衍生化单糖与标准

液相（HPLC)衍生化单糖组分分析的问题希望能得到高手们的指点，我尝试用PMP衍生化单糖的方法去做液相分析，因为衍生化之后就可以用C18柱分离并用紫外检测器检测，可是结果做了N次一直不理想，无论是标品还样品出的峰都很小很小，微不可见，只有电脑才识别的出来，跟被没法往Paper上贴，恳请各位高手指点一二，以帮我爬出这泥潭。谢谢

我用PMP衍生化单糖，单糖标品最后跑出来的峰去掉空白还有好几个峰，单糖混标峰的保留时间都很靠前而且聚在一起，峰的数量也远远多于单糖的数量，想问一下各位大佬知不知道这是怎么回事衍生化方法：[font=华文中宋]精密吸取水解液（单糖混合对照品溶液、空白溶液）[/font][font='Times New Roman',serif]200uL[/font][font=华文中宋]置[/font][font='Times New Roman',serif]5mL[/font][font=华文中宋]安瓶中，精密加入[/font][font='Times New Roman',serif]0.3mol/L [/font][font=华文中宋]的氢氧化钠溶液[/font][font='Times New Roman',serif]400uL[/font][font=华文中宋]，混匀，精密加入[/font][font='Times New Roman',serif]0.5mol/L PMP[/font][font=华文中宋]甲醇溶液[/font][font='Times New Roman',serif]200uL[/font][font=华文中宋]，在[/font][font='Times New Roman',serif]70[/font][font=华文中宋]℃条件下衍生化反应[/font][font='Times New Roman',serif]60min[/font][font=华文中宋]。取出，放冷，精密加入[/font][font='Times New Roman',serif]0.3mol/L[/font][font=华文中宋]的盐酸溶液[/font][font='Times New Roman',serif]400uL[/font][font=华文中宋]，涡旋混匀。移至[/font][font='Times New Roman',serif]5mL[/font][font=华文中宋]离心管中，涡旋混匀。加入三氯甲烷[/font][font='Times New Roman',serif]1mL[/font][font=华文中宋]，涡旋混匀，离心（[/font][font='Times New Roman',serif]3000r/min[/font][font=华文中宋]）[/font][font='Times New Roman',serif]10min[/font][font=华文中宋]，弃去三氯甲烷层（下层），如此至少重复[/font][font='Times New Roman',serif]3[/font][font=华文中宋]次，直至三氯甲烷层无颜色，水层（上层）即为供试品溶液。[/font][font='Times New Roman',serif]0.45um[/font][font=华文中宋]微孔滤膜过滤。[/font][font=华文中宋]色谱条件：乙腈：磷酸盐（0.5mol/L，pH6.8）=17:83，波长245nm，流速0.8mL/min，进样量10uL[/font][font=华文中宋]空白[/font][font=华文中宋][/font]

[color=#444444]我想咨询一下，我现在在做单糖衍生化用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析，我用吡啶溶解后，加入硅烷化试剂，然后加入正己烷取正己烷层[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]分析可是并没有出峰，我想问一下在这个过程中用到的吡啶要进行无水处理吗？[/color]

现在正在做单糖与二糖的衍生化，我用的是六甲基二硅胺烷与三甲基氯硅烷为衍生化试剂，溶剂为吡啶，为什么衍生化总没有稳定的时候了。考察稳定是用GC-FID在加入衍生化试剂后不间断进样，峰面积一直在变，而很多文献报道只要室温三小时或者几分钟就可以反应完全。那个做个糖的衍生化没。麻烦指导一下，谢谢。可以qq联系 383197712。

[font=Times New Roman]三甲基硅烷化方法是糖的羟基衍生化的主要方式之一。优点是：衍生物挥发性强，制备快速、简便。衍生化反应可在室温下几分钟完成，它可适用于醛糖、酮糖、甙、糖醇、糖醛酸和脱氧糖等的衍生化。缺点是：由于各种单糖异构体和不同大小环的特殊单糖的存在，造成色谱峰多于组分单糖的数目，从而导致混合物的定性定量分析复杂化。[/font]那么如何用内标法/外标法对同种糖的不同峰定量呢 以求出该糖总浓度？

问下各位友友，我跑单糖用的pmp柱前衍生化，衍生结束后加入盐酸终止反应很产生很多沉淀正常吗[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403201932526051_9217_5517361_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403201932526051_9217_5517361_3.jpg!w690x517.jpg[/img]

如题，乙酸酐衍生单糖用盐酸羟胺做还原剂，盐酸羟胺的作用是什么啊，不加行不行啊，那位指点一下。再有气相衍生单糖会不会有多重产物？

最近在做阿拉伯糖的衍生化，用到的试剂是MSTFA，用GC检测，谱图有一大三小四个峰，标准品和样品都一样。请问各位高手，这种现象是正常的吗？这些峰是不是不同数量羟基发生硅烷化的结果？用其他什么试剂或方法衍生才能得到GC的单一峰？请多指教。谢谢！

