核酸蛋白紫外检测

ZHD型紫外蛋白核酸检测仪使用说明 一、系统简介 蛋白核酸检测仪是层析分析的主要装置，配上层析柱、恒流泵、部分收集器（根据需要选配）和电脑打印设备即构成一套完整的液相色谱分离系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质（样品）对紫外光有明显吸收的特征，实现对样品成份含量比对分析，以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。然而，目前国内生产的蛋白检测仪虽然种类繁多，但均采用记录仪描谱且预热时间较长。 ZHD型紫外蛋白核酸检测仪的研制成功，为科研和实验人员利用电脑系统实现核酸蛋白检测和分析提供了一种先进的手段，其特点是系统稳定、操作简便、电脑显示谱图、数据分析和打印谱图。 二、系统特点 本系列检测仪有别于其他检测仪，主要有以下特点： 1、预热时间短，一般做实验只要预热10分钟左右。 2、稳定性高，预热后每小时漂移一般小于0.001。 3、操作简洁，开机后仪器自动调整透光率（T）到100%，吸光度（A）调整到0.000。 4、透光率（T）和吸光度（A）对应准确，点两者误差小于1%。 5、双数据显示，仪器适时显示吸光度（A）和透光率（T）。 6、仪器带有电脑接口和记录仪接口（吸光度0—200mv）。 7、工作软件提供谱图采集、分析计算、保存、打印等功能，可将谱图插入文档（word）文件中。 8、一台电脑可配多台检测仪（由电脑有效端口数决定）。 三、 技术性能 1、通过测量选择菜单，在电脑屏幕上可描出吸光度（A）谱图，透过率（T%）谱图以及A-T%谱图。 2、通过图形平移、复读伸缩和压缩选择等菜单，可对谱图并进行幅度、宽度调整和谱图参数计算，预览满意后打印输出。 3、在描谱过程中，电脑会自动将图形左移（也可人工调整），电脑描谱最长时间为20小时。 4、采集数据自动保存。 四、主要参数： 1、波长：254nm，280nm（可根据用户需要调配）。 2、样品池100ul，光程3mm。 3、量程：吸光度（A）：0--2.000 透光率（T）：1%—100%。 4、分辩率：吸光度（A）：0.001 透光率（T）：0.1%。 5、电脑分析参数：峰高、峰宽、峰面积、峰面积比、保留时间、面积含量（归一化）、层析柱分辩率等。 6、电源220V±10%，50HZ。 7、主机重量：约3.5Kg。 五、系统安装与操作步骤 1、将仪器背板上的输出端通过一根串行口连接电缆与电脑主机的COM1或COM2串行口相连。 2、打开紫外蛋白核酸检测仪电源，仪器预热10分钟左右。 3、打开电脑后，将应用软件（ZHD.exe）复制到硬盘上。钦一下仪器面板上的复位按钮，待仪器显示0.000A和100%T后，双击ZHD.exe启动应用软件，系统进入采集（分析）状态。 4、在“测量选择”菜单下，用鼠标选择检测项目。 5、在“检测操作”菜单下点击“测量开始”，电脑开始采集。 6、要停止采集，点击“检测操作”下的“测量结束”菜单，然后关闭紫外蛋白酸检检测仪。 六、层析普工作站软件使用 1、 对硬件的基本要求： a、电脑在简体中文Windowsxp操作系统上运行； b、显示器分辩率为1024*768，小字体，256色配置； c、图形打印机； d、电脑系统必须正常工作，并保证串行口（COM2或COM1）有效； 2、系统连接无误后先让检测仪工作，再执行应用软件ZHD.exe； 3、 点击文件操作菜单下的“打开谱图”，出现文件操作对话框，打开随机盘上的数据文件(.ran)，图形被打开，熟悉菜单操作。菜单介绍如下： a、“文件操作”菜单下有打开谱图、保存谱图、打印谱图、打印预览等； b、“检测操作”菜单下有测量开始、测量结束(测量结束后,系统在应用程序目录下生成“文件名.TXT”文件,此格式文件可在Excel软件中打开,并可转贴到Word文档中使用)； c、“灵敏度选择”菜单下有A、T%、A-T%选项； d、“谱图平移”菜单后有向左慢移动 []和向右快移动[]； e、“谱图重绘”菜单：从起始点描谱；清理屏幕；释放压缩； f、“谱图全貌”菜单：在屏幕上观察全部谱图。 g、“参数选择”菜单:可对谱图进行参数分析计算。方法如下：在吸光度状态下，点击鼠标左键选取基线及时间范围（第一次点击选取第一点，第二次点击选取第二点），点击“选择参数”下拉菜单的峰高、标准差、半峰宽、峰底宽、峰面积、峰面积比、面积含量及保留时间等参数进行计算，还可间接计算出层析柱分辨率；双击鼠标左键，即可取消本次计算。 ｈ、在吸光度(A)或透光率(T%)状态下，单击鼠标右键，屏幕显示该鼠标点的数值；双击鼠标右健，擦除屏幕显示数值。 七、注意事项： a、 更改波长方法：打开样品池挡板后，可见到滤光片的燕尾型支架和印字（245或280代表当前所使用的波长），用手将其轻轻抽出，换向后插入原位，再将样品池挡板装上，拧紧固定螺钉即可。 b、 在检测仪和电脑正常工作后才能运行应用软件； c、 应用软件执行后，十秒钟后不出现采集分析界面，说明电脑未收到数据，需检查系统连接是否正常； d、 在A—T%描谱过程中，开始1小时内，T%谱以实蓝线表示；1小时后（或点击“图形重绘” ），已描过的T%谱会以虚蓝线表示； e、 测量开始后（特别是出峰以后）不要按复位按钮。 f、 要停止采集，请点击“测量结束”后，先点击“EXIT”，再关闭检测仪。 g、 开始测量时，屏幕会弹出保存文件对话框，要求输入数据文件名及存放路径；之后，电脑自动保存数据。 I、基线选取要保证基线与所选峰必须要有两个焦点，并与其他峰无焦点。

