比现有离线糖基分析方法的速度提高几十倍甚至上百倍之多。报告中创新的技术亮点及应用优势引发与会专家的广泛兴趣与好评。 关于安捷伦科技 安捷伦科技（纽约证交所：A）是全球领先的测量公司，是化学分析、生命科学、电子和通讯领域的技术领导者。公司的 18700 名员工为 100 多个国家的客户提供服务。在 2011 财政年度，安捷伦的业务净收入为66亿美元。要了解安捷伦科技的信息，请访问：www.agilent.com.cn。

仪器信息网讯 黄曲霉毒素是广泛污染农产品的一类强致癌、剧毒性真菌毒素，黄曲霉毒素又分多种。目前常用黄曲霉毒素快速检测方法常见以酶联免疫为基础的免疫分析法、免疫亲和分析法等。但是这类方法通常有抗原抗体特异性差，检测灵敏度低等缺点。 　　在2014年10月16日，第一届快速检测技术及仪器学术研讨会上，来自中国农业科学院油料作物所的李培武研究员作了&ldquo 农产品黄曲霉毒素靶向抗体创制与高灵敏检测技术&rdquo 的报告，向大家分享了他在黄曲霉素毒素抗原抗体特异性结合方面的研究，提出了黄曲霉毒素抗体亲和靶向诱导效应学说，创建了黄曲霉毒素抗原抗体特异性结合、高灵敏检测技术和标准体系。 中国农业科学院油料作物所 李培武研究员 　　报告中，李培武研究员说，经过多年反复试验，不仅探明了黄曲霉毒素抗原抗体互作分子机制并发现了其免疫活性位点即黄曲霉毒素抗原苯基与呋喃环氧基，通过验证试验发现黄曲霉毒素抗原抗体亲和力常数得到显著提高，实现了抗原抗体高灵敏特异性识别。不仅如此基于活性位点对抗体亲和力产生的诱导效应，将这种诱导效应顺利的从免疫动物到体外杂交瘤进行高效传递，突破了传统的筛选方法，从而建立了快速培养梯度筛选法。通过这种筛选法把杂交瘤的融合和筛选，实现了一步化的选育，大大提高了筛选的效应，建立了从实验动物到杂交瘤的高效选育通路。基于此项研究成果，李培武研究员创制出黄曲霉毒素总量与M1、B1、G1分量系列单克隆抗体、基因重组抗体和纳米抗体，并创造了灵敏度最高、特异性最强的世界纪录。 　　不仅如此，李培武研究员将此项研究进行成果转化，创建了铕标记侧向流时间分辨荧光检测、纳米金同步检测、荧光增强免疫亲和检测技术，研制出黄曲霉毒素时间分辨荧光试剂盒、纳米金试剂盒、多毒素同步检测试剂盒系列产品，获得多项发明专利。构建了黄曲霉毒素高灵敏检测技术标准体系，并入选了农业部行业标准。

p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em " & nbsp 单克隆抗体药物(mAb)是通过基因工程生产的蛋白质药物，具有特异性高、作用机制明确、效果显著、经济效益大等优势，是近年来生物医药产业的重要增长点。 br/ /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em " 治疗性单克隆抗体（mAbs）的开发和制造是一个高度管制的过程，ICH的指导原则指出了相关产品质量参数允许的异质性水平。电荷异构体是单克隆抗体（mAb）的关键质量参数（CQA）之一，在药品稳定性研究、申报及放行等环节都必须检测、评估。抗体的电荷异构体是由细胞内的酶促和非酶促过程分泌到培养基后形成，电荷异构体可能具有明显不同的生物活性，影响单抗药物的功能、安全性及稳定性。导致电荷异质性的最常见变异之一是C末端赖氨酸剪切，随着一个或两个带正电荷的赖氨酸残基丢失，可导致碱性变异体的形成；另外，在N-和O-连接的聚糖上脱酰胺、糖化和带负电荷的唾液酸的存在都会导致负电荷增加和酸性变异体的形成。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em " 电荷异构体的检测方法有很多种，如：聚丙烯酰胺凝胶电泳，虽然仪器设备相对便宜，但其分辨率低、操作繁琐，目前应用较少；毛细管等电点聚焦（cIEF）电泳可进行蛋白的等电点测定，现已开发出毛细管电泳与质谱联用的技术，该方法可从完整蛋白水平进行分析，暂未推广使用；离子交换色谱（IEX）在电荷异构体的分析中使用较多，有盐洗脱与pH梯度洗脱两种方式，后续收集各个成分进行质谱检测分析其分子量及翻译后修饰。现已有在线的LC-MS方法，此方法不使用传统的盐缓冲液，改为质谱可以耐受的有机盐缓冲液来进行电荷异构体的分离，但其质谱图谱质量及普适性还有待考量，且不能实现肽段水平翻译后修饰的解析。中国计量科学研究院研制了人源化IgG1 κ型单克隆抗体标准物质，与军事科学院军事医学研究院钱小红、应万涛课题组合作，建立了cIEF-WCID及SCX-HPLC两种方法分离检测了单克隆抗体标准物质中的电荷异构体。运用蛋白质组学技术，从完整的分子量分布、肽图分析、进一步延伸到糖肽分析，建立了逐步深入的分析方法来研究单克隆抗体电荷异构体形成的影响因素，此方法可推广应用于其他单抗类药物的电荷异质性分析与评价。 /p p style=" text-align: center margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em text-indent: 0em " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 272px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202010/uepic/f26eb0c0-ed43-47b2-9965-eb69024d8360.jpg" title=" 图片1.png" alt=" 图片1.png" width=" 600" height=" 272" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em " 2020年11月10-12日，中国计量科学研究院和国际计量局拟联合举办 span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 第三届 “药物及诊断试剂研发与质控——测量与标准，质量与安全（TD-MSQS 2020）” /strong /span 国际研讨会，以期进一步促进该领域的学术交流和技术发展，提升企业的研发水平和产品质量。本次会议将在南京市政府的支持下，在江苏省南京市举行。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em " 本次会议可通过官方网站http://tdmsqs.ncrm.org.cn注册或扫描二维码注册，注册成功后请填写参会回执发送至会议邮箱pptd@nim.ac.cn。 /p p style=" text-align: center text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em " & nbsp /p p style=" text-align: center margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em text-indent: 0em " img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202010/uepic/11c12ff4-263b-48c2-aff9-f4640b0a1850.jpg" title=" 图片3.png" alt=" 图片3.png" / /p p style=" margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em text-indent: 0em text-align: center " strong span style=" text-indent: 0em " 欢迎各位专家、同仁报名参会！ /span /strong /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em " 更多信息请关注会议官方网站： a href=" http://tdmsqs.ncrm.org.cn。" _src=" http://tdmsqs.ncrm.org.cn。" http://tdmsqs.ncrm.org.cn。 /a /p p style=" margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.75em text-indent: 0em text-align: right " 供稿：崔新玲 胡志上 span style=" text-indent: 2em " & nbsp /span /p

