细菌鉴定药敏检测

美国密歇根大学的研究人员近日发明出一种新型生物传感装置，利用该装置，无需显微镜即可测量出细菌的生长过程及药敏特征。研究结果发表在1月15日的《生物传感器与生物电子学》期刊上。 科学家将这种装置称为“异步磁珠转动（AMBR）传感器”，它采用了一种可以在磁场中异步旋转的磁性小珠，任何附着到这种磁珠的物质都会降低其转速。在这项研究中，研究人员将杆状大肠杆菌附着在磁珠上，然后用AMBR传感器进行检测。“当单个细菌附着上去后……将极大地阻碍磁珠，使磁珠旋转速率减慢到原来的四分之一”，领导这项研究的Raoul Kopelman教授解释，“若细菌再长大一点点，阻碍力将持续增大，转速也将随之变化，因而我们可测量出细菌的这种纳米级生长变化”。利用同样的原理，该装置也可用于检测细菌的药敏性。当细菌受到药物影响停止持续生长，进而使得磁珠转速发生变化，于是研究人员便能在数分钟内知道药物是否对细菌产生了作用。“采用这种方法，我们可以检测到小至80纳米程度的细菌生长变化，远比一台光学显微镜管用——显微镜的解析度也就大约250纳米”，文章第一作者Paivo Kinnunen说，“这种方法可以应用到任何微米级或纳米级的大小变化检测中”。研究人员表示，这种新型生物传感装置或将有助于加快细菌感染治疗。（科学网 张笑/编译）相关仪器：IX71型倒置光学显微镜 异步磁珠转动传感器完成人：拉乌尔·科普曼课题组实验室：美国密歇根大学化学系、生物医药工程系、化学工程系、病理学系、应用物理计划兰道实验室 密歇根大学卫生系统临床微生物学与病毒学实验室群

美国密歇根大学的研究人员近日发明出一种新型生物传感装置，利用该装置，无需显微镜即可测量出细菌的生长过程及药敏特征。研究结果发表在1月15日的《生物传感器与生物电子学》期刊上。科学家将这种装置称为“异步磁珠转动（AMBR）传感器”，它采用了一种可以在磁场中异步旋转的磁性小珠，任何附着到这种磁珠的物质都会降低其转速。在这项研究中，研究人员将杆状大肠杆菌附着在磁珠上，然后用AMBR传感器进行检测。“当单个细菌附着上去后……将极大地阻碍磁珠，使磁珠旋转速率减慢到原来的四分之一”，领导这项研究的Raoul Kopelman教授解释，“若细菌再长大一点点，阻碍力将持续增大，转速也将随之变化，因而我们可测量出细菌的这种纳米级生长变化”。利用同样的原理，该装置也可用于检测细菌的药敏性。当细菌受到药物影响停止持续生长，进而使得磁珠转速发生变化，于是研究人员便能在数分钟内知道药物是否对细菌产生了作用。“采用这种方法，我们可以检测到小至80纳米程度的细菌生长变化，远比一台光学显微镜管用——显微镜的解析度也就大约250纳米”，文章第一作者Paivo Kinnunen说，“这种方法可以应用到任何微米级或纳米级的大小变化检测中”。研究人员表示，这种新型生物传感装置或将有助于加快细菌感染治疗。相关仪器：IX71型倒置光学显微镜 异步磁珠转动传感器完成人：拉乌尔·科普曼课题组实验室：美国密歇根大学化学系、生物医药工程系、化学工程系、病理学系、应用物理计划兰道实验室 密歇根大学卫生系统临床微生物学与病毒学实验室群http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09505.gif

求药敏试验标准及方法 最近想作饲料药物添加剂多细菌的药敏试验，请教各位！！

药敏试验常用K-B法：1从孵育16-24小时的琼脂平板上（血平板），挑出单个菌落，直接用生理盐水制成0.5麦氏单位。2在15分钟内，用无菌棉拭子蘸取调好的菌液，在液面上方管壁处旋转并用力挤压几次，以从中挤出过多的菌液。3用棉拭子在无菌的M-H培养基表面化线接种，再重复操作两次，每次将平板转动60度，每次接种都应保证接种物均匀分布，最后用棉拭子涂抹平板的边缘。4将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。每个纸片都应压一下，以保证与平板表面完全接触。每个纸片中心间距24mm。纸片一旦与平板接触，不应再移动。5贴完纸片后，应在15分钟内放入35度孵箱。嗜血杆菌属，链球菌属放入3%-5%的CO2烛缸。6孵育24小时以后，测量各药敏纸片抑菌圈直径，与NCCLS手册比较，作出结果判断。说明：细菌药敏结果的判断以NCCLS为标准，所以药敏试验的每一步都应严格按照NCCLS操作，否则将失去意义。链球菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌、除铜绿假单孢菌和不动杆菌外的假单孢菌属不用K-B法.

求抗微生物药敏感试验方法 最好是国标最近打算开展抗生素对大肠杆菌 金黄色葡萄球菌药敏试验，验证细菌对药物是否敏感。虽然找了一些方便，但都来源于江湖，http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09507.gif没找到有标准文本的支持，请教各位！求抗微生物药敏感试验方法 最好是国标。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09509.gifhttp://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif

细菌的实验室检测方法进展——金黄色葡萄球菌的鉴定方法摘要：金黄色葡萄球菌广泛分布于自然界，多存在于人和动物的鼻腔、咽喉、皮肤及与外界相通的腔道。能引起人和动物机体局部、脏器的化脓性感染，重者可引起败血症、脓毒血症等全身感染。金黄色葡萄球菌也是国内外最常见的细菌性食物中毒病原菌之一，在我国由金黄色葡萄球肠毒素引起的食物中毒占细菌性食物中毒事件的前几位。典型的金黄色葡萄球菌为球型，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌肠毒素被分为7 个血清型，A、B、C（C1、C2、C3）、D、E。目前实验室对金黄色葡萄球菌的检验有传统培养法，金黄色葡萄球菌肠毒素的检测方法，脉冲场凝胶电泳检测分型方法和聚合酶链式反应（PCR）技术对金黄色葡萄球菌的检测方法。

