凯氏氮硫酸标准

凯氏氮用的是蒸馏和中和滴定法，总氮用的过硫酸钾氧化紫外分光光度法，都是标准方法，测一污水样品，凯氏氮为50mg/L,总氮为30mg/L, 已反复复做多次，不知为何，谁能解释？

采用[color=#ff0000][color=#000000]水质 凯氏氮的测定GB/T 11891-1989方法进行水质凯氏氮的检测，标准中写当凯氏氮含量低的时候采用光度法 ，凯氏氮含量高的时候采用酸滴定法，问题是标准中没有光度法检测的步骤和计算方法？[/color][/color][color=#ff0000][color=#000000]问题二：根据酸滴定法计算公式换算出的公式单位是kg/L,不是标准中写的mg/L？[/color][/color][color=#ff0000][color=#000000]问题三按照修正之后的公式进行计算，如果要使水质凯氏氮检测结果在50-100mg/L之间，需要消耗的硫酸标准溶液体积就会以100L左右计，这在日常实验中是不合理的？[/color][/color][color=#ff0000][color=#000000]求教[/color][/color]

请问用硫酸铵测凯氏定氮仪的回收率具体的实验步骤和计算方法有吗？

食品中蛋白质含量的现行国家标准和国际通行测定方法是经典凯氏定氮法， 作为一名分析人员，现在将凯氏定氮法原理，方法步骤和计算方法写出来，看看凯氏定氮法在蛋白质含量中的缺陷。何为凯氏定氮法？简单地说，凯氏定氮法是一种检测物质中“氮的含量”的方法。蛋白质是一种含氮的有机化合物，食品中的蛋白质经硫酸和催化剂分解后，产生的氨能够与硫酸结合，生成硫酸氨，再经过碱化蒸馏后，氨即成为游离状态，游离氨经硼酸吸引，再以硫酸或盐酸的标准溶液进行滴定，根据酸的消耗量再乘以换算系数，就可以推算出食品中的蛋白含量。一. 凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热，经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程，最后有机氮转变为无机氮硫酸铵，这一过程称为有机物的消化。为了加速和完全有机物质的分解，缩短消化时间，在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂，加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解，除硫酸钾外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等盐类类提高沸点，但效果不如硫酸钾。硫酸铜起催化剂的作用。凯氏定氮法中可用的催化剂种类很多，除硫酸铜外，还有氧化汞、汞、硒粉、钼酸钠等，但考虑到效果、价格及环境污染等多种因素，应用最广泛的是硫酸铜。使用时常加入少量过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物氧化。消化完成后，将消化液转入凯氏定氮仪反应室，加入过量的浓氢氧化钠，将NH4+转变成NH3，通过蒸馏把NH3驱入过量的硼酸溶液接受瓶内，硼酸接受氨后，形成四硼酸铵，然后用标准盐酸滴定，直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数，通过计算即可得出总氮量。在滴定过程中，滴定终点采用甲基红-次甲基蓝混合指示剂颜色变化来判定。测定出的含氮量是样品的总氮量，其中包括有机氮和无机氮。反应式如下：1.有机物中的氮在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，消化生成（NH4）2SO4 反应式为： H2SO4==SO2+H2O+ R. CH.COOH+==R.CO.COOH+NH3 NH3 R.CO.COOH+==nCO2+mH2O 2NH3+H2SO4==(NH4)2SO42.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于 H3BO3 溶液中反应式为： 2NH4++OH-==NH3+H2O NH3+H3BO3==NH4++H2BO3-3. 再用已知浓度的HCI标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量。反应式为： H2BO3-+H+==H3BO3