9月5日，国际神经病学顶级期刊JAMA Neurology（影响因子29）在线发表了国际创新技术-免疫斑点法（IDoT）检测水通道蛋白（AQP4）抗体的研究论著，为快速诊断神经免疫疾病增添助力。这是目前国内神经免疫抗体检测领域首个发表于该期刊的研究，在国际神经免疫病研究领域发出了中国声音，也体现了国际同行对中国开展国际临床合作研究的认可。该研究由中山大学附属第三医院（以下简称“中山三院”）、福建医科大学附属第一医院、陕西师范大学联合组成的中国团队领衔，其中中山三院邱伟、韩国国立癌症中心（NCC）Ho Jin Kim为共同通讯作者，福建医科大学附属第一医院付莹、毕锦，陕西师范大学闫亚平以及中山三院孙晓渤为共同第一作者。视神经脊髓炎视谱疾病在亚洲多见视神经脊髓炎视谱疾病（NMOSD）是神经免疫病的一种，在亚洲女性中发病率较高。NMOSD会反复发作视神经炎和脊髓炎，最终造成神经功能障碍，给家庭、社会造成负担。目前，NMOSD诊断依赖外周血水通道蛋白4（AQP4-IgG）抗体检测，因此，基于细胞表达的抗体检测方法（CBA）于2015年被国际NMOSD诊断指南推荐，作为当今AQP4-IgG抗体检测的金标准。然而，CBA法耗时3-7天，且需要特殊实验室和技术人员等，大大限制了CBA法的广泛使用，尤其在一些NMOSD高发、但医疗条件欠发达的地域；并且，目前商品化的检测试剂盒仍依赖国外进口，检测成本极高。解决传统AQP4-IgG抗体检测的瓶颈，是全球神经免疫学者关注的重点，同时中国人作为NMOSD高发人群，我国需要具有自主知识产权的可靠检测方法。面对临床需求，中山三院、福建附一、陕西师大与国际学者组成联合攻关团队，从临床问题出发，依托中国南方NMOSD临床队列，开展基础-临床结合的转化研究，共同进行抗体检测新技术的研发与验证。研究过程中，陕西师大闫亚平团队首先利用表达AQP4的细胞提取的膜碎片（带有完整AQP4空间构象）作为抗原底物，创建一种高效、易操作的AQP4-IgG检测新技术--IDoT法。随后，邱伟、孙晓渤团队以及福建医科大学附属第一医院付莹团队，联合韩国国立癌症中心（NCC）Ho Jin Kim团队自主设计，开展为期3年（2020年5月-2023年2月）的前瞻性、病例-对照、国际多中心交叉验证研究。该研究在中国（广东、福建）和韩国共检测836例患者的血清样本。结果显示，与传统的金标准CBA法对比（活细胞CBA法或者固定CBA法等），IDoT法的抗体检测性能与CBA相当，诊断性研究结果Kappa系数为98.0%（400例患者）；436例验证者，包括275例其他疾病队列（风湿免疫疾病等）、57例NMOSD前瞻性随访队列、31例国内交叉验证队列、73例韩国神经免疫疾病队列交叉验证（NMOSD、MOGAD等），整体验证队列结果中，仅2例与CBA检测不一致。因此，IDoT总体敏感性为99.4%（95%CI:97.8%- 99.9%），特异性为99.2%（95%CI:98.0%- 99.8%）。新方法有望降低检测成本该研究证明，IDoT法与目前金标准CBA法具有相同检测效能。但IDoT法高效、易操作，可实现在普通实验室、一般技术人员、广泛人群中进行AQP4-IgG抗体检测，在快速筛查中具有更广泛的应用前景，可实现NMOSD患者早诊断早治疗，同时为资源较少和经验不足的基层医院以及其他经济欠发达国家提供一种可选择方法，最终实现提高AQP4-IgG抗体检测率。该研究成果是我国的自主研发成果，有效解决国内神经免疫抗体检测的“卡脖子”问题，也填补了国际上快速检测AQP4-IgG抗体领域的空白，对于推动全球NMOSD的早期精确诊断具有重要意义。同时，我国对该成果自主知识产权的拥有，未来将大大降低NMOSD诊断成本，促进患者群体早诊断早干预，减轻家庭与国家的经济负担。JMMA Neurology 在全球享有很高的声誉和影响力，研究论文得到了JMMA Neurology 杂志多个审稿人的高度评价，认为 “这项非常详实的研究将引起神经科医生的极大兴趣，克服在不同医疗条件下NMOSD抗体检测的障碍”、“该研究发现将对NMOSD抗体检测领域产生重大影响”、“该研究是神经免疫抗体检测技术的重大进步”。

一国际研究团队在最新一期《应用化学》杂志发表论文称，其设计并合成出一种纳米尺度的DNA(脱氧核糖核酸)机器，该机器的定制修改特性可支持识别特定的目标抗体。研究成果将给目前缓慢、繁琐且昂贵的抗体检测过程带来革命性变化，有助于诊断风湿性关节炎、HIV(艾滋病病毒)等感染和其他自身免疫性疾病，从而减少疾病治疗延误，降低治疗开支。　　论文指出，抗体与该DNA机器的结合可引起结构性变化，并产生光信号。传感器无需化学激活，在5分钟内即可快速作用，即使在血清等复杂临床样品中也能容易地检测出目标抗体。　　加拿大蒙特利尔大学瓦列里贝利索教授称，该模块化平台比现有抗体检测方法具有明显优势，不仅迅速，而且不需化学试剂，可用于即时检测和生物成像等一系列场合。研究人员还表示，该方法具有广谱特性，非常灵活，DNA纳米机器可进行定制修改，以用于检测各种不同疾病的抗体。平台还具有低成本优势，每次检测的成本仅需15美分，与其他定量检测方法相比非常有竞争力。　　目前，研究人员正与诊断公司合作对该项技术进行改进，通过调整平台，未来用户将可用手机直接读取纳米开关的信号。

【详细说明】：促肾上腺皮质激素ACTH(18-39)抗体【浓 度】：1mg/1ml 抗体来源【宿 主】：兔源、鼠源、其他 克隆：单克隆抗体、多克隆抗体【适 用】：Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep, Monkey, others。 抗体类型：一抗 研究领域:细胞生物、神经生物学等 【性 状】：促肾上腺皮质激素ACTH(18-39)抗体冻干粉或液体【相关标记】：FITC、Gold 、HRP、PE PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5 、PE-CY7 、RBITC 、 Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488 、 Alexa Fluor 555 、Alexa Fluor 647、AP 、APC 、Biotin 、Cy3 、Cy5 、Cy5.5 、Cy7 。【储 存 液】： Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4 or PBS with 0.1% sodium azide and 50% glycerol pH 7.3. -20oC, Avoid freeze / thaw cycles.