检测食品中微生物的仪器主要包括以下几种：　　无菌均质器：这种仪器广泛应用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制备。它具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点。样本装在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，有助于预防交叉污染。　　微生物鉴定系统/药敏分析仪：细菌鉴定药敏分析仪适用于对病原微生物进行种类鉴定和体外抗生素敏感试验、分析。其检测范围广泛，菌种库包含2000种以上，可鉴定临床致病菌550种以上，测试200种以上药物的敏感性。这种仪器能够实现细菌鉴定的自动化、标准化和药物试验的定量化，对于食品安全国家标准GB4789系列所要求的食源性致病菌(如弯曲杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌等)的分离鉴定非常有用。　　微生物检测仪：便携式微生物检测仪广泛应用于活菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、粪肠球菌(链球菌)、酵母(酵母菌)等微生物的快速检测。这种仪器便携一体化，防水抗压，可随时随地进行检测。　　微生物限度仪：如JC-WX600微生物限度检测系统，采用不锈钢金属材料制成，配有内置隔膜液泵，不需外接抽滤瓶，液体直接通过隔膜液泵排除，减少了抽滤瓶使用上的繁琐，避免了连接不好造成抽滤速度慢等缺点。　　以上这些仪器都是食品微生物检测中常用的设备，它们为食品的安全和质量控制提供了强有力的技术支持。

做药敏试验时用于培养细菌。用的是冷冻干燥保存的金葡菌，复苏的时候安瓶打开后细菌要全部用完吗？

[size=12px]E-试验（E-test）跟纸片扩散法和稀释法一样，也是药敏试验之一。E-试验是结合了纸片扩散法和琼脂稀释法的原理和特点，是一种抗生素浓度梯度稀释法直接测量MIC的药敏试验的体外药敏试验方法。 [b][b]一、E-试验原理[/b][/b]E-试验要用到E-试条，它是一条带有抗生素浓度梯度的塑料条。该条带表面涂有抗生素，浓度从条带一端的沿条带逐渐降低，形成连续的对数浓度梯度。将E试条放置于已接种有待测细菌的琼脂培养基上，经孵育后，可见一个以试条为中心的对称抑菌椭圆环，椭圆环边缘与试条交界处的刻度即为MIC值。 [font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][b]二[/b][/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][b]、E-试[/b][/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][b]验操作步骤[/b][/font]前面几个步骤跟纸片扩散法一样。[/size] [b][size=12px]1.菌液制备[/size][/b] [size=12px][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &]采用划线法将大肠杆菌受试菌种和标准菌种接种于营养琼脂平板，35℃培养16-18h，然后挑取单菌落，重悬于3mL无菌生理盐水中，混匀后与标准比浊管比浊。[/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &]调整浊度与标准比浊管0.5麦氏相同。[/font][/size] [size=12px][b]2.倒平板[/b]将MH琼脂培养基溶化后倒平板，注意平皿中培养基厚度均匀，倒3套平板。[i]90mm×15mm，平板厚度均匀，约4mm厚，大约1/3高度。[/i][/size] [b][size=12px]3.涂平板[/size][/b] [size=12px] 用无菌棉棒蘸取菌液（金黄色葡萄球菌）。将多余菌液在液面上方管壁内轻轻旋转挤出，涂布在MH琼脂平板整个平面三次，每次旋转60度，最后沿周边绕两圈，保证涂均匀，平板加盖室温干燥5min。 [/size][align=center][size=12px] [/size][/align][size=12px][b]4.插入E试条[/b] 用无菌镊夹取试纸条柄端，将其垂直插入MH培养基，并确保E试条与培养基间无气泡。E试条抗菌药物面（通常标有浓度刻度）朝上，抗生素浓度高的一侧（有标记）靠培养皿。 E试条有垂直插入和平放两种，一般建议垂直插入方式。[/size] [b][size=12px]5.孵育[/size][/b] [size=12px][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][/font]将上述平板倒置于37℃恒温培养箱中培养，观察并记录抑菌圈大小。 [b]6.结果分析[/b]孵育后围绕着E试条可形成一个椭圆形的抑菌圈，抑菌圈与试条的横向相交处的读数刻度为 MIC值。[/size][align=center][size=12px] [/size][/align][size=12px][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, Helvetica Neue, PingFang SC, Hiragino Sans GB, Microsoft YaHei UI, Microsoft YaHei, Arial, sans-serif][b]三[/b][/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, Helvetica Neue, PingFang SC, Hiragino Sans GB, Microsoft YaHei UI, Microsoft YaHei, Arial, sans-serif][b]、E-试[/b][/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, Helvetica Neue, PingFang SC, Hiragino Sans GB, Microsoft YaHei UI, Microsoft YaHei, Arial, sans-serif][b]验与纸片扩散法和稀释法的异同[/b][/font]1.E试验、纸片扩散法和稀释法都是常用的药敏试验，都可以用来选择抗菌药物。[/size] [size=12px]2.E试验和纸片扩散法：操作相似，但E试验更简便，可以直接读取MIC值，相比，纸片扩散法比较繁琐，需要测量抑菌圈的大小。[/size] [size=12px]E试验和稀释法：虽操作上有差异，都可以确定MIC值，但E试条是带有抗生素浓度梯度的塑料条带，在琼脂平板上形成连续的浓度梯度，相比，稀释法比较繁琐，需要连续对倍稀释形成递减的抗生素浓度梯度。 [b]注意事项[/b][/size] [size=12px]1.E试条接触琼脂后，不能移动位置，以免影响抗菌药物在琼脂中的扩散和形成的浓度梯度。[/size] [size=12px]2.E试条需要按照说明书要求进行保存。3.E试条需要正规机构购买。4.平板中E试条的个数要根据平板大小，比如说90cm平板可以插入两条，150cm可以插入6条等。[/size]

