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恒温扩增荧光检测

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恒温扩增荧光检测相关的资讯

  • 一个半小时就能检测6种病毒 恒温扩增技术大有可期
    p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " span style=" text-indent: 2em " 在近日召开的国务院联防联控机制新闻发布会上,中国工程院院士、清华大学医学院讲席教授程京介绍了一款基于恒温扩增芯片技术、一次能对6种呼吸道病毒进行快速检测的试剂盒。 /span span style=" text-indent: 2em " & nbsp /span /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 500px height: 585px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/2184a4fc-0506-4778-9ee7-271a66c821bc.jpg" title=" 程京院士.png" alt=" 程京院士.png" width=" 500" height=" 585" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 这款新型检测试剂盒具有2大优点:能对对6种呼吸道常见病毒进行一并检测;检测速度快,在1.5个小时就能完成所有检测。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 397px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/10e81520-0028-44c9-9891-eedb826f1a53.jpg" title=" 微流控芯片.png" alt=" 微流控芯片.png" width=" 600" height=" 397" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 临床应用方面,这款新型检测试剂可以非常好地帮助临床医务人员做出鉴别诊断,迅速区分哪些人是新冠病毒感染者,哪些是其他病毒感染者,把合并感染、交叉感染的情况加以区分& nbsp 。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 截至目前,国家药品监督管理局共应急批准17个新冠病毒检测产品,其中新冠病毒核酸检测试剂11个,抗体检测试剂6个。在核酸检测产品中,9款核酸检测试剂盒均基于荧光定量PCR法。而程京院士团队合作研发的这款新冠病毒检测试剂盒为名单中唯一上榜的基于恒温扩增芯片法的试剂盒产品。 span style=" text-indent: 2em " & nbsp /span /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 304px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/4e92bcbf-87d2-4dd1-888b-e00656870e92.jpg" title=" 国家药监局批准可以临床使用的新冠病毒检测试剂产品.png" alt=" 国家药监局批准可以临床使用的新冠病毒检测试剂产品.png" width=" 600" height=" 304" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px text-align: center " 国家药监局批准可以临床使用的新冠病毒检测试剂产品 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 荧光定量PCR技术想必大家并不陌生,那什么是恒温扩增技术?和荧光定量PCR相比又有哪些优势? /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 大家知道,核酸扩增是核酸分子诊断的关键技术。 strong 根据核酸扩增反应中温度变化要求,可以将核酸扩增技术分为两大类:一类是PCR核酸扩增技术,另一类是核酸恒温扩增技术 /strong 。PCR技术是指通过控制温度的变化来实现DNA扩增的三个步骤:模板变性(如95℃)-引物杂交(如58℃)-DNA合成(如72℃)。这种温度变化的循环重复(如重复35次)过程通常由精密而复杂的仪器(PCR仪)来控制。核酸恒温扩增技术(Nucleic Acid Isothermal Amplification,NAIA)则是扩增反应的全过程均在同一温度下进行,不须像PCR反应那样需要经历几十个温度变化的循环过程。这一特点使得它们对扩增所需仪器的要求大大简化,反应时间大大缩短,因而具有巨大的应用价值,成为分子诊断行业发展中的热点。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 恒温扩增技术是继PCR技术后发展起来的一门新型的体外核酸扩增技术。 strong 目前主要的恒温扩增技术有:滚环核酸扩增、环介导等温扩增、链替代扩增、依赖核酸序列扩增和解链酶扩增。 /strong /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " strong 滚环核酸扩增 /strong (rolling circleamolification, RCA)是通过借鉴病原生物体滚环复制DNA 的方式而提出的,可分为线性扩增与指数扩增两种形式。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " strong 环介导等温扩增 /strong (loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。环介导等温扩增的六个区域设计四条引物,利用链置换型DNA聚合酶在恒温条件下进行扩增反应,可在15-60分钟内实现109-1010倍的扩增,反应能产生大量的扩增产物即焦磷酸镁白色沉淀,可以通过肉眼观察白色沉淀的有无来判断靶基因是否存在. /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " strong 链替代扩增 /strong (strand displacement amplification,SDA),靶DNA序列经加热变性后,引物与其互补链DNA单链退火,在聚合酶作用下产生带HincⅡ识别位点的目的DNA序列,该双链DNA进入SDA循环。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " strong 依赖核酸序列扩增 /strong (Nucleicacidsequence-basedamplification,NASBA),是一种扩增RNA的新技术,是由一对引物引导的、连续均一的、体外特异核苷酸序列等温扩增的酶促反应过程。反应在42℃进行,可以在2h左右将模板RNA扩增约109倍,不需特殊的仪器。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " strong 解链酶扩增( /strong Helicase-dependent amplification,HDA)是解旋酶解开双链DNA,单链DNA结合蛋白与单链结合,使模板处于单链状态并保护其完整性,引物与模板结合,然后在DNA 聚合酶作用下扩增。生成的dsDNA作为底物进入下一轮扩增。恒温扩增温度取决于所用的酶,可以60~65℃,也可以是37℃。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px " 诊断检测方法的建立,最终目的均是应用到实际检测中去。等温扩增技术无需复杂的仪器,不需要热变性与温度循环,同时具有简便、快速、灵敏度高、特异性强等优点,因此被寄予厚望。微流控芯片技术通过与等温扩增技术相结合,仅在一个芯片上即可完成核酸提取、扩增和检测等过程,具有快速、简便、结果直观和可进行高通量筛选等优点。随着相应的便携式装置的开发及费用的降低,等温扩增-微流控芯片技术必将成为下一代基因快速检测的发展方向。 /p
  • 《食品中沙门氏菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法》等五项CAIA标准发布
    p & nbsp & nbsp 来自中国分析测试协会的消息:2017年4月17日,中国分析测试协会标准化委员会“筛检技术标准化工作组”组织有关专家对中国科学院上海生命科学院营养科学研究所申报的四项CAIA标准,山东荣成出入境检验检疫局综合技术服务中心等三家单位共同申报的一项CAIA标准进行了预审。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp 五项标准的起草人根据工作组专家的意见,修改了标准草案和编制说明。CAIA标委会秘书组将修改后的标准草案报批稿和标准草案编制说明用电子邮件发给中国分析测试协会标准化委员会的每一个委员进行审议。规定的审议时间内,委员们在同意五项标准草案的前提下,对标准草案和编制说明提出了修改意见。五项标准草案的起草人根据委员们提出的修改意见,对标准的报批稿进行了修改,形成了五项“CAIA标准”的正式文件,报中国分析测试协会标准化委员会主任委员张玉奎院士审批。经张玉奎院士审查同意,现将这五项CAIA标准正式发布(发布的五项标准附后)。 /p p br/ /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/6341c16a-dbfc-406f-9808-8278797b84bf.pdf" 食品中沙门氏菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法.pdf /a /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/f135c3a7-2018-426a-ae82-cf4cb4b10877.pdf" 食品金黄色葡萄球菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法.pdf /a /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/f19ff5eb-a321-45b6-9523-0457c32bf76d.pdf" 食品单核细胞增生李斯特氏菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法.pdf /a /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/66b64ad7-7385-4fc8-ab63-0f721cc54451.pdf" 食品副溶血性弧菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法.pdf /a /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/4bbda0d5-f741-49de-9215-5defa486a5fd.pdf" 清酒 & nbsp 铅砷的测定 电感耦合等离子体质谱法.pdf /a /p
  • 新一代恒温扩增|先达基因自主研发New ERA技术,助推现场化核酸即时检测
    随着全球新冠疫情爆发,原本只能在专业实验室开展的核酸检测逐步为大众所认知,而对于疫情控制所需要现场快速检测紧迫的需求,也驱动着全球诊断企业加速技术的革新。近两年越来越多的体外诊断企业开始探索居家检测,让传染病检测、癌症早筛等体外诊断项目逐步落地至家庭场景。体外诊断项目如何实现小型化、便捷化、家庭化,如何跳过样本流转和实验室检测环节,居家完成整个检验流程,一直是国内外相关体外诊断企业研发的重点。2020年底,随着Cue Health公司的家用新冠分子POCT检测产品的FDA获批及应用,将分子POCT检测从实验室带入了全程家庭化的全新场景。New ERA技术助推现场化核酸即时检测在此背景下,苏州先达基因科技有限公司将自主开发的新一代核酸检测技术(New ERA),配套微型核酸荧光检测仪(基因镜 GENEYE®),建立了先达基因New ERA核酸检测一体化解决方案,革命性地实现了全程10分钟现场化检测,极大提升了现有检测诊断技术水平。New ERA技术产品与基因镜(GENEYE®) “10分钟一体化核酸检测解决方案”流程图凭借该方案的技术优势,未来有望广泛用于医院床旁、基层诊所、野外、学校、机场、家庭等检测场景,甚至可应用于肿瘤、老年痴呆等早筛领域。基因镜搭配有独立APP及微信小程序,在手机上便可查看相应检测结果,满足了对便捷、私密的检测需求。基因镜(GENEYE®)图底层技术创新是打造行业差异化竞争力的关键PCR技术凭借着优异的敏感度和特异性,被认为是现阶段用于病原微生物检测等项目的理想方法。但PCR技术需要精密昂贵的仪器设备、专业的技术人员,且对实验室环境及标本处理要求较高,检测时限长达两个小时甚至更久,难以实现快速检测的要求。近年来,快速、准确、便捷地进行核酸检测成为行业的迫切需求。先达基因CEO于继彬在PCR扩增技术和基因工程领域有20余年经验,有着深厚的技术和管理积淀,对行业痛点和发展趋势有着更为切身的体会和敏锐的感知。于继彬本人在读研究生期间便开始了PCR法合成基因的尝试,并早在2002年工作期间,在国内率先建立了以PCR扩增法为基础的基因合成工业化流程。2005年加入南京金斯瑞,任职副总裁,负责公司生产与研发业务,成为公司核心管理成员之一。曾领导包括基因合成、蛋白工程、抗体工程、新药筛选、引物合成、基因测序等业务板块。任职金斯瑞高管的十年间,公司实现从初创到成为全球最大的PCR实验基地与基因合成中心的跨越。2017年,于继彬借POCT行业萌发的契机创立了先达基因,旨在创新核酸快速检测技术。并组建了富有工业界管理经验的分子生物学专家、分子诊断用酶工艺专家、生物制药工程专家以及医疗器械营销专家的核心管理团队。利用计算机分子设计(Molecular Design)、定向进化(Direct Evolution)、亲和力成熟(Affinity Maturation)等制药领域高端技术对PCR和生物体遗传物质自身扩增复制所必需的聚合酶、核酸内切酶、单链结合蛋白等进行了多次改造筛选,先达基因开发了新一代恒温扩增(New ERA)技术,在恒定温度条件下,5-8分钟即可将DNA/RNA扩增数亿倍,配合独特的引物与探针自环化结构,使全程检测仅需10分钟左右即可完成。灵敏度特异性可与常规荧光定量PCR媲美。同时,先达基因团队还设计了超大的检测反应体系,虽然成本有所增加,但对于用户操作便利性带来极大优势,同时也能容纳更多的样本。这也使得检测装置可以实现简易化的关键之一。一切从用户角度出发,快捷流畅的用户体验是先达基因产品设计的基本逻辑。New ERA技术开发路线图
  • 进入食品安全监测领域的微流控恒温扩增仪