【产品应用】 ：Immunohistochemistry （IHC）, Flow Cytometry （FACS） , Western Blotting （WB） , ELISA , Immunohistochemistry , Immunohistochemistry （Paraffin-embedded Sections） （IHC （p）） , Immunoprecipitation （IP） , Immunocytochemistry （ICC） ，Immunofluorescence （IF）等。促肾上腺皮质激素ACTH(18-39)抗体ADCY8 腺苷酸环化酶8抗体 （1）IgG ：血清中含量最高，因此是最重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。 IgG 还能激活补体，结合并增强巨噬细胞的吞噬功能（调理作用和 ADCC 效应），穿过胎盘，保护胎儿及新生婴儿免受感染。 （2）IgA ：分单体和双体两种。前者存在血清中，后者存在于黏膜表面及分泌液中，是黏膜局部抗感染的重要因素。（3）IgM ：是分子量最大，体内受感染后最早产生的抗体，具有很强的激活补体和调理作用，因此是重要的抗感染因子，且常用于诊断早期感染。　 （4）IgD ：主要存在于成熟 B 细胞表面，是 B 细胞识别抗原的受体。 （5）IgE ：血清中含量最少的抗体，某些过敏性体质的人血清中可检测到，参与介导 I 型超敏反应和抗寄生虫感染。促肾上腺皮质激素ACTH(18-39)抗体现货促销中，为您推荐相关优质检测抗体：Anti-Leptin receptor（long） 瘦素受体抗体（长） Anti-Leptin receptor（long） 瘦素受体抗体（长） Anti-Lgr5/GPR49 肠上皮干细胞蛋白抗体 Anti-LH (Mouse Anti-Human Luteinizing Hormone Monoclonal Antibody) 鼠抗人促黄体生成素抗体 Anti-L-HDC (L-Histidine decarboxylase) L-组氨酸脱羧酶抗体 hu, mo, rat, bov, dog, pig, chi Anti-LHRH/GNRH （luteinizing hormone-releasing hormone） 黄体激素释放激素抗体/促性腺激素释放激素抗体 Anti-LIF (leukemia inhibitory factor) 白血病抑制因子抗体 Anti-Lingo-1 Nogo受体作用蛋白抗体 Anti-Livin （Inhibitors of apoptosis proterins Livin） 一种新的凋亡抑制蛋白抗体 anti-LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝脏型脂肪酸结合蛋白抗体 anti-LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝脏型脂肪酸结合蛋白抗体 Anti-LN (laminin) 层粘连蛋白抗体 Anti-Lpin1 protein Lpin1 抗体 Anti-Lpin1 protein Lpin1 抗体 Anti-LRP/MVP (Lung resistance related protein) 肺耐药相关蛋白抗体 Anti-LRRK2 (Leucine-rich repeat kinase 2) 帕金森氏病致病基因/神经系统新功能基因抗体 Anti-Lumbrokinase 抗蚯蚓纤溶酶抗体/抗蚓激酶抗体 Anti-Lysozyme 溶菌酶抗体 anti-LYVE-1（lymphalic vessel endotheilial hyaluronan receptor 1） 淋巴管内皮透明质酸受体抗体 Anti-M2-PK （ pyruvate Kinase M2） 丙酮酸激酶-M2抗体 Anti-M2-PK （pyruvate Kinase M2） 丙酮酸激酶-M2（小鼠来源抗体） Anti-Integrin αM/CD11b (Mac-1/CR3A)（Integrin-alpha2） 巨噬细胞表面分子/整合素-α2抗体 Anti-ChRM1 (muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗体 Anti-MADCAM-1(-Mucosal addressin cellular adhesion molecule-1) 粘膜选址素抗体 Anti-MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein L / S -MAG ) 髓鞘相关糖蛋白a/b抗体 Anti-MAG-a/L-MAG (Myelin associated glycoprotein) 髓鞘相关糖蛋白-a抗体 Anti-MAGE-1/HLA-A1 protein (melanoma antigen family A member 1) 黑素瘤抗原-1抗体 Anti-MAPKK1 (MAP kinase kinase 1) 丝裂原活化蛋白激酶激酶1 Anti-MAPKK2 (MAP kinase kinase 2) 丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体 Anti-Maspin (mammary serine protease inhibitor) 抑癌基因抗体 Anti-Matriptase 蛋白裂解酶（一种新的癌基因）抗体 Anti-MBP (Myelin Basic Protein, MBP) 髓鞘碱性蛋白抗体 Anti-MCP-1 (monocyte chemotactic protein1) 巨噬细胞趋化蛋白-1抗体 Anti-M-CSF (Macrophage Colony Stimulating Factors) 巨噬细胞克隆刺激因子抗体 Anti-MDM2 (urine double minute 2) 双微体2癌基因抗体 Anti-Megsin/SER—PINB7 丝氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑制剂B7抗体 Anti-Melan-A/MART-1 黑色素瘤相关抗原/黑色素-A抗体 Anti-Metal ion transporter 拟南介金属离子转运蛋白抗体 Anti-Mfn1 (Mitofusin1) 线粒体融合蛋白1抗体 Anti-MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase) O6甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶抗体 anti-MT(metallothionein) 金属基质硫蛋白抗体 anti-MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)（NT） 层粘连蛋白受体1抗体（N端） anti-MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)（CT） 层粘连蛋白受体1抗体（C端） Anti-MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 一种细胞应激分子抗体 Anti-Midnolin isoform Protein 1 中脑核仁蛋白1抗体 Anti-Midnolin isoform Protein 2 中脑核仁蛋白2抗体 