作为科研生产中最重要的基础性资源—菌毒种,其收集、保藏及相关的研究工作在我国正处于整理、整合以及全方面逐步正规化阶段.2003年7月23日,科技部在北京召开了“国家科技基础条件平台建设”部际联席会和专家顾问组成立大会,正式启动了国家科技基础条件平台建设工作.国家自然科技资源共享平台建设作为其中的一个重要组成部分同步启动.作为该项8的一个重要组成部分,微生物菌种资源整理、整合工作同期启动,在此项工作中,中国兽医药品监察所承担了兽医微生物资源整理、整合工作.本所在行业内发展了数家加盟单位,在整理、整合菌种资源的过程中遇到了一些实验室细菌鉴定结果出现偏差的问题.经分析调查,多是由于实验室人员结构以及实验室的硬件水平差别较大等原因,造成实验室间鉴定能力的参差不齐,致使鉴定项目完成情况不尽相同,细菌鉴定结果出现偏差. 细菌鉴定是指将分离培养获得的病原菌,通过纯化培养使其达到不含有其他微生物的纯培养程度,继而进行系统鉴定.而菌种保藏机构在收集一些已经冻干的菌种时,应在开启后经过两代的适应性培养方可进行复核性的系统鉴定.系统鉴定是通过细菌的形态结构、生长特性、抗原性、病原性以及目前流行的核酸测定方法等检测,并用已知标准免疫血清确定分离细菌的属、种和型(群).目前菌种保藏机构通常使用的细菌鉴定方法大致有以下几种:

目的:建立抗菌中药对临床常见病原性细菌抑菌作用的检测方法。方法:选择6种常用抗菌中药（黄连、苦参、连翘、大黄、生地、知母)，分别采用水提法制备至质量浓度1mg/L。应用液体稀释法测定上述中药对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果:建立了中药抑菌作用的检测方法。黄连、大黄与连翘抑制细菌的作用较强，MIC值均≤0.05mg/L，其中黄连对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强（MIC值为0.00625mg/L）。结论:应用本方法可以进行中药抑菌作用的检测。抗菌中药对所试验菌种表现不同的抑菌作用。【关键词】中草药；微生物敏感性试验；抗菌药；细菌 Study on Antibacteral Effects of Six Chinese Herbs Against Pathogenic Bacteria XUE Jianjiang1,QIAO Haixia2,LIU Jinjun2,et al 1.Clinicial Lab,The First Affilited Hospitial,Hebei North University,Zhangjiakou,075000,Hebei,China 2.Department of Microbiology,Hebei North University,Zhangjiakou,075000,Hebei,China 【ABSTRACT】Objective:To establish a method to detect the antibacterialactivity of traditional chinese medicine against pathegenicbacteria.Methods:Six varieties of traditional chinese medicine(Coptisetc)were selected and extracted with pure water to make concentratedwith 1mg/L.Three different common pathogenic bacteria were used todetermine the minimal inhibitory concentration(MIC)in vitro with liquiddilution method to the selected medicine.Results:The methods wereestablished to detect the antibacterial activity of traditional chinesemedicine.Three herbs had inhibition effects on the strains oftest,among which Coptis Chinesis had the strongest effect and MIC was0.00625g/mL to Staphylococcus aureus.Conclusion:The methods can serveas a reference for the antibacterial activity of traditional chinesemedicine.The degree of inhibition effect for different traditionalchinese medicine on different bacteria were different. 【KEY WORDS】Chinese Herb,Microbial Sensitivity Tests,AntiBacterial Agents,Bacteria 中药几千年来为中国人民的健康做出了重大贡献，在现代预防和控制细菌性感染疾病中也发挥了积极作用。应用中药进行抗感染治疗具有副作用小，药物来源广泛，价格低廉等优势。在清热解毒抗菌类中药中开发抗菌药物具有良好的应用前景。长期以来，对于抗菌中药作用机理的较少认识限制了其在临床中的应用。目前，尚无统一规范的中药抗菌作用评价方法。为此，本研究拟应用抗生素最小抑菌浓度检测方法，检测6种常用抗菌中药（大黄、苦参、连翘、黄连、生地、知母）对三种常见病原性细菌（金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌）的抑菌作用，建立一种可以规范的中药抗菌作用检测方法。

[size=4] 传统的微生物分离、鉴定方法操作繁杂，周期长，准确性差，灵敏度低，对实验室技术人员的专业技术、操作技能、工作经验要求极高，快速和准确获得细菌的鉴定及药敏结果是非常必要的。近年来随着计算机的发展及广泛应用，微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。先后出现了许多全自动细菌鉴定与药敏系统，比如VITEK 系统、MicroScan WaikAway系统、MicroScan AS-4 微生物分析仪、PHOENIXTM系统等。这些技术的应用，为医学微生物检验工作提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序，大大提高了细菌鉴定的准确性,在很大程度上提高了工作效率，但同时也应注意一些问题，本文对几种常用的鉴定系统在临床微生物检验中的应用情况做一综述。[back=rgb(243, 40, 255)]1 全自动微生物鉴定系统的基本原理 [/back] 全自动微生物鉴定系统是基于生物信息编码（数码）鉴定细菌的新方法。数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码，建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字（编码），查阅检索本或数据库，得到细菌名称。其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。 鉴定系统的工作原理因不同的仪器和系统而异。不同的细菌对底物的反应不同是生化反应鉴定细菌的基础，而试验结果的准确度取决于鉴定系统配套培养基的制备方法、培养物浓度、孵育条件和结果判定等。大多鉴定系统采用细菌分解底物后反应液中pH的变化，色原性或荧光原性底物的酶解，测定挥发或不挥发酸，或识别是否生长等方法来分析鉴定细菌。 药敏试验分析系统的基本原理是将抗生素微量稀释在条孔或条板中，加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育，通过测定细菌生长的浊度，或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解，观察细菌的生长情况。在含有抗生素的培养基中，浊度的增加提示细菌生长，根据判断标准解释敏感或耐药。[/size]