核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置，核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统（根据需要选配）和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质（样品）对紫外光有明显吸收的特征，实现对样品成份含量比对分析，以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。在生化分析、环保科学、食品研究、毒理研究、新药开发等领域中对核酸、蛋白检测、纯化和提取提供了一种独特的分析手段。

话说无论是初接触分子生物学的新手，还是久经考验的“老鸟”，都知道EB染料的有害性，这种有害性表现在三个方面：接触致癌性，紫外观测的诱变性，以及麻烦的后处理。但是要说到EB的替代品，好像又都不是那么合心意，比如SYBR类染料在紫外下不稳定，容易降解，一些像是GelRed之类的染料虽然毒性低，但是价格却不亲民。想要避免EB的影响，又不想影响实验的效果，许多实验人员常陷入两难中，另一方面，经典的凝胶成像系统一般都是采用的紫外成像，在这种波长下，EB的灵敏度和价格都是比较合适的，而其它的染料又存在不稳定性这一瓶颈式缺点，所以导致了虽然知道EB的有害性，但许多实验室还是采用EB染料的现状。国内生物技术自主研发着名企业：百泰克公司2009年推出了新一代的凝胶透射仪，可用于核酸和蛋白质电泳凝胶样品的观察、处理、分析和拍照。这种凝胶透射仪：UltraPowerTM采用的是可见光光源，如果配合新一代核酸染料UltraPowerTM或者其他花菁类荧光染料，可检测出几十pg的dsDNA，灵敏度比紫外凝胶透射仪配合EB染料高10-25倍。这是由于花菁染料具有摩尔吸收系数大和荧光量子产率高的优点，通过共轭链长度的调节，花菁的光谱可以从可见光区一直延伸到近红外区，采用红区测量可有效地排除背景干扰，获得更为理想的分析灵敏度和选择性。花菁染料的光谱对外界微环境的变化极为敏感，非常适合生物及环境样品的分析研究。除此之外，UltraPowerTM可见光凝胶透射仪还可以用于多数荧光染料，比如SYBR Green I、绿色荧光蛋白（EGPF）等（具体染料见附表）。这可以算得上是一套多色荧光成像分析系统，而且UltraPower可以采用普通数码相机拍照，从而摆脱了高昂造价得黑白CCD时代，可以拍出多姿多彩的电泳图片来。

GB5009.5-2010紫外法做蛋白含量，用硫酸铵做标准曲线，经过15分钟100度水浴，标液有明显的色梯度，液体也很清晰，但回温到室温后，液体变的混浊，无法测吸收光。有没有用这个方法做蛋白的？有没有遇上这种情况的？救求高手指教！