    [仪器信息网讯] 2014年5月7日-5月8日,CFAS 2014第三届中国食品与农产品质量安全检测技术国际论坛暨展览会于北京国家会议中心召开。本次会议为期两天,邀请学界与业界的院士、专家、学者、企业家,展会吸引了1500余名业内人士参加,100余家企业参展并展示自己的成果。在本次大会举办的进一步推动和促进国内外食品与农产品质量安全检测技术会上,北京博奥晶典生物有限公司(以下简称:博奥晶典)的成后龙全国产品经理对此次展出的微流控恒温扩增平台在论坛上作了技术演讲,向大家介绍这套平台在食品安全快速检测领域及农产品快速检测应用状况,为更好地了解其技术原理及优势,仪器信息网编辑在现场对博奥晶典的成后龙经理进行采访。 北京博奥晶典生物有限公司成后龙经理   仪器信息网:贵公司这套快速检测平台主要采用什么技术? 成后龙经理:这套平台结合了两个国际先进技术,一个是恒温扩增,一个是微流控芯片技术。恒温扩增技术,不需要传统扩增技术的温度变化,所有反应都在50-60度下完成。微流控芯片技术,是博奥的专利技术,而博奥也是国内唯一具有国际先进微加工工艺的公司。这种微流控碟式芯片具有多指标多样品并行检测、样品及试剂用量少的特点。不仅可以用于食品安全检测,农产品检测还可以应用在医学诊断等方面。   晶芯® RTisochipTM-A恒温扩增微流控芯片核酸分析仪及其微流控蝶式芯片 仪器信息网:此款微流控恒温扩增仪是否专门定位食品安全监测领域?相比市场中其他仪器有什么优势?    成后龙经理:这个平台能够很好的满足食品安全快速检测的需要,是一个基于检测微生物的平台,同样也应用在临检,如呼吸道病原微生物检测,以及农业、奶制品、水质等病原微生物的检测。    恒温扩增和微流控芯片这两个顶尖技术相结合,博奥是国内第一家也是唯一一家。大家都知道,传统方法检测食源性微生物呢,一次只能检一个指标,而微流控碟式芯片上的24个检测通道,可以进行多指标多样品的并行检测。通道之间完全隔离,不接触空气,避免了交叉污染。另外,从实验成本控制角度来讲,碟式芯片上每个样品反应量仅需1.4&mu L,相应的试剂用量也减少到了几微升,更符合目前快速检测领域的需求。   恒温扩增技术在食品安全检测方面的实际应用主要都是用来定性,其多个引物的设计能带来更高的特异性,反应快, 实验操作也非常简单,因此很适合快速检测。并且微流控芯片的结构设计有液封的效果,反应液的挥发并不严重,因此具有各检测孔反应均一、结果可控的优势。关于这两种技术的优劣势比较,行业内人士也都比较了解,我这里就不多作介绍,我们的技术创新主要是微流控芯片, 或者说微流控与恒温扩增技术的结合。   仪器信息网:引物是否存在变性的可能?在检测中是否有质控? 成后龙经理:在检测中,我们有设定阳性和阴性对照,由于所有反应池里引物的包埋都是同时以同样的方式进行的,因此我们认为,如果阳性对照可以得到阳性结果,那么其他的引物也是能正常工作的。当然,也可以针对每一个反应池设置阳性对照,但根据我们的大量实验验证结果,这种设置不是必要的。 仪器信息网:在食品检测仪器这个大环境中,你们对恒温扩增仪如何定位? 成后龙经理:如今不管是国家还是我们百姓对食品安全这个问题越来越重视,信息来源也越来越多。食品检测仪器的重要性和多样新就体现出来了。我们博奥晶典的恒温扩增仪可以说是拥有与众不同的技术。微流控芯片可以一次性检测多个样本多个指标。恒温扩增,不需要温度变化。整个检测反应时间最快20分钟就可以出来。所以我们定位在多指标多样本的快速检测,定性分析和半定量分析上。   关于北京博奥晶典生物技术有限公司:    北京博奥晶典生物技术有限公司是依托于博奥生物集团有限公司/生物芯片北京国家工程研究中心成立的一家全资子公司,整合了旗下系统化生物芯片相关的仪器 平台、技术力量、服务团队等优质资源,致力于为生命科学领域的实验室建设提供创新、完善的整体解决方案。公司主营方向:从事以微流控技术为核心的生物芯片 相关仪器平台的搭建及服务,提供领先创新性的技术应用思路、实验室建设及运营、技术支持及培训的整体方案,涵盖了生命科学研究、生物(含食品)安全、临床 诊断等领域。
  • 芯片式恒温扩增核酸检测技术|苏州医工所获授全国科技系统抗疫先进集体
    近期,科技部印发了《关于表彰全国科技系统抗击新冠肺炎疫情先进集体和先进个人的决定》,授予全国163个集体“全国科技系统抗击新冠肺炎疫情先进集体”称号,314人“全国科技系统抗击新冠肺炎疫情先进个人”称号。中国科学院苏州生物医学工程技术研究所生物医学检验技术重点实验室(以下简称苏州医工所医学检验室)被授予先进集体称号。苏州医工所医学检验室在其高灵敏传感器及分子诊断核心技术基础上,开展相关技术攻关,研制出基于芯片式恒温扩增技术(LAMP)核酸即时检验(POCT)仪器。这款手持式核酸即时检验仪能够在芯片封闭的通道里迅速提取出冠状病毒核糖核酸(RNA)标的物,15分钟便能出检测结果,成本低,适用于急诊、ICU、救护车、社区、家庭、火车站等环境下快速识别感染人群,产品交付给一线检测机构和国际合作医院。针对新冠核酸检测工作样本量大、工作繁琐、接触易感染等问题,苏州医工所团队结合海关、口岸、“应检尽检”等场景,开展“超高通量全自动核酸检测系统”研制工作。该系统可以实现从“核酸样品管”至“检验报告”全流程、全自动化、生物安全型检测,单个小时内完成1000个样本的超高通量检测,超过国外相关公司产品指标。在团队的不懈努力下,各单元技术模块均打磨成熟,他们研发出的全自动开盖分杯、全自动核酸提取(96样本、16样本)以及6色qPCR检测仪等系列仪器真正实现了“分可独立作战,聚可联合攻关”。目前,该项目正申报医疗器械注册证进行产业化,为疫情防控提供创新技术支撑,助力苏州打赢疫情防控阻击战。
  • 博奥晶典推出恒温扩增微流控芯片核酸分析仪
    [仪器信息网讯] 2014年3月19日,CBIFS第七届中国北京国际食品安全技术论坛于北京国家会议中心召开。本次论坛为期两天,共邀请到了60余位业内专家就食品安全的相关话题进行深入的探讨,展会吸引了700余名业内人士参加,40余家企业参展并展示自己的成果。在本次大会举办的食品安全快速检测专题论坛上,北京博奥晶典生物有限公司(以下简称:博奥晶典)的张岩博士对此次展出的微流控恒温扩增平台在论坛上作了技术演讲,向大家介绍这套平台在食品安全快速检测领域应用状况,为更好地了解其技术原理及优势,仪器信息网编辑在现场对博奥晶典的张岩博士进行采访。 北京博奥晶典生物有限公司张岩博士   仪器信息网:贵公司这套快速检测平台主要采用什么技术?   张岩博士:恒 温扩增技术以及微流控芯片技术。博奥是国内唯一具备国际先进的微加工生产工艺的公司,微流控碟式芯片是博奥的专利技术,恒温扩增仪是我们第一款应用微流控芯片技术的扩增产品,微流控碟式芯片具有多指标并行检测、样品及试剂用量少的特点。博奥采用恒温扩增技术,因为恒温扩增反应不需要90度以上的高温变性过程,只是在50-60度之间反应,并且微流控芯片的结构设计有液封的效果,反应液的挥发并不严重,因此具有各检测孔反应均一、结果可控的优势。   晶芯® RTisochipTM-A恒温扩增微流控芯片核酸分析仪及其微流控蝶式芯片   仪器信息网:此款微流控恒温扩增仪是否专门定位食品安全监测领域?相对传统实时荧光定量PCR技术,微流控恒温扩增仪在食品安全检测领域有何应用优势?   张岩博士:这个平台能够很好的满足食品安全快速检测的需要,是一个基于检测微生物的平台,同样也应用在临检,如呼吸道病原微生物检测,以及农业、奶制品、水质等病原微生物的检测。    大家都知道,传统方法检测食源性微生物呢,一次只能检一个指标,而微流控碟式芯片上的24个检测通道,可以进行多指标的并行检测。并且通道之间完全隔离,不接触空气,因此避免了交叉污染。另外,从实验成本控制角度来讲,碟式芯片上每个样品反应量仅需1.4&mu L,相应的试剂用量也减少到了几微升,更符合目前快速检测领域的需求。   恒温扩增技术在食品安全检测方面的实际应用主要都是用来定性,其多个引物的设计能带来更高的特异性,反应快, 实验操作也非常简单,因此很适合快速检测。关于这两种技术的优劣势比较,行业内人士也都比较了解,我这里就不多作介绍,我们的技术创新主要是微流控芯片, 或者说微流控与恒温扩增技术的结合。   仪器信息网:碟式芯片不同通道的多个引物之间是否会产生干扰?   张岩博士:每个反应池是独立的,微流控碟式芯片的设计能有效的避免交叉污染,在不同指标之间不存在干扰。对于同一个指标来说,不是多重PCR,而是针对一个序列的检测,当然在引物的设计过程中,我们必须要考察的就是待测序列的菌种特异性。   仪器信息网:引物是否存在变性的可能?在检测中是否有质控?   张岩博士:在检测中,我们有设定阳性和阴性对照,由于所有反应池里引物的包埋都是同时以同样的方式进行的,因此我们认为,如果阳性对照可以得到阳性结果,那么其他的引物也是能正常工作的。当然,也可以针对每一个反应池设置阳性对照,但根据我们的大量实验验证结果,这种设置不是必要的。   关于北京博奥晶典生物技术有限公司:    北京博奥晶典生物技术有限公司是依托于博奥生物集团有限公司/生物芯片北京国家工程研究中心成立的一家全资子公司,整合了旗下系统化生物芯片相关的仪器 平台、技术力量、服务团队等优质资源,致力于为生命科学领域的实验室建设提供创新、完善的整体解决方案。公司主营方向:从事以微流控技术为核心的生物芯片 相关仪器平台的搭建及服务,提供领先创新性的技术应用思路、实验室建设及运营、技术支持及培训的整体方案,涵盖了生命科学研究、生物(含食品)安全、临床 诊断等领域。   (撰稿人:傅晔)
  • 等温扩增,下一个新冠检测“金标准”?获证仪器大盘点
    2022年,新冠病毒“卷土重来”,奥密克戎变异株侵袭国内多地,上海、吉林等地疫情尤为严重。奥密克戎变异株具有传播快、隐匿性强的特点,因而近期本土疫情点多、面广、频发。为控制疫情,提高疫情防控效率,居家新冠核酸快速检测自检已经成为了不可逆的趋势。今年,国家发布《区域新型冠状病毒核酸检测(新冠核酸快速检测)组织实施指南(第三版)》明确推出了“抗原筛查,核酸诊断”的监测模式。目前, 传统的聚合酶链式反应(PCR技术)是新冠病毒核酸检测的“金标准”,最主要用到的技术为荧光定量PCR技术,该方法的优势为灵敏度高、特异性强、稳定性好。但是由于PCR方法核酸检测集中采样接触易感染,需配套洁净实验室,工作繁琐且获取结果时间长,难以实现对病原的现场快速检测。新冠病毒抗原检测通过抗原和抗体结合反应在试纸条上检测,方便快检,通常30分钟内可出结果,能够实现现场快速检测。但抗原检测灵敏度低,易出现假阳性,无法代替核酸检测作为诊断标准。因此,在“抗原筛查,核酸诊断”的现行新冠检测方案之外,是否能找到一种既可靠、又快速的技术方法,以适配除“集采”和“居家自测”以外更多的现场检测场景,如社区门诊、发热门诊、海关等?等温扩增可能是最佳答案。核酸等温扩增技术是指在某一恒定温度、由特定酶作用完成靶标核酸扩增和相关信号检测的技术。相比于PCR技术,等温扩增技术无需热循环,能快速达到实验所需的温度,基于该技术开发的分子诊断系统具有操作简便、检测快速高效、仪器易小型化和易普及等多重优点。经过十多年的发展,目前已有多种等温扩增技术用于分子诊断领域,包括同时扩增和检测(SAT)、重组酶辅助扩增(RAA)、交叉引物放大(CPA)和LAMP离心盘微流控芯片(LAMP-chip)等。基于等温扩增技术的新冠核酸快速检测,将大大提升新冠核酸现场快速检测效率,是对现行新冠检测方案很好的补充。本文对我国用于新冠病毒检测的恒温扩增快检技术和产品进行梳理盘点,以飨读者。目前,已经有多款基于恒温扩增技术的新冠病毒检测产品上市。1、 上海速创全自动恒温核酸扩增分析仪全自动恒温核酸扩增分析仪MA3000(国械注准20213220473)上海速创诊断产品有限公司推出的全自动恒温核酸扩增分析仪MA3000,该产品是一款基于微流控生物芯片技术打造的集核酸提取、纯化、扩增、分析、报告于一体的全自动核酸检测平台。与公司的微流控生物芯片试剂相结合,可以实现多样本、多靶点的微生物病原体DNA/RNA检测。检测通量可达96样本/小时,检测时间在30-45分钟之间,强阳性样本最快可以15分钟出结果(5分钟核酸提取纯化,10分钟扩增出结果)。2、成都博奥晶芯恒温扩增微流控芯片核酸分析仪晶芯® RTisochip™ -A 恒温扩增微流控芯片核酸分析仪(国械注准 20173401354) 恒温扩增微流控芯片核酸分析仪(型号:RTisochipTM-A)及配套碟式芯片是博奥研发的快速检测微生物核酸的新平台,博奥将微流控技术与恒温扩增技术结合,可提供 1×24、2×11、3×8三种不同型号的碟式芯片。 博奥同时自主研发和生产了呼吸道病原菌核酸检测试剂盒,与恒温扩增微流控芯片核酸分析仪一起通过国家药品监督管理局的创新审批,并获得三类医疗器械注册证。 性能指标3、上海仁度AutoSAT全自动核酸检测分析系统AutoSAT全自动核酸检测分析系统(国械注准20193220245)原理:采用SAT—RNA实时荧光恒温扩增检测技术,靶标RNA在RT酶作用下逆转录合成一条带T7启动子的双链DNA,T7 RNA聚合酶以这条双链DNA为模板进行转录,每个cDNA分子可以转录出100~1000个拷贝的RNA,合成出的RNA与分子信标结合,发出荧光,可以被荧光检测仪检测到。与此同时,新合成的RNA继续在RT酶和T7 RNA聚合酶的作用下循环逆转录和转录的过程。如此往复,以达到高效扩增的目的。检测通量:90分钟报告第一个样本结果,之后平均2分钟报告一个结果,8小时可检测200样本,24小时可检测500-700个样本;样本容量:可一次性放置80个样本并实现连续上样。4、上海伯杰一体化核酸快速检测系统BG-NOVA-X8一体化核酸快速检测系统(国械注准20213220715)伯杰医疗自主研发的BG-Nova-X8,集成CRISPR技术、磁珠提取、高精度机械臂,42℃恒温扩增检测,快速完成扩增反应,40分钟即可全自动出结果,2021年公司新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(恒温CRISPR法)获批上市,国械注准20213400714。5、长光辰英Home Lab便携式恒温核酸扩增分析仪Home Lab便携式恒温核酸扩增分析仪长光辰英自主研发的Home Lab便携式恒温核酸扩增分析仪,基于光信号即时判读技术与环介导等温扩增技术(LAMP)结合,自动判读核酸检测结果。根据产品介绍,Home Lab分析仪搭配新冠核酸快速检测试剂盒(环介导等温扩增法),组成系统化快速检测方案,通过鼻拭子取样,12-30分钟内可完成4个样品的核酸检测,在感染早期即可进行病毒检测。目前,Home Lab分析仪已实现量产化生产,并于2021年末顺利通过了欧盟CE医疗许可认证。6、江苏奇天RAA快检平台系列仪器F1628 恒温核酸扩增分析仪原理:重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase Aided Amplification)是一种全球领先的分子检测技术,简称RAA技术,该技术利用重组酶、单链结合蛋白、DNA聚合酶在等温(37℃)条件下进行核酸扩增,结合荧光探针实现即时检测,是一种精准、方便、快速的核酸检测技术,实现5-15分钟完成检测输出结果,灵敏度高达到1 拷贝/测试。2020年1月,奇天基因与中国疾病预防控制中心联合研制的新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸等温扩增快速检测试剂盒, 实现了8-15分钟快速检测出结果。2021年,江苏奇天新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒(荧光RT-RAA法)获批上市,国械注准20213400656。7、杭州尤思达即时分子诊断系统新型冠状病毒(2019-nCoV)即时分子诊断系统系统基于交叉引物放大(CPA)原理,检测全流程时长约80分钟,通量为2个样本。今年以来,有更多等温扩增核酸检测仪研发成果被报道。据中科院苏州医工所官方网站报道,苏州医工所医学检验室尹焕才研究员联合马富强研究员及相关科研力量,在苏州医工所自主部署项目的支持下,开展了基于LAMP技术(Loop-mediated isothermal amplification,环介导等温扩增技术)的传染性病原体检测系统研制。从特异性引物筛选设计、LAMP反应核心酶研发、高灵敏反应体系构建、到配套便携式荧光检测仪器,进行了全链条部署研究,取得阶段性进展。半小时内完成测试,试剂可常温运输,无需冷链,便于居家、床旁及现场快速检测使用,已初步具备转产条件。呼吸道病原体快速检测系统构成4月,据有关媒体报道,香港理工大学研发的便携式新冠病毒检测仪,利用反转录恒温环状扩增法(RT-LAMP)及金纳米粒子(作为核酸扩增显示剂),已成功进行精准的新冠病毒检测。临床样本测试结果与反转录聚合酶连锁反应(RT-PCR)标准完全吻合。检测仪在25分钟内可以确认新冠病毒阳性样本,整个检测约40分钟内完成,结果亦可凭肉眼辨识。据介绍,检测仪可同时放置六个样本,撇除两个阳性及阴性对照样本之外,可同时检测最多四个样本。采集样本后,即可使用检测仪在现场进行检测,无需将样本送回实验室。香港理工大学研发的“便携式新冠病毒检测仪”