Anti-MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬细胞移动抑制因子抗体 Anti-MIP-1α (macrophage inflammatory protein 1α) 巨噬细胞炎症因子1α抗体 Anti-MIP-1β (macrophage inflammatory protein 1β) 巨噬细胞炎症因子1β 抗体 Anti-MMP-1(matrix metalloproteinases-1) 基质金属蛋白酶-1抗体 Anti-MMP-1(matrix metalloproteinases-1)anti-Mouse 基质金属蛋白酶-1抗体（小鼠） Anti-MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基质金属蛋白酶13抗体 Anti-MMP-14(Matrix metalloproteinase-14) 基质金属蛋白酶-14抗体 Anti-MMP-2(Collagenase IV /Gelatinase A/Metallo proteinase-2) 基质金属蛋白酶-2抗体 Anti-MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor) 基质金属蛋白酶-3抗体 Anti-MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基质金属蛋白酶-7抗体 Anti-MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基质金属蛋白酶-9抗体 Anti-β-2-MG 鼠抗人β2微球蛋白抗体(单抗) Anti-Mo anti-KLH 小鼠抗血蓝蛋白抗体 Anti-MOG (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG) 髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白抗体 Anti-Mouse anti-human HAS 鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体 Anti-Mouse IgA 兔抗小鼠IgA抗体 Anti-MPO (myeloperoxidase) 髓过氧化物酶抗体 Anti-MRP1(Multidrug Resistanec-Associated Protein 1) 多药耐药相关蛋白1抗体 Anti-MRP2 (multidrug resistance-associated protein2) 多药耐药相关蛋白2抗体 Anti-MRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3) 多药耐药相关蛋白3抗体 Anti-MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28) 线粒体核糖体蛋白L28抗体 Anti-MSH-2 (MutS homolog 2) 错配修复蛋白2抗体 anti-MLH1(Mutl homolog l gene) 错配修复蛋白1抗体 Anti-MSLN (mesothelin) 间皮素抗体 anti-MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃粘液素抗体 Anti-MTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受体/松果体素受体抗体 Anti-mucin-1/Muc-1/CD227 antigen (Epithelial Membrane Antigen ) 粘蛋白-1/上皮膜抗原抗体 Anti-MyD88 (myeloid differential protein-88) 髓样分化蛋白抗体 Anti-Myelin P0 protein( peripheral myelin prothein Zero MPZ MPP) 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗体 Anti-Myosin (Smooth Muscle) 鼠抗人心肌肌凝蛋白(平滑肌) 单抗 Anti-N-AChR α4 (Nicotinic-Acetylcholine receptor α4) 烟碱型乙酰胆碱受体α4抗体 Anti-N-AChR α7 (Nicotinic-Acetylcholine receptor α7) 烟碱型乙酰胆碱受体α7抗体 Anti-Nanog 胚胎干细胞关键蛋白抗体 anti-Natrexone 抗纳曲酮抗体IgG Anti-NAP1 (nucleosome assembly protein 1) 核小体组装蛋白1抗体 Anti-N-cadherin N-钙粘附分子抗体 Anti-N-coR1 （Nuclear receptor co-repressor 1） 核受体辅助抑制因子抗体 Anti-Nephrin Protein 肾病蛋白抗体 Anti-Nestin 巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体 Anti-Nestin 巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体 Anti-Neurobeachin protein (AKAP550) 蛋白激酶锚定蛋白/激酶固定蛋白抗体 Anti-Neurocan 神经粘蛋白抗体 Anti-Neurofascin-155 神经束蛋白-155 Anti-NF-H（Neurofilament triplet H) 高分子量神经丝蛋白抗体 Anti-NFKBp65(p65 NF-kappa B p65NFKB) 细胞核因子/k基因结合核因子抗体 Anti-NF-L（Neurofilament triplet L) 低分子量神经丝蛋白抗体 Anti-NF-M (Neurofilament triplet M） 中分子量神经丝蛋白抗体 Anti-NF-κBp50（p50 NF-kappa B p50NFKB） 细胞核因子50/κ基因结合核因子50抗体 Anti-NGF-R/p75NTR/CD271（p75 Neurotrophin R） 神经生长因子受体抗体 Anti-NGF-β 神经生长因子-β抗体 anti-NGN3（neurogenin 3 Neurog3） 神经元素3抗体 Anti-NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6) 鼻咽癌细胞相关基因6抗体 Anti-NHE1（Na+/H+ Exchanger） 钠氢通道蛋白抗体 Anti-NIK(NF-kappaB-Inducing Kinase) NFkB诱导的激酶抗体 Anti-NIS(Na+/I-symporter) 钠碘转运体蛋白抗体 Anti-NK-1/SuRCtance P Receptor (Neurokinin receptor1 Tachykinin receptor1) P物质受体抗体