凯氏定氮法测回收率波动的六个原因解析测定食品中的“蛋白质”含量 ，大家经常会用的一种方法就是：[color=black]凯氏定氮法 [/color][color=black]方法原理：食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离, 用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量计算氮含量,再乘以换算系数（常用的乳及乳制品的系数 6.38 、饲料的系数 6.25）,即为蛋白质的含量。[/color][color=black]方法有很多的优点：比如1、可用于所有食品的蛋白质分析中。 2、操作相对比较简单。 3、实验费用较低。 4、结果准确，是一种测定蛋白质的经典方法。 5、用微量凯氏定氮法可测定样品中微量的蛋白质。 [/color]但[size=21px][color=black]如何评价凯氏定氮法测定的准确性的问题尼？一般采用质控样和回收率两种方法对其进行评价，看到最后，一定会收获满满。[/color][/size][color=black]有朋友问到：采用硫酸铵做质控，结果有的偏高、或者偏低。是原因引起的？有以下几种可能，逐一排查：[/color]硫酸铵或者尿素 易吸潮，称量之前一定干燥。要检查干燥器中干燥剂 是否可用， 颜色是蓝色 还是白色。称量用到的天平，水平泡是否张中心，是否在计量期间核查时效内。接收液 硼酸溶液 配置是否正确？滴定管 是否计量过？滴定操作是否正确。手动滴定 还是 仪器自动滴 ，手动滴的话不同人员对 滴定终点的颜色 目测也会存在差异。[color=black]这些因素都可能引起结果的偏差，要留意一下。[/color]

影响凯氏定氮法测定粗蛋白准确性应注意的细节问题摘 要 阐述了影响凯氏定氮法测定粗蛋白准确性应注意的一些细节问题，并进行了相关分析，且提出了相应的解决办法。关键词 凯氏定氮法；粗蛋白；测定；准确性；问题随着饲料行业的飞速发展，饲料原料及其饲料产品的价格也居高不下。而粗蛋白的检测是评定饲料原料及其产品的重要指标之一，目前常用的为凯氏定氮法，即国家颁布的《饲料中粗蛋白的测定方法》(GB1996-6432)。但是该方法也存在着测定过成较复杂、费时等缺陷，测定时除严格按照规定程序操作外，还需要一定的实验技巧和实践经验。因此有很多饲料企业在实际操作过程中总是出现各种问题，导致检测结果异常而不知如何去分析。下面，笔者以GB/T6432—1994为准，针对影响凯氏定氮对测定结果标准性应注意的细节问题和大家共同探讨。1 试剂的配制粗蛋白测定中所用的化学药品如浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、硼酸、硫酸铜、硫酸钾(硫酸钠)、硫酸铵、蔗糖等均为化学纯，标定盐酸标准溶液用的无水碳酸钠为基准试剂。在配制试剂前一定要用PH试纸或酸度计检测一下蒸馏水是否为中性，所用的烧杯、试剂瓶等配液设备清洗干净。1.1 盐酸标准溶液的配制配制的盐酸标准溶液尽量为低浓度，一般C(HCl)=0.02～0.05mol·L-1。低浓度虽然用量大，但可减少操作误差和读数误差。配制盐酸标准溶液一定要严格按照标准操作进行，基准无水碳酸钠已定于270～300℃灼烧至恒重，称准至0.0001g，做4～6个平行样，去掉最高值和最低值后取平均值，同时还要做空白试验。盐酸标准溶液的配制量尽量不要太多、使用时间太长，防止水分蒸发和盐酸挥发而影响其浓度的准确性。1.2 其他试剂的配制400g·L-1氢氧化钠溶液、20g·L-1硼酸溶液、混合指示剂(1g·L-1甲基红乙醇溶液与5g·L-1溴甲酚绿乙醇溶液等体积混合)等主要是在称量时要做到快、准、稳，再就是防止使用时间太长，特别是混合指示剂不要超过3个月。

我做肥料消化时,加热到20多分钟后,开始冒白烟,冒了一会,不到十分钟,就没有白烟了.正常吗/?"但硫酸冒白烟不能长，不然，硫酸铵也开始少量分解逸出。"上面这句话给我的感觉是消化过程中,冒白烟持续的时间很长.而我做的实验白烟持续的时间很短,感觉哪个地方有问题.但又找不到原因.所有步骤都是按GB/T8572来的.[em09509]