[color=#444444]请问单糖的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]衍生可以用MTBSTFA进行硅烷化衍生吗？求大神指点！[/color]

请教各位前辈，请问GC可以确定单糖的绝对构型吗？之前在一些文章上看到通过衍生化的方法与糖的标准品对照确定单糖的绝对构型（D型或L型），可我最近投了一篇稿，编辑说这种方法只能确定糖的相对构型，不能确定绝对构型，我很疑惑，求大家解答。

想用GC测单糖，看文献上说样品加入甲醇解试剂（硫酸-甲醇）后，衍生化小瓶要充氮封盖然后再加热。请问一下：充氮具体应该怎么操作呢？需要什么工具吗？我的实验室里只有氮气吹干装置...先谢过各位啦！

求助专家，有做气相色谱测单糖的，如何做样品前处理？醋酸酐乙酰化效果好吗？

大家好！我想将糖醇衍生化后进行GC-MS分析，请问一下大家采用什么样的衍生化方案比较好我是一个水相的反应体系，希望能直接在水相里面衍生化，然后就是希望能获得比较好的衍生化转化效率我在论坛上看到大家用NaBH-甲基咪唑进行乙酰化，似乎可以在水相中进行，大家能提供一个具体的步骤吗？谢谢

最近做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]的糖类衍生，我先用肟化反应将糖类的羰基反应掉，然后用硅烷化试剂与羟基反应。现在发现能对单糖顺利衍生，而对二糖不能顺利衍生？可有做过类似衍生的同行，这问题到底出在哪里呢？是肟化试剂中吡啶的含水量高，还是衍生化试剂有问题？

求助，按照文献的方法对GlcNAc进行衍生化处理，调整反应温度、时间、酸碱度后均未成功，请问有人做过相关实验的么。除了衍生化外，换了硅胶柱检测标准品，在195 nm波长下发现出了两个距离较近的峰，想请问这是由于洗脱方法不太合适还是流动相不太合适呢

衍生化处理一个高浓度的标准溶液，稀释 做曲线呢？还是 衍生化几个不同浓度的做曲线？行家指点一二

[color=#444444]我想咨询下，Pmp衍生化测单糖，对单糖的浓度有什么要求吗？浓度梯度是怎么确定的啊？我用的单糖的浓度梯度是0.2g/L~1g/L共5个浓度梯度…发现峰面积并不是成比例的…心累啊…再者，PMp的浓度按文献稀释了10倍，峰高还是3000mA左右…会不会太高…和衍生物的峰高放在一起，谱图画面有点不和谐啊！对于PMp过量的问题，要达到多少就可以呢？有什么要求吗？这个衍生化反应的彻底吗？查了几篇文献，并没有看到这方面的说法[/color]

糖衍生化有哪個大俠做過?可以說明你是怎麼做的?方法說清楚一點耗時多久感恩

最近在做一个糖苷类的检测方法，想用对硝基苯甲酸和糖苷上的羟基发生酯化反应显色后用紫外检测器检测，但是副产物太多，不能进行准确的定量，想请教下还有别的衍生化条件没？ 我的衍生化条件是10mg糖苷样品+50mg对硝基苯甲酸加丙酮溶解后加1ml浓盐酸加热10min，条件是我自己摸索的，可能有很多的不规范的地方样品里可能有葡萄糖，蔗糖，葡萄糖甲苷，1-O-甲基-四苄基葡萄糖，1-羟基-四苄基葡萄糖

我要用HPLC测定样品中的木糖和阿拉伯糖。先前是使用PMP的柱前衍生化，利用紫外检测器检测，可是跑标样时，单糖总是出现两个峰，五分钟左右一个，35分钟左右一个，这是什么原因呢？如果我改用示差折光检测器测定，改用什么柱子比较好，流动相用什么呢？请各位高手指点一二！谢谢！

我门最近刚刚开展肉中硝基呋喃代谢物的检测。仪器是agilent 6410的质谱。但是突然发现在优化质谱条件，寻找母离子和子离子时，需要将标准品进行衍生，请教各位大侠，有没有具体的衍生化条件？越具体越好！不胜感激！

各位专家，有机酸需衍生化后才能[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]测定。但是衍生化可能不完全，衍生化产物又不够稳定，那么在使用标准品时该用酸类还是酯类呢？另外，哪里能找到有关标准品使用与保存以及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]定量详细操作步骤的信息呢？多谢！！

[color=#444444]在做标准单糖的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]分析时，将单糖衍生为糖腈乙酸酯衍生物后跑[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]，出现很多杂质峰，无法分别出那个是单糖，[/color][img=,absmiddle]http://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/cry.gif[/img][color=#444444]完全按照书上要求做的啊，过程也没出错啊， 有哪位大神能帮个忙解释一下这是什么原因啊~已经排除是柱子的问题[/color]