新一代双光束紫外检测仪产品隆重上市一、双光束紫外检测仪研发的背景 　　双光束、单光束紫外检测仪都是液相色谱中的一种紫外检测仪，它是用来监视生物化学、分子生物学、制药、食品等行业在柱层析在分离分析时必不可少的设备，目前在市场中多数的产品为“核酸蛋白检测仪”该仪器基本上是七十年代生化所转让的产品，鉴于当时受技术水平、市场元器件等限制，因此虽试制成功，但还存在许多问题，如基线漂移、换档零点不准等，为此当时市场上虽有十几家生产厂家，但它们几乎是同一产品，同一面孔，同一性能，无法满足用户的需求。而进口的仪器如法玛西亚等价格昂贵。而国产的核酸蛋白检测仪却大大落后于市场，许多急待改进部分却很少有制造商厂家进行研究改造，20年来除了面目稍有改进，内部结构几乎不变。　　不足之处： 　　1、该仪器光源，因为核酸蛋白检测仪器里用的是汞灯，它的特定谱线是253.7nm，而在生化等行业里检测核酸用的波长为260nm，在检测浓度高的样品中问题不大，但在进行少量宝贵样品中而浓度又比较稀的情况下，得出的结果偏差就大了。　　2、在光电转换中核酸蛋白检测仪用的是光电倍增管，我们知道光电倍增管体积大，占地大，并且还需要高压电源支撑，高压电源稳定度直接影响到整个仪器稳定度，做的好不好非常关键，再加上光电倍增的暗流，随温度变化等不确定性，是造成仪器不容易做好根本原因之一，现在市场上进口仪器基本上都是用光敏二极管来做转换器，体积小（只有一只三极管之大），性能稳定，暗流小，如此先进的技术核酸蛋白检测仪却弃之不用。　　3、现在市场上的核酸蛋白检测仪看上去具有254nm、280nm波长可测定，实质上在用254nm测定核酸时还可以（真正核酸测定是260nm），但在用280nm去测蛋白时，却有些牵强因为此时它们的能量很弱，进口的仪器在用汞灯作光源测蛋白时，它们280nm波长取得是采用荧光将254nm通过荧光转换为280nm，然后再用280nm滤光片取得280nm波长去检测蛋白的，而在国产核酸蛋白检测仪器中，因无此类技术（荧光粉有毒不好做，也没这门手艺）所以省去此道工序，就只能用280nm滤光片取得280nm波长。结果因为汞灯的特征谱线为254nm，280nm波长是该谱线的延伸段，与254nm相比光强度几乎是它的1/10，因此虽然用280nm滤光片但因254nm能量太强，它照样能透过滤光片进入测量系统，结果测出峰为：254nm、280nm波长的共同吸收峰，因此该种仪器如作教育工具还可以，在科研领域研究中，在制药行业中是非常非常不利的。　　4、市场上核酸蛋白检测仪在线路设计上有问题，比如在无样品时灵敏度换档时在记录仪反映的基线会有很大变化，这样对操作者很麻烦，如果在监视过程中发现峰形太大或太小时，想要改变灵敏度得到合适峰时，因基线基准点变化，峰值就受影响，结果就不准确，在灵敏度＞1OD时，仪器零点与记录仪零点偏差极大，以其无法工作。　　5、现在市场上还有一种紫外检测仪器是用元素灯作为光源的，虽然该灯的谱长比较汞灯来说单色性较好，但元素灯寿命短，一般2000小时，不宜作为长时间监测，经常更换灯成本高。　　另外市场上核酸蛋白检测仪基本上都是灵敏度换档时，不仅记录仪基线变，表头读数也会跟着变，实际上灵敏度换档对一个样品的浓度不会变化的，变的是记录仪峰值大小，浓度读数是恒定的。　　鉴于看到市场上核酸蛋白检测仪存在种种问题，及它们给科研工作者、给制药业等行业带来不利后果，也为了填补国内空白，因此决定试制颇有难度的双光束紫外检测仪。通过生化所专业技术人员两年的研发新一代UV-DETECTORⅢ双光束紫外检测仪目前已推向市场，经各大院校、科研所、生物药业等单位应用证明，可达到LKB等进口仪器的同等效果。　　二、双光束紫外检测仪与其他紫外检测仪的比较 　　1、紫外光源 　　双光束紫外检测仪用的光源为无电极放电灯，该灯在国内为空白，在国际上只有瑞典LKB公司生产，该灯通过专业人员查资料查文献，不断试制最终获得成功。　　2、线路设计 　　双光束紫外检测仪的光电转换器用光敏二极管，这是跟上时代步伐要求，省去高压以及高压带来影响仪器不稳定因素。在线路上采用双光束形式，一路为样品光束，另一路为参考光束，参考光束转换为电压后，用来产生反馈，抑制光源随温度变化而引起的变化，这样整个机器稳定，不会像单光束那样因温度等影响，一路慢慢漂移不止。　　3、温度控制 　　灯室采用恒温控制。众所周知，一般光源都会随温度发生变化，采用恒温形式不仅能稳定光源，还会延长灯的寿命，而且也适合仪器在冷室中长期使用。　　采用无电极放电灯，体积小只有手指大小，起动灯源的供电部分用微波激发，整个激发光源板只有手掌大小，结构简单，功耗＜3W，该灯寿命长，理论上100,000小时，说明书上保守写2万小时，可不关机长期连续使用，完全适合生化等领域长期监视，　　双光束紫外检测仪特点： 　　1、仪器稳定时间短，开机后半小时内足以稳定。 　　2、仪器外壳设计防腐、防锈、美观、轻巧，市场上尚未见同类产品。 　　3、线路设计先进合理，除采用反馈等技术外，该仪器在改变灵敏度时，记录仪上的零点基线基本上保持不变，并且面板表上的读数不随灵敏度变化而变化，实验结果正确可靠。　　4、因为光源采用无电极放电灯，各波长214nm、230nm、260nm、280nm、214nm、340nm等强度均匀，用滤光片取出波长，单色性好，不会给操作者、研究者等带来波长间互渗混乱效果。　　与进口LKB公司仪器比较，我们采用了它们的先进技术，但又作了改进，像无电极放电灯，它们260nm、280nm要用2个滤光片，2个灯来获得，而我们只要用一个灯就可获得5个波长，这样可适应不同人需要，应用范围更广。进口仪器不设面板表，而我们采用面板表这样更直观，并随时从表头上获得监视样品信息，甚至仪器不接记录仪也可用，双光束紫外检测仪比进口仪器更稳定，尤其在高灵敏度区域内。

蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收，且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时，将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中，用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照，在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿，盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时，A280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值(A1%1cm)有文献数据可查，根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与(A1%1cm)值(即蛋白质溶液浓度为1%，光径为1cm时的光吸收值)的关系。文献值A1%1cm,λ称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度= (A280´10 )/ A1%1cm,280nm (mg/ml)(Q 1%浓度»10mg/ml)

我们实验室用的是上海嘉鹏科技有限公司生产的的核算蛋白检测仪，型号为ＨＤ－2000，现在急需该仪器的说明书

因为要进行蛋白质的检测，所以就查了一些文献，总结了一下利用紫外吸收法检测蛋白质的方法，希望对大家有用！

UV紫外吸收法测protein蛋白质含量 蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的（NH4）2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。

检测和分离脂多糖中的 [font=宋体]脂阿拉伯甘露糖（[/font][font='Times New Roman']LAM[/font][font=宋体]）和脂甘露糖（[/font][font='Times New Roman']LM[/font][font=宋体]）这二种糖在紫外检测器有吸收吗？且一般选什么柱子？检测蛋白一般用什么柱子和检测器？[/font]

网上查到一份西安某大学的学报，里边介绍了日本某品牌紫外可搭配超速离心机进行基因工程的研究，我想请问下高手们：1、使用哪些机器搭配紫外能够达到分析DNA和蛋白质的目的？2、有使用过HITACHI紫外系列产品的高手能来回答下其分析软件（尤其是核算分析软件包）是需要独立购买的吗？