[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406241014302662_4223_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]　　在现代科技的快速发展下，生物检测领域也迎来了诸多创新与突破。其中，ATP细菌检测仪作为一种先进的生物检测仪器，凭借其独特的优势，在食品安全、医疗卫生、环境监测等领域发挥着越来越重要的作用。以下，我们将深入探讨ATP细菌检测仪的众多优点。　　首先，ATP细菌检测仪具备出色的快速性。相比传统的细菌培养方法，ATP细菌检测仪能够在短时间内迅速得到检测结果。传统的培养方法通常需要数天甚至更长时间才能观察到细菌的生长和繁殖，而ATP细菌检测仪则能够在几分钟到几十分钟内完成检测，大大提高了检测效率。这种快速性对于需要及时响应和处理的场合尤为重要，如食品加工行业、医疗机构和公共场所等。　　其次，ATP细菌检测仪具有高度的准确性。ATP是生物体内普遍存在的一种高能化合物，是细胞活动不可或缺的能量来源。ATP细菌检测仪通过检测样品中ATP的含量，可以间接推算出活菌的数量。由于ATP只存在于活菌中，因此ATP细菌检测仪可以直接测量活菌的数量，而不需要依赖于细菌的繁殖和计数。这种直接测量的方式使得检测结果更加准确可靠，避免了传统培养方法中可能出现的误差和干扰。　　再者，ATP细菌检测仪的灵敏性也是其一大优点。它能够检测到极低浓度的细菌，甚至可以达到每毫升几万个细菌的数量。这种高灵敏度使得ATP细菌检测仪能够及时发现潜在的微生物污染问题，为食品安全、医疗卫生和环境监测等领域提供了更加有效的保障。　　此外，ATP细菌检测仪还具有简便易用的特点。其操作过程简单易懂，不需要过多的技术和经验，只需按照说明书进行简单的操作即可。这使得ATP细菌检测仪能够广泛应用于各个行业和领域，为不同用户提供了方便和实用的检测手段。　　　综上所述，ATP细菌检测仪作为一种先进的生物检测仪器，在食品安全、医疗卫生和环境监测等领域发挥着重要作用。其快速、准确、灵敏、简便易用等优点使得它成为了一个多功能的生物检测工具。然而，在使用过程中仍需注意一些事项以确保检测结果的准确性和可靠性。随着科技的不断发展和进步，我们有理由相信ATP细菌检测仪将在未来的生物检测领域发挥更大的作用。

[size=4] 在环保部监测站的建设标准中所说的“细菌检定分类系统”，准确地说应该是“细菌检测分类系统“。该系统可与无菌操作台配套使用。[font=新宋体] 目前水中粪大肠杆菌群（耐热大肠菌群）检测方法主要有传统的滤膜法及多管发酵法，并且已经列入环保行业标准方法（HJ/T 347-2007），此两种传统方法被国内环境检测部门广泛采用，但上述方法操作时间长需2-5天，步骤较为繁琐，需验证试验，不能对水的卫生学状况做出快速评价，制约了其应用。 且多管发酵法每毫升水样中最低检出线为2个粪大肠菌群，而固定底物酶底物法却能抑制200万个异样细菌，精确检测到1个粪大肠菌群。 因此，固定底物酶底物法可以较好的弥补传统方法的不足。该方法及相关设备也可以作为一个[font=Arial]“细菌检测分类系统“。[/font][/font][/size][size=3][font=宋体][/font][/size]

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]　　病毒细菌检测仪如何评估检测数据，病毒细菌检测仪评估检测数据的方法涉及多个方面，主要包括数据的准确性、灵敏度、特异性、重复性以及与标准方法的对比等。以下是对这些方面的详细分析：　　一、数据的准确性　　与传统方法的对比：病毒细菌检测仪的检测结果应当与传统微生物培养方法或其他准确的微生物检测方法具有一致性。这是评估数据准确性的重要标准。通过对比两种方法的结果，可以判断检测仪的准确度。　　标准物质检测：使用已知浓度的标准物质(如特定种类的病毒或细菌)进行检测，将检测结果与标准物质的浓度进行对比，以评估检测仪的准确性。　　二、灵敏度与特异性　　灵敏度：病毒细菌检测仪应能够在低微生物含量下进行可靠的检测。这要求检测仪具有较高的灵敏度，能够检测到微量的微生物。　　特异性：检测仪的检测结果应主要受到目标微生物的影响，而不受其他物质的干扰。特异性是评估检测仪在复杂环境中准确识别目标微生物的能力。　　三、重复性　　多次检测：在相同条件下对同一样本进行多次检测，观察检测结果的稳定性。如果多次检测结果基本一致，说明检测仪的重复性良好。　　变异系数：计算多次检测结果的变异系数，以量化检测结果的稳定性。变异系数越小，说明检测仪的重复性越好。　　四、检测标准与范围　　检测标准：参考相关国家标准或行业标准，如《GB/T 4789.2-2022 食品微生物学检验 菌落总数测定》等，评估检测仪的检测结果是否符合标准要求。　　检测范围：了解检测仪的检测范围，确保其在预定范围内进行检测。超出检测范围的结果可能不准确或无法解释。　　五、数据分析与解读　　数据分析：使用统计软件对检测数据进行处理和分析，如计算平均值、标准差、置信区间等，以量化检测结果的不确定性。　　结果解读：根据数据分析结果和检测仪的说明书或操作手册，对检测结果进行解读。注意区分合格、警告和不合格等不同的结果等级。　　六、实际应用中的注意事项　　样品前处理：确保样品在检测前经过适当的前处理，如稀释、培养等，以提高检测的准确性和灵敏度。　　操作规范：遵循检测仪的操作规程和注意事项，确保操作过程规范、准确。　　维护保养：定期对检测仪进行维护保养，如清洁、校准等，以保证其性能和稳定性。　　综上所述，评估病毒细菌检测仪的检测数据需要从多个方面进行综合考量。在实际应用中，应结合具体情况选择合适的评估方法和标准。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/07/202407171141238127_4767_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