  • 又是恒温扩增!国家药监局第六次应急批准新冠病毒快检试剂盒
    p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px line-height: 1.75em margin-bottom: 15px " 近日,国家药监局再次应急批准1个新冠病毒核酸快速检测产品,进一步服务于疫情防控需要。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px line-height: 1.75em margin-bottom: 15px " 与DNA分子诊断技术(PCR)相比,SAT技术具有灵敏度高、特异性强、交叉污染低和易于实现全自动高通量检测等特点。基于SAT技术的分子诊断产品可广泛应用于临床检测、血液筛查、食品安全检测、传染性疾病的应急防控和快速反应等多个领域。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px line-height: 1.75em margin-bottom: 15px " strong 上海仁度生物科技有限公司开发的新冠病毒2019-nCoV核酸检测试剂, 采用RNA特异靶标捕获和转录介导的恒温扩增实时检测技术,在一个反应管中自动化完成核酸提取、扩增步骤,90分钟可出结果,并可实现连续并行检测,提升检测效率。 /strong 相关数据显示,检测结果灵敏度、特异性能够达到传统PCR方法的水平。 br/   此前,国家药监局已应急批准杭州优思达生物技术有限公司新冠病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(恒温扩增-实时荧光法)、安邦(厦门)生物科技有限公司新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(杂交捕获免疫荧光法)2个核酸快速检测试剂产品。 br/   上述3个核酸快速检测试剂,缩短了核酸检测试剂的检测时间,提高了检测效率,全力服务疫情防控需要。 br/   国家药监局还应急批准了上海复星长征医学科学有限公司新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)产品,进一步扩大了疫情防控用检测试剂的供应。 br/   截至目前,国家药监局已经应急批准23个新型冠状病毒检测产品,其中新冠病毒核酸检测试剂15个,抗体检测试剂8个。 br/    strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 已批准新型冠状病毒检测试剂 /span /strong /p p style=" text-align: center line-height: 1.75em margin-bottom: 15px " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 456px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/7574495e-5138-490c-b620-ef7a69ff3205.jpg" title=" 1.png" alt=" 1.png" width=" 600" height=" 456" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.75em margin-bottom: 15px " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 423px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/e5051618-ad02-49e5-a605-6171d772eefa.jpg" title=" 2.png" alt=" 2.png" width=" 600" height=" 423" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.75em margin-bottom: 15px " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 370px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/409bdc2b-7e27-4813-a97d-cbd51f98711a.jpg" title=" 3.png" alt=" 3.png" width=" 600" height=" 370" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px line-height: 1.75em margin-bottom: 15px " 据了解,上海仁度生物科技有限公司成立于2007年,是国内专注于RNA分子诊断技术与产品的高新技术企业,致力于开发、推广以实时荧光恒温扩增检测技术(简称SAT技术)为基础的RNA分子诊断产品。目前,上海仁度已成功建立了SAT技术平台,有17项相关专利获得授权,10个产品获得CFDA注册证书并上市销售。 /p
  • 环凯正式推出LAMP(环介导恒温扩增技术)微生物快速检测试剂盒 ——快速、灵敏度高、特异性强、不需要特殊仪器
    环凯于2016年底正式推出基于lamp(环介导恒温扩增技术)荧光检测技术的微生物快速试剂盒,可用于食源性致病菌:沙门氏菌,金黄色葡萄球菌,志贺氏菌,单核增生李斯特菌,副溶血性弧菌,大肠杆菌o157:h7,阪崎肠杆菌,产气荚膜梭菌等 水源性微生物:铜绿假单胞菌,粪肠球菌,产气荚膜梭菌的快速检测。   环凯lamp荧光检测试剂盒基于环介导恒温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,lamp)荧光法检测,利 用两对特殊引物和具有链置换活性的bst dna聚合酶,使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构, 引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应,实现在恒温条件下(60-65℃)进行连续快速扩增。反应体系中加入了显色指示剂,阴阳性结果显色差异显著,扩增结束后可以通过观察荧光显色剂的颜色变化判读结果,无需开盖避免了扩增产物交叉感染性的可能性。  lamp技术是一种新型的恒温核酸扩增技术,该技术无需常规pcr中变性、退火、延伸等步骤不同温度设计要求,只需提供一个适宜的恒定温度即可。 因此,与常规pcr相比,lamp技术更适合现场高通量快速检测。  采用环凯lamp试剂盒,可在快速增菌的基础上,40-60分钟即可完成检测,判读结果。而且特异性强,灵敏度高,比传统pcr灵敏度高10-100倍。是食品快速检测的福音。  环凯lamp试剂盒的6大优势:  1、快速判读:40-60分钟内完成检测,肉眼观察颜色变化即可判读结果。  2、特异性强:针对靶基因的6个区段设计引物,保证扩增特异性。  3、灵敏度高:比传统pcr灵敏度高10-100倍, 可检测5-20个拷贝。  4、操作简单:几步加样后,60 -65℃温度范围内恒温条件下即可完成扩增。  5、使用便捷:一管式冻干,免去繁琐的配置溶液步骤。  6、仪器简单:扩增条件简单,能提供恒温的装置即可进行快速检测。   环凯lamp试剂盒产品列表:   需要了解更多关于lamp试剂盒的技术细节,可关注环凯公司微信公众号(扫以下二维码关注),在“环凯服务--技术支持栏目”咨询。或者拨打环凯技术支持电话:020-32078333-8877咨询。 关注健康 为食品药品安全保驾护航 微生物控制整体解决方案的提供者  扫描或长按二维码关注环凯公众号
  • 核酸快检 |长光辰英Home Lab便携式恒温核酸扩增分析仪
    目前新冠检测主要使用核酸检测与抗原检测,基于RT-PCR的核酸检测具有准确率高、可在病毒感染早期检测等特点,但对检测人员、环境等要求较高。而抗原检测具有操作简便、速度快等特点,但仅能对感染期患者实现准确检测,感染早期难以有效检测。而基于恒温扩增的核酸检测技术,兼具RT-PCR的早期检测与抗原的快速、便捷,有望更好地满足居家自测、大规模筛查的需求。近日,长光辰英公布自主研发的Home Lab便携式恒温核酸扩增分析仪,该仪器基于光信号即时判读技术与环介导等温扩增技术(LAMP)结合,自动判读核酸检测结果。仪器设计小巧,可重复性使用,产品重量仅为450g,体积为80*80*90mm,操作方便快捷,不受场地约束。仪器内置蓝牙模块,可连接手机APP(支持IOS和Android平台)使用,智能化辅助用户进行日常监测。Home Lab分析仪搭配新冠核酸快速检测试剂盒(环介导等温扩增法),组成系统化快速检测方案,通过鼻拭子取样,12-30分钟内可完成4个样品的核酸检测,在感染早期即可进行病毒检测。为广大用户提供更加便捷、高效的一体化核酸检测服务,从而有效解决目前在新冠病毒检测中存在的排队检测困难、采样交叉污染、实验室检测时间冗长等问题。简易操作流程Home Lab分析仪经过多项严苛的可靠性测试和安规测试,已实现量产化生产,并于2021年末顺利通过了欧盟CE医疗许可认证,目前公司开始部署国内医疗注册认证申请。Home Lab便携式恒温核酸扩增分析仪未来,Home Lab还可搭配更多LAMP试剂盒,进行HPV、HIV、甲流、乙流等感染性疾病的家庭或社区筛查检测,促进快检和防疫下沉。通过自主技术创新,实现国产设备在全民健康、食品安全、宠物畜牧业检测等领域的全产业生态化发展。注:基于实时定量PCR技术的核酸检测依然是新冠病毒感染的确诊依据,在按照国家防疫标准检测的前提下,本产品采用的新型快速检测技术,现阶段检测结果只作为(科研数据)参考,不作为医学诊断依据。
  • 联合医学LAMP便携式恒温扩增分析仪亮相2022美国AACC
    12022 AACC2022年美国临床化学年会暨临床实验医学博览会”7月28日,为期三天的第74届AACC美国临床化学年会暨临床实验室设备博览会已正式落下帷幕。AACC年会作为世界范围内临床检验领域最重要的国际学术会议之一,具有重要的国际影响力,每届年会都会吸引来自全球100多个国家,超过20000名国际医学界的专业人员和医疗保健领导者参加。2展会回顾”此次AACC,联合医学携LAMP便携式恒温扩增分析仪,POCT免疫荧光分析仪,新冠病毒检测全流程解决方案,tNGS病原体靶向测序等产品远赴美国芝加哥参加展会。✦✦联合医学作为全球分子诊断检测试剂与仪器的首选供应商,产品出口至全球多个国家,在全球积累了良好的市场口碑。展会期间吸引了来自世界各地的行业专家、客户与媒体莅临联合医学展台参观交流,对联合医学的产品与技术给予高度的认可和评价。美国芝加哥3联合医学 Uni-medica”深圳联合医学科技有限公司(Uni-medica简称“联合医学”)坐落于深圳市南山区,国家高新技术企业,致力于体外诊断试剂与仪器一体化解决方案的开发,与香港科技大学、深圳大学及中国科学院等众多科研院校开展一系列科研合作,承担了国家和省市多个科技攻关项目,获得仙瞳资本和深圳市科技金融服务中心投资,并入选中国创新企业新苗榜100强。 联合医学专注于感染性疾病与生殖健康相关领域创新产品的研发及产业化,拥有荧光定量PCR平台、高通量测序平台、流式细胞仪平台、免疫荧光显微成像平台等多个技术平台以及成熟完善的医疗器械生产注册体系,基于多组学检测技术为感染性疾病、生殖健康领域提供精准诊断完整解决方案。 公司拥有数十项知识产权和专利证书,多个产品获得国家药监局颁发的Ⅱ类、Ⅲ类医疗器械注册证,相关产品广泛应用于数百家临床机构、疾控中心和海关实验室,为疾病防控和预防保健提供了强有力的技术支撑。
  • 上海速创GBS恒温扩增芯片法试剂盒正式获批三类医械证
    继上海速创诊断全自动恒温核酸扩增分析仪获国家药监局三类医疗器械注册证(注册证号:国械注准20213220473号)之后,近日,公司B族链球菌核酸检测试剂盒(恒温扩增芯片法)又获批三类医疗器械注册证(注册证号:国械注准20223401433号)。产品规格48测试/盒、96测试/盒适用仪器上海速创诊断 全自动恒温核酸扩增分析仪(型号:MA3000)产品优势:易操作样本进-结果出 速度快全程检测≤1小时无污染提纯-扩增全封闭 结果准确临床阳性符合率≥97.40%阴性符合率≥98.20%适用人群01 妊娠35-37周进行GBS筛查02 本次妊娠有GBS菌尿03 既往新生儿GBS感染史04 在妊娠37周之前分娩 05 羊膜破裂超过18小时06 分娩体温超过38.0℃07 筛查距离分娩大于5周该试剂盒完全变革了现在PCR检测或培养镜检的范式,可在1小时內全自动地实现“样本进-结果出”的功能,为临床B族链球菌的诊断提供了更高效、更快速、更准确的检测手段。未来,速创诊断将继续秉承“科技为本、人才为先、追求卓越、创芯一流!”的理念,为打造微流控分子诊断领域第一品牌而不懈努力!
  • 博奥晶典微流控恒温扩增仪亮相CSIE 2014
    北京博奥晶典生物技术有限公司将携公司最新研发的基于微流控技术的芯片工作站和恒温扩增仪亮相CSIE2014。微流控技术的应用打破传统检测方法耗时长,操作繁琐的壁垒,有望在食品安全快速检测、临床诊断、检验检疫等领域得到广泛的使用。博奥晶典诚邀您参加CSIE2014并莅临本公司展位。 北京博奥晶典生物技术有限公司是依托于博奥生物的我国生物芯片领域产品及市场销售规模最大、研发实力最强的科技公司。公司致力于系统化生物芯片和相关仪器设备的研制,面向“生命科学研究、食品安全检测、临床诊断”等应用领域。 CSIE全称成都国际科学仪器及实验室装备展览会,由四川省分析仪测试学会主办、该会议已经连续成功举办了八届,在国内外享有较高的声誉。 展览会时间:2014年3月5日至3月7日展位号:6号馆C22展览会地址:成都市天府大道中段1号
  • 一文揽尽:荧光定量PCR扩增曲线哪个阶段最重要