蛋白质的研究对生物领域来说非常重要，那么，蛋白质的测定方法，从古至今，已累积不少，其分析与定性、定量分析是生物化学和其他生物学科、食品检验、临床检验、诊断疾病、生物药物分离提纯和质量检验中最重要的工作。测定蛋白质的方法，从大的方面分，可以分为直接法和间接法，从细的分，则可以分很多：凯氏定氮仪法、考马斯亮蓝G-250法、双缩脲法、Folin酚法、紫外吸收法、pH滴定法、甲醛滴定法等等。每种方法其测定原理不同，其精度以及过程也就不同，下面我们就凯氏定氮法和双缩脲法进行比较。　　双缩脲法：双缩脲法对白蛋白、红蛋白的颜色反应相近，不受温度影响。测试速度快，但是灵敏度低，不适合高精度的蛋白质含量测定。测定范围为1-20mg。常用于谷物蛋白质含量的测定。　　凯氏定氮法：凯氏定氮法是最经典的测定蛋白质含量的方法，其需要使用的有定氮仪或者粗蛋白测定仪。粗蛋白测定仪的原理跟定氮仪一样，都是利用氮的含量来计算蛋白质的含量。凯氏定氮法是测定试样中总有机氮最准确和最简单的方法之一,是被国内外作为法定的标准检验方法。它包括消化、蒸馏、吸收、滴定四个过程，在催化剂作用下,试样用浓硫酸消煮破坏有机物,使其中的蛋白质氮及其他有机氮转化为氨态氮,然后与硫酸结合生成硫酸铵,加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,测出含氮量,将结果乘以换算系数,计算出粗蛋白质含量。通过凯氏定氮仪测定蛋白质含量时，需要将有毒气体排出，另外要选择合适的催化剂。　　与双缩脲法相比，虽然都能够对蛋白质含量进行测定，但是凯氏定氮法是最为常用的方法，是经典的方法。适用于样品广泛和用于结果较为精确的测试。而双缩脲法测试过程较为简便、快速，用于可以准备配取标准蛋白溶液而准确性要求不高的测试。我们在选择方法时，应该根据要求，选择适合实验的方法。

听仪器厂家售后说用硫酸更好一点，比盐酸稳定。两种溶液浓度使用相同吗？百度了一下是这样的浓度，0.025mol/L硫酸标准溶液或0.05mol/L盐酸标准溶液。这样对吗

用凯氏定氮法做饲料中的蛋白质含量，空白值变化，一起消化一起蒸馏下来的两个空白消耗结果不同，而且消耗差距大，用0.01硫酸标准溶液滴定，试剂都是分析纯，请帮忙分析一下原因，苦脑好久，万分感谢！

首先我们讲凯氏定氮仪的适用范围：凯氏定氮仪适用于食品、饮料、医药、农林渔业、矿山、化工等生产企业，以及高等院校、科研院所、环境监测、土肥站、农机站、质量监督检验等科研检测单位对食品、乳制品、天然橡胶、乳胶、种子、土壤、植株、饲料、矿石、污泥及化学沉淀物等样品中对蛋白质含量的智能化测定。 了解凯氏定氮仪的适用范围后，我们在使用凯氏定氮仪的过程中，如何鉴定仪器的可靠性或则如何校准凯氏定氮仪？ 下面重点阐述校准方法： 使用过凯氏定氮仪的老师一定知道硫酸铵，硫酸铵是不需要消解直接可以蒸馏、滴定、出氮含量结果的，所以给校准工作带来了极大的方便。值得注意的是：1、选择（分析纯）高纯度硫酸铵 2、硫酸铵需要在105℃左右的高温下进行长达2小时的烘干处理。 校准步骤： 1、万分之一天平一台称量烘干的硫酸铵样品（分析纯），样品称量范围与标准酸滴定浓度有关系的。比如我们的标准酸浓度为0. 173mol/L，称量硫酸铵0.1g左右即可（精确到小数点后4位） 2、NKY6120颜色法凯氏定氮仪为例：（半自动手动滴定这里不举例了） 蒸馏滴定： 选择边蒸馏边滴定模式，加稀释水15ml,硼酸30ml,40%氢氧化钠40ml，蒸馏5min。 校准硫酸铵的参考值为21.19±0.2，所以参考值一般在20.99%----21.39之间。