目前，大多数医学实验室主要仰仗逆转录PCR（RT-PCR）技术来诊断新冠病毒感染。PCR技术可以放大病毒的遗传物质，使其可被检测出来。但这项技术需要专门的人员和设备，供应链短缺导致很多国家和地区的检测能力严重不足。为了在不需要基因扩增的情况下直接检测出患者样本内的新冠病毒，华盛顿大学医学院蛋白质设计研究所所长大卫贝克教授领导的研究小组利用计算机，设计出了一款生物传感器，可识别病毒表面的特定分子并与之结合，然后通过生化反应发光。抗体测试可以揭示某人此前是否感染过新冠病毒，科学家们用此来追踪新冠肺炎的传播情况，但这种测试也需要复杂的实验室设备。鉴于此，该研究团队还发明了另一款生物传感器，当与新冠病毒抗体混合时，这款传感器也会发光。而且，这款传感器不会对血液中的其他抗体——包括针对其他病毒的抗体产生反应，这对于避免假阳性非常重要。贝克说：“我们已经在实验室证明，这些新传感器可以轻而易举地检测到模拟鼻腔液或血清样本中的病毒蛋白或抗体，接下来，我们将证明它们是否能可靠地用于诊断环境。”研究小组还表示，除用于检测新冠病毒外，这些生物传感器还可用于检测其他人类蛋白，如Her2（某些乳腺癌的生物标志物和治疗靶点）和Bcl-2（在淋巴瘤和其他一些癌症中具有临床意义），以及针对乙肝的细菌毒素和抗体病毒等。

抗体的质量受pH、温度、和细胞培养代谢物等工艺参数的影响[1]。抗体等生物药需要进行质量控制，以确保质量和安全。这些生物药不仅需要通过串联质谱等物理化学方法进行表征，而且还必须研究它们的生物活性。传统方法例如酶联免疫吸附测定（ELISA）[1] [2]）被用于活性测定。然而，这些检测不能提供动力学和亲和力数据[1]。另一种方法是表面等离子体共振（SPR）技术。SPR是一种表征蛋白质的强大技术，作为一种无标记技术，利用它可以实时检测蛋白质相互作用，并且样品使用量少[2]。大型SPR系统已被用于蛋白质质量控制[2] [3]。尽管如此，大型SPR设备的使用仍然有限，仪器需专人使用，操作复杂，耗材成本高[4]。另一方面，个人型SPR设备可以让科学家快速的检测样品，轻松获得验证质量所需的有价值的动力学和亲和力数据，而不影响灵敏度和特异性。在本应用中，我们演示了如何使用个人型SPR设备（P4SPR™）轻松确定哪种来源的抗核衣壳抗体与SARS-CoV-2核衣壳重组蛋白具有最佳的结合性能。Djaileb等人在ChemRXiv论文中描述了更详细的实验过程[6]。图1显示了固定SARS-CoV-2核衣壳蛋白检测抗核衣壳抗体的方案。通常，金传感器表面用Afficoat[4]修饰。用EDC / NHS处理，然后用醋酸钠洗涤。将SARS-CoV-2核衣壳重组（rN）蛋白溶液（10μg/ mL）添加到表面并处理20分钟；再次用醋酸钠洗涤。蛋白质修饰的表面被1M乙醇胺封闭10分钟（pH 8.5）以减少非特异性吸附。通过运行缓冲液（RB）对其进行平衡。随后，将来自不同来源的抗体制造商的抗核衣壳抗体溶液（10 μg/mL）（表1）手动注入传感器，并在每个通道（图2，通道A-C）收集SPR响应信号，一次进样获得3次重复试验数据。在引入新的抗体溶液之前，使用运行缓冲液和甘氨酸溶液进行洗涤。使用AntiRBD（受体结合结构域）作为对照（图2，通道D），以校正温度和体折射率的任何波动。SPR偏移的差异根据测量开始到结束的共振单位（RU）差异确定[6]。结果和讨论整个实验测试4种不同来源的抗体抗核衣壳所花费的总时间2.5小时。每次注射的平均时间约为18分钟，注射和再生的平均总时间为25分钟。图3显示了所有3个样品通道中抗核衣壳抗体第一和第二来源的SPR响应。可以清楚地看到抗核衣壳抗体与SARS-CoV-2核衣壳重组蛋白的互作响应。图4显示了所有四次进样的平均信号曲线图。图5显示了各种来源（按进样顺序）的抗核衣壳抗体（即浅蓝色的RU强度）互作强弱。很明显，AB1，批次B（注射#2）表现出最高的SPR响应或活性。此外，值得注意的是，如果使用浓度梯度的抗体或分析物，还可以通过手动进样轻松确定解离平衡常数（KD）。结论很明显，个人型SPR仪器可以快速对抗体进行质控，从而选择哪种抗体更适合于下一步的实验。这样可有效保障研究者的实验进展。同时，P4SPR也为生物制药产品进行质量控制提供了一种快速简便的方案。P4SPR优势Affinité 仪器的 P4SPR™ 是一种用户友好型仪器，可用于对蛋白质进行一般质量控制。无论蛋白质供应来自新供应商还是已经储存了一段时间，P4SPR™都可以轻松区分高活性和低活性蛋白质。此外，抗体样品不需要复杂的样本制备，可以稀释后直接注射样到仪器中。由于其多通道的功能设计，P4SPR 可提供快速、实时的数据和精度。参考文献1. M. Zschatzsch, Paul Ritter, Anja Henseleit,Klaus Wiehler, Sven Malik, Thomas Bley,Thomas Walther, Elke Boschke, "Monitoringbioactive and total antibody concentrationsfor continuous process control by surfaceplasmon resonance spectroscopy," Eng. LifeSci., vol. 19, pp. 681-690, 2019.2. Pranavan Thillaivinayagalingam, JulienGommeaux, Michael McLoughlin, DavidCollins, Anthony R. Newcombe,"Biopharmaceutical production: Applicationsof surface plasmon resonance biosensors," J.Chromatogr. B, vol. 878, pp. 149-153, 2010.3. C. Gassner, F. Lipsmeier, P. Metzger, H. Beck, A.Schnueriger, J.T. Regula, J. Moelleken,"Development and validation of a novel SPRbased assay principle for bispecific molecules,"J. Pharm. Biomed. Anal., vol. 102, pp. 144-149,2015.4. "Affinité Instruments," [Online]. Available:https://affiniteinstruments.com/5. H. Wang, Jing Shi, Youchun Wang, Kun Cai, QinWang, Xiaojun Hou, Wei Guo, Feng Zhang,"Development of biosensor-based SPRtechnology for biological quantification andquality control of pharmaceutical proteins," J.Pharm. Biomed. Anal., vol. 50, pp. 1026-1029,2009.6. Abdelhadi Djaileb, Benjamin Charron, MaryamHojjat Jodaylami, Vincent Thibault, JulienCoutu, Keisean Stevenson, Simon Forest,Ludovic S. Live, Denis Boudreau, Joelle N.Pelletier, Jean-Francois Masson, "A Rapid and Quantitative Serum Test for SARS-CoV-2 Antibodies with Portable Surface Plasmon Resonance Sensing,"http://doi.org/10.26434/chemrxiv.12118914.v1, April 15, 2020.