[color=#444444]我想做水样里所有可培养细菌的鉴定分型，请问用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]可不可以啊？[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]做细菌的鉴定分型可以做到什么程度？比如说属、种、亚种？[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法在这方面比生化检测有什么优势?大家要帮帮我啊[/color]

近来，欧盟和美国食品中致病菌检测技术又有新的进展。已得到认可的由法国生物梅里埃集团生产的ＶＩＴＥＫ 全自动细菌鉴定及药敏分析系统和ＶＩＤＡＳ 全自动快速致病菌筛选仪。ｍｉｎｉ　ＶＩＤＡＳ 采用具有优异敏感性和特异性的酶联荧光分析技术，使标本与包被在固相包被针内的相应抗原或抗体进行反应，通过测得的荧光底物的荧光值来确认标本中有无待检物或其含量。使用成品的封闭的试条，试条可直接使用，内设自检系统，仪器内无管道，无须清洗，排除了交叉污染。每个试条均有条形码，仪器自动识别试条批号和有效期。每种试验也可由特殊的字母和色码识别。

.4 水质的细菌学检测 9.4.1 水中细菌总数的检测 9.4.1.1 目的和原理 水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关，它是评价水质污染程度的一个重要指标之一。由于重金属及某些其它有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用，因此总细菌数少的水样，并不能排除已被这些物质所污染。本试验采用标准平皿法对水样中细菌作计数，这是一种测定水中好氧的和兼性厌氧的异养细菌密度的方法，由于细菌在水体中能以单独个体、成对、链状，成簇或成团的形式存在，此外没有单独的一种培养基或某一环境条件能满足一个水样中所有细菌的生理要求，所以由此法所得的菌落数实际上要低于被测水样中真正存在的活细菌的数目。细期总数是指1毫升水样在营养琼脂培养基中，37℃、24小时培养后所生长的菌落数。一般规定，1毫升自来水中总菌数不得超过 100个。 9.4.1.2 材料和器皿 （1）培养基①营养琼脂培养基②2216E培养基：蛋白胨 5.0克 酵母膏 1.0克 FePO4 0.01克 琼脂 18.0克 陈海水 1000毫升 pH 7.6～7.8 （2）无菌采样瓶、灭菌移液管、灭菌培养皿，盛有90ml及 9mL灭菌蒸馏水的锥形瓶和试管。 9.4.1.3 方法和步骤 （1）采集水样。（2）吸取10 ml水样（河水、污水、游泳池水或港湾水等），注入盛有90ml无菌水或无菌海水的三角瓶中，混匀成10-1稀释液，在吸水样前，水样应彻底搅动均匀。（3）按10倍稀释法将水样稀释成10-2、10-3、10-4。（4）根据水样的洁净程度，污染严重者选取10-2、10-3、10-4稀释度；中等的选取10-1、10-2、10-3稀释度，每个稀释液分别注入两个培养皿，每皿 1ml。稀释度的选择是本试验精确度的关键，选择适宜者，平皿上菌落总数介于30—300个之间。（5）注入彻底融化，然后冷却到45℃的营养琼脂培养基（用于河水样）或2216E培养基（用于海水、港湾水样）约15ml，立即旋摇培养血，充分混匀，水平放置至固化。（6）接种河水的培养皿，倒置于37℃培养24小时。接种海水样，港湾水样的培养皿，应倒置后于18—20℃下培养到长出明显菌落（5天左右）止。 9.4.1.4 结果与分析 取同一稀释度的平板培养物，依菌落计算原则进行计算。（1）菌落计算原则平皿菌落的计算，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，防止遗漏，也可借助于菌落计数器计数。对长得相当接近，但不相触的菌落，应予以—一计数。对链状菌落，应当作为一个菌落来计算。平皿中若有较大片状菌落时则不宜采用，若片状菌落少于平皿的一半时，而另一半中菌落分布又均匀，则可将其菌落数的2倍作为全皿的数目。算出同一稀释度的平均菌数，供下一步计算时用。（2）计算方法①首先选择平均菌落数在30～300者进行计算。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即可用它作为平均值乘其稀释倍数（见表5－9的例1）。②若有两个稀释度的平均菌落数都在30—300之间，则应按两者的比值来决定。若其比例小于2，应报告两者的平均数；若大于2，则报告其中较小的数字（见表7-例2和例3）。③如果所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5－9例4）④若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5－9例5）。⑤如果全部稀释度的平均菌落数均不在30—300之间，则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5－9例6）。③菌落计数的报告，菌落在100以内时，按实有数报告；大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示（见表5－9的“报告方式”栏）。 表5－9 稀释度选择及菌落报告方式 例次 不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落数之比 菌落总数（个／ml）报告方式（个／ml） 10 -1 10 -2 10-3 1136016420-1640016000或1.6×104 22760295 461.63775038000或3.8×104 3289027160 2.22710027000或7×104 4无法计数4651513-513000510000或5.1×105 527 11 5 -270 270或2.7×102 6无法计数305 12- 30500 31000或3.1×104