蛋白质为复杂的含氮有机化合物，是各种氨基酸以肽键连接而成，各类食品的蛋白质含量很不均匀，蛋白质含量是评价食物营养价值的重要指标之一。在食品中蛋白质含量测定方法中最常用最基本的方法是凯氏定氮法，在GB/T5009.5-2003中也将其定为法定检测方法，凯氏定氮法有常量凯氏氮法和微量凯氏定氮法。采用经典的凯氏定氮法比较费时费力，采用模块式消化、全自动凯氏定氮仪测定食品中的蛋白质，该方法比经典法快速，且数据准确可靠。1 材料与方法1．1 仪器与试剂1．1．1主要仪器：KjeltecTM2300型全自动凯氏定氮仪，DS-20消化炉及排废装置(均为瑞典FOSSTECATOR公司生产)，样品磨，电子天平(准确至0.0001克)。1．1．2主要试剂：浓硫酸；硫酸钾；硫酸铜；盐酸标准溶液0.1027mol/L；氢氧化钠溶液400g/L；1％溴甲酚绿和0.7％甲基红混合指示剂；1％硼酸吸收溶液；硫酸铵；蔗糖。所用试剂均为优质品。1．2 测定方法称取适量样品放入消化管中，加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及约12mL浓硫酸慢慢摇动将样品浸湿。把消化管放入已预热至42℃的加热模块中，将抽气泵打开到最大。5min后，关小抽气泵至酸雾刚好充满排废罩，在试管中形成冷凝环。约60min样品消化至透明蓝绿色液体，取出冷却至室温。将消化管放入2300型自动凯氏定氮仪，关上安全门，待仪器自动蒸馏、滴定、计算并打印结果。2 结果与讨论2．1 精密度取3种蛋白质含量不同的样品，每种样品平行测定6次，从测定结果可见，该仪器的精密度良好（见表1）。表1 仪器精密度测定样品名称 蛋 白 质 含 量(g/100g) 平均值(g/100g) 相对标准差(RSD%)纯牛奶 3.18 3.17 3.20 3.19 3.18 3.18 3.18 0.34大豆 31.25 31.46 31.38 31.53 31.62 31.39 31.44 0.41螺旋藻粉 67.54 67.78 67.58 67.64 67.69 67.82 67.68 0.16

今日环保部发布水质 总氮的测定 碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法 (HJ 636—2012)新标准，并规定标准自2012年6月1日起实施，实施之日起原GB 11894—89作废。本次为GB11894—89的第一次修订，主要修订内容如下： ——扩大了标准的适用范围； ——增加了氢氧化钠和过硫酸钾的含氮量要求及含氮量测定方法； ——增加了质量保证和质量控制条款； ——增加了注意事项条款。 请各位检测总氮的版友多多发表高见。

燃烧法定氮仪也叫化学发光定氮仪，它与凯式定氮仪的区别体现在原理，测定对象，标准，样品量，价格，运行费用，分析速度，自动化程度，工作环境等方面，具体介绍如下：一、原理不同：凯氏方法是绝对测量；燃烧法是相对测量凯氏定氮仪是应用凯氏定氮法的仪器设备，凯氏方法是利用浓硫酸消化、碱性环境蒸汽蒸馏、硼酸吸收、指示剂滴定终点颜色判定法，根据滴定体积来计算出氮含量。燃烧法：在高温情况下，使用充足的氧气将样品全部燃烧，生成氮的氧化物，再还原出氮元素，利用TCD 检测器测量其信号强度，与事先标定的曲线进行比对，计算出样品中的氮含量。凯氏方法是绝对测量，与标准样品无关，可以直接测量标准品的含量，并用来检验仪器的准确性；燃烧法是相对测量，必须依靠标准品，标准品的准确性定标直接影响测量结果，没有办法检验仪器的准确性。二、测量的对象不同：凯氏测量的是氨态氮；燃烧法测量的是总氮样品中的氮含量根据定义不同有：总氮、凯氏氮、铵态氮、硝态氮、亚硝态氮；也可以分为：有机氮和无机氮。燃烧法测量的是总氮的含量。凯氏方法可以分别测量出来上述各个氮含量。样品不经过消化直接蒸馏测量，就是无机氮中的铵态氮；在蒸馏过程中加入催化剂将硝态氮、亚硝态氮转换成铵态氮，其结果就是无机氮。样品经过消化蒸馏得到的是凯氏氮，在消化前加入催化剂将硝态氮、亚硝态氮转换成铵态氮，得到的是总氮。因而燃烧法测量的结果总是高于凯氏氮的结果；没有人为掺假的食品，二者测量结果是一样的。三、标准不同：凯氏方法是所有样品的国标；燃烧法是参考方法凯氏方法是食品、饲料、土壤、环境、种子等样品中氮或蛋白质含量测量的强制标准，测量结果具有互通性和可比性。由于燃烧法和凯氏法测量的氮含量对象不同，造成样品种类不同、成份不一样，结果偏差也不一样。燃烧法不适合化肥中的氮含量的国家标准。四、样品量不同：凯氏方法是常量分析；燃烧法是微量分析凯氏方法是常量和半微量；燃烧法是从微量扩展到半微。凯氏法固体到5g、液体到15ml；燃烧法最多到1g。凯氏法可以一直使用最大量分析，而燃烧法如一直使用最大量分析，则燃烧后的无机残渣堆积在仪器里面，要求频繁清理，同时也会缩短仪器的使用寿命。对于均匀性不好的固体样品，脂肪高的食品，只能通过大取样量来减少测量结果的偏差，燃烧法显得稍微。困难；如大豆、玉米。此外鲜肉类食品，由于蛋白、脂肪分布不均匀，也建议是大的取样量。