    qPCR扩增曲线一般分成四个阶段:基线期、指数期、线性期和平台期。那么每个阶段PCR产物量的变化都有什么区别呢?哪个阶段最重要呢?小编这就一一道来。基线期PCR起始时,刚开始前几个循环的荧光信号还没有发生变化,接近一条直线,将其称之为基线,一般是3-15个循环。在基线期内,扩增的荧光信号被背景荧光信号所掩盖,无法判断PCR产物量的变化。指数期扩增的荧光信号高于背景荧光信号,扩增曲线起峰,开始进入指数期。在指数期内,每个循环积聚的产物准确加倍(假定100%反应效率)。该阶段的PCR反应具有高度特异性和精确度。因为所有试剂均充足,反应的动力学推动反应有利于扩增子加倍,所以产物出现指数级扩增。只有在这个阶段,Cq值与初始模板量的对数之间存在线性关系,所以在此阶段进行定量分析最合适。线性期(高变异性)随着PCR反应体系各成分的消耗,其中的一种或者多种成分限制反应,导致反应开始减缓,并且每个循环的PCR产物不再加倍,该阶段不再是指数级扩增。平台期反应停止,不再产生更多产物,并且如果放置时间够长,PCR产物将开始降解。因为每个样品具有不同的反应动力学,所以每支试管或每个反应将在不同的时间点进入平台期,最终的产物含量也各不相同。由于线性期和平台期的扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的产物量与初始模板量之间没有线性关系,所以也不能通过这两个阶段的PCR产物量计算出初始模板量。想要知道初始模板量的多少,还要依赖指数期的Cq值进行计算。▲ 图1. qPCR 反应的重要阶段如图所示,标准的扩增曲线是呈现S型的。曲线是否符合标准,不仅跟样本起始量、qPCR体系配制、反应程序等相关,更依赖于一套高品质的实时荧光定量PCR系统。对于实时荧光定量PCR系统来说,高度检测灵敏度、高度重复性和高度稳定性,是每一台qPCR仪的追求。高性能的Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统完全符合以上要求,该系统来自美国Azure Biosystems公司,融合了高品质的帕尔特温度模块和基于光纤传输的光学检测系统,为您的科学研究提供高精准、高灵敏可靠结果。提供Azure Cielo-3通道和Azure Cielo-6通道,可根据实验需求灵活配置。同时配有10.3”触控系统,主机本身可独立运行、连接、远程交互,让您随时随地知悉实验进程和及时获得实验结果。▲ 图2. Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统高度的灵敏度使用探针法,同时在Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统和其他品牌产品上检测GAPDH基因,结果表明:A)Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统对单拷贝基因的检出率更高。B)Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统的Cq平均值要低于2个Cq。▲ 图3. 单拷贝基因检测对比(n=96)高度的重复性源于优异的孔间均一性。105拷贝数GAPDH模板,GAPDH引物扩增,96孔重复结果。Cq平均值=19.1,变异系数(Cv)=0.002。▲ 图4. 96孔重复扩增曲线 A)线性图 B)对数图 高度的稳定性稳定可靠的温度模块和光学系统,确保仪器连续运行1000轮qPCR实验,数据依然稳定可靠,重复性高度一致。对GAPDH进行检测并连续计算Cq值得出平均值和Cq值的标准偏差。Cq值=22.4+0.01。▲ 图5. 长时间连续工作数据稳定
  • 视频采访:博奥晶典恒温扩增微流控芯片核酸分析仪亮相CISILE
    仪器信息网讯 2014年5月21-23日,由中国仪器仪表行业协会主办,北京朗普展览有限公司承办的第十二届中国国际科学仪器及实验室装备展览会(CISILE 2014)在中国国际展览中心开幕。作为CISILE 2014的战略合作媒体,仪器信息网也参加本次展会。   在本届CISILE上,北京博奥晶典生物有限公司展出了晶芯® RTisochipTM-A恒温扩增微流控芯片核酸分析仪及其微流控蝶式芯片。据该公司科学仪器事业部市场部经理王永贵介绍,传统方法一次只能检测一个食源性微生物指标,而微流控碟式芯片拥有24个检测通道,一次可以实现24个指标的高通量检测,特别适用于质监系统、出入境单位的常见致病微生物检测,医院检验科的呼吸道细菌检测等,目前这款恒温扩增微流控芯片核酸分析仪已在北京、广东的多家单位有所试用。
  • 快速通关有妙招!全自动封闭式核酸扩增分析仪提供海关检测新思路
    近日,北京新闻中心召开科技冬奥专场新闻发布会,重点介绍“科技冬奥”有关情况。本届冬奥会共有200余项技术,500多家单位,超过万名科研人员参与研发,为办好一届“简约、安全、精彩”的冬奥会提供有力保障。而其中也包含了海关科技人员的积极参与和贡献,由中国海关科学技术研究中心会同北京海关、石家庄海关、广州海关、宁波海关、青岛海关所属技术机构等10余家单位联合承担科技部国家重点研发计划“科技冬奥”重点专项项目“冬奥会口岸快速通关智能监管技术及装备”开发60余种传染病快速检测方法、17台套口岸监管装备,部分装备在冬奥会期间在10余个冬奥场馆和海关监管场所测试应用,有效助力了冬奥会口岸快速通关、智慧监管和疫情防控等工作。为进一步推动相关成果应用落地,《中国口岸科学技术》公众号将推出系列报道,对相关成果进行介绍,以供各界参考。全自动封闭式核酸扩增分析仪“科技冬奥”是2022年北京冬奥会赛场外最亮眼的主题,世界盛会不仅为大家呈现了精彩纷呈的体育赛事,也让全世界领略了科技带给北京冬奥会的独特魅力。在当今新冠疫情全球大流行的形势下,为确保北京冬奥会和冬残奥会的安全顺利举办,众多炫酷科技在本届冬奥会赛场内外大显身手,展现了我国科技创新的硕果。针对预防冬奥会期间输入性传染病口岸快速筛查的需求,国家重点研发计划 “科技冬奥”重点专项“冬奥会口岸快速通关智能监管技术及装备”项目,基于微流控芯片核酸检测技术,建立可快速检测25种传染病病原体的现场快速检测装备——全自动封闭式核酸扩增分析仪,由中国海关科学技术研究中心联合海关总署(北京)国际旅行卫生保健中心、北京中科生仪科技有限公司共同研发承担。该装备可在1小时内完成病原微生物样品的检测,对出入境人员、交通工具、运输设备、以及可能传播传染病的行李、邮包、货物等物品进行现场快速检测,迅速识别传染源,防止检疫传染病的传入或者传出。全自动封闭式核酸扩增分析仪及其配套检测卡目前,虽然有多种全自动核酸检测系统能够实现“样品进-结果出”,但具备全自动化核酸提取和实时荧光PCR精准检测能力的大多数仍是“实验室内”桌面型”设备,无法适应现场化的检测要求。CarryOn P1000Q采用高度集成化的设计理念针对以上短板,项目团队通过大量的研发和测试,将复杂的功能结构高度集成于比手掌略大的仪器上,采用快速升降温、超声控制、纯化温控、微型化多通道荧光检测、微流控液路驱动、锂离子蓄电池等模块,实现完善的使用功能和手持式的小型化设计。并采用了微流控技术的一体化芯片设计,将进行样本处理、核酸提取和纯化、荧光PCR反应的体系集成在8cm×6cm的芯片上,替代了传统意义上的实验室功能,使传统的核酸检测时间从3~4小时缩至1小时以内,突破了制约分子检测快速化的关键技术瓶颈,而且全封闭自动化检测过程解决了传统分子检测技术易发生环境交叉污染而难以在口岸现场应用的技术难题。简单的操作流程现场检测替代传统意义的实验室检测本系统凭借简单、便捷、快速的性能特点,全封闭无污染的反应过程以及精准、可靠、直观的实验结果,非常适合应用在冬奥会和冬残奥会等重大国际活动中。如得以最终应用,将大幅度简化通关流程,减少通关人员的等待时间,满足快速通关需求,解决大型国际活动现场快速筛查和确诊技术缺乏的问题。同时,有利于提高我国口岸传染病筛查的效率,更早、更准确地发现传染病携带者,识别传染病跨境传播风险,尽早进行传染病预警,以防止传染病发生扩散,维护国家公共卫生安全和人民健康。这将为疫情常态化下我国举办大型国际活动口岸疫情防控提供新的解决方案,在服务口岸现实需求的同时,也可充分展现口岸公共卫生检疫体系的高效性、准确性和人性化。
  • 上海纽钛成功研发新冠恒温荧光检测试剂盒 30分钟完成快速检测
    p style=" text-indent: 2em " span style=" text-indent: 2em " 武汉新型冠状病毒疫情日益严峻,在抗击新型冠状病毒肺炎的过程中,检测试剂盒曾一度紧缺,很多患者不能被第一时间确诊和收治,导致很多后续治疗工作推进缓慢。 /span /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 687px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/7bd9e3db-1ad0-42d6-8c8c-dec7ec849cab.jpg" title=" 1 新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测流程图.png" alt=" 1 新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测流程图.png" width=" 600" height=" 687" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-indent: 2em text-align: center " 新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测流程图 /p p style=" text-indent: 2em " 为应对这一状况,上海纽钛研发团队在股东公司及大专院校的大力支持下,第一时间获取武汉新型冠状病毒基因组序列(2019-nCoV)并进行了分析和设计,成功研发出了针对新型冠状病毒(2019-nCoV)的恒温荧光检测试剂盒。该试剂可针对鼻咽拭子、血清、唾液、痰液等样品中病毒的特异性核酸片段进行扩增,扩增效率高,可在30分钟内完成检测。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/e69ef088-d8a7-4a91-a5f9-3fcde2c7a17c.jpg" title=" 02 新型冠状病毒(2019-nCoV)恒温荧光检测试剂盒.png" alt=" 02 新型冠状病毒(2019-nCoV)恒温荧光检测试剂盒.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/bcbf1a90-3a1c-4de0-b416-400efc53f0f2.jpg" title=" 02 新型冠状病毒(2019-nCoV)恒温荧光检测试剂盒1.png" alt=" 02 新型冠状病毒(2019-nCoV)恒温荧光检测试剂盒1.png" / span style=" text-indent: 2em " & nbsp & nbsp /span /p p style=" text-indent: 2em text-align: center " 新型冠状病毒(2019-nCoV)恒温荧光检测试剂盒 /p p style=" text-indent: 2em " 基于国家重点研发计划“重大科学仪器设备开发”重点专项(高灵敏低功耗小型荧光检测器的研制及产业化应用,项目编号:2017YFF0104900)的开发成果,上海纽钛推出一款通用恒温荧光检测仪,可同时适用于SYBR Green、钙黄绿素等多种荧光染料,可满足市面上大多数恒温荧光试剂的检测需求。该仪器配合我司开发的新冠恒温荧光检测试剂盒,可实现快速检测,可在30分钟内完成检测。该仪器具有16个荧光检测孔,每个孔可单独随时启动检测,不仅适用于大医院集中样本检测,也能满足小医院及各检验检疫单位零星样本随到随检的需求 span style=" text-indent: 2em " & nbsp /span /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/cb164c80-ca50-4fe3-9e9c-1c600d585dcc.jpg" title=" 03 ICT-208-16恒温荧光检测仪.png" alt=" 03 ICT-208-16恒温荧光检测仪.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/4f1820c6-9277-46d1-8831-bf6c42fcf431.jpg" title=" 03 ICT-208-16恒温荧光检测仪1.png" alt=" 03 ICT-208-16恒温荧光检测仪1.png" / /p p style=" text-indent: 2em text-align: center " span style=" text-indent: 2em " & nbsp & nbsp & nbsp /span span style=" text-indent: 2em " ICT-208-16恒温荧光检测仪 /span /p p style=" text-indent: 2em " 同时上海纽钛还有全自动核酸提取仪、RT-qPCR、多款恒温荧光检测仪等核酸检测系列相关仪器可供各医院、检验检疫单位、科研院所、试剂生产厂家共同应对此次疫情。 /p p style=" text-indent: 2em " 上海纽钛测控技术有限公司于2018年2月由”万人计划”领军人才牵头创建。致力于分析仪器+自动化+人工智能的融合,聚焦生物医药、农业与食品安全领域,为用户提供高可靠性智能筛选装备及系统解决方案。 /p
  • 达元发布DY-7100 恒温荧光检测仪(非洲猪瘟检测仪)新品
    恒温荧光检测仪是一款集恒温扩增、实时荧光检测、智能数据判读一身的恒温荧光检测仪,具有操作简单、速度快、准确性高、数据可溯源的优点。 广泛用于肉类动物源性成分检测、非洲猪瘟检测,、食源性致病菌检测、转基因检测、动物病害等检测。性能特点:1.检测速度快。2.操作简单:搭配达元冻干分子检测试剂,省去可复杂的配置体系操作过程,仪器检测信息输入简单。3.检测项目齐全:覆盖常见的动物源性成分检测和食源性致病菌等检测项目,其他产品陆续上市。4.可溯源:检测数据可通过有线网络、无线wifi、3G或4G网络,及时上传到食品安全监管信息系统。5.智能判读:检测结果非常直观,非专业人员也可轻松完成判读。6.检测效率高:仪器可同时检测不同样品和项目。7.内置打印机:检测结果可现场打印。8.实时监测:可实时查看荧光曲线。9.兼容市场上常见的恒温扩增检测试剂(包括LAMP法、RPA法、RAA法等)图1 检测曲线图 检测范围:肉及肉制品动物源性成分检测;乳品及乳制品、饮用水等食品致病菌检测;鱼虾等水产品动物病害检测;动物饲料及农产品转基因检测。可选试剂:金黄色葡萄球菌核酸检测盒沙门氏菌核酸检测盒大肠杆菌O157核酸检测盒单增李斯特氏菌核酸检测盒副溶血性弧菌核酸检测盒志贺氏菌核酸检测盒阪崎肠杆菌核酸检测盒霍乱弧菌核酸检测盒铜绿假单胞菌核酸检测盒溶血性链球菌核酸检测盒非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒应用领域:恒温荧光检测仪可广泛应用食品药品监督、海关出入境、疾控中心、水产渔政、农业、肉类批发、食品企业等多个行业。创新点:针对非洲猪瘟改良创新出的解决方案
  • 核酸免扩增高敏检测新技术:临床诊断应用潜力巨大!
    近日,国际分析化学领域权威期刊Analytical Chemistry在线发表文章“Nucleic Acid Hybridization Enhanced Luminescence for Rapid and Sensitive RNA and DNA Based Diagnostics”。该论文提出了一种基于核酸杂交增强荧光用于高灵敏核酸检测的新策略。该成果由SIAT深圳市微纳生物传感重点实验室(筹)喻学锋研究员团队完成,材料界面中心金宗文、罗擎颖副研究员为该文章通讯作者。论文上线截图长寿命发射型核酸探针因其结构可编程、信背比高和灵敏度高等优势而广泛应用于生物化学分析。基于长寿命荧光核酸探针可实现荧光共振能量转移(FRET)的均相检测,但该技术常受到有效能量转移距离范围窄的局限。本研究提出了一种核酸杂交响应发光探针的新策略,可通过核酸杂交将DNA修饰的Lumi4-Tb复合物的光致发光(PL)增加20倍以上,适用于生理条件对各种核酸、蛋白质及其他生物小分子的高灵敏检测。本研究进一步通过PL寿命分析揭示了发光增强的可能机制:由于单链核酸链的柔性,碱基和磷酸基团可以与Tb(III)配位,降低Tb复合物的稳定性,导致初始PL较弱。而杂交后,双螺旋刚性结构抑制了Tb(III)与碱基或磷酸根之间的配位,使得发光增强。基于本机理,可针对不同靶标灵活设计DNA序列,在无需额外核酸扩增的前提下实现对DNA或RNA低至pM的检测,并且完全适用于真实样本分析,在临床诊断中的核酸检测方面显示出巨大的潜力。基于核酸增强发光的核酸高灵敏检测示意图该研究得到国家自然科学基金、广东省面上项目、中国博士后基金等的支持。全文获取链接:https://doi.org/10.1021/acs.analchem.2c02673