[size=4] 我们对现今应用较为普遍的VITEK-AMS鉴定系统中报告“不能鉴定细菌”(UIO)菌株作了进一步分析，探讨其发生原因、处理方法，以期建立一套切实可行的仪器与手工方法相结合的细菌鉴定方法。[/size][size=4]　　[b]一、材料与方法[/b][/size][size=4]　　1. 仪器与试剂：VITEK-AMS 60型全自动细菌鉴定仪及其配套GNI、GPI、YBC试验卡（生物梅里埃公司产品)。[/size][size=4]　　2. 试验菌株：1 025株本院1999.10.21-2000.3.3临床标本分离的菌株进行了Vitek- AMS鉴定，其中应用GNI 卡631例、GPI卡334例、YBC卡60例。[/size][size=4]　　3.VITEK-AMS鉴定法：根据细菌表型特征，选择相应GNI+、GPI、YBC卡，严格按仪器操作说明进行，孵育后当检验地带网仪器报告结果为UIO时，挑取生长对照孔(GPI卡第1孔、GNI+卡第3孔、YBC卡第24孔)悬液于非选择性培养基上重新分离，观察是否纯培养，若是，分别按同法及以下两法鉴定。否则， 经纯培养后重新上机鉴定。[/size][size=4]　　4. 双歧检索鉴定法：根据Vitek全自动微生物分析系统技术资料提供的双歧检索表，依生化结果检索至属或种。[/size][size=4]　　5. 常规鉴定法：按照全国临床检验操作规程［1］进行，并经API系统(生物梅里埃公司) 复核鉴定至种。部分菌株鉴定依据文献［2］进行。 [/size][size=4]　　[b]二、结果[/b][/size][size=4]　　1. UIO发生机率：总共1025株细菌鉴定中，共出现UIO 44株，占4.3%。其中GPI卡334株，出现UIO16株，占4.8%；GNI+卡631株，出现UIO 24株，占3.8%；YBC卡60株，出现UIO4株，占6.7%。[/size][size=4]　　2.UIO发生原因：在44株出现UIO中，9株（0.9%)为待检细菌不纯，3株(0.3%)为浊度不合要求，2株(0.2%)为接种物孵育时间过长（超过48h），2株(0.2%)为超出试验卡鉴定范围（均为臭鼻克雷伯菌），1株(0.1%)为菌悬液不乳化（粘液型绿脓假单胞），其他如冲液时气泡过多，或其他原因不确定者27株（2.6%）。[/size][size=4]　　3.处理：（1）9株不纯菌株，经纯培养后，重新上机，均能成功鉴定。（2）35株纯培养但报告UIO菌株中，18株(1.8%)可通过双歧检索法获得结果，并与常规分类法结果完 全一致。3株（0.3%）浊度不合要求者经调整浊度后重新上机获得结果。 2株(0.2%)接种物超过48h菌株，经重新孵育后得以鉴定。1株(0.1%)为悬液不乳化菌株经|检验地带网|配制3个麦氏单位菌悬液，然后低速离心1～2 min(1 000r/min)，取上清液比浊并调节到所需的浓度后，得以鉴定。(3)余下11株(1.1%)菌中，仅2株(1株为大肠埃希菌，另1株为臭鼻克雷伯菌)不能从双歧检索表中查出结果，其他9株(主要为洋葱假单胞菌、琼氏不动杆菌、木糖产碱氧化杆菌等)，虽能从双歧检索表获得结果，但与常规鉴定法结果不相符合，或出现矛盾的生化结果，需增加试验项目，按常规鉴定方法及 API系统报告结果。[/size][size=4]　　[b]三、讨论[/b][/size][size=4]　　实验表明95.7%的临床分离菌株可通过VITEK-AMS正确鉴定，仅4.3%菌株无法一次性成功鉴定。细菌不纯是产生这部分菌株的主要原因（占近1/5），其他如待检菌菌龄、菌液浓度也是关系鉴定成败的关键。由于仪器本身原因（如对于罕见生物型、新种或不典型菌株无法鉴定）也不可忽视。正确处理这部分菌株，有重要的临床意义。实际应用自动化仪器时，必须挑取纯培养菌落，可提高鉴定率，对确认为纯培养而无法鉴定者，可通过传统分类法，参照双歧检索表能成功鉴定将近一半菌株，因此合理应用双歧检索表不失为一种较好的辅助方法。但仍有占总数1.1%菌株需用常规方法或其他方法如API系统重新鉴定。[/size][size=4]　　参考文献[/size][size=4]　　1，叶应妩，王毓三，主编. 全国临床检验操作规程. 第2版. 南京： 东南大学出版社,1997.5.[/size][size=4]　　2，Patrick R. Manual of clinical Microbiology (7th Edition). Washington DC: American Society for Microbiology, 1999.316-647. [/size]