p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 湖北省医疗保障局下发通知，5月6日起，将新型冠状病毒核酸检测、抗体检测项目临时纳入医保目录，按乙类支付。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 499px height: 265px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202005/uepic/ce14ead1-65f1-45c2-8dc1-5f484caf15fb.jpg" title=" 新冠核酸检测纳入医保.jpg" alt=" 新冠核酸检测纳入医保.jpg" width=" 499" height=" 265" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 为确保新冠肺炎患者得到及时救治，疫情之初，湖北明确将确诊和疑似患者在医疗机构治疗期间的核酸检测、抗体检测费用纳入医保支付范围。此后，又启动新冠病毒相关检测试剂集中采购，制定全省核酸检测、抗体检测最高限价。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 据湖北省医疗保障局有关负责人介绍，新增医疗服务项目纳入医保目录，须根据“临床诊疗必需、安全有效、费用适宜”原则，经过申请、初核、专家评审、公示、批准等一系列流程。此次按照“特事特办”原则，将相关检测项目临时纳入医保目录。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 湖北省医疗保障局明确，核酸、抗体检测项目医保支付具体标准，由各地根据本地实际自行确定，但不得高于此前全省核酸检测180元/次、抗体检测50元/项的最高限价。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 此前，中央应对新冠肺炎疫情工作领导小组22日召开会议。会议指出，做到“四早”首要是早发现。做好常态化防控要加快提升检测能力，大规模开展核酸和抗体检测。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 具 a href=" https://www.instrument.com.cn/news/20200423/536777.shtml" target=" _blank" 体详情请点击下方图片查看： /a /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/news/20200423/536777.shtml" target=" _blank" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202005/uepic/e9fb01f0-ff38-4251-96fb-50e0cb74dada.jpg" title=" 中央核酸扩大检测规模.jpg" alt=" 中央核酸扩大检测规模.jpg" / /a /p

MALDI质谱成像（MSI）是一种多功能技术，能够表征脂质、多糖、代谢物，例如在各种样品中的蛋白质、药物和肽分布。最近，MSI已与市售的含有光解MS标签（PC-MT）的抗体探针相结合，这些标签在所谓的MALDI-免疫组织化学（MALDI-IHC）MSI中可靶向检测特定蛋白质。本研究中，展示了福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）人体扁桃体组织切片在岛津台式MALDI-8020，同时使用6种抗体的多重抗体和由20种抗体的多重抗体组成的癌症标记物筛查小组。证明了该方法是一种可靠、低成本的方法，具有良好的质量结果。淋巴滤泡反应性增生是淋巴结常见良性病变之一，表现为次级淋巴滤泡数量增加，伴有大小和形状改变，其特征是生发中心数量增加，覆盖区大小不一。研究使用6重探针组对组织进行染色，成像分析以30μm的阶段步长进行，采集时间2小时2分钟。如图A图B所示，与滤泡增生的扁桃体组织相比，关键标志物（Ki67和CD3ε）在正常扁桃体组织中的分布明显不同，这表明该技术具有发展为临床应用的潜力。淋巴滤泡反应性增生组织样本分析显示可见与正常人扁桃体组织在结构上的差异特征和细胞分布：PC-MT标记抗体的MALDI-IHC图像，来自（左）正常人扁桃体和（右）淋巴滤泡反应性增生的人扁桃体上的6重探针组，其中可见不同大小的生发中心数量增加和不同的T细胞分布（成像软件岛津IonView）。6重探针组中提取的单个和叠加的离子成像图使用6重探针组对组织进行染色。成像分析以30μm的阶段步长进行，采集时间2小时2分钟。20重探针组中提取的单个和叠加的离子成像图使用20重探针组对组织进行染色。成像分析以30μm的阶段步长进行，采集时间1小时52分钟。在~2kDa的扩展质量范围内可以看到清晰的同位素分辨率，可以检测到所有20个肽质量标签。MALDI-IHC人体扁桃体成像工作流程使用标签的抗体（AmberGen，Billerica，MA），随后使用岛津基质升华装置iMLayer，用DHB涂层后，扁桃体切片在岛津MALDI-8020台式MALDI-TOF质谱仪上以线性模式（30μm间距）成像。使用IonView和IMAGEREVEAL MS软件包处理成像数据。▍研究结果★ 使用低成本的线性台式MALDI-TOF质谱仪结合Miralys探针试剂盒，成功检测了多达20个生物标志物，其阶段步长为30μm。★ 质谱图分辨率高，可以在正常和具有临床意义的样本中进行清晰和特异的成像。

新冠疫情肆虐全球已一年有余，科学家们同理合作，从最开始的核酸检测试剂盒到治疗药物，再到一秒，已经有越来越多的应对手段面世。默克生命科学在助力抗击疫情方面，也做了各种各样的努力。在2019年，推出了革命性的重组单克隆抗体ZooMab® ，而ZooMab® 充分发挥其无需经杂交瘤的长期生产工艺，快速输出了几款检测COVID-19用的科研抗体。默克推出的ZooMabCOVID-19用科研抗体据默克官网介绍，之所以称该产品“革命性”，主要有以下原因：1、技术上突破传统以来实验动物获取抗体的方法，实现Animal-free革新，而且严格遵守了国际公认的动物研究3R原则（减少、改进和替代动物试验）；2、质量过硬，每个实验数据都经得起验证。源头上，默克科研科学家对每个靶点都进行多种试验方法的验证，并如实讲验证数据上传至产品页面，供所有用户参考，还定期对保存的抗体进行复检；3、设计和包装环保。该产品包装不是用带有保护性泡泡塑料袋的大箱子，而是用小多的包装协议（信封大小）来交付。