  • 122万!中山大学孙逸仙纪念医院荧光定量PCR扩增仪 采购项目
    项目编号:0724-2231SW932791项目名称:中山大学孙逸仙纪念医院深汕中心医院采购检验分子公共检测平台检测能力系列设备招标项目采购方式:公开招标预算金额:1,220,000.00元采购需求:合同包1(荧光定量PCR扩增仪):合同包预算金额:1,220,000.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)1-1临床检验设备荧光定量PCR扩增仪2(套)详见采购文件1,220,000.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:自合同生效之日起至合同全部权利义务履行完毕之日止。
  • CRISPR等温扩增基因检测技术取得新进展
    p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 近日,中国科学院深圳先进技术研究院博士周文华等在CRISPR等温扩增基因检测技术领域取得新进展。相关工作“A CRISPR-Cas9-triggered strand displacement amplification method for ultrasensitive DNA detection”(《一种应用于核酸超敏检测的CRISPR-Cas9链取代扩增技术》)发表于国际刊物《自然-通讯》(Nat. Commun.& nbsp 2018, 9, 5012)。论文共同第一作者是周文华和研究助理胡丽,通讯作者是研究员喻学锋。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify "   核酸分子检测已被广泛应用于精准医疗、食品安全检疫、公共安全监控等多个领域。尽管基于PCR(聚合酶链式反应)的核酸检测技术被广泛用于专业检测机构,但由于该技术操作复杂、仪器昂贵、以及涉及多重变温过程,并不适用于基层检测和家庭检测。为了克服PCR技术的缺点,一类不依赖变温的检测技术,即等温扩增检测技术得到广泛关注。然而,当前等温扩增技术在灵敏度、特异性和抗干扰度方面仍各自有着其内在缺陷,且成熟的等温扩增技术核心专利大多掌握在国外公司手中。因此,迫切需要开发出一种性能更优异,且具有完全自主知识产权的新的核酸等温扩增检测技术,以满足我国在核酸检测领域日益增长的需求。CRISPR/Cas9作为一种源自原核生物获得性免疫系统的基因定点编辑技术,自发现以来已吸引了大量科研关注和投资兴趣。然而,由于人体的复杂性和伦理方面的争议,基于CRISPR技术的临床基因治疗仍面临着诸多困难和挑战。另一方面,由于该技术操作简便、灵敏度高、抗干扰性强等优势,目前已开始在体外核酸分子的检测领域得到应用。但目前以CRISPR技术为基础的核酸检测手段仍依赖传统的PCR技术或等温扩增技术对靶分子进行扩增,其创新性和适用范围仍有待提高。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify "   针对这些现状,喻学锋课题组创新性地提出利用CRISPR系统效应蛋白Cas9在与靶核酸分子结合过程中独特的构象变化,作为链取代等温扩增反应的开关,高效启动针对靶核酸分子的指数倍扩增(简称CRISDA技术)。相比于传统PCR和其他等温扩增技术,CRISDA技术有着诸多独特优势。第一,该技术灵敏度高。基于CRISPR技术良好的抗干扰性,该技术可在复杂背景条件下,对aM(10-18M)浓度的靶核酸分子进行高效扩增检测。第二,CRISDA技术特异性强。通过在机理上的特殊优化,该技术很好地规避了在传统CRISPR基因编辑技术中普遍存在的脱靶效应,可实现对极低浓度的靶核酸分子进行单核苷酸多态性(SNP)检测。第三,CRISDA技术普适性极强。在针对不同靶位点的检测反应中,所需的扩增引物设计简单、无需优化,可迅速实现对新位点的检测反应体系开发。除此之外,该技术检测过程完全等温,并且在从室温到42oC的范围内均保持良好的扩增检测效果,可充分满足在实际检测中对新靶点的检测需求。目前,课题组已利用该技术成功检测出人基因组中乳腺癌相关的单核苷酸位点突变,并在野生型大豆中成功检测出万分之三的转基因大豆。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify "   同时,由于CRISDA技术所具有的独特优势和超越传统PCR技术的应用前景,以该技术为背景的“基于CRISPR-Cas系统的核酸高敏快速等温检测技术”项目在中科院首届“率先杯”未来技术创新大赛中,从数百个项目中脱颖而出,获得最终优胜奖,并已吸引了多家投资机构前来洽谈产业化事宜。目前,课题组正将该技术应用于突发或新型传染病的检测,如新型流感、非洲猪瘟等,并正积极开发相关检测试剂盒。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify "   该研究工作得到国家自然科学基金、深圳市科技计划国际合作研究、中科院前沿科学研究重点计划、深圳科技研究计划、英国利华休姆信托基金和香港研究资助局面上项目等的资助。 /p p style=" text-align: center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/32ba99f4-c48b-4ce7-af65-d3cb1a2f9940.jpg" title=" 1.png" alt=" 1.png" / /p p style=" text-indent: 2em text-align: center " 图1:& nbsp 传统PCR技术与CRISDA检测技术对比。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: left " & nbsp /p p style=" text-align:center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/b631edb6-a6db-4c5c-88b5-21d9ca4cb583.jpg" title=" 2.png" alt=" 2.png" / /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify "   图2:& nbsp 利用CRISDA技术对aM量级的靶分子进行特异性扩增检测。(a)扩增体系设计;和(b)利用CRISDA技术对合成的DNA片段进行特异性扩增检测。(c)利用CRISDA技术对来自人基因组的DNA片段进行特异性扩增检测。(d)利用CRISDA技术对人基因组的特定区域进行特异性扩增检测。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: left " & nbsp /p p style=" text-align:center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/89f1c732-cb1d-4b15-97bb-37f9e5aee8e8.jpg" title=" 3.png" alt=" 3.png" / /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify "   图3:& nbsp 利用CRISDA技术对aM量级的靶分子进行SNP扩增检测。(a)不同细胞株基因组中rs3803662位点的测序验证;(b)利用CRISDA技术对该SNP位点进行高灵敏度扩增检测。 /p
  • 传统PCR OUT了!CRISPR等温扩增基因检测技术实现
    p   近日,中国科学院深圳先进技术研究院博士周文华等在CRISPR等温扩增基因检测技术领域取得新进展。相关工作“A CRISPR-Cas9-triggered strand displacement amplification method for ultrasensitive DNA detection”(《一种应用于核酸超敏检测的CRISPR-Cas9链取代扩增技术》)发表于国际刊物《自然-通讯》(Nat. Commun. 2018, 9, 5012)。论文共同第一作者是周文华和研究助理胡丽,通讯作者是研究员喻学锋。 /p p   核酸分子检测已被广泛应用于精准医疗、食品安全检疫、公共安全监控等多个领域。尽管基于PCR(聚合酶链式反应)的核酸检测技术被广泛用于专业检测机构,但由于该技术操作复杂、仪器昂贵、以及涉及多重变温过程,并不适用于基层检测和家庭检测。为了克服PCR技术的缺点,一类不依赖变温的检测技术,即等温扩增检测技术得到广泛关注。然而,当前等温扩增技术在灵敏度、特异性和抗干扰度方面仍各自有着其内在缺陷,且成熟的等温扩增技术核心专利大多掌握在国外公司手中。因此,迫切需要开发出一种性能更优异,且具有完全自主知识产权的新的核酸等温扩增检测技术,以满足我国在核酸检测领域日益增长的需求。 /p p style=" text-indent: 2em " CRISPR/Cas9作为一种源自原核生物获得性免疫系统的基因定点编辑技术,自发现以来已吸引了大量科研关注和投资兴趣。然而,由于人体的复杂性和伦理方面的争议,基于CRISPR技术的临床基因治疗仍面临着诸多困难和挑战。另一方面,由于该技术操作简便、灵敏度高、抗干扰性强等优势,目前已开始在体外核酸分子的检测领域得到应用。但目前以CRISPR技术为基础的核酸检测手段仍依赖传统的PCR技术或等温扩增技术对靶分子进行扩增,其创新性和适用范围仍有待提高。 /p p   针对这些现状,喻学锋课题组创新性地提出利用CRISPR系统效应蛋白Cas9在与靶核酸分子结合过程中独特的构象变化,作为链取代等温扩增反应的开关,高效启动针对靶核酸分子的指数倍扩增(简称CRISDA技术)。相比于传统PCR和其他等温扩增技术,CRISDA技术有着诸多独特优势。第一,该技术灵敏度高。基于CRISPR技术良好的抗干扰性,该技术可在复杂背景条件下,对aM(10-18M)浓度的靶核酸分子进行高效扩增检测。第二,CRISDA技术特异性强。通过在机理上的特殊优化,该技术很好地规避了在传统CRISPR基因编辑技术中普遍存在的脱靶效应,可实现对极低浓度的靶核酸分子进行单核苷酸多态性(SNP)检测。第三,CRISDA技术普适性极强。在针对不同靶位点的检测反应中,所需的扩增引物设计简单、无需优化,可迅速实现对新位点的检测反应体系开发。除此之外,该技术检测过程完全等温,并且在从室温到42oC的范围内均保持良好的扩增检测效果,可充分满足在实际检测中对新靶点的检测需求。目前,课题组已利用该技术成功检测出人基因组中乳腺癌相关的单核苷酸位点突变,并在野生型大豆中成功检测出万分之三的转基因大豆。 /p p   同时,由于CRISDA技术所具有的独特优势和超越传统PCR技术的应用前景,以该技术为背景的“基于CRISPR-Cas系统的核酸高敏快速等温检测技术”项目在中科院首届“率先杯”未来技术创新大赛中,从数百个项目中脱颖而出,获得最终优胜奖,并已吸引了多家投资机构前来洽谈产业化事宜。目前,课题组正将该技术应用于突发或新型传染病的检测,如新型流感、非洲猪瘟等,并正积极开发相关检测试剂盒。 /p p   该研究工作得到国家自然科学基金、深圳市科技计划国际合作研究、中科院前沿科学研究重点计划、深圳科技研究计划、英国利华休姆信托基金和香港研究资助局面上项目等的资助。 /p p    a href=" https://www.nature.com/articles/s41467-018-07324-5" target=" _self" strong 论文链接 /strong /a /p p    img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/0d23d2ca-6349-469c-8baf-47725333d3c4.jpg" title=" 111.png" alt=" 111.png" style=" text-align: center " / /p p style=" text-align: center " 图1: 传统PCR技术与CRISDA检测技术对比。 /p p style=" text-align: center "    img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/d9f7eaaa-745e-48b5-b10a-1fee29f62f2d.jpg" title=" 222.png" alt=" 222.png" style=" text-align: center " / /p p style=" text-indent: 2em " 图2: 利用CRISDA技术对aM量级的靶分子进行特异性扩增检测。(a)扩增体系设计 和(b)利用CRISDA技术对合成的DNA片段进行特异性扩增检测。(c)利用CRISDA技术对来自人基因组的DNA片段进行特异性扩增检测。(d)利用CRISDA技术对人基因组的特定区域进行特异性扩增检测。 br/ /p p    img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/0f10d157-8779-46d8-8160-16cfad36b63c.jpg" title=" 333.png" alt=" 333.png" style=" text-align: center " / /p p   图3: 利用CRISDA技术对aM量级的靶分子进行SNP扩增检测。(a)不同细胞株基因组中rs3803662位点的测序验证 (b)利用CRISDA技术对该SNP位点进行高灵敏度扩增检测。 /p
  • 国产PCR核酸扩增仪10月热度榜(上),小编精心梳理