据美国媒体8月12日报道，在印度、巴基斯坦等南亚国家出现的一种新型细菌变种基因有可能在全球蔓延，拥有这种基因的细菌乎对所有的抗生素都有耐药性。有报道称，这种变种基因目前已经传播到英国、美国、加拿大、澳大利亚、荷兰等国家。抗生素耐药性领域的医学专家将这种变种基因命名为NDM-1，最早出现在印度、巴基斯坦等南亚国家，后来有不少英美等国的游客前往这些南亚国家接受价格低廉的整形手术，使得这种基因得以传播。美国疾病控制和预防中心今年1月至6月间在美国发现3例这种病例，并建议医生们对在南亚接受过手术的病人特别加以关注。医学专家对NDM-1的出现感到“担忧”，担心它会在全球蔓延。不过也有医学专家持乐观态度。他们认为，尽管世界上存在多种对抗生素具有耐药性的细菌，但是其中并没有任何一种能够真正成为“超级细菌”和“食肉细菌”。纽约大学朗格尼医学中心负责人表示：“这些对抗生素具有耐药性的细菌无疑是带有危害性的，但NDM-1超级细菌比耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）更令人担忧吗？现在作出判断还为时过早。”MRSA是一种可以抵抗所有抗生素和药物的病菌，能够感染伤口和褥疮，引起各种感染，令免疫力弱的人死亡。MRSA呈多重耐药，是临床重点耐药性监测的多重耐药菌之一。===============================================这种超级细菌就是带有NDM-1的细菌，所谓NDM-1就是“新德里金属β内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase 1，简称NDM-1)”，这种酶存在于大肠杆菌等不同细菌DNA结构的一个线粒体上，并让这些细菌变得威力巨大，对几乎所有的抗生素都具备抵御能力。 去年，卡迪夫大学的研究者蒂莫西沃尔什首次在一名瑞典病人感染的大肠杆菌和肺炎杆菌中确认了这种酶的存在，并将之命名为NDM-1。[b]那我们怎么才能检测？假如大肠杆菌带有这种酶，怎么检测？用什么方法？用什么仪器？[/b]

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=18px]　　细菌检测仪工作原理，细菌检测仪的工作原理主要基于荧光素酶作用的ATP检测试剂，通过检测样品表面的ATP含量来判断细菌的数量。以下是细菌检测仪工作原理的详细解释：　　荧光素酶反应：细菌检测仪利用荧光素酶与ATP检测试剂反应，将样品表面的ATP转化为荧光素。这一过程中，荧光素酶起到催化作用，使得ATP与试剂中的荧光素结合。　　发光特性测定：转化后的荧光素在荧光素酶的催化下会发光，细菌检测仪通过测量这种发光的强度来判定样品表面的ATP含量。由于ATP是所有活细胞的基本能量单位，因此其含量可以间接反映细菌的数量。　　快速、准确测量：这种基于荧光素酶反应的测量方法非常快速且准确。一般来说，整个检测过程不超过30秒，使得细菌检测仪成为一种高效的工具，特别适用于需要快速检测细菌数量的场合。　　应用领域广泛：细菌检测仪广泛应用于食品、医药卫生、日化、造纸、工业水处理等多个行业。在食品行业中，它常被用于检测食品表面的微生物污染情况，以确保食品安全。　　综上所述，细菌检测仪通过荧光素酶反应的ATP检测技术，能够快速、准确地测量样品表面的细菌数量，为保障公共卫生和食品安全提供了重要的技术支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406250932573396_8825_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

[size=16px][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b]ATP荧光检测仪可以检测什么细菌[/color][/font]ATP荧光检测仪是一种专门用于检测微生物代谢活性的仪器，其原理是基于细菌在代谢过程中会产生一种荧光物质——ATP。当细菌接触到荧光染料时，ATP会被荧光染料标记，随后被检测器检测到，从而确定细菌的数量和代谢活性。具体来说，ATP荧光检测仪可以快速检测各种食品样品（包括肉类、海鲜、蔬菜、水果等）中的微生物数量，如葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌等。此外，它还可以用于检测土壤、水体和生物体内的细菌、真菌、原生动物和藻类等微生物的数量和代谢活性。除了食品安全领域，ATP荧光检测仪还广泛应用于医药卫生、环境监测等领域。例如，在医院内部环境的卫生检测中，使用ATP荧光微生物检测仪可以对手术室、病房、器械等进行快速检测，及时发现和消除卫生隐患，保护患者的健康。总之，ATP荧光检测仪是一种功能强大的微生物检测工具，其应用范围广泛，对于确保食品安全、环境卫生和医疗安全等方面具有重要意义。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403151353381095_7818_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