本人用半微量法测定污水的凯氏氮含量。 详细步骤如下：《1》取污水50ML，加2.5ML硫酸，0.4ML硫酸铜，1.2g硫酸钾。加热30分钟，进行消解过程。冷却后吧凯氏瓶中的消解液移到100ML的容量瓶，并定容。 《2》从容量瓶中取20ML溶液，至半微量定氮蒸馏装置中，然后加10ML氢氧化钠，用20ML硼酸吸收，接取馏出液80ML。然后移到100ML的容量瓶，并定容。 《3》从容量瓶中取10ML定量后的馏出液，用纳氏试剂分光光度法去测定其中的凯氏氮含量。 结果：测定结果，馏出液中的凯氏氮含量为1.64mg/L, 问题：已知馏出液中的凯氏氮含量为1.64mg/L,怎么换算出原来50ML中的污水当中的凯氏氮含量，因为里面进行了两次定量，？？？

100mg硫酸铵中的氮含量是多少？我是想用100MG硫酸铵来校准凯氏定氮装置的，但是不知道硫酸铵中的氮含量怎么求？麻烦请详细点。

GB 5009.5中规定浓硫酸用量20ml，是如何确定的？通过什么方法计算呀？

我有一个制剂产品需要测里面的凯氏氮含量，根据GB11891-1989方法测定，需取样液50ml加硫酸进行消化，但体积多爆沸后容易喷出来，所以采取先将样品的水分尽量挥发掉再加硫酸等进行消化，但最终滴定出来的结果偏低很多，请问大家，这种先将样品挥发干再消化会影响结果准确性吗，如果影响怎么保证消化过程中不爆沸出来？还有消化终点怎么判定，是按照温度程序最终450℃保持30min液体澄清就行，还是三氧化硫烟雾完全消失？使用的设备是消化炉加凯氏定氮仪