    小编整理了2023年10月国产PCR仪器热度榜单,收录了10月的热门国产PCR产品,供有采购此类仪器的用户参考。本篇是第1至5名。TOP1、普迈 Amplly全自动核酸提纯及荧光PCR分析系统品牌型号:安普利 | Anadas9850价格:100万 - 200万生产商:普迈精医科技(北京)有限公司产品介绍:全自动核酸提纯及荧光PCR分析系统是一个集成创新项目,基于临床大规模微量基因定量分析而推出的一种流水线式核酸检测平台,其利用仪器设备的高精度、高可靠性、高速度的特点,从标本录入开始到PCR定量出报告全程自动化,检测通量大,检测效率高,是目前国内、国际上检测速度最快的检测平台,同时充分考虑临床实验室检测特点,满足目前临床上日益增加的基因定量分析需求。充分考虑到临床实验室检测的特点,利用仪器设备的高精度、高可靠性、速度快的特点而推出的一个平台装备 全自动化,具有检测通量大,检测效率高,是目前国内、国际上检测速度最快的检测平台。产品特点:1、自动化程度高;全自动核酸提纯及荧光PCR分析系统从标本上样、模板制备、全程条码化管理,连接ILS系统,自动读取病人信息安排实验,自动打印报告可以直接从样本管中提取血清、血浆、分泌物等标本,多品种并行处理,减少交叉污染试剂、耗材自动条码录入,程序自动记忆,避免人工出错根据标本信息自动选择处理程序,减少人为错误。2、通量大,速度快;设备采用18只移液器并行处理,一次可处理96个标本,基因分离时间少于60分钟,大大提高了标本处理的通量与速度,内置两台全自动医用PCR分析系统,工作自动分配,检测速度快96个标本首次核酸定量分析检测时间小于2.5小时,之后每次96个标本分析周期小于1小时标本、试剂、耗材自动条码录入,无须人工干预,处理速度快。3、生物安全性好;内置全外排净化层流通风系统,设备采用过滤的净化层流通风系统,出风全外排,对实验室无污染全自动封闭操作,排除外界的污染,避免有害物质对人体的危害,采用带滤芯的一次性Tip头,避免交叉污染,标本与试剂移液器分离,避免交叉污染,自我清洁、气流自动控制。内置定时紫外消毒功能4、提取效率高,提取纯度高;龙门闭环结构,稳定可靠,运行精度高三维立体多重自检系统,仪器运行稳定可靠。5、重复性、稳定性好。专用的提取试剂和预置的提取程序并行,可消除操作过程中的不均一因素,使得每批之间的结果高度重复 6、ZD满足临床需求;满足临床的便利需求,可以直接从样本管中提取血清、血浆、分泌物等标本,而且可以并行处理,减少交叉污染,ZD满足临床多品种标本的检测,多种标本可同时上机,并行处理,适用临床多品种标本的检测,自动化程度高,避免了手工进行标本移液的操作步骤,减少交叉污染灵活的软件操作,全中文图文界面,处理速度快试剂、耗材自动条码录入,避免人工出错荧光PCR分析系统提供常用的多种波段的荧光选择,并可根据客户要求,选择2-6波段定制。7、操作简便,易上手。操作流程:1、开机,仪器自检2、在指定位置放入临床样本、试剂、耗材3、仪器运行4、分析报告5、清理仪器、关机产品参数:厂商简介:普迈精医科技(北京)有限公司(PRECISION MEDICINE TECHNOLOGY(Beijing)Co.LTD)是EVOQUA懿华在中国的合作伙伴,为实验室客户提供专业的科研检测设备解决方案。 我们了解科学仪器在全球的最前沿应用,汇集于专业的解决方案,传递给国内顶级科研及检测人员,辅助我们的客户取得事业进步和成功。TOP2、全自动医用PCR分析系统品牌型号:天隆科技 | Gentier 96 E/Gentier 96 R价格:30万 - 50万生产商:西安天隆科技有限公司产品介绍:Gentier 96E/96R全自动医用PCR分析系统是一款大通量、多靶标、高精度qPCR核酸检测设备。该款产品具有科学高效的温控系统与光电系统、强大易用的软件分析功能、人性化的操控方式等诸多优势,轻松实现下游多重基因检测、定量分析、SNP分析、 熔解曲线分析等应用。升温速率≥6.1°C/s温度均一性±0.1°C7s完成检测仪器特点01 所有通道同步检测多种常规的激发、检测通道,可兼容大多数荧光染料、探针类型,实现绝对定量、相对定量、基因分型等检测;Gentier 96E/96R FRET(荧光能量共振转移)通道的引入实现用户低荧光本底值、高灵敏度检测的需求,使检测更加便捷、专业、精准。02 多样化的操作方式在继承经典的外接电脑一对一操控的基础上,创造性地引入局域网内的远程操控、仪器的单机本地运行模式;内置10.4英寸触摸屏搭载自主研发的控制软件,实验设置、实验实时监控、仪器设置等操作更加便捷。 03 精准高效的温控系统基于Peltier效应的多枚半导体制冷片排布于Block下,温度的均匀性、准确性、升降温速率等均得到了明显提升,缩短实验周期;温度梯度功能的实现,省去以往对退火温度的反复摸索,提高实验效率。 04 科学合理的光学系统荧光激发光源采用高亮长寿命LED,荧光检测系统终身免维护;光学系统位于仪器顶部,运行时顶部激发、扫描,无需担心孔内灰尘对结果造成的不良影响;紧凑的光学系统内集成了6/4个荧光检测通道,实现多项技术突破;同时增加恒温控制,保证了荧光检测的精准性和稳定性;仅需7秒即可完成96孔位6/4种荧光通道的逐孔扫描,高效且无荧光边缘效应。厂商简介:西安天隆科技有限公司(以下简称:天隆科技)成立于1997年,是一家以市场为先导、产学研为基础、创新驱动为核心、品牌高度自主化的高科技企业。历经二十余年,天隆科技已逐步发展成由西安天隆、苏州天隆、无锡锐奇等多公司组成的跨区域企业集群。公司秉持科技服务大众,客户为中心的发展理念,始终致力于基因检测、分子诊断领域仪器及体外诊断试剂的研发、生产和整体解决方案的提供。TOP3、盘古(Pangaea)快速荧光定量PCR系统品牌型号:艾普拜 | Pangaea价格:面议生产商:北京深蓝云生物科技有限公司产品介绍:又准又快,盘古(Pangaea)快速荧光定量PCR系统集二十年国际品牌的经验,圆科学仪器中国智造梦。盘古(Pangaea)快速荧光定量PCR系统是其由资深国际团队设计和研发匠心打造的,具有国际水准、优异品质的PCR产品。采用马洛半导体精确控温和独特的光波导检测设计,保证数据的准确性和均一性,升温速度可达8.5°C/s,获得结果快速。国际化软件设计和操作规范,操作简易,数据可视化,支持中英文等多语言,带来前所未有的操作体验。▎ 技术特点• 精确的温控系统:马洛(Marlow)半导体控温:>50万次循环寿命,热转换效率高;温度均一性±0.15℃;温度准确性±0.1℃,保证数据准确性和均一性。• 一流的升降温速度:升温速度≥8.5℃/S,获得结果快速。• 采用光波导检测系统:显著降低背景噪音,无边缘效应。• 符合国际规范的操控软件:国际化软件设计和操作规范,操作简易,数据可视化。• 智能压力系统:兼容0.1ml和0.2ml的耗材。• 完美的电动控制:可实现全自动工作站,进行大规模全自动检测。▎ 优异性能• 一致性好使用探针法对FAM通道的模板(105 copies/μL)进行96孔检测;图中为20μL反应体系的96个孔重复。Cq=21.38±0.13。• 灵敏度高2倍浓度差异样品的区分:质粒DNA以2倍梯度进行稀释后扩增,每个梯度进行7个重复。结果显示出优秀的分辨率,灵敏度,重复性和数据的均一性。(CV盘古快速荧光定量PCR系统线性范围检测。质粒DNA以10倍梯度稀释,共11个浓度梯度,使用HEX探针检测,R2=0.998。结果显示盘古具有宽广的动力学范围。• 卓越的6重检测能力盘古快速荧光定量PCR系统能够实现单管6重检测能力,经过验证的优异的滤光片组合设计最大程度地检测特定通道中特定染料的荧光信号,无荧光串扰。▎ 符合国际规范的CqMAN定量操作软件国际化软件设计和操作规范,操作简易,数据可视化,支持中英文等多语言。• 中英文一键切换,降低学习曲线。• 具有向导式窗口,可极大精简设置过程。• 支持先运行程序再进行孔板设置,节约实验时间。• 快速阴/阳性判别,直观可靠。• 实验设计、孔板布局、程序设置可独立或全部保存模板,进行快速运行实验。厂商简介:北京深蓝云生物科技有限公司致力于为用户提供新型生命科学研究仪器和分析产品以及优化的整体应用解决方案。 深蓝云生物配备着专业的技术支持和应用支持,依托国际领先的生命科学产品和解决方案,专注为用户提供分析产品和完善的售前咨询和售后服务。TOP4、实时荧光定量PCR仪品牌型号:杰莱美 | QX96M / QX96B / QX300 / QX400 / QX600价格:30万 - 50万生产商:四川杰莱美科技有限公司产品介绍:高精度的温度传感及控制系统:导热性能优良的合金加热槽内置3个独立校准的超高精度温度传感器,温度测量精度可达到±0.05°C,先进的PID温控算法可实现8.4°C/s升温速度的同时确保超调不超0.1°C、准确性±0.15°C、精度优于±0.1出众温控性能 高灵敏的光学系统:专业布局的高精密光学系统,与高效率的均衡宽光谱激发光源、高灵敏度的科研级图像传感器相结合,可快读检测微量样品极其微弱的荧光信号操作方式灵活:既可使用触摸屏独立控制设备完成实验,也可使用网线或WIFI控制设备,同时,仪器可无线传输指定格式的文件,实验结果自动传输到用户指定邮箱,可按客户命令自动关机方便易用的操作体验:既可以在触摸屏上实现单机操作,也可以通过网络连接PC端编辑运行程序,还可以通过运行程序移植,实现多台机器同时完成相同的检测程序可升级的无限远光路系统:增加或减少滤光片对光路路线没有任何影响,仪器只需增加或减少滤块就能实现荧光通道的增减,可根据用户需求灵活升级。厂家备有滤块库,质保期内用户可随时申请更换自己需要的滤块助力科研 品质服务极高的重复性:利用质粒特异性的基因序列,在20μl体现下进行96孔重复扩增,结果显示所有样本Ct值的标准差(SD)为0.07卓越的分辨率:利用探针法对不同浓度质粒DNA模板进行扩增的结果能清晰的区分2倍和1.5倍(置信区间99%)的质粒DNA模板差异宽广的线性检测范围:利用质粒特定基因进行10个浓度梯度(10个数量级)检测,回归系数 ≥0.999,扩增效率高厂商简介: 四川杰莱美科技有限公司成立于2016年,是一家专业致力于实验室科学仪器设备的研发、制造、销售、服务为一体的高新技术企业。其总部设立在成都,在北京、上海、广州、武汉等一二线城市均设有办事处,是全国多个政府部门及国家机构的合作伙伴。公司现有专业技术人员100余人,其中,博硕士以上学历占50%,本科以上学历占95%。公司已建立包括分子生物学、血清学、形态自动识别系统等在内的一整套研发、生产技术体系平台,拥有多个自主研发产品并同步发展,可以满足各知名高校、研究院所、政府检验实验室、大型医院的科研实验与信息化需求。TOP5、赛沛 GeneXpert全自动医用PCR分析系统(Infinity-80) 品牌型号:Cepheid | Infinity-80价格:200万 - 500万生产商:赛沛(上海)商贸有限公司产品介绍:Cepheid® GeneXpert® Infinity System 全自动医用PCR分析系统(Infinity-80)是一种全自动化、高处理量、按需随选、随机访问、封闭式的系统,完全集成实时、基于 PCR 的分子诊断检测技术,实际动手时间极少。是完整的一体化分子诊断系统,具有无与伦比的用户界面。可搭载16-80个独立的反应模块,系统通过独立运行的检测模块及具有专利的Xpert®试剂盒将样品制备与扩增和检测过程相结合,真正做到了“样本进,结果出”,让更多的检测场景成为可能。Infinity系统的灵活性还体现在能够根据客户需求提供16-80个样本检测通量,同时预留加急(STAT)模块,可解决紧急标本的检测问题。国内已有多款配套试剂上市,覆盖感染性疾病病原体、耐药性基因及肿瘤基因等领域,能够为临床及时提供检测依据,已广泛应用国内大型三甲医院。产品特点:试剂盒自动装填处理;减少人为因素影响结果高通量、无停机时间(2,000* 测试/ 天);达到工作效率模块化设计,灵活组合,可拓展性强,按需装配16 to 48 个模块;满足不同发展需求触摸屏界面,智能化人机交互与易用性创新的故障管理体系;售后维护简单方便支持全自动模式和手动模式废弃物自动化处理,生物安全性高搭载多款传染病检测菜单,不断拓展应用领域厂商简介:赛沛是一家总部位于美国加利福尼亚州Sunnyvale的分子诊断公司,致力于研发、生产、销售快速易用的分子诊断系统和试剂盒,帮助改善当前医疗状况。通过将高度复杂且耗时的手工操作自动化,赛沛为不同规模的机构提供解决方案,可以对微生物和遗传病进行复杂的基因检测。赛沛凭借强大的分子生物学平台,专注于各种需要快速检测结果并可为临床诊断提供依据的应用领域,如传染病和癌症防治领域。国产PCR2023年10月热度榜就介绍到这里,点击查看更多PCR产品。
  • 西藏首家临床基因扩增检测实验室通过国家技术验收
    p   & nbsp 日前,记者从自治区人民医院了解到,在中组部医疗人才“组团式”援藏专家的帮助下,该院检验科临床基因扩增检测实验室顺利通过国家卫计委临检中心技术验收,本月21日,国家卫计委临检中心主任陈文祥教授将亲自为实验室颁发技术验收合格证书。这是西藏首家通过国家验收的临床基因扩增检测实验室。目前,该实验室已能开展乙肝病毒DNA检测、人乳头瘤病毒DNA检测,将根据临床需要进一步要开展其他检测。 /p p    strong 对照技术验收要求 /strong /p p    strong 提前逐条进行自我核查 /strong /p p   随着精准医学和个体化医疗的发展,临床基因扩增检测技术(PCR实验)已成为临床检验领域最热门的技术。该技术对于实验室的技术能力及管理要求极高,临床风险也较高,早在2002年,我国就颁布了《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》,并于2010年进行修订,规定,临床机构基因扩增实验室必须经过技术验收,合法开展相关检测业务。 /p p   北京协和医院检验科副主任、“组团式”援藏专家邱玲教授介绍,2010年,西藏自治区人民医院就已经开展相关检测,并筹备基因扩增检测实验室验收相关工作。为保证医疗安全,合法开展相关检测业务,2015年10月,在中组部医疗人才“组团式”援藏专家的积极推进和指导下,该院检验科临床基因扩增检测实验室向国家卫计委临检中心正式递交验收申请,并对照技术验收的38条要求逐条进行自我核查,补充了大量性能验证实验、对设备进行校准、进一步完善了人员技术档案等。 /p p    strong 现场技术验收 /strong /p p strong   实验室达到内地同等水平 /strong /p p   据了解,日前,由国家卫计委临检中心主任陈文祥教授和重庆市临检中心主任廖璞教授组成的基因扩增检测实验室技术验收组对该实验室进行了现场验收。通过现场查看实验室布局、环境,核查各类文件及试验记录,审核现场操作过程及现场试验结果等,验收组一致认为,自治区人民医院基因扩增技术实验室已经达到了内地实验室同等水平,并在设备校准、性能验证等方面表现优异。最终,验收组确认实验室的各项管理要素及技术能力,宣布自治区人民医院检验科基因扩增技术实验室顺 利通过现场技术验收。据国家卫计委临检中心获悉,目前专家组已经对整改条款进行确认,正式宣布该实验室通过技术验收,并将于本月21日,由卫计委临检中心 主任陈文祥教授亲自颁发技术验收合格证书。 /p p   据介绍,该实验室填补了我区该项领域的空白,对我区合法开展基因扩增检测业务,开展精准医学、个体化医学工作作出了积极贡献。邱玲透露,西藏自治区直属的临床检验中心也已正式获批成立,并挂靠自治区人民医院管理。 /p p    strong 根据临床需要 /strong /p p strong   将进一步扩大检测范围 /strong /p p   自治区人民医院检验科副主任刘治娟介绍,此前,该实验室已开展过乙肝病毒DNA检测、人乳头瘤病毒DNA检测(16型、18型)等检测工作,一周检测标本 70—80个。下一步,该实验室将根据临床需要扩大检测范围,进一步拓展基因扩增检测技术,并增加检测量,合法开展更多临床项目,为传染性疾病、肿瘤及慢性病等疾病进行诊疗服务,如开展丙肝病毒RNA定量检测、沙眼衣原体DNA检测、结核杆菌基因检测等。 /p p   相对传统检测方法,PCR检测更快速、更敏感也更精确。刘治娟举例,同样是结核病,如果采用病原学检测,仅结核杆菌培养就需要14天,而采用特定的基因扩增检测技术进行结核杆菌基因检测,一般只需要2小时的时间。 /p p   PCR检测如此快速,在进行乙肝病毒检测时,是否还需要进行乙肝两对半检查呢?对此,刘治娟解释,乙肝五项检查的意义在于:检查是否感染乙肝及感染的具体情况,区分大三阳、小三阳,是用来判定是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查,侧重于病情的诊断。而乙肝病毒PCR定量检测则为检测诊断提供了新手段,通过此项检测,可以指导选择对症药品,有效避免耐药和盲目用药 同时,可直接正确地测定体内病毒数目,有助于疗效的判定 还可以有效正确检测出乙肝 病毒是否变异,有助及时调整治疗方案,侧重于治疗效果的检验。两项检查都是临床乙肝检查中不可或缺的检查项目,各有各的检查意义,应该区别对待,正确使用。 /p p br/ /p
  • qPCR扩增曲线的自述