p style=" text-align: justify text-indent: 2em " /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 2020年4月27日《全国艾滋病检测技术规范（2020年修订版）》由中国疾病预防控制中心批准 [中疾控办发（2020）30号]，目前已下发至全国艾滋病检测实验室及有关单位。《全国艾滋病检测技术规范》自1997年颁布第一版以来，2004、2009和2015年进行了修订更新。每次规范修订都结合我国艾滋病检测的需要，紧跟国内外检测技术进展，引进新的技术方法、策略和标准，最大程度的满足艾滋病检测工作需要。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/72153fc4-a80b-4004-9c0e-eea825d545d1.jpg" title=" 全国艾滋病检测技术规范 0200820224859.png" alt=" 全国艾滋病检测技术规范 0200820224859.png" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " strong 新版修订主要体现四个方面 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 全国艾滋病检测技术规范(2020年修订版)与旧版本相比主要修订了以下4个方面：1.新增了检测总流程图、检测样本类型、自我检测及传递检测、输入性抗体核酸检测及HIV-2核酸检测；2．优化了抗体检测流程和抗体确证检测不确定结果的随访要求；3．强化了核酸检测的诊断价值和生物安全；4．完善了新发感染检测策略、核酸检测策略、婴幼儿诊断及各类检测报告。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 此外，规范强调了HIV核酸检测实验室要求：实验室人员和要求培训改为市级以上培训，厂家补充为“相关技术设备及检测产品提供商”。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " strong 艾滋病检测必知的三个文件 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 从事艾滋病临床诊断的医生及实验室检测技术人员必须了解的三个文件： /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》（简称行标）是临床诊断的依据，《中国艾滋病诊疗指南》（简称指南）是临床诊断和选择各项临床检测指标的指引，《全国艾滋病检测技术规范》（简称规范）是实施各项实验室检测的标准流程和策略。在实践中，临床医生和实验室检测技术人员都应该了解这三个文件，临床医生了解“规范”可以更好地利用和有效选择各项检测方法，实验室检测技术人员了解“行标”和“指南”可以更好地了解临床需求，为诊断提供精准技术支持。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " strong 谁来诊断艾滋病？ /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 由临床医生根据“行标”与“指南”做出诊断，“行标”与“指南”的诊断原则和条件一致，“指南”在诊断原则下细化了更多具体内容。实验室检测的作用是为医生诊断提供实验室依据。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/e1eb73d1-eca3-425f-8e4b-2f866d2caa38.jpg" title=" HIV核酸检测20200820231537.jpg" alt=" HIV核酸检测20200820231537.jpg" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " strong 关于补充实验的修订要点 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 实验室检测的基本原则是先做筛查试验，筛查试验阴性的，直接提供阴性结果报告，筛查试验有反应的样本不能直接给出阳性结果报告，必须进一步做补充试验。请注意：针对科研和项目实施过程中阳性样本反复检测的结果，不在常规监测和检测范畴，可根据科研用途处理结果，不能作为个体诊断反复出具阳性报告，以免给常规监测和报告系统带来混乱。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " strong 抗体检测和核酸检测 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 在这次新冠肺炎疫情中，核酸检测可谓是功不可没。其实在艾滋病检测也会用到核酸检测。由国家卫生健康委员会发布，2019年7月1日开始实施的《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》WS-293-2019，就已经将核酸检测纳入艾滋病诊断标准。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 根据2020版“规范”，补充试验可以选择抗体检测，也可以选择核酸检测。抗体补充试验即抗体确证阳性可以作为诊断HIV感染的依据，核酸检测阳性也可以作为诊断HIV感染的依据。需要注意的是：选择核酸定性检测，其结果为阳性可以直接报告阳性，选择核酸定量检测（即病毒载量）作为诊断依据需要检测值大于等于5000拷贝，5000拷贝以下的需要进行第二次检测或2-4周后随访。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " strong 核酸检测主要是PCR法 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 目前，HIV核酸定性检测主要有实时荧光定量PCR方法、荧光探针PCR法及以焦磷酸化激活聚合酶（PAP）反应为基础的核酸扩增PCR方法。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 疾控实验室的常规工作可利用已经建立的抗体确证实验室条件进行抗体补充试验，必要时可应用核酸试验进行疑难样本和特殊样本的检测。临床医院实验室，如果具备核酸检测条件，推荐优先选择核酸检测，检测结果为阳性即可以作为诊断依据，也可以了解感染者和病人的病毒复制情况，有助于抗病毒治疗效果的判断。（标准方法源于中国疾控中心） /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " a href=" https://www.instrument.com.cn/zc/133.html" target=" _blank" span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong PCR仪器看这里,点击进入PCR专场查看更多仪器信息： /strong /span /a /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " a href=" https://www.instrument.com.cn/zc/133.html" target=" _blank" span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong /strong /span /a /p p style=" text-align: center" a href=" https://www.instrument.com.cn/zc/133.html" target=" _blank" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/c148f606-02cb-4ac6-9f5f-f1ce15c0cb8b.jpg" title=" PCR专场5-1a2fc4739d8d.jpg" alt=" PCR专场5-1a2fc4739d8d.jpg" / /a /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong /strong /span br/ /p p br/ /p