用凯氏定氮法测蛋白质时，最后滴定用0.05mol/l的硫酸标准滴定溶液或者0.05mol/l的盐酸标准滴定溶液滴定，这两种标液怎配制阿

[color=#00008B][color=#00FFFF][size=4]版友给我的短信，贴出来大家一起讨论下：[/size][/color][/color]凯氏定氮法本身没有问题； 不过我有二个疑点： 1：有人说“其实凯氏定氮法的缺陷并不难弥补，只要多一道步骤即可：先用三氯乙酸处理样品。三氯乙酸能让蛋白质形成沉淀，过滤后，分别测定沉淀和滤液中的氮含量，就可以知道蛋白质的真正含量和冒充蛋白质的氮含量。这是生物化学的常识，也早成为检测牛奶氮含量的国际标准（ISO 8968）。”请问搂主这样说有没有道理？ PK：您说的有道理，但我要反驳的事：1.奶里本身不含有三聚氰胺，如果不出现这档子事，根本就没人去关心，就像我我之前说的，泉水中没有鱼，没有捕到的必要，何必要浪费宝贵的资源去检测呢？2 看您也是专家，对凯氏定氮有研究，凯氏定氮本身用大量的硫酸和氢氧化钠，对环境的污染本身比较大，如果按照您说的方法去检测，将会使用双倍的试剂，污染环境，您说呢？3 这也是最关键和重要的一个环节，三聚氰胺如果含量比较低的话，是很难检测的，一般现在用0.1摩尔的酸，如果含量比较低，你就要换0.01摩尔的酸您也知道，现在一般用的比较多的是福斯的开始定氮仪，换酸很麻烦的，而且标准酸溶液浓度越低，准确度也越低，像现在液相检测三聚氰胺的检出限2毫克每公斤，凯氏定氮根本达不到这个检出限，只有像三鹿这样添加很多的才能检测出来。2：即便牛奶中不含三聚氰胺，是不是常规分析，也要应该检测一下牛奶中有机成分的分析，比如奶牛饲料中含有农残等等，挤出来的奶肯定要化验一下，这是理所应当的吧？就好比我们喝的自来水一样啊。而检测的手段最好用gc-ms，三聚氰胺是可以被检测出来的。 PK：现在一般的大型乳品厂都有福斯公司的乳成分分析仪，采用近红外技术，2分钟测定一个样品，检测出脂肪，蛋白，乳糖和体细胞数据，很先进，但是需要凯氏定氮校准仪器，很多厂家收奶都用这个检测。 常规分析不做牛奶中的有机成分，拿巴氏杀菌奶来说，做脂肪，蛋白，干物质，硝酸盐，亚硝酸盐，黄曲霉毒素，微生物方面有大肠菌群，菌落总数，致病菌等，元素检测铅和无机砷，就这么几项下来检测费都好几千。如果检测农药残留，那就更多了666，DDT，有机磷，有机氯，多了去了，您想法是好的，但实现起来比较困难，企业很难承担检测费，而且能检测的实验室也不是很多。 还有您说的gc-ms，很先进，很好，但是能买的起的实验室又有多少呢？不是每个实验室都那么有钱。有的做凯氏定氮还没有定氮仪，用凯氏烧瓶做呢条件层次不齐，实现起来很困难，还是从原料奶的源头抓起，是最好的办法，消灭在萌芽状态。