    大家好!首先跟大家做一个自我介绍:我是扩增曲线,来自荧光定量PCR,是用于描述qPCR动态进程的曲线,我有两种形态,一种是线性图谱:横坐标是循环数,纵坐标是荧光强度值;另一种是对数图谱:横坐标是循环数,纵坐标是荧光强度值的对数。大家根据我来确定Cq值,最终确定初始模板的含量。新冠疫情以来,我可是发挥了重要的作用,诊断技术的金标准,骄傲的很呢。在引物、模板、缓冲液、酶等都充足的理想状态下,PCR扩增产物理论上是呈2的倍数增长的,所以我应该是长这个样子的:▲ 图1. 理论的扩增曲线线性图谱但是呢,理想很美好,现实却很骨感,随着PCR循环数的增加,DNA聚合酶的失活、dNTP和引物的枯竭等诸多因素影响了PCR扩增效率,实际的我是长这样的:▲ 图2. 实际的扩增曲线线性图谱不过S型的曲线,曼妙的身材,我还是很满意的。大家也根据我将PCR进程分为4个时期,分别为基线期,指数增长期,线性增长期和平台期。我的特征还是很明显的:基线期平整;指数期起峰,陡度较大;线性期慢慢趋于平整;平台期基本平整。▲ 图3. 扩增曲线的各个时期如果大家在每次实验中都能遇到如此美丽的我,那就是“你好我好大家好”的欢快场景了。但是在实验过程中,大家可能会看到各种奇形怪状的我,分析不出原因,导致实验止步不前,因此茶饭不思,郁郁寡欢。其实主要还是大家对我不太了解。我,作为大家的科研小助手,单纯善良,心思简单,没有那么多套路的。之所以出现奇奇怪怪的我,都是有原因的。接下来可都是满满的干货吆!笔记要做起来了吆!一. 没有Cq值出现1. 反应循环数不够:一般设定在35个循环以上,也可根据实验情况增加循环数。2. 引物/探针设计不当或发生降解:优化引物/探针的设计;或通过PAGE电泳检测其完整性。3. 模板浓度低或降解导致:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起;同时样品制备时尽量避免引入杂质和反复冻融。二.Cq值偏大1. 模板浓度低:建议提高样本的上样量。2. 扩增效率低:反应条件不适宜或引物探针设计不当,建议通过绘制标准曲线确认扩增效率,同时对反应条件和引物探针设计进行优化。3. PCR产物太长:一般采用80-150bp的产物长度。如果扩增产物过长,建议用三步法程序扩增或优化引物。4. 反应体系中可能有PCR反应抑制物:建议将模板梯度稀释后加入反应体系,或者重新制备纯度更高的模板。三.扩增曲线末尾起跳,但没有完整扩增1. 可能存在污染:建议对样本进行复检。2. 如果是阴性对照,可能是引物二聚体或污染导致;如果是正常样本,说明浓度过低或者加样量不足。四.复孔重复性差1. 加样误差导致:定期校准移液器;同时可先配制除模板以外的其他试剂的预混液,然后进行分装再加入模板,其次加大模板上样体积,以上均可降低移液误差的影响。2. 模板浓度越低,重复性越差。建议提高模板量,使Ct值在15-30之间。现在大家对我的了解是不是又多了一些呢?是不是对qPCR实验又充满了信心呢?那就赶紧行动起来吧!Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统,没有他就没有我那么多标致的图片,快快申请试用,感受它的魅力呀!▲ 图4. Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统申请试用我们的仪器可以申请试用哦!关注“深蓝云生物科技”公众号,点击“云活动”→“试用中心”即可。图源:部分来源于网络,侵删
  • 核酸等温扩增技术的应用现状与思考——马学军 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所中心实验室主任
    目前,传统的聚合酶链式反应,简称PCR技术,因其灵敏度高、特异性强和稳定性好被认为是病毒核酸检测的首选方法。PCR技术是一个热循环的过程,整个扩增检测时间较长,需要核酸扩增仪作为辅助工具,因此PCR反应始终受到电力、成本以及空间等因素的制约,难以实现对病原的现场快速检测。核酸等温扩增是在等温条件下的核酸扩增和检测技术,无需热循环仪,等温仪器体积小,实验操作简单,具有快速、准确和易普及等特点,适用于对检测速度要求极高的海关口岸和技术力量、基础薄弱的县乡级基层医疗机构(如发热门诊等),能在短时间内完成培训,使其具备核酸检测能力。本文拟回顾和评论目前国内外主要的核酸等温扩增技术及其在新型冠状病毒核酸检测中的应用现状,并分析核酸等温扩增技术目前应用存在的不足,展望和思考核酸等温扩增技术未来发展前景,供同行参考和批评指正。国外广泛应用的核酸等温扩增技术包括依赖核酸序列的扩增技术(Nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)、环介导等温扩增技术(Loop-mediated amplification,LAMP)、重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase polymerase amplification,RPA)和将上述等温扩增技术与Cas酶结合的新型检测方法如SHERLOCK(Specific high-sensitivity enzymatic reporter unlocking)和DETECTR(DNA endonuclease-targeted CRISPR trans reporter)等。基于Cas酶的核酸等温扩增技术:等温扩增技术仅对靶标进行高效扩增,还需要指示剂、荧光染料或荧光探针对扩增产物进行识别与报告,识别的特异性往往受到靶标序列及扩增特异性的影响,而造成结果不准确。Cas 酶检测系统作为一种高特异性的核酸序列识别与报告方法,与等温扩增技术相结合,可提高检测结果的准确性。基于Cas酶的附属活性,SHERLOCK和DETECTR两种等温检测方法已成功用于新冠病毒核酸检测。SHERLOCK 采用逆转录RPA和T7 RNA聚合酶对病原RNA靶标进行扩增,得到大量单链RNA产物,最后利用Cas13a在向导序列的介导下与靶序列结合时被激活的附属活性,对体系中的单链报告探针进行切割产生信号,从而对扩增产物进行特异性检测。DETECTR与SHERLOCK原理类似,不同在于其所使用的Cas酶为Cas12,可识别DNA靶标,只需一步逆转录LAMP 而无需转录过程即可对靶标进行检测。SHERLOCK和DETECTR的检测灵敏度均可达到10拷贝/μL,并且均可在1h内完成。但是两者都需要在扩增反应结束后开管进行扩增产物的转移,而且试纸条检测时也需要再次开管,这增大了产物污染的风险和操作难度。为了解决这一问题,一种基于Cas12b的检测方法STOP(SHERLOCK Testing in One Pot)被开发出来。该方法所采用的Cas12b可以在LAMP反应温度(65℃)下保持活性,因此可以无需在扩增结束后开管转移产物,降低了产物污染的风险。并且为了避免试纸条检测时的开管,Joung J 等采用了弹夹式试纸条检测管进行结果检测。国内自主研发主要的核酸等温扩增技术包括实时荧光核酸恒温扩增检测技术(Simultaneous Amplification and Testing,SAT)、重组酶介导扩增技术(recombinase-aid amplification,RAA)和交叉引发扩增技术(Cross-priming amplification,CPA)等。表1 国内等温扩增技术检测新冠病毒核酸试剂比较SAT-RNA捕获探针法:SAT技术配合AutoSAT全自动核酸分析系统可以实现8h内200个样本的高通量检测,可一次性放置80个样品并实现连续上样。SAT-RNA 技术利用RNA捕获探针和分子信标技术在 NASBA 技术的基础上进一步提高了检测的灵敏度和特异性,结合全自动分析系统简化了操作并且提高了检测通量,但是并未能从原理上克服 NASBA 技术反应时间长的问题。此外,该技术仍然需要预先对样本进行常规病毒核酸提取,因此,更适合于检疫检验部门在实验室环境下进行高通量的SARS-CoV-2核酸检测。荧光RT-RAA法:荧光RAA方法可用于检测口咽拭子、鼻咽拭子、鼻拭子、肺泡灌洗液、唾液等样本中的核酸,灵敏度高(注册检报告的灵敏度两批试剂盒可以达到137copies/mL,一批试剂盒达到45 copies/mL)。配套自动化核酸提取仪器和提取试剂盒,加入提取的核酸后,在8-15分钟内完成16个样本的检测,1个小时内完成96样品的全流程检测,检测结果可用便携式等温扩增荧光仪器自动判读。操作简便和快速,检测具有灵活性,可实现随到随检,适合在县级乡镇发热门诊和口岸检测机构进行快速筛查。CPA实时荧光法:逆转录CPA实时荧光法使用了一种一体化全自动核酸检测管。这种检测管整合了核酸提取和检测,通过温度改变熔化各种核酸提取试剂和检测反应试剂之间的有机隔层,控制整个提取和检测反应有序进行。CPA扩增产物采用分子信标进行检测,荧光信号由外部荧光检测设备检测。这种全自动检测管适合疫情暴发初期的现场筛查。LAMP芯片法:基于LAMP和离心碟式微流控芯片法用于包括新冠病毒在内的6种呼吸道病原体检测。该芯片上有24个反应单元和引物预载单元环形排列,反应单元之间由连接通道连接。六种病毒对应的引物分别预载在不同的引物预载单元内,进行检测时,经过核酸提取的样本与反应体系的混合液由加样孔加入,并在离心力的作用下均匀分布进入反应单元,芯片在63℃下反应1.5 h完成扩增,扩增产物采用钙黄绿素显色法进行检测,配合多芯片反应检测仪器,一次可检测16人份的样品。LAMP芯片法实现了多种呼吸道病原体的鉴别检测,适合于医疗机构对有呼吸道疾病指征的患者进行快速分诊处治。利用肉眼观察颜色变化来判读检测结果,虽然降低了对仪器设备的要求,适合在资源有限和经济不发达地区开展核酸检测,然而主观判断颜色变化存在较大个体差异,钙黄绿素等指示剂不具有靶标序列特异性,因此影响结果的准确性。此外,LAMP芯片法尚需传统的病毒核酸提取步骤,限制了检测速度,不适于现场快速检测。曾有文献报道 LAMP 反应体系抗干扰能力较强,可对只经过简单裂解的血样或只经过沸水浴处理的拭子样本直接进行扩增检测。如果能开发出直接检测热裂解咽拭子样本的新冠病毒核酸检测方法,将有利于现场快速检测。目前的核酸等温扩增技术在扩增检测速度、仪器小型化,试剂成本、可视化判读结果等方面比PCR技术有一定优势,但现场检测难以实现,样品前处理(核酸提取)成为主要制约因素。简单的样本处理法若能与等温扩增技术匹配,才能真正缩短检测周期,发挥出等温扩增快速、灵敏、便捷的特点。其次,如何实现单管闭管条件下的多重或多靶标等温扩增检测,并同时具有高灵敏度和特异性,也是亟待解决的技术难题,否则将限制等温扩增技术的应用范围。此外,虽然有些等温扩增POCT(Point-of-care test)技术实现了样品进、结果出的终极目标,解决了核酸提取和等温扩增多重检测难点,具有现场应用的前景,然而目前的产品通量偏低,成本偏高,时间偏长或灵敏度偏低,从而限制了其应用场景。目前Cas酶系统成为技术热点,但是Cas酶系统只是一种特异性的产物检测方法,Cas酶检测系统本身灵敏度不足,必须结合扩增反应才能实现靶标的检测,另外,Cas酶检测系统对报告探针的切割无选择特异性,实现单管多重检测面临技术挑战。• 核酸检测技术的未来发展方向是信息化,小型化,简单化和自动化。核酸等温扩增技术在病原检测中仍不能替代PCR技术,但是弥补了传统 PCR 检测技术设备依赖和检测周期长的不足,极具发展潜力,使得核酸等温扩增技术在现场快速检测、全自动一体化检测等方面展现出独特的应用前景,是传染性病原体核酸检测技术未来发展的方向。微流控芯片作为一种新型的反应和检测载体,可以与不同的等温扩增反应结合开发出小巧便携的床旁检测或即时检测平台,微流控芯片也可以将多重反应整合在一起,实现多样本或者多靶标同时检测。真正实现核酸等温扩增技术的现场应用,还需要考虑仪器的小型化或无仪器的可视化判读,可接受的检测成本,智慧数据传输(如智能手机)和电池驱动装置等。新型冠状病毒疫情在全球流行,由于各国防控情况不平衡,新型冠状病毒或将在相当长的一段时间内与人类共存甚至会成为长期存在的一种呼吸道传播病原体。建议在实际应用层面上可允许采取组合检测方式,如核酸等温扩增技术用于初筛,PCR技术用于复核,可以充分发挥两种技术的优势和特点,满足口岸快速排查,基层发热门诊快速分流的实际需求。同时,鉴于与国外同类技术比较,国内核酸等温扩增技术的原创性和核酸等温扩增新技术产业化方面差距明显,建议设立新技术研发专项,鼓励探索性和原创性研究,重点扶持具有中国自主知识产权的核酸检测新技术的研发和产业化。
  • 耶拿隆重发布TAdvanced基因扩增仪新产品
    仪器信息网讯 2014年9月25日,耶拿公司在上海举办了TAdvanced基因扩增仪新产品发布会暨高分辨原子光谱技术和ICP-MS新技术研讨会。   德国Biometra公司拥有近30年的PCR研发制造和专业服务经验,是欧洲最大的PCR生产商,其红色的TProfessional和TPersonal系列PCR仪,因稳定的性能、结实耐用的设计、超静音的表现在中国拥有大量的忠实用户群。2009年Biometra公司被德国耶拿公司全资收购,在更强大的平台上为客户提供高品质的产品和服务。   TAdvanced基因扩增仪作为德国Biometra PCR家族中的最新成员,于2014年慕尼黑上海生化展期间正式发布。耶拿生命科学部全球总裁Alexander Berka向与会者介绍了TAdvanced高品质性能。 耶拿生命科学部全球总裁Alexander Berka   TAdvanced基因扩增仪具有铝合金样品槽,通过独特的设计和电子控制技术,实现银质样品槽才能达到的高效传热效果和快速的升降温速率,节省PCR扩增时间,并获得最佳的扩增效果。仪器拥有专门的恒温孵育功能模块,设置模块温度,热盖温度和孵育时间,即可作为金属孵育器使用。仪器特有静音技术,运行最大噪音不超过45dB。仪器设计有用户特异性快速启动功能。通过程序预览和快速启动功能,用户可快速启动各自曾使用过的程序。   耶拿生命科学部全球总裁Alexander Berka,耶拿中国区总经理赵泰,耶拿生命科学部中国区总经理诸建共同为TAdvanced基因扩增仪新产品揭幕。 TAdvanced基因扩增仪新产品揭幕。左:耶拿生命科学部全球总裁Alexander Berka。中:耶拿中国区总经理赵泰。右:耶拿生命科学部中国区总经理诸建 TAdvanced基因扩增仪   基因扩增仪新品发布会同期,耶拿公司召开了高分辨原子光谱技术和ICP-MS新技术研讨会。耶拿公司原子光谱资深应用专家杨静,耶拿公司ICP-MS资深应用专家高尔乐分别作了题为&ldquo 高分辨率原子光谱仪最新技术进展及应用&rdquo 和&ldquo 高灵敏度ICP-MS的最新技术与应用的报告&rdquo 。介绍了高分辨率的连续光源原子吸收ContrAA,PQ9000高分辨率ICP-OES以及aurora M90高灵敏度ICP-MS的技术特点及应用。 耶拿公司原子光谱资深应用专家杨静 耶拿公司ICP-MS资深应用专家高尔乐 ContrAA® 700连续光源原子吸收光谱仪 PQ9000高分辨率ICP-OES aurora M90高灵敏度ICP-MS
  • 值得收藏的小工具:在线预测PCR扩增效率
    目前已开发多种工具可以进行PCR引物的设计,但大多数工具只考虑避免发夹结构形成、3' 末端核苷酸的选择、引物解链温度等问题,并没有考虑内在扩增子的特征以及没有预测给定扩增子和引物对的PCR扩增效率。Izaskun Mallona等人[1]使用了一种基于90个引物对组合的统计方法,扩增来自细菌、酵母、植物和人类的模板,扩增子大小在74到907bp 之间,以确定影响PCR效率的参数。最终开发了一个拟合数据的广义加法模型,并构建了PCR Efficiency在线分析工具(http://130.60.24.89/efficiency.html),允许从给定序列开始获得针对PCR 优化的寡核苷酸,并可以预测出扩增效率。有个这款小工具,还怕做不好PCR实验吗?现在快快试用我们的数字PCR系统和实时荧光定量PCR系统,你们就知道预测工具好不好用了。naica® 微滴芯片数字PCR系统naica® 微滴芯片数字PCR系统,以Sapphire芯片(全自动)或Opal(高通量)芯片为耗材,形成由25,000-30,000个微滴组成的单层二维阵列,该单层微滴阵列形成后直接进行PCR扩增实验。反应完成后对微滴进行三通道成像,从而对起始核酸浓度进行绝对定量。仅需2.5小时即可获取结果。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司,配备高品质温度模块,采用光纤和CMOS的检测系统,高能LED的激发,提供高灵敏和可靠的数据。参考文献:[1] Izaskun M , Julia W , Egea-Cortines M . pcrEfficiency: a Web tool for PCR amplification efficiency prediction[J]. BMC Bioinformatics, 2011, 12(1):404.