哪位大侠知道如何用紫外测定DNA和蛋白原理是什么？又是怎么计算的？先谢谢啦中国心中国心中国心

随着常规分子生物学研究的深入，越来越多的生物实验室日常需要测量的核酸、蛋白样品量也在不断地加大。传统的分光光度计虽然已经非常普及，但由于需要在测量后清洗比色杯，实际上消耗了不少宝贵的研究时间。同时，由于核酸样品的体积较小，即使使用昂贵的微量石英比色杯（容积数十ul左右），也往往需要对原始样品进行稀释，从而带来可能的操作偏差。对于一些稀有的样品来说，稀释即意味着测量后无法回收，同样也会对后续研究带来更高成本。因此，无需比色杯，仅需数ul即可测定样品浓度的超微量分光光度计现在受到很多实验室的关注和欢迎。NanoVue是GE Healthcare公司于2008年最新推出超微量分光光度计。GE Healthcare公司的分光光度计品牌Ultrospec和GeneQuant在市场上已经有了十多年的历史，在用户中有着很好的信誉和口碑。NanoVue在该系列仪器的基础上延续了出众的检测性能，同时大大改进了检测的光路设计，通过专利的检测技术使检测样品的体积最小仅需0.5ul， 190-1100nm的宽范围连续波长设计较市场上同类仪器宽了一倍左右，使得能够轻松检测核酸、蛋白样品和Cydye荧光染料标记物的浓度。仪器内置了RNA、DNA 和寡核苷酸浓度和纯度测定方法；寡核苷酸转换因子，分子量，理论Tm计算功能；包括一般紫外、Bradford、 Biuret、BCA、Lowry的蛋白定量法；以及波长扫描，动力学，标准曲线，多波长测定等扩展功能。除了强大的检测性能外，NanoVue还在许多操作性能上进行了精心的设计，能够给用户带来众多全新的体验，主要包括以下方面：1 唯一不需电脑就能在仪器面板上直接检测的超微量分光光度计。仪器配置了一块大面积高分辨率的背光液晶屏和操作面板。相对于点样后转去电脑控制，再回去仪器清洁的过程，NanoVue不仅节省了购买电脑的支出，同时点样，按键测量，擦拭一气呵成。可以通过整合的打印机直接打印分析数据。当然，如果需要在电脑上保存分析数据，NanoVue同样支持USB或蓝牙连接电脑，将珍贵的实验数据永久记录下来。2 通过特别设计的疏水点样表面，能够很容易回收稀有的样品，并且有效避免多个测量间的样品交叉污染，提高测量的准确性。NanoVue的点样表面具有专利设计，表面坚固而且光滑。不管是样品回收还是测量完直接擦去都非常简易，不会有任何样品粘附残留在点样面上。而且点样面耐用性也非常出众，保守估计可以至少测量20000个样品以上。3 最快的检测速度。NanoVue通过独特的光路设计，使得所有样品的检测都能够在5秒钟之内完成，把微量分光光度计的测量时间提升到了一个新的高度。而且NanoVue具备即开即用功能，避免了许多分光光度计开机需要预热的麻烦，真正做到省时省力。由此可见，NanoVue不仅性能出众，其易用性和灵活性也是目前超微量分光光度计中出类拔萃的。通过试用NanoVue的体验，使用者可以完全感受到，原来，核酸蛋白的测定可以这么简单，这么快速！目前，NanoVue已经正式在中国推出，欲了解更多的信息，请直接联系GE公司。

国外的核酸蛋白检测仪比较起来哪个厂家的比较好，给推荐几个，价位

用紫外分光光度计测牛奶中那个蛋白质的含量，牛奶样品要做怎么样的前处理呢？也就是要怎么消化，使检测过程干扰低、出峰好。请各位帮帮忙～

国外的核酸蛋白检测仪比较起来哪个厂家的比较好，给推荐几个，价位又是什么样的，谢谢

[em07] 各位老师，您好！我用毛细管电泳测蛋白质的组成，紫外检测波长文献中有214nm，254nm等，这些波长如何确定，请指教。

谁有紫外测DNA和蛋白质的方法

我现在在做蛋白和核酸的结合.我的蛋白和核酸可以结合. 蛋白是400多KDa的 核酸很小, 是30bp的dsDNA. 我现在的检测条件下只跑蛋白是可以跑出来的, 当我蛋白和核酸一起跑的时候, 也会在跟只跑蛋白在差不多的位置出峰. (我用的双波长检测,蛋白和核酸分别标记,所以都能看到.)问题就是,一起跑的时候, 出的所有峰, 都是既有蛋白又有核酸, 不管我加的比例是多少.我就很困惑. 如果我加的核酸量很小的话,不是应该有很多游离的蛋白吗,就是说应该有的蛋白峰对应的地方是没有核酸出峰才对的啊, 为什么没有这样的峰呢, 我什么地方理解错了吗?~ 请大家帮忙.谢谢~~~~!BTW， 我用的是bare fused silica capillary， 是CZE， 不是凝胶的 谢谢~~~