[size=18px][font=&] 蛋白质是构成生物体细胞组织的重要成分。食物中的蛋白质是人体中氮的唯一来源，具有不可替代的作用。含氮是蛋白质区别于其他有机化合物的重要标志。在检验食品中蛋白质时，通常是先检定出食品中的总氮量，然后乘以蛋白质换算系数，以此得到蛋白质含量。凯氏定氮法由Kieldahl于1883年首先提出，至今仍被作为标准检验方法。凯氏定氮法测定蛋白质分为样品消化、蒸馏、吸收和滴定过程。[/font][font=&]原理[/font][font=&]向样品中加入浓硫酸和催化剂，充分混匀，然后加热消化分解，样中碳和氢被氧化成二氧化碳和水，其中的有机氮转化为硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。[/font][font=&]样品消化[/font][font=&]浓硫酸具有脱水性和氧化性，可使有机物中的碳、氢被氧化为二氧化碳和水，蛋白质会分解为氨，然后氨与硫酸结合生成硫酸铵。通常加入硫酸钾和硫酸铜作为催化剂来加快蛋白质分解。硫酸钾可以提高溶液的沸点，一般情况下，纯硫酸的沸点在340℃左右，但是在添加硫酸钾后，可提高至400℃以上。提高温度使有机物加快分解。但是不能加入过多的硫酸钾，否则会因为温度过高，使生成的硫酸铵发生热分解成氨而造成损失。硫酸铜除作为催化剂外，还可以指示消化终点的到达，有机物全部消化完全后，溶液呈现清澈的蓝绿色，硫酸铜还可以做蒸馏时碱性反应的指示剂。[/font][font=&]蒸馏[/font][font=&]消化液中的硫酸铵在碱性环境下会转化成氨。为防止水中微量的氨气受热逸出，影响测定结果，所以水蒸气发生器中的水要保持酸性。硫酸铵是一种强酸弱碱盐，需要足够的碱液使结合态的氨完全反应并释放出来，这个过程中的氢氧化钠一定要过量，过量的氢氧化钠会与硫酸铜生成蓝色的氢氧化铜沉淀，氢氧化铜受热分解成黑色的氧化铜沉淀。检验蒸馏是否完成，可用奈氏试纸法，NH4+或NH3遇奈氏试剂会反应生成棕红色的碘化汞铵化合物。[/font][font=&]吸收[/font][font=&]加热蒸馏放出的氨可用硼酸溶液吸收，硼酸有吸收氨的作用，又因其呈微弱酸性，不影响下一步滴定时指示剂的变色反应。温度过高会使硼酸吸收液对氨的吸收作用减弱，从而造成损失，故一般不超过40 ℃。[/font][font=&]滴定[/font][font=&]待吸收完全后，用硫酸或者盐酸标准溶液进行酸碱滴定，滴定液的浓度直接影响结果的准确性，必须按照要求进行配制和标定。混合指示剂在中性溶液中呈灰色，滴定终点时液体呈灰色。[/font][font=&]注意事项[/font][font=&]①所用的试剂溶液应用无氨蒸馏水配制；[/font][font=&]②取样应具有代表性,取样前将样品充分混匀；[/font][font=&]③样品称量放入凯氏烧瓶时，切勿使样品粘附在瓶颈部，避免样品未消化完全而造成氮损失；[/font][font=&]④为了保证使烧瓶壁上的残渣消化完全，在消化过程中要不时地转动凯氏烧瓶；[/font][font=&]⑤消化脂肪或糖含量较高的样品时，易产生大量泡沫，为防止泡沫溢出，消化时应先消化加热并不断摇动，或者加入少量辛醇或液体石蜡或硅油消泡剂；[/font][font=&]⑥当样品消化液浑浊或未澄清透明时，可先将凯氏烧瓶放冷至室温后，再加入30%的过氧化氢，然后继续加热消化；[/font][font=&]⑦加碱后，漏斗要进行水封，避免因装置漏气造成氨的逸出影响结果的准确性；[/font][font=&]⑧要保证蒸馏装置不能漏气；[/font][font=&]⑨在蒸馏时反应室与外界存在的压力差，蒸汽可将氨带出。故蒸馏时，要保证蒸汽均匀、充足，中间不能停止加热，防止发生倒吸；[/font][font=&]⑩蒸馏前如果加碱后消化液呈蓝色而没有生成氢氧化铜沉淀，说明加入的碱量不足，需要适量补加碱；,蒸馏时为防止水蒸气发生器内液体爆沸，加入几片碎瓷片或大的玻璃珠，玻璃珠直径最好大于联通的玻璃管直径，以免玻璃珠进入玻璃管内影响蒸汽均匀、充足的输出；-冷凝管下端要插入硼酸吸收液液面以下，防止氨逸出，蒸馏完毕后先将冷凝管下端提离液面，再蒸1min后清洗管口，再移开吸收瓶，最后关掉热源，否则可能发生倒吸。[/font][font=&]常见问题解答[/font][font=&]一、消化过程中容易沾壁怎么办？消化后定氮瓶内有黑色残留物怎么办？[/font][font=&]解答：称样时需要注意切勿使样品粘附在定氮瓶颈部，避免因样品未消化完全而造成结果偏低。消化过程中如果发生沾壁在定氮瓶肚上或者定氮瓶肚上有黑色残留物，可以在消化较完全时摇动定氮瓶，把定氮瓶肚上的黑色物质摇洗下来。摇动的方法是取下小漏斗，戴上防烫手套，手掌紧握瓶颈，向前后侧甩，使瓶内液体呈半旋转半振荡状态，注意控制力度不要让液体溅离瓶口。[/font][font=&]二、硫酸钾的作用是催化剂吗？[/font][font=&]解答：硫酸钾的作用是提高溶液沸点，从而加快有机物分解。[/font][font=&]三、硫酸铜是否是消化终点以及加碱蒸馏时的指示剂？[/font][font=&]解答：硫酸铜的作用有三个，分别为：[/font][font=&]①催化作用：加速有机物的氧化分解。[/font][font=&]②消化完全的指示剂：使液体呈现蓝绿色澄清透明状态。[/font][font=&]③蒸馏时碱性反应的指示剂：产生褐色沉淀。[/font][font=&]四、混合指示剂必须临用时混合吗？[/font][font=&]解答：混合指示剂必须临用时混合。[/font][font=&]五、请问蒸馏的时取下锥形瓶，需要用洗瓶冲洗吗？不冲洗会有误差吗？[/font][font=&]解答：需要冲洗冷凝管下端以防止产生结果误差。蒸馏后移动蒸馏液接收瓶,液面离开冷凝管下端,再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部,然后取下蒸馏液接收瓶。[/font][font=&]六、蒸馏仪器的检漏如何操作？[/font][font=&]解答：可以将蒸馏装置连接好后，在接口以及瓶塞等可能漏气的地方滴加少量水，打开电炉加热，观察有无气泡产生。[/font][font=&]七、硼酸可以多加吗？[/font][font=&]解答：不可以。按国标的要求正确操作，10mL硼酸足够。[/font][font=&]八、滴定时消耗了很多盐酸溶液，能否换浓度高的盐酸溶液滴定？[/font][font=&]解答：不能更改国标给出的滴定液浓度。蛋白质含量较高的样品可以适当减少称样量，或合理范围内减少吸取消化液的体积V3。[/font][font=&]九、空白消耗标准滴定液的体积指的是什么？[/font][font=&]解答：试剂空白实验消耗的标准滴定溶液的体积就是空白体积。[/font][font=&]十、同时有两种蛋白怎么换算？[/font][font=&]解答：同时含有多种蛋白质，且折算系数不相同时可以按复合配方食品换算蛋白质系数。[/font][font=&]结语：凯氏定氮法经典、准确，适用于食品中蛋白质的测定。但是因样品中一般会含有一些非蛋白质的含氮化合物，所以凯氏定氮法测定结果为样品中粗蛋白质含量。然而，此法实际上测的不是蛋白质含量，而是通过测氮含量来推算出样品中蛋白质的含量。在凯氏定氮法中消化操作的条件是产生误差的主要原因，因此要格外注意。在实际的生产实验中，每一步应该严格按照标准的规定来进行操作。本文为笔者日常工作实验总结所得，望对实验者有些许帮助。[/font][/size]