美国麻省理工学院工程师使用专门的碳纳米管设计了一种新型传感器，可在没有任何抗体的情况下检测新冠病毒，并在几分钟内给出结果。新传感器基于可快速准确诊断的技术，不仅适用于新冠疫情，还适用于未来的流行病。麻省理工学院化学工程教授、研究资深作者迈克尔斯特拉诺说，“快速测试意味着可以在未来的大疫情中更早地开放旅行。可以对下飞机的人进行筛查，并确定他们是否应该隔离，也可对进入工作场所的人员进行筛查。”在该项目开始后大约10天，研究人员就为新冠病毒的核衣壳和刺突蛋白确定了准确的传感器。在此期间，他们还能够将传感器集成到带有光纤尖端的原型设备中，该设备可实时检测生物流体样本的荧光变化。这消除了将样本送到实验室的需要，而这是新冠PCR诊断测试所必需的。研究人员将传感器整合到一个带有光纤尖端的原型中，该光纤尖端可以检测测试样品中荧光的变化。图片来源：美国麻省理工学院该设备在大约5分钟内产生结果，并且可检测低至每毫升样品2.4皮克病毒蛋白的浓度。在这篇论文提交后最新进行的实验中，研究人员实现了比现在商业上可用的快速测试更低的检测限值。该设备还可检测溶解在唾液中的新冠病毒核衣壳蛋白（但不能检测到刺突蛋白）。检测唾液中的病毒蛋白通常很困难，因为唾液中含有黏性碳水化合物和消化酶分子，会干扰蛋白质检测，这就是为什么大多数新冠诊断需要鼻拭子的原因。研究人员表示，即使没有任何抗体和受体设计，该传感器也显示出最高范围的检测限值、响应时间和唾液兼容性。这种分子识别方案的一个独特之处在于，可进行快速设计和测试，而不受传统抗体或酶受体的开发时间和供应链要求的阻碍。斯特拉诺说，研究人员开发工作原型的速度表明，这种方法可证明对在未来疫情大流行期间更快地开发诊断方法是有用的。

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单克隆抗体(mAb)是制药行业增长最快的治疗方法之一，mAb的高阶结构(HOS)影响药物与靶标的结合特异性，从而影响治疗效果和副作用。若储存而导致HOS发生变化，例如蛋白质错误折叠和聚集，会导致稳定性降低、功效丧失或可能的免疫原性。因此，监测HOS对保证mAb疗法的有效性和安全性至关重要。X射线晶体学和核磁共振(NMR)光谱可以提供原子级分辨率，但存在费时费样品的缺点；生物物理技术，如差示扫描量热法(DSC)、动态光散射(DLS)、荧光光谱、红外(IR)光谱和圆二色(CD)光谱只能提供低分辨率的整体构象。焦碳酸二乙酯(DEPC)作为亲电子试剂能够修饰溶剂可接近的亲核侧链（Cys、His、Lys、Thr、Tyr、Ser）和蛋白质的N末端，这些残基产生的羧基化产物具有+72.021Da的质量转移，经过蛋白水解消化、液相色谱分离和串联质谱分析后，可以识别和半定量特定的蛋白质修饰位点。将一种条件（例如天然）与另一种条件（例如加热）进行比较时，特定残基处共价标记程度的变化可用于探测蛋白质的HOS变化（图1）。在这篇文章中，作者使用DEPC共价标记联用质谱，以利妥昔单抗作为单抗药物的模型，以期在远低于mAb治疗药物熔点的温度下能够特异性检测细微HOS变化，并通过活性测定进行验证。图1. DEPC 标记与质谱联用分析单抗药物结构的流程在通过共价标记研究热应力（heat stressed）利妥昔单抗之前，作者使用CD光谱、荧光光谱和动态光散射(DLS)来识别加热对蛋白质结构的干扰。发现当在低于其熔点的温度下加热利妥昔单抗4小时时，这三种技术在45°C或55°C时无法检测到显著的结构变化，而在65°C时仅显示出轻微的变化。随后作者团队使用DEPC CL-MS探测利妥昔单抗的细微结构变化。在45°C压力下的利妥昔单抗样品中发现DEPC标记水平的变化较少，大多数变化是由于蛋白质受热去折叠导致的标记增加（图2），且可变区的变化远少于恒定区。超过70%的标记变化发生在Tyr、Ser和Thr残基处，而发生在His和Lys残基处的标记变化始终小于20%。标记变化表明，45°C时的结构变化主要是局部微环境的变化，而非溶剂可及性差异显著的大结构变化，也就是说修饰位点分散在整个蛋白质结构中，而不是集中在蛋白质的某些区域。图2. 45°C 热应力 4 h 后 DEPC修饰程度的变化。饼图表示在利妥昔单抗的每个结构域内标记变化显著的修饰残基比例。红色代表标记增加，而蓝色代表减少。条形图表示共价标记变化程度低 (L)、中 (M) 和高 (H)的残基数量。活性测定能反映一定程度的结构变化对利妥昔单抗活性的影响，从而验证DEPC标记结果。桥接ELISA的结果表明，在预热至45°C后，利妥昔单抗的Fc结合活性没有显著变化（图3a），Fc区域的CDC活性估计在45°C热应激后保持不变（图3b），利妥昔单抗的Fab结合活性估计与对照样品没有差异（图3c）。活性测定结果表明蛋白质在45°C时没有发生显著的结构变化。在Fab和Fc区域中标记变化的残基数量相对较少，主要标记对局部微环境变化更敏感的Tyr、Ser和Thr残基。修饰位点分散在整个蛋白质中，对Fab和Fc区域的构象几乎没有影响，与共价标记质谱联用的测定结果相吻合。图3.使用单抗活性测定验证CL-MS实验揭示的结构变化。Fc区的结构完整性通过(a)测量Fc与捕获抗体结合的利妥昔单抗桥接ELISA和(b)测量补体依赖性细胞毒性的Alamarblue测定来评估。Fab区域的结构完整性通过(c)Raji细胞下拉试验评估，测量Fab与B细胞CD20抗原的结合。55°C加热4h后利妥昔单抗所有结构域的残基修饰程度都发生了显著的变化，尤其是Fab区域的VH和VL结构域。（图4）加热至55°C时，His和Lys残基处发生的标记变化几乎是45°C的两倍，表明蛋白质在这些区域展开；Fab区域标记水平发生显著变化，特别是在VH、VL和CL域。这表明利妥昔单抗的Fab区域存在局部结构变化，据报道这也是IgG1分子中对热应激最敏感的区域。Fc区域中没有观察到类似的发生标记变化的残基聚集，Tyr、Ser和Thr处的大多数标记变化为中度或高度变化，这些结果表明蛋白质拓扑结构可能发生变化。图4. 55°C 热应力 4 h 后 DEPC修饰程度的变化。饼图表示在利妥昔单抗的每个结构域内标记变化显著的修饰残基比例。红色代表标记增加，而蓝色代表减少。条形图表示共价标记变化程度低 (L)、中 (M) 和高 (H)的残基数量。尺寸排阻色谱(SEC)测量表明在65°C加热条件下存在高分子量物质。将DEPC CL-MS方法应用于65°C热应力的利妥昔单抗后，发现所有利妥昔单抗结构域的标记发生显著变化（图5），主要体现为标记的减少，这可能是因为蛋白质聚集。利妥昔单抗的Fab和Fc区均发现标记减少的残基簇，活性测定结果显示Fc结合和CDC活性的降低（图3），说明了Fc区特别是CH3结构域的标记变化，与DEPC标记结果一致。图5. 65°C 热应力 4 h 后 DEPC修饰程度的变化。饼图表示在利妥昔单抗的每个结构域内标记变化显著的修饰残基比例。红色代表标记增加，而蓝色代表减少。条形图表示共价标记变化程度低 (L)、中 (M) 和高 (H)的残基数量。总结DEPC标记技术的结构分辨率和灵敏度足以探测细微的蛋白质构象变化，该技术与质谱联用可在低于Tm的温度下揭示利妥昔单抗中的细微HOS变化，与经典的生物物理技术互补。总体而言，鉴于CL-MS简便、灵敏的特点，该方法将适用其他抗体药物的结构研究。