本文是USP24细菌内毒素检查法（BACTERLAL ENDOTOXINS TEST）的译文，但目前执行的标准是USP24版第二增补本（USP—NF19 Second Supplement）的细菌内毒素检查法，读者可对照学习，从中可看出USP24细菌内毒素检查的不足之处。本文将介绍用鲎试剂检测样品内或样品上存在的细菌内毒素浓度的方法。鲎试剂（Limulus Amebocyte,LAL）来自鲎的循环细胞，经水提取而行，制备和检验后，用于凝固法。反应的终点是将供检样品稀释后，与平行稀释的参考内毒素标准进行直接比较得到的。测得的内毒素含量用规定的内毒素单位表示。鲎试剂也是用浊度法或显色法来读取数据的，这些试齐只要能满足这些选择方法的要求，就可以使用。在做试验时，需要先做出一条标准曲线，并用该曲线计算供检样品的内毒素含量，包括样品和对照液加鲎试剂后的培育时间和在分光光度计上读取光密度时使用的波长等操作，都应该事先规定好。如果是终点浊度法，则到达培育期后，应立刻读取读数。而动力学检测（凶手浊度法和显色法），光密度的测定是贯穿于整个反应期间，而用于计算结果的百分数就是从这些读数中计算出来的。在用终点法的显色法检测时，在到达事先规定的反应时间后，添加停止酶反应的试剂使反应停止后，再读取数据。1、参考内毒素标准与对照内毒素标准参考内毒素标准（Reference standard endotoxin,RSE）是美国药典（USP）的内毒素参考标准，其效价为每瓶10 000个USP内毒素单位（EU）。每瓶参考内毒素标准加5ml鲎试剂用水（LAL Reagent Watet），用旋转搅拌器间歇搅拌30min使其溶解，制成原液，用这一原液制作合适的系列稀释。原液应保存于冰箱中，用于以后的稀释，但保存时间不得超过14d。用前，用旋转搅拌器强力搅拌至少3min，每一步稀释，至少搅拌30s，然后才能用它稀释下一步。经稀释的参考内毒素不得贮存待以后使用，因为吸附作用会使其失去活性。对照内毒素标准（Contuol standard endotoxin,CSE）是以参考内毒素标准为标准另行制备的。一批新的对照内毒素标准在使用前应进行检定。检定时使用的鲎试剂应为试验中使用的同批鲎试剂。参考内毒素标准对照内毒素标准进行检定时，可使用鲎试剂的凝固法，按“试验操作”进行。每批对照内毒素标准，至少取1瓶与1瓶参考内毒素标准进行对比。参考内毒素标准的每个稀释度作4管。每瓶或每个样品的对照内毒素标准的每个稀释度也都要4管。参考内毒素标准终点的对数Log10的平均值和对照内毒素标准终点的对数Log10平均值之间的差值的反对数等于对照内毒素标准效价的标定值。可根据情况，将其变换成每ng干燥制剂的单位数或每瓶所含的单位数。适宜的对照内毒素标准的效价应不小于2EU/ng也不大于50EU/ng。2、试验的准备鲎试剂的灵敏度应经过确证。试验中使用的所有容器和用具，都必须在≥250℃的烤箱中，用足够的时间进行加热处理、破坏这些用具表面上可能存在的外源性内毒素。内毒素试验的结果是否可靠，还必须从试验使用的各种用具、溶液、洗涤用品中取样或提取样品，并用适当的方法证明它们对反应没有抑制或拉强或其它干扰作用。可按下述方法进行抑制试验或增强试验。试验中应设置阴性对照。如果鲎试剂的原材料、生产方法或处方发生改变时都要重新进行试验。3、鲎试剂灵敏度的确认试验为了确认鲎试剂标签上的灵敏度，每批至少取1瓶样品进行检定。参考内毒素标准（或对照内毒素标准）作2倍系列稀释，稀释成2.0λ,1.0λ,0.5λ和0.25λ。其中λ是鲎试剂标签上的灵敏度EU/ml。上述4个稀释度和阴性对照都要重复做4管。所得结果的几何平均值的对数应大于或等于0.5λ，小于或等于2.0λ。每一批新的鲎试剂，使用前都必须作标签灵敏度的确认试验。4、抑制试验和增强试验用不超过地大有效稀释而检测不出内毒素的样品，不加或内毒素，使最后浓度等于2.0λ,1.0λ,0.5λ和0.25λ。按照试验操作（Test Procedure）项的规定用标准内毒素进行检定。不加和加内毒素的样品管至少做4管。同时，用水稀释上述相同浓度的内毒素和阴性对照各两管，做平行两管试验。按照计算和判定项的方法，计算样品终点内毒素浓度的几何平均值。如果所得结果大于或等于0.5λ，小于或等于2.0λ,则该样品适合作细菌内毒素检查。用中和、灭活或除去干扰物质方法或用不超过最大有效稀释度稀释检品后，可重做抑制试验和增强试验。如果用不超过最大有效稀释法，对已知加量的内毒素可以克服抑制和增强作用。则样品可以经过稀释后，再作内毒素检查。如果在试验条件下，对未处理的样品检查出有内源性内毒素。则该样品不适合用于作抑制或拉强试验。不过，这种样品可用超过滤法将存在的内毒素去掉或做适当稀释、使之适合于作抑制或增强试验。稀释未处理样品（像开瓶溶解或在使用前注射前稀释那样），稀释到检验不到内毒素但不超过最大有效稀释倍数。再用这些已稀释的样品重作抑制试验或增强试验。5、最大有效稀释度（MVD） 最大有效稀释度是指在使用时将药物溶解或稀释成恰好用于注射或其它非经口途径使用的浓度。有时为了避免给药量的体积（EU/ml）计算。用试剂标签上的灵敏度（EU/ml）λ除限定浓度，就可以得到MVD因子。如果某一试剂的限量浓度是按重量或按药品的活性单位

微生物细菌检测仪是一种专门用于检测生物体、环境水样、食品、化妆品和医药产品表面ATP(三磷酸腺苷)含量的装置。ATP是所有活细胞和一些非细胞生物(如病毒、霉菌和酵母菌等)所含的核苷酸之一，因此微生物细菌检测仪可以通过检测表面ATP含量来检测这些生物的存在。　　微生物细菌检测仪的工作原理是通过荧光素酶作用的ATP检测试剂将样品表面的ATP转化为荧光素，然后利用荧光素酶催化的发光特性来测定样品表面的ATP含量。这种测量方法快速、准确、简单，一般检测时间不超过30秒。　　微生物细菌检测仪的作用和用途非常广泛，它可以用于以下领域：　　食品生产和加工：检测食品生产和加工过程中的卫生情况，确保食品质量和安全。　　医疗设备和药品检测：用于检测医疗设备、药品和患者样本中的微生物，确保患者的安全和健康。　　环境监测：检测水源和空气中的微生物污染，评估环境质量。　　化妆品和医药产品检测：确保这些产品的生产和储存过程中的卫生条件符合标准。　　此外，微生物细菌检测仪的使用方法通常包括打开机器、放入试子、采集样品、挤压拭子头、将拭子插入仪器中检测等步骤。在操作过程中，需要遵循相关操作规范，以确保检测结果的准确性和可靠性。　　总之，微生物细菌检测仪是一种重要的检测工具，它可以帮助我们快速、准确地检测生物体、环境水样、食品、化妆品和医药产品表面的微生物含量，为食品安全、医疗、环境监测等领域提供有力的技术支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405091048555937_3652_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

请问一下生活饮用水大肠埃希氏细菌检测紫外灯366波长要不要检定