我采用以下方法进行衍生，结果无论是单独的样品，还是混合品，或者是样品都只出现一个峰，是什么原因，然后在衍生的时候需要无氧条件吗[font=宋体][color=#000000]玉竹中性多糖的水解：称取玉竹中性多糖 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]1mg[/color][/font][font=宋体][color=#000000]，加[/color][/font][font=宋体][color=#000000]入 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]2mol/L [/color][/font][font=宋体][color=#000000]的三氟乙酸溶液 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]1mL[/color][/font][font=宋体][color=#000000]，密封，于 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]110[/color][/font][font=宋体][color=#000000]℃水解 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]4h[/color][/font][font=宋体][color=#000000]，[/color][/font][font=宋体][color=#000000]水解后样品冻干。[/color][/font][font=宋体][color=#000000]单糖衍生物制备：称取各标准单糖 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]1mg [/color][/font][font=宋体][color=#000000]与玉竹中性[/color][/font][font=宋体][color=#000000]多糖水解后样品分别加入[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]0.3mol/L[/color][/font][font=宋体][color=#000000]的[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]NaOH[/color][/font][font=宋体][color=#000000]溶液[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]1mL[/color][/font][font=宋体][color=#000000]，配[/color][/font][font=宋体][color=#000000]成 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]1 mg/mL [/color][/font][font=宋体][color=#000000]的 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]NaOH [/color][/font][font=宋体][color=#000000]溶液。分别量取 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]100[/color][/font][font=KaiTi_GB2312][color=#000000]μ[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]L [/color][/font][font=宋体][color=#000000]加入 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]1.5mL[/color][/font][font=宋体][color=#000000]离心管中，加入 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]0.5mol/L [/color][/font][font=宋体][color=#000000]的 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]1- 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Roman][color=#000000]35[/color][/font][font=宋体][color=#000000]℃，流速：[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]1.0mL/min[/color][/font][font=宋体][color=#000000]，[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]Ecilipse XDB-C[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]18 [/color][/font][font=宋体][color=#000000]色谱柱[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000](4.6mm [/color][/font][font=宋体][color=#000000]× [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]150mm[/color][/font][font=宋体][color=#000000]，[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]5[/color][/font][font=KaiTi_GB2312][color=#000000]μ[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]m)[/color][/font][font=宋体][color=#000000]，流动[/color][/font][font=宋体][color=#000000]相：[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]82.2% PBS [/color][/font][font=宋体][color=#000000]缓冲液[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000](0.1mol/L[/color][/font][font=宋体][color=#000000]，[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]pH7.0)[/color][/font][font=宋体][color=#000000]和 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]17.8% [/color][/font][font=宋体][color=#000000]乙腈[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]([/color][/font][font=TimesNewRomanPS-ItalicMT][color=#000000]V/V[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000])[/color][/font][font=宋体][color=#000000]。进样量 [/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]1 0[/color][/font][font=KaiTi_GB2312][color=#000000]μ[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]L[/color][/font][font=宋体][color=#000000]。将各单糖衍生物混合样品注入[/color][/font][font=Times New Roman][color=#000000]HPLC [/color][/font][font=宋体][color=#000000]中，进行分析。[/color][/font]

求助：那位有龙眼肉多糖提取和衍生化的方法和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]分析方法与结果呀？我在做，但是这方面的资料很少，谢谢！

如题，我想用液相测提取的多糖里的单糖，我看文献上都是提取纯化后，用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行衍生化后再测定，我看别人用的柱子有XDB-C18，ODS-VP色谱柱，Wondasil C18，检测器都在用紫外或者二极管阵列检测器。现在我们有一个ODS-3（C18）的柱子，不知道能不能测衍生化后的糖呢？对柱子这块我不是很懂，烦请有经验的前辈交流下，不胜感激。祝大家新年快乐~

各位老师，BPA能用BSTFA衍生化吗，如果能衍生化，衍生化步骤和衍生化产物的离子碎片是什么，用什么溶剂配置BPA标准溶液去衍生化，求助

现在做一种单糖的定量，用GCMS。前处理用氮吹将样品吹干，加100ul吡啶和100ul的BSTFA（1%TMCS），78摄氏度60min。分子中三个羟基变成三个三甲基硅烷基。正己烷定容至500ul进样。现在的问题是同样的三个重复之间差异很大（30%）。不知道是氮吹将样品吹跑了还是衍生化过程的问题。请高手指教。。。。感谢！！

按照方法，通过PMP衍生可以在液相正常打出峰，但是样品瓶在放置2天后再次进样，峰的响应只有原先的五分之一，有人知道原因吗？谢谢