  • 针对骨肉瘤的Cu和Ce基氧化物纳米平台,用于NIR-II荧光/磁共振双模成像和ros级联扩增以及免疫
    本文要点:骨肉瘤是一种致命的骨肿瘤,多发于儿童和青少年,具有局部破坏性和高转移性。迫切需要针对骨肉瘤具有高治疗效果和精确诊断的独特纳米平台。多模态光学成像和程序化治疗,包括协同光热-化学动力学治疗 (PTT-CDT) 引发免疫遗传性细胞死亡 (ICD) 是一种有前途的策略,它具有高生物成像灵敏度,可准确描绘骨肉瘤,治疗效果显著,副作用可忽略不计。动物活体成像系统方案1. 骨肉瘤靶向mCu&Ce@ICG/RGD的构建过程示意图,用于NIR-II荧光/MR生物成像和PTT-CDT-ICD协同肿瘤抑制本文开发了一种简便的一步法合成具有介孔纳米结构的多功能 Cu&Ce 氧化物纳米球 (mCu&Ce)。据报道,在 ICG 封装和 RGD 肽表面接枝(mCu&Ce@ICG/RGD) 后,该纳米平台可准确识别骨肉瘤并在肿瘤微环境 (pH = 6.5) 下触发 ICG、Cu 和 Ce 离子的剧烈释放(方案1)。进入骨肉瘤肿瘤细胞后,mCu&Ce@ICG/RGD 可在近红外激光照射下有效产生高温并进而促进&bull OH 的生成。PTT/CDT 协同肿瘤消融将在体外和体内实现。同时,热量和扩增的 ROS 都通过激发 ICD 来激活有效的 T 细胞生成,从而产生全身抗骨肉瘤免疫反应,从而显著介导有效的肿瘤免疫治疗。此外,基于Cu&Ce 的纳米平台可以通过 NIR-II 荧光和磁共振双模生物成像对骨肉瘤进行精确的早期诊断。总之,本研究设计了一种具有双模生物成像特性的简便的 Cu&Ce 纳米平台。它可以特异性地识别骨肉瘤,并通过 PTT 增强的 CDT 实现癌细胞抑制,从而进一步显著诱导 ICD 增强。图1. mCu&Ce@ICG/RGD 的表征mCu&Ce@ICG/RGD纳米平台的制备具体流程如图1所示。首先以氯化铜(CuCl 2)和氯化铈(CeCl 3)为前驱体(重量比=7:3)在水相体系中首次制备出亲水性的mCu&Ce纳米粒子,在90°C下搅拌均匀后,加入乌洛托品不同时间后可得到一系列表面粗糙的合金化Cu&Ce纳米球。进一步临床荧光团ICG负载到中孔纳米结构中(mCe&Cu@ICG),负载效率约为12.5 &thinsp %(w/w)。接下来,为了延长血液循环时间并进行随后的靶向修饰,将亲水性PEG 2000 -NH 2包裹在mCe&Cu@ICG的界面上。最后,通过脱水缩合反应将活性骨肉瘤识别配体RGD交联在ICG负载的双金属纳米粒子的外层(mCe&Cu@ICG/RGD)。令人兴奋的是,表面接枝RGD后ζ电位明显降低,这可归因于-NH2基团的消耗。在mCe&Cu@ICG/RGD中发现不明显的形态转变和尺寸变化(图 1L)。同时,与ICG类似,ICG封装纳米平台的发射光谱理想地延伸到NIR-II,并且上述两个样品的非峰值NIR-II发光图像非常强,证明了mCe&Cu@ICG/RGD的成功设计(图 1 P)图2. pH 敏感生物降解、ROS 生成和高温测定由于mCe&Cu@ICG/RGD是为了激活ICG的释放而设计的,因此在细胞外弱酸诱发下,mCe&Cu基框架生物降解发生了类Fenton反应。在pH=6.5条件处理下的生物降解效率在所有时间点都明显高于pH=7.4组,6h时框架初步崩溃,纳米颗粒释放,36h时所有纳米球消失,出现大量Cu&Ce基颗粒。这些纳米颗粒能够传导肿瘤组织浸润。在肿瘤组织中细胞外弱酸性pH值浸泡36小时后,mCe&Cu@ICG/RGD的平均直径从&sim 68nm急剧下降到&thinsp &sim 5nm ,&thinsp 进一步表明结构整体崩解。同时,在不同的孵育期内还测定了pH=6.5生理缓冲液上清液中ICG的释放曲线。我们观察到ICG染料以时间依赖性方式逐渐释放(图2C)。同时,如pH=6.5条件下释放的游离ICG的NIR-II发光图像所示,荧光信号在36小时内显著增强,明显强于pH=7.4组(图 2D)。同时,在肿瘤微环境刺激缓冲液孵育不同时间后,Cu和Ce离子的释放趋势相似,孵育36h后约有90%的Cu/Ce离子被释放。同时,在弱酸性环境下处理36h后,以商业&bull OH指示剂3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)评价Cu&Ce离子的类Fenton催化效果。在&bull OH催化下,产物氧化物TMB具有三个特征峰,显然,与mCe&Cu@ICG/RGD + L基团相比,mCu@ICG/RGD仅表现出边际ROS生成率,正如预期的那样,mCe&Cu@ICG/RGD + H2O2&thinsp + L 的&bull OH 增加量增加了 2 倍。纳米平台在高 H2O2条件下加上 808 nm 光照射时增强的化学动力学能力(图 2E)。随后,由于 ICG 对 808 nm 激光的强吸收赋予 mCe&Cu@ICG/RGD 强大的光热转换性能。如图 2F、G 所示,纳米平台的温度呈现出明显的时间相关上升趋势,在连续 300 秒的 808 nm 激光照射下温度上升到最高水平(79.1 °C),证明了快速的近红外光响应。与此形成鲜明对比的是,在相同处理下,PBS 溶液中的温度略有上升,在激光照射终点仅为 36.3 °C。此外,为了进一步检测激光-热转换效率(η),最近从冷却-加热循环计算了分散在水溶液中的mCe&Cu@ICG/RGD的热量差异(图 2H),具体的η值大约为&sim 55.92 &thinsp %(图2I)同时,在四次808nm激光开关循环后也监测到出色的光热稳定性(图 2J)。总体而言,所有结果证实了负载ICG的肿瘤响应性程序化介孔Cu&Ce纳米载体可进一步应用于通过PTT-CDT抑制恶性肿瘤。图3. PTT -CDT体外细胞杀伤及 ICD 指标的表达如图 3A所示,用RGD修饰的纳米平台处理的ICG的红光明显强于mCe&Cu@ICG和游离ICG。如图 3B 所示 ,与 mCu&Ce@ICG/RGD 组相比,mCu@ICG/RGD 组呈现出暗绿色荧光,这可以归因于前者的生物降解率低。在 pH = 6.5 的缓冲液中孵育 36 小时后,发现从 mCu 纳米叶中释放出的 Cu 离子相对较少,且含有大量 Cu 基碎片。值得注意的是,与本体溶液中的 ROS 生成趋势一致,当使用 808 nm 光照射并伴随 H2O2预处理时,该趋势会显著加强(图3G)。研究结果表明,更高的热量产生可以显著增强类 Fenton 反应,因为 ROS 增强的结果凸显了我们研究的重要性。如图 3D所示,与其他制剂相比,用 mCu&Ce@ICG/RGD + H2O2+ L处理的 143b 和 b 细胞&thinsp 介导了最高水平的 CRT,这与细胞内 ROS 扩增结果一致。此外,该组中还显示出 HMGB1 信号减弱,CRT 水平的这种相反趋势进一步证明了我们的纳米平台增强的 ICD 效应(图 3D)。随后,为了进一步说明 ICD 相关蛋白的表达,通过蛋白质印迹分析研究了各种处理后 143b 中的 CRT 和 HMGB1 水平。显然,当用 mCu&Ce@ICG/RGD + H2O2 + L 处理 143b 细胞时,CRT 在细胞膜上显著上调,而 HMGB1 在细胞质中显著下调&thinsp (图 3E 、F)。与mCu&Ce@ICG/RGD 组相比,mCu&Ce@ICG/RGD + H2O2+ L中上述表达的蛋白质水平分别大约高出 2 倍和降低 5 倍&thinsp (图 3I、J),揭示了该处理强大的 ICD激发能力。最后,分别用CLSM和流式细胞仪获得活死染色图像和细胞凋亡-坏死研究。与细胞内ROS生成和HMGB1的结果类似,143b细胞在mCu&Ce@ICG/RGD + H2O2+ L中经历最有效的细胞死亡&thinsp (图 3K -N)。正如预期的那样,当mCu&Ce@ICG/RGD的浓度增加到300µ g / mL时,H2O2预孵育加激光照射组中143b细胞的细胞活力仅为纯纳米平台处理组的一半。这种最高的肿瘤细胞杀伤力主要由PTT同时扩增的ROS和ICD介导。图4. 通过荧光成像、MRI 和光热评估进行体内肿瘤靶向性评估之后,研究mCu&Ce@ICG/RGD在骨肉瘤荷瘤裸鼠模型中的生物分布和肿瘤富集行为。首先,为了获得准确的肿瘤轮廓辨别,将mCu@ICG/RGD和mCu&Ce@ICG/RGD分别静脉注射到荷瘤小鼠皮下,随后在特定时间拍摄NIR-II荧光生物图像,通过小动物NIR-II荧光成像生物系统监测该纳米平台在体内的肿瘤靶向性和生物分布。显然,在注射mCu&Ce@ICG/RGD后2 h,肿瘤轮廓逐渐清晰,荧光信号(超过1000 nm)最初集中在肿瘤部位,24 h时达最强,肿瘤轮廓与周围外周肌肉组织明显区分开来;随后,它随着时间的推移而缓慢衰减,残留纳米平台保持在48小时(图 4 A)。而mCu@ICG/RGD的荧光信号主要分散在肝脏中,并且在所有时间间隔内都明显高于mCu&Ce@ICG/RGD组。基于在肝脏中的这种高积累,后一组的肿瘤组织几乎无法区分(图 4 A)。同时,收获肿瘤和主要器官进行离体NIR-II荧光生物成像。值得注意的是,即使可以看到上述两组肿瘤中的比较光信号强度,mCu&Ce@ICG/RGD处理的肝脏的强度明显低于mCu@ICG/RGD(图 4 B)。此处,前者相对快速的生物降解行为有利于肝脏清除。因此,肿瘤与周围正常组织的比例通过半定量平均NIR-II信号强度来计算。mCu&Ce@ICG/RGD 在注射后 24 小时的数值比 mCu@ICG/RGD 高 6 倍(图 4D)。此外,本文还通过MRI 验证了Cu 基纳米平台对肿瘤的特异性识别,以临床Gd-DTPA 为对照。根据不同时间间隔的连续 T1WI MRI 生物图像,足底注射 mCu&Ce@ICG/RGD 的淋巴转移性骨肉瘤的 MRI 信号在注射后 24 小时急剧增加至峰值水平,从此时间点开始逐渐衰减至基础强度(图 4C)。然而,由于 Gd-DTPA 的快速排泄,可以在注射后 2 小时发现最高的肿瘤积累。我们的纳米平台在 24 小时的肿瘤与组织比明显高于 Gd-DTPA(图 4E),进一步证明了mCu&Ce@ICG/RGD有效的肿瘤靶向能力,此时最合适进行激光照射进行PTT。最后,研究了皮下骨肉瘤小鼠尾静脉注射PBS、mCu&Ce@ICG和mCu&Ce@ICG/RGD后在体内的光热转换效果。具体而言,纳米制剂处理的肿瘤部位温度急剧变化,升高到峰值(分别为48.9和52.8°C),并且最大光热维持率(图 4F,G)。毫无疑问,这种现象主要归因于RGD修饰的主动靶向能力。对于PBS处理的小鼠,即使经过300秒的照射,温度也仅略有升高(39.8°C)(图 4F,G)。因此,上述体内生物成像结果凸显了多模对比纳米剂在肿瘤诊断方面的潜力和令人满意的肿瘤抑制热疗性能。图5. 体内 PTT CDT 和 ICD 评估基于上述基于Cu&Ce的纳米平台在体外具有良好的细胞杀伤力和出色的肿瘤蓄积效果,我们建立了143b肿瘤异种移植小鼠模型,以进一步研究mCu&Ce@ICG/RGD在体内的PTT/CDT/ICD协同治疗效果。为了验证我们的程序化治疗假设,给皮下患有骨肉瘤的小鼠施用六种不同的配方(PBS、L、mCu@ICG/RGD、mCu&Ce@ICG/RGD、mCu@ICG/RGD +L和mCu&Ce@ICG/RGD + L)。如图 5A -D所示,接受PBS或激光治疗的小鼠的肿瘤组织在整个治疗过程中迅速生长,证实单独使用808nm激光( 5分钟,1.5W/cm2 )对肿瘤生长几乎没有抑制作用。不出所料,与具有部分消融效果的 mCu@ICG/RGD 相比,由于生物降解速度更快,用mCu&Ce@ICG/RGD 处理的肿瘤生长抑制率相对较高,相比之下,纳米粒子加激光照射组的肿瘤体积和肿瘤重量均得到明显控制。有趣的是,与其他组相比,mCu&Ce@ICG/RGD + L 给药的肿瘤基本被抑制,肿瘤抑制率明显较低。显然,这种彻底的根除效率可能归因于协同 PTT 增强的 ROS 扩增。结果显示,激光照射后给予mCu&Ce@ICG/RGD可显著延长小鼠寿命,超过90%的治愈小鼠存活超过100天,而接受PBS治疗的小鼠均在42天内死亡(图 5E),充分表明我们基于Cu&Ce的PTT-CDT协同疗法具有最佳的肿瘤抑制性能。 总之,本文设计并成功制备了一个迷人的纳米平台,该平台由用于 CDT 和 MRI 的介孔Cu&Ce 氧化物纳米球、用于 NIR-II 造影剂和PTT 的负载 ICG 以及用于靶向基序的 RGD 组成。这种有前途的纳米治疗剂具有无与伦比的优势,例如对骨肉瘤组织的精确识别、用于肿瘤轮廓区分的 NIR-II 荧光生物成像和 MRI 以及通过 PTT 评估的 CDT 和激活的ICD 进行的程序化抗癌性能。通过在体外有效诱导癌细胞死亡以及在体内强力根除实体骨肉瘤并显著延长存活率来证实治疗效果。此外,出色的生物安全性能也在体内得到体现。该研究为促进临床恶性肿瘤的靶向诊断和治疗开发了一种独特的范例。参考文献heng, M., Kong, Q., Tian, Q. et al. 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  • 岛津应用:微芯片电泳MultiNA检测中华鳖蛋白粉中提取的DNA扩增产物
    中华鳖是高蛋白食品,具有滋补身体增强免疫力的功效,然而直接食用中华鳖,其营养吸收率并不高。相比之下,中华鳖蛋白粉更容易被人体吸收,是具有高附加值的营养食品。然而由于中华鳖原料价格昂贵,不法分子容易对其掺假、造假以牟取非法利益。 分子标记(molecular marker)是一种新的遗传标记方法,它是以 DNA 多态性与性状间的紧密连锁关系为基础的遗传标记。DNA 分子标记是由于缺失、插入、易位、倒位、重排或由于存在长短与排列不一的重复序列等机制而产生的多态性,其本质上是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异特征的DNA 片段,因此,可以实现物种鉴定的目的。这种 DNA 片段是基因组 DNA 经限制性内切酶切割,或作分子杂交后在电泳胶上或检测得到的。由于基因组一般很大,无法进行全面的序列分析,需要针对基因组中个别特征基因片段进行研究,选择合适的分子标记片段是一个关键问题。目前的研究对象以线粒体DNA 的细胞色素 b 基因(Cyt b)和核糖体DNA(rDNA)为主。线粒体 Cyt b 基因具有 相对高的种间差异、较低的种内变异以及相当长的变化序列,因而可通过 Cyt b 鉴别密切相关的物种。分子标记技术为中华鳖蛋白粉鉴定提供了新的检测手段,这就需要从蛋白粉中提取合适的 DNA 用于分子标记。然而中华鳖蛋白粉加工工艺精细,所提得的 DNA 结构是否被破坏,最终能否用于 PCR 扩增,即 DNA 分子标记鉴定是否适用中华鳖蛋白粉,是一个需要探讨的课题。为此本文利用改动的试剂盒方法对市售中华鳖蛋白粉进行 DNA 提取,并用通用线粒体细胞色素 b 基因(Cyt b)引物进行 PCR 扩增,微芯片电泳 MultiNA 检测扩增产物。结果表明蛋白粉中可以提取到线粒体细胞色素 b 基因(Cyt b),与从中华鳖肌肉样品中得到的阳性对照样品结果相似,即约 450 bp 的产物。本方法为分子标记技术应用于高附加值产品的鉴定提供了技术基础。微芯片电泳MultiNA了解详情,敬请点击《微芯片电泳MultiNA检测中华鳖蛋白粉中提取的DNA扩增产物》关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。
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