请问一下测定凯氏氮，消解完了以后加硫代硫酸钠和氢氧化钠的混合液的时候，为什么会变黑， 我是新手，请大家多指教！！ 如果有对这方面很熟悉的同仁，就麻烦把加每一种试剂的用途都告诉我，我不知道？？？？？？？？？？？？？？

在凯氏定氮过程中，测定回收率所用试剂除了用硫酸铵，还可以用什么试剂？其含氮量是多少？因为我们硫酸铵已经用完，现在急需做下回收率，帮帮忙了

请教各位老师，氨氮标准液的标定方法或硫酸铵标准液的标定方法；有同事说杂质标准国标都不标定的，假如要标定如何操作；

标准说要用凯氏氮消解瓶，但是网上也搜不到这个消解瓶长什么样，大家有图片吗？急用的话用凯式蒸馏装置的凯式蒸馏瓶可以代替吗？

1.大家在用凯氏定氮法消解的乳粉的时候加都少的硫酸？2.消化后冷却有结晶出现对实验有木有影响呢？

由于本人的化学知识不足，请教一下问题？1.蒸氨时为什么蒸馏瓶内要加浓碱？吸收液为什么要用硼酸溶液？为什么要将冷凝管下端插入接收瓶液面下？能否用其它的酸代替硼酸？2.试样消化过程中 加入浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾的作用是什么？3为什么消化完全时试液呈兰绿色，而加入40％NaOH溶液变为深蓝色或棕黑色？ [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=36122]凯氏定氮的原理与方法[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=36121]凯氏定氮的原理和方法[/url]