各位大神，最近在册牛血清蛋白标准曲线，资料上显示说，牛血清蛋白与考马斯亮蓝结合之后在595 nm处显示最大吸收，可是为什么我用紫外扫谱发现在578 nm处才是最大吸收，但是测出来的不同浓度的吸光度线性关系也不好，排出紫外检测器的问题，到底是什么原因呢？？？？

求购核酸蛋白仪,

[size=4]我正在做一种生物碱与[/size][size=3][font=宋体]牛血清白蛋白（BSA）结合作用的荧光光谱研究，需要求算[/font][/size][size=3][font=宋体]生物碱分子的紫外光谱与牛血清白蛋白（BSA）[/font][/size][size=3][font=宋体]荧光发射光谱的重叠积分，以便求算药物分子与BSA结合的距离，文献上说明可以采用矩形分割法求出两光谱重叠区域的积分值，但用何软件如何求算我还不会。肯请此间高人出手指点，不胜感激！最好能将方法发到我的邮箱[email]zhongming2613@163.com[/email] 谢谢！[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003121811_205351_1889038_3.gif[/img][/font][/size]

现想检测血粉蛋白经过蛋白酶水解产物，目标产物是10肽以下水解物，10肽的平均分子量红1200左右，设备只有液相+紫外检测器。需要知道产物里面，不周大小的肽所占的比例（如2肽的，4肽的。10肽）。因为不知道肽的结构，无法用反相色谱定量，不知道用凝胶色谱是否可以得到理想的数据，GPC在相差一个肽的分子量（120）时，是否可以完全分开，什么规格型号的色谱柱较好？

建立离子色谱-紫外法检测牛奶中三聚氰胺的方法。利用乙腈沉淀牛奶中的蛋白，十八烷基（ODS）固相萃取柱对上清液中的三聚氰胺进行富集。选用SH-Cation 2 阳离子交换色谱柱，以甲烷磺酸（MSA）作淋洗液，240nm紫外波长下进行检测。该法在0.10~10.0mg/L范围内线性关系良好，R2为0.9998，检测限为0.50μg/L，加标回收率在92.0%~99.8%之间。方法简便易行，灵敏度高，结果准确。

最近有一家叫SCINCO的韩国厂商到我们这推荐一种氙灯的紫外，体积挺小巧的，说是专门快速测量核酸和蛋白质含量的，说的天花乱坠的。。。。。看参数也不怎么样！说是价格比较实惠。。。不知道各位知不知道生物测量这块什么仪器测量最简便？紫外应用的多吗？简介：专业的生物紫外可见分光光度计优化生化分析，预设的程序和LabPro®生物软件使得核酸和蛋白质的测量变得非常简单，微量比色皿和多点比色皿可以减少实验样品用量，这款仪器在提供完整的解决方案分析DNA、RNA和蛋白质的同时其高性价比也使其更具有竞争力。主要参数波长范围：190-1100nm光源：氙气闪光灯检测器：512光电二极管阵列光谱带宽：2nm波长精确度：±1nm波长重复率：0.02nm

大家好： 我想利用免疫电镜检测热应激前后小鼠囊胚中热休克蛋白70的定位情况，有两种方案：1.包埋前免疫电镜：胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后，然后清洗，渗透，封闭，分别与一抗和二抗反应，然后再用锇酸固定，脱水，812包埋。2.包埋后的免疫电镜：胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后，脱水，体温包埋剂渗透，包埋，聚合，超薄切片，最后进行免疫染色。 第一种方案：不知道热休克蛋白70的抗原性保存如何？另外，不知道免疫标记效果如何就进行包埋，是不是有点盲目？ 第二种方案 超微结构和抗原性都保存较好，试验重复性好。但是包埋剂比较贵，而且本试验室没有聚合用的低温冰箱和紫外灯。 请各位大虾帮帮我！

请教各位：有没有办法把植物中的一步把蛋白降为氨基酸，淀粉降为葡萄糖，核酸降为核苷酸，油脂降为脂肪酸？也不一定要一步，就是所有的组分要尽量少损失。有